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基于垂体转录组测序筛选康乐黄鸡开产性状相关基因和信号通路
1
作者 马荆鄂 兰岚 +1 位作者 刘梓阁 许继国 《广东农业科学》 2025年第4期73-87,共15页
【目的】运用转录组测序技术深度剖析154日龄已开产与未开产康乐黄鸡垂体转录组表达谱差异,旨在筛选垂体中与开产性状紧密关联的基因及信号通路。【方法】采用Illumina NovaSeq 6000测序平台,对154日龄康乐黄鸡已开产和未开产个体的垂... 【目的】运用转录组测序技术深度剖析154日龄已开产与未开产康乐黄鸡垂体转录组表达谱差异,旨在筛选垂体中与开产性状紧密关联的基因及信号通路。【方法】采用Illumina NovaSeq 6000测序平台,对154日龄康乐黄鸡已开产和未开产个体的垂体组织进行转录组测序,对筛选出的差异表达基因进行功能注释和蛋白网络互作分析,并利用RT-qPCR技术验证基因表达水平。【结果】两组样品中共获得21168713~23657558个Clean reads,检测到23447个基因在垂体组织中表达,其中分类为6大垂体细胞簇的标记基因共282个。通过筛选共获得119个基因在已开产与未开产个体间呈显著差异表达,具体表现为46个基因上调表达、73个基因下调表达,且TRPC4和TYRP1分别为上、下调差异倍数最大的基因。GO功能富集分析显示,差异表达基因主要富集在管发育、心脏发育、膜的整体成分和核苷酸结合等生物过程。KEGG通路富集分析发现,差异表达基因显著富集于吞噬体、细胞衰老、细胞黏附分子、内吞作用和单纯疱疹病毒1型感染等信号通路。蛋白互作分析表明,119个差异表达基因中有14个基因存在互作关系,其中EPHA10、OVCH1和FGB为互作网络中的核心蛋白。综合分析,鉴定到12个开产性状相关重要候选基因,分别为POMC、CHGA、GRP、GH、CGA、PRL、CST3、CARTPT、TRPC4、PRKAA2、HTR1B和IGFBP5。RT-qPCR验证结果显示,其中7个基因表达量变化趋势与转录组测序结果一致。【结论】通过分析康乐黄鸡垂体组织转录组测序结果,筛选出12个开产相关候选基因、8条关键基因通路,为深入探究鸡垂体组织基因调控开产性状的分子机制提供坚实的数据支持。 展开更多
关键词 垂体 转录组测序 康乐黄鸡 开产性状 差异表达基因 KEGG通路
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miR-362-3p调控垂体肿瘤转化基因1抑制口腔鳞状细胞癌侵袭及增殖的研究 被引量：3
2
作者 丁啸 陈嘉雯 +4 位作者 曲鹏宇 孙晨雨 李洪利 胡温庭 范欣 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期46-55,共10页
目的探讨垂体肿瘤转化基因1(PTTG1)在miR-362-3p作用下对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞Cal-27、HN-30侵袭以及增殖能力的影响。方法生物信息学在线数据库查询PTTG1在头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)中的表达。蛋白质印迹法(Western blot)实验检测PT... 目的探讨垂体肿瘤转化基因1(PTTG1)在miR-362-3p作用下对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞Cal-27、HN-30侵袭以及增殖能力的影响。方法生物信息学在线数据库查询PTTG1在头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)中的表达。蛋白质印迹法(Western blot)实验检测PTTG1在Cal-27、HN-30以及HOK细胞系中的表达。划痕愈合实验、Transwell侵袭实验及5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(EdU)细胞增殖实验检测PTTG1对Cal-27、HN-30细胞迁移、侵袭、增殖的影响。生物信息学在线数据库预测PTTG1的上游miRNA,双荧光素酶实验检测结合情况,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测该miRNA在组织中的表达。结果ENCORI数据库结果显示PTTG1在OSCC组织中表达上调;Western blot实验显示Cal-27、HN-30细胞中PTTG1表达量较HOK细胞中高。转染Si-PTTG1质粒的Cal-27、HN-30细胞的迁移能力、侵袭能力和细胞增殖能力均较对照组降低(P<0.05)。通过网站预测出PTTG1的上游miRNA为miR-362-3p,双荧光素酶实验检测出PTTG1与miR-362-3p存在结合位点;qRT-PCR检测结果显示miR-362-3p在OSCC肿瘤组织中相对于正常组织表达下调(P<0.05);并且敲低miR-362-3p的表达后能够促进敲低PTTG1后的Cal-27、HN-30侵袭和增殖。结论miR-362-3p可通过靶向PTTG1抑制Cal-27、HN-30细胞侵袭、增殖。 展开更多
关键词 口腔鳞状细胞癌 垂体肿瘤转化基因1 微小RNA 侵袭 增殖
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糖皮质激素对下丘脑-垂体-肾上腺轴钙调素基因表达的影响 被引量：8
3
作者 宋春风 尹桂山 +2 位作者 吕佩源 孙素菊 王桂香 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期76-79,共4页
目的　探讨糖皮质激素醋酸可的松对大鼠下丘脑 垂体 肾上腺轴 (hypothalamus pituitay adrenal,HPAA)钙调素基因表达的影响。方法　以逆转录多聚酶链反应 (RT PCR)半定量法测定大鼠注射醋酸可的松后钙调素 (calmodulin ,CaM)mRNA的表达... 目的　探讨糖皮质激素醋酸可的松对大鼠下丘脑 垂体 肾上腺轴 (hypothalamus pituitay adrenal,HPAA)钙调素基因表达的影响。方法　以逆转录多聚酶链反应 (RT PCR)半定量法测定大鼠注射醋酸可的松后钙调素 (calmodulin ,CaM)mRNA的表达水平。结果　醋酸可的松诱导大鼠下丘脑、肾上腺CaMmRNA水平升高 ,对垂体组织CaMmRNA水平没有显著影响。 展开更多
关键词 钙调素 糖皮质激素 下丘脑-垂体-肾上腺轴 HPAA 基因表达
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慢病毒介导shRNA抑制垂体腺瘤PTTG基因表达及对细胞增殖和侵袭能力的影响 被引量：5
4
作者 沈云龙 安泰学 +5 位作者 罗巧灵 李和珍 杨勇 王雪娟 刘丽红 王芳 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期522-529,共8页
【目的】观察慢病毒介导的sh RNA对GH3和At T20型垂体腺瘤中垂体肿瘤转化基因(PTTG)表达的抑制作用,以及对肿瘤细胞增殖和侵袭能力的影响及其机制探讨。【方法】筛选最佳抑制效果的干扰序列构建PTTG基因sh RNA的慢病毒表达载体,转染GH3... 【目的】观察慢病毒介导的sh RNA对GH3和At T20型垂体腺瘤中垂体肿瘤转化基因(PTTG)表达的抑制作用,以及对肿瘤细胞增殖和侵袭能力的影响及其机制探讨。【方法】筛选最佳抑制效果的干扰序列构建PTTG基因sh RNA的慢病毒表达载体,转染GH3和At T20型垂体腺瘤细胞。流式细胞仪分析细胞转染效率,RT-PCR和Western blot检测细胞PTTG基因m RNA和蛋白的表达水平,MTT和Ed U法分别检测靶向PTTG的sh RNA对肿瘤细胞增殖生长的抑制作用,流式细胞仪检测细胞周期变化。Transwell小室检测细胞侵袭能力的变化,基因芯片筛查干扰后的基因表达谱差异并进行生物信息学分析。【结果】细胞转染表达PTTG基因sh RNA的慢病毒载体后,能显著抑制肿瘤细胞PTTGm RNA和蛋白的表达,与对照组相比有统计学差异(P<0.05),细胞的增殖能力受到明显抑制,且增殖抑制效应具有时间依赖性;细胞生长显著变慢,G0/G1期细胞比例显著增高,克隆形成能力下降,细胞侵袭能力也显著减弱,均与对照组相比有统计学差异(P<0.05)。PI3K等信号通路的基因表达也发生显著变化。【结论】慢病毒介导sh RNA沉默PTTG基因表达可能是通过对PI3K信号通路的调控,抑制了GH3和At T20垂体腺瘤细胞的生长,抑制肿瘤细胞的体外增殖和侵袭能力。 展开更多
关键词 短发夹RNA 垂体腺瘤 垂体肿瘤转化基因 基因治疗
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绵羊发情周期不同组织Cry1 mRNA转录水平相对定量研究 被引量：8
5
作者 高磊 甘尚权 +4 位作者 杨井泉 杨剑波 梁耀伟 阿不都艾尼.努拉洪 沈敏 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期85-92,共8页
研究表明,时钟基因Cry1在哺乳动物季节性繁殖内分泌过程中可能发挥了重要作用。文章以多浪羊(非季节性繁殖)和中国美利奴羊(季节性繁殖)为研究对象,采用实时荧光定量PCR技术对下丘脑-垂体-性腺轴主要组织Cry1在发情周期不同阶段的表达... 研究表明,时钟基因Cry1在哺乳动物季节性繁殖内分泌过程中可能发挥了重要作用。文章以多浪羊(非季节性繁殖)和中国美利奴羊(季节性繁殖)为研究对象,采用实时荧光定量PCR技术对下丘脑-垂体-性腺轴主要组织Cry1在发情周期不同阶段的表达变化情况进行了跟踪检测。结果表明:绵羊Cry1在所检测组织中均有表达,其中松果体和甲状腺Cry1的表达水平较高;不同绵羊品种Cry1在发情周期不同阶段的组织表达谱基本一致,除下丘脑外,卵巢、子宫、松果体、垂体和甲状腺中Cry1的表达水平均是在发情前期达到峰值;卵巢、子宫、垂体和松果体Cry1在发情前期和发情期的表达变化幅度存在显著的品种间差异。研究结果表明:Cry1可能具有启动发情和季节性繁殖的重要作用。 展开更多
关键词 Cry1基因 发情周期 下丘脑-垂体-性腺轴 绵羊
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垂体瘤转化基因在垂体大腺瘤中的表达及其与肿瘤侵袭性的关系 被引量：3
6
作者 胡静芳 苏青 蔡瑜 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期193-195,共3页
目的研究垂体瘤转化基因(PTTG)在垂体大腺瘤中的表达,探讨其与肿瘤侵袭性的关系。方法收集手术和病理证实的垂体大腺瘤40例,其中无功能腺瘤22例,生长激素腺瘤8例,泌乳素腺瘤10例。用免疫组化技术检测垂体大腺瘤中PTTG表达。结合影像资料... 目的研究垂体瘤转化基因(PTTG)在垂体大腺瘤中的表达,探讨其与肿瘤侵袭性的关系。方法收集手术和病理证实的垂体大腺瘤40例,其中无功能腺瘤22例,生长激素腺瘤8例,泌乳素腺瘤10例。用免疫组化技术检测垂体大腺瘤中PTTG表达。结合影像资料,分析PTTG的表达与大腺瘤侵袭性生物学行为的关系。结果40例垂体大腺瘤中均发现PTTG的表达升高,PTTG在侵袭性垂体大腺瘤中的表达显著高于非侵袭性垂体大腺瘤(P<0.01)。结论PTTG的表达与垂体大腺瘤侵袭性的生物学行为有关,其表达程度可用作垂体大腺瘤预后的评估指标,为大腺瘤术后复发以及相应的辅助治疗提供判断依据。 展开更多
关键词 垂体大腺瘤 垂体瘤转化基因 侵袭性 肿瘤侵袭性 基因表达
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垂体瘤转化基因在多发性骨髓瘤患者中表达的研究 被引量：4
7
作者 王昭 鹿全意 +2 位作者 陈萍 张鹏 丛雅琴 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2006年第6期1143-1145,共3页
为了研究垂体瘤转化基因(pituitarytumor-transforminggene,PTTG)在老年多发性骨髓瘤(multiplemyelo-ma,MM)患者中的表达并分析它与MM发生的关系,采用RT-PCR方法检测33例MM患者及10例正常对照者骨髓单个核细胞中PTTG的表达。结果表明MM... 为了研究垂体瘤转化基因(pituitarytumor-transforminggene,PTTG)在老年多发性骨髓瘤(multiplemyelo-ma,MM)患者中的表达并分析它与MM发生的关系,采用RT-PCR方法检测33例MM患者及10例正常对照者骨髓单个核细胞中PTTG的表达。结果表明MM患者PTTG在MM中的表达水平(0.3415±0.2172)明显高于正常对照组(0.0590±0.0233)(P<0.05)。结论PTTG的过度表达可能与MM的发生发展有关,这为MM的发病机制及其基因靶向治疗的研究提供了新的思路。 展开更多
关键词 垂体瘤转化基因 多发性骨髓瘤 逆转录聚合酶链反应 垂体瘤
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哇巴因与地高辛对大鼠垂体钠泵α亚单位基因表达影响的对比研究 被引量：4
8
作者 王颢 原卫清 吕卓人 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期631-634,共4页
目的　对比研究哇巴因与地高辛对大鼠垂体钠泵(Na+,K+ ATP酶 )α亚单位基因表达的影响 ,探讨内源性哇巴因 (EO)的生物学效应以及洋地黄类药物药理作用的分子机制。方法　长期给予大鼠注射小剂量哇巴因 (2 0 μg·kg-1·d-1)与... 目的　对比研究哇巴因与地高辛对大鼠垂体钠泵(Na+,K+ ATP酶 )α亚单位基因表达的影响 ,探讨内源性哇巴因 (EO)的生物学效应以及洋地黄类药物药理作用的分子机制。方法　长期给予大鼠注射小剂量哇巴因 (2 0 μg·kg-1·d-1)与地高辛 (32 μg·kg-1·d-1) ,动态观察大鼠血压变化 ;分别应用分子生物学RT PCR及免疫组织化学技术 ,探讨各组大鼠垂体钠泵α1、α2 及α3 亚单位mRNA及蛋白水平基因表达的改变。结果　哇巴因与地高辛对大鼠血压的影响存在着明显差别 ,长期给予大鼠注射小剂量哇巴因可使大鼠血压升高 ,而地高辛对大鼠血压无影响。哇巴因与地高辛对垂体钠泵α亚单位表达的影响存在明显不同 :在mRNA水平 ,哇巴因使α1、α2 及α3 亚单位的表达均明显减弱 ,而地高辛仅使α3 亚单位表达减弱 ;在蛋白水平 ,哇巴因使α2 及α3 亚单位表达减弱 ,α1亚单位无改变 ,而地高辛使α1及α3 亚单位表达减弱 ,α2 亚单位无改变。结论　哇巴因在高血压发病中可能起着重要作用 ;哇巴因与地高辛可导致不同的钠泵基因表达改变 ,为进一步揭示EO生理与病理作用以及洋地黄类药物药理与毒理作用的分子机制提供了理论及实验依据。 展开更多
关键词 哇巴因 地高辛 降压药 垂体 钠泵 基因表达
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鸭垂体中GH基因表达的发育性变化分析 被引量：3
9
作者 陶志云 徐文娟 +4 位作者 宋迟 宋卫涛 朱春红 陈文峰 李慧芳 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期15-19,共5页
以生长速度差异较大的‘高邮鸭’和‘金定鸭’为试验材料,采用实时荧光定量PCR方法检测2个品种鸭胚胎期和出雏早期垂体中GH mRNA的差异表达水平,探究生长激素(GH)基因在不同品种鸭胚胎期和出雏早期垂体中表达水平的发育性变化.从13胚龄... 以生长速度差异较大的‘高邮鸭’和‘金定鸭’为试验材料,采用实时荧光定量PCR方法检测2个品种鸭胚胎期和出雏早期垂体中GH mRNA的差异表达水平,探究生长激素(GH)基因在不同品种鸭胚胎期和出雏早期垂体中表达水平的发育性变化.从13胚龄到7日龄,垂体中均可检测到GH mRNA的表达,其发育性变化在品种间表现出不同的变化规律.‘高邮鸭’随胚(日)龄的增加,垂体GH mRNA水平一直大幅增加,胚龄间差异显著或极显著(P<0.05或P<0.01);‘金定鸭’在17胚龄和21胚龄间表达量差异不显著(P>0.05),在其他各胚龄间差异极显著(P<0.01).在胚胎期,在13、15、17、25胚龄,‘金定鸭’垂体中GH的表达量均高于‘高邮鸭’垂体中的表达量,但差异不显著(P>0.05),在21胚龄和出雏后第7d,‘金定鸭’垂体中GH的表达量显著低于‘高邮鸭’垂体中的表达量(P<0.05).研究表明,垂体中GH基因表达具有显著的胚(日)龄依赖性和明显的品种特征,垂体中GH基因的表达对动物早期生长具有重要影响. 展开更多
关键词 鸭 垂体 GH基因 胚胎期 发育性变化
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垂体腺瘤中雌激素受体基因的表达 被引量：8
10
作者 佟晓光 杨树源 +2 位作者 张建宁 赵钧明 庞文新 《中国神经精神疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期132-134,共3页
目的　研究人垂体腺瘤中雌激素受体基因 (estrogenreceptorgene ,ER)mRNA与蛋白水平的表达及其与垂体腺瘤生物学特性的关系。方法　用免疫组化法和逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR法 ) ,检测 6 0例各种类型垂体腺瘤标本中ER蛋白的表达 ,... 目的　研究人垂体腺瘤中雌激素受体基因 (estrogenreceptorgene ,ER)mRNA与蛋白水平的表达及其与垂体腺瘤生物学特性的关系。方法　用免疫组化法和逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR法 ) ,检测 6 0例各种类型垂体腺瘤标本中ER蛋白的表达 ,比较不同类型垂体腺瘤ER蛋白表达的差异及ER蛋白表达与mRNA表达的差异。结果　泌乳素腺瘤、促性腺激素细胞瘤中均有ER蛋白表达 ,其表达与mRNA表达一致 ;无功能腺瘤中 2例有ER蛋白表达 ,其蛋白表达与mRNA表达不一致 ;其它类型垂体腺瘤未发现ER基因表达。结论　ER基因表达的检测可有助于评价PRL腺瘤的增殖活性及筛选抗雌激素治疗对象。ER基因的表达异常可能与PRL腺瘤及促性腺激素细胞瘤的发生。 展开更多
关键词 垂体腺瘤 雌激素受体基因 MRNA 基因表达
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绵羊MTNR1a基因mRNA表达量的季节性差异 被引量：5
11
作者 郭婷婷 刘月琴 +1 位作者 张英杰 王忻 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期14-18,52,共6页
本试验分别于春分、夏至、秋分和冬至4个节气,随机选择体况良好体重相近的蒙古羊8只,外科手术取下丘脑、垂体组织样品,采用RT-PCR方法对其褪黑素受体MTNR1a基因表达进行半定量分析.结果表明:绵羊MTNR1a基因表达存在明显的季节性节律,下... 本试验分别于春分、夏至、秋分和冬至4个节气,随机选择体况良好体重相近的蒙古羊8只,外科手术取下丘脑、垂体组织样品,采用RT-PCR方法对其褪黑素受体MTNR1a基因表达进行半定量分析.结果表明:绵羊MTNR1a基因表达存在明显的季节性节律,下丘脑MTNR1a基因表达量在夏至时最低,秋分时最高,春冬季节相近;垂体MTNR1a基因表达量在秋分时最低,夏至时最高,春冬季节也相近. 展开更多
关键词 绵羊 褪黑素受体基因 下丘脑 垂体 季节节律
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垂体瘤转化基因和C-myc基因在多发性骨髓瘤中表达的研究 被引量：3
12
作者 李大启 陈萍 +4 位作者 邵建华 董学斌 常亚丽 赵红玉 周亚伟 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第5期1238-1241,共4页
本研究探讨垂体瘤转化基因(pituitary tumor transforming gene,PTTG)和c-myc基因在多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者中的表达并分析它们与MM发生的关系。采用RT-PCR方法检测33例MM患者及10例正常人骨髓单个核细胞(bone marrow mo... 本研究探讨垂体瘤转化基因(pituitary tumor transforming gene,PTTG)和c-myc基因在多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者中的表达并分析它们与MM发生的关系。采用RT-PCR方法检测33例MM患者及10例正常人骨髓单个核细胞(bone marrow mononuclear cell,BMMNC)中PTTG和c-myc基因的表达。结果表明:MM患者PTTG和c-myc基因的表达明显高于正常对照组(p<0.05)。PTTG基因与c-myc基因的表达呈正相关(r=0.801,p<0.05)。结论:PTTG和c-myc基因的过度表达与MM的发生发展有关。 展开更多
关键词 垂体瘤转化基因 c—myc基因 多发性骨髓瘤
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家禽垂体特异转录因子POU1F1研究进展 被引量：18
13
作者 姜润深 杨宁 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期957-961,共5页
催乳素 (Prolactin ,PRL)、生长激素 (GrowthHormone ,GH)、促甲状腺素 β(Thyroid stimulatingHormone β ,TSHβ)是家禽垂体前叶分泌的具有重要生理功能的激素 ,这些激素通过调控家禽就巢性的发生与维持、生长发育、免疫应答等过程来... 催乳素 (Prolactin ,PRL)、生长激素 (GrowthHormone ,GH)、促甲状腺素 β(Thyroid stimulatingHormone β ,TSHβ)是家禽垂体前叶分泌的具有重要生理功能的激素 ,这些激素通过调控家禽就巢性的发生与维持、生长发育、免疫应答等过程来影响家禽的产蛋性能、生长性能以及免疫力。垂体特异转录因子POU1F1(Pituitary specificTranscriptionFactor)是家禽垂体前叶特异表达的一种具有重要功能的转录因子 ,它与PRL基因、GH基因、TSHβ基因以及Pit 1自身的启动子结合 ,调控这些基因的转录 ,通过调节这些基因的表达而对家禽的生长发育、繁殖等很多方面起着重要的作用。比较了家禽Pit 1基因的结构与哺乳动物的差异 ,阐述了家禽Pit 1基因的表达特点及其生物学效应。考虑到POU1F1的重要作用和作者的研究 ,作者认为Pit 1基因可作为家禽生长、产蛋。 展开更多
关键词 家禽 垂体特异转录因子 PIT-1基因
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大鼠应激时垂体c-fos和催乳素基因表达关系的研究 被引量：5
14
作者 蓝妮 谢启文 王淑芬 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期244-246,共3页
目的 :探讨应激刺激下 ,垂体是否有 c- fos表达及其与催乳素 (PRL)基因表达的关系。方法 :雌性 Wistar大鼠给予禁锢应激 6 0 m in,用原位杂交方法检测应激开始后 15 ,30 ,6 0 ,12 0 ,180 min时 PRL m RNA水平。结果 :基础状态下垂体前叶... 目的 :探讨应激刺激下 ,垂体是否有 c- fos表达及其与催乳素 (PRL)基因表达的关系。方法 :雌性 Wistar大鼠给予禁锢应激 6 0 m in,用原位杂交方法检测应激开始后 15 ,30 ,6 0 ,12 0 ,180 min时 PRL m RNA水平。结果 :基础状态下垂体前叶 c- fos有弱表达 ,在禁锢应激开始后 15～ 30 m in迅速增加达高峰 ,尔后下降 ,在 12 0～ 180 m in出现第 2次表达高峰 ,PRL m RNA水平的改变与 c- fos平行。结论 :垂体 c- fos可能参与介导应激引起的 PRL 基因的激活 ,垂体即刻早期基因的表达有可能作为神经内分泌系统激活的标志。 展开更多
关键词 垂体 催乳素 原位杂交应激 基因表达 C-FOS IEGs
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靶向PTTG和survivin基因共干扰质粒对U251细胞的沉默效率 被引量：2
15
作者 徐松柏 刘宝斌 +6 位作者 赵红光 于洪泉 李蕴潜 张显峰 张宇 金铮 赵刚 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期37-41,共5页
目的:探讨共干扰质粒pGenesil-2.1-PTTG-survivin siRNA对U251细胞人垂体瘤转化基因(PTTG)和生存素(survivin)基因表达的影响。方法:U251细胞分为5组,分别为正常细胞对照组、Lipo2000+pGenesil-2.1HK组(HK阴性对照组)、Lipo2000+pGenesi... 目的:探讨共干扰质粒pGenesil-2.1-PTTG-survivin siRNA对U251细胞人垂体瘤转化基因(PTTG)和生存素(survivin)基因表达的影响。方法:U251细胞分为5组,分别为正常细胞对照组、Lipo2000+pGenesil-2.1HK组(HK阴性对照组)、Lipo2000+pGenesil-2.1-PTTG siRNA、Lipo2000+pGenesil-2.1-survivin siRNA及Lipo2000+pGenesil-2.1-PTTG-survivin siRNA。应用RT-PCR法、流式细胞术和Westernblotting方法检测转染36h后的各组U251细胞PTTG与survivin基因mRNA和蛋白表达。结果:3个干扰组的U251细胞中PTTG和survivin基因mRNA和蛋白表达水平均较HK阴性对照组显著降低(P<0.01),以共干扰质粒pGenesil-2.1-PTTG-survivin siRNA组降低最明显。结论:共干扰pGenesil1-PTTG-survivin siRNA质粒对U251细胞中PTTG与survivin基因的沉默效应强于单独沉默其中某一基因的干扰质粒。 展开更多
关键词 垂体肿瘤转化基因 生存素 RNA干扰 胶质瘤
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垂体腺苷酸环化酶激活肽基因的合成表达与活性研究 被引量：3
16
作者 陈哲宇 柴延丰 +2 位作者 何成 路长林 吴祥甫 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第2期192-197,共6页
根据文献报道垂体腺苷酸环化酶激活肽 (pituitaryadenylatecyclaseactivatingpolypeptide,PACAP)的氨基酸序列 ,推导出其核苷酸序列并设计成部分互补的 6条寡核苷酸片段 ,利用DNA合成仪人工合成、纯化这 6条寡核苷酸片段 ,通过片段退火... 根据文献报道垂体腺苷酸环化酶激活肽 (pituitaryadenylatecyclaseactivatingpolypeptide,PACAP)的氨基酸序列 ,推导出其核苷酸序列并设计成部分互补的 6条寡核苷酸片段 ,利用DNA合成仪人工合成、纯化这 6条寡核苷酸片段 ,通过片段退火、连接、克隆及测序鉴定获得了PACAP基因 .将PACAP基因克隆至 pGEX 4T 3质粒中转化BL2 1进行表达分析 ,融合蛋白约占细胞总蛋白的 30 % ,其中部分为可溶性 ,部分以包涵体形式存在 .通过亲和层析纯化GST PACAP融合蛋白 ,该蛋白质能促进PC12细胞轴突生长及脊髓神经元存活 . 展开更多
关键词 垂体腺苷酸环化酶激活肽 基因克隆 基因表达 PC12细胞 脊髓神经元
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垂体瘤基因表达谱的建立及其发病分子机理的探讨 被引量：7
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作者 胡仁明 宋怀东 +23 位作者 彭永德 彭永德 黄秋花 黄秋花 周隽 周隽 吴听彦 任双喜 王立 余亚萍 余亚萍 戴蒙 毛羽丰 徐淑华 徐淑华 范惠泳 沈宇 高国峰 汤正义 付刚 付刚 陈名道 张庆华 陈家伦 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2000年第2期97-101,共5页
目的　建立垂体瘤组织基因表达谱并探讨其发病的分子机理。方法垂体生长激素瘤（ＧＨＰＡ）和无功能腺瘤（ＮＦＰＴ）ｃＤＮＡ文库构建，大规模表达序列标签（ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｔａｇｓ，ＥＳＴｓ）测序及生物信息... 目的　建立垂体瘤组织基因表达谱并探讨其发病的分子机理。方法垂体生长激素瘤（ＧＨＰＡ）和无功能腺瘤（ＮＦＰＴ）ｃＤＮＡ文库构建，大规模表达序列标签（ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｔａｇｓ，ＥＳＴｓ）测序及生物信息学处理。结果　　在已知基因中，参与基因蛋白表达者最高（分别为２９％和２８％），其次是代谢相关基因（分别为１８％和２１％），均较正常垂体为高（２３．２％和１４．３％）。ＧＨＰＡ中可同时表达泌乳素（ＰＲＬ）和生长激素（ＧＨ）；ＧＨＰＡ和正常垂体（ＮＰ）中ＧＳａ基因表达明显高于钙调素，而ＮＦＰＴ中则相反。在垂体瘤差异表达的与细胞分裂有关的基因中，有些与肿瘤的发生有关；发现了７４个在垂体瘤中高表达而正常垂体中不表达的未知基因的ＥＳＴｓ。结论　不同垂体瘤组织中其主要的信号转导途径可能有别；发现有些与细胞分裂有关的基因在ＮＦＰＴ或ＧＨＰＡ库中与ＮＰ库中表达不同。 展开更多
关键词 垂体瘤 基因表达谱 表达序列标签 分子机理
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H_(22)荷瘤小鼠早期垂体差异表达的基因及其特征 被引量：2
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作者 刘小美 方肇勤 +8 位作者 潘志强 卢文丽 梁超 吴中华 侯俐 张辉 卓少元 廖明娟 高必峰 《中华中医药学刊》 CAS 2009年第3期603-607,共5页
目的:筛选荷瘤小鼠早期垂体差异表达的基因,并简要分析其功能特征。方法:采用荷瘤小鼠标准化四诊及辨证方法,及GeneChip Mouse Exon1.0STArray等技术,检测H22荷瘤小鼠早期邪毒壅盛证和气虚证、中期阳气虚证、中晚期气阴阳虚证共3阶段4... 目的:筛选荷瘤小鼠早期垂体差异表达的基因,并简要分析其功能特征。方法:采用荷瘤小鼠标准化四诊及辨证方法,及GeneChip Mouse Exon1.0STArray等技术,检测H22荷瘤小鼠早期邪毒壅盛证和气虚证、中期阳气虚证、中晚期气阴阳虚证共3阶段4个证候垂体基因表达的差异,重点关注早期垂体差异表达的基因。结果:筛选到早期上调的基因12个:Alb1、Timp3、Ifi44、Kdr、Cbln3、Hectd2、Hecw2、Vtn、LOC631028、LOC630776、4933427I04Rik、A630075K04Rik。下调的基因17个:Klk1b27、Klk1b26、Klk1b4、Klk1b22、Klk1b3、Klk1、Klk1b16、Muc10、Cryaa、Bag3、Gsg2、Six2、Saa3、1700108L22Rik、LOC628820、2310057J18Rik、2410002I01Rik。结论:H22荷瘤小鼠早期垂体基因表达改变集中表现为保护蛋白的功能减弱、细胞周期改变,以及血管、神经、表皮生成存在障碍的倾向,这可能与荷瘤小鼠早期垂体应激代偿,甚至是失代偿有关。其中Cbln3可能是邪毒壅盛证的标志基因之一。 展开更多
关键词 小鼠 肿瘤 垂体 证候 基因 基因芯片
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GnRH-A免疫对GnRHR、FSH-β和LH-β表达及生物信息学特性的影响 被引量：4
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作者 魏锁成 韦敏 巩转娣 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期232-235,共4页
目的:探讨GnRH-A主动免疫对垂体GnRHR、FSHβ-和LHβ-基因表达和生物信息学特性的影响,进而研究GnRH-A的作用机理。方法:30只日本大耳白兔(Oryctolagus cuniculus)随机均分为三组,在EG-Ⅰ和EG-Ⅱ皮下注射1.0 ml(100μg/ml)GnRH-A抗原,EG... 目的:探讨GnRH-A主动免疫对垂体GnRHR、FSHβ-和LHβ-基因表达和生物信息学特性的影响,进而研究GnRH-A的作用机理。方法:30只日本大耳白兔(Oryctolagus cuniculus)随机均分为三组,在EG-Ⅰ和EG-Ⅱ皮下注射1.0 ml(100μg/ml)GnRH-A抗原,EG-Ⅱ于20天以相同剂量加强免疫一次,对照组不做任何处理。70天颈动脉放血致死实验兔,无菌采集垂体。从兔垂体中提取总RNA,GnRHR,FSHβ-和LHβ-mRNA基因扩增、克隆和测序,实时荧光定量PCR分析mRNA基因的表达。用DNAMAN、Tmpred、SignalP、TargetP、Expasy等生物信息学分析软件和在线工具,对GnRHR序列和蛋白的理化特性、跨膜结构、信号肽及二级结构等进行分析和预测。结果:EG-Ⅰ和EG-Ⅱ的GnRHR mRNA低于对照组(P<0.01),EG-Ⅱ又低于EG-Ⅰ(P<0.05);EG-Ⅰ和EG-ⅡFSHβ-mRNA和LHβ-mRNA极显著低于对照组(P<0.01),EG-Ⅰ与EG-Ⅱ间也具有显著差异(P<0.05)。GnRHR核苷酸为1 179 bp,与NM-001082738的同源性达96%,核苷酸中含A 28.7%,C 24.9%,G 19.0%,T 27.5%。Gn-RHR的线粒体转运肽、信号肽及转运肽长度发生了明显改变。与NM-001082738的比较显示,GnRHR mRNA的核苷酸、氨基酸、分子量、脂肪指数和平均疏水性均变小,而不稳定指数、α螺旋和β折叠数均增加。结论:GnRH-A免疫可明显降低雄兔垂体GnRHR、FSHβ-和LHβ-mRNA基因的表达,而且对GnRHR的生物信息学特性具有一定的影响,加强免疫作用更明显;GnRHR是一种含有信号肽的不稳定的疏水性跨膜蛋白。 展开更多
关键词 阿拉瑞林 GNRH受体 垂体 基因表达 生物信息学 雄兔
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大肠癌中PTTG的表达及意义 被引量：3
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作者 郑建云 刘冰 +2 位作者 任天顺 王美妮 廖和和 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期148-150,共3页
目的探讨垂体肿瘤转化基因(pituitary tumor transforming gene,PTTG)在大肠癌中的表达及其与大肠癌临床病理特征的关系。方法采用免疫组化MaxVision两步法对63例大肠癌组织及距癌灶3 cm以外的癌旁组织、距癌灶10 cm以外的正常组织中PTT... 目的探讨垂体肿瘤转化基因(pituitary tumor transforming gene,PTTG)在大肠癌中的表达及其与大肠癌临床病理特征的关系。方法采用免疫组化MaxVision两步法对63例大肠癌组织及距癌灶3 cm以外的癌旁组织、距癌灶10 cm以外的正常组织中PTTG进行检测。结果PTTG在癌组织中表达的阳性率明显高于癌旁和非癌组织(P<0.01、P<0.01);并在不同年龄组(<60岁和≥60岁)、不同组织学分级(高分化和中、低分化)、有或无淋巴结转移及肿瘤不同浸润深度(肌层和浆膜层)病例中表达差异有显著性(P<0.05,P<0.01,P<0.05,P<0.01)。结论PTTG在大肠癌的发生、发展中起重要作用;可以作为临床判断大肠癌生物学行为有用的分子生物学指标。 展开更多
关键词 大肠肿瘤 PTTG 免疫组织化学
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