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HMGB1/Caspase-1/GSDMD信号轴介导肝细胞焦亡在肝脏缺血-再灌注损伤中的作用 被引量:7
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作者 胡莎莎 刘钰 +3 位作者 王朝阳 杨爽 张国梁 蔡金贞 《器官移植》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期88-97,共10页
目的探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-1/Gasdermin D(GSDMD)信号轴介导肝细胞焦亡在肝脏缺血-再灌注损伤(IRI)中的作用。方法将C57BL/6小鼠随机分为假手术组(Sham组)、IRI 2 h组、IRI 6 h组、IRI 12 h组、... 目的探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-1/Gasdermin D(GSDMD)信号轴介导肝细胞焦亡在肝脏缺血-再灌注损伤(IRI)中的作用。方法将C57BL/6小鼠随机分为假手术组(Sham组)、IRI 2 h组、IRI 6 h组、IRI 12 h组、甘草酸(GA)+Sham组和GA+IRI 12 h组(每组8只);将AML12细胞大致均匀地分为Sham组、IRI 12 h组、GA+Sham组和GA+IRI 12 h组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、白细胞介素(IL)-1β和IL-6的水平;采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝组织中IL-1β和IL-6信使核糖核酸(mRNA)水平;比较各组小鼠肝脏缺血病理学评分和细胞凋亡情况;采用免疫组织化学(免疫组化)法检测各组小鼠肝组织中HMGB1的表达情况;采用蛋白质印迹法检测小鼠肝组织和AML12细胞中HMGB1、Caspase-1、GSDMD蛋白的表达水平。结果与Sham组比较,IRI后各组小鼠血清中ALT、AST、IL-1β、IL-6水平,以及小鼠肝组织中的IL-1β、IL-6 mRNA相对表达量均升高(均为P<0.05),且随着再灌注时间的延长呈明显的时间依赖性。与Sham组比较,IRI后各组小鼠肝脏缺血病理学评分和肝细胞凋亡率均升高(均为P<0.05)。免疫组化结果显示,IRI后HMGB1在肝组织中的表达明显增多,且在2~12 h内随着时间延长而增多。蛋白质印迹法结果显示,在体内和在体外,与Sham组比较,IRI 12 h组HMGB1、Caspase-1和GSDMD蛋白相对表达量均升高;与IRI 12 h组比较,GA+IRI 12 h组HMGB1蛋白相对表达量升高,Caspase-1和GSDMD蛋白相对表达量均降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论肝细胞可能通过释放HMGB1激活Caspase-1/GSDMD通路,从而触发肝细胞发生焦亡,导致肝脏IRI,而通过GA抑制HMGB1的胞外释放可减轻肝脏IRI。 展开更多
关键词 缺血-再灌注损伤(IRI) 细胞焦亡 高迁移率族蛋白1 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1 GSDMD 甘草酸 炎症 免疫反应
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miR-223调控NLRP3/Caspase-1通路在氯胺酮诱导发育期大鼠海马神经元焦亡中的作用 被引量:3
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作者 张洪江 李树霞 翁洪亮 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第7期848-852,共5页
目的 探究微小RNA 223(miR-223)调控NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)/含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(Caspase-1)通路在氯胺酮诱导发育期大鼠海马神经元焦亡中的作用。方法 50只大鼠分为对照组、氯胺酮组、agomir-NC组、agomir... 目的 探究微小RNA 223(miR-223)调控NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)/含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(Caspase-1)通路在氯胺酮诱导发育期大鼠海马神经元焦亡中的作用。方法 50只大鼠分为对照组、氯胺酮组、agomir-NC组、agomir-223组、agomir-223+BAY11-7082组,每组10只;qRT-PCR检测大鼠海马组织中miR-223表达水平,空间探索实验检测miR-223对大鼠认知功能的影响,HE染色与TUNEL染色检测大鼠海马组织病理学改变。分析miR-223过表达对大鼠海马神经元凋亡以及白介素18(Interleukin 18,IL-18)、白介素1β(Interleukin 1β,IL-1β)的影响,Western blot检测各组大鼠海马组织中NLRP3、cleaved Caspase-1、GSDMD-N的表达情况。结果 与对照组相比,氯胺酮组大鼠潜伏期、海马组织病理学程度、神经元凋亡、白介素18(IL-18)、白介素1β(IL-1β)、NLRP3、cleaved Caspase-1、GSDMD-N水平增加,穿越平台次数、第三象限停留时间占比、miR-223水平降低(P <0.05);与氯胺酮组相比,agomir-223组潜伏期、海马组织病理学程度、神经元凋亡、IL-18、IL-1β、NLRP3、cleaved Caspase-1、GSDMD-N水平降低,穿越平台次数、第三象限停留时间占比、miR-223水平增加(P <0.05)。结论 miR-223过表达可能通过抑制NLRP3/Caspase-1通路来改善氯胺酮诱导发育期大鼠海马神经元焦亡。 展开更多
关键词 微小RNA 223 氯胺酮 神经元 焦亡 含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1
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NLRP3、AIM2和CASP1基因在慢性阻塞性肺疾病急性加重发病中的作用 被引量:9
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作者 王国强 牟佳 +6 位作者 李元 袁语泽 王昱博 宋晨雪 谢婧书 郑敬彤 王放 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期130-133,共4页
目的:探讨固有免疫中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、黑素瘤缺乏因子2(AIM2)、半胱天冬酶1(CASP1)基因和白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素18(IL-18)炎症因子在慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性发作期(AECOPD)患者体内的表达情... 目的:探讨固有免疫中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、黑素瘤缺乏因子2(AIM2)、半胱天冬酶1(CASP1)基因和白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素18(IL-18)炎症因子在慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性发作期(AECOPD)患者体内的表达情况,阐明其作用机制。方法:收集健康对照组(12例)和AECOPD患者(20例)的痰液,分别进行痰处理,采用实时荧光定量PCR法检测NLRP3、AIM2和CASP1基因表达水平,通过ELISA法检测痰上清中的IL-1β和IL-18蛋白表达水平。结果:与健康对照组比较,AECOPD组患者NLRP3、AIM2和CASP1基因表达分别上调3.83、1.70和2.42倍,NLRP3、AIM2和CASP1基因表达水平明显增高(P<0.01),AECOPD组患者痰上清中IL-1β和IL-18蛋白表达水平明显增高(P<0.05)。结论:NLRP3及AIM2炎性体参与AECOPD的病理过程,其作用机制可能与固有免疫活化有关。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病急性发作期 核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3 黑素瘤缺乏因子2 半胱天冬酶1 固有免疫
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炎症复合体与炎症反应 被引量:9
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作者 祝筱梅 姚咏明 盛志勇 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2010年第2期129-137,共9页
炎症复合体(inflammasome)是胞浆内一组复杂的多蛋白复合体,是胱天蛋白酶(caspase)-1活化所必需的反应平台,调控白介素(interleukin,IL)-1β、IL-18、IL-33等促炎细胞因子的加工及活化,参与天然免疫系统的激活.核苷酸结合寡聚化结构域... 炎症复合体(inflammasome)是胞浆内一组复杂的多蛋白复合体,是胱天蛋白酶(caspase)-1活化所必需的反应平台,调控白介素(interleukin,IL)-1β、IL-18、IL-33等促炎细胞因子的加工及活化,参与天然免疫系统的激活.核苷酸结合寡聚化结构域样受体(nucleotide-binding and oligomerization domain-like receptors,NLRs)是胞浆内重要的模式识别受体,能感知胞内病原微生物产物及代谢性应激,起始炎症复合体的组装,是构成炎症复合体的核心成分.综述了炎症复合体和NLRs研究现状及其在炎症反应中的作用. 展开更多
关键词 炎症复合体 胱天蛋白酶-1 白介素-1Β 炎症
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补中益气丸对溃疡性结肠炎小鼠结肠黏膜mRNA表达的影响 被引量:14
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作者 罗书 李燕舞 +1 位作者 巫燕莉 杜群 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期485-489,共5页
目的研究补中益气丸(黄芪、白术、陈皮等)对溃疡性结肠炎(UC)小鼠结肠黏膜NOD样受体蛋白3(Nlrp3)、凋亡相关的斑点样蛋白(Asc)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(caspase-1)mR NA表达的影响,评估其对UC的预防作用。方法将60只C57BL/6... 目的研究补中益气丸(黄芪、白术、陈皮等)对溃疡性结肠炎(UC)小鼠结肠黏膜NOD样受体蛋白3(Nlrp3)、凋亡相关的斑点样蛋白(Asc)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(caspase-1)mR NA表达的影响,评估其对UC的预防作用。方法将60只C57BL/6小鼠随机分为空白组,模型组,柳氮磺砒啶(SASP)对照组,补中益气丸高、中、低剂量组,每组10只。除正常组外,其余各组予3%葡聚糖硫酸钠(DSS)造模;正常组、模型组每日给予蒸馏水0.01 mL/g;阳性对照组每日给予柳氮磺砒啶1.33 g/kg;补中益气丸高、中、低剂量组每日分别给予补中益气丸12、6、3 g/kg,连续给药7 d后,提取结肠样本,观察小鼠结肠病理变化,实时荧光定量-聚合酶链式反应检测结肠粘膜Nlrp3、Asc、caspase-1的mR NA表达水平。结果模型组小鼠病理检测显示结肠上皮糜烂、出血、多病灶浅溃疡、大量炎细胞浸润,而给药组均不同程度地改善上述症状。与空白组、柳氮磺砒啶对照组比较,模型组Nlrp3表达显著增高(P<0.05);与补中益气丸各组比较,没有明显差异(P>0.05);与其它各组比较,模型组Asc、caspase-1 mR NA表达均显著增高(P<0.05)。结论补中益气丸对DSS诱导小鼠UC有一定预防作用,其虽未能抑制Nlrp3表达,却能明显抑制Asc、caspase-1表达,提示其对小鼠UC预防作用机制可能与抑制结肠黏膜Asc、caspase-1表达,阻断Nlrp3炎性体装配有关。 展开更多
关键词 溃疡性结肠炎 补中益气丸 NOD样受体蛋白3 凋亡相关的斑点样蛋白 含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1
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磷酸甘油酸变位酶5调控细胞焦亡在肝脏缺血-再灌注损伤中的作用 被引量:1
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作者 乔兵兵 李世朋 +2 位作者 宋浩森 季敏 赵龙栓 《器官移植》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期412-420,共9页
目的研究磷酸甘油酸变位酶5(PGAM5)调控细胞焦亡在肝脏缺血-再灌注损伤(IRI)中的作用及分子机制。方法建立C57小鼠肝脏IRI模型,随机分别予再灌注6 h(6 h组)与12 h(12 h组),并设立假手术组(Sham组),每组10只。分析IRI对小鼠肝组织及血清... 目的研究磷酸甘油酸变位酶5(PGAM5)调控细胞焦亡在肝脏缺血-再灌注损伤(IRI)中的作用及分子机制。方法建立C57小鼠肝脏IRI模型,随机分别予再灌注6 h(6 h组)与12 h(12 h组),并设立假手术组(Sham组),每组10只。分析IRI对小鼠肝组织及血清学指标的影响;分析小鼠肝脏IRI过程中PGAM5、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-1的表达情况。建立肝细胞IRI模型(IRI组),采用Caspase-1抑制剂Z-YVAD-FMK预处理后再建立肝细胞IRI模型(抑制剂组),将未处理的AML12细胞作为对照组,分析抑制Caspase-1活性对细胞焦亡的影响。采用脂质体3000将PGAM5小干扰核糖核酸(siRNA)(siRNA组)和siRNA阴性对照(siRNA-NC)(siRNA-NC组)转染至AML12细胞,再建立肝细胞IRI模型,将未处理的AML12细胞作为对照组,分析PGAM5调控细胞焦亡对肝细胞IRI的影响。结果 6 h组和12 h组小鼠肝组织中部分肝细胞水肿,肝窦区变窄,中央静脉充血,偶见点灶状坏死等,且12 h组较6 h组病变加重。与Sham组小鼠比较,6 h组和12 h组小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平升高,且12 h组高于6 h组;6 h组和12 h组肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β水平升高,12 h组低于6 h组;6 h组和12 h组小鼠肝组织IL-1β信使核糖核酸(mRNA)相对表达量升高,12 h组低于6 h组;6 h组和12 h组肝组织细胞凋亡率升高,12 h组低于6 h组(P<0.01~0.05)。与Sham组小鼠比较,6 h组和12 h组小鼠肝组织PGAM5 mRNA相对表达量和蛋白相对表达量均升高,且12 h组高于6 h组(P<0.01~0.05);6 h组和12 h组肝组织PGAM5、Caspase-1蛋白表达增多。IRI组细胞NOD样受体蛋白3(NLRP3)、裂解Caspase(cleaved Caspase)-1及Gasdermin D(GSDMD)蛋白相对表达量较对照组升高,GSDMD荧光强度较对照组增强;抑制剂组NLRP3、cleaved Caspase-1及GSDMD蛋白相对表达量较IRI组下降,GSDMD荧光强度较IRI组减弱(P<0.01~0.05)。与对照组比较,siRNA-NC组细胞存活率下降,PGAM5、NLRP3、cleaved Caspase-1、GSDMD蛋白相对表达量升高(P<0.01~0.05);与siRNA-NC组比较,siRNA组细胞存活率升高,PGAM5、NLRP3、cleaved Caspase-1、GSDMD蛋白相对表达量下降(P<0.01~0.05)。结论 PGAM5可加重小鼠肝脏IRI,其机制可能为通过PGAM5/Caspase-1/GSDMD信号通路调控细胞焦亡,加速肝细胞损伤。 展开更多
关键词 细胞焦亡 肝移植 缺血-再灌注损伤(IRI) 磷酸甘油酸变位酶5(PGAM5) 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-1 NOD样受体蛋白3(NLRP3) 肿瘤坏死因子(TNF)-α 白细胞介素(IL)-1β
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NLRP3炎症小体与相关炎症信号通路在肾缺血-再灌注损伤中的作用 被引量:4
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作者 袁强 申开文 +1 位作者 张瑞波 沈俊 《器官移植》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期177-183,共7页
肾缺血-再灌注损伤(IRI)常见于肾移植术中,是引起急性肾衰竭的重要病理生理过程,严重影响受者预后。炎症反应在IRI的发病机制及病理过程中占据着重要地位。活化的NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体可通过介导多种促炎因子的成熟与释放,调... 肾缺血-再灌注损伤(IRI)常见于肾移植术中,是引起急性肾衰竭的重要病理生理过程,严重影响受者预后。炎症反应在IRI的发病机制及病理过程中占据着重要地位。活化的NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体可通过介导多种促炎因子的成熟与释放,调节机体炎症反应及相关细胞功能。本文对肾IRI中的NLRP3炎症小体及其相关炎症信号通路的作用机制进行了总结,旨在为临床肾IRI的防治提供新思路。 展开更多
关键词 缺血-再灌注损伤(IRI) 肾移植 NOD样受体蛋白3(NLRP3) Toll样受体(TLR) 模式识别受体(PRR) 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-1 线粒体DNA(mtDNA)
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薯蓣皂苷元对心肌缺血再灌注损伤大鼠细胞凋亡的影响及相关机制的分析 被引量:6
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作者 蒋先训 张凯 张鹰 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2022年第5期526-532,共7页
目的:探究薯蓣皂苷元对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠细胞凋亡的影响,并初步分析其对NOD样受体蛋白3(NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶1(Caspase-1)信号通路的作用。方法:采用左冠状动脉前降支结扎法建立MIRI大鼠模型,将造模成功的7... 目的:探究薯蓣皂苷元对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠细胞凋亡的影响,并初步分析其对NOD样受体蛋白3(NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶1(Caspase-1)信号通路的作用。方法:采用左冠状动脉前降支结扎法建立MIRI大鼠模型,将造模成功的72只大鼠,按照随机数字表法分成MIRI组、薯蓣皂苷元低剂量组(50 mg/kg)、薯蓣皂苷元中剂量组(75 mg/kg)和薯蓣皂苷元高剂量组(100 mg/kg),每组18只;另取18只大鼠为假手术组。造模完成后,给予相应药物灌胃,每日1次。末次给药后,记录每组大鼠在不同时间段的心脏血液动力学参数;三苯基四氮唑(TTC)法检测大鼠心肌梗死面积;苏木素-伊红染色检测各组心肌组织病理学变化;TUNEL法检测心肌细胞凋亡情况;ELISA法检测大鼠血清中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;免疫蛋白印迹法检测大鼠心肌组织中NLRP3、Caspase-1、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、IL-1β蛋白表达水平。结果:与假手术组相比,MIRI组大鼠心肌梗死面积更大,心肌细胞凋亡率、左心室舒张末期压力(LVEDP)、血清IL-6、IL-1β、TNF-α含量及心肌组织中NLRP3、Caspase-1、ASC、IL-1β蛋白表达水平均显著升高(P均<0.05),左心室收缩压(LVSP)、左心室射血分数(LVEF)、短轴缩短率(FS)及最大收缩/舒张期压力变化速率(±dp/dtmax)均显著降低(P均<0.05);与MIRI组相比,薯蓣皂苷元不同剂量干预组大鼠心肌梗死面积较小,细胞凋亡率、LVEDP、血清IL-6、IL-1β、TNF-α含量及心肌组织中NLRP3、Caspase-1、ASC、IL-1β蛋白表达水平均显著降低(P均<0.05),LVSP、LVEF、FS及±dp/dtmax均显著升高(P均<0.05)。结论:薯蓣皂苷元可改善MIRI大鼠的心功能,减少炎症反应和细胞凋亡,可能与抑制NLRP3/caspase-1信号通路有关。 展开更多
关键词 薯蓣皂苷元 心肌缺血/再灌注损伤 NOD样受体蛋白3炎性小体 细胞凋亡 半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶1
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