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赭曲霉毒素A的高灵敏时间分辨荧光免疫分析 被引量：28
1
作者 黄飚 陶文沂 +3 位作者 张莲芬 时瑾 杨海麟 金坚 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第7期662-666,共5页
采用时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术建立快速的高灵敏度的赭曲霉毒素A(OTA)全自动检测方法.将OTA-BSA作为免疫分子免疫Balb/c小鼠,OTA-KLH为筛选用抗原包被板,用间接酶联免疫分析(ELISA)法筛选出专一针对OTA的高效价的阳性克隆3G9,用... 采用时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术建立快速的高灵敏度的赭曲霉毒素A(OTA)全自动检测方法.将OTA-BSA作为免疫分子免疫Balb/c小鼠,OTA-KLH为筛选用抗原包被板,用间接酶联免疫分析(ELISA)法筛选出专一针对OTA的高效价的阳性克隆3G9,用杂交瘤细胞制备抗OTA单克隆抗体.用OTA-BSA包被96孔板为固相抗原,与游离OTA共同竞争有限的抗OTA单克隆抗体,以稀土离子Eu3+标记的羊抗鼠抗体进行示踪,采用间接竞争免疫分析方法在解离增强荧光免疫分析体系中建立OTA-TRFIA.该方法的灵敏度为0.03μg/L,测量范围为0.03￣1000μg/L,批内和批间变异分别为3.7%和5.3%,平均回收率为94.2%,与赭曲霉毒素B的平均交叉反应为3.7%,与黄曲霉毒素B1、牛血清白蛋白和苯基丙氨酸无交叉反应,说明抗体的特异性很好.8条不同时间进行的间接竞争OTA-TRFIA的效应点均值ED80、ED50、ED20分别为(0.33±0.02)μg/L、(1.44±0.08)μg/L和(5.22±0.12)μg/L,说明方法的稳定性好,样品经TRFIA和ELISA试剂盒同时检测OTA,两者的相关系数为0.925,结果相符.研究表明,OTA-TRFIA是目前报道的OTA检测中最灵敏的方法,该分析方法稳定性好,可测范围宽,具有很好的应用前景. 展开更多
关键词 赭曲霉毒素A(OTA) 时间分辨荧光免疫分析(trfia) 真菌毒素 单克隆抗体
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时间分辨荧光免疫分析的新进展 被引量：17
2
作者 辛甜甜 郭松林 +2 位作者 王艺磊 冯建军 林鹏 《理化检验（化学分册）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期112-118,共7页
对2003~2015年间时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)的新进展作了综述,包括荧光共振能量转移TRFIA、酶放大TRFIA和基于纳米颗粒的TRFIA,以及时间分辨荧光免疫分析与流动注射分析、实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)等技术联用的应用情况,并对TR... 对2003~2015年间时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)的新进展作了综述,包括荧光共振能量转移TRFIA、酶放大TRFIA和基于纳米颗粒的TRFIA,以及时间分辨荧光免疫分析与流动注射分析、实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)等技术联用的应用情况,并对TRFIA的发展前景进行了展望(引用文献82篇)。 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫分析(trfia) 荧光共振能量转移-trfia 酶放大-trfia 纳米颗粒-trfia
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Eu^3＋标抗原盐酸克伦特罗的时间分辨荧光免疫检测 被引量：11
3
作者 樊晓博 杨金易 +3 位作者 高秀杰 吴英松 孙远明 雷红涛 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第20期307-310,共4页
采用时间分辨荧光免疫分析(time-resolved fluoroimmunoassay,TRFIA)建立简便、快速、灵敏的盐酸克伦特罗(clenbuterol hydrochloride,CBL)检测方法。以自制盐酸克伦特罗单克隆抗体包被96孔微孔板作为固相抗体,Eu3+标记抗原与样品中的CB... 采用时间分辨荧光免疫分析(time-resolved fluoroimmunoassay,TRFIA)建立简便、快速、灵敏的盐酸克伦特罗(clenbuterol hydrochloride,CBL)检测方法。以自制盐酸克伦特罗单克隆抗体包被96孔微孔板作为固相抗体,Eu3+标记抗原与样品中的CBL竞争结合抗体,建立直接竞争荧光免疫分析体系。猪尿、组织样品添加回收率实验表明:方法灵敏度为0.02μg/L,样品回收率为91%～101%,与沙丁胺醇、莱克多巴胺等结构类似物的交叉反应率均小于1%。建立盐酸克伦特罗铕标抗原直接竞争时间分辨免疫检测方法,方法灵敏度高、特异性强,且操作简单,完全可以满足现有实际检测需求。 展开更多
关键词 盐酸克伦特罗 时间分辨 标记抗原 检测
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T-2毒素的高灵敏时间分辨荧光免疫分析 被引量：10
4
作者 杨润琳 计融 +4 位作者 江涛 汤鲁宏 朱海 李文新 黄飚 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2010年第1期74-76,85,共4页
以时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)方法建立快速灵敏的T-2毒素的全自动检测方法。采用T-2-BSA包被96孔板作为固相抗原,与游离的T-2竞争有限的抗T-2单克隆抗体,以Eu3+标记的羊抗鼠抗体示踪,采用间接竞争免疫分析方法在解离增强荧光免疫分析... 以时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)方法建立快速灵敏的T-2毒素的全自动检测方法。采用T-2-BSA包被96孔板作为固相抗原,与游离的T-2竞争有限的抗T-2单克隆抗体,以Eu3+标记的羊抗鼠抗体示踪,采用间接竞争免疫分析方法在解离增强荧光免疫分析体系中建立T-2-TRFIA。同时对这一方法的稳定性、灵敏度、回收率和特异性进行考核。此方法灵敏度为0.2μg/L,测量范围0.2～500μg/L,批内变异为7.5%,批间变异为12.7%,平均回收率为89.6%。与赭曲霉毒素A、黄曲霉毒素B1、牛血清白蛋白无交叉反应。10条不同时间进行的间接竞争T-2-TRFIA的效应点均值ED80、ED50和ED20分别为2.66,6.97,29.11μg/L。同时,用TRFIA和ELISA试剂盒同时检测T-2毒素,在ELISA和TRFIA产品的共同可测范围之内,两者的相关系数为0.926。 展开更多
关键词 T-2毒素(T-2 toxin) 时间分辨荧光免疫分析(trfia) 单克隆抗体
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应用生物素-链霉亲和素的时间分辨荧光免疫分析检测玉米赤霉烯酮 被引量：3
5
作者 马智鸿 黄飚 +3 位作者 屠蔷 高蕾 张珏 王柯 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2009年第4期905-909,共5页
采用基于生物素（Biotin）-链霉亲和素（Strepavidin）的时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）技术建立了快速灵敏的玉米赤霉烯酮（ZEN）检测方法。以strepavidin包被板条，加入生物素化的ZEN—BSA，结合在板条上的ZEN—BSA与标准／样本中的游... 采用基于生物素（Biotin）-链霉亲和素（Strepavidin）的时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）技术建立了快速灵敏的玉米赤霉烯酮（ZEN）检测方法。以strepavidin包被板条，加入生物素化的ZEN—BSA，结合在板条上的ZEN—BSA与标准／样本中的游离ZEN共同竞争限量的抗ZEN单克隆抗体，用稀土离子Eu“标记的羊抗鼠IgG进行示踪，建立了间接竞争的ZEN-TRFIA。该方法的检测灵敏度为0．2ng／ml，测量范围是0．2～200．0ng／ml，批内、批间变异系数分别为5．7％和8．3％，平均回收率为91．1％。与玉米赤霉醇的平均交叉反应是12．3％，与赭曲霉素A、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、黄曲霉素B1无交叉反应，说明该方法的特异性较好。相关试剂在4℃放6个月后各检测参数基本无变化，说明该方法稳定。样品同时用ZEN—TRFIA和商品ELISA试剂盒测定样品ZEN含量，两者的相关系数为0．9664，说明该方法测量准确。ZEN—TRFIA具有测量准确、检测灵敏度高、检测范围宽、操作简便、标记物稳定等优点，适合于ZEN大量筛查的应用。 展开更多
关键词 玉米赤霉烯酮(ZEN) 时间分辨荧光免疫分析(trfia) 生物素-链霉亲和素 真菌毒素
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人生长激素的时间分辨荧光免疫分析及其诊断试剂研制 被引量：1
6
作者 杭建峰 吴英松 +3 位作者 徐伟文 周志聪 黄颖 李明 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期472-475,共4页
【目的】利用时间分辨荧光免疫分析(time-resolved fluoroimmunoassay,TRFIA)技术,建立人生长激素(human growth hormone,hGH)的快速检测方法并研制其诊断试剂。【方法】采用双抗体夹心法(一株抗GH的单抗用于包被微孔板,另一株抗GH的单... 【目的】利用时间分辨荧光免疫分析(time-resolved fluoroimmunoassay,TRFIA)技术,建立人生长激素(human growth hormone,hGH)的快速检测方法并研制其诊断试剂。【方法】采用双抗体夹心法(一株抗GH的单抗用于包被微孔板,另一株抗GH的单抗用于Eu3+标记)建立hGH-TRFIA。【结果】hGH-TRFIA的线性测量范围为0.1×10-3～100×10-3U/L,灵敏度为0.036×10-3U/L,批内和批间的变异系数分别为5.3%～8.6%和7.6%～12.8%。与促甲状腺激素(TSH)、卵泡生成素(FSH)、人胎盘催乳素(LH)和黄体生成素(HPL)均无交叉反应。将43份血清标本用本法与Wallac试剂盒同时检测相关系数(r)为0.957。【结论】hGH-TRFIA可作为一种具有灵敏度高、特异性强和测量范围宽的新方法,用于临床GH水平的测定。 展开更多
关键词 生长激素 时间分辨荧光免疫分析 试剂
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时间分辨荧光免疫分析技术的研究进展 被引量：20
7
作者 王泽洲 吴俊清 +3 位作者 张永宁 章健 吴宣 吴冠英 《四川畜牧兽医》 2015年第7期34-37,共4页
时间分辨荧光免疫分析技术是一种新型的超微量免疫标记分析方法,集酶标记免疫分析和放射免疫分析等优点于一身,具有无放射性、无背景光干扰、灵敏、稳定、线性范围宽、操作简便、分析速度快等优点,已广泛应用于临床医学检测、食品安全... 时间分辨荧光免疫分析技术是一种新型的超微量免疫标记分析方法,集酶标记免疫分析和放射免疫分析等优点于一身,具有无放射性、无背景光干扰、灵敏、稳定、线性范围宽、操作简便、分析速度快等优点,已广泛应用于临床医学检测、食品安全快速检测等领域。本文就时间分辨荧光免疫分析的原理及在兽医学中的应用作一综述。 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫分析 兽医学 应用
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时间分辨荧光免疫分析仪测量时间稳定性的研究与设计
8
作者 王慧锋 潘德辉 张芹 《华东理工大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期283-287,共5页
时间分辨荧光免疫分析仪的测量精度取决于微弱荧光信号的测试精度,而测量时间不稳定将导致测量的荧光信号强度发生波动。针对影响测量时间精度的3个因素(时基信号误差、触发误差、量化误差),采用TX2108带温度补偿的晶体振荡器作为时基... 时间分辨荧光免疫分析仪的测量精度取决于微弱荧光信号的测试精度,而测量时间不稳定将导致测量的荧光信号强度发生波动。针对影响测量时间精度的3个因素(时基信号误差、触发误差、量化误差),采用TX2108带温度补偿的晶体振荡器作为时基信号源,减小时基信号误差;采用RISC结构的高速单片机及性能稳定的74HC系列外围器件,减小触发误差;采用双游标法使测时分辨力提高3个数量级,减小量化误差。实验表明:在保证同样测量精度的前提下,所需测量次数由1 000次减少到120次。 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫分析仪 弱荧光信号测量 测量时间稳定性 游标法
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时间分辨荧光免疫法检测环境中四溴双酚A衍生物(TBBPA DHEE) 被引量：1
9
作者 黄梦璐 张祯 吴向阳 《环境化学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期2124-2130,共7页
本研究利用前期制备的四溴双酚A双(2-羟基乙基)醚(TBBPA DHEE)的多克隆抗体,构建了一种高灵敏的时间分辨荧光免疫分析法,用于检测环境中的四溴双酚A衍生物TBBPA DHEE.为提高分析方法的灵敏度,本研究对反应体系中有机溶剂(甲醇)、离子强... 本研究利用前期制备的四溴双酚A双(2-羟基乙基)醚(TBBPA DHEE)的多克隆抗体,构建了一种高灵敏的时间分辨荧光免疫分析法,用于检测环境中的四溴双酚A衍生物TBBPA DHEE.为提高分析方法的灵敏度,本研究对反应体系中有机溶剂(甲醇)、离子强度及缓冲体系p H等参数进行了优化.在最适条件下,本方法的最低检测限(LOD,基于F/F_0=90%)与IC_(50)分别为0.27 ng·m L^(-1)及4.3 ng·m L^(-1).该方法具有较高的准确度(水样加标回收率为96%—120%;土样及生物加标回收率为75%—90%).利用该方法对江苏省苏州某地区的环境样品进行了调查:在采集的56个样本中,13个样本检出了这种污染物.检出浓度为:水样0.5—2.7 ng·m L^(-1)、土样0.6—1.6 ng·g^(-1),干重、生物样2.9—4.6 ng·g^(-1),湿重.本研究为首次针对环境中TBBPA DHEE污染状况的系统性分析. 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫法 多克隆抗体 四溴双酚A衍生物 四溴双酚A双(2-羟基乙基)醚 环境污染调查
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