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利用SSH方法筛选与鉴定AC3基因缺失小鼠主要嗅觉表皮内的差异表达基因被引量：4: 1; 作者曹振龙郝江叶 +8 位作者周艳芬张喆倪志华胡远想刘伟丽李永超 Daniel R.Storm 马润林王振山《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期574-583,共10页; 腺苷酸环化酶3(Adenylate cyclase 3,AC3)基因在小鼠主要嗅觉表皮(Main olfactory epithelium,MOE)内的嗅觉信号传导中起着重要作用,AC3缺失是否会导致MOE内与之相关的基因发生差异表达,尚待确定。文章利用抑制性消减杂交(Suppression s... 展开更多; 关键词腺苷酸环化酶3 主要嗅觉表皮差异表达基因抑制性消减杂交; 在线阅读下载PDF 职称材料

盐酸酸化可改善核抗原免疫荧光染色被引量：2: 2; 作者王振山张喆 +3 位作者翟云鹏刘明琛张燕花周艳芬《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期231-236,共6页; 免疫荧光染色(immunofluorescent staining,IF)技术广泛用于细胞或组织内抗原定性、定量或定位检测。然而,依常规染色步骤操作,在有些胞核抗原的检测中很难得到令人满意的结果。有研究者采用盐酸酸化预处理用于细胞增殖标记物5-溴-2-脱... 展开更多; 关键词盐酸酸化细胞核抗原免疫荧光染色主要嗅觉表皮(moe); 在线阅读下载PDF 职称材料

腺苷酸环化酶3缺失对小鼠主要嗅觉表皮组织内相关因子及信号通路的影响被引量：4: 3; 作者周艳芬韩绍芳 +4 位作者舒俐张晶刘明琛沈丽敏王振山《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期816-822,共7页; 主要嗅觉表皮(main olfactory epithelium,MOE)是哺乳动物感知气味分子的主要嗅觉器官。在MOE组织内,大多数嗅觉神经元通过c AMP信号传导通路感知气味信息。作为嗅觉c AMP信号通路的主要成员之一,腺苷酸环化酶3(adenylyl cyclase 3,ac3... 展开更多; 关键词主要嗅觉表皮腺苷酸环化酶3 腺苷酸环化酶2 腺苷酸环化酶4 c AMP信号通路 IP3信号通路 SHH信号通路; 在线阅读下载PDF 职称材料

腺苷酸环化酶3缺失下调小鼠嗅觉受体基因表达被引量：1: 4; 作者周艳芬王伟娜 +5 位作者袁焕娜张梦迪吴向博王亚文王晓婷王振山《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1143-1151,共9页; 主要嗅觉表皮组织(MOE)是哺乳动物感知气味分子的重要器官,气味诱导是嗅觉受体神经元(ORN)活动的起点,嗅觉受体(OR)结合气味分子后通过环腺苷酸(c AMP)信号通路向下游传递信号。腺苷酸环化酶3(AC3)是此通路中的重要分子。为了探讨AC3缺... 展开更多; 关键词腺苷酸环化酶3 主要嗅觉表皮组织嗅觉受体神经元嗅觉受体基因; 在线阅读下载PDF 职称材料

腺苷酸环化酶3缺失对小鼠主要嗅觉表皮组织内DNA甲基化的影响: 5; 作者周艳芬王亚文 +3 位作者王晓婷舒俐李淑娟王振山《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2019年第5期474-484,共11页; 腺苷酸环化酶3 (adenylate cyclaseⅢ,AC3)是嗅觉系统中的重要成分,AC3缺失后小鼠的主要嗅觉表皮组织(main olfactory epidermal,MOE)随年龄增长逐渐变薄,MOE内基因表达谱发生改变. DNA甲基化在动物发育、基因表达调控中具有重要作用.... 展开更多; 关键词嗅觉受体基因 DNA甲基化腺苷酸环化酶3 cAMP信号通路主要嗅觉表皮组织; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名利用SSH方法筛选与鉴定AC3基因缺失小鼠主要嗅觉表皮内的差异表达基因被引量：4: 1; 作者曹振龙郝江叶周艳芬张喆倪志华胡远想刘伟丽李永超 Daniel R.Storm 马润林王振山; 机构河北大学生命科学学院河北省生物工程技术研究中心河北大学基础医学院中国科学院遗传与发育生物学研究所 Department of Pharmacology; 出处《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期574-583,共10页; 基金国家自然科学基金项目(编号:31171191) 河北省自然科学基金项目(编号:C2012201106) +1 种基金河北省生物工程重点学科经费资助; 文摘腺苷酸环化酶3(Adenylate cyclase 3,AC3)基因在小鼠主要嗅觉表皮(Main olfactory epithelium,MOE)内的嗅觉信号传导中起着重要作用,AC3缺失是否会导致MOE内与之相关的基因发生差异表达,尚待确定。文章利用抑制性消减杂交(Suppression subtractive hybridization,SSH)方法,以AC3敲除(AC3-/-)及其同窝出生的野生型(AC3+/+)小鼠MOE为材料,构建了正向和反向两个消减文库,采用斑点杂交对消减文库进行初步筛选,对筛选出的差异表达基因进行序列测定及生物信息学分析,并利用荧光定量PCR(qRT-PCR)方法对其进行验证。斑点杂交筛选获得了386个差异表达克隆,随机选取其中的80个进行DNA序列测定,经序列比对后发现有62个在GenBank上获得了与之相匹配的基因信息,其中24个上调差异表达克隆对应于kcnk3、mapk7、megf11等基因,38个下调差异表达克隆对应于tmem88b、c-mip、skp1a、mlycd等基因。利用Gene Ontology(GO)方法对这些差异表达基因进行蛋白功能注释,发现它们主要集中在分子结合、细胞周期、生物和细胞过程等功能方面。选取其中上调基因kcnk3和下调基因c-mip、mlycd、tmem88b及trappc5进行qRT-PCR验证。结果表明,在AC3-/-小鼠MOE内kcnk3的表达量显著上调,是对照组小鼠的1.27倍,而c-mip、mlycd、tmem88b和trappc5的表达量显著下调,为对照组小鼠的20%、7%、32%和29%。这些基因的功能与K+通道、细胞发育与分化、脂肪代谢和膜蛋白转运等密切相关。推测它们可能与AC3基因共同作用,调节小鼠MOE内的嗅觉信号传导信息。; 关键词腺苷酸环化酶3 主要嗅觉表皮差异表达基因抑制性消减杂交; Keywords adenylate cyclase 3 （AC3） main olfactory epithelium （moe） differentially expressed genes suppression subtractive hybridization （SSH）; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名盐酸酸化可改善核抗原免疫荧光染色被引量：2: 2; 作者王振山张喆翟云鹏刘明琛张燕花周艳芬; 机构河北大学生命科学学院河北大学医学院河北大学公共卫生学院河北大学护理学院; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期231-236,共6页; 基金国家自然科学基金(No.31171191 No.31471178) +2 种基金河北省生物学强势特色学科建设项目资助~~; 文摘免疫荧光染色(immunofluorescent staining,IF)技术广泛用于细胞或组织内抗原定性、定量或定位检测。然而,依常规染色步骤操作,在有些胞核抗原的检测中很难得到令人满意的结果。有研究者采用盐酸酸化预处理用于细胞增殖标记物5-溴-2-脱氧尿嘧啶核苷(Brd U)的荧光染色并获得良好效果。但此方法是否也适用于其他类型的胞核抗原,尚不清楚。为系统全面分析盐酸酸化在胞核抗原免疫荧光染色中的作用,本文以成年C57BL小鼠主要嗅觉表皮(MOE)为材料,分别对Ki-67、5-甲基胞嘧啶(5m C)和5-羟甲基胞嘧啶(5hm C)三种不同类型的胞核抗原进行盐酸酸化处理免疫荧光染色。结果显示,当血清封闭和抗体浓度等条件一致时,室温下盐酸酸化2 h,Ki-67的染色效果最佳,而阴性对照与未酸化组均未出现阳性信号;同样经过盐酸处理2 h,5m C和5hm C染色也呈现较强的阳性信号。该研究表明,在一些胞核抗原免疫荧光染色中,使用盐酸酸化处理可显著提高染色效果。; 关键词盐酸酸化细胞核抗原免疫荧光染色主要嗅觉表皮(moe); Keywords HCl acidification nuclear antigens immunofluorescent staining main olfactory epithelium; 分类号 Q503 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名腺苷酸环化酶3缺失对小鼠主要嗅觉表皮组织内相关因子及信号通路的影响被引量：4: 3; 作者周艳芬韩绍芳舒俐张晶刘明琛沈丽敏王振山; 机构河北大学生命科学学院河北大学预防医学与卫生事业管理系河北大学医学院; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期816-822,共7页; 基金国家自然科学基金(No.31171191 31471178) +2 种基金河北大学人才引进基金(No.2011-215)项目资助~~; 文摘主要嗅觉表皮(main olfactory epithelium,MOE)是哺乳动物感知气味分子的主要嗅觉器官。在MOE组织内,大多数嗅觉神经元通过c AMP信号传导通路感知气味信息。作为嗅觉c AMP信号通路的主要成员之一,腺苷酸环化酶3(adenylyl cyclase 3,ac3)基因敲除小鼠嗅觉探测功能丧失。除c AMP信号传导通路外,MOE内AC3相关因子AC2和AC4,以及肌醇1,4,5-三磷酸(inositol 1,4,5-trisphosphate,IP3)信号通路和Sonic Hedgehog(Shh)信号通路均有表达。然而,敲除ac3是否会对ac2和ac4以及IP3和Shh信号通路成员产生影响,尚不清楚。本文以AC3缺失(AC3-/-)及其野生型小鼠(AC3+/+)MOE为材料,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和免疫荧光组织化学方法,发现AC3缺失后,MOE内的ac2和ac4,以及IP3信号通路中的IP3受体ip3r1及钙调蛋白calm1和calm2表达水平均明显降低。Shh信号通路中的受体patched(ptch)与smoothened(smo)、以及核转录因子gli1与gli2的表达也受到了影响。总之,AC3基因缺失不但导致小鼠MOE组织中c AMP信号通路受损,同时AC3相关因子,IP3信号通路和Shh信号通路的传导也受到抑制。本文对于阐明AC3基因敲除小鼠嗅觉丧失的原因及其嗅觉探测机制具有重要启示作用。; 关键词主要嗅觉表皮腺苷酸环化酶3 腺苷酸环化酶2 腺苷酸环化酶4 c AMP信号通路 IP3信号通路 SHH信号通路; Keywords main olfactory epithelium adenylyl cyclase 3 adenylyl cyclase 2 adenylyl cyclase 4 cAMP signaling pathway IP3 signaling pathway Shh signaling pathway; 分类号 Q953 [生物学—动物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名腺苷酸环化酶3缺失下调小鼠嗅觉受体基因表达被引量：1: 4; 作者周艳芬王伟娜袁焕娜张梦迪吴向博王亚文王晓婷王振山; 机构河北大学生命科学学院河北省生物工程技术研究中心河北大学预防医学与卫生事业管理系河北大学医学院; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1143-1151,共9页; 基金国家自然科学基金(No.31171191 31471178) +1 种基金河北省巨人计划项目(No.201235)资助~~; 文摘主要嗅觉表皮组织(MOE)是哺乳动物感知气味分子的重要器官,气味诱导是嗅觉受体神经元(ORN)活动的起点,嗅觉受体(OR)结合气味分子后通过环腺苷酸(c AMP)信号通路向下游传递信号。腺苷酸环化酶3(AC3)是此通路中的重要分子。为了探讨AC3缺失对小鼠MOE内ORs基因表达的影响,本文以AC3敲除型小鼠(AC3-/-)和野生型小鼠(AC3+/+)为材料,采用荧光定量PCR(qRT-PCR)、荧光原位杂交(FISH)技术分析了部分ORs基因及与其相关因子在MOE中的表达。qRT-PCR表明,3月龄AC3-/-小鼠MOE中嗅觉受体Olfr15、Olfr16、Olfr533、Olfr536、Olfr1507和Olfr642的表达量均显著下降。出生后PND7、PND30和PND90三个不同发育时期的AC3-/-小鼠MOE原位杂交显示,嗅觉受体Olfr15、Olfr536和Olfr1507表达的细胞数目均减少。进一步qRTPCR分析发现,3月龄AC3-/-小鼠嗅觉受体相关因子Rtp1、Rtp2、Reep1、Lhx2、Emx2和Ric-8b的表达也均发生显著下调。由此推测,AC3缺失导致的ORs及其相关因子的表达下调可能是嗅觉行为障碍的原因之一。; 关键词腺苷酸环化酶3 主要嗅觉表皮组织嗅觉受体神经元嗅觉受体基因; Keywords adenylyl cyclase 3 main olfactory epithelium olfactory receptor neurons olfactory receptorgenes; 分类号 Q956 [生物学—动物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名腺苷酸环化酶3缺失对小鼠主要嗅觉表皮组织内DNA甲基化的影响: 5; 作者周艳芬王亚文王晓婷舒俐李淑娟王振山; 机构河北大学生命科学学院河北大学预防医学与卫生事业管理系河北大学医学院; 出处《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2019年第5期474-484,共11页; 基金国家自然科学基金面上资助项目(31871246 31471178) +2 种基金河北大学大学生创新创业训练计划资助项目(2018277)~~; 文摘腺苷酸环化酶3 (adenylate cyclaseⅢ,AC3)是嗅觉系统中的重要成分,AC3缺失后小鼠的主要嗅觉表皮组织(main olfactory epidermal,MOE)随年龄增长逐渐变薄,MOE内基因表达谱发生改变. DNA甲基化在动物发育、基因表达调控中具有重要作用.为了探讨AC3缺失后小鼠MOE内基因启动子甲基化水平的改变以及对基因表达的影响,本文采用DNA甲基化免疫共沉淀芯片(methylated DNA immunoprecipitation chip,MeDIP-chip)筛选AC3缺失小鼠MOE内启动子区甲基化差异表达基因,利用甲基化特异PCR (methylation-specific PCR,MSP)、实时荧光定量PCR (qRT-PCR)进一步检测部分甲基化差异基因的DNA甲基化水平改变和表达差异.结果表明,AC3缺失小鼠中有1 978个基因启动子的甲基化水平发生了改变,占总探针数的9%,其中727个基因启动子甲基化水平升高,1 251个甲基化水平降低.功能分析表明,这些启动子甲基化发生改变的基因主要涉及的功能分别与嗅觉受体、神经发育、cAMP信号通路、ATP结合、钙离子调控、乙酰化修饰、转录因子等相关. MSP检测表明,嗅觉受体基因Olfr1153、Olfr231、Olfr378、Olfr651、Olfr691启动子区的甲基化水平升高,Cngb1、Pde4a和Olfr1394基因启动子区的甲基化水平降低. qRT-PCR结果显示,基因Cngb1、Hcn4、Olfm1、Olfr1394、Olfr1153、Olfr231、Olfr378、Olfr691的表达水平显著下降,而Pde4a和Olfr651基因的表达水平显著升高.总之,AC3缺失后MOE内嗅觉受体基因、神经发育相关基因、cAMP信号通路等相关基因启动子甲基化水平发生显著改变,影响核苷酸切除修复、DNA复制、错配修复等信号通路的传导,从而综合调控小鼠MOE内的基因表达数量和水平.; 关键词嗅觉受体基因 DNA甲基化腺苷酸环化酶3 cAMP信号通路主要嗅觉表皮组织; Keywords olfactory receptor DNA methylation adenylate cyclaseⅢ cAMP signaling pathway main olfactory epithelium; 分类号 Q434 [生物学—生理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	利用SSH方法筛选与鉴定AC3基因缺失小鼠主要嗅觉表皮内的差异表达基因	曹振龙郝江叶周艳芬张喆倪志华胡远想刘伟丽李永超 Daniel R.Storm 马润林王振山	《遗传》 CAS CSCD 北大核心	2014	4	在线阅读下载PDF 职称材料
2	盐酸酸化可改善核抗原免疫荧光染色	王振山张喆翟云鹏刘明琛张燕花周艳芬	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2016	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	腺苷酸环化酶3缺失对小鼠主要嗅觉表皮组织内相关因子及信号通路的影响	周艳芬韩绍芳舒俐张晶刘明琛沈丽敏王振山	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2016	4	在线阅读下载PDF 职称材料
4	腺苷酸环化酶3缺失下调小鼠嗅觉受体基因表达	周艳芬王伟娜袁焕娜张梦迪吴向博王亚文王晓婷王振山	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2017	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	腺苷酸环化酶3缺失对小鼠主要嗅觉表皮组织内DNA甲基化的影响	周艳芬王亚文王晓婷舒俐李淑娟王振山	《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心	2019	0	在线阅读下载PDF 职称材料