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补中益气汤通过Nrf2/ROS通路调控内质网应激改善A549细胞、A549/DDP细胞顺铂耐药的分子机制
1
作者 于丹 牟琪瑞 高原 《中华中医药学刊》 北大核心 2025年第3期170-174,I0034,共6页
目的通过对补中益气汤调控Nrf2/ROS通路对A549细胞、A549/DDP细胞内质网应激的影响,探讨补中益气汤改善非小细胞肺癌顺铂耐药的分子机制。方法制备补中益气汤含药血清并培养A549细胞、A549/DDP细胞,并进行随机分组为A组(A549细胞)、B组(... 目的通过对补中益气汤调控Nrf2/ROS通路对A549细胞、A549/DDP细胞内质网应激的影响,探讨补中益气汤改善非小细胞肺癌顺铂耐药的分子机制。方法制备补中益气汤含药血清并培养A549细胞、A549/DDP细胞,并进行随机分组为A组(A549细胞)、B组(A549细胞+20μg/mL顺铂)、C组(A549细胞+20μg/mL顺铂+10%补中益气汤含药血清)、D组(A549/DDP细胞)、E组(A549/DDP细胞+20μg/mL顺铂)、F组(A549/DDP细胞+20μg/mL顺铂+10%补中益气汤含药血清),应用CCK-8法检测各组细胞顺铂半数抑制浓度(IC50)值,DCFH-DA荧光探针法检测各组活性氧(ROS)含量,Western blot法检测各组细胞Nrf2、P-Nrf2、PERK、P-PERK、eIF2α、P-eIF2α、IRE1、XBP1的蛋白表达量。结果在A549细胞和A549/DDP细胞中,补中益气汤均可以显著下调其对顺铂的IC50值(P<0.05);两株细胞中,顺铂均可以上调Nrf2、P-Nrf2的蛋白表达,在补中益气汤干预后,二者表达量下调(P<0.05),且二者在A549/DDP细胞中表达较A549细胞更高(P<0.05);与空白组比较,顺铂可以上调两株细胞的ROS表达量(P<0.05),在联合了补中益气汤后ROS表达量进一步上调(P<0.05),且A549细胞的ROS表达量要显著高于A549/DDP细胞(P<0.05);PERK、eIF2α在各组细胞中表达无显著差异(P>0.05),在两株细胞中,顺铂能显著上调P-PERK、P-eIF2α、IRE1、XBP1、蛋白表达,在补中益气汤干预后表达再次上调(P<0.05),且A549细胞的内质网应激蛋白表达高于A549/DDP细胞(P<0.05)。结论补中益气汤可能通过Nrf2/ROS通路调控内质网应激改善A549细胞、A549/DDP细胞顺铂耐药。 展开更多
关键词 补中益气汤 非小细胞肺癌 Nrf2/ROS 内质网应激 顺铂耐药
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华蟾素调控PI3K/AKT通路逆转卵巢癌A2780/DDP细胞顺铂耐药的作用机制 被引量：4
2
作者 舒美玲 吴悦 +2 位作者 叶映泉 张爽爽 张梅 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第4期671-677,741,共8页
目的研究华蟾素(CBG)对人卵巢癌细胞顺铂耐药的逆转作用和机制。方法A2780细胞株及其顺铂耐药细胞株A2780/DDP是临床常见的卵巢癌细胞,故选择这两种细胞株作为研究对象。通过CCK-8法检测细胞活力,平板克隆和5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(... 目的研究华蟾素(CBG)对人卵巢癌细胞顺铂耐药的逆转作用和机制。方法A2780细胞株及其顺铂耐药细胞株A2780/DDP是临床常见的卵巢癌细胞,故选择这两种细胞株作为研究对象。通过CCK-8法检测细胞活力,平板克隆和5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU)实验检测细胞的增殖能力,赫斯特染色(Hoechst)法观察细胞凋亡情况,细胞划痕实验和Transwell实验评估细胞的迁移和侵袭能力,Western blot和定量逆转录PCR(RT-qPCR)法检测磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶(PI3K/AKT)信号通路和上皮-间质转化(EMT)的相关蛋白和mRNA的表达差异。结果与A2780细胞相比,A2780/DDP细胞的耐药指数分别约为5.636、5.864、5.695,采用CBG(2、4、6 mg/ml)处理A2780/DDP耐药细胞后,逆转耐药指数分别为1.617、2.570、3.461。CBG呈浓度依赖性地上调细胞凋亡水平、抑制细胞的增殖、迁移和侵袭能力(P<0.05)。Western blot结果显示:与A2780细胞相比,对照组(A2780/DDP)细胞中P-PI3K/PI3K和P-AKT/AKT的蛋白水平相对比值以及N钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、蜗牛蛋白(Snail)的蛋白表达更高,E钙黏蛋白(E-cadherin)蛋白表达更低(t_(P-PI3K/PI3K)=8.115,t_(P-AKT/AKT)=17.62、t_(N-cadherin)=6.126、t_(Vimentin)=4.001、t_(Snail)=17.333、t_(E-cadherin)=4.620,P<0.01);随着CBG剂量升高,耐药细胞中的P-PI3K、P-AKT、N-cadherin、Vimentin、Snail的蛋白表达水平降低,而E-cadherin的蛋白表达量增加(F_(P-PI3K)=268.5、F P-AKT=190.5、F_(N-cadherin)=24.02、F_(Vimentin)=57.65、F_(Snail)=87.24、F_(E-cadherin)=135.8,P<0.05)。RT-qPCR结果显示:随着CBG浓度增加,PI3K、AKT、N-cadherin、Vimentin、Snail的mRNA表达水平随之降低,相反E-cadherin的mRNA表达水平逐渐升高(F PI3K=101.1、F_(AKT)=558.3、F_(N-cadherin)=86.97、F_(Vimentin)=105.9、F_(Snail)=85.71、F_(E-cadherin)=80.96,P<0.01)。结论CBG具有逆转卵巢癌A2780/DDP细胞株顺铂耐药的作用,其机制可能与CBG调控PI3K/AKT信号通路和抑制EMT发生有关。 展开更多
关键词 华蟾素 卵巢癌 顺铂耐药 逆转耐药 PI3K/AKT 上皮间质转化 作用机制
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DDP功能化UiO-66纳米颗粒的制备及其作为润滑油纳米添加剂的摩擦学性能研究 被引量：2
3
作者 罗浩文 李番番 +4 位作者 吴韦 李旭光 钱勇 张梦晨 刘建喜 《摩擦学学报（中英文）》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1064-1073,共10页
金属有机框架(Metal-organic frameworks,MOFs)材料具有良好的机械性能、可设计的组成结构以及可调的表面物化性质,在润滑油纳米添加剂方面表现出潜在的应用前景,然而,MOFs纳米颗粒与基础油之间差的相容性限制了其进一步的发展.本文中... 金属有机框架(Metal-organic frameworks,MOFs)材料具有良好的机械性能、可设计的组成结构以及可调的表面物化性质,在润滑油纳米添加剂方面表现出潜在的应用前景,然而,MOFs纳米颗粒与基础油之间差的相容性限制了其进一步的发展.本文中选择具有良好化学、机械和热稳定性的UiO-66纳米颗粒作为润滑油添加剂,并通过将3种不同分子链长和结构的二烷基二硫代磷酸(DDP)分子在UiO-66上进行组装.借助透射电子显微镜、X-射线衍射仪、傅里叶变换红外光谱仪、激光动态光散射和高频摩擦磨损试验机对DDP修饰前后UiO-66的微观形貌、物相组成、化学结构、粒径分布和摩擦学性能进行了研究,发现DDP分子可以通过配位相互作用组装在UiO-66纳米颗粒表面而不会破坏初始MOFs的形状尺寸和结晶性,DDP的修饰有效改善了UiO-66纳米颗粒在溶剂以及基础油中的分散稳定性,进一步将其作为润滑油纳米添加剂,可表现出良好的减摩抗磨性能,并能有效提高基础油的抗载能力以及综合摩擦学性能.最后,通过X-射线光电子能谱仪对其摩擦机理进行了研究,结果表明:DDP分子修饰的UiO-66纳米颗粒通过DDP在摩擦副表面形成了摩擦反应膜以及Zr-MOFs的“滚珠轴承”效应,有效减少了摩擦副表面的摩擦磨损. 展开更多
关键词 MOFS UiO-66 表面修饰 润滑油添加剂 摩擦学性能
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下调富含脯氨酸蛋白11表达对食管癌耐药细胞EC9706/DDP耐药性的影响及其机制 被引量：2
4
作者 亢春彦 张秀芝 +1 位作者 周慧聪 陈洁 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期113-119,共7页
目的:探讨下调富含脯氨酸蛋白11(PRR11)表达对食管癌耐药细胞耐药性的影响,阐明其相关机制。方法:采用顺铂(DDP)浓度递增间断刺激人食管癌EC9706细胞建立DDP耐药细胞株EC9706/DDP,MTT法检测EC9706/DDP细胞药敏性,实时荧光定量PCR(RT-qP... 目的:探讨下调富含脯氨酸蛋白11(PRR11)表达对食管癌耐药细胞耐药性的影响,阐明其相关机制。方法:采用顺铂(DDP)浓度递增间断刺激人食管癌EC9706细胞建立DDP耐药细胞株EC9706/DDP,MTT法检测EC9706/DDP细胞药敏性,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和Western blotting法检测EC9706/DDP细胞及其亲本EC9706细胞中PRR11 mRNA和蛋白表达水平。将EC9706/DDP细胞分为对照组、sh-NC组(转染sh-NC)、sh-PRR11组(转染sh-PRR11)、sh-NC+DDP组(转染sh-NC后用4 mg·L^(-1)DDP处理)和sh-PRR11+DDP组(转染sh-PRR11后用4 mg·L^(-1)DDP处理),RT-qPCR法检测各组细胞中PRR11 mRNA表达水平,Western blotting法检测各组细胞中PRR11、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)p110α、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化AKT(p-AKT)、P-糖蛋白(P-gp)和多药耐药相关蛋白1(MRP1)蛋白表达水平,流式细胞术检测各组细胞凋亡率。结果:成功获得DDP耐药细胞株EC9706/DDP,耐药指数为7.23±0.86。与EC9706细胞比较,EC9706/DDP细胞中PRR11 mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05)。分别与对照组和sh-NC组比较,sh-PRR11组细胞中PRR11 mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05),细胞的DDP半数抑制浓度(IC50)降低(P<0.05)。与sh-NC组比较,sh-NC+DDP组和sh-PRR11组细胞中PI3K p110α、p-AKT、P-gp和MRP1蛋白表达水平降低(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05);分别与sh-NC+DDP组和sh-PRR11组比较,sh-PRR11+DDP组细胞中PI3Kp110α、p-AKT、P-gp和MRP1蛋白表达水平降低(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05)。结论:下调EC9706/DDP耐药细胞中PRR11基因的表达,可抑制耐药相关蛋白的表达,逆转对DDP耐药,并诱导细胞凋亡,其作用机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路激活有关。 展开更多
关键词 富含脯氨酸蛋白11 食管肿瘤 顺铂 耐药 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路
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miRNA-126通过抑制自噬逆转肺癌A549/DDP细胞顺铂耐药的作用研究 被引量：3
5
作者 唐夏莉 陈君 +1 位作者 焦德敏 刘翔 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1378-1383,共6页
目的:比较人肺腺癌顺铂耐药株A549/DDP细胞与人肺腺癌顺铂敏感株A549细胞的自噬水平,观察微小RNA-126(microRNA-126,miRNA-126)对肺癌顺铂耐药细胞自噬的影响,并探讨miRNA-126在肺癌顺铂耐药中的作用。方法:MTT法检测顺铂的半数抑制浓度... 目的:比较人肺腺癌顺铂耐药株A549/DDP细胞与人肺腺癌顺铂敏感株A549细胞的自噬水平,观察微小RNA-126(microRNA-126,miRNA-126)对肺癌顺铂耐药细胞自噬的影响,并探讨miRNA-126在肺癌顺铂耐药中的作用。方法:MTT法检测顺铂的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50);RT-qPCR检测miRNA-126转染后肺癌细胞中miRNA-126的表达量;吖啶橙染色观察肺癌细胞自噬囊泡的形成情况;Western blot检测自噬标志蛋白微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)的表达变化。结果:A549/DDP细胞自噬囊泡数量和LC3水平显著高于A549细胞(P<0.01);转染miRNA-126上调了A549/DDP细胞中miRNA-126的表达量(P<0.01);miRNA-126降低A549/DDP细胞中自噬囊泡比例和LC3-II蛋白表达水平(P<0.01),从而抑制了顺铂耐药细胞A549/DDP的自噬水平;自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)提高A549/DDP细胞对顺铂的敏感性,miRNA-126联合3-MA进一步增加A549/DDP细胞对顺铂的敏感性(P<0.01)。结论:miRNA-126通过抑制自噬逆转了肺癌A549/DDP细胞顺铂耐药。 展开更多
关键词 微小RNA-126 肺癌 自噬 顺铂 耐药性
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康艾注射液通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路诱导细胞周期阻滞及自噬性死亡改善A549/DDP细胞顺铂耐药性的研究
6
作者 吕佳璐 周欢 +2 位作者 刘文俊 王建光 王淳 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2024年第12期3127-3135,共9页
目的靶向细胞周期及细胞自噬,探讨康艾注射液(Kangai injection,KAI)通过PI3K/Akt/mTOR信号通路改善人肺腺癌A549/DDP细胞顺铂耐药性的分子机制。方法将A549/DDP细胞随机分为空白对照组、顺铂组(20μmol·L^(-1)cisplatin)及低、中... 目的靶向细胞周期及细胞自噬,探讨康艾注射液(Kangai injection,KAI)通过PI3K/Akt/mTOR信号通路改善人肺腺癌A549/DDP细胞顺铂耐药性的分子机制。方法将A549/DDP细胞随机分为空白对照组、顺铂组(20μmol·L^(-1)cisplatin)及低、中、高剂量KAI联合顺铂组(15 mg·mL^(-1)、25 mg·mL^(-1)、50 mg·mL^(-1)KAI+20μmol·L^(-1)cisplatin)。CCK-8法检测细胞活力、流式细胞术检测细胞周期分布情况、免疫细胞化学法检测p53蛋白的表达情况、蛋白质免疫印迹法分别检测p53、自噬相关蛋白LC3Ⅱ及自噬通路关键分子(mTOR、p-mTOR、Akt、p-Akt)蛋白表达水平,并利用PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002进一步明确KAI改善顺铂耐药性的分子机制。结果与对照组相比,顺铂组及低、中、高剂量KAI联合顺铂组细胞存活率显著下降(P<0.05);与顺铂组相比,中、高剂量KAI联合顺铂组细胞周期S+G2/M期细胞比率升高(P<0.05),低、中、高剂量KAI联合顺铂组p53蛋白平均光密度值显著增加(P<0.05),中、高剂量KAI联合顺铂组自噬相关蛋白LC3Ⅱ表达水平升高(P<0.05)、信号通路相关蛋白mTOR及Akt磷酸化(p-mTOR、p-Akt)水平降低(均P<0.01);通路抑制剂实验结果显示,LY294002可有效抑制KAI联合顺铂诱导的LC3Ⅱ蛋白表达上调及细胞死亡(均P<0.05)。结论KAI联合顺铂通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路,诱导细胞周期阻滞及细胞自噬性死亡,改善NSCLC顺铂耐药性。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 顺铂耐药 康艾注射液 周期阻滞 自噬
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TPX2基因沉默对膀胱癌耐药细胞株T24/DDP顺铂化疗敏感性的增强作用及其机制 被引量：2
7
作者 张鹰 蒋先训 万朝辉 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期346-354,共9页
目的:探讨爪蟾驱动蛋白样蛋白2靶蛋白(TPX2)基因沉默对膀胱癌耐药细胞株T24/顺铂(DDP)的化疗敏感性的影响,并阐明其作用机制。方法:采用DDP浓度梯度刺激法建立DDP耐药细胞株T24/DDP,将细胞分为T24细胞组和T24/DDP细胞组。MTT法检测各组... 目的:探讨爪蟾驱动蛋白样蛋白2靶蛋白(TPX2)基因沉默对膀胱癌耐药细胞株T24/顺铂(DDP)的化疗敏感性的影响,并阐明其作用机制。方法:采用DDP浓度梯度刺激法建立DDP耐药细胞株T24/DDP,将细胞分为T24细胞组和T24/DDP细胞组。MTT法检测各组细胞增殖活性,并根据半数抑制浓度(IC50)值计算耐药指数(RI);实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法和Westernblotting法检测细胞中TPX2mRNA及蛋白表达水平。通过小干扰RNA(siRNA)沉默T24/DDP细胞中TPX2基因表达,再将细胞分为空白对照组、阴性对照干扰(si-NC)组、TPX2沉默(si-TPX2)组、si-NC+DDP(2 mg·L^(-1) DDP)组和si-TPX2+DDP(2 mg·L^(-1) DDP)组。RT-qPCR法和Western blotting法检测转染后细胞中TPX2 mRNA及蛋白表达水平,MTT法检测各组细胞增殖活性,流式细胞术检测各组凋亡细胞率和细胞周期G2/M期百分率,Transwell小室实验检测各组迁移细胞数和侵袭细胞数,Western blotting法检测各组细胞中Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路相关蛋白β-catenin、P-糖蛋白(P-gp)、锌指蛋白转录因子1(Snail1)和Survivin蛋白表达水平。结果:成功建立膀胱癌DDP耐药细胞株T24/DDP,RI值为8.76。与T24细胞组比较,T24/DDP细胞组中TPX2 mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。与空白对照组和si-NC组比较,si-TPX2组T24/DDP细胞中TPX2mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.01),且DDP的IC50值明显降低(P<0.01)。与si-NC组比较,si-TPX2组T24/DDP细胞凋亡率和细胞周期G2/M期百分率明显升高(P<0.01),迁移细胞数和侵袭细胞数明显降低(P<0.01),T24/DDP细胞中β-catenin、P-gp、Snail1和Survivin蛋白表达水平明显降低(P<0.01);与si-NC+DDP组比较,si-TPX2+DDP组T24/DDP细胞凋亡率和细胞周期G2/M期百分率明显升高(P<0.01),迁移细胞数和侵袭细胞数明显降低(P<0.01),T24/DDP细胞中β-catenin、P-gp、Snail1和Survivin蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。结论:TPX2基因沉默通过抑制Wnt/β-catenin信号通路增强膀胱癌耐药细胞株T24/DDP对DDP的化疗敏感性。 展开更多
关键词 爪蟾驱动蛋白样蛋白2靶蛋白 膀胱肿瘤 顺铂 化疗敏感性 Wnt/β-catenin信号通路
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基于Wnt/JNK信号通路探讨补中益气汤联合顺铂增强A549细胞移植瘤对顺铂敏感性的分子机制
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作者 王莹 黄婧漪 +4 位作者 刘玥彤 李贺 于丹 刘春英 高原 《辽宁中医杂志》 北大核心 2025年第8期188-192,I0005,共6页
目的通过对补中益气汤联合顺铂(cisplatin,DDP)对非小细胞肺癌荷瘤裸鼠移植瘤Wnt/JNK信号通路影响的研究,探讨补中益气汤增强顺铂敏感性的分子机制。方法培养A549细胞,将其接种于裸鼠腋窝皮下并将所有裸鼠随机等分为5组,分别是A549对照... 目的通过对补中益气汤联合顺铂(cisplatin,DDP)对非小细胞肺癌荷瘤裸鼠移植瘤Wnt/JNK信号通路影响的研究,探讨补中益气汤增强顺铂敏感性的分子机制。方法培养A549细胞,将其接种于裸鼠腋窝皮下并将所有裸鼠随机等分为5组,分别是A549对照荷瘤组(a)、A549荷瘤+DDP组(b)、A549荷瘤+DDP+低剂量中药组(c)、A549荷瘤+DDP+中剂量中药组(d)、A549荷瘤+DDP+高剂量中药组(e)。测量并记录每组移植瘤的体积,测量每组移植瘤重量并计算抑瘤率。应用蛋白印迹法检测移植瘤组织中Wnt11、Rac1、JNK、p-JNK、c-Jun、p-c-Jun、P-gp蛋白的表达。结果补中益气汤可同时缩小A549细胞株荷瘤裸鼠移植体积,减轻移植瘤重量,提高顺铂抑瘤率,变化呈现显著的时间依赖性和剂量依赖性。与DDP组相比,DDP联合低、中、高剂量中药组移植瘤的Wnt11、Rac1、p-JNK、p-c-Jun、P-gp蛋白表达均下调(P<0.05),JNK、c-Jun蛋白表达无明显变化(P>0.05)。结论补中益气汤可抑制A549细胞株荷瘤裸鼠移植瘤生长,同时下调移植瘤Wnt11、Rac1、p-JNK、p-c-Jun、P-gp蛋白的表达,推测其可通过抑制Wnt/JNK信号通路来增强顺铂的敏感性。 展开更多
关键词 补中益气汤 顺铂 Wnt/JNK信号通路 非小细胞肺癌 化疗
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在顺铂耐药的A549/DDP人肺腺癌细胞中乙醛脱氢酶表达增加 被引量：8
9
作者 何进喜 宋旭梅 +5 位作者 于亮 李靖 乔志雄 氿睿 余博 刘晓明 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期625-629,共5页
目的观察乙醛脱氢酶(ALDH)在A549/DDP人肺腺癌耐顺铂细胞中的表达及在顺铂耐药性中的功能。方法流式细胞术检测肿瘤干细胞标志分子CD44、CD90、CD73、CD105、上皮细胞黏附分子(Ep CAM)、ATP结合盒式超家族G成员2(ABCG2)以及ALDH在A549... 目的观察乙醛脱氢酶(ALDH)在A549/DDP人肺腺癌耐顺铂细胞中的表达及在顺铂耐药性中的功能。方法流式细胞术检测肿瘤干细胞标志分子CD44、CD90、CD73、CD105、上皮细胞黏附分子(Ep CAM)、ATP结合盒式超家族G成员2(ABCG2)以及ALDH在A549细胞和A549/DDP细胞表达的阳性率;MTT法检测100μmol/L二乙氨基苯甲醛(DEAB)处理前后A549/DDP细胞的增殖能力和对顺铂的敏感性;实时定量PCR检测ALDH各亚型在A549细胞与A549/DDP细胞中的mRNA水平的表达;Western blot法检测实时定量PCR有明显差异结果的ALDH的亚型ALDH1A3和ALDH1B1在A549细胞与A549/DDP细胞中的蛋白水平的表达。结果与A549细胞相比,ABCG2和ALDH在A549/DDP细胞的阳性率增加,ALDH阳性率达97.7%,在A549细胞中仅仅为4.3%;CD44、CD90、CD73、CD105在二者间阳性率无明显差异,而Ep CAM在A549/DDP细胞阳性率降低;经100μmol/L DEAB处理后,A549/DDP细胞对顺铂的耐药性显著低于未处理前;与A549细胞相比,ALDH1A3和ALDH1B1的mRNA在A549/DDP细胞中表达水平增高;ALDH1B1蛋白表达升高,ALDH1A3表达降低。结论 ALDH可作为顺铂耐药人肺腺癌细胞的标志分子之一,其中ALDH1B1在顺铂耐药性中可能发挥一定作用,为临床上治疗肺腺癌耐药患者提供新的治疗靶点和策略。 展开更多
关键词 A549/ddp 顺铂耐药 乙醛脱氢酶
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黄芪多糖通过调控miR-20a/TGFBR2分子轴降低结直肠癌HT-29/DDP细胞的顺铂耐药性 被引量：14
10
作者 招志辉 丘振文 招远明 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期417-425,共9页
目的:探讨黄芪多糖(APS)通过调控miR-20a/TGFBR2分子轴对结直肠癌(CRC)顺铂耐药细胞HT-29/DDP增殖、侵袭、凋亡和耐药性的影响及其机制。方法:以人CRC HT-29细胞、HT-29/DDP细胞为亲本和耐药细胞模型,将HT-29/DDP细胞随机分为4组:对照组... 目的:探讨黄芪多糖(APS)通过调控miR-20a/TGFBR2分子轴对结直肠癌(CRC)顺铂耐药细胞HT-29/DDP增殖、侵袭、凋亡和耐药性的影响及其机制。方法:以人CRC HT-29细胞、HT-29/DDP细胞为亲本和耐药细胞模型,将HT-29/DDP细胞随机分为4组:对照组、APS处理组、过表达miR-20a+APS组、沉默TGFBR2+APS组。用不同质量浓度的APS(0、0.5、1.0、1.5和2.0 mg/ml)处理HT-29/DDP细胞后,以qPCR和Wb实验检测细胞中miR-20a和TGFBR2的表达水平;用CCK-8、Transwell和Annexin V-FITC/PI染色流式细胞术检测对HT-29/DDP细胞增殖、侵袭和凋亡的影响;用双荧光素酶报告基因验证miR-20a与TGFBR2的靶向作用关系。构建裸鼠皮下CRC HT-29/DDP细胞移植瘤模型,观察APS对移植瘤生长的影响及其机制。结果:APS显著抑制HT-29/DDP细胞的增殖(P<0.01),且呈剂量依赖性。miR-20a在经APS处理后的HT-29/DDP细胞中低表达(P<0.01)、TGFBR2的表达水平显著上调(P<0.01)。双荧光素酶报告基因证实miR-20a靶向作用TGFBR2并下调其表达水平。体内外实验证实APS通过靶向下调miR-20a对TGFBR2的抑制作用,提高HT-29/DDP细胞的药物敏感性,进而抑制该细胞增殖、侵袭和促进凋亡(均P<0.01);同时发现,该作用与抑制PCNA、Bcl-2蛋白而促进Bax、Caspase-3蛋白表达有关联。结论:APS通过下调miR-20a对TGFBR2表达的抑制作用,从而逆转HT-29/DDP细胞对顺铂的耐药性。 展开更多
关键词 黄芪多糖 结直肠癌 HT-29细胞 HT-29/ddp细胞 顺铂 miR-20a/TGFBR2分子轴
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雷公藤多苷增强耐顺铂人上皮性卵巢癌SKOV3/DDP细胞株顺铂敏感性的体外研究 被引量：3
11
作者 刘文成 谭布珍 +3 位作者 占欣璐 胡辉 黄根华 曹青 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2017年第12期1364-1370,共7页
目的:探讨雷公藤多苷(GTW)对耐顺铂人上皮性卵巢癌细胞株(SKOV3/DDP)的顺铂(DDP)增敏作用及机制。方法:将对数生长期的SKOV3/DDP细胞随机分为8组:空白对照组、10μg/mL DDP组、50μg/mL GTW组、800μg/mL GTW组、3 200μg/mL GTW组、10... 目的:探讨雷公藤多苷(GTW)对耐顺铂人上皮性卵巢癌细胞株(SKOV3/DDP)的顺铂(DDP)增敏作用及机制。方法:将对数生长期的SKOV3/DDP细胞随机分为8组:空白对照组、10μg/mL DDP组、50μg/mL GTW组、800μg/mL GTW组、3 200μg/mL GTW组、10μg/mL DDP+50μg/mL GTW组、10μg/mL DDP+800μg/mL GTW组、10μg/mL DDP+3 200μg/mL GTW组,利用CCK-8法、流式细胞术、Western blot法检测各组细胞生长、细胞凋亡以及细胞谷胱甘肽S转移酶-π(GST-π)基因蛋白、P-糖蛋白(MDR1)、信号转导和转录激活因子3(STAT3)、p-STAT3的表达。结果:DDP与GTW联用在抑制SKOV3/DDP细胞生长作用上呈现相加效应;800、3 200μg/mL GTW分别与10μg/mL DDP联用后,可显著促进SKOV3/DDP细胞凋亡,下调p-STAT3的表达(P<0.05)。结论:GTW可显著增强SKOV3/DDP细胞对DDP的敏感性,其作用机制可能是下调STAT3信号通路中的p-STAT3表达。 展开更多
关键词 雷公藤多苷 SKOV3/ddp 顺铂 增敏作用 STAT3
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槐耳清膏对人肺腺癌A549/DDP细胞增殖的影响及顺铂耐药逆转作用 被引量：4
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作者 鲁明骞 卢宏达 +6 位作者 卢忠心 孔庆志 雷章 许新华小 许新华 徐冰清 郭蓉 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2016年第9期2185-2187,共3页
目的:探讨槐耳清膏对人肺腺癌A549细胞和A549/DDP细胞增殖的抑制影响及其顺铂耐药细胞A549/DDP的逆转作用。方法:以体外培养的人肺腺癌A549及A549/DDP细胞为实验模型,采用MTT法测定不同浓度槐耳清膏对A549细胞及A549/DDP细胞的增殖抑制... 目的:探讨槐耳清膏对人肺腺癌A549细胞和A549/DDP细胞增殖的抑制影响及其顺铂耐药细胞A549/DDP的逆转作用。方法:以体外培养的人肺腺癌A549及A549/DDP细胞为实验模型,采用MTT法测定不同浓度槐耳清膏对A549细胞及A549/DDP细胞的增殖抑制率,并运用流式细胞术检测顺铂联合槐耳清膏对A549/DDP细胞的变化,以及增敏作用效应。结果:槐耳清膏对A549细胞及A549/DDP细胞的增殖有明显抑制作用,随着药物浓度的增加,其抑制率逐渐增加,具有明显的量-效关系(P<0.05)。顺铂40μmol/L作用于A549及A549/DDP细胞48 h后,其凋亡率分别为(27.61±3.45)%和(17.93±1.73)%,两组间有统计学差异(P<0.01)。槐耳清膏1 mg/m L作用于人肺腺癌A549和A549/DDP细胞40 h后,再以相同浓度顺铂诱导,A549细胞凋亡率为(32.35±2.68)%,A549/DDP细胞凋亡率为(30.01±3.65)%,两组间无统计学意义,但与单独DDP作用相比,差异具有显著意义(P<0.01)。结论:槐耳清膏能显著抑制人肺腺癌A549及A549/DDP细胞的增殖,诱导细胞凋亡,还可以增加A549/DDP细胞对顺铂的敏感性。 展开更多
关键词 槐耳清膏 人肺腺癌A549/ddp细胞 细胞增殖 顺铂耐药
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CF加5-FU持续滴注联合DDP治疗晚期食管癌 被引量：20
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作者 江艺 杨钰贤 +3 位作者 许香华 邱希辉 徐绮腻 张盛奇 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2002年第2期155-156,159,共3页
目的 :评价大剂量醛氢叶酸 (CF)加氟尿嘧啶 (5 FU)持续 4 8小时滴注联合顺铂 (DDP)方案治疗晚期食管癌的疗效及毒副反应 ,探索晚期食管癌较合理治疗方案。方法 :对入选的 30例晚期食管癌病人采用大剂量CF(2 0 0mg m2 ) +5 FU(3.0g m2 ... 目的 :评价大剂量醛氢叶酸 (CF)加氟尿嘧啶 (5 FU)持续 4 8小时滴注联合顺铂 (DDP)方案治疗晚期食管癌的疗效及毒副反应 ,探索晚期食管癌较合理治疗方案。方法 :对入选的 30例晚期食管癌病人采用大剂量CF(2 0 0mg m2 ) +5 FU(3.0g m2 )持续 4 8小时滴注联合顺铂方案进行治疗 ,平均 2 .5 3个疗程。结果 :完全缓解 (CR) 2例 ,部份缓解 (PR) 14例 ,稳定 (NC) 13例 ,进展 (PD) 1例 ,有效率为 5 3.33%。主要的毒副反应为恶心呕吐、口腔粘膜炎、骨髓抑制及脱发。上述毒副作用除恶心呕吐较明显外 ,其余绝大多数均为Ⅰ～Ⅱ度反应 ,且发生率不高 ,经常规对症治疗后见好转。结论 :大剂量CF +5FU持续 4 8小时滴注联合顺铂方案治疗晚期食管癌疗效好 ,毒副反应轻 。 展开更多
关键词 持续滴注 ddp 晚期食管癌 醛氢叶酸 顺铂 氟尿嘧啶 联合化疗
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人参单体Rh_2诱导人肺腺癌A549/DDP细胞凋亡的体外研究 被引量：16
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作者 周东波 胡成平 +1 位作者 苏晓丽 杨红忠 《中国肺癌杂志》 CAS 2005年第4期257-260,共4页
背景与目的肺癌已成为人类癌症主要死亡原因之一。从植物中开发抗肿瘤药物是国内外抗肿瘤新药开发的一个热点。本研究的目的是观察人参单体Rh2诱导人肺腺癌A549/DDP细胞系凋亡的作用,并探讨其可能的分子机制。方法体外培养的人肺腺癌A54... 背景与目的肺癌已成为人类癌症主要死亡原因之一。从植物中开发抗肿瘤药物是国内外抗肿瘤新药开发的一个热点。本研究的目的是观察人参单体Rh2诱导人肺腺癌A549/DDP细胞系凋亡的作用,并探讨其可能的分子机制。方法体外培养的人肺腺癌A549/DDP细胞经不同浓度梯度的人参单体Rh2干预,分别应用MTT实验观察其对细胞增殖的影响,用流式细胞术检测细胞周期、凋亡指数及相关基因表达的改变,以及用双抗体夹心ELISA法测定细胞上清液sApo-1/Fas浓度变化。结果①人参单体Rh2可抑制A549/DDP细胞的生长,并呈剂量、时间依赖作用。②人参单体Rh2处理A549/DDP细胞24h,实验组凋亡指数显著高于对照组(P<0.001),G0/G1期细胞比例显著高于对照组(P<0.01),S期细胞比例显著低于对照组(P<0.01),G2/M期细胞比例与对照组比较无显著性差异(P>0.05)。③实验组p53、Fas阳性表达率显著高于对照组(P<0.01,P<0.001),Bcl-2阳性表达率显著低于对照组(P<0.001)。④实验组A549/DDP细胞培养上清液于不同时间sApo-1/Fas含量均显著低于对照组(P<0.05)。结论人参单体Rh2具有诱导人肺腺癌A549/DDP细胞凋亡的作用,其分子机制可能是上调p53和Fas及下调Bcl-2的表达、通过Fas/FasL系统途径诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 人参单体Rh2 肺肿瘤 A549/ddp细胞株 凋亡
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姜黄素增强卵巢癌耐药细胞株COC1/DDP对顺铂敏感性的研究 被引量：9
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作者 吕靖 英焕春 戴进 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2009年第8期1183-1186,共4页
目的:探讨姜黄素的使用与卵巢癌顺铂耐药细胞株COC1/DDP对顺铂化疗敏感性的关系。方法:采用MTT法和TUNEL法检测姜黄素、顺铂单独和联合作用时对COC1/DDP细胞增殖和凋亡的影响;RT-PCR检测上述各组细胞凋亡相关基因Bcl-2、Smac的表达。结... 目的:探讨姜黄素的使用与卵巢癌顺铂耐药细胞株COC1/DDP对顺铂化疗敏感性的关系。方法:采用MTT法和TUNEL法检测姜黄素、顺铂单独和联合作用时对COC1/DDP细胞增殖和凋亡的影响;RT-PCR检测上述各组细胞凋亡相关基因Bcl-2、Smac的表达。结果:顺铂的浓度在1.25～5μg/mL时与姜黄素合用后耐药细胞生存率下降明显(P<0.05),尤以2.5μg/mL顺铂和20μmol/L姜黄素联合作用时,耐药细胞生存率下降最明显;顺铂与姜黄素联合用药与单独用药相比,凋亡率明显增加(P<0.05);联合用药与单独用药相比Bcl-2 mRNA的表达明显降低(P<0.05),Smac mRNA的表达明显增高(P<0.05)。结论:姜黄素能够显著抑制COC1/DDP增殖,并能增强该细胞系对顺铂的敏感性,机制可能与降低Bcl-2基因的表达,增加Smac基因的表达有关。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 姜黄素 顺铂 基因 BCL-2 COC1/ddp 耐药 SMAC
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黄芪多糖(APS)及联合顺铂(DDP)抑制小鼠Lewis肺癌复发瘤生长的机制 被引量：15
16
作者 刘丹 李杨 +4 位作者 王雪林 王彦君 马寅瑞 陈彦文 明海霞 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1105-1110,共6页
目的观察黄芪多糖(APS)及联合顺铂(DDP)对小鼠Lewis肺癌术后复发瘤病理形态及转移相关蛋白CD44、CD62P和骨桥蛋白(OPN)表达的影响。方法选取C57BL/6J小鼠10只作为供瘤组,另外80只随机分为模型组、(50、100、200)μg/mL APS处理组、6 mg/... 目的观察黄芪多糖(APS)及联合顺铂(DDP)对小鼠Lewis肺癌术后复发瘤病理形态及转移相关蛋白CD44、CD62P和骨桥蛋白(OPN)表达的影响。方法选取C57BL/6J小鼠10只作为供瘤组,另外80只随机分为模型组、(50、100、200)μg/mL APS处理组、6 mg/kg DDP处理组、3 mg/kg DDP联合(50、100、200)μg/m L APS处理组,每组10只。取供瘤组小鼠瘤组织制备Lewis瘤单细胞悬液接种于每只小鼠左侧后肢爪垫内侧皮下10 d后,切除爪垫瘤组织,建立肺癌术后复发转移模型;造模次日起给药,第16天脱颈处死。采用HE染色法观察术后复发瘤组织病理形态,免疫组织化学染色法检测复发瘤中CD44、CD62P和OPN的表达。结果与模型组相比,各处理组复发瘤组织坏死加重,尤以DDP联合200μg/mL APS处理组更明显,且各处理组CD44、CD62P和OPN蛋白的表达均有降低,以DDP以及DDP联合(100、200)μg/m L APS处理组最为显著。结论DDP联合APS能抑制Lewis肺癌细胞生长并降低瘤组织CD44、CD62P和OPN蛋白表达。 展开更多
关键词 黄芪多糖(APS) LEWIS肺癌 顺铂(ddp) CD44 CD62P 骨桥蛋白(OPN)
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Bcl-XL siRNA对肺腺癌细胞A549/DDP药物敏感性及凋亡的影响 被引量：2
17
作者 黄泽香 刘丽娟 +4 位作者 姚淑琼 雷小勇 朱炳阳 唐圣松 廖端芳 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2007年第1期57-61,共5页
目的:探讨小干扰RNA沉默Bcl-XL对肺腺癌耐药细胞株A549/DDP药物敏感性的影响及其凋亡机制。方法:将Bcl-XLsiRNA质粒载体转染至A549/DDP细胞,MTT、流式细胞仪检测细胞药物敏感性的改变;丫啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色法检测细胞凋亡;RT-PCR... 目的:探讨小干扰RNA沉默Bcl-XL对肺腺癌耐药细胞株A549/DDP药物敏感性的影响及其凋亡机制。方法:将Bcl-XLsiRNA质粒载体转染至A549/DDP细胞,MTT、流式细胞仪检测细胞药物敏感性的改变;丫啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色法检测细胞凋亡;RT-PCR检测Bcl-XLmRNA水平;Western-Blot检测Bcl-XL、caspase-3蛋白表达的变化。结果:分别用0.2、2、20、200μg/mL顺铂处理细胞48 h,MTT显示转染Bcl-XLsiRNA细胞组A570吸光度值较阴性siRNA细胞组和未转染对照组明显降低,细胞生长抑制率明显增高;用20μg/mL顺铂处理细胞48 h,流式细胞仪检测,转染Bcl-XLsiRNA组凋亡率较转染阴性siRNA组和未转染组增加;AO/EB染色显示转染Bcl-XLsiRNA的细胞较转染阴性siRNA及未转染者凋亡率增加;转染Bcl-XLsiRNA降低了Bcl-XLmRNA和蛋白水平,升高了caspase-3活性形式蛋白表达。结论:Bcl-XLsiRNA特异性下调A549/DDP细胞Bcl-XL的表达,活化caspase-3蛋白,促进A549/DDP细胞凋亡,增强该肺腺瘤细胞对顺铂的敏感性。 展开更多
关键词 小干扰RNA BCL-XL A549/ddp细胞 凋亡 顺铂
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染料木素对非小细胞型肺癌A549/DDP细胞增殖和凋亡的影响 被引量：5
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作者 任彦 陆红玲 +2 位作者 宋永祥 李大玉 徐刚 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期669-672,共4页
目的:观察染料木素(genistein)对人非小细胞型肺癌(non small cell lung cancer,NSCLC)A549/DDP细胞增殖和凋亡的影响。方法:培养A549及A549/DDP细胞株,以A549细胞为对照。①MTT法测定A549及A549/DDP细胞对顺铂的IC50值、耐药倍数及细... 目的:观察染料木素(genistein)对人非小细胞型肺癌(non small cell lung cancer,NSCLC)A549/DDP细胞增殖和凋亡的影响。方法:培养A549及A549/DDP细胞株,以A549细胞为对照。①MTT法测定A549及A549/DDP细胞对顺铂的IC50值、耐药倍数及细胞增殖抑制率;②测定0、1.25、2.5、5.0、10、20、40、60、80μg/ml染料木素作用48 h对A549/DDP细胞增殖的抑制率及IC50值;③用6.25、12.5、25μg/ml染料木素处理A549/DDP细胞24 h后,经流式细胞计量仪检测细胞周期及细胞凋亡情况。结果:①A549及A549/DDP细胞对顺铂的IC50值分别为33.6μmol/L和76.9μmol/L,耐药倍数为2.3;细胞增殖抑制率随顺铂浓度增加而逐渐加大;②染料木素对A549/DDP细胞生长的影响,随染料木素浓度增加表现为先促增殖后抑制的作用,其对A549及A549/DDP细胞的IC50值分别为85.1μg/ml和80.2μg/ml;③6.25、12.5、25μg/ml染料木素作用于A549/DDP细胞24 h后,随染料木素浓度的增加,停留于G2/M期的细胞数逐渐增多(P<0.05),同时A549/DDP细胞出现凋亡。结论:染料木素可抑制A549/DDP细胞的生长,将细胞阻滞于G2/M期,并诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 染料木素 人非小细胞型肺癌A549 ddp细胞 细胞增殖 细胞凋亡
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E2F-1基因沉默可增强人胃癌耐药细胞株SGC-7901/DDP对顺铂的敏感性 被引量：4
19
作者 廉超 杨杰 +2 位作者 王晓通 谢玉波 肖强 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1727-1732,共6页
目的探讨E2F转录因子1(E2F transcription factor 1,E2F-1)基因沉默对人胃癌耐药细胞株SGC-7901/DDP对顺铂敏感性的影响及可能机制。方法将SGC-7901/DDP细胞接种于六孔板,分为3组:以E2F-1沉默重组慢病毒颗粒(Lv-shRNA-E2F-1)感染SGC-790... 目的探讨E2F转录因子1(E2F transcription factor 1,E2F-1)基因沉默对人胃癌耐药细胞株SGC-7901/DDP对顺铂敏感性的影响及可能机制。方法将SGC-7901/DDP细胞接种于六孔板,分为3组:以E2F-1沉默重组慢病毒颗粒(Lv-shRNA-E2F-1)感染SGC-7901/DDP,作为Lv-shRNA-E2F-1组;以阴性对照慢病毒颗粒(Lv-shRNA-NC)感染SGC-7901/DDP,作为Lv-shRNANC组;空白对照组不做任何处理。以MTT法测定转染后各组细胞对DDP的半数抑制浓度(IC50),并以AxnnexinV-PE/7-AAD双染色流式细胞术检测各组细胞凋亡率及周期分布。应用Western blot和半定量RT-PCR技术分别对各组细胞中E2F-1、survivin、Bcl-2的mRNA及蛋白水平进行检测。结果与Lv-shRNA-NC组和空白对照组相比,Lv-shRNA-E2F-1组细胞对顺铂的IC50显著降低,细胞凋亡率显著提高,细胞周期阻滞于G0/G1期,差别均有统计学意义(P<0.05);Lv-shRNA-E2F-1组E2F-1mRNA水平较Lv-shRNA-NC组和空白对照组分别下降45.0%和41.3%,蛋白水平分别下降66.7%和70.5%(均P<0.01);LvshRNA-E2F-1组survivin mRNA水平较Lv-shRNA-NC组和空白对照组分别下降30.3%和28.7%,蛋白水平分别下降56.5%和53.6%(均P<0.01);Lv-shRNA-E2F-1组Bcl-2 mRNA水平较Lv-shRNA-NC组和空白对照组分别下降76.6%和76.8%,蛋白水平分别下降74.6%和79.9%(均P<0.01);Lv-shRNA-NC组与空白对照组比较,上述指标差别均无统计学意义(均P>0.05)。结论:沉默E2F-1基因可有效提高人胃癌耐药细胞株SGC-7901/DDP对顺铂的敏感性,其机制可能与survivin及Bcl-2表达下调有关,提示E2F-1可能成为胃癌药物治疗的新靶点。 展开更多
关键词 E2F-1 胃癌 cisplatin 化疗敏感性 survivin Bcl-2
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补中益气汤含药血清联合siRNA对肺腺癌A549/DDP细胞的LRP表达影响 被引量：4
20
作者 李璐璐 迟寿军 +2 位作者 王莹 井欢 刘春英 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1211-1214,共4页
目的:运用小干扰RNA片段(small interfering RNA,siRNA)的方法特异性沉默肺耐药蛋白(lung resistance protein,LRP)基因,观测该方法同补中益气汤含药血清联合应用逆转人肺腺癌耐药细胞A549/DDP的效果。方法:设计并合成针对LRP基因对应... 目的:运用小干扰RNA片段(small interfering RNA,siRNA)的方法特异性沉默肺耐药蛋白(lung resistance protein,LRP)基因,观测该方法同补中益气汤含药血清联合应用逆转人肺腺癌耐药细胞A549/DDP的效果。方法:设计并合成针对LRP基因对应序列的siRNA,采用转染试剂对细胞进行转染。实验分组为:空白对照组、补中益气汤含药血清组、siRNA组及补中益气汤含药血清+siRNA组,利用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测对该基因的抑制作用,Western blot及免疫细胞化学法检测蛋白质表达。结果:参照空白对照组,补中益气汤含药血清组、siRNA组及补中益气汤含药血清+siRNA组mRNA及LRP蛋白表达均减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:补中益气汤含药血清和siRNA均能降低A549/DDP的LRP蛋白表达,并且2种因素之间存在交互作用。 展开更多
关键词 补中益气汤 小干扰RNA片段 A549/ddp细胞 肺耐药蛋白
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