基于PI3K/AKT/GSK-3β信号通路探讨EA改善APP/PS1双转基因小鼠认知功能障碍的内在机制 被引量：3

1

作者 仲丽丽 路鑫 +7 位作者 于颖 赵秦妍 张静 刘彤慧 倪雪妍 车艳玲 吴丹 刘宏 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期90-98,共9页

目的探讨鞣花酸(ellagicacid,EA)对APP/PS1双转基因小鼠认知功能的影响,并基于磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/糖原合成酶激酶-3(PI3K/AKT/GSK-3β)信号通路探讨鞣花酸对双转基因小鼠海马氧化应激水平的调节机制。方法将32只SPF级6月龄APP/... 目的探讨鞣花酸(ellagicacid,EA)对APP/PS1双转基因小鼠认知功能的影响,并基于磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/糖原合成酶激酶-3(PI3K/AKT/GSK-3β)信号通路探讨鞣花酸对双转基因小鼠海马氧化应激水平的调节机制。方法将32只SPF级6月龄APP/PS1双转基因小鼠随机分为4组,即APP/PS1组、APP/PS1+EA组、APP/PS1+LY294002组、APP/PS1+EA+LY294002组,每组8只,另外选取8只SPF级C57BL/6J野生型小鼠(Wildtype)作为空白对照组,即WT组。APP/PS1+EA组给予50mg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃EA;APP/PS1+LY294002组予以1.5mg·kg^(-1)·d^(-1)腹腔注射PI3K抑制剂LY294002;APP/PS1+EA+LY294002组予以50mg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃EA,同时按1.5mg·kg^(-1)·d^(-1)腹腔注射LY294002;WT组和APP/PS1组于相同时间点灌胃等体积10%二甲基亚砜(DMSO)。每日给药1次,连续给药60天。Morris水迷宫检测小鼠学习和记忆能力,免疫组化、蛋白免疫印迹法检测PI3K、AKT、GSK-3β相关蛋白的表达,透射电镜观察小鼠海马组织超微结构变化。结果与WT组相比,其他四组的逃避潜伏期均增长(P<0.05),穿越平台次数明显减少(P<0.01);APP/PS1组、APP/PS1+LY294002组和APP/PS1+EA+LY294002组中的PI3K、AKT蛋白表达量显著降低(P<0.01),GSK-3β表达量显著升高(P<0.01);APP/PS1+EA组的PI3K表达量降低(P<0.05),AKT表达量显著降低(P<0.01),GSK-3β表达量升高(P<0.05);与WT组相比,APP/PS1组海马神经元细胞数目较少,线粒体结构破坏,大部分线粒体出现肿胀,线粒体的内膜和外模不完整,部分线粒体嵴消失,微管、微丝缠结,排列紊乱,而APP/PS1+EA组神经元细胞数较APP/PS1组增多,线粒体结构较清晰,可见清楚的线粒体嵴,线粒体轻度水肿。微管、微丝排列较整齐有序。结论鞣花酸改善AD模型小鼠的学习和记忆能力、减少海马神经元细胞损伤和凋亡,其作用机制可能是通过调节PI3K、AKT、GSK-3β等相关蛋白降低AD模型小鼠海马氧化应激水平。 展开更多

关键词 APP/PS1双转基因小鼠 阿尔茨海默病 鞣花酸 磷脂酰肌醇3-激酶 蛋白激酶B 糖原合成酶激酶-3

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17β-雌二醇对海马神经干细胞增殖和分化的影响及其机制

2

作者 杨英 赵亮 +2 位作者 由涌 许倩 杨振军 《吉林大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第2期317-324,共8页

目的:观察17β-雌二醇(17β-E2)对原代培养海马神经干细胞(NSCs)增殖和分化能力的影响,并阐明其可能的作用机制。方法:提取新生24 h内SD大鼠海马组织NSCs,分为对照组和17β-E2组。采用免疫荧光法检测2组NSCs中巢蛋白(Nestin)和5-乙炔基-... 目的:观察17β-雌二醇(17β-E2)对原代培养海马神经干细胞(NSCs)增殖和分化能力的影响,并阐明其可能的作用机制。方法:提取新生24 h内SD大鼠海马组织NSCs,分为对照组和17β-E2组。采用免疫荧光法检测2组NSCs中巢蛋白(Nestin)和5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)的表达情况,计算NSCs增殖率。Western blotting法检测NSCs中Nestin蛋白表达水平,流式细胞术检测不同细胞周期NSCs百分率。采用免疫荧光法检测NSCs分化后神经元标志物βⅢ-微管蛋白(βⅢ-tubulin)和星形胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达情况,计算神经元与星形胶质细胞的相对比值。Western blotting法检测NSCs分化后βⅢ-tubulin、GFAP以及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)、糖原合成激酶3β(GSK-3β)、磷酸化GSK-3β(p-GSK-3β)和β-连环蛋白(β-catenin)等PI3K/Akt/GSK-3β通路相关蛋白的表达水平。结果:免疫荧光法,2组NSCs中Nestin均阳性表达,与对照组比较,17β-E2组NSCs增殖率明显升高(P<0.01);Western blotting法,与对照组比较,17β-E2组NSCs中Nestin蛋白表达水平升高(P<0.05)。流式细胞术,与对照组比较,17β-E2组S期NSCs百分率明显升高(P<0.01)。免疫荧光法,与对照组比较,17β-E2组神经元与星形胶质细胞的相对比值明显升高(P<0.05)。Western blotting法,与对照组比较,17β-E2组NSCs分化后βⅢ-tubulin蛋白表达水平升高(P<0.05),GFAP蛋白表达水平降低(P<0.01),Akt、p-Akt、β-catenin和p-GSK-3β蛋白表达水平升高(P<0.05或P<0.01),GSK-3β蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:17β-E2可以促进NSCs增殖并促使其向神经元方向分化,其作用机制可能与PI3K/Akt/GSK-3β信号通路有关。 展开更多

关键词 17Β-雌二醇 神经干细胞 细胞增殖 细胞分化 磷脂酰肌醇3-激酶 蛋白激酶B 糖原合成酶激酶3β

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α-硫辛酸对血糖波动状态下2型糖尿病大鼠血管内皮细胞功能及PI3K/Akt/GSK-3β通路的影响 被引量：13

3

作者 王景尚 孙明月 +1 位作者 黄烨 殷惠军 《中国全科医学》 CAS 北大核心 2017年第24期2965-2971,共7页

目的观察α-硫辛酸(α-LA)对血糖波动状态下2型糖尿病(T2DM)大鼠血管内皮细胞功能及磷脂酰肌醇3磷酸激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/糖原合酶激酶3β(GSK-3β)通路的影响,初步探讨其作用机制。方法 2013年7—12月,选取50只清洁级雄性Sprague... 目的观察α-硫辛酸(α-LA)对血糖波动状态下2型糖尿病(T2DM)大鼠血管内皮细胞功能及磷脂酰肌醇3磷酸激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/糖原合酶激酶3β(GSK-3β)通路的影响,初步探讨其作用机制。方法 2013年7—12月,选取50只清洁级雄性Sprague Dawley(SD)大鼠,采用普通饲料适应性喂养2周后,采用随机数字表法抽取10只作为正常组(NOR组),余下40只大鼠建造T2DM模型,给予高脂饲料6周后,一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)35 mg/kg,然后给予普通饲料2周,并于第10周连续尾静脉采血检测空腹血糖(FBG),计算空腹血糖变异系数(FBG-CV),以FBG>16.7 mmol/L视为造模成功,共造模成功T2DM大鼠36只;NOR组始终给予普通饲料,并在相同时间点一次性腹腔注射等体积的柠檬酸-柠檬酸三钠缓冲液,且运用相同方法检测7次FBG,并计算FBG-CV。将造模成功的T2DM大鼠,以FBG-CV>2倍NOR组FBG-CV为波动高糖组(BHG组,24只,选取FBG-CV较大的20只进行实验),以NOR组FBG-CV<FBG-CV≤2倍NOR组FBG-CV为稳定高糖组(SHG组,12只,选取FBGCV较小的10只进行实验)。采用随机数字表法将BHG组大鼠分为α-LA组(10只)和波动高糖对照组(FHG组,10只)。α-LA组给予高脂饲料,灌服α-LA混悬液;FHG组给予高脂饲料,灌服等体积蒸馏水;NOR组给予普通饲料,灌服等体积蒸馏水;SHG组给予高脂饲料,灌服等体积蒸馏水。干预8周后,检测各组大鼠FBG、空腹血浆胰岛素(FINS)水平,血管内皮细胞损伤指标[肝细胞生长因子(HGF)、一氧化氮(NO)]、氧化应激指标[超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、糖基化终末产物(AGEs)]水平,PI3K/Akt/GSK-3β通路蛋白[Akt、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、GSK-3β、磷酸化糖原合酶激酶3β(p-GSK-3β)]水平及Akt、GSK-3β激活程度(p-Akt/Akt、pGSK-3β/GSK-3β)。结果 SHG组、FHG组大鼠体质量、FINS水平低于NOR组,FBG水平高于NOR组(P<0.05);α-LA组大鼠体质量低于NOR组,FBG水平高于NOR组(P<0.05);α-LA组大鼠FBG水平低于FHG组,FINS水平高于FHG组(P<0.05)。SHG组、FHG组大鼠HGF、NO、MDA、AGEs水平高于NOR组,SOD水平低于NOR组(P<0.05);SHG组、α-LA组大鼠HGF、NO、MDA、AGEs水平低于FHG组,SOD水平高于FHG组(P<0.05);α-LA组大鼠SOD水平低于NOR组,MDA水平高于NOR组(P<0.05)。SHG组、FHG组大鼠p-Akt水平、p-GSK-3β水平、p-Akt/Akt、p-GSK-3β/GSK-3β低于NOR组(P<0.05);α-LA组大鼠p-Akt水平、p-Akt/Akt低于NOR组,GSK-3β水平、p-GSK-3β水平高于NOR组(P<0.05);SHG组大鼠p-Akt水平、p-Akt/Akt高于FHG组(P<0.05);α-LA组大鼠p-Akt水平、GSK-3β水平、p-GSK-3β水平、p-Akt/Akt、p-GSK-3β/GSK-3β高于FHG组(P<0.05)。结论α-LA对血糖波动状态下T2DM大鼠血管内皮细胞功能具有保护效应,其机制与α-LA改善氧化应激、调控PI3K/Akt/GSK-3β通路蛋白表达相关。 展开更多

关键词 糖尿病 2型 硫辛酸 血糖 内皮细胞 磷酸肌醇3-激酶 蛋白激酶类 糖原合成酶激酶类

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糖尿病大鼠脑GSK-3与PP-2A失调诱导tau蛋白过度磷酸化 被引量：6

4

作者 曲忠森 赵永波 +1 位作者 刘文文 王建枝 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第8期789-794,共6页

探讨胰岛素缺乏的糖尿病大鼠皮层糖原合酶激酶-3(GSK-3)及蛋白磷酯酶-2A(PP-2A)变化及其对tau蛋白磷酸化的作用.用链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)建立胰岛素缺乏的糖尿病大鼠模型,用放射性配体结合实验检测了GSK-3和PP-2A的活性,蛋白... 探讨胰岛素缺乏的糖尿病大鼠皮层糖原合酶激酶-3(GSK-3)及蛋白磷酯酶-2A(PP-2A)变化及其对tau蛋白磷酸化的作用.用链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)建立胰岛素缺乏的糖尿病大鼠模型,用放射性配体结合实验检测了GSK-3和PP-2A的活性,蛋白质印迹检测了tau蛋白的磷酸化水平及PP-2A的表达.结果提示:在糖尿病大鼠皮层,GSK-3活性升高,PP-2A活性及表达降低,tau蛋白在Ser198/Ser199/Ser202和Ser396/Ser404位点磷酸化.应用GSK-3的选择性抑制剂Li2CO3后,GSK-3活性降低,PP-2A活性及表达恢复,tau蛋白在Ser198/Ser199/Ser202和Ser396/Ser404位点磷酸化水平降低.研究提示:糖尿病大鼠皮层GSK-3升高可能抑制PP-2A的活性,升高的GSK-3和降低的PP-2A协同促进tau蛋白的磷酸化. 展开更多

关键词 糖尿病 糖原合酶激酶-3 蛋白磷酸酯酶-2A TAU蛋白 Li2CO3

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红芪多糖干预内毒素诱导的葡萄膜炎模型中糖原合成酶3-β的表达及其作用机制 被引量：10

5

作者 杨硕 余朔 +3 位作者 刘新丽 于晋懿 张孝生 卢弘 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2019年第2期123-128,共6页

目的通过观察红芪多糖(radix hedysari polysaccharide,HPS)和氯化锂(Li Cl)对霍乱弧菌内毒素(lipopolysaccharide,LPS)诱导的葡萄膜炎的抗炎作用,探讨糖原合成酶3-β(glycogen synthase kinase 3-β,GSK3-β)在葡萄膜炎中的作用机制。... 目的通过观察红芪多糖(radix hedysari polysaccharide,HPS)和氯化锂(Li Cl)对霍乱弧菌内毒素(lipopolysaccharide,LPS)诱导的葡萄膜炎的抗炎作用,探讨糖原合成酶3-β(glycogen synthase kinase 3-β,GSK3-β)在葡萄膜炎中的作用机制。方法200只Wistar大鼠随机分为4组(n=50):空白对照组(negative control,NC)组、LPS诱导的葡萄膜炎组(LPS组)、HPS治疗组(LPS+HPS组)和Li Cl治疗组(LPS+Li Cl组)。LPS+HPS组腹腔注射400 mg·kg^(-1)HPS,LPS+Li Cl组腹腔注射0. 5 mol·L^(-1)的Li Cl 100μL,对照组和LPS组注射等量PBS。2 h后,LPS组、LPS+HPS组和LPS+Li Cl组每只大鼠足底注射0. 1 mL LPS注射液,NC组注射等体积的PBS。应用临床评分、裂隙灯照相、HE染色等检查评价炎性反应程度; Western blot和RT-PCR检测虹膜睫状体GSK3-β和核因子-κB(neuclear factor-κB,NF-κB) p65表达水平;酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent as-say,ELISA)检测大鼠前房房水中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素10(interleukin-10,IL-10)、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)等细胞因子的水平。结果 LPS注射后6 h、12 h、24 h、48 hLPS组的炎症评分分别为(2. 3±0. 2)分、(3. 6±0. 7)分、(3. 9±0. 3)分、(3. 2±0. 4)分,显著高于其他三组(均为P <0. 05),而LPS+HPS组、HPS+Li Cl组和NC组之间差异均无统计学意义(均为P> 0. 05),HPS或Li Cl预处理对LPS诱导的大鼠葡萄膜炎产生了抗炎效果。经过HPS或Li Cl处理,LPS诱导的葡萄膜炎大鼠虹膜睫状体磷酸化GSK3-β水平上调,NF-κB p65表达明显被抑制,前房房水中抗炎因子IL-10水平上调,而TNF-α、IL-6、IL-1β等炎症细胞因子受到抑制。结论 HPS或Li Cl预处理可以抑制LPS诱导的大鼠葡萄膜炎炎性反应,这一抗炎作用与GSK3-β的抑制性磷酸化密切相关。 展开更多

关键词 内毒素 葡萄膜炎 糖原合成酶3-β 虹膜睫状体 红芪多糖 氯化锂

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脂多糖预处理对GSK-3功能活性的影响 被引量：3

6

作者 陈太忠 张艳 +3 位作者 熊弢 徐发良 龚建平 余正 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第13期1304-1309,共6页

目的探讨脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)耐受和糖原合成酶激酶-3(glycogen synthase kinase 3,GSK-3)抑制剂对其功能活性的影响。方法雄性健康SD大鼠36只,随机数字表法分为对照组(NC)、LPS耐受组(ET)和LiCl处理组(LiCl),每组12只;LPS... 目的探讨脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)耐受和糖原合成酶激酶-3(glycogen synthase kinase 3,GSK-3)抑制剂对其功能活性的影响。方法雄性健康SD大鼠36只,随机数字表法分为对照组(NC)、LPS耐受组(ET)和LiCl处理组(LiCl),每组12只;LPS耐受组(ET)于第1、2、3天接受0.015、0.030和0.060 mg/kg LPS腹腔注射;LiCl处理组(LiCl)同样时间点腹腔注射2.5 mol/L LiCl 0.25 ml,饮水含3 mmol/L LiCl;对照组每天腹腔注射磷酸盐缓冲液(PBS)0.25 ml;处理结束后每组再按是否接受致死量LPS(10 mg/kg)攻击而分为LPS攻击前和LPS攻击后2个亚组,LPS攻击后组按10 mg/kg腹腔注射LPS,LPS攻击前亚组等体积的PBS腹腔注射,12 h后取材。按照[γ-32P]放射性掺入法、用液体闪射仪检测肝组织GSK-3激酶总活性,RT-PCR法检测GSK-3α、GSK-3βmRNA表达,Western blot法分析GSK-3α/β、pGSK-3α/β蛋白表达,考马斯亮蓝法测定Calpain活性,激光共聚焦显微镜下观察GSK-3亚细胞定位状况。结果 LPS攻击后ET组GSK-3活性显著低于NC组LPS攻击前水平[(1 311±57),P=0.023 5],其他各组在LPS攻击前后差异无显著性。LPS耐受、LiCl预处理和LPS攻击未导致GSK-3α和β的mRNA表达变化和GSK-3α和β的总蛋白表达变化(P>0.05)。LPS攻击前,NC、ET和LiCl组GSK-3α磷酸化无显著增加(P>0.05),但LPS攻击后,LiCl组GSK-3α磷酸化显著增加[(3.07±0.62),P<0.05]。LPS攻击前,ET和LiCl组GSK-3β磷酸化比NC组显著增加[ET(1.49±0.26);LiCl(2.05±0.43),P<0.05];但LPS攻击后,只有LiCl组GSK-3β磷酸化显著增加[(1.54±0.32),P<0.05]。同时,LPS耐受动物经大剂量LPS攻击后肝组织GSK-3α严重降解。LPS攻击导致各组与LPS攻击前比较Calpain显著升高[NC(2.78±0.53);ET(2.45±0.22);LiCl(2.39±0.86),P<0.05],但组间比较没有显著差异(P>0.05)。GSK-3亚细胞定位分析,LPS耐受时胞核内聚集的GSK-3减少,并主要集中于细胞质内;在不同浓度LiCl刺激下,胞核GSK-3也可减少,但不显著;在大剂量LPS攻击下,胞核GSK-3减少,主要集中于细胞质内和胞核周围。结论 LPS耐受和GSK-3抑制剂LiCl预处理均可导致GSK-3功能活性改变,但影响和机制并不完全相同,LPS耐受的机制可能与抑制GSK-3激酶活性、诱导GSK-3磷酸化、促进GSK-3α裂解并诱导GSK-3从胞核向细胞质转移有关。 展开更多

关键词 脂多糖 内毒素耐受 糖原合成酶激酶-3 肝损伤

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DNMT1、β-catenin和P-GSK-3β在结肠癌组织中的表达 被引量：9

7

作者 魏永长 贺大林 +1 位作者 赵佳辉 白纪蓉 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期100-102,114,共4页

目的探讨DNA甲基转移酶1(DNMT1)、β-连环素(β-catenin)和磷酸化糖原合成酶激酶(P-GSK-3β)在结肠癌中的表达及其与肿瘤分化程度和淋巴结转移等的关系。方法采用荧光定量PCR检测62例原发性结肠癌患者癌组织及21例正常大肠黏膜组织中DN... 目的探讨DNA甲基转移酶1(DNMT1)、β-连环素(β-catenin)和磷酸化糖原合成酶激酶(P-GSK-3β)在结肠癌中的表达及其与肿瘤分化程度和淋巴结转移等的关系。方法采用荧光定量PCR检测62例原发性结肠癌患者癌组织及21例正常大肠黏膜组织中DNMT1、β-catenin和GSK的表达,采用Westernblot方法验证蛋白的表达情况。结果结肠癌组织中DNMT1、β-catenin和P-GSK-3β表达程度显著高于正常组织。DNMT1在低分化程度的癌组织间相对含量高,β-catenin在肿瘤的不同分化程度及有无淋巴结转移的癌组织间相对含量的差异有统计学意义,而P-GSK-3β的组间比较无显著性差异。结论DNMT1、β-catenin和P-GSK-3β的活性改变与结肠癌有一定的相关性。 展开更多

关键词 DNA甲基转移酶1 磷酸化糖原合成酶激酶 Β-连环素 结肠癌

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在体转染GSK-3β引起tau蛋白在PHF-1位点的过度磷酸化(英文) 被引量：3

8

作者 李宏莲 王少辉 +3 位作者 廖晓梅 王小川 王群 王建枝 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期506-510,共5页

目的:探讨在体转染GSK-3β对tau蛋白在PHF-1位点磷酸化的影响。方法:21只大鼠随机分为GSK-3β转染组、空载体组和空白对照组3组:0.1μg/3μLGSK-3β-HA质粒和空载体分别注射入大鼠大脑,对照组大鼠不作处理,应用免疫印迹和免疫组织化学检... 目的:探讨在体转染GSK-3β对tau蛋白在PHF-1位点磷酸化的影响。方法:21只大鼠随机分为GSK-3β转染组、空载体组和空白对照组3组:0.1μg/3μLGSK-3β-HA质粒和空载体分别注射入大鼠大脑,对照组大鼠不作处理,应用免疫印迹和免疫组织化学检测GSK-3β的表达,并应用磷酸化位点特异性抗体PHF-1检测tau蛋白的磷酸化水平。结果:转染48h后,GSK-3β-HA表达在转染组;并且在转染区域的神经元内异常过度磷酸化tau蛋白(在PHF-1表位)聚积;异常过度磷酸化的tau蛋白与GSK-3β共定位。结论:在体转染GSK-3β引起导致神经退行性疾病发生机制相关的tau蛋白异常过度磷酸化,这进一步证明了GSK-3β是tau蛋白异常过度磷酸化的一个关键激酶,并且可作为一个防治与tau相关的神经退行性疾病的靶点。 展开更多

关键词 糖原合成酶激酶3 TAU蛋白质类 磷酸化

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镇肝熄风汤对帕金森病肝阳上亢证大鼠中脑Akt和GSK-3β磷酸化的影响 被引量：12

9

作者 王晓丽 孙影 +4 位作者 朱兰芹 綦艳秋 张丽华 张红宇 董妙先 《世界科学技术-中医药现代化》 2016年第8期1374-1378,共5页

目的:本研究主要观察镇肝熄风汤对帕金森病肝阳上亢证大鼠中脑Akt及其下游靶分子GSK-3β磷酸化的影响。方法:105只大鼠随机分为对照组、假手术组、模型组、镇肝熄风汤高、中、低剂量组和司来吉兰组。采用6-OHDA中脑微量注射合并附子汤... 目的:本研究主要观察镇肝熄风汤对帕金森病肝阳上亢证大鼠中脑Akt及其下游靶分子GSK-3β磷酸化的影响。方法:105只大鼠随机分为对照组、假手术组、模型组、镇肝熄风汤高、中、低剂量组和司来吉兰组。采用6-OHDA中脑微量注射合并附子汤灌胃制备帕金森病肝阳上亢证模型,采用分光光度法检测中脑组织caspase-3活性,Western blot检测脑组织Akt和GSK-3β磷酸化水平。结果:与假手术组比较,帕金森病肝阳上亢证大鼠中脑caspase-3活性明显增强,Akt和GSK-3β磷酸化水平明显升高,而镇肝熄风汤组中脑caspase-3活性明显减弱,Akt和GSK-3β磷酸化水平明显升高。结论:镇肝熄风汤能够减弱帕金森病肝阳上亢证大鼠中脑caspase-3活性,其机制可能与Akt活化和GSK-3β失活有关。 展开更多

关键词 肝阳上亢证 镇肝熄风汤 帕金森病 半胱天冬酶3 糖原合成酶激酶-3β

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GSK-3与精神障碍的关系 被引量：3

10

作者 杨静 李俊发 赵丽 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期250-254,共5页

糖原合成酶激酶3(GSK-3)是一种丝/苏氨酸蛋白激酶,通过Wnt/β-catenin等多条信号通路来调节机体的代谢、生长发育和凋亡等过程,是机体生存必不可少的物质。大量研究表明,GSK-3调节异常可以激活特定细胞、通路和环路,从而诱发精神障碍,... 糖原合成酶激酶3(GSK-3)是一种丝/苏氨酸蛋白激酶,通过Wnt/β-catenin等多条信号通路来调节机体的代谢、生长发育和凋亡等过程,是机体生存必不可少的物质。大量研究表明,GSK-3调节异常可以激活特定细胞、通路和环路,从而诱发精神障碍,如双向情感障碍、抑郁症、孤独症和精神分裂症等。抑制GSK-3活性是精神疾病治疗方法的一个重要组分。本文对近年来国内外有关GSK-3在精神疾病中的作用机制予以综述,以期为临床治疗提供依据。 展开更多

关键词 糖原合成酶激酶3 精神疾病 发病机制 治疗

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脂多糖预处理导致的糖原合成酶激酶-3抑制对肝糖原的影响和机制 被引量：2

11

作者 陈小乐 龚建平 徐发良 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期201-205,共5页

目的探讨脂多糖预处理时糖原合成酶激酶3(glycogen synthase kinase-3,GSK-3)功能活性的变化及其对肝组织糖原代谢的影响和机制。方法雄性SD大鼠随机分为正常对照、脂多糖预处理和GSK-3抑制剂氯化锂预处理组,分别进行相应处理后再接受... 目的探讨脂多糖预处理时糖原合成酶激酶3(glycogen synthase kinase-3,GSK-3)功能活性的变化及其对肝组织糖原代谢的影响和机制。方法雄性SD大鼠随机分为正常对照、脂多糖预处理和GSK-3抑制剂氯化锂预处理组,分别进行相应处理后再接受大剂量脂多糖(10 mg/kg)攻击以建立脂多糖诱导的急性肝损伤模型;采用PAS染色法观察肝组织糖原聚集,用试剂盒法定量检测肝组织糖原含量,以Western Blot法半定量分析GSK-3的蛋白表达和抑制性磷酸化水平,采用考马斯亮兰比色法测定肝组织钙依赖蛋白酶的活性。结果尽管大剂量脂多糖攻击后各组动物肝组织糖原含量组间比较均无显著差异(P>0.05),但均较攻击前有显著降低(P<0.05),且脂多糖和氯化锂预处理均可导致肝组织糖原含量增加(P<0.05);尽管诱导脂多糖预处理并未改变GSK-3的蛋白表达水平(P>0.05),但导致GSK-3β抑制性磷酸化(P<0.05)和GSK-3α不完全裂解;大剂量脂多糖攻击后肝组织钙依赖蛋白酶活性较前显著升高(P<0.05),但组间比较无显著差异(P>0.05)。结论脂多糖预处理导致GSK-3β抑制性磷酸化和GSK-3α不完全裂解,促进肝组织糖原合成和聚集,但不影响钙依赖蛋白酶活性,有利于增加肝组织糖原储备并可能在遭受大剂量脂多糖攻击时提供能量需求。 展开更多

关键词 糖原合成酶激酶-3 糖原代谢 脂多糖 肝损伤 氯化锂 器官保护 glycogen synthase kinase-3

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ILK siRNA对高糖刺激的人肾小管上皮细胞GSK-3β及β-catenin表达的影响 被引量：2

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作者 闫喆 姚芳 +3 位作者 张丽萍 郝军 吴海江 段惠军 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期503-508,共6页

目的:探讨高糖诱导肾小管上皮细胞转分化中整合素连接激酶小干扰RNA(ILK siRNA)对糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)磷酸化和β-连环蛋白(β-catenin)核内表达的影响及意义。方法:体外培养人近端肾小管上皮细胞系HKC,分为正常对照组(NG)、高糖... 目的:探讨高糖诱导肾小管上皮细胞转分化中整合素连接激酶小干扰RNA(ILK siRNA)对糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)磷酸化和β-连环蛋白(β-catenin)核内表达的影响及意义。方法:体外培养人近端肾小管上皮细胞系HKC,分为正常对照组(NG)、高糖组(HG)、高糖+阴性转染对照组(HG+HK)和高糖+ILK siRNA组(HG+ILK siRNA)。倒置荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达。RT-PCR及Western blotting检测ILK mRNA及蛋白表达水平;免疫细胞化学检测磷酸化GSK-3β(p-GSK-3β)和β-catenin表达。Western blotting检测总GSK-3β、pGSK-3β、核β-catenin、总β-catenin、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达水平。结果:(1)倒置荧光显微镜下可见绿色荧光蛋白表达,证实构建的siRNA重组质粒成功转染HKC细胞;(2)与HG和HG+HK组相比,HG+ILK siRNA组ILK mRNA及蛋白水平下降,但较NG组表达仍高;(3)HG+ILK siRNA组ILK基因沉默后,p-GSK-3β与核β-catenin蛋白表达较HG及HG+HK组均下降,但较NG组表达仍高。而总GSK-3β与总β-catenin在各组表达无明显差异。结论:ILK、GSK-3β和β-catenin可能参与了高糖介导的肾小管上皮细胞转分化过程。ILK可能通过调节Wnt/β-catenin途径下游效应蛋白GSK-3β和β-catenin的表达而促使肾小管上皮细胞转分化。 展开更多

关键词 糖尿病肾病 上皮-间充质转化 整合素连接激酶 小干扰RNA 糖原合成酶激酶313 β-连环蛋白

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糖原合酶激酶-3,一个参与多种信号通路的重要调节因子 被引量：3

13

作者 宾晓芸 姜明国 翁汉荣 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1120-1127,共8页

糖原合酶激酶-3(glycogen synthase kinase-3,GSK-3)是一种多功能的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,在蛋白质合成、信号传递、细胞增殖、细胞分化、神经功能、肿瘤形成及胚胎发育等众多细胞进程中均扮演重要的角色.GSK-3能够使多种底物发生磷酸... 糖原合酶激酶-3(glycogen synthase kinase-3,GSK-3)是一种多功能的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,在蛋白质合成、信号传递、细胞增殖、细胞分化、神经功能、肿瘤形成及胚胎发育等众多细胞进程中均扮演重要的角色.GSK-3能够使多种底物发生磷酸化,并参与胰岛素、Wnt及Hedgehog等多个信号通路的调控.GSK-3抑制剂在信号通路中能有效地抑制病理情况下GSK-3活性的异常增高,达到治疗的目的.GSK-3的抑制剂将作为一种潜在的药物对治疗糖尿病、阿尔海默茨症、肿瘤等疾病发挥效用. 展开更多

关键词 糖原合酶激酶-3 胰岛素 WNT HEDGEHOG 调控

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糖原合成酶激酶-3β在双相情感性精神障碍发病与治疗中的作用研究进展 被引量：1

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作者 崔颖 薛瑞 +1 位作者 张有志 洪浩 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期362-368,共7页

双相情感性精神障碍(BD)是一种严重的精神疾病,具有高患病率、高致残率和高致死率等特点。糖原合成酶激酶-3(GSK-3)是普遍存在于真核细胞内的一种多功能丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,其作用主要包括调节糖原的合成代谢、细胞的分化与增殖以及... 双相情感性精神障碍(BD)是一种严重的精神疾病,具有高患病率、高致残率和高致死率等特点。糖原合成酶激酶-3(GSK-3)是普遍存在于真核细胞内的一种多功能丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,其作用主要包括调节糖原的合成代谢、细胞的分化与增殖以及基因的表达。它参与多条细胞信号传导通路,通过磷酸化调节细胞内许多信号蛋白、结构蛋白和转录因子,进而影响神经元的存活及可塑性。从基因多态性和临床研究发现,GSK-3β可能与BD发生相关。作为GSK-3β抑制剂,锂盐是一种有效的BD治疗药物,以GSK-3β为靶标研发的小分子抑制剂也是BD治疗的热点。综上所述,GSK-3β可能是治疗BD的潜在靶标。 展开更多

关键词 双相情感性精神障碍 糖原合成酶激酶-3 靶标 锂盐 小分子抑制剂

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花生黄曲霉抗性与糖原合成酶激酶-3的关系 被引量：1

15

作者 严海燕 宗成志 +1 位作者 包文志 单世华 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2011年第5期1-4,共4页

前期研究证明糖原合成酶激酶(GSK3β)在花生黄曲霉敏感品种中上调表达。本研究对花生黄曲霉抗性品种和易感品种发育种子表达的GSK3进行了生物信息学和定量PCR的分析验证。结果表明,在抗性品系中,GSK3β基因在小果时期上调表达。由于GSK... 前期研究证明糖原合成酶激酶(GSK3β)在花生黄曲霉敏感品种中上调表达。本研究对花生黄曲霉抗性品种和易感品种发育种子表达的GSK3进行了生物信息学和定量PCR的分析验证。结果表明,在抗性品系中,GSK3β基因在小果时期上调表达。由于GSK3β是油菜类甾醇信号传导的负调控因子,在细胞延长中起着抑制作用。因此推测GSK3β在花生果实发育中是种子和果实大小的抑制因子,与黄曲霉抗性有间接或直接的关系。 展开更多

关键词 花生 糖原合成酶激酶-3 生物信息学 黄曲霉抗性 果实发育

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GSK3β促进TGF-β1诱导的肾小管上皮HK-2细胞纤维化 被引量：5

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作者 赵凯 陈姗 +2 位作者 龚如军 黎松 何凤田 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第19期1921-1924,共4页

目的阐明GSK3β对于肾脏小管间质纤维化的作用。方法以TGF-β1诱导的体外肾小管间质纤维化模型为研究对象,以GSK3β特异抑制剂LiCl处理细胞和不同GSK3β表达质粒(野生型GSK3β表达质粒GSK3β-WT;第9位点上丝氨酸突变为丙氨酸,由此不能... 目的阐明GSK3β对于肾脏小管间质纤维化的作用。方法以TGF-β1诱导的体外肾小管间质纤维化模型为研究对象,以GSK3β特异抑制剂LiCl处理细胞和不同GSK3β表达质粒(野生型GSK3β表达质粒GSK3β-WT;第9位点上丝氨酸突变为丙氨酸,由此不能再被磷酸化失活而具有固有活性的GSK3β突变质粒GSK3β-S9A;第85、86位点上赖氨酸突变为丙氨酸、失去激酶活性的GSK3β突变质粒GSK3β-KD)转染细胞,观察肾脏纤维化的标志性分子纤维连接素蛋白(fibronectin,FN)表达水平的改变,以及对TGF-β/Smad信号通路的作用。结果 LiCl增加HK-2细胞GSK3β的磷酸化,抑制GSK3β的活性,同时降低了细胞基础水平和TGF-β1诱导的FN表达。过表达的GSK3β-WT增强TGF-β1诱导的FN表达,而这种效应在GSK3β-S9A转染细胞更为显著。过表达GSK3β-KD抑制TGF-β1诱导的FN表达。分析对TGF-β/Smad信号通路的作用,LiCl可以抑制TGF-β1诱导的Smad3磷酸化,而对Smad2磷酸化水平无影响。同时,LiCl也不改变Smad3的总蛋白表达。结论 GSK3β通过TGF-β1/Smad3信号通路促HK-2细胞纤维化,抑制GSK3β可以抗纤维化。 展开更多

关键词 肾脏纤维化 糖原合成酶激酶3 转化生长因子β1 Smad3蛋白质

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内毒素耐受导致的GSK-3抑制对急性内毒素性肝损伤的保护机制

17

作者 徐发良 陈小乐 +3 位作者 朱宁生 熊忠讯 于峰 黄春 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第16期1698-1703,共6页

目的探讨内毒素(lipopolysaccharide,LPS)耐受导致的糖原合成酶激酶-3(glycogen synthase kinase-3,GSK-3)活性抑制对急性内毒素性肝损伤产生保护效应的潜在机制。方法建立LPS和GSK-3抑制剂氯化锂(LiCl)预处理的SD大鼠模型,采用半定量RT... 目的探讨内毒素(lipopolysaccharide,LPS)耐受导致的糖原合成酶激酶-3(glycogen synthase kinase-3,GSK-3)活性抑制对急性内毒素性肝损伤产生保护效应的潜在机制。方法建立LPS和GSK-3抑制剂氯化锂(LiCl)预处理的SD大鼠模型,采用半定量RT-PCR检测肝组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-10(IL-10)mRNA表达水平,以专用试剂盒检测代表肝组织中性粒细胞浸润程度的髓过氧化物酶(MPO)活性;用密度梯度离心法分离Kupffer细胞,建立LPS耐受和GSK-3抑制剂(LiCl和胰岛素)预处理的Kupffer细胞模型,用中性红法测定细胞吞噬活性;采用激光共聚焦显微镜和Western blot实验观察Kupffer细胞核因子-κB(NF-κB)p65的亚细胞定位和核转位情况。结果 LPS耐受和GSK-3抑制剂LiCl预处理均可减少大剂量LPS攻击导致的肝组织TNF-αmRNA上调表达(P<0.05)、促进IL-10 mRNA上调表达(P<0.05),减少LPS攻击导致的MPO活性升高(P<0.05);LPS耐受和GSK-3抑制剂(LiCl和胰岛素)均能增强Kupffer细胞吞噬活性(P<0.05);LPS耐受和GSK-3抑制剂LiCl预处理均可减少大剂量LPS导致的NF-κB p65核转位(P<0.05)。结论 LPS耐受导致的GSK-3功能活性抑制,可能通过对NF-kappaB p65核转位、炎症细胞因子分泌、中性粒细胞浸润和Kupffer细胞吞噬活性等下游事件产生影响,从而保护急性内毒素性肝脏损伤。 展开更多

关键词 糖原合成酶激酶-3 脂多糖 肝脏 氯化锂 炎症性损伤 器官保护

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糖原合成酶激酶-3抑制剂在骨质疏松性疾病治疗中的作用研究进展

18

作者 李理 李百川 +3 位作者 王仁崇 唐经励 覃永保 李兵 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1188-1194,共7页

骨质疏松症是一种全身性代谢性疾病,其主要特征为骨密度降低,易引发骨质疏松性骨折等疾病。糖原合成酶激酶-3抑制剂能够抑制糖原合成酶激酶-3活性,从而促进Wnt信号转导通路及其下游基因、蛋白的表达,主要通过促进骨髓间充质干细胞、成... 骨质疏松症是一种全身性代谢性疾病,其主要特征为骨密度降低,易引发骨质疏松性骨折等疾病。糖原合成酶激酶-3抑制剂能够抑制糖原合成酶激酶-3活性,从而促进Wnt信号转导通路及其下游基因、蛋白的表达,主要通过促进骨髓间充质干细胞、成骨细胞增殖和分化的同时抑制破骨细胞活性,共同调节骨细胞微环境来实现对骨质疏松性疾病的治疗。现就糖原合成酶激酶-3抑制剂在骨质疏松性疾病治疗过程中的作用研究进展做一综述。 展开更多

关键词 骨质疏松症 糖原合成酶激酶-3抑制剂 WNT信号转导通路

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ATP竞争性GSK-3抑制剂对人食管鳞癌细胞多药耐药的影响

19

作者 甘思远 钟雪云 +1 位作者 谢思明 罗枫 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期1219-1223,共5页

目的:研究ATP竞争性糖原合成酶激酶3(GSK-3)抑制剂6-溴靛玉红-3'-肟(BIO)作用于食管鳞癌细胞后,对ATP结合盒(ABC)转运蛋白——P-糖蛋白(P-gp)和多药耐药相关蛋白2(MRP2)、凋亡抑制蛋白Bcl-2以及β-catenin表达的影响,探讨它们表达... 目的:研究ATP竞争性糖原合成酶激酶3(GSK-3)抑制剂6-溴靛玉红-3'-肟(BIO)作用于食管鳞癌细胞后,对ATP结合盒(ABC)转运蛋白——P-糖蛋白(P-gp)和多药耐药相关蛋白2(MRP2)、凋亡抑制蛋白Bcl-2以及β-catenin表达的影响,探讨它们表达的相互关系,以及对细胞内游离ATP水平和P-gp、MRP2转运功能的影响,进而初步探讨GSK-3抑制剂对食管鳞癌细胞多药耐药的影响。方法:BIO作用于食管鳞癌EC-109细胞后,运用免疫荧光细胞化学法、流式细胞术以及ATP检测试剂盒分别检测细胞内MRP2、P-gp、β-cate-nin和Bcl-2表达的改变、ABC转运蛋白的转运功能以及细胞内游离ATP水平的改变。结果:BIO作用食管鳞癌EC-109细胞后,加药组与对照组相比,β-catenin和Bcl-2在胞浆中的表达增强,并且β-catenin出现胞核内累积,MRP2在胞浆和胞膜中表达增强,P-gp在胞浆和胞膜中表达减弱;细胞内游离ATP水平增加;ABC转运蛋白的转运功能增强。结论:BIO处理食管鳞癌细胞后增强了细胞的多药耐药。 展开更多

关键词 食管肿瘤 多药耐药 糖原合成酶激酶3

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GSK-3及P70S6K在胰岛素抵抗大鼠肌肉中的表达及意义

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作者 王艳军 赵晟 刘国良 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1133-1135,共3页

目的:观察饮食诱导的胰岛素抵抗(IR)大鼠骨骼肌中糖原合成酶-3(GSK-3)及核糖体S6蛋白激酶(P70S6K)的表达及变化情况,并探讨GSK-3和P70S6K在IR发生中的作用及意义。方法:将40只4周龄Wistar大鼠随机分为正常对照组、高糖组、高脂组、高脂... 目的:观察饮食诱导的胰岛素抵抗(IR)大鼠骨骼肌中糖原合成酶-3(GSK-3)及核糖体S6蛋白激酶(P70S6K)的表达及变化情况,并探讨GSK-3和P70S6K在IR发生中的作用及意义。方法:将40只4周龄Wistar大鼠随机分为正常对照组、高糖组、高脂组、高脂高糖饲养组,喂养8周后用高胰岛素-正葡萄糖钳夹技术(钳夹试验)对大鼠进行胰岛素敏感性的评估,采用Westernblot法检测各组大鼠骨骼肌中GSK-3及P70S6K的含量,同时测定各组大鼠的附睾脂肪垫重量、血糖(BG)、胰岛素(INS)、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)及游离脂肪酸(FFA)水平、超敏C反应蛋白(hsCRP)。结果:高脂高糖组、高脂组大鼠产生明显IR,体重增加(P<0.01),以附睾脂肪垫的重量增加更为显著(P<0.01),TG、TC及FFA水平、hsCRP增加(P<0.01),GSK-3、P70S6K在IR大鼠肌肉中的表达明显升高。结论:高脂高糖饮食可诱导大鼠产生IR,IR大鼠的hsCRP、TG、TC及FFA水平明显增高,大鼠产生IR与炎症反应有关,GSK-3、P70S6K在IR大鼠中的表达明显升高,在胰岛素信号传导中起负相调节作用。 展开更多

关键词 糖原合成酶3(GSK-3) 核糖体S6蛋白激酶(P70S6K) 胰岛素抵抗(IR) 信号传导

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