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根皮素通过抑制FAK改善肾小管间质纤维化
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作者 程新瑶 曹文洁 +5 位作者 钱永帅 刘丽 余惠凡 王晓菲 方梦淇 李飞 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期181-189,共9页
目的探究根皮素能否通过抑制黏着斑激酶(FAK)改善肾小管间质纤维化。方法肾小管上皮细胞NRK-52E经TGF-β1(10 ng/mL)诱导建立肾纤维化细胞模型,并构建单侧输尿管梗阻(UUO)肾间质纤维化小鼠模型。通过免疫荧光及Western blot法检测细胞... 目的探究根皮素能否通过抑制黏着斑激酶(FAK)改善肾小管间质纤维化。方法肾小管上皮细胞NRK-52E经TGF-β1(10 ng/mL)诱导建立肾纤维化细胞模型,并构建单侧输尿管梗阻(UUO)肾间质纤维化小鼠模型。通过免疫荧光及Western blot法检测细胞及小鼠肾脏组织中α-SMA、FN的蛋白表达水平,明确根皮素体内外抗肾纤维化作用;检测实验小鼠血清中肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)水平,分析根皮素的肾保护作用;以苏木精-伊红(HE)染色和Masson染色观察根皮素对UUO小鼠肾脏病理学改变和胶原纤维沉积的影响;Western blot检测TGF-β1诱导的NRK-52E细胞和UUO小鼠肾组织中FAK、p-FAK的蛋白表达水平;通过分子对接预测根皮素与FAK蛋白的潜在结合模式和结合能力;使用FAK抑制剂PND-1186,探究根皮素改善肾间质纤维化的作用机制。结果根皮素可逆转TGF-β1所致的肾小管上皮细胞及UUO小鼠肾组织中α-SMA、FN的蛋白表达水平升高,且显著降低UUO小鼠血清中Cr、BUN水平,改善UUO小鼠肾小管扩张、炎性细胞浸润及间质胶原沉积;根皮素可以显著抑制UUO小鼠肾组织中FAK、p-FAK蛋白的表达水平,分子对接提示根皮素与FAK蛋白之间具有良好相互作用。根皮素与PND-1186均可改善TGF-β1诱导的NRK-52E细胞纤维化。结论根皮素通过抑制FAK信号通路在体内外发挥抗肾间质纤维化作用。 展开更多
关键词 根皮素 单侧输尿管梗阻 肾保护 肾间质纤维化 黏着斑激酶
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FAK在肝细胞癌中的表达及临床病理意义 被引量:5
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作者 韩少山 刘青光 +4 位作者 周振宇 姚英民 宋涛 昝献峰 孙昊 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期81-84,127,共5页
目的研究FAK在肝细胞癌组织中的表达情况以及其与临床病理特征的联系,并探讨其表达与肝细胞癌患者预后之间的关系。方法利用RT-PCR法检测了52例肝癌组织及对应的癌旁组织中FAK mRNA的表达水平。分析了FAK mRNA的表达水平与肝癌临床病理... 目的研究FAK在肝细胞癌组织中的表达情况以及其与临床病理特征的联系,并探讨其表达与肝细胞癌患者预后之间的关系。方法利用RT-PCR法检测了52例肝癌组织及对应的癌旁组织中FAK mRNA的表达水平。分析了FAK mRNA的表达水平与肝癌临床病理特征之间的关系。利用免疫组化的方法检测了FAK蛋白在30例肝癌组织及其癌旁组织和10例正常肝脏组织中的表达。Kaplan-Meier生存分析和Cox回归分析了FAK表达与肝癌手术治疗预后的关系。结果肝癌组织中FAK mRNA的表达水平显著高于其癌旁组织(0.48±0.12 vs.0.17±0.07;P<0.05)。FAK mRNA表达水平与肿瘤直径、组织病理分化程度、TNM分期、血管侵犯等临床病理特征显著相关(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析和COX回归模型分析发现FAK表达是影响肝细胞癌术后生存率的因素。30例肝癌组织细胞质中广泛表达FAK蛋白,主要定位于肝癌细胞质内,阳性率为60%(18/30),癌旁组织阳性率为26.3%(8/30),10例正常肝组织阳性表达率为20%(2/10)。结论 FAK在肝癌组织中高表达,这与肝癌的恶性临床病理特征相关,也是判断肝细胞癌手术治疗预后的指标,提示FAK可能成为肝癌潜在的分子标志物或治疗靶点。 展开更多
关键词 黏着斑激酶(fak) 肝细胞癌 RT—PCR 免疫组化 临床病理
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低强度脉冲超声波对兔膝骨性关节炎软骨整合素-FAK-MAPKs信号通路蛋白表达的影响 被引量:11
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作者 沈士浩 程凯 +4 位作者 林强 夏鹏 高明霞 任莎莎 李雪萍 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期160-166,共7页
目的:观察低强度脉冲超声波(low-intensity pulsed ultrasound,LIPUS)对兔膝骨性关节炎(osteoarthritis,OA)软骨中整合素-FAK-MAPKs力化学细胞信号转导通路相关蛋白表达的影响。方法:18只成年新西兰大白兔随机平均分成3组,分为正常对照... 目的:观察低强度脉冲超声波(low-intensity pulsed ultrasound,LIPUS)对兔膝骨性关节炎(osteoarthritis,OA)软骨中整合素-FAK-MAPKs力化学细胞信号转导通路相关蛋白表达的影响。方法:18只成年新西兰大白兔随机平均分成3组,分为正常对照组(normal control,NC),OA模型组(OA group,OA),OA模型照射组(O+L)。OA组接受右侧后肢前交叉韧带切断(ACLT)处理术后4周接受LIPUS假辐射,O+L组同样手术处理,术后4周接受LIPUS辐射,NC组仅切开关节囊。LIPUS作用6周后,处死实验动物,取右后肢,采用HE染色行改良Mankin评分比较各组胫骨平台关节表面病理学改变。同时,采用Western blot技术检测Ⅱ型胶原,MMP-13,整合素β1的蛋白表达水平以及FAK、MAPKs家族蛋白(p38、ERK1/2、JNK)磷酸化水平。结果:1组织学观察及Mankin评分:LIPUS干预后,OA软骨表层轻微不平整,染色轻度缺失,可见软骨细胞增殖;Mankin评分,NC组:4.67±0.57;OA组:10.57±2.55;O+L组:7.66±1.74。与NC组相比,OA组、O+L组Mankin评分明显增高,但OA组增高更为明显(P<0.05);与OA组相比,O+L组Mankin评分明显降低(P<0.05)。2Ⅱ型胶原、MMP-13含量:LIPUS干预后,II型胶原含量较NC组升高,MMP-13含量有明显下降。3整合素β1-FAK-MAPKs信号通路相关蛋白表达:LIPUS干预使整合素β1、磷酸化FAK表达增高;同时MAPKs信号通路相关蛋白ERK1/2、p38磷酸化水平明显下降,而JNK磷酸化水平无明显变化。结论:LIPUS可以减轻骨性关节炎软骨ECM损伤程度,与LIPUS产生机械应力使关节软骨中细胞表面应力受体之一整合素β1及其下游分子黏着斑激酶FAK磷酸化表达增高,进一步下游的磷酸化p38,ERK1/2表达下调有关。LIPUS的机械效应可经力化学转导途径作用于OA关节软骨,为治疗骨性关节炎提供一种新的思路。 展开更多
关键词 低强度脉冲超声波 骨性关节炎 整合素 粘着斑激酶 丝裂原活化蛋白激酶
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PTEN下调FAK磷酸化来抑制EGFR受体突变体引起的胶质瘤细胞侵袭 被引量:6
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作者 蔡秀梅 王丽影 查锡良 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2008年第1期30-34,共5页
背景与目的:抑癌基因PTEN在胶质瘤中突变率达20%~40%,且PTEN缺失和表皮生长因子受体突变体EGFRvⅢ同时存在EGFR表达的胶质瘤组织中。PTEN通过直接与FAK作用从而降低其酪氨酸磷酸化来抑制肿瘤细胞侵袭。EGFRvⅢ表达,PTEN缺失都是肿瘤细... 背景与目的:抑癌基因PTEN在胶质瘤中突变率达20%~40%,且PTEN缺失和表皮生长因子受体突变体EGFRvⅢ同时存在EGFR表达的胶质瘤组织中。PTEN通过直接与FAK作用从而降低其酪氨酸磷酸化来抑制肿瘤细胞侵袭。EGFRvⅢ表达,PTEN缺失都是肿瘤细胞侵袭性增加的原因之一。PTEN功能的丧失可能是EGFRvⅢ表达的肿瘤进一步发展成恶性侵袭性肿瘤的原因之一。本文将探讨在EGFRvⅢ表达和PTEN缺失的肿瘤细胞中转入PTEN以观察其是否能抑制EGFRvⅢ所引起的肿瘤细胞的侵袭。方法:将野生型PTEN及其突变体分别导入人胶质瘤细胞U87ΔEGFR中,利用Transwell-细胞侵袭实验观察细胞侵袭运动变化;免疫印迹实验检查FAK磷酸化变化;FAK表达载体来转染FAK磷酸化程度低的U87ΔEGFR-wtPTEN细胞,观察细胞侵袭运动变化。结果:PTEN和PTEN(G129E)能够抑制U87ΔEGFR细胞侵袭,并且下调FAK397位点磷酸化水平。U87ΔEGFR-wtPTEN细胞中FAK397位点磷酸化水平增加伴随着细胞侵袭能力的提高。结论:PTEN可能通过下调FAK397位点磷酸化水平来抑制EGFRvⅢ引起的胶质瘤细胞侵袭。 展开更多
关键词 PTEN EGFRvm fak 磷酸化 细胞侵袭 胶质瘤
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大麻素受体1、FAK mRNA在小鼠肝纤维化形成过程中肝组织中的表达及相互关系 被引量:6
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作者 杨莉 赵召霞 +3 位作者 侯军良 刘玉珍 姜惠卿 戴二黑 《临床肝胆病杂志》 CAS 2011年第8期824-826,836,共4页
目的研究大麻素受体1(CB1)mRNA在肝纤维化形成过程中表达的变化,从基因转录水平探讨其与黏着斑激酶(FAK)的关系。方法采用10%四氯化碳腹腔注射制备肝纤维化模型,分别于造模第2、4、6、8周留取小鼠的肝组织及血清。通过肝组织病理对肝纤... 目的研究大麻素受体1(CB1)mRNA在肝纤维化形成过程中表达的变化,从基因转录水平探讨其与黏着斑激酶(FAK)的关系。方法采用10%四氯化碳腹腔注射制备肝纤维化模型,分别于造模第2、4、6、8周留取小鼠的肝组织及血清。通过肝组织病理对肝纤维化程度进行评分,荧光定量PCR检测CB1 mRNA和FAK mRNA水平,ELISA方法检测血清中转化生长因子(TGF)β1的含量。结果与正常对照组相比,各模型组小鼠肝组织中CB1 mRNA和FAK mRNA含量显著升高(P<0.05),而且随造模时间的延长,CB1 mRNA和FAK mRNA含量亦逐渐增高,各组之间差异有统计学意义(P<0.05)。CB1 mRNA的含量不但与肝纤维化评分呈显著正相关(r=0.747),而且与肝组织中FAK mRNA含量也呈显著正相关(r=0.907),P值均<0.01。各模型组小鼠血清中TGFβ1的水平随造模时间延长而不断升高,各组间差异具有统计学意义(P<0.05)。肝组织中CB1 mRNA的含量与血清TGFβ1水平呈显著正相关(r=0.542,P<0.01)。结论 CB1可能通过激活FAK,以磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)通路诱导肝星状细胞(HSC)增殖并分泌大量TGFβ1,从而促进肝纤维化的形成。 展开更多
关键词 受体 大麻酚 CB1 黏着斑蛋白酪氨酸激酶类 肝硬化
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FAK基因沉默诱导白血病细胞凋亡 被引量:7
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作者 许吕宏 方建培 +2 位作者 Le Yi 翁文骏 洪冬玲 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期1352-1355,共4页
目的:本研究靶向黏着斑激酶(FAK)基因,构建FAK-shRNA慢病毒载体,并研究FAK基因沉默对白血病细胞生长的影响。方法:化学合成人FAK基因的shRNA序列,应用分子生物学方法将该FAK shRNA序列插入含荧光素GFP慢病毒质粒。该FAK shRNA慢病毒载... 目的:本研究靶向黏着斑激酶(FAK)基因,构建FAK-shRNA慢病毒载体,并研究FAK基因沉默对白血病细胞生长的影响。方法:化学合成人FAK基因的shRNA序列,应用分子生物学方法将该FAK shRNA序列插入含荧光素GFP慢病毒质粒。该FAK shRNA慢病毒载体在体外包装、浓缩,然后转染至人白血病细胞株。应用逆转录聚合酶链反应及蛋白质印迹方法检测FAK基因表达水平,予Annexin V标记检测细胞凋亡的情况。结果:经核苷酸序列分析提示FAK shRNA正确插入慢病毒质粒,该病毒载体在白血病细胞株的转染率为10%-25%。与对照组相比(无FAK shRNA的慢病毒载体),FAK shRNA慢病毒载体在细胞FAK mRNA及蛋白水平的抑制率分别为40%和70%。凋亡实验表明,对照组与FAK shRNA慢病毒载体组的Annexin V阳性率分别为(4.19±0.36)%和(8.48±0.58)%,两者差异明显(P<0.05)。结论:我们成功构建FAK shRNA慢病毒载体,该载体能抑制FAK基因表达并诱导白血病细胞凋亡。 展开更多
关键词 黏着斑激酶 基因沉默 白血病 细胞凋亡 REH细胞
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泼尼松对阿霉素肾病大鼠肾组织FAK/Pyk2表达的影响 被引量:4
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作者 陈小英 王菊霞 +3 位作者 郑京 吴心虹 刘慈赟 林秀芹 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1149-1153,共5页
目的观察泼尼松对阿霉素肾病大鼠FAK、Pyk2表达的影响。方法利用随机数字表将SD大鼠分为正常组、模型组、泼尼松组,建立阿霉素肾病大鼠模型,于阿霉素注射后第7天干预组以泼尼松10 mg/(kg·d)灌胃,于实验不同时间点测定24 h尿蛋白定... 目的观察泼尼松对阿霉素肾病大鼠FAK、Pyk2表达的影响。方法利用随机数字表将SD大鼠分为正常组、模型组、泼尼松组,建立阿霉素肾病大鼠模型,于阿霉素注射后第7天干预组以泼尼松10 mg/(kg·d)灌胃,于实验不同时间点测定24 h尿蛋白定量,观察肾组织电镜结果,实时荧光定量PCR检测FAK、Pyk2、Nephrin表达水平的变化,Western blot检测肾组织FAK、Pyk2蛋白及磷酸化蛋白,免疫组织化学法检测Nephrin表达水平。结果⑥与正常组比较,模型组尿蛋白升高(P<0.01);⑥与模型组比较,治疗组尿蛋白降低(P<0.01);⑥模型组电镜可见足细胞足突广泛融合,免疫组化示治疗组Nephrin较模型组有改善(P<0.05);⑥第21、35天,模型组、治疗组Nephrin mRNA表达较正常组低,FAK mRNA表达较正常组升高(P<0.01),治疗组Nephrin mRNA表达较模型组上升(P<0.05);⑥第21、35天,模型组FAK总蛋白及其磷酸化蛋白表达、P-FAK/FAK、P-Pyk2/Pyk2较正常组高(P<0.01),治疗组FAK总蛋白及其磷酸化蛋白表达、P-FAK/FAK、P-Pyk2/Pyk2较模型组降低(P<0.01);⑥多元相关分析显示,尿蛋白与FAKmRNA、FAK、pFAK、Pyk2mRNA及pPyk2/Pyk2比值呈正相关(r=0.819、0.750、0.838、0.762、0.934,P<0.01)。结论阿霉素可能通过激活FAK、Pyk2磷酸化导致肾病的发生;泼尼松能抑制FAK、Pyk2激活,降低阿霉素肾病大鼠蛋白尿,改善足突病变,从而保护肾小球滤过屏障。 展开更多
关键词 阿霉素肾病 泼尼松 黏着斑激酶 富含脯氨酸的酪氨酸激酶2 NEPHRIN
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FAK表达水平对人肝癌细胞运动、增殖、凋亡等的影响 被引量:2
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作者 张楠楠 魏丽丽 +3 位作者 强荣兵 聂红娟 高晓杰 侯颖春 《陕西师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期72-75,80,共5页
构建了FAK基因siRNA质粒表达载体并用磷酸钙法转染人肝癌细胞SMMC—7721,采用半定量RT-PCR、Western Blot检测FAK siRNA转染后SMMC—7721细胞FAK mRNA和蛋白表达的变化.以损伤修复法检测FAK siRNA对SMMC—7721细胞迁移的影响,以四甲基... 构建了FAK基因siRNA质粒表达载体并用磷酸钙法转染人肝癌细胞SMMC—7721,采用半定量RT-PCR、Western Blot检测FAK siRNA转染后SMMC—7721细胞FAK mRNA和蛋白表达的变化.以损伤修复法检测FAK siRNA对SMMC—7721细胞迁移的影响,以四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测FAK siRNA转染对SMMC—7721细胞生长的抑制作用,以Hoechst染色法检测FAK siRNA对SMMC—7721细胞凋亡的影响.结果显示,特异性的FAK siRNA片段能有效降低SMMC—7721细胞FAK mRNA和蛋白的表达水平;转染FAK siRNA后,SMMC—7721细胞生长和迁移均受到抑制,凋亡细胞的数目也显著增多.表明靶向FAK基因的siRNA可以明显抑制SMMC—7721细胞的运动和增殖等生物学行为. 展开更多
关键词 粘膜斑激酶 RNAI 肝癌 细胞运动 细胞增殖和凋亡
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粘附斑激酶(FAK)及其信号通路研究进展 被引量:19
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作者 李树裕 王志钢 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期6-10,共5页
粘附斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)是一类胞质非受体蛋白酪氨酸激酶,属于蛋白酪氨酸激酶(protein tyrosine kinase)超家族,因而也称为PTKⅡ。FAK在细胞信号转导中处于十分重要的位置,它是胞内外信号出入的中枢,介导多条信号通路。... 粘附斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)是一类胞质非受体蛋白酪氨酸激酶,属于蛋白酪氨酸激酶(protein tyrosine kinase)超家族,因而也称为PTKⅡ。FAK在细胞信号转导中处于十分重要的位置,它是胞内外信号出入的中枢,介导多条信号通路。FAK可以整合来自整合素、生长因子以及机械刺激等的信号,激活胞内PI3K/Akt、Ras/MAPK等信号通路,调节细胞生长。FAK还与胚胎发育、肿瘤发生与迁移有关。 展开更多
关键词 粘附斑激酶 发育 肿瘤 信号通路
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ErbB2诱导的肿瘤形成和侵袭有赖于FAK功能 被引量:4
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作者 何强 黄美近 +3 位作者 彭宝岗 梁力建 沈顺利 周凡 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期2369-2373,共5页
目的:探讨FAK功能在ErbB2诱导肿瘤形成和侵袭过程中的作用。方法:采用FAK-/-和FAK+/+细胞感染含ErbB2逆病毒颗粒,使ErbB2在FAK-/-和FAK+/+细胞中过量表达,通过比较FAK-/-ErbB2和FAK+/+-ErbB2在细胞生存、细胞侵袭、体内成瘤等项指标来观... 目的:探讨FAK功能在ErbB2诱导肿瘤形成和侵袭过程中的作用。方法:采用FAK-/-和FAK+/+细胞感染含ErbB2逆病毒颗粒,使ErbB2在FAK-/-和FAK+/+细胞中过量表达,通过比较FAK-/-ErbB2和FAK+/+-ErbB2在细胞生存、细胞侵袭、体内成瘤等项指标来观察FAK的功能。结果:感染后,ErbB2受体在FAK-/-和FAK+/+细胞中稳定表达和激活。ErbB2诱导的锚定依赖性细胞生存、细胞侵袭以及体内肿瘤形成等方面均有赖于FAK功能。结论:FAK在调节ErbB2诱导的细胞生存、肿瘤形成和侵袭等方面起着重要的作用,其机制可能涉及到ErbB-FAK-Src-MAPK分子信号转导途径。 展开更多
关键词 焦点粘连激酶 基因 ErbB2 肿瘤侵润
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FAK与肿瘤关系的研究进展 被引量:10
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作者 李玲妹 曹文枫 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期116-119,共4页
着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)是一种细胞质内的蛋白酪氨酸激酶(protein tyrosine kinase,PTK),因其与细胞粘附功能密切相关而得名。近年来,人们对FAK的了解逐渐深入,国内外大量研究表明FAK在多种肿瘤组织中表达增高,并与肿瘤的... 着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)是一种细胞质内的蛋白酪氨酸激酶(protein tyrosine kinase,PTK),因其与细胞粘附功能密切相关而得名。近年来,人们对FAK的了解逐渐深入,国内外大量研究表明FAK在多种肿瘤组织中表达增高,并与肿瘤的多个过程有着密切的关系。FAK已经成为新的肿瘤治疗靶点之一,为肿瘤的治疗带来新的方法和希望。 展开更多
关键词 粘着斑激酶 肿瘤 转移 凋亡
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FAK基因沉默对人舌鳞癌细胞CAL-27增殖与迁移能力的影响 被引量:2
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作者 陈凯 刘涛 +2 位作者 李张维 李梁 潘宣 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2018年第1期8-11,共4页
目的探讨运用RNA干扰技术沉默FAK基因表达对人舌鳞癌细胞株CAL-27增殖与迁移能力的影响。方法使用si RNA干扰技术瞬时转染构建FAK si RNA。将实验细胞分为空白对照组、阴性对照组和实验组。运用q PCR和Western blotting法检测FAK m RNA... 目的探讨运用RNA干扰技术沉默FAK基因表达对人舌鳞癌细胞株CAL-27增殖与迁移能力的影响。方法使用si RNA干扰技术瞬时转染构建FAK si RNA。将实验细胞分为空白对照组、阴性对照组和实验组。运用q PCR和Western blotting法检测FAK m RNA和蛋白的表达情况,MTT法检测细胞的增殖情况,Transwell小室法研究细胞的迁移能力。结果 q PCR和Western blotting实验结果显示,实验组细胞FAK m RNA和蛋白表达量明显低于空白对照组和阴性对照组(Pm RNA<0.01,P蛋白<0.05);MTT实验结果显示在48和72 h时,空白对照组和阴性对照组的吸光度值均明显高于实验组(P<0.01);Transwell实验结果显示实验组穿膜迁移细胞数明显低于空白对照组和阴性对照组(P<0.05)。结论沉默FAK基因表达可有效抑制人舌鳞癌CAL-27细胞的增殖和迁移能力。 展开更多
关键词 舌鳞癌细胞株CAL-27 黏着斑激酶 基因沉默 增殖 迁移
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FAK反义寡核苷酸促进人肺动脉平滑肌细胞凋亡 被引量:13
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作者 林春龙 张珍祥 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期288-291,共4页
目的:了解黏着斑激酶(focal adhesion kinase FAK)是否参与人肺动脉平滑肌细胞(HPASMCs)凋亡。方法:纤黏连蛋白(FN40mg/L)刺激下培养的HPASMCs被用来进行反义寡核苷酸(antisense oligonucleotides,ASODNs)转染以做进一步实验。采用免疫... 目的:了解黏着斑激酶(focal adhesion kinase FAK)是否参与人肺动脉平滑肌细胞(HPASMCs)凋亡。方法:纤黏连蛋白(FN40mg/L)刺激下培养的HPASMCs被用来进行反义寡核苷酸(antisense oligonucleotides,ASODNs)转染以做进一步实验。采用免疫印迹方法测定FAK蛋白质及凋亡蛋白半光氨酸蛋白酶-3(caspase-3)的表达,TUNEL法检测细胞凋亡。结果:免疫印迹方法测定结果表明,应用FAKASODNs转染后HPASMCs中FAK的表达明显低于转染前(P<0·01);caspase-3在应用FAKASODNs转染后高于转染前(P<0·05),TUNEL法检测结果表明FAKASODNs转染后细胞凋亡增加。结论:本实验结果表明FAKASODNs抑制细胞增生,促进细胞凋亡。其机制很可能是经caspase-3信号通路促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 粘着斑激酶 肺动脉 细胞凋亡 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3
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FAK、FAKpY397和Src在肝细胞癌中的表达和意义 被引量:2
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作者 谷艳娇 张敬坤 +1 位作者 包翠芬 苏荣健 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期851-854,共4页
目的:探讨黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)、磷酸化黏着斑激酶(phospho-FAK Y397,FAKpY397)和类固醇激素受体共活化因子(sceroid recptor coactivator,Src)在不同分化程度肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达情况以... 目的:探讨黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)、磷酸化黏着斑激酶(phospho-FAK Y397,FAKpY397)和类固醇激素受体共活化因子(sceroid recptor coactivator,Src)在不同分化程度肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达情况以及三者的相关性。方法:通过免疫组织化学法和人工计数法检测44例HCC组织及8例癌旁正常肝脏组织中FAK、FAKpY397和Src的表达。结果:FAK、FAKpY397和Src在HCC组织中表达均高于正常肝脏组织(P=0.027、P=0.041、P=0.030)且三者均与HCC分化程度有关(P=0.026、P=0.045、P=0.005),FAK和Src低分化组阳性率高于高分化组(P=0.015、P=0.002)。HCC组织中三者表达两两之间呈正相关(P=0.000、P=0.000、P=0.000)。结论:HCC组织中FAK、FAKpY397和Src表达与HCC分化程度有关;FAK和Src低分化组阳性率高于高分化组且三者相互之间存在一定相关性。 展开更多
关键词 黏着斑激酶 磷酸化黏着斑激酶 类固醇激素受体共活化因子 肝细胞癌
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结肠癌α-catenin和FAK的表达与侵袭转移的关系 被引量:4
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作者 王吉明 程勇 +1 位作者 董蒲江 胡祥 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期833-836,共4页
目的:探讨α-catenin和黏着斑激酶(Focal adhesion kinase,FAK)在结肠癌中的表达特点及临床意义。方法:分别应用免疫组化、Western blot方法来检测34例结肠癌患者肿瘤组织及相应正常组织的α-catenin和FAK的表达。结果:α-catenin和FAK... 目的:探讨α-catenin和黏着斑激酶(Focal adhesion kinase,FAK)在结肠癌中的表达特点及临床意义。方法:分别应用免疫组化、Western blot方法来检测34例结肠癌患者肿瘤组织及相应正常组织的α-catenin和FAK的表达。结果:α-catenin和FAK在肿瘤组织和正常组织中均有表达,主要表达于细胞膜和细胞浆。α-catenin的表达在肿瘤组织中明显低于正常组织(t=10.693,P<0.01),FAK在肿瘤组织中的表达明显高于正常组织(χ2=10.350,P=0.001),两者在肿瘤组织中的表达呈弱负相关(Pearson相关系数为-0.383,P=0.025)。α-catenin和FAK的表达在结肠癌TNM分期、有无远处转移、和有无淋巴转移方面差异有显著意义(P<0.01),与患者的年龄、性别之间未发现关系。α-catenin的表达在肿瘤的病理组织分化程度方面差异亦有显著意义,FAK在不同肿瘤病理组织分化程度之间表达没有统计学意义。结论:肿瘤组织中FAK的高表达与α-catenin的低表达,共同在结肠癌的发生发展过程中扮演着重要角色。 展开更多
关键词 结肠癌α-连接蛋白 黏着斑激酶 转移
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FAK-shRNA重组逆转录病毒载体的构建及稳定表达细胞株的筛选 被引量:3
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作者 阿力亚 林武 何强 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期688-694,共7页
目的:研究利用RNA干扰技术,以黏附斑激酶(FAK)为靶基因,构建FAK-shRNA重组逆转录病毒载体,将其导入包装细胞Phoenix中,筛选出稳定产生FAK-shRNA病毒的细胞克隆,以病毒上清感染并筛选FAK表达沉默的细胞株,观察其对相关蛋白表达的影响。方... 目的:研究利用RNA干扰技术,以黏附斑激酶(FAK)为靶基因,构建FAK-shRNA重组逆转录病毒载体,将其导入包装细胞Phoenix中,筛选出稳定产生FAK-shRNA病毒的细胞克隆,以病毒上清感染并筛选FAK表达沉默的细胞株,观察其对相关蛋白表达的影响。方法:体外合成能转录产生靶向FAK短发夹RNA(shRNA)的寡核苷酸并定向克隆入pSuper.retro逆转录病毒载体,以脂质体法转染Phoenix细胞株,待筛选稳定克隆成功后收获病毒上清,感染人肝癌细胞株HCC-LM3,以嘌呤霉素筛选得到抑制FAK表达的稳定细胞株后用Westernboltting鉴定FAK表达的抑制效果及相关蛋白表达情况。结果:构建了重组逆转录病毒载体pSuper-FAK并抑制了人肝癌HCC-LM3细胞内FAK蛋白的表达。在下调FAK表达的细胞株中p-Akt和p-MAPK1/2表达明显受到抑制。下调FAK的细胞株迁移和侵袭能力下降,细胞周期多被阻止在G_0/G_1期,细胞凋亡增多,增殖率明显下降。结论:重组逆转录病毒载体pSuper-FAK转染包装细胞Phoenix后,其产生的FAK-shRNA病毒可以抑制HCC-LM3细胞内的FAK蛋白表达并抑制Akt及MAPK1/2磷酸化。下调FAK后可以对肿瘤细胞的生物学行为产生明显影响。 展开更多
关键词 黏着斑激酶 RNA干扰 逆转录病毒载体 肝肿瘤
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大肠癌中FAK的表达与生物学行为关系的研究 被引量:2
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作者 杨红军 周军 丁彦青 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2003年第9期624-626,共3页
目的:研究粘着斑激酶(FAK)在大肠癌及癌旁组织中的表达及与肿瘤细胞分化、浸润、转移等生物学行为的关系。方法:应用免疫组织化学LSAB法检测60例大肠癌及癌旁组织石蜡标本中FAK蛋白的表达水平。结果:FAK在癌组织中的表达明显高于癌旁组... 目的:研究粘着斑激酶(FAK)在大肠癌及癌旁组织中的表达及与肿瘤细胞分化、浸润、转移等生物学行为的关系。方法:应用免疫组织化学LSAB法检测60例大肠癌及癌旁组织石蜡标本中FAK蛋白的表达水平。结果:FAK在癌组织中的表达明显高于癌旁组织,低分化癌组织较高分化、中分化组织中FAK的表达高,有淋巴结转移的组织较无转移的组织表达高,浸润程度越深表达越高。结论:FAK可能是一种转化相关酶又是一种演变相关酶。FAK的表达量可作为肿瘤发生、发展过程中一种较有价值的病理指标。 展开更多
关键词 大肠癌 免疫组织化学 粘着斑激酶
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α-SMA和FAK与慢性乙型肝炎肝纤维化的相关性 被引量:3
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作者 叶立红 王翀奎 任桂芳 《临床肝胆病杂志》 CAS 2007年第2期92-94,共3页
探讨α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和粘着斑激酶(FAK)与慢性乙型肝炎病理肝纤维化分期(S)之间的相关性。选取行肝组织活检的慢性乙型肝炎患者42例,对肝组织进行HE、Masson三色、网状纤维染色,并进行肝纤维化分期(S0-S4)。免疫组化法测定肝... 探讨α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和粘着斑激酶(FAK)与慢性乙型肝炎病理肝纤维化分期(S)之间的相关性。选取行肝组织活检的慢性乙型肝炎患者42例,对肝组织进行HE、Masson三色、网状纤维染色,并进行肝纤维化分期(S0-S4)。免疫组化法测定肝组织中α-SMA和FAK,并进行半定量分析。不同分期的肝纤维化α-SMA、FAK表达积分情况不同(P<0.01),与S0(0.429±0.535,0.143±0.378)比较,S1(1.571±1.397,1.286±1.113)、S2(2.875±1.885,1.875±1.885)、S3(4.286±0.756,4.286±0.756)、S4(4.796±0.927,4.923±0.954)积分明显逐渐升高(P<0.05),具有S4>S3>S2>S1>S0的规律。相关性分析显示α-SMA、FAK表达积分与肝纤维化分期(S)呈正相关(P<0.05)。肝组织中α-SMA、FAK的表达在肝纤维化发生发展过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 Α-平滑肌肌动蛋白 粘着斑激酶 肝星状细胞 肝纤维化
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FAK靶向RNAi重组体的构建及其抗多细胞球体形成效应 被引量:1
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作者 陈玉英 向浏欣 +4 位作者 杨黎 潘凤 蒋金妍 陈克力 梁后杰 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第17期1633-1636,共4页
目的构建RNA干扰(RNAi)重组体抑制黏着斑激酶(FAK)表达,并探讨其对结肠癌多细胞球体(MCSs)形成的影响。方法针对FAK cDNA序列设计并合成1对特异性的含有短发卡的寡核苷酸序列及其对照序列,经退火后插入pGenesil-1中构建重组体。经双酶... 目的构建RNA干扰(RNAi)重组体抑制黏着斑激酶(FAK)表达,并探讨其对结肠癌多细胞球体(MCSs)形成的影响。方法针对FAK cDNA序列设计并合成1对特异性的含有短发卡的寡核苷酸序列及其对照序列,经退火后插入pGenesil-1中构建重组体。经双酶切鉴定和DNA测序后,用脂质体2000将其转染结肠癌HT29细胞,并用G418稳定筛选,采用Real-time PCR和Western blot检测干扰前后FAK在HT29内的表达变化,并作细胞悬浮培养观测靶向干扰FAK对MCSs形成的影响。结果双酶切和测序鉴定证实插入序列完全正确;靶向干扰FAK后,其mRNA和蛋白表达分别显著下调(79.20±2.97)%和(78.47±4.39)%,且细胞不易聚集形成MCSs。结论成功构建FAK靶向RNAi重组载体,显著地抑制FAK表达,并能有效地抑制MCSs的形成。 展开更多
关键词 黏着斑激酶 RNA干扰 构建 多细胞球
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FAK Ezrin和PTEN蛋白的表达与肝癌生物学行为的关系 被引量:1
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作者 黄海花 吴秀浅 +1 位作者 郑志超 张薇 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2011年第14期825-829,共5页
目的: 探讨肝癌中Ezrin、FAK和PTEN的表达及其与肝癌发生及进展的关系。方法:应用免疫组织化学SP法原位观察上述3个蛋白在正常肝组织、肝癌及相应癌旁组织中的表达,分析其与各临床病理参数间的关系。结果:1)Ezrin、FAK和PTEN在肝癌中的... 目的: 探讨肝癌中Ezrin、FAK和PTEN的表达及其与肝癌发生及进展的关系。方法:应用免疫组织化学SP法原位观察上述3个蛋白在正常肝组织、肝癌及相应癌旁组织中的表达,分析其与各临床病理参数间的关系。结果:1)Ezrin、FAK和PTEN在肝癌中的阳性表达率分别为66.00%、48.00%及64.00%。2)Ezrin和FAK在肝癌组织中的阳性表达率明显高于正常肝组织(P<0.05,P<0.01),PTFN则相反,其在肝癌组织中的阳性表达率明显低于相应的癌旁组织及正常肝组织(P<0.01)。Ezrin和PTEN的表达均与肝癌的组织分级、血管浸润及卫星灶有关(P<0.05,P<0.01)。FAK的表达与血管浸润及卫星灶有关(P<0.05,P<0.01),但与组织学分级及肝硬化无关。Ezrin、FAK及PTEN的表达均与患者的年龄、性别和肿瘤大小无关(P>0.05)。3)Ezrin与FAK的表达呈正相关(r=0.445,P=0.001),Ezrin和FAK均与PTEN的表达呈负相关(r=-0.475,P=0.001;r=-0.364,P=0.009)。结论:Ezrin和FAK过表达与PTEN表达的下调,可能在肝癌的发生和浸润过程中扮演重要角色。三者的异常表达可能是肝癌发生的一个信号。 展开更多
关键词 肝细胞肝癌 免疫组织化学 骨架连接蛋白 粘着斑激酶 浸润
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