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乙型肝炎功能性治愈新药:聚焦反义寡核苷酸和小干扰RNA
1
作者 梁携儿 刘智泓 侯金林 《临床肝胆病杂志》 北大核心 2025年第1期7-14,共8页
在乙型肝炎治疗领域,现有的核苷(酸)类似物以及聚乙二醇干扰素在功能性治愈方面的疗效较为有限。最近,反义寡核苷酸与小干扰RNA等小核酸药物以全新的作用机制和令人瞩目的早期临床研究疗效,为乙型肝炎的功能性治愈带来了前所未有的突破... 在乙型肝炎治疗领域,现有的核苷(酸)类似物以及聚乙二醇干扰素在功能性治愈方面的疗效较为有限。最近,反义寡核苷酸与小干扰RNA等小核酸药物以全新的作用机制和令人瞩目的早期临床研究疗效,为乙型肝炎的功能性治愈带来了前所未有的突破性进展。反义寡核苷酸和小干扰RNA等小核酸药物可降低HBsAg水平甚至HBsAg转阴。随着HBsAg的减少,可能部分恢复机体的乙型肝炎特异性免疫功能,并可能将单纯的HBsAg清除进一步转化为减少乙型肝炎相关肝脏事件等具有临床价值的硬终点。紧密结合新药背景下HBsAg的动态变化轨迹,进一步优化联合治疗的策略与方案,有望将乙型肝炎功能性治愈转化为提升患者生存率及显著改善其生活质量的最终目标。 展开更多
关键词 乙型肝炎 寡核苷酸类 反义 RNA 小分子干扰 乙型肝炎表面抗原 功能性治愈
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脂质体介导的hTERT PEI/ASODN缩合体对乳癌MCF-7细胞生长及hTERT表达的影响 被引量：2
2
作者 权松霞 张振中 +2 位作者 邵彦江 王晓娟 李惠翔 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2010年第4期554-559,共6页
目的:探讨脂质体介导的人端粒酶逆转录酶(hTERT)聚乙烯亚胺(PEI)/反义寡核苷酸(ASODN)缩合体对乳癌MCF-7细胞生长及hTERT表达的影响。方法:MCF-7细胞分为3组,分别转染ASODN、PEI/ASODN和脂质体PEI/ASODN,采用激光共聚焦扫描观察摄入情... 目的:探讨脂质体介导的人端粒酶逆转录酶(hTERT)聚乙烯亚胺(PEI)/反义寡核苷酸(ASODN)缩合体对乳癌MCF-7细胞生长及hTERT表达的影响。方法:MCF-7细胞分为3组,分别转染ASODN、PEI/ASODN和脂质体PEI/ASODN,采用激光共聚焦扫描观察摄入情况。另取MCF-7细胞分为9组:空白对照组、ASODN组、SODN组、溶媒组、空白脂质体组、PEI/ASODN组、PEI/SODN组、脂质体-PEI/ASODN组和脂质体-PEI/SODN组。转染后不同时间,分别采用MTT法、RT-PCR及免疫细胞化学方法检测MCF-7细胞的生长情况、hTERT蛋白以及 mRNA的表达。结果:脂质体介导的hTERTPEI/ASODN缩合体可以进入细胞内。转染后24、48和72h,9组间光密度值相比,差异均有统计学意义(F=11.187、30.283和33.080,P均<0.001)。与空白对照组相比,PEI/ASODN组、PEI/SODN组及脂质体-PEI/ASODN组光密度值降低(P<0.05)。与空白对照组相比,转染48h后hTERT蛋白和hTERT mRNA表达降低。结论:脂质体介导的hTERTPEI/ASODN缩合体能够有效进入细胞内,抑制MCF-7细胞的生长,其作用可能与抑制细胞中hTERT mRNA及蛋白的表达有关。 展开更多
关键词 MCF-7细胞 端粒酶逆转录酶 反义寡核苷酸 脂质体
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脂质体包裹^(99m)Tc-HYNIC-Survivin ASODN的鸟嘌呤含量与启动子位置对显像质量的影响 被引量：1
3
作者 贾红丽 冯珏 +2 位作者 张秀梅 杨阳 李晓东 《中国医学影像技术》 CSCD 北大核心 2011年第3期449-452,共4页
目的制备鸟嘌呤(G)含量及离启动子远近不同的4种脂质体包裹99mTc-HYNIC-Survivin ASODN对荷人肝癌裸鼠行SPECT显像,探讨其显像质量是否受G含量及启动子位置影响,以找到最佳反义显像的碱基序列,提高基因显像质量。方法制备两种(A1、A2)G... 目的制备鸟嘌呤(G)含量及离启动子远近不同的4种脂质体包裹99mTc-HYNIC-Survivin ASODN对荷人肝癌裸鼠行SPECT显像,探讨其显像质量是否受G含量及启动子位置影响,以找到最佳反义显像的碱基序列,提高基因显像质量。方法制备两种(A1、A2)G含量不同而离启动子远近相近的16个碱基单链ASODN和两种(A'1、A'2)G含量相同而离启动子远近不同的10个碱基单链ASODN,耦联HYNIC,99mTc标记后,经Cellufine GH-25纯化后脂质体包裹。用此显像剂对荷瘤裸鼠行肿瘤反义显像并通过ROI技术进行分析。结果肿瘤/对侧肌肉比值(T/NT)A1、A2分别为4.13±0.09和2.47±0.04(2 h),4.90±0.11和3.75±0.10(4 h);A'1、A'2分别为3.90±0.07和2.09±0.07(2 h),4.41±0.08和2.78±0.10(4 h)。上述各组T/NT值在各时间点差异有统计学意义(P<0.01)。结论 G含量相同,离启动子位置较近,显像质量较好;离启动子位置相近,G含量较低,显像质量较好。 展开更多
关键词 寡核苷酸 反义 启动区域(基因) 鸟嘌呤 放射性核素显像
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PEI-RGD/^(125)I-(α_V) ASODN的制备及其对肝癌HepG2细胞侵袭力的抑制
4
作者 蔡海东 谯娱 +4 位作者 袁雪宇 杨越华 袁世栋 孙明 吕中伟 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期609-613,共5页
目的:探讨以PEI-RGD(polyethyleneimine-Arg-Gly-Asp)为转染载体的125I-(αV)ASODN投递在体外对HepG2肝癌细胞侵袭力的影响。方法:125I标记整合素αV亚基的ASODN,以聚乙烯亚胺衍生物PEI-RGD为载体制备PEI-RGD/125I-(αV)ASODN复合物,通... 目的:探讨以PEI-RGD(polyethyleneimine-Arg-Gly-Asp)为转染载体的125I-(αV)ASODN投递在体外对HepG2肝癌细胞侵袭力的影响。方法:125I标记整合素αV亚基的ASODN,以聚乙烯亚胺衍生物PEI-RGD为载体制备PEI-RGD/125I-(αV)ASODN复合物,通过受体介导方式转染进入HepG2细胞,利用Boyden小室侵袭模型检测复合物对HepG2细胞侵袭力的影响。结果:(1)125I-(αV)ASODN的标记率为(73.78±4.09)%,放化纯度为(96.68±1.38)%,37℃放置48 h后的放化纯度仍>90%,表明其稳定性良好;(2)HepG2细胞对PEI-RGD/125I-(αV)ASODN的摄取于4μl/2μg时达到峰值[(12.77±0.85)%],之后明显降低,故选择2μl/1μg作为PEI-RGD/125I-(αV)ASODN对HepG2细胞的作用剂量;(3)相对于其他实验组和对照组,PEI-RGD/125I-(αV)ASODN组显著降低了HepG2细胞的侵袭能力(P<0.01)。结论:以PEI-RGD为载体投递125I-(α)ASODN能有效抑制HepG2细胞的侵袭力。 展开更多
关键词 聚乙烯亚胺-精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(PEI-RGD) 整合素αV亚基 asodn 肝肿瘤 侵袭
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ASO的发展、递送与免疫疗法的机遇挑战
5
作者 廖梦归 朱晨 王雅俊 《中国药科大学学报》 北大核心 2025年第4期424-431,共8页
反义寡核苷酸(ASO)药物在临床中的应用因免疫原性等问题面临挑战。为了解决这些问题,研究者通过化学修饰优化了ASO的核酸骨架和末端结构,显著提升了体内稳定性、靶向性及抗核酸酶降解能力。此外,递送系统和给药方式的优化有效提高了ASO... 反义寡核苷酸(ASO)药物在临床中的应用因免疫原性等问题面临挑战。为了解决这些问题,研究者通过化学修饰优化了ASO的核酸骨架和末端结构,显著提升了体内稳定性、靶向性及抗核酸酶降解能力。此外,递送系统和给药方式的优化有效提高了ASO的递送效率,使其能够更好地适应不同疾病的治疗需求。本文概述了ASO的发展、递送与免疫疗法的最新研究进展,旨在为ASO药物的化学修饰、递送效率、稳定性等方面提供参考,推动ASO在疾病治疗中的进一步发展。 展开更多
关键词 反义寡核苷酸 免疫原性 化学修饰 递送策略
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亨廷顿病基因治疗的进展
6
作者 裴中 吴腾腾 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期552-557,共6页
亨廷顿病是一种常染色体显性遗传病,近年来多项针对mRNA水平的干预策略相继开展临床试验,同时随着聚集的规律性间隔短回文重复序列(clustered regularly interspersed short palindromic repeats,CRISPR)/CRISPR关联基因(CRISPR associa... 亨廷顿病是一种常染色体显性遗传病,近年来多项针对mRNA水平的干预策略相继开展临床试验,同时随着聚集的规律性间隔短回文重复序列(clustered regularly interspersed short palindromic repeats,CRISPR)/CRISPR关联基因(CRISPR associated gene,Cas)系统的日渐成熟,针对致病基因组的基因编辑策略也屡有报道。本文将围绕亨廷顿病基因治疗的临床现状、研究进展、临床评估的改进做简要综述。 展开更多
关键词 亨廷顿病 基因治疗 反义寡核苷酸 基因编辑
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反义寡核苷酸的作用机制及其在运动系统中的研究进展 被引量：1
7
作者 杨建乐 吴南 《协和医学杂志》 CSCD 北大核心 2024年第4期891-896,共6页
反义寡核苷酸(antisense oligonucleotides,ASOs)是一类新型的小分子基因靶向药物,可与目的mRNA结合,ASOs以其与目标序列互补的碱基配对方式,对基因进行靶向调控。随着基因测序技术和分子合成技术的不断发展,ASOs在运动系统中的研究和... 反义寡核苷酸(antisense oligonucleotides,ASOs)是一类新型的小分子基因靶向药物,可与目的mRNA结合,ASOs以其与目标序列互补的碱基配对方式,对基因进行靶向调控。随着基因测序技术和分子合成技术的不断发展,ASOs在运动系统中的研究和应用进一步深入。本文阐述了ASOs在基因沉默和表达调控中的作用机制,以及其在基因治疗方面的应用前景。此外,还介绍了ASOs在运动系统疾病中的研究进展和应用情况,并分析此类药物目前所面临的问题,旨在深化医务人员对ASOs的认识,并为其在生物医学研究和临床中的推广应用提供有益参考。 展开更多
关键词 反义寡核苷酸 基因治疗 临床应用 运动系统
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可编辑DNA纳米花抑制LLC细胞增殖、迁移及侵袭的实验研究
8
作者 曹宇超 廖洪建 +2 位作者 胡璨 郭佳俊 杜永洪 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1105-1112,共8页
目的:探究载有阿霉素(doxorubicin,DOX)和缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)反义寡核苷酸的DNA纳米花(DNA nanoflower,DF)对小鼠肺癌(lewis lung carcinoma,LLC)细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法:通过滚环... 目的:探究载有阿霉素(doxorubicin,DOX)和缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)反义寡核苷酸的DNA纳米花(DNA nanoflower,DF)对小鼠肺癌(lewis lung carcinoma,LLC)细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法:通过滚环扩增反应(rolling circle amplification,RCA)合成含有HIF-1α反义寡核苷酸的DHA-DF,并检测其物理特性;负载DOX后获得载DOX纳米花(DOX-loaded DNA nanoflower,DDF)。通过细胞计数试剂(cell counting kit-8,CCK-8)评价DHA-DDF对LLC细胞活性的影响;通过划痕实验和Transwell小室实验检测DHA-DDF对LLC细胞迁移及侵袭能力的影响;通过蛋白质印记实验和定量聚合酶链反应检测LLC细胞HIF-1α的表达水平。结果:DHA-DF为多孔花瓣状球形颗粒,粒径为(421.26±7.90)nm;与游离DOX和DA-DDF相比,经DHA-DDF处理后的LLC细胞HIF-1α蛋白及mRNA的表达量明显下降(均P<0.05),且其细胞活性、划痕愈合面积及侵袭细胞数目明显减少(均P<0.05)。结论:DHA-DDF能有效降低HIF-1α的表达并抑制LLC细胞的增殖、迁移和侵袭,有望为临床肿瘤治疗提供新的思路。 展开更多
关键词 DNA纳米花 缺氧 肺癌 反义寡核苷酸
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Ezrin在肝癌中的表达及其与肿瘤黏附、侵袭和门静脉癌栓的关系 被引量：22
9
作者 孙琦蛮 樊嘉 +4 位作者 刘银坤 周俭 余耀 邱双健 吴志全 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期147-150,F002,共5页
目的　探讨细胞骨架连接蛋白 (ezrin)在肝癌组织和细胞系中的表达及其与肿瘤黏附、侵袭和门静脉癌栓的关系。方法　 4 1例肝细胞肝癌及其癌旁肝组织标本按肿瘤大小、有无播散灶及远处转移、包膜、门静脉癌栓等分为高侵袭和低侵袭 2组并... 目的　探讨细胞骨架连接蛋白 (ezrin)在肝癌组织和细胞系中的表达及其与肿瘤黏附、侵袭和门静脉癌栓的关系。方法　 4 1例肝细胞肝癌及其癌旁肝组织标本按肿瘤大小、有无播散灶及远处转移、包膜、门静脉癌栓等分为高侵袭和低侵袭 2组并与同期 9例良性肝病肝组织作比较 ,分别采用RT PCR和免疫组化技术检测ezrin表达。另选MHCC97L、MHCC97H和LM 33株肝癌细胞系并检测ezrin表达 ;同时运用脂质体转染反义寡核苷酸抑制MHCC97H细胞ezrin表达 ,比较转染前后细胞黏附、侵袭能力的改变。结果　高侵袭肝癌ezrin表达显著高于低侵袭肝癌 (P <0 .0 5 ) ,癌栓组织ezrin表达强度更高 (P <0 .0 5 )。MHCC97L、MHCC97H和LM33株细胞系均表达ezrin ,其强度随侵袭性增加依次增强。脂质体转染反义寡核苷酸能显著抑制MHCC97H的ezrin表达以及黏附、侵袭能力。结论　Ezrin在肝癌、门静脉癌栓和MHCC97L、MHCC97H、LM3细胞系中均表达 ,其表达强度随侵袭性增强而增加 ;Ezrin可能主要通过影响肿瘤黏附、侵袭能力 ,从而在肿瘤侵袭及门静脉癌栓形成中起重要作用。 展开更多
关键词 EZRIN 表达及 EZRIN 门静脉癌栓形成 侵袭能力 反义寡核苷酸 肝组织标本 肝细胞肝癌 肝癌细胞系 脂质体转染 肝癌组织 连接蛋白 细胞骨架 肿瘤大小 远处转移 病肝组织 技术检测 免疫组化 转染反义 细胞黏附 肿瘤侵袭 侵袭性 PCR 酸抑制 强度
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反义寡核苷酸抑制survivin基因表达及肝癌细胞生长的研究 被引量：4
10
作者 陈涛 贾玉容 +1 位作者 赵铁军 尹致良 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2004年第3期187-190,共4页
目的:采用反义寡核苷酸抑制肝癌细胞中survivin基因的表达,研究其对肝癌细胞生长的作用。方法:采用脂质 体介导survivin反义寡核苷酸转染人肝癌细胞株SMMC-7721细胞,Western blot及原位杂交方法检测survivin蛋白及mRNA表 达,流式细胞仪... 目的:采用反义寡核苷酸抑制肝癌细胞中survivin基因的表达,研究其对肝癌细胞生长的作用。方法:采用脂质 体介导survivin反义寡核苷酸转染人肝癌细胞株SMMC-7721细胞,Western blot及原位杂交方法检测survivin蛋白及mRNA表 达,流式细胞仪检测凋亡细胞比率,检测转染前后细胞贴壁率变化,并绘制细胞生长曲线。结果:survivin反义寡核苷酸转染 后,肝癌细胞survivin蛋白及mRNA表达均显著降低,细胞贴壁率显著降低,细胞增殖活性明显受抑,细胞凋亡率显著增加。 结论:survivin反义寡核苷酸转染可以有效降低细胞内survivin基因的表达,诱导细胞发生凋亡,抑制肝癌细胞生长。 展开更多
关键词 肝癌 SURVIVIN基因 反义寡核苷酸 细胞增殖 细胞凋亡
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STAT1反义寡核苷酸对肺纤维化大鼠肺泡巨噬细胞分泌TNF-α、IL-8和NO的影响 被引量：15
11
作者 范贤明 张世波 +2 位作者 刘春涛 熊彬 王曾礼 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期487-489,492,共4页
目的:探讨STAT1(signaltransducerandactivatoroftranscription1)反义寡核苷酸(ASON)对博莱霉素(BLM)致肺纤维化1周大鼠肺泡巨噬细胞(AM)分泌TNF-α、IL-8和NO的影响。方法:取Wistar大鼠5只,向气管内灌注BLM复制肺纤维化模型后7d处死动... 目的:探讨STAT1(signaltransducerandactivatoroftranscription1)反义寡核苷酸(ASON)对博莱霉素(BLM)致肺纤维化1周大鼠肺泡巨噬细胞(AM)分泌TNF-α、IL-8和NO的影响。方法:取Wistar大鼠5只,向气管内灌注BLM复制肺纤维化模型后7d处死动物,通过支气管肺泡灌洗获取AM,并分为STAT1ASON组、STAT1正义寡核苷酸(SON)组、地塞米松(dexamethasone,DEX)组和空白对照组。分别用ASON、SON和DEX干预AM(空白对照组只加培养基),然后检测AM分泌TNF-α、IL-8和NO的能力。结果:用STAT1ASON处理AM后的培养上清中,TNF-α、IL-8和NO的含量减少,与空白对照组、SON组及DEX组相比较差异显著(P<0.05);DEX组AM的培养上清中,TNF-α、IL-8和NO的含量明显低于空白对照组和SON组(P<0.05);而空白对照组和SON组培养上清中,TNF-α、IL-8和NO的含量却无统计学意义(P>0.05)。结论:STAT1ASON和DEX能使AM分泌TNF-α、IL-8和NO的能力下降,且STAT1ASON的作用强于DEX。STAT1可作为肺纤维化治疗的靶目标。 展开更多
关键词 STAT1 肺泡巨噬细胞 反义寡核苷酸 肺纤维化
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VEGF反义寡核苷酸抑制C_6胶质瘤细胞VEGF表达的作用和效果 被引量：8
12
作者 李维方 张光霁 +2 位作者 朱诚 金由辛 卢亦成 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期156-158,共3页
目的 :设计了针对 VEGF的第 外显子 (exon,E3)的反义、错义和正义寡核苷酸 ,观察 VEGF反义寡核苷酸抑制 C6胶质瘤细胞 VEGF表达的作用。 方法 :免疫细胞化学法观察反义、正义、错义寡核苷酸对 C6 胶质瘤细胞 VEGF表达的影响 ;观察制备... 目的 :设计了针对 VEGF的第 外显子 (exon,E3)的反义、错义和正义寡核苷酸 ,观察 VEGF反义寡核苷酸抑制 C6胶质瘤细胞 VEGF表达的作用。 方法 :免疫细胞化学法观察反义、正义、错义寡核苷酸对 C6 胶质瘤细胞 VEGF表达的影响 ;观察制备反义、正义、错义寡核苷酸的条件培养液对内皮细胞生长的抑制作用。 结果 :VEGF反义寡核苷酸对 C6 胶质瘤细胞VEGF的表达有明显抑制作用。 结论 :反义 VEGF寡核苷酸通过抑制 C6 胶质瘤细胞 VEGF的表达 ,进而抑制内皮细胞的生长。 展开更多
关键词 神经胶质瘤 血管内皮 血管内皮生长因子 反义寡核苷酸类 C6胶质瘤 VEGF
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粘着斑激酶活化对平滑肌细胞粘附和迁移的影响 被引量：9
13
作者 尹航 汪丽蕙 +3 位作者 彭旭 霍勇 夏春芳 唐朝枢 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期593-596,共4页
目的 :研究粘着斑激酶磷酸化在细胞外基质成份诱导平滑肌细胞粘附和迁移中的作用。方法 :通过纤粘连蛋白 (FN)诱导培养的平滑肌细胞粘附迁移 ,以免疫沉淀和Westernblolt方法检测粘着斑激酶 (FAK)及其磷酸化的表达量。将FAK反义寡核苷酸 ... 目的 :研究粘着斑激酶磷酸化在细胞外基质成份诱导平滑肌细胞粘附和迁移中的作用。方法 :通过纤粘连蛋白 (FN)诱导培养的平滑肌细胞粘附迁移 ,以免疫沉淀和Westernblolt方法检测粘着斑激酶 (FAK)及其磷酸化的表达量。将FAK反义寡核苷酸 (ODNs)经脂质体转染细胞 ,观察对FAK磷酸化、细胞粘附铺展和迁移的影响。结果 :FN在显著诱导平滑肌细胞粘附和迁移时 ,FAK也呈明显表达 ,2 0mg/LFN可使其磷酸化处于较高表达量。脂质体可有效地介导ODNs转染 ,转染效率为 (86 7± 4 5 ) % ,FAK磷酸化表达量明显减少 ,5 - 6 0mg/L不同浓度FN组 ,细胞铺展率减少 17 89% - 2 7 6 7% ,10、2 0、4 0和 6 0mg/LFN组迁移细胞数也分别显著少 2 3 2 6 %、2 1 6 3%、19 31%、17 88% (P <0 0 5 )。结论 :活化的FAK是细胞外基质诱导SMCs粘附和迁移的重要信号分子 ,由其介导的信号转导促进了这一过程 。 展开更多
关键词 粘着斑激酶 细胞粘附 纤粘连蛋白 平滑肌细胞 细胞迁移 血管成形术 血管再狭窄
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脂质体介导的cripto反义寡核苷酸抑制结肠癌细胞端粒酶活性 被引量：42
14
作者 范钰 郑树 丁佳逸 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期762-765,共4页
目的:探讨cripto反义寡核苷酸(ASODN)对结肠癌细胞端粒酶活性的影响。方法:应用脂质体瞬时转染法介导cripto反义寡核苷酸,处理人结肠癌细胞系后,分别采用实时定量PCR检测cripto mRNA表达,用TRAP检测端粒酶活性,采用软琼脂集落培养试验... 目的:探讨cripto反义寡核苷酸(ASODN)对结肠癌细胞端粒酶活性的影响。方法:应用脂质体瞬时转染法介导cripto反义寡核苷酸,处理人结肠癌细胞系后,分别采用实时定量PCR检测cripto mRNA表达,用TRAP检测端粒酶活性,采用软琼脂集落培养试验检测结肠癌细胞的生长。结果:Cripto ASODN可有效抑制结肠癌细胞集落生长,且与浓度相关。结肠癌细胞经Cripto ASODN转染后,端粒酶活性明显受到抑制,呈作用浓度和时间依赖性。并与ASODN的浓度和处理时间有关。结论:cripto基因可能参与对结肠癌细胞端粒酶活性的调控。 展开更多
关键词 寡核苷酸类 反义 端粒 末端转移酶 基因 cripto 结肠肿瘤
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反义微小RNA-21对人膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响 被引量：10
15
作者 张明 魏巍 +2 位作者 刘禄成 李志 温都苏 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期450-452,607,共4页
目的:探讨微小RNA-21(miRNA-21)反义寡核苷酸(ASOND)对人膀胱癌细胞株T24增殖和凋亡的影响,为膀胱癌的治疗提供理论依据。方法:将脂质体介导的反义寡核苷酸(AS-miRNA-21)转染T24细胞,设转染无义序列组、对照组和AS-miRNA-21转染组,采用... 目的:探讨微小RNA-21(miRNA-21)反义寡核苷酸(ASOND)对人膀胱癌细胞株T24增殖和凋亡的影响,为膀胱癌的治疗提供理论依据。方法:将脂质体介导的反义寡核苷酸(AS-miRNA-21)转染T24细胞,设转染无义序列组、对照组和AS-miRNA-21转染组,采用蛋白印迹(Western blotting)检测转染细胞miRNA-21表达水平,噻唑蓝(MTT)比色法和流式细胞仪(FCM)分别检测转染细胞的增殖和凋亡情况,转染无义序列组、对照组分别与AS-miRNA-21转染组比较。结果:经过转染AS-miRNA-21的T24细胞miRNA-21表达水平下降,细胞增殖能力受抑。AS-miRNA-21组T24细胞增殖率为53.6%,转染无义序列组T24细胞增殖率为92.5%,对照组为100%;相对应的凋亡率分别为13.8%、1.9%和2.7%。上述3组间T24细胞的增殖率、凋亡率比较差异均有显著性(P<0.01)。结论:反义miRNA-21对人膀胱癌细胞T24具有抑制增殖和促进凋亡的作用,抑制miRNA-21表达有望成为膀胱癌基因治疗的有效方法。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 微小RNA-21 反义寡核苷酸类
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以胰岛素样生长因子受体1基因为靶的反义寡核苷酸体内外抗肿瘤研究 被引量：4
16
作者 林莉 王升启 +2 位作者 管伟 杨秉呼 胡小电 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第2期247-251,共5页
以胰岛素样生长因子受体 - 1基因为靶筛选抗肿瘤药物 .根据IGF1RmRNA的二级结构设计了 9条反义寡核苷酸药物 ,以脂质体介导进行转染 ,MTT染色计算细胞生长抑制率 ,从中筛选出一条序列并对之进行优化 ,最后以最佳序列进行体外作用持续时... 以胰岛素样生长因子受体 - 1基因为靶筛选抗肿瘤药物 .根据IGF1RmRNA的二级结构设计了 9条反义寡核苷酸药物 ,以脂质体介导进行转染 ,MTT染色计算细胞生长抑制率 ,从中筛选出一条序列并对之进行优化 ,最后以最佳序列进行体外作用持续时间及体内细胞生长抑制率分析 .结果表明该序列在体内外具有良好的抗肿瘤活性 ,具有剂量依赖性关系 ,且对荷瘤裸鼠无明显的毒性 . 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子受体1 靶标 反义寡核苷酸 抗肿瘤 IGF1R
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以microRNA-21为靶标的反义寡核苷酸对人白血病K562细胞的抑制作用 被引量：11
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作者 郭敏 李育敏 +1 位作者 费嘉 张洹 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期1127-1131,共5页
目的:探讨以microRNA-21为靶标的反义寡核苷酸对白血病K562细胞的生长抑制效应及可能的作用机制。方法:依据与microRNA-21序列互补的原理,设计反义寡核苷酸,人工合成并全硫代修饰,在Lipo-fectamineTM2000介导下,转染K562细胞。采用四甲... 目的:探讨以microRNA-21为靶标的反义寡核苷酸对白血病K562细胞的生长抑制效应及可能的作用机制。方法:依据与microRNA-21序列互补的原理,设计反义寡核苷酸,人工合成并全硫代修饰,在Lipo-fectamineTM2000介导下,转染K562细胞。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法筛选最佳作用浓度,台盼蓝拒染法检测其对细胞生长抑制的作用,姬姆萨染色观察细胞的形态学变化,流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期的变化。利用荧光定量PCR技术检测反义寡核苷酸作用后细胞内microRNA-21表达水平的改变。结果:MTT结果显示反义寡核苷酸有效抑制细胞生长,分别与随机组、空白对照组进行比较有显著差异(P<0.05),反义寡核苷酸作用的最佳浓度是0.6μmol/L。台盼蓝拒染法结果显示从转染K562细胞24 h开始,反义寡核苷酸组细胞生长明显受到抑制,抑制效应持续到72 h。姬姆萨染色显示反义寡核苷酸作用K562细胞24 h后,可在细胞中见凋亡小体。流式细胞仪检测结果显示反义寡核苷酸组出现明显的亚二倍体峰,细胞周期无发生明显变化。荧光定量PCR结果显示,反义寡核苷酸可有效抑制细胞内microRNA-21的表达水平。结论:以microRNA-21为靶标的反义寡核苷酸可有效抑制人白血病K562细胞的生长,并显著促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 microRNA 寡核苷酸类 反义 K562细胞 细胞凋亡
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碳纳米管-树形分子载体递送Survivin反义寡核苷酸对肝癌细胞增殖的作用 被引量：7
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作者 潘碧峰 崔大祥 +5 位作者 徐萍 高峰 贺蓉 尤晓刚 邵君 杨浩 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2006年第3期176-180,共5页
目的:探讨碳纳米管(CNT)-树形分子递送Survivin反义寡核苷酸(ASOND)进入肝癌细胞HepG2的效率及其对肝癌细胞增殖的影响。方法:制备碳纳米管与PAMAM树形分子复合物,与Survivin反义寡核苷酸组装后,用原子力显微镜(AFM)与凝胶电泳观察碳纳... 目的:探讨碳纳米管(CNT)-树形分子递送Survivin反义寡核苷酸(ASOND)进入肝癌细胞HepG2的效率及其对肝癌细胞增殖的影响。方法:制备碳纳米管与PAMAM树形分子复合物,与Survivin反义寡核苷酸组装后,用原子力显微镜(AFM)与凝胶电泳观察碳纳米管-树形分子-反义核苷酸复合物的形态结构;然后将复合物与人肝癌HepG2细胞共培养,同时设立对照,采用透射电镜观察碳纳米管-树形分子-反义核苷酸复合物在细胞中的定位,采用MTT法检测复合物对癌细胞生长的抑制作用。结果:AFM与凝胶电泳分析证实碳纳米管-树形分子-反义核苷酸复合物被成功制备。透射电镜观察证实碳纳米管-树形分子-反义核苷酸复合物位于细胞质。MTT法检测表明,CNT-PAMAM-ASODN浓度为1.0μmol/L时,即可抑制(45.97±4.28)%的HepG2细胞增殖,而ASODN组和CNT-PAMAM组在此浓度条件下对HepG2细胞的抑制率则分别为(9.33±0.85)%和(6.37±0.69)%;当CNT-PAMAM-ASODN达到1.50μmol/L时,细胞抑制率为(70.22±7.25)%,而且抑制作用随培养时间的延长与浓度的增加而增强,实验组与对照组之间细胞抑制率存在显著性差异(P<0.01)。结论:碳纳米管-树形分子复合物是一种高效的基因递送载体,能够携带Survivin反义寡核苷酸进入肝癌细胞,并高效抑制HepG2细胞的增殖,显著增强反义寡核苷酸的作用效果。 展开更多
关键词 碳纳米管 树形分子 SURVIVIN基因 反义寡核苷酸 肝癌
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锁核酸研究进展 被引量：13
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作者 李生茂 徐祥 +1 位作者 梁华平 李磊 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期319-323,共5页
锁核酸 (lockednucleicacid ,LNA)是一种新型的寡核酸衍生物 ,结构中 β D 呋喃核糖的 2’ O ,4’ C位通过缩水作用形成环形的氧亚甲基桥、硫亚甲基桥或胺亚甲基桥 ,呋喃糖的结构锁定在C3’内型的N构型 ,形成了刚性的缩合结构。LNA作... 锁核酸 (lockednucleicacid ,LNA)是一种新型的寡核酸衍生物 ,结构中 β D 呋喃核糖的 2’ O ,4’ C位通过缩水作用形成环形的氧亚甲基桥、硫亚甲基桥或胺亚甲基桥 ,呋喃糖的结构锁定在C3’内型的N构型 ,形成了刚性的缩合结构。LNA作为一种新的反义核酸 ,具有与DNA/RNA强大的杂交亲和力、反义活性、抗核酸酶能力、水溶性好及体内无毒性等优点。LNA在基因诊断和基因治疗上有很多优势 ,如 :单链核酸的多态性基因分型、LNA寡聚体具有高效抑制端粒酶活性及LNA修饰的DNA核酶 (LNAzymes)高效清除高级结构的RNA等 。 展开更多
关键词 锁核酸 核苷酸衍生物 寡聚核苷酸 基因诊断
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靶向Survivin的反义寡核苷酸对肿瘤细胞增殖的抑制作用 被引量：8
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作者 王治 梅柱中 +3 位作者 童新 董燕 李青山 孙志贤 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期795-799,共5页
Survivin是新近克隆的一种凋亡抑制蛋白 (IAP)家族成员 ,在几乎所有肿瘤组织中特异性表达 ,而在正常成年终末分化组织中低表达甚至不表达 .采用四唑盐 (MTT)比色实验法比较 2 0条抗人survivin反义寡核苷酸对HeLa细胞增殖的抑制效果 ,并... Survivin是新近克隆的一种凋亡抑制蛋白 (IAP)家族成员 ,在几乎所有肿瘤组织中特异性表达 ,而在正常成年终末分化组织中低表达甚至不表达 .采用四唑盐 (MTT)比色实验法比较 2 0条抗人survivin反义寡核苷酸对HeLa细胞增殖的抑制效果 ,并从中筛选效果显著的反义寡核苷酸 ,在体外水平进一步验证其抑制survivin表达的能力 .在用 4 0 0nmol L反义寡核苷酸转染HeLa细胞 4 8h后 ,有 4条反义寡核苷酸对细胞增殖的抑制率超过 4 0 %,其中 4 5号反义寡核苷酸的抑制率可达5 9%,而阳性对照序列ISIS2 372 2的抑制率仅达 30 %.Northern和Western印迹分析证明 :4 5号反义寡核苷酸可明显降低细胞中survivin基因的mRNA含量和蛋白水平 .4 5号反义寡核苷酸还可在较低浓度 (2 0 0nmol L)显著增强HeLa细胞对化疗药三尖杉酯碱的敏感性 .因此 ,4 展开更多
关键词 靶向SURVIVIN 反义寡核苷酸 肿瘤细胞增殖 抑制作用 IAP 凋亡抑制蛋白
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