黄芪多糖通过调控miR-20a/TGFBR2分子轴降低结直肠癌HT-29/DDP细胞的顺铂耐药性 被引量：14

1

作者 招志辉 丘振文 招远明 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期417-425,共9页

目的:探讨黄芪多糖(APS)通过调控miR-20a/TGFBR2分子轴对结直肠癌(CRC)顺铂耐药细胞HT-29/DDP增殖、侵袭、凋亡和耐药性的影响及其机制。方法:以人CRC HT-29细胞、HT-29/DDP细胞为亲本和耐药细胞模型,将HT-29/DDP细胞随机分为4组:对照组... 目的:探讨黄芪多糖(APS)通过调控miR-20a/TGFBR2分子轴对结直肠癌(CRC)顺铂耐药细胞HT-29/DDP增殖、侵袭、凋亡和耐药性的影响及其机制。方法:以人CRC HT-29细胞、HT-29/DDP细胞为亲本和耐药细胞模型,将HT-29/DDP细胞随机分为4组:对照组、APS处理组、过表达miR-20a+APS组、沉默TGFBR2+APS组。用不同质量浓度的APS(0、0.5、1.0、1.5和2.0 mg/ml)处理HT-29/DDP细胞后,以qPCR和Wb实验检测细胞中miR-20a和TGFBR2的表达水平;用CCK-8、Transwell和Annexin V-FITC/PI染色流式细胞术检测对HT-29/DDP细胞增殖、侵袭和凋亡的影响;用双荧光素酶报告基因验证miR-20a与TGFBR2的靶向作用关系。构建裸鼠皮下CRC HT-29/DDP细胞移植瘤模型,观察APS对移植瘤生长的影响及其机制。结果:APS显著抑制HT-29/DDP细胞的增殖(P<0.01),且呈剂量依赖性。miR-20a在经APS处理后的HT-29/DDP细胞中低表达(P<0.01)、TGFBR2的表达水平显著上调(P<0.01)。双荧光素酶报告基因证实miR-20a靶向作用TGFBR2并下调其表达水平。体内外实验证实APS通过靶向下调miR-20a对TGFBR2的抑制作用,提高HT-29/DDP细胞的药物敏感性,进而抑制该细胞增殖、侵袭和促进凋亡(均P<0.01);同时发现,该作用与抑制PCNA、Bcl-2蛋白而促进Bax、Caspase-3蛋白表达有关联。结论:APS通过下调miR-20a对TGFBR2表达的抑制作用,从而逆转HT-29/DDP细胞对顺铂的耐药性。 展开更多

关键词 黄芪多糖 结直肠癌 HT-29细胞 HT-29/DDP细胞 顺铂 mir-20a/TGFBR2分子轴

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血浆miR-20a和let-7a在卵巢癌中的表达及其临床意义 被引量：5

2

作者 孟伟伟 贺付成 +1 位作者 吕品 曲蕴慧 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期167-170,共4页

目的检测miR-20a和let-7a在卵巢癌患者血浆中的表达,探讨其临床意义。方法选取卵巢癌患者50例为实验组,另选择同期与其年龄性别相匹配的健康体检者20例为健康对照组,采用实时定量荧光定量酶链反应（qRT-PCR）检测血浆miR-20a和let-7a表... 目的检测miR-20a和let-7a在卵巢癌患者血浆中的表达,探讨其临床意义。方法选取卵巢癌患者50例为实验组,另选择同期与其年龄性别相匹配的健康体检者20例为健康对照组,采用实时定量荧光定量酶链反应（qRT-PCR）检测血浆miR-20a和let-7a表达水平,同时采用电化学发光法测定其血浆中糖类抗原125（CA125）的含量并进行统计分析。结果卵巢癌患者血浆中miR-20a和let-7a的相对表达量分别为（4.02±3.77）、（0.42±0.34）,卵巢癌患者血浆中miR-20a和CA125的表达均高于对照组（P〈0.01）,let-7a表达低于对照组（P〈0.01）。临床病理分期Ⅰ~Ⅱ期和Ⅲ~Ⅳ期卵巢癌患者血浆let-7a相对表达量的中位数分别为0.39、0.21,差异有统计学意义（P〈0.01）,而血浆miR-20a的表达与临床病理分期无关（P〉0.05）,miR-20a和let-7a的相对表达量与年龄、淋巴结转移和组织学分类均无关（P〉0.05）。miR-20a、let-7a和CA125的ROC曲线下面积为0.898（95%CI：0.802~0.957）、0.876（95%CI：0.775~0.942）、0.819（95%CI：0.708~0.900）。结论卵巢癌患者血浆中miR-20a和let-7a均表达异常,提示能够成为辅助诊断卵巢癌的标志物。 展开更多

关键词 卵巢癌 mir-20a let-7a CA125 血浆

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miR-20a海绵载体构建及在白血病细胞株Jurkat中的表达 被引量：4

3

作者 吴顺泉 徐珍珍 +1 位作者 林君 战榕 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期1056-1062,共7页

本研究构建miR-20a基因的miRNA海绵载体,建立Jurkat-S稳定细胞株,为进一步研究的miR-20a功能及应用干扰技术治疗奠定基础。设计、合成1对含有2个重复针对miR-20a成熟序列第9-12碱基错配的序列,并带有酶切位点,退火后连接到pCDNA3.0-L表... 本研究构建miR-20a基因的miRNA海绵载体,建立Jurkat-S稳定细胞株,为进一步研究的miR-20a功能及应用干扰技术治疗奠定基础。设计、合成1对含有2个重复针对miR-20a成熟序列第9-12碱基错配的序列,并带有酶切位点,退火后连接到pCDNA3.0-L表达载体上;载体双酶切后再与退火产物连接,重复4次后进行酶切及荧光素酶活性鉴定;亚克隆到慢病毒表达载体,与psPAX2、PMD2G共转染HEK 293T细胞,包装产生慢病毒颗粒并测定病毒滴度,感染Jurkat细胞,建立稳定细胞株;应用实时PCR和Western blot技术分别检测Jurkat-S稳定细胞中P21及E2F1 mRNA和蛋白的表达,并与对照组进行比较。结果表明,成功构建了针对miR-20a基因的海绵载体,病毒滴度为5×107TU/ml;建立了稳定转染的Jurkat-S细胞株。有效干扰验证显示,miR-20a海绵能明显上调P21及E2F1的mRNA及蛋白表达水平,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:成功构建miR-20a基因的miRNA海绵载体,建立稳定干扰miR-20a表达的Jurkat-S细胞株。 展开更多

关键词 mir-20a miRNA海绵 JURKAT细胞

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雷帕霉素对RAW264.7细胞6种miRNAs表达的影响及miR-20a对ATG16L1的靶向调控作用 被引量：2

4

作者 赵瑾 刘宏鹏 +3 位作者 段相国 张爱君 丁淑琴 徐广贤 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期687-691,共5页

目的:探讨雷帕霉素对miR-17-92簇中的6种miRNAs表达的影响,及miR-20a对ATG16L1基因的靶向调控作用。方法:利用qRT-PCR检测雷帕霉素对RAW264.7细胞miR-17-92簇中的miR-20a等6种miRNAs的表达水平;通过双荧光素酶报告系统、Western blot,验... 目的:探讨雷帕霉素对miR-17-92簇中的6种miRNAs表达的影响,及miR-20a对ATG16L1基因的靶向调控作用。方法:利用qRT-PCR检测雷帕霉素对RAW264.7细胞miR-17-92簇中的miR-20a等6种miRNAs的表达水平;通过双荧光素酶报告系统、Western blot,验证miR-20a对ATG16L1的靶向调控关系。结果:与正常组相比,雷帕霉素组RAW264.7细胞的miR-17、miR-18a、miR-20a表达水平显著上调(P<0.05);3-MA组RAW264.7细胞的miR-20a表达水平显著下调(P<0.05)。双荧光素酶报告系统结果显示,miR-20a可靶向ATG16L1-3'-UTR,抑制其表达;Western blot结果显示,miR-20a能明显抑制ATG16L1蛋白的表达,说明miR-20a可靶向抑制ATG16L1的表达,参与调控细胞自噬过程。结论:miR-20可靶向抑制Atg16L1的表达,参与调控RAW264.7细胞自噬过程。 展开更多

关键词 mir-20a 靶向调控 细胞自噬

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胶质瘤中hsa-miR-20a的表达及对细胞增殖的影响 被引量：1

5

作者 姚兴军 李伟 +6 位作者 王岳华 丁正斌 侯文仲 曾敏敏 邓光策 张金柱 杨洪发 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期198-201,共4页

目的探讨hsa-miR-20在胶质瘤中的表达情况及对胶质瘤细胞增殖的影响。方法应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应方法检测正常脑组织和不同级别脑胶质瘤组织中miR-20a的表达情况;脂质体转染miR-20a模拟物后,通过MTT比色法及流式细胞术观... 目的探讨hsa-miR-20在胶质瘤中的表达情况及对胶质瘤细胞增殖的影响。方法应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应方法检测正常脑组织和不同级别脑胶质瘤组织中miR-20a的表达情况;脂质体转染miR-20a模拟物后,通过MTT比色法及流式细胞术观察胶质瘤U251细胞增殖的变化。结果 (1)与正常脑组织相比,胶质瘤组织miR-20a的表达水平显著增高(P=0.035);(2)胶质瘤组织恶性程度越高,miR-20a表达越高(P<0.001);(3)u251细胞转染miR-20a模拟物后,增殖能力明显加快,S期细胞比例明显增多(P<0.001)。结论 miR-20a能促进胶质瘤细胞的增殖,其高表达在脑胶质瘤的发生、发展中起重要作用。 展开更多

关键词 胶质瘤 hsa-mir-20a 细胞增殖

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miR-20a-5p表达对胃粘膜相关组织淋巴瘤增殖的影响及其机制研究 被引量：1

6

作者 农卫霞 王奎 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2021年第1期102-108,共7页

目的探讨miR-20a-5p的表达对胃粘膜相关组织(MALT)淋巴瘤的增殖影响及其相关分子机制。方法收集18例人胃MALT淋巴瘤组织及邻近正常胃粘膜组织。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测组织中miR-20a-5p的相对表达;应用miR-20a-5p mi... 目的探讨miR-20a-5p的表达对胃粘膜相关组织(MALT)淋巴瘤的增殖影响及其相关分子机制。方法收集18例人胃MALT淋巴瘤组织及邻近正常胃粘膜组织。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测组织中miR-20a-5p的相对表达;应用miR-20a-5p mimic和miR-20a-5p inhibitor分别转染Raji淋巴瘤细胞,以细胞增殖活性(CCK-8)实验分析miR-20a-5p对细胞的增殖的影响;通过计算机靶基因预测软件Target Scan、双荧光素酶报告基因实验及Western blot实验确定miR-20a-5p作用的可能靶基因;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测组织中runt相关转录因子3(RUNX3)的相对表达量。结果与邻近正常粘膜组织相比,胃MALT淋巴瘤组织中miR-20a-5p的表达异常增高(P<0.05)。CCK-8实验显示,与对照组相比,miR-20a-5p mimic转染Raji淋巴瘤细胞的吸光度显著升高(P<0.05),miR-20a-5p inhibitor组吸光度显著降低(P<0.05)。生物信息学软件预测RUNX3为miR-20a-5p作用的靶基因。双荧光素酶报告实验证明miR-20a-5p与RUNX3的3’UTR区特异性结合。Western Blot实验结果显示miR-20a-5p mimic组RUNX3蛋白表达水平明显低于对照组(P<0.05),miR-20a-5p inhibitor组RUNX3蛋白表达水平显著高于对照组(P<0.05)。MALT淋巴瘤患者标本中的RUNX3 mRNA水平均显著低于邻近胃粘膜组织(P<0.05)。人MALT淋巴瘤组织中miR-20a-5p表达与RUNX3 mRNA表达呈负相关关系(P<0.05)。结论 miR-20a-5p可促进Raji淋巴瘤细胞的增殖,其机制与下调RUNX3的表达有关。miR-20-5p在胃MALT呈低表达,与RUNX3表达呈负相关关系,miR-20-5p为MALT淋巴瘤的临床治疗提供新靶标。 展开更多

关键词 粘膜相关组织淋巴瘤 mir-20a-5p RAJI细胞 增殖 RUNT相关转录因子3

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miRNA Sponge介导的miR-17和miR-20a基因沉默的抗白血病作用机制 被引量：2

7

作者 牛文艳 吴顺泉 +2 位作者 徐珍珍 林君 战榕 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期932-937,共6页

本研究旨在检测急性白血病患者中miR-17和miR-20a前体的表达水平,并探讨miRNA Sponge介导的miR-17和miR-20a沉默的抗白血病作用机制。采用荧光实时定量PCR方法检测初治急性白血病患者及8种白血病细胞株中miR-17和miR-20a前体的表达水平... 本研究旨在检测急性白血病患者中miR-17和miR-20a前体的表达水平,并探讨miRNA Sponge介导的miR-17和miR-20a沉默的抗白血病作用机制。采用荧光实时定量PCR方法检测初治急性白血病患者及8种白血病细胞株中miR-17和miR-20a前体的表达水平,分析其在各型白血病中的表达情况。利用前期构建的针对miR-17和miR-20a基因的miRNA Sponge慢病毒表达载体,感染高表达miR-17和miR-20a的Jurkat细胞株;用CCK-8方法及流式细胞术分别检测miR-17和miR-20a沉默对Jurkat细胞增殖能力及细胞周期的影响。结果表明:初治急性白血病患者中miR-17和miR-20a前体的表达明显高于正常对照(P<0.05);且与急性髓系白血病患者相比,急性淋巴细胞白血病患者中的表达量更高;然而二者表达量与患者外周血高白细胞计数无明显相关性(P>0.05)。miR-17和miR-20a沉默能抑制Jurkat细胞的增殖,使细胞周期阻滞于G1—S期,同时促进细胞的凋亡。结论:急性白血病患者中miR-17和miR-20a呈过表达,可能参与白血病的发生、发展;高表达的miR-17和miR-20a可通过在转录后抑制P21和E2F1表达,从而促进细胞增殖及细胞周期G1—S期转换,抑制细胞凋亡。 展开更多

关键词 MIRNA SPONGE mir-17 mir-20a 基因沉默 抗白血病机制

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miR-20a-5p通过下调HOXB13基因表达抑制肺癌细胞系A549增殖 被引量：2

8

作者 刘海军 王杰 +2 位作者 申珈馨 吴旭 李玉磊 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期568-574,共7页

目的探讨miR-20a-5p调控HOXB13基因表达抑制肺癌细胞系A549增殖的分子机制。方法转染HOXB13过表达质粒与HOXB13 siRNA到肺癌细胞系A549,通过qRT-PCR及Western blot实验检测HOXB13 mRNA及蛋白的表达水平;CCK-8及EdU实验检测HOXB13对肺癌... 目的探讨miR-20a-5p调控HOXB13基因表达抑制肺癌细胞系A549增殖的分子机制。方法转染HOXB13过表达质粒与HOXB13 siRNA到肺癌细胞系A549,通过qRT-PCR及Western blot实验检测HOXB13 mRNA及蛋白的表达水平;CCK-8及EdU实验检测HOXB13对肺癌细胞系A549细胞增殖的影响;利用生物信息学分析筛选HOXB13可能结合的miRNA;通过qRT-PCR检测转染miR-20a-5p mimic与miR-20a-5p inhibitor到肺癌细胞系后miR-20a-5p的表达水平;Western blot实验检测HOXB13在肺癌细胞系中的表达情况;CCK-8及EdU实验检测miR-20a-5p肺癌细胞系A549细胞增殖的影响;在A549细胞中共转染miR-20a-5p mimic及HOXB13过表达质粒,CCK-8及EdU实验检测A549细胞增殖能力。结果HOXB13促进了A549细胞的增殖(P<0.05);生物信息学筛选出HOXB13可能结合的miRNA为miR-20a-5p;在肺癌细胞系中过表达miR-20a-5p后,HOXB13蛋白表达量降低(P<0.05);而干扰miR-20a-5p表达后,HOXB13蛋白的表达量升高(P<0.05);细胞增殖实验结果显示,miR-20a-5p与HOXB13对细胞增殖的影响相反,miR-20a-5p及HOXB13同时过表达,细胞增殖情况介于单独过表达miR-20a-5p及单独过表达HOXB13组之间(P<0.05)。结论miR-20a-5p调控HOXB13基因表达抑制肺癌细胞系A549的增殖。 展开更多

关键词 mir-20a-5p 肺癌 细胞增殖 A549 HOXB13

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LncRNA HOTAIR通过靶基因miR-20a-5p调控淋巴瘤细胞增殖、侵袭、迁移的分子机制研究 被引量：1

9

作者 雷阿明 祝平安 +3 位作者 符丽梅 廖欣 阿孜古丽 朱平 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期89-95,共7页

目的:探讨lnc RNA HOTAIR通过靶基因mi R-20a-5p对淋巴瘤细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其分子机制研究。方法:合成HOTAIR si RNA和si RNA NC质粒后,分别转染淋巴瘤Raji细胞,RT-q PCR检测HOTAIR的m RNA表达,分别通过CCK-8实验、Transwel... 目的:探讨lnc RNA HOTAIR通过靶基因mi R-20a-5p对淋巴瘤细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其分子机制研究。方法:合成HOTAIR si RNA和si RNA NC质粒后,分别转染淋巴瘤Raji细胞,RT-q PCR检测HOTAIR的m RNA表达,分别通过CCK-8实验、Transwell和细胞划痕愈合实验检测Raji细胞的增殖、侵袭和迁移情况。mi Rcode软件预测lnc RNA HOTAIR的靶基因,并通过双荧光素酶实验分析HOTAIR与靶基因的关系。合成mi R-20a-5p inhibitor和inhibitor NC后,瞬时转染Raji细胞,RT-q PCR检测mi R-20a-5p表达,分析下调mi R-20a-5p对Raji细胞的增殖、侵袭和迁移的影响。用lnc RNA HOTAIR过表达质粒和mi R-20a-5p模拟物同时转染Raji细胞,分析Raji细胞的增殖、侵袭和迁移能力。过表达或下调mi R-20a-5p后,分析JAK/STAT3信号通路相关蛋白的表达。结果:转染HOTAIR si RNA后Raji细胞中HOTAIR表达降低(P<0.01),转染mi R-20a-5p inhibitor后Raji细胞中mi R-20a-5p表达降低(P<0.01);HOTAIR与mi R-20a-5p存在靶向及负调控关系(r=-0.826);沉默HOTAIR促进mi R-20a-5p表达,抑制Raji细胞增殖、侵袭和迁移;下调mi R-20a-5p表达促进Raji细胞增殖、侵袭和迁移。上调mi R-20a-5p可逆转过表达HOTAIR对Raji细胞增殖、侵袭和迁移的促进作用。下调mi R-20a-5p表达激活了细胞内JAK/STAT3信号通路。结论:HOTAIR通过靶向mi R-20a-5p影响淋巴瘤细胞的增殖、侵袭和迁移,其作用机制可能与JAK/STAT3信号通路激活有关。 展开更多

关键词 HOTAIR mir-20a-5p 淋巴瘤 增殖 侵袭 迁移

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miR-20a-5p调控NFKBIB对人肾母细胞瘤细胞WiT49裸鼠移植瘤增殖的影响 被引量：1

10

作者 王雅琦 李万富 +4 位作者 阿依古再丽·麦麦江 艾尼娃·克然木 樊珈榕 梁鹏 娜菲沙·沙木西丁 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第4期490-495,共6页

目的探讨miR-20a-5p对人肾母细胞瘤细胞系WiT49裸鼠移植瘤的影响及作用机制。方法从GEO数据库下载基因表达芯片,应用GEO2R获得差异基因miR-20a-5p;通过cBioPortal数据库获得与miR-20a-5p表达具有正相关关系的NF-κB基因;通过targetscan... 目的探讨miR-20a-5p对人肾母细胞瘤细胞系WiT49裸鼠移植瘤的影响及作用机制。方法从GEO数据库下载基因表达芯片,应用GEO2R获得差异基因miR-20a-5p;通过cBioPortal数据库获得与miR-20a-5p表达具有正相关关系的NF-κB基因;通过targetscan数据库预测miR-20a-5p靶基因可能为NF-κB转录因子抑制蛋白家族的NFKBIB,并使用双荧光素酶实验进行验证;体外培养肾母细胞瘤细胞系WiT49,采用miR-20a-5p模拟物及其抑制基因构建慢病毒载体分别转染至WiT49细胞;将12只裸鼠随机分为3组,WiT49模型组、WiT49-miR-20a-5p过表达组、WiT49-miR-20a-5p敲低组;裸鼠成瘤实验检测各组瘤块质量及体积;应用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测各组瘤块中miR-20a-5p、NFKBIB及NF-κB表达情况;通过CCK-8细胞增殖实验验证各组瘤细胞增殖情况。结果miR-20a-5p在肾母细胞瘤中高表达,且与NF-κB表达呈正相关,miR-20a-5p与NFKBIB具有相互结合位点且存在结合作用;裸鼠成瘤实验中,WiT49-miR-20a-5p过表达组瘤块体积及质量较WiT49模型组均明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);qRT-PCR实验中,WiT49-miR-20a-5p过表达组中miR-20a-5p及NF-κB表达均高于WiT49模型组,WiT49-miR-20a-5p过表达组中NFKBIB表达低于WiT49模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。CCK-8细胞增殖实验中WiT49-miR-20a-5p过表达组细胞24及48 h吸光度高于WiT49模型组,WiT49-miR-20a-5p敲低组细胞24、48及72 h吸光度均低于WiT49模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论miR-20a-5p可能是通过调控NFKBIB激活NF-κB通路促进人肾母细胞瘤细胞WiT49裸鼠移植瘤生长。 展开更多

关键词 肾母细胞瘤 mir-20a-5p 裸鼠 NFKBIB

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红景天苷调控miR-20a-5p/TIMP2轴对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖和迁移的影响 被引量：3

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作者 朱光昭 方璐 +1 位作者 严婕 李琴 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第5期803-809,共7页

目的探讨红景天苷调控miR-20a-5p/金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP2)轴对人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(HFLS-RA)功能和活化的影响。方法以HFLS-RA细胞为研究对象,将HFLS-RA细胞分为肿瘤坏死因子-α(TNF-α)组、对照组、红景天苷组、miR-... 目的探讨红景天苷调控miR-20a-5p/金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP2)轴对人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(HFLS-RA)功能和活化的影响。方法以HFLS-RA细胞为研究对象,将HFLS-RA细胞分为肿瘤坏死因子-α(TNF-α)组、对照组、红景天苷组、miR-20a-5p抑制物阴性对照(inhibitor NC)组、miR-20a-5p抑制物组、红景天苷+miR-20a-5p模拟物阴性对照(mimic NC)组、红景天苷+miR-20a-5p模拟物组。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测HFLS-RA细胞中miR-20a-5p表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HFLS-RA细胞上清液中白细胞介素(IL)-1β、IL-6水平;细胞计数试剂盒8(CCK-8)法、5-乙炔基-2’-脱氧尿苷(EdU)染色检测HFLS-RA细胞增殖;划痕实验检测HFLS-RA细胞迁移;免疫印迹实验(Western blot)检测HFLS-RA细胞中TIMP2、细胞周期素D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶(MMP)-9蛋白表达;双荧光素酶验证miR-20a-5p与TIMP2的关系。结果与对照组比较,TNF-α组miR-20a-5p表达、IL-1β、IL-6水平、吸光度(OD_(450))值、EdU阳性细胞率、划痕愈合率及CyclinD1、MMP-9蛋白上调,TIMP2蛋白下调(P<0.05);与TNF-α组相比,红景天苷组miR-20a-5p表达、IL-1β、IL-6水平、OD_(450)值、EdU阳性细胞率、划痕愈合率及CyclinD1、MMP-9蛋白下调,TIMP2蛋白上调(P<0.05);与inhibitor NC组、TNF-α组相比比较,miR-20a-5p抑制物组miR-20a-5p表达、IL-1β、IL-6水平、OD_(450)值、EdU阳性细胞率、划痕愈合率及CyclinD1、MMP-9蛋白下调,TIMP2蛋白上调(P<0.05);与红景天苷+mimic NC组、红景天苷组相比,红景天苷+miR-20a-5p模拟物组miR-20a-5p表达、IL-1β、IL-6水平、OD_(450)值、EdU阳性细胞率、划痕愈合率及CyclinD1、MMP-9蛋白表达升高,TIMP2蛋白表达降低(P<0.05)。miR-20a-5p与TIMP2存在靶向调控关系。结论红景天苷可能通过调控miR-20a-5p/TIMP2抑制TNF-α诱导的HFLS-RA细胞增殖、迁移及炎症反应。 展开更多

关键词 红景天苷 mir-20a-5p 金属蛋白酶组织抑制剂-2 类风湿关节炎 成纤维样滑膜细胞 增殖 迁移

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血清miR-191-5p和miR-20a-5p联合作为脑卒中后认知功能障碍诊断标志物的研究 被引量：15

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作者 王振杰 谷诗浓 +2 位作者 刘毓佳 周凡萍 黄赛娥 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第5期593-596,601,共5页

目的观察卒中后认知障碍患者血清中miR-191-5p和miR-20a-5p变化,以探讨两者联合是否能够作为脑卒中后认知障碍的诊断标志物。方法收集36例脑卒中后认知障碍(post-stroke cognitive impairment,PSCI)患者、36例脑卒中后认知正常(post-str... 目的观察卒中后认知障碍患者血清中miR-191-5p和miR-20a-5p变化,以探讨两者联合是否能够作为脑卒中后认知障碍的诊断标志物。方法收集36例脑卒中后认知障碍(post-stroke cognitive impairment,PSCI)患者、36例脑卒中后认知正常(post-stroke cognitive normal,PSCN)患者和37例年龄匹配对照组(age-matched control,AMC)的样本。使用ROC曲线和AUC分析比较miR-191-5p和miR-20a-5p及其联合对PSCI的诊断能力。结果与PSCN和AMC相比,PSCI患者血清中,miR-191-5p和miR-20a-5p均升高,ROC曲线显示miR-191-5p的AUC(95%CI)为0.647(P<0.05),灵敏度为66.7%,特异度为55.6%;miR-20a-5p的AUC(95%CI)为0.759(P<0.05),灵敏度为77.8%,特异度为61.1%;两者联合的AUC(95%CI)为0.861(P<0.05),灵敏度为88.9%,特异度为72.2%。而且miR-191-5p和miR-20a-5p均与PSCI患者的MoCA评分相关,miR-191-5p(r=-0.488,P<0.01),miR-20a-5p(r=-0.624,P<0.01)。结论血清miR-191-5p和miR-20a-5p表达与卒中后认知功能存在显著相关性,提示miR-191-5p联合miR-20a-5p可能是PSCI的诊断标志物。 展开更多

关键词 卒中后认知障碍 血清 mir-191-5p mir-20a-5p

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贝伐珠单抗辅助PD-1抑制剂治疗胃癌对血清miR-20a-5p和miR-515-3p的影响研究 被引量：6

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作者 汪斐 刘佩 胡楠 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期493-500,共8页

背景与目的:二线化疗方案治疗胃癌疗效欠佳,贝伐珠单抗属于抗血管生成分子靶向抗癌药物,信迪利单抗是一种国产的程序性死亡蛋白-1(programmed death-1,PD-1)抑制剂,两者结合是临床治疗胃癌的新方向。本研究旨在探究贝伐珠单抗辅助PD-1... 背景与目的:二线化疗方案治疗胃癌疗效欠佳,贝伐珠单抗属于抗血管生成分子靶向抗癌药物,信迪利单抗是一种国产的程序性死亡蛋白-1(programmed death-1,PD-1)抑制剂,两者结合是临床治疗胃癌的新方向。本研究旨在探究贝伐珠单抗辅助PD-1抑制剂治疗胃癌对血清miR-20a-5p和miR-515-3p的影响。方法:选取2019年1月—2021年7月于南京医科大学第四附属医院就诊的84例胃癌患者进行回顾性研究,根据治疗方案的不同将其分为观察组和对照组(每组各42例),对照组给予二线化疗方案治疗,观察组在对照组基础上给予贝伐珠单抗联合PD-1抑制剂(信迪利单抗)治疗,比较两组的客观缓解率(objective response rate,ORR)、疾病控制率(disease control rate,DCR)、血清肿瘤标志物、免疫功能指标、血清miR-20a-5p、miR-515-3p及不良反应总发生率。本研究已通过南京医科大学第四附属医院伦理委员会的伦理审批(批件号:20230531--K061)。结果:观察组的ORR(69.05%)和DCR(85.71%)均高于对照组(40.48%、64.29%)。观察组治疗后的血清糖类抗原12-5(carbohydrate antigen 12-5,CA12-5)、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)及细胞角蛋白19片段抗原21-1(cytokerantin-19-fragment antigen 21-1,CYFRA21-1)水平均低于对照组。观察组治疗后的CD4^(+)T淋巴细胞、CD4^(+)/CD8^(+)T淋巴细胞比值均高于对照组,CD8^(+)T淋巴细胞低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组治疗后的血清miR-20a-5p、miR-515-3p水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组(28.57%)的不良反应总发生率与对照组(38.10%)相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:贝伐珠单抗辅助信迪利单抗可有效地提高胃癌治疗效率,改善免疫功能,降低血清miR-20a-5p、miR-515-3p及肿瘤标志物表达量,且不会增加不良反应,效果显著。 展开更多

关键词 贝伐珠单抗 程序性死亡蛋白-1抑制剂 胃癌 mir-20a-5p mir-515-3p

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miR-20a对人炎症牙周膜干细胞成骨分化能力的影响 被引量：8

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作者 杨倩娟 刘文佳 +4 位作者 常文悦 郭晓睿 王红 陈琦 陆群 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期186-189,共4页

目的:研究miR-20a对人炎症牙周膜干细胞成骨分化能力的影响。方法:分离培养人牙周膜干细胞后用qRT-PCR检测miR-20a的表达,并且在瞬时转染miR-20a mimics和inhibitor后成骨诱导,用茜素红染色,Western Blot和PCR的方法检测成骨能力的改变... 目的:研究miR-20a对人炎症牙周膜干细胞成骨分化能力的影响。方法:分离培养人牙周膜干细胞后用qRT-PCR检测miR-20a的表达,并且在瞬时转染miR-20a mimics和inhibitor后成骨诱导,用茜素红染色,Western Blot和PCR的方法检测成骨能力的改变。结果:人炎症牙周膜干细胞中miR-20a表达降低,转染mimics后成骨能力升高,转染inhibitor后成骨能力降低。结论:miR-20a可以促进人炎症牙周膜干细胞成骨分化。 展开更多

关键词 mir-20a 牙周膜干细胞(PDLSCs) 成骨分化

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miR-20a通过靶向NR4A3促进前列腺癌细胞增殖 被引量：3

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作者 杨伟玉 刘驰 +2 位作者 谢辉 林平 于晓光 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期1093-1099,共7页

前列腺癌是男性患者中常见的恶性肿瘤,探讨前列腺癌的发病机制和寻找合适的治疗靶标具有重要的临床意义。来源于类固醇核激素受体超家族NR4A3在多种肿瘤的恶性进展中发挥重要作用,但其在前列腺癌中的作用尚未阐明。本课题拟以前列腺癌... 前列腺癌是男性患者中常见的恶性肿瘤,探讨前列腺癌的发病机制和寻找合适的治疗靶标具有重要的临床意义。来源于类固醇核激素受体超家族NR4A3在多种肿瘤的恶性进展中发挥重要作用,但其在前列腺癌中的作用尚未阐明。本课题拟以前列腺癌细胞为研究对象,揭示NR4A3在前列腺癌中的作用;在此基础上,寻找靶向NR4A3的miRNA,为前列腺癌的诊断和治疗提供新靶点。GEPIA网站预测显示,NR4A3在前列腺癌组织中呈低表达。qRT-PCR检测证实,NR4A3在前列腺癌细胞中也呈低表达(P<0.01);CCK8和克隆形成的结果显示,过表达NR4A3可使前列腺癌细胞活力显著下降(P<0.01),集落数量和大小显著减少。生物信息学网站预测,NR4A3可能是miR-20a靶基因。通过qRT-PCR检测发现,miR-20a在前列腺癌细胞中呈高表达(P<0.01),双荧光素酶报告基因结果证实,miR-20a能够与NR4A3的3’-UTR的2个位点靶向结合(P<0.05,P<0.001),且Western印迹结果显示,miR-20a可抑制NR4A3的表达;进一步CCK8检测发现,随着时间的延长miR-20a inhibitor能够使前列腺癌细胞活力显著下降(P<0.05),miR-20a mimic则得到与之相反的结果(P<0.05,P<0.01);而当共转染miR-20a mimic和pcDNA3.1-NR4A3重组质粒时,通过CCK8和克隆形成实验发现,上调NR4A3的表达可部分抵消miR-20a mimic对PC3细胞活力(P<0.05),集落数量和大小的促进作用。综上所述,miR-20a通过靶向NR4A3促进前列腺癌细胞增殖。 展开更多

关键词 前列腺癌 mir-20a 核受体亚家族4 A组成员3 细胞增殖

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基于miR-20b-5p/TXNIP通路探讨羟基喜树碱脂质体对梗阻性肾病大鼠肾脏线粒体动力学的影响

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作者 李思阳 李更东 闫宇辉 《天然产物研究与开发》 北大核心 2025年第3期521-528,共8页

基于miR-20b-5p/硫氧还蛋白互作蛋白(thioredoxin interacting protein,TXNIP)通路探讨羟基喜树碱脂质体(hydroxycamptothecin liposomes,HCPTL)对梗阻性肾病大鼠肾脏线粒体动力学的影响。单侧输尿管结扎(unilateral ureteral ligation,... 基于miR-20b-5p/硫氧还蛋白互作蛋白(thioredoxin interacting protein,TXNIP)通路探讨羟基喜树碱脂质体(hydroxycamptothecin liposomes,HCPTL)对梗阻性肾病大鼠肾脏线粒体动力学的影响。单侧输尿管结扎(unilateral ureteral ligation,UUO)法成功构建梗阻性肾病大鼠模型后分别用羟基喜树碱(hydroxycamptothecin,HCPT)、HCPTL、HCPTL+miR-20b-5p antagomir(miR-Ant)干预,检测血清中血肌酐(serum creatinine,SCR)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)水平;观察肾组织纤维化及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平变化;评估肾组织中线粒体结构、线粒体膜电位、线粒体融合蛋白2(mitochondrial fusion protein 2,MFN2)、动力相关蛋白1(dynamic related protein 1,DRP1)平均光密度值、miR-20b-5p表达及TXNIP、MFN2、DRP1蛋白变化。结果显示,HCPT、HCPTL干预后,UUO大鼠呈蓝染的纤维化区域减少,线粒体基质肿胀、嵴破裂等现象有所缓解,血清中SCR、BUN降低,肾组织中SOD水平、线粒体膜电位、MFN2平均光密度值、miR-20b-5p表达及MFN2蛋白表达升高,肾组织中MDA水平、DRP1平均光密度值、TXNIP、DRP1蛋白表达降低,且HCPTL干预后的对应变化趋势更明显(P<0.05);miR-Ant减弱了HCPTL对梗阻性肾病大鼠肾脏线粒体动力学的改善作用。以上结果表明HCPTL可能通过调控miR-20b-5p/TXNIP通路改善肾脏线粒体动力学,增强抗氧化应激能力,进而抑制梗阻性肾病大鼠肾损伤。 展开更多

关键词 羟基喜树碱脂质体 梗阻性肾病 mir-20b-5p 线粒体动力学 硫氧还蛋白互作蛋白

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miR-20b抑制哮喘小鼠的气道炎症 被引量：3

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作者 马华 罗玉岚 +2 位作者 郭术俊 申林 宋传旺 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1463-1466,共4页

目的探讨miR-20b对哮喘小鼠气道炎症的影响。方法 BALB/c小鼠随机分为正常对照组、哮喘组、哮喘+miR-20b模拟物处理组、哮喘+miR-20b模拟物对照处理组。卵清白蛋白(OVA)致敏和激发构建哮喘模型小鼠,miR-20b模拟物及其对照采用鼻滴的方... 目的探讨miR-20b对哮喘小鼠气道炎症的影响。方法 BALB/c小鼠随机分为正常对照组、哮喘组、哮喘+miR-20b模拟物处理组、哮喘+miR-20b模拟物对照处理组。卵清白蛋白(OVA)致敏和激发构建哮喘模型小鼠,miR-20b模拟物及其对照采用鼻滴的方式给药干预。实验流程的第49天检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中的细胞总数和分类计数,肺组织进行HE染色观察病理学变化,ELISA检测BALF中血管内皮生长因子(VEGF)的浓度。结果哮喘小鼠经miR-20b模拟物处理后,BALF中细胞总数及中性粒细胞、嗜酸性粒细胞的分类计数明显降低(P<0.01),并且气道黏膜增厚减轻,气道腔内粘液分泌及支气管周围炎性细胞的浸润减少。与哮喘组BALF中VEGF的含量28.55±3.42 pg/m L相比,哮喘+miR-20b模拟物处理组的含量18.19±3.67 pg/m L明显降低(P<0.01)。结论 miR-20b对哮喘小鼠气道炎症产生抑制作用,这一效应可能是通过降低VEGF的表达来介导。 展开更多

关键词 mir-20b 哮喘 气道炎症 血管内皮生长因子

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靶向抑制miR-20b降低肝癌HuH-7细胞增殖、迁移和侵袭能力 被引量：1

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作者 王敬红 崔永兴 +1 位作者 彭鹏 于锦萍 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1162-1167,共6页

目的探讨miR-20b对肝癌HuH-7细胞增殖、迁移、侵袭的影响和机制。方法在肝癌HuH-7细胞中转染miR-20b inhibitor,分别采用Real-time PCR评估下调效果,MTT法评估细胞增殖变化,Transwell小室评估细胞侵袭能力,Western blot法评估细胞中MMP-... 目的探讨miR-20b对肝癌HuH-7细胞增殖、迁移、侵袭的影响和机制。方法在肝癌HuH-7细胞中转染miR-20b inhibitor,分别采用Real-time PCR评估下调效果,MTT法评估细胞增殖变化,Transwell小室评估细胞侵袭能力,Western blot法评估细胞中MMP-2、E-cadherin、MMP-9和vimentin蛋白水平。应用生物信息学软件预测TCF21可能是miR-20b的靶基因,以双荧光素酶报告系统鉴定靶向关系。在肝癌HuH-7细胞中共转染TCF21 siRNA和miR-20b inhibitor,评估细胞增殖、侵袭、迁移与细胞中MMP-2、E-cadherin、MMP-9、vimentin蛋白的表达水平。结果转染miR-20b inhibitor后HuH-7细胞中miR-20b表达水平降低[(1.02±0.11)vs(0.43±0.05)];细胞增殖[(0.57±0.06)vs(0.34±0.02)]、迁移[(125.64±13.65)vs(92.14±6.94)]和侵袭[(88.15±9.32)vs(63.48±6.2)]能力下降;MMP-2、vimentin、MMP-9蛋白表达水平降低;E-cadherin蛋白表达水平升高。miR-20b靶向负调控TCF21表达。共转染TCF21 siRNA和miR-20b inhibitor可以显著提高HuH-7细胞增殖[(0.40±0.05)vs(0.56±0.06)]、迁移[(89.62±9.25)vs(115.26±10.84)]和侵袭[(68.25±4.15)vs (95.21±6.51)]能力;提高细胞中MMP-2、vimentin、MMP-9蛋白表达水平,降低E-cadherin蛋白水平;与共转染siRNA control和miR-20b inhibitor的细胞比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论下调miR-20b表达,可通过靶向TCF21抑制肝癌HuH-7细胞的增殖、迁移、侵袭和上皮-间质转化。 展开更多

关键词 肝肿瘤 mir-20b TCF21 侵袭

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MiR-20b直接靶向3’-UTR调控HIF-1α表达 被引量：1

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作者 王贺龙 罗玉岚 +4 位作者 陶象男 汪忆梦 何晶 郭术俊 宋传旺 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期657-661,共5页

目的:探讨微小RNA-20b(micro RNA-20b/miR-20b)是否直接靶向低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)信使RNA的3’-非编码区(3’-untranslated region,3’-UTR)调控其基因表达。方法:采用Target Scan和miRanda算法预测H... 目的:探讨微小RNA-20b(micro RNA-20b/miR-20b)是否直接靶向低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)信使RNA的3’-非编码区(3’-untranslated region,3’-UTR)调控其基因表达。方法:采用Target Scan和miRanda算法预测HIF-1α3’-UTR区是否存在miR-20b的配对序列;构建并鉴定表达HIF-1α3’-UTR的双荧光素酶基因报告系统(pmiRRB-ReportTM-HIF-1α3’-UTR),将重组质粒(recombinant plasmid,RP)与mimics-miR-20b(M)或NC-miR-20b(N)共转染He La细胞,本研究共分为RP、RP+M、RP+N、P、P+M和P+N六组,24 h后检测各组双荧光素酶活性的比值。结果:HIF-1α3’-UTR区存在miR-20b配对区域;成功构建了含HIF-1α3’-UTR序列的双荧光素酶基因报告载体;重组质粒与mimics-miR-20b共转染的He La细胞荧光素酶活性明显低于其他对照组(P=0.022)。结论:miR-20b可以直接靶向结合HIF-1α3’-UTR区负向调控其表达。 展开更多

关键词 低氧诱导因子 3’-非编码区 mir-20b 双荧光素酶基因报告系统

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miR-20b直接靶向3′-UTR负性调节VEGF的表达 被引量：4

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作者 陶象男 汪忆梦 宋传旺 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期22-26,共5页

目的探讨miR-20b是否直接靶向VEGF 3′-非编码区(3′-UTR)而调控其表达。方法采用miRanda软件预测VEGF 3′-UTR是否存在miR-20b的结合位点;使用PCR方法扩增RAW264.7细胞VEGF基因3′-UTR序列,经双酶切后克隆到pmiR-RB-Report^(TM)质粒海... 目的探讨miR-20b是否直接靶向VEGF 3′-非编码区(3′-UTR)而调控其表达。方法采用miRanda软件预测VEGF 3′-UTR是否存在miR-20b的结合位点;使用PCR方法扩增RAW264.7细胞VEGF基因3′-UTR序列,经双酶切后克隆到pmiR-RB-Report^(TM)质粒海肾荧光素酶的下游,得到pmiR-RB-Report TM-VEGF 3′-UTR双荧光素酶重组质粒,使用电泳法和测序法进行验证;将重组质粒或空质粒与miR-20b模拟物或其对照共转染HeLa细胞,24h后检测相应荧光素酶活性。结果 VEGF 3′-UTR存在miR-20b的结合位点;获得了含VEGF 3′-UTR的双荧光素酶报告载体;重组质粒与miR-20b模拟物共转染组HeLa细胞的荧光素酶活性明显低于空质粒转染组(P<0.05)。结论成功构建小鼠VEGF基因3′-UTR双荧光素酶报告载体,miR-20b可以直接靶向VEGF 3′-UTR而负性调控其表达。 展开更多

关键词 血管内皮生长因子 3′-非编码区 mir-20b 双荧光素酶报告载体

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