MAR结合蛋白及其调控功能 被引量：4

1

作者 王天云 张俊河 +1 位作者 张煜 王俐 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期302-306,共5页

核基质结合区(MAR)是真核生物中能与核基质结合的DNA片段.MAR通过与特异的MAR结合蛋白相互作用,在提高转基因表达水平、降低转基因个体之间表达水平差异以及染色体包装等方面具有重要的调控作用.目前,已在不同物种分离MAR结合蛋白,分别... 核基质结合区(MAR)是真核生物中能与核基质结合的DNA片段.MAR通过与特异的MAR结合蛋白相互作用,在提高转基因表达水平、降低转基因个体之间表达水平差异以及染色体包装等方面具有重要的调控作用.目前,已在不同物种分离MAR结合蛋白,分别为核基质成分、核仁蛋白、组蛋白、叶绿体蛋白等,它们在调控基因表达、细胞发育、细胞凋亡、染色体包装等方面具有重要的功能.本文综述了目前分离出的MAR结合蛋白及其功能,并对MAR-结合蛋白研究作一展望. 展开更多

关键词 核基质结合区 核基质 mar结合蛋白 调控功能

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核骨架基质结合区(S/MAR)提高逆转录病毒载体介导egfp在NIH3T3细胞中的表达 被引量：10

2

作者 戴冰冰 梅文瀚 +2 位作者 王家敏 钱关祥 卢健 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期24-30,共7页

为减轻逆转录病毒介导的外源基因的沉默 ,进一步提高逆转录病毒MFG载体介导的转移基因的表达 ,将人 β INF基因上游 80 0bp的核骨架基质结合区 (S MAR)分别反向和正向克隆至MFG载体 3′LTR上游 ,以egfp为报告基因观察S MAR对egfp基因表... 为减轻逆转录病毒介导的外源基因的沉默 ,进一步提高逆转录病毒MFG载体介导的转移基因的表达 ,将人 β INF基因上游 80 0bp的核骨架基质结合区 (S MAR)分别反向和正向克隆至MFG载体 3′LTR上游 ,以egfp为报告基因观察S MAR对egfp基因表达水平以及对病毒滴度的影响 .结果显示 :反向和正向的S MAR在瞬时表达的情况都不能提高egfp的表达 ,但在稳定整合的情况下反向S MAR可明显提高egfp在NIH3T3细胞内的表达 ,而正向的S MAR作用不明显 ,另外反向S MAR可明显提高MFG逆转录病毒载体的滴度约 5倍 ;因此改造后的MFG逆转录病毒载体将能更好地用来介导外源治疗基因的表达 .同时还观察到 ,同一个载体骨架在稳定表达的情况下 ,磷酸钙介导较逆转录病毒载体介导的表达水平高 . 展开更多

关键词 核骨架基质结合区 逆转录病毒载体 基因沉默

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MAR结合蛋白 被引量：3

3

作者 周丛照 钱信果 李振刚 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1998年第4期307-310,共4页

ＭＡＲ（ｍａｔｒｉｘａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｒｅｇｉｏｎｓ）是真核基因组的ＤＮＡ序列中可特异性地与核基质紧密结合的区域．ＭＡＲ通过特异性地与一些ＭＡＲ结合蛋白相互作用，在真核基因的复制和表达调控以及染色体的包装构建等方... ＭＡＲ（ｍａｔｒｉｘａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｒｅｇｉｏｎｓ）是真核基因组的ＤＮＡ序列中可特异性地与核基质紧密结合的区域．ＭＡＲ通过特异性地与一些ＭＡＲ结合蛋白相互作用，在真核基因的复制和表达调控以及染色体的包装构建等方面发挥重要作用．ＭＡＲ结合蛋白主要包括一些构成染色质或核基质的结构蛋白（如组蛋白Ｈ１、拓扑异构酶Ⅰ和Ⅱ、ＨＭＧＩ／Ｙ、ＬａｍｉｎＢ１、Ｍａｔｒｉｎ等）以及一些组织特异性表达的蛋白（如ＳＡＴＢ１、骨钙蛋白基因启动子结合因子等）．根据它们与核基质的关系将ＭＡＲ结合蛋白分为三类：核基质富含组分、核基质稀有组分以及非核基质组分，对其与ＭＡＲ的相互作用进行了比较和分析． 展开更多

关键词 mar 核基质 mar结合蛋白

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转基因下游MAR在稳定转化的CHO细胞中对基因表达的调控作用 被引量：4

4

作者 张俊河 张艳芳 +2 位作者 王芳 杨献军 王天云 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第18期8359-8361,共3页

[目的]探讨转基因下游MAR在稳定转化的CHO细胞中对基因表达的调控作用。[方法]将PCR扩增得到的人β-珠蛋白MAR插入到真核表达载体pCATG的下游,构建转基因表达盒3′端含MAR的表达载体。酶切鉴定正确后,转染CHO细胞,G418筛选出稳定转化的... [目的]探讨转基因下游MAR在稳定转化的CHO细胞中对基因表达的调控作用。[方法]将PCR扩增得到的人β-珠蛋白MAR插入到真核表达载体pCATG的下游,构建转基因表达盒3′端含MAR的表达载体。酶切鉴定正确后,转染CHO细胞,G418筛选出稳定转化的细胞株,ELISA分析转基因的表达水平,半定量PCR分析转基因相对拷贝数。[结果]结果表明,表达盒3′端含MAR序列能使转基因表达水平降低,其基因拷贝数则有一定程度的增加。转基因下游β-珠蛋白MAR在一定程度上能抑制外源基因的表达水平;外源基因表达量与基因拷贝数不成正比,未呈现出"拷贝数依赖性"。[结论]该研究结果为进一步研究MAR的调控机制奠定基础。 展开更多

关键词 核基质结合区 CHO细胞 转基因 报告基因

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含有MAR序列的植物表达载体pBI121-MARs的构建 被引量：3

5

作者 武冬梅 陈创夫 +1 位作者 史芳芳 祝建波 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2006年第4期429-432,共4页

将MAR(Matrix Attachment Region)构建到外源基因表达框的两侧,可以促进外源基因的表达,减少转基因沉默。实验利用PCR方法从普通烟草基因组中分离到一段MAR序列,将其正向重复插入到植物表达载体pBI121β-葡糖醛酸酶(-βglucuronidase,G... 将MAR(Matrix Attachment Region)构建到外源基因表达框的两侧,可以促进外源基因的表达,减少转基因沉默。实验利用PCR方法从普通烟草基因组中分离到一段MAR序列,将其正向重复插入到植物表达载体pBI121β-葡糖醛酸酶(-βglucuronidase,GUS)基因表达框的两侧,形成一个新的植物表达载体。 展开更多

关键词 mar序列 植物表达载体 β-葡糖醛酸酶

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拟南芥AtTTG1基因的克隆及用于转化花生的MAR调控表达载体构建 被引量：2

6

作者 陈湘瑜 郑国栋 +1 位作者 黄金堂 庄伟建 《花生学报》 2014年第2期1-6,共6页

黄曲霉毒素污染对花生产业危害巨大,通过基因工程改变花生果种皮结构以提高花生抗黄曲霉能力。根据GenBank中拟南芥AtTTG1基因的cDNA编码区设计引物,通过RT-PCR克隆AtTTG1基因,结果显示,克隆获得的片段长1026bp,与基因库中数据比对相同... 黄曲霉毒素污染对花生产业危害巨大,通过基因工程改变花生果种皮结构以提高花生抗黄曲霉能力。根据GenBank中拟南芥AtTTG1基因的cDNA编码区设计引物,通过RT-PCR克隆AtTTG1基因,结果显示,克隆获得的片段长1026bp,与基因库中数据比对相同,该片段编码341个氨基酸,预测其蛋白分子量为86.96KDa,等电点为4.85。结合实验室已获得的花生果种皮特异启动子S19和MAR序列调控的植物表达载体pLMAR,构建了植物高效表达载体pLMAR-S19-TTG1,并将其导入根癌农杆菌EHA105。为进一步对花生进行遗传转化,获得转基因高抗黄曲霉花生奠定基础。 展开更多

关键词 花生 抗黄曲霉 AtTTG1 基因 核基质结合区(mar) 果种皮特异启动子 载体构建

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植物的MAR及其对转基因表达的效应 被引量：2

7

作者 赵艳 高振宇 黄大年 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期281-284,共4页

与核基质结合的DNA序列称为基质附着区 (matrixattachmentregions ,MARs) ,可提高转基因的表达水平并降低转基因在不同转基因系间的表达差异 ,因其在植物基因工程中的巨大应用潜力而引起了研究者的极大兴趣。对植物中MAR的研究尚处于早... 与核基质结合的DNA序列称为基质附着区 (matrixattachmentregions ,MARs) ,可提高转基因的表达水平并降低转基因在不同转基因系间的表达差异 ,因其在植物基因工程中的巨大应用潜力而引起了研究者的极大兴趣。对植物中MAR的研究尚处于早期阶段 ,本文综述了植物中MAR的分离鉴定、序列特征及MAR对植物中转基因表达的影响 。 展开更多

关键词 植物 基质附着区 转基因表达 mar

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豌豆MAR的分离及其功能分析

8

作者 邓智年 魏源文 +3 位作者 黄诚梅 潘有强 吕维莉 李杨瑞 《广西农业科学》 CSCD 2010年第10期1041-1045,共5页

从3个不同品种豌豆中分离获得3个具有MARs序列特征的DNA片段MMAR、DMAR、HMAR。根据GenBank同源性搜索结果,发现这些片段均为未注册的DNA序列。经转化烟草并测定其GUS活性,结果发现两侧顺式重复连接MAR对外源基因的表达具有明显的增强作... 从3个不同品种豌豆中分离获得3个具有MARs序列特征的DNA片段MMAR、DMAR、HMAR。根据GenBank同源性搜索结果,发现这些片段均为未注册的DNA序列。经转化烟草并测定其GUS活性,结果发现两侧顺式重复连接MAR对外源基因的表达具有明显的增强作用,MMAR、HMAR和DMAR均不同程度提高了GUS的表达,分别为载体对照植株的4.16、3.66和2.08倍,但不同转化体间表达水平差异仍比较明显。 展开更多

关键词 豌豆 核基质附着区(mars) GUS表达

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MAR介导的非病毒附着体载体的研究进展 被引量：1

9

作者 林艳 李照熙 +1 位作者 王芳 王天云 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期46-50,共5页

附着体载体可以使外源基因在宿主细胞中不整合到基因组上而是以附着体的形式存在,是一种新型的高效、安全、附着体表达载体。目前研究较多的是由S/MAR(Scaffold/Matrix Attachment Region,S/MAR)元件介导的质粒。虽然此类载体均能介导... 附着体载体可以使外源基因在宿主细胞中不整合到基因组上而是以附着体的形式存在,是一种新型的高效、安全、附着体表达载体。目前研究较多的是由S/MAR(Scaffold/Matrix Attachment Region,S/MAR)元件介导的质粒。虽然此类载体均能介导载体附着存在,但是转基因的表达量不同。最近研究发现,载体的启动子、骨架结构、CpG基序以及表达系统等方面能够影响转基因的表达,针对以上内容作一综述,希望据此进一步优化载体,为临床研究提供基础依据。 展开更多

关键词 核基质附着区 转基因表达 附着体载体 启动子 骨架结构 CPG基序

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MAR提高重组CHO细胞中转基因表达的分子特性分析

10

作者 孙秋丽 张俊河 +2 位作者 赵春澎 王小引 王天云 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期64-68,共5页

分析核基质结合区（matrix attachment region,MAR）调控转基因表达的分子序列特征,鉴定能有效提高CHO细胞转基因表达的MAR特征性元件。将人β-珠蛋白MAR片段从5＇到3＇端分为6个分段（1-540,421-1 020,901-1 500,1 381-1 980,1 861-2 4... 分析核基质结合区（matrix attachment region,MAR）调控转基因表达的分子序列特征,鉴定能有效提高CHO细胞转基因表达的MAR特征性元件。将人β-珠蛋白MAR片段从5＇到3＇端分为6个分段（1-540,421-1 020,901-1 500,1 381-1 980,1 861-2 460,2 341-2 999位置）,分别采用PCR进行克隆,经测序证实正确后,分别连接到含有氯霉素乙酰转移酶（chloramphenicol acetyltransferase,CAT）报告基因的表达载体SV40启动子及上游,构建β-珠蛋白MAR渐次片段介导的表达载体,转染CHO细胞,G418筛选出稳定表达细胞株,ELISA分析CAT报告基因的表达水平,生物信息学分析MAR序列特征。结果表明,β-珠蛋白MAR全长能显著提高转基因的表达,6个渐次片段相比较,421-1 020位的第2个分段和901-1 500位的第3个分段提高转基因表达作用显著。生物信息学分析结果显示,MAR-like motif有助于转基因表达提高。 展开更多

关键词 核基质结合区 CHO细胞 渐次克隆 转基因表达

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MAR介导的逆转录病毒包装细胞系的建立

11

作者 张靖 王天云 +2 位作者 张俊河 杨保胜 张继红 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期182-185,共4页

根据GenBank登录的序列号,使用primer5.0进行引物设计,提取人的外周血基因组DNA为模板,PCR方法扩增出人β-珠蛋白MAR序列,将MAR序列插入到逆转录病毒表达载体pLXSN,构建MAR序列介导的逆转录病毒载体。酶切和测序鉴定后,阳离子聚合物转染... 根据GenBank登录的序列号,使用primer5.0进行引物设计,提取人的外周血基因组DNA为模板,PCR方法扩增出人β-珠蛋白MAR序列,将MAR序列插入到逆转录病毒表达载体pLXSN,构建MAR序列介导的逆转录病毒载体。酶切和测序鉴定后,阳离子聚合物转染PA317细胞,G418筛选出阳性细胞克隆,提取病毒液上清,测定逆转录病毒颗粒滴度,逆转录病毒颗粒的最高滴度为1.6×106CFU/mL,成功建立了MAR介导的逆转录病毒包装细胞系。 展开更多

关键词 核基质结合区 逆转录病毒载体 包装细胞系

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MAR序列对逆转录病毒载体表达外源基因的调控作用

12

作者 张靖 张婷 +2 位作者 孙强 朱婷 石晓卫 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期43-45,78,共4页

为研究核基质结合区对逆转录病毒载体表达外源基因的调控作用,将CAT基因插入到载体pLXSN中构建出中间载体,构建出在5’端和3’端含人β-珠蛋白核基质结合区的载体。逆转录载体转染PA317细胞后G418筛选,提取PA317阳性细胞病毒上清液转染B... 为研究核基质结合区对逆转录病毒载体表达外源基因的调控作用,将CAT基因插入到载体pLXSN中构建出中间载体,构建出在5’端和3’端含人β-珠蛋白核基质结合区的载体。逆转录载体转染PA317细胞后G418筛选,提取PA317阳性细胞病毒上清液转染Bel-7404,经G418筛选出阳性细胞。测定3组CAT报告基因表达量。结果显示,与中间载体相比,3’端含核基质结合区的载体可以显著提高CAT报告基因的表达量(P<0.05),而5’端含MAR序列的载体不能显著提高基因表达水平(P>0.05)。以上结果表明MAR介导逆转录表达载体能提高外源报告基因CAT的表达水平,且MAR对转基因表达调控作用与其在载体上插入位置有关。 展开更多

关键词 核基质结合区 基因沉默 基因治疗 位置效应

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杜氏盐藻核基质结合区结合蛋白的细胞定位 被引量：2

13

作者 王鹏举 王天云 +2 位作者 冯英才 刘红涛 薛乐勋 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期55-58,共4页

为研究核基质结合区结合蛋白的功能及调控机制,PCR扩增杜氏盐藻MBP的cDNA全长序列及N端和C端序列,与绿色荧光蛋白基因融合构建真核表达载体,脂质体转染CHO细胞,Western blotting和荧光显微镜检测基因表达情况和细胞定位。结果显示:MBP及... 为研究核基质结合区结合蛋白的功能及调控机制,PCR扩增杜氏盐藻MBP的cDNA全长序列及N端和C端序列,与绿色荧光蛋白基因融合构建真核表达载体,脂质体转染CHO细胞,Western blotting和荧光显微镜检测基因表达情况和细胞定位。结果显示:MBP及N端和C端融合蛋白成功在CHO细胞表达,MBP和C端部分定位于细胞核且聚集于核仁,N端部分分布整个细胞,说明MBP定位于细胞核且细胞定位信号位于C端,MBP可能与rRNA前体结合发挥作用。 展开更多

关键词 杜氏盐藻 核基质附着区 核基质结合区结合蛋白 真核表达载体 细胞定位

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核基质结合区在转基因烟草中提高报导基因的表达水平 被引量：5

14

作者 李旭刚 朱祯 +2 位作者 徐军望 徐鸿林 肖桂芳 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2000年第9期9-13,共5页

从豌豆基因组中分离了位于质体蓝素 (Plastocyanin)基因下游的核基质结合区(Matrixattachmentregion ,MAR)。为进一步研究此段MAR序列在转基因植物中对外源基因表达水平的影响 ,将MAR序列构建在报导基因 β 葡糖醛酸酶 (β glucuronidas... 从豌豆基因组中分离了位于质体蓝素 (Plastocyanin)基因下游的核基质结合区(Matrixattachmentregion ,MAR)。为进一步研究此段MAR序列在转基因植物中对外源基因表达水平的影响 ,将MAR序列构建在报导基因 β 葡糖醛酸酶 (β glucuronidase ,GUS)基因和植物选择标记新霉素磷酸转移酶 (Neomycinphosphotransferase ,NPT II)基因的两侧形成T DNA结构。采用叶盘法 ,经农杆菌介导转化烟草。GUS定量检测表明 ,MAR的存在使GUS基因的平均表达水平提高了 2倍。 展开更多

关键词 核基质结合区 转基因植物 β-葡糖醛酸酶 外源基因表达

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杜氏盐藻核基质的制备 被引量：3

15

作者 王天云 柴玉荣 +4 位作者 侯卫红 谢华 赵青赞 王宁 薛乐勋 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2004年第1期39-41,共3页

目的 :制备盐藻核基质 ,进而分离核基质结合区 (matrixattachmentregions)。方法 :采用体积分数 0 .5 %TritonX - 1 0 0破碎细胞 ,体积分数 1 5 %Percoll分离盐藻细胞核 ,二碘水杨酸锂 (lithiumdiiodosalicylate,LIS)抽提核蛋白 ,SDS -P... 目的 :制备盐藻核基质 ,进而分离核基质结合区 (matrixattachmentregions)。方法 :采用体积分数 0 .5 %TritonX - 1 0 0破碎细胞 ,体积分数 1 5 %Percoll分离盐藻细胞核 ,二碘水杨酸锂 (lithiumdiiodosalicylate,LIS)抽提核蛋白 ,SDS -PAGE电泳分析蛋白质成分。结果 :分离出了高纯度的盐藻细胞核 ,电泳分析表明绝大部分核蛋白已被去除。结论 :体积分数 0 .5 %TritonX - 1 0 0能有效破碎盐藻细胞 ,体积分数 1 5 %Percoll可分离高纯度的盐藻细胞核 ,2 展开更多

关键词 盐藻 核基质 核基质结合区 SDS—PAGE

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豌豆核基质结合区的功能研究 被引量：4

16

作者 李旭刚 吴茜 +1 位作者 朱祯 肖桂芳 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2000年第10期4-8,共5页

将豌豆基因组中分离的核基质结合区 (Matrixattachmentregions ,MARs)构建在植物表达载体的T DNA结构域中 ,使得报导基因 β 葡糖醛酸酶 (β glucuronidase ,GUS)基因位于两段MARs序列之间。将此载体与不包含MARs序列的植物表达载体经... 将豌豆基因组中分离的核基质结合区 (Matrixattachmentregions ,MARs)构建在植物表达载体的T DNA结构域中 ,使得报导基因 β 葡糖醛酸酶 (β glucuronidase ,GUS)基因位于两段MARs序列之间。将此载体与不包含MARs序列的植物表达载体经农杆菌介导转化烟草。GUS活性检测表明 ,MARs可以提高GUS基因的表达水平 ,和不包含MARs的转基因植株相比 ,MARs序列使GUS基因的平均表达水平提高 2倍。但在瞬时表达中 ,MARs对GUS基因的表达没有影响。 展开更多

关键词 核基质结合区 β-葡糖醛酸酶 外源基因表达 瞬时表达 豌豆

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杜氏盐藻核基质附着区的分离及特征性分析 被引量：1

17

作者 王天云 袁保梅 +2 位作者 柴玉荣 王建人 薛乐勋 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期145-148,共4页

采用0.5%TritonX 100破碎细胞,15%Percoll分离盐藻细胞核,25mM二碘水杨酸锂(lithiumdi iodosalicylate,LIS)抽提核蛋白,限制酶消化除去结合松弛的DNA,蛋白酶K SDS处理,酚/氯仿抽提,乙醇 沉淀提取核基质附着DNA,限制酶酶切连至pUC1... 采用0.5%TritonX 100破碎细胞,15%Percoll分离盐藻细胞核,25mM二碘水杨酸锂(lithiumdi iodosalicylate,LIS)抽提核蛋白,限制酶消化除去结合松弛的DNA,蛋白酶K SDS处理,酚/氯仿抽提,乙醇 沉淀提取核基质附着DNA,限制酶酶切连至pUC18载体上构建MARs文库。随机挑选6个克隆进行体外结 合实验筛选,筛选出一能与核基质结合的克隆,测序分析结果表明该序列具明显的MAR序列特征。 展开更多

关键词 核基质附着区 杜氏盐藻 分离 特征性 PERCOLL Triton X-100 PUC18 破碎细胞 25mM 蛋白酶K 乙醇沉淀 mars 体外结合 序列特征 分析结果 DNA 限制酶 细胞核 水杨酸 核蛋白 SDS 抽提 筛选 克隆 载体 测序

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核基质结合区与转基因植物的基因表达 被引量：2

18

作者 刘峰 许明 +2 位作者 赵伊英 郑回勇 郑金贵 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2003年第1期93-97,共5页

核基质结合区(matrixattachmentregions,MARs)是真核细胞染色质中能与核基质结合的一段DNA序列.当MARs位于外源基因两侧时,能够使转基因植株高效、稳定表达,说明MARs是消除植物转基因沉默的一条可行途径.本文综述了MARs的研究进展,认为M... 核基质结合区(matrixattachmentregions,MARs)是真核细胞染色质中能与核基质结合的一段DNA序列.当MARs位于外源基因两侧时,能够使转基因植株高效、稳定表达,说明MARs是消除植物转基因沉默的一条可行途径.本文综述了MARs的研究进展,认为MARs的研究与利用对获得高效、稳定的转基因禾谷类作物具有重要的意义. 展开更多

关键词 转基因植物 基因表达 核基质结合区 基因调控 基因沉默 结构特征

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核基质结合区的位置对转基因表达的影响 被引量：3

19

作者 张俊河 昝玉玺 王天云 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期839-843,共5页

为研究核基质结合区(MAR)序列不同插入位置对转基因表达作用的影响,PCR扩增人β-珠蛋白MAR分别插入到含氯霉素乙酰转移酶(chloramphenicol acetyltransferase,CAT)报告基因真核表达载体pCATG表达盒两侧、5′端及3′端.酶切鉴定后,用阳... 为研究核基质结合区(MAR)序列不同插入位置对转基因表达作用的影响,PCR扩增人β-珠蛋白MAR分别插入到含氯霉素乙酰转移酶(chloramphenicol acetyltransferase,CAT)报告基因真核表达载体pCATG表达盒两侧、5′端及3′端.酶切鉴定后,用阳离子聚合物转染CHO细胞,G418筛选出阳性细胞克隆,ELISA分析CAT基因的表达水平,半定量PCR分析CAT基因相对拷贝数.结果表明,表达盒两侧含MAR序列的载体能提高介导的转基因表达水平平均提高10.4倍,5′端含MAR序列的载体表达水平平均提高3.9倍,3′端含MAR序列的载体反而降低转基因表达水平.5′端含MAR序列的表达载体其转基因相对拷贝数高于其它两组载体的基因拷贝数,转基因表达量与基因拷贝数不成正比. 展开更多

关键词 核基质结合区 插入位置 转基因表达 报告基因

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甘蓝短散布元件对转基因表达效果的研究 被引量：1

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作者 杨正安 曹晖 +1 位作者 王小佳 张应华 《云南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 2008年第5期590-594,共5页

为检验甘蓝短散布元件(SINE)对植物转基因表达的影响,采用PCR方法,从甘蓝基因组中克隆了一段短散布元件序列(Short Interspersed Nuclear Element,SINE),该SINE具有核基质结合区(matrix attachmentregion,MAR)的结构特征,将其构建到β-... 为检验甘蓝短散布元件(SINE)对植物转基因表达的影响,采用PCR方法,从甘蓝基因组中克隆了一段短散布元件序列(Short Interspersed Nuclear Element,SINE),该SINE具有核基质结合区(matrix attachmentregion,MAR)的结构特征,将其构建到β-葡糖醛酸酶(β-glucuronidase,GUS)基因(uidA)的两侧翼,形成SINE调控的植物表达载体,采用农杆菌介导法,将含SINE序列和不含SINE序列的植物表达载体导入烟草中。对转基因植株进行GUS活性定量测定,结果表明,SINE表现出类似MAR的功能,可以提高外源uidA基因的表达水平,与不含SINE的转化植株相比,外源基因的平均表达水平提高了2倍,但转基因植株个体间表达水平存在较大的差异。 展开更多

关键词 甘蓝 短散布元件(SINE) 核基质结合区 转基因表达 烟草

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