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piggyBac转座子介导的牛A-FABP表达载体的构建与鉴定 被引量:2
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作者 杨宁 昝林森 +2 位作者 成功 付常振 李耀坤 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2013年第9期8-14,20,共8页
【目的】构建以piggyBac(PB)转座子为载体元件,绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因,Neomycin(NEO)为抗性基因,alpha-肌动蛋白(α-actin)为启动子的A-FABP基因特异性表达载体pPB-AFABP,并验证其转座活性。【方法】通过PCR方法合成PB转座子骨... 【目的】构建以piggyBac(PB)转座子为载体元件,绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因,Neomycin(NEO)为抗性基因,alpha-肌动蛋白(α-actin)为启动子的A-FABP基因特异性表达载体pPB-AFABP,并验证其转座活性。【方法】通过PCR方法合成PB转座子骨架序列、NEO-EGFP、α-actin启动子以及A-FABP基因序列,并将各个序列连接构建成转基因载体pPB-AFABP;用脂质体法将供体质粒pPB-AFABP和辅助质粒pCAG-PBase组成的PB二元系统及质粒pPB-AFABP分别转染牛成纤维细胞,通过G418筛选得到转基因细胞。【结果】经过酶切和测序鉴定,载体pPB-AFABP构建正确;PB二元系统的阳性克隆数明显多于转座子载体pPB-AFABP的克隆数;PCR鉴定结果表明,牛成纤维细胞中存在目的基因A-FABP。【结论】成功构建了转基因表达载体pPB-AFABP,且证实PB转座子在牛成纤维细胞中具有较高的转座活性。 展开更多
关键词 piggybac转座子 A-FABP基因 表达载体 牛成纤维细胞
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CTM2-GFP转基因拟南芥构建及细胞定位研究
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作者 李亚平 曹蕾 +1 位作者 郑朋朋 樊婷婷 《合肥工业大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2024年第10期1377-1380,1411,共5页
通过筛选突变体库发现的镉耐受突变体植株可能参与了植物Cd胁迫的调控。文章通过同源重组方法构建pART27-CTM2-GFP载体,并将pART27-CTM2-GFP重组质粒转入农杆菌GV3101,采用浸花转染法转入野生型拟南芥植株;通过抗性筛选和聚合酶链式反应... 通过筛选突变体库发现的镉耐受突变体植株可能参与了植物Cd胁迫的调控。文章通过同源重组方法构建pART27-CTM2-GFP载体,并将pART27-CTM2-GFP重组质粒转入农杆菌GV3101,采用浸花转染法转入野生型拟南芥植株;通过抗性筛选和聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)鉴定获得CTM2-GFP转基因阳性植株,进行抗性分离鉴定获得纯合转基因植株;最后通过qPCR检测CTM2基因表达,筛选最佳的CTM2-GFP转基因株系;通过观察CTM2-GFP转基因植株中绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的荧光发现CTM2为细胞膜定位蛋白。研究结果为深入研究CTM2基因在调控植物镉耐受分子机制中的作用提供了遗传材料支撑。 展开更多
关键词 拟南芥 CTM2基因 植物表达载体 转基因植株 镉耐受
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蜘蛛拖牵丝蛋白基因转家蚕表达质粒的构建 被引量:6
3
作者 刘辉芬 李维 +2 位作者 王宇 蒋平 郭聪 《湖南大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第5期105-109,共5页
利用DNA重组技术对络新妇蛛(Nephila clavipes)拖牵丝蛋白基因MaSp1高度重复序列进行多次重组,人工构建成1.6 kb的蜘蛛拖牵丝蛋白人工基因Sil-E,DNA序列分析证明了人工基因序列的正确性.将家蚕L链基因启动子片段、L链cDNA、L链基因终止... 利用DNA重组技术对络新妇蛛(Nephila clavipes)拖牵丝蛋白基因MaSp1高度重复序列进行多次重组,人工构建成1.6 kb的蜘蛛拖牵丝蛋白人工基因Sil-E,DNA序列分析证明了人工基因序列的正确性.将家蚕L链基因启动子片段、L链cDNA、L链基因终止子融合在一起,构建成丝腺特异性表达单元.再与Sil-E融合构建成蜘蛛拖牵丝蛋白基因家蚕丝腺特异表达单元.将该表达单元克隆到转座子piggyBac的转基因载体中,获得了蜘蛛拖牵丝蛋白转基因表达载体.采用显微注射法将其与辅助质粒共导入到家蚕蚕卵中.筛选转基因阳性个体,经PCR和Southern杂交鉴定,结果表明目的基因整合到家蚕基因组中,为进一步研究家蚕作为生物反应器表达蜘蛛拖牵丝蛋白基因奠定了基础. 展开更多
关键词 蜘蛛拖牵丝蛋白基因 转座子表达质粒 转基因家蚕
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小麦耐逆基因-TaLEA_2转化拟南芥的研究 被引量:20
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作者 赵咏梅 杨建雄 +1 位作者 俞嘉宁 原江锋 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期1-6,共6页
研究小麦第3组LEA基因中T aLEA2对耐旱和耐盐性能的影响.将小麦第3组LEA基因T aLEA2连接在双元表达载体pB I121 C aM V 35S启动子下游,构建了能在植物中高效表达的载体pB I121-T aLEA2.通过农杆菌介导的真空渗透法,将其转入野生拟南芥中... 研究小麦第3组LEA基因中T aLEA2对耐旱和耐盐性能的影响.将小麦第3组LEA基因T aLEA2连接在双元表达载体pB I121 C aM V 35S启动子下游,构建了能在植物中高效表达的载体pB I121-T aLEA2.通过农杆菌介导的真空渗透法,将其转入野生拟南芥中,经抗性筛选及PCR验证,获得T0代转基因植株,并用不同浓度的PEG 4000和N aC l对转基因拟南芥的耐逆性进行检测.结果表明,这些转基因植株可明显改进拟南芥在10%PEG及0.8%N aC l培养基上的生长状态.在实验条件下,转基因拟南芥的耐旱性及耐盐性均有所提高,提示T aLEA2基因在植物水分调节方面有重要作用. 展开更多
关键词 TnLEA2基因 植物表达载体 转基因 耐逆性
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双T-DNA表达载体转化大豆的研究 被引量:14
5
作者 张秀春 郭丽琼 +2 位作者 吴坤鑫 林俊扬 林俊芳 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期291-295,共5页
利用含有筛选标记基因和目的基因Δ6-脂肪酸脱氢酶基因的双T-DNA共转化表达载体pLIN61,经农杆菌EHA101介导,采用子叶节转化法转化大豆,使用除草剂Glufosinate作为筛选剂,获得了一批携带有玻璃苣Δ6-脂肪酸脱氢酶基因的转基因大豆,转化... 利用含有筛选标记基因和目的基因Δ6-脂肪酸脱氢酶基因的双T-DNA共转化表达载体pLIN61,经农杆菌EHA101介导,采用子叶节转化法转化大豆,使用除草剂Glufosinate作为筛选剂,获得了一批携带有玻璃苣Δ6-脂肪酸脱氢酶基因的转基因大豆,转化效率为2.0%,共转化频率及实际转化率分别为56.25%、1.12%。PCR检测和Southern杂交结果证明,玻璃苣D6D已经整合到大豆的基因组上。RT-PCR检测结果显示,玻璃苣Δ6-脂肪酸脱氢酶基因在转基因大豆的转录水平上得到了表达。 展开更多
关键词 共转化表达载体 △^6-脂肪酸脱氢酶基因 转基因大豆
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紫花苜蓿MsZIP基因超表达载体的构建及转基因苜蓿检测 被引量:12
6
作者 李燕 孙彦 +3 位作者 杨青川 康俊梅 张铁军 房锋 《草业学报》 CSCD 北大核心 2012年第6期182-189,共8页
根据已经克隆得到的MsZIP基因(GenBank序列号:HQ911778),扩增编码区cDNA,构建植物超表达载体PBI-MsZIP。酶切鉴定表明,目的基因已经正确的插入到载体中,超表达载体构建成功。采用CaCl2冻融法将其转入农杆菌菌株中,然后采用农杆菌介导的... 根据已经克隆得到的MsZIP基因(GenBank序列号:HQ911778),扩增编码区cDNA,构建植物超表达载体PBI-MsZIP。酶切鉴定表明,目的基因已经正确的插入到载体中,超表达载体构建成功。采用CaCl2冻融法将其转入农杆菌菌株中,然后采用农杆菌介导的方法,转化紫花苜蓿,共得到11株抗性苗,对其中的4株进行卡那霉素基因PCR检测,均得到了目的条带。同时对这4株抗性苗进行目的基因的RT-PCR检测,均得到了目的条带。说明MsZIP基因已经成功在苜蓿中超表达。为了进一步验证该基因的功能,分别用200mmol/L NaCl和25μmol/LPEG-6000处理转基因苜蓿,3d后进行生理指标的测定。结果表明,MsZIP基因在苜蓿中超表达可以提高苜蓿的耐盐性和耐旱性。 展开更多
关键词 紫花苜蓿 MsZIP基因 超表达载体 苜蓿转化 转基因苜蓿检测
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Cu/Zn-SOD基因植物表达载体的构建及其在烟草中的表达 被引量:11
7
作者 姚冉 李轶女 +2 位作者 张志芳 沈桂芳 潘沈元 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期78-82,共5页
为研究Cu/Zn-SOD基因在提高转基因植物抗逆性方面的作用,从一株地热芽孢杆菌(Geobacillus)中克隆得到Cu/Zn-SOD基因,以pZP211质粒为表达载体,构建了植物表达载体pZP211-Cu/ZnSOD,并通过农杆菌介导对烟草进行遗传转化。经PCR检测证明已... 为研究Cu/Zn-SOD基因在提高转基因植物抗逆性方面的作用,从一株地热芽孢杆菌(Geobacillus)中克隆得到Cu/Zn-SOD基因,以pZP211质粒为表达载体,构建了植物表达载体pZP211-Cu/ZnSOD,并通过农杆菌介导对烟草进行遗传转化。经PCR检测证明已获得转Cu/Zn-SOD基因的烟草。进而测定转基因烟草的SOD活力,结果表明Cu/Zn-SOD基因在烟草中高效表达。对转基因烟草进行耐盐性检测,证明Cu/Zn-SOD基因确实能够提高烟草对盐胁迫的耐受性。 展开更多
关键词 CU Zn-SOD基因 植物表达载体 转基因烟草
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大豆抗病相关基因SR1正反义植物表达载体的构建及遗传转化研究 被引量:3
8
作者 林世锋 张淑珍 +3 位作者 杨秀红 陈庆山 杨庆凯 李文滨 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期90-94,共5页
实验构建了CaMV35S启动子控制下的大豆抗病相关基因SR1的正反义植物双元表达载体pBISR1(+)和pBISR1(-)。通过根癌农杆菌叶盘转化法,将正义和反义SR1 基因导入烟草Ha vana 425,经卡那霉素筛选,获得了抗性植株。经PCR和PCR-Southern印迹分... 实验构建了CaMV35S启动子控制下的大豆抗病相关基因SR1的正反义植物双元表达载体pBISR1(+)和pBISR1(-)。通过根癌农杆菌叶盘转化法,将正义和反义SR1 基因导入烟草Ha vana 425,经卡那霉素筛选,获得了抗性植株。经PCR和PCR-Southern印迹分析,证明抗性植株中整和了SR1基因,RT-PCR分析进一步表明正义和反义基因皆能转录为完整的mRNA,经疫霉根腐接种及抗病性鉴定表明,转反义基因株系和未转基因株系均轻微感病,而转正义基因株系始终没有出现感病症状。 展开更多
关键词 抗病相关基因 反义植物表达载体 遗传转化 构建 大豆 双元表达载体 35S启动子 抗性植株 反义基因 PCR分析 抗病性鉴定 CaMV 基因导入 卡那霉素 mRNA 正义基因 转化法 株系 转基因 感病 根癌 烟草 接种 根腐 疫霉
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马铃薯Y病毒复制酶基因植物表达载体构建及转基因烟草的培育 被引量:8
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作者 王振东 刘玉乐 +2 位作者 房德纯 吴元华 田波 《沈阳农业大学学报》 CAS CSCD 1995年第3期249-253,共5页
用BamHI/KpnI从重组克隆pZD-1中切下马铃薯Y病毒脉坏死株系复制酶基因,将其插入质粒pROK2相应切点中构成植物表达载体.用重组pROK2转化农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)LB... 用BamHI/KpnI从重组克隆pZD-1中切下马铃薯Y病毒脉坏死株系复制酶基因,将其插入质粒pROK2相应切点中构成植物表达载体.用重组pROK2转化农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)LBA4404菌株,通过重组农杆菌侵染叶盘将复制酶基因转入烟草品种NC89中获得转基因植株.分子生物学检测结果表明,复制酶基因在转基因烟草中获得表达,并转基因烟草表现一定程度的延迟发病作用. 展开更多
关键词 马铃薯 病毒 复制酶基因 转基因 烟草
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eGfp/Gus融合基因植物表达载体的构建和转化验证 被引量:4
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作者 吴学龙 何海燕 +1 位作者 刘智宏 黄锐之 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2011年第4期645-650,共6页
绿色荧光蛋白(Gfp)基因和葡萄糖醛酸糖苷酶(Gus)基因是广泛应用的2个报告基因,在定性和定量研究基因表达和启动子功能等方面各有优劣。为联合使用这2个报告基因,根据报告基因序列设计2对带有特异限制性内切酶位点的引物,PCR法分别扩增... 绿色荧光蛋白(Gfp)基因和葡萄糖醛酸糖苷酶(Gus)基因是广泛应用的2个报告基因,在定性和定量研究基因表达和启动子功能等方面各有优劣。为联合使用这2个报告基因,根据报告基因序列设计2对带有特异限制性内切酶位点的引物,PCR法分别扩增增强型Gfp(eGfp)和Gus基因,连接到植物表达载体pF-GC5941中,构建含CaMV35S启动子驱动的eGfp/Gus基因融合表达载体,命名为pFGC-DR。注射农杆菌法转化烟草叶片,以及花器官农杆菌浸泡法转化拟南芥,发现融合基因成功地在烟草叶片中瞬时表达和在拟南芥中稳定表达,表明融合报告基因在烟草和拟南芥中都能高效表达。 展开更多
关键词 eGfp/Gus双报告基因 植物表达载体 瞬时表达 转基因表达
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番茄转录调控因子基因Pti5植物表达载体的构建及其转化烟草的研究 被引量:2
11
作者 张艳华 王罡 +1 位作者 季静 杜娟 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期563-566,共4页
本实验构建了含有CaMV35S启动子控制下的Pti5 VP16基因的植物双元表达载体pBI121UCH1。通过根癌农杆菌叶盘转化法,将Pti5 VP16基因导入烟草SRI中,经卡那霉素筛选,获得了抗性植株。经PCR和Southern印迹分析,表明抗性植株中整合了Pti5 VP1... 本实验构建了含有CaMV35S启动子控制下的Pti5 VP16基因的植物双元表达载体pBI121UCH1。通过根癌农杆菌叶盘转化法,将Pti5 VP16基因导入烟草SRI中,经卡那霉素筛选,获得了抗性植株。经PCR和Southern印迹分析,表明抗性植株中整合了Pti5 VP16基因,经抗病性鉴定转基因烟草植株的抗病性明显提高。 展开更多
关键词 Pti5-VPl6基因 转化 烟草 番茄转录调控因子基因 植物表达载体
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动物乳腺生物反应器研究进展 被引量:3
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作者 舒建洪 刘津 +2 位作者 胡先春 杨瑞锋 张涌 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2004年第12期149-153,共5页
 针对利用动物乳腺生物反应器技术生产重组蛋白,具有生产效率高和经济效益明显的特点。综述了制备乳腺生物反应器时表达载体构建和基因转移两个关键环节的研究现状,并就基因打靶和体细胞克隆技术的结合探讨了乳腺生物反应器的发展趋势。
关键词 乳腺生物反应器 表达载体 转基因 基因打靶 体细胞克隆
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抗菌肽B、D双基因表达载体的构建及转化广藿香的研究 被引量:12
13
作者 张家明 孙雪飘 郑学勤 《热带作物学报》 CSCD 1997年第1期50-57,共8页
将人工合成的柞蚕抗菌肽D基因和天蚕抗菌肽B基因分别接上启动子和终止于,克隆到双元表达载体PBin19上,构建成双价抗菌肽基因表达载体pTBD。用三亲交配的方法将pTBD导入根癌农杆菌菌株LBA4404,再通过农杆菌将抗菌肽B、D基因导入广藿... 将人工合成的柞蚕抗菌肽D基因和天蚕抗菌肽B基因分别接上启动子和终止于,克隆到双元表达载体PBin19上,构建成双价抗菌肽基因表达载体pTBD。用三亲交配的方法将pTBD导入根癌农杆菌菌株LBA4404,再通过农杆菌将抗菌肽B、D基因导入广藿香,获27个转基因植株。Southern杂交结果表明,抗菌肽B、D基因已同时整合进3个株系染色体组中。与病原细菌Pseudomonassolanacearum试管共培养结果表明,转基因植株获得较强抗病性。盆栽接菌试验结果也表明.转基因植株具有较强抗病性。 展开更多
关键词 广藿香 抗菌肽 双基因表达载体 转基因植株
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绵羊毛角蛋白Ⅱ型中间丝9基因的扩增及表达 被引量:4
14
作者 于永生 王晓阳 +2 位作者 朴庆林 罗晓彤 金海国 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第6期64-67,共4页
本试验旨在构建绵羊毛角蛋白Ⅱ型中间丝9(keratin typeⅡintermediate filament 9,KIFⅡ-9)基因cDNA的毛囊特异性表达载体,转染辽宁绒山羊胎儿成纤维细胞,筛选出稳定表达外源基因并可用于核移植的转基因细胞克隆。通过PCR扩增得到的KAP... 本试验旨在构建绵羊毛角蛋白Ⅱ型中间丝9(keratin typeⅡintermediate filament 9,KIFⅡ-9)基因cDNA的毛囊特异性表达载体,转染辽宁绒山羊胎儿成纤维细胞,筛选出稳定表达外源基因并可用于核移植的转基因细胞克隆。通过PCR扩增得到的KAP6-1基因启动子,然后与RT-PCR扩增得到的KIFⅡ-9 cDNA序列连接构成皮肤特异性表达载体pcDNA3.1-KK,将重组表达载体以脂质体介导转染胎儿成纤维细胞,通过G418筛选获得转基因细胞克隆,结果显示,外源KAP6-1启动子序列和KIFⅡ-9 cDNA整合到细胞基因组中,为下一步通过核移植方法获得转基因绒山羊提供了条件。 展开更多
关键词 辽宁绒山羊 毛角蛋白Ⅱ型中间丝基因 毛囊特异性表达载体 转基因体细胞
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油菜素内酯基因BAS1根系表达载体的构建及烟草的遗传转化 被引量:1
15
作者 束红梅 郭书巧 +1 位作者 巩元勇 倪万潮 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期106-110,共5页
为使油菜素内酯基因BAS1在根系特异表达。首先构建含有根系启动子Tob RB7的根系表达载体p CAMBIA2301-RB7-rbc。再将获得的油菜素内酯失活基因BAS1与其整合,得到BAS1基因的根系特异表达载体p CAMBIA2301-RB7-BAS1-rbc,通过农杆菌侵染转... 为使油菜素内酯基因BAS1在根系特异表达。首先构建含有根系启动子Tob RB7的根系表达载体p CAMBIA2301-RB7-rbc。再将获得的油菜素内酯失活基因BAS1与其整合,得到BAS1基因的根系特异表达载体p CAMBIA2301-RB7-BAS1-rbc,通过农杆菌侵染转入烟草。经PCR和RT-PCR验证,目的基因BAS1已成功转入烟草,并在根系表达,转基因植株中根系油菜素内酯受体激酶基因BRI1的表达受到影响。 展开更多
关键词 BAS1基因 根系表达载体构建 转基因植株 表达
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NtSKP1基因的反义载体构建及转基因烟草的产生 被引量:1
16
作者 张付云 李伟 +3 位作者 张瑛 孙秋颖 李研 杜昱光 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期141-145,共5页
根据枯斑三生烟SKP1基因(NtSKP1)的序列,设计一对分别含有特定酶切位点的特异引物,以重组质粒pMD18-SKP1为模板,扩增目的基因(约473bp)片段。将反向目的片段插入中间载体pHANNIBAL的内含子右侧,再经NotⅠ酶切回收约3443bp的目的片段,插... 根据枯斑三生烟SKP1基因(NtSKP1)的序列,设计一对分别含有特定酶切位点的特异引物,以重组质粒pMD18-SKP1为模板,扩增目的基因(约473bp)片段。将反向目的片段插入中间载体pHANNIBAL的内含子右侧,再经NotⅠ酶切回收约3443bp的目的片段,插入到双元载体质粒pART27中,成功构建了含NtSKP1基因片段反向序列的植物表达载体pART27-skp1a,其转录产物能减弱目的基因的表达。将pART27-skp1a质粒导人根癌农杆菌LBA4404中并转化烟草叶片细胞,经选择分化培养,获得转基因烟草。 展开更多
关键词 NtSKP1基因 反义表达载体的构建 转基因烟草
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人类人工染色体作为转基因载体的应用前景 被引量:2
17
作者 左国伟 吕凤林 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期995-1000,共6页
自1997年首次成功构建人类人工染色体(human artificial chromosome,HAC)以来,对其理论、方法学问题的研究一直就是人们关注的焦点,并引起了科学家们的极大兴趣,目前已能采用不同的方法获得多种类型的HAC。与酵母人工染色体(YAC)、细菌... 自1997年首次成功构建人类人工染色体(human artificial chromosome,HAC)以来,对其理论、方法学问题的研究一直就是人们关注的焦点,并引起了科学家们的极大兴趣,目前已能采用不同的方法获得多种类型的HAC。与酵母人工染色体(YAC)、细菌人工染色体(BAC)等相比,HAC不整合到细胞的基因组中,以一个独立的功能性染色体单位而存在,并在细胞中进行正常的有丝分裂和减数分裂。迄今的研究表明:HAC可以携带大片段基因组DNA,是研究人类基因表达和调控、染色体功能基本单元的重要工具,也是建立HAC动物模型的重要手段。在未来的基因治疗方面有着广阔的应用前景。 展开更多
关键词 人类人工染色体 基因载体 基因表达 基因治疗
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SlMYC2转录因子对番茄伤害诱导抗性相关基因的调控研究 被引量:1
18
作者 杜敏敏 李景富 +1 位作者 王保 李传友 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期31-37,共7页
MYC2作为茉莉酸信号途径中一个重要的转录因子,在调控植物对昆虫取食和腐生型病原菌的抗性反应中发挥重要作用。但迄今为止,在番茄中仍未有关于SlMYC2突变体(或SlMYC2沉默转基因植物)的报道。在改造pCAMBIA1301表达载体的基础上,利用RNA... MYC2作为茉莉酸信号途径中一个重要的转录因子,在调控植物对昆虫取食和腐生型病原菌的抗性反应中发挥重要作用。但迄今为止,在番茄中仍未有关于SlMYC2突变体(或SlMYC2沉默转基因植物)的报道。在改造pCAMBIA1301表达载体的基础上,利用RNAi方法构建SlMYC2沉默的转基因植物。利用荧光定量PCR方法,证明这些转基因植物中SlMYC2表达量显著下降,达到沉默SlMYC2的目的。通过检测SlMYC2-RNAi转基因植物中伤害诱导标记基因的表达情况,发现SlMYC2-RNAi转基因植物中伤害诱导的早期响应基因和晚期响应基因的表达都受到明显抑制,结果表明SlMYC2转录因子在调控番茄伤害诱导相关抗性基因的表达中发挥重要作用。 展开更多
关键词 番茄 SlMYC2沉默转基因植物 载体改造 基因表达
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猪pGH基因真核表达载体的构建及其表达 被引量:2
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作者 吴明明 闫守庆 孙金海 《青岛农业大学学报(自然科学版)》 2010年第4期259-262,共4页
从120日龄的长白猪脑垂体组织中扩增出pGH基因的cDNA,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,通过DNA重组技术将该基因片段重组于pEGFP-N1真核表达载体上,构建pEGFP-N1-pGH重组质粒。通过PCR扩增、酶切电泳分析和测序的方法对重组DNA进... 从120日龄的长白猪脑垂体组织中扩增出pGH基因的cDNA,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,通过DNA重组技术将该基因片段重组于pEGFP-N1真核表达载体上,构建pEGFP-N1-pGH重组质粒。通过PCR扩增、酶切电泳分析和测序的方法对重组DNA进行鉴定,并将其转染PK15细胞,通过荧光素酶活性检测特异性表达强度.结果表明,成功构建了pEGFP-N1-pGH真核表达载体,为转基因猪的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 猪生长激素基因 真核表达 克隆 载体构建 转基因
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以核多角体病毒为载体在家蚕中生产外源蛋白 被引量:9
20
作者 张雨青 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1994年第5期406-410,共5页
以家蚕核多角体病毒(BmNPV)为载体,在家蚕幼虫或家蚕培养细胞系中表达的外源基因越来越多,其表达的产物已涉及到医用药物、医疗诊断、疫苗生产、生物防治等诸多领域,文章就BmNPV的特性及其基因组构造,多角体蛋白基因的... 以家蚕核多角体病毒(BmNPV)为载体,在家蚕幼虫或家蚕培养细胞系中表达的外源基因越来越多,其表达的产物已涉及到医用药物、医疗诊断、疫苗生产、生物防治等诸多领域,文章就BmNPV的特性及其基因组构造,多角体蛋白基因的特性,重组BmNPV的构建及其在家蚕幼虫体内和细胞系中的表达,BmNPV-家蚕表达系统的外源蛋白生产效率及其应用等各个方面作了全面、系统的综述。 展开更多
关键词 家蚕 核型多解体病毒 外源蛋白 基因表达
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