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高盐低pH值法提取大豆不同组织DNA的效果 被引量:20
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作者 姚丹 闫伟 +2 位作者 关淑艳 常唯一 王丕武 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2009年第12期50-54,共5页
以大豆品种吉农18和吉林47的叶片、种子和鼓粒期鲜豆荚为材料,利用优化的高盐低pH值法提取大豆基因组DNA,同时采用改良的SDS法和CTAB法进行提取,并对DNA的纯度、浓度及提取质量进行比较分析。结果表明,在以大豆种子和鼓粒期鲜豆荚为材料... 以大豆品种吉农18和吉林47的叶片、种子和鼓粒期鲜豆荚为材料,利用优化的高盐低pH值法提取大豆基因组DNA,同时采用改良的SDS法和CTAB法进行提取,并对DNA的纯度、浓度及提取质量进行比较分析。结果表明,在以大豆种子和鼓粒期鲜豆荚为材料时,高盐低pH值法提取基因组DNA的效果最佳,其纯度及浓度均高于改良的SDS法和CTAB法,且该方法具有成本低、步骤简单、时间短、不使用或少用有毒试剂等优点,是一种高效、快速、经济的大豆基因组DNA提取方法。 展开更多
关键词 大豆 基因组dna 提取 高盐低pH值法
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高质量毕赤酵母基因组DNA提取方法比较 被引量:14
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作者 唐天乐 高炳淼 +1 位作者 长孙东亭 罗素兰 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期196-199,共4页
旨在比较5种毕赤酵母基因组DNA的提取法,以便获得简便高效的提取高质量酵母基因组DNA的优化方法。分别使用蜗牛酶破壁法,超声波破碎法,液氮研磨法,Lyticase破壁法,试剂盒法提取毕赤酵母基因组DNA,然后进行DNA电泳检测以及紫外分光光度... 旨在比较5种毕赤酵母基因组DNA的提取法,以便获得简便高效的提取高质量酵母基因组DNA的优化方法。分别使用蜗牛酶破壁法,超声波破碎法,液氮研磨法,Lyticase破壁法,试剂盒法提取毕赤酵母基因组DNA,然后进行DNA电泳检测以及紫外分光光度计测定DNA浓度和纯度。结果显示,5种方法均能提取出酵母基因组DNA,而酶法所提取的酵母基因组DNA质量最好。由此证实,蜗牛酶法成本低、效果好,是理想的提取高质量酵母基因组DNA的方法,完全满足后续试验要求。 展开更多
关键词 毕赤酵母 高质量基因组dna 提取方法优化
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基因组DNA高通量提取技术及其在骨髓库捐献者样本HLA基因分型中的应用 被引量:3
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作者 王大明 唐斯 +3 位作者 李桢 程曦 高素青 邓志辉 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第5期1265-1268,共4页
本研究旨在建立从全血EDTA抗凝样本中高通量提取基因组DNA的有效方法,以常规应用于Luminexr SSO HLA流式磁珠基因分型。使用2ml深孔板和TECAN DNA全自动工作站,从288份骨髓捐献者样本中提取基因组DNA;提取的DNA样本用紫外分光光度仪测... 本研究旨在建立从全血EDTA抗凝样本中高通量提取基因组DNA的有效方法,以常规应用于Luminexr SSO HLA流式磁珠基因分型。使用2ml深孔板和TECAN DNA全自动工作站,从288份骨髓捐献者样本中提取基因组DNA;提取的DNA样本用紫外分光光度仪测定其浓度和纯度,并采用琼脂糖凝胶电泳检测DNA的完整性;DNA样本用Onelambdar SSOHLA-A、B和DRB1基因分型试剂盒进行PCR扩增、分子杂交和Luminex流式磁珠分析仪检测,统计分析每一DNA样本HLA-A、B和DRB1基因扩增产物经DNA探针分子杂交后的阳性磁珠和阴性磁珠的荧光信号强度。结果表明:从400μl全血中提取了基因组DNA,288份样本的DNA产量平均为3.217±0.715μg,A260/A280值平均为1.710±0.103,A260-A320/A280-A320值平均为1.761±0.151;用琼脂糖凝胶电泳法测得DNA的分子量均大于15kb;每一样本HLA-A、-B和-DRB1杂交后的阳性磁珠的荧光信号强度均>600RFU,而阴性磁珠的荧光信号强度<50RFU。结论:本方法适用于从大量全血样本中快速提取基因组DNA,所得的基因组DNA适用于高通量中华骨髓捐献者样本的HLA流式磁珠基因分型等下游的移植免疫学与分子生物学实验。 展开更多
关键词 基因组dna 基因组dna高通量提取 中华骨髓库 HLA基因分型
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高盐沉淀CTAB法提取温室菊花基因组DNA 被引量:11
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作者 马月萍 戴思兰 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期90-93,共4页
根据温室菊花植物组织富含多酚、多糖的具体特性,对CTAB法加以改进:在待沉淀液中加入1/2体积5 mol.L-1NaCl。改进后的方法获得的DNA质量良好,电泳条带清晰,提取过程无明显的DNA降解,基本上排除了多酚物质的干扰。以提取的DNA为模板,用... 根据温室菊花植物组织富含多酚、多糖的具体特性,对CTAB法加以改进:在待沉淀液中加入1/2体积5 mol.L-1NaCl。改进后的方法获得的DNA质量良好,电泳条带清晰,提取过程无明显的DNA降解,基本上排除了多酚物质的干扰。以提取的DNA为模板,用一对引物扩增菊花中18S基因,得到条带单一,大小与已知一致,说明获得的DNA可以进行PCR扩增,EcoRI酶切基因组DNA图谱表明,提取的DNA能被限制性内切酶完全酶切,可以满足相关的分子生物学研究。 展开更多
关键词 菊花 基因组dna的提取 高盐沉淀CTAB法
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海洋单细胞四爿藻基因组DNA的微量提取 被引量:8
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作者 罗立明 欧阳叶新 胡鸿钧 《武汉植物学研究》 CSCD 2003年第4期295-300,共6页
四爿藻具有坚硬的囊壳和特殊的细胞壁组成,细胞不易破碎,且含有丰富的糖蛋白,易对DNA造成污染,使其基因组DNA提取较为困难、纯度不高。研究对比传统的CTAB法与高盐低pH法提取四爿藻DNA,高盐低pH法快速经济,得到的基因组DNA纯度较高,是... 四爿藻具有坚硬的囊壳和特殊的细胞壁组成,细胞不易破碎,且含有丰富的糖蛋白,易对DNA造成污染,使其基因组DNA提取较为困难、纯度不高。研究对比传统的CTAB法与高盐低pH法提取四爿藻DNA,高盐低pH法快速经济,得到的基因组DNA纯度较高,是一种行之有效的四爿藻基因组DNA提取方法。该法通过改变抽提介质,提高细胞破碎效率,减少抽提次数,有效去除污染,提取的基因组DNA不仅可以成功进行nrDNA转录间隔区(ITS)扩增,而且扩增产物适合于进行测序分析,这为其它淡水和海洋单细胞及多细胞藻类基因组DNA的提取也提供了借鉴。 展开更多
关键词 四爿藻 基因组dna提取 高盐低pH法 CTAB法
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药用植物大黄种子基因组DNA的提取方法研究 被引量:3
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作者 任海龙 《山西农业科学》 2018年第3期325-327,349,共4页
通过传统CTAB法、改良CTAB法、高盐低p H法、改良SDS法、试剂盒法等5种方法,对大黄种子进行基因组DNA提取,为了筛选一种适合大黄种子基因组DNA的提取方法,同时用紫外分光光度法和琼脂糖凝胶电泳对5种方法所提的DNA进行检测,并将5种方法... 通过传统CTAB法、改良CTAB法、高盐低p H法、改良SDS法、试剂盒法等5种方法,对大黄种子进行基因组DNA提取,为了筛选一种适合大黄种子基因组DNA的提取方法,同时用紫外分光光度法和琼脂糖凝胶电泳对5种方法所提的DNA进行检测,并将5种方法所提取的DNA进行PCR扩增检测。结果表明,高盐低pH法提取的DNA得率最好,时间较短,价格便宜,PCR扩增条带清晰,能满足分子标记的要求。 展开更多
关键词 大黄 基因组dna提取 CTAB SDS 高盐低p H 试剂盒 PCR
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球磨机高通量提取甘蔗叶片DNA研究
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作者 陈平华 方静平 +4 位作者 许莉萍 王恒波 高三基 陈由强 陈如凯 《热带农业科学》 2010年第10期8-12,共5页
简便快速地获得高质量、高纯度的DNA模板是进行分子遗传学研究和大批量分子检测的基础。常用的液氮手工研磨提取DNA方法存在着耗时、费力、污染等诸多不足。利用从美国引进的球磨机,根据甘蔗叶片的特点,采用国产钢珠,通过优化实验步骤,... 简便快速地获得高质量、高纯度的DNA模板是进行分子遗传学研究和大批量分子检测的基础。常用的液氮手工研磨提取DNA方法存在着耗时、费力、污染等诸多不足。利用从美国引进的球磨机,根据甘蔗叶片的特点,采用国产钢珠,通过优化实验步骤,建立了一种高通量制备甘蔗叶片DNA的方法,其中,叶片快速研磨使用不锈钢珠的直径为4 mm,对叶片进行液氮预冻,时间为30~45 min,叶片用量为50~100 mg,打磨时间为30~40 s。这种方法缩短了提取DNA的时间,提高了效率,而DNA质量与经典方法相当,能够满足分子生物学研究的需要。 展开更多
关键词 球磨机 高通量 甘蔗叶片 基因组dna 提取
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白草种子基因组DNA五种提取方法的比较 被引量:3
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作者 郝豆豆 田志华 +3 位作者 雷鸣 武俊喜 拉多 张勇群 《西部林业科学》 CAS 2016年第3期81-84,95,共5页
用5种方法 (传统CTAB法、改良CTAB法、高盐低p H法、改良SDS法、试剂盒法)对白草种子基因组DNA进行提取,分别用紫外分光光度计法、琼脂糖凝胶电泳法、PCR扩增检测提取的DNA的质量。结果表明,传统CTAB法提取的DNA浓度低,含有较多杂质,抑... 用5种方法 (传统CTAB法、改良CTAB法、高盐低p H法、改良SDS法、试剂盒法)对白草种子基因组DNA进行提取,分别用紫外分光光度计法、琼脂糖凝胶电泳法、PCR扩增检测提取的DNA的质量。结果表明,传统CTAB法提取的DNA浓度低,含有较多杂质,抑制PCR反应;改良SDS法和改良CTAB法提取的DNA纯度低,不符合检测要求;高盐低pH法和试剂盒法提取的DNA纯度高、完整性好,但试剂盒法成本高、DNA得率低。所以高盐低pH法为5种方法中最经济、效果最好的白草种子DNA提取方法。 展开更多
关键词 白草 基因组dna dna提取方法 高盐低p H法
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腐乳中菌群基因组DNA提取方法的对比研究 被引量:5
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作者 张娜娜 徐琼 黎鸿艺 《中国酿造》 CAS 北大核心 2023年第10期177-181,共5页
为更好研究腐乳中微生物菌群的多样性,采用改良十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法和玻璃珠法对腐乳中的微生物进行非培养方式的基因组DNA提取,并将提取产物进行高通量测序分析。结果显示,在基因组DNA提取浓度方面,玻璃珠法和改良CTAB法均能... 为更好研究腐乳中微生物菌群的多样性,采用改良十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法和玻璃珠法对腐乳中的微生物进行非培养方式的基因组DNA提取,并将提取产物进行高通量测序分析。结果显示,在基因组DNA提取浓度方面,玻璃珠法和改良CTAB法均能得到一定量的基因组DNA,且均可得到扩增条带,但玻璃珠法拖尾严重。借助高通量测序方法检测,两种提取方法得到的样品基因组DNA在文库中的序列基本都能够被测出,在门和属水平上菌群结构相差不大。综上,改良CTAB法更适合大批量样品进行非培养方式的基因组DNA提取,该方法提取得到的基因组DNA浓度高且不影响后续实验。 展开更多
关键词 腐乳 微生物 基因组dna提取 改良CTAB法 玻璃珠法 高通量测序
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