DEAE-葡聚糖在SHIV病毒TCID50滴定及扩增中的作用 被引量：2

1

作者 丛喆 姚南 +2 位作者 蒋虹 金光 魏强 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2011年第3期193-196,共4页

目的确定DEAE-葡聚糖对CEMx174细胞的半数抑制浓度,明确其在SHIV病毒TCID50滴定及病毒扩增中的促进作用。方法分别使用含DEAE和无DEAE的DMEM完全培养基测定SHIVchn19p7的TCID50。用无血清DMEM培养基系列稀释DEAE,加入CEMx174细胞,使用cc... 目的确定DEAE-葡聚糖对CEMx174细胞的半数抑制浓度,明确其在SHIV病毒TCID50滴定及病毒扩增中的促进作用。方法分别使用含DEAE和无DEAE的DMEM完全培养基测定SHIVchn19p7的TCID50。用无血清DMEM培养基系列稀释DEAE,加入CEMx174细胞,使用cck-8测定细胞破坏率。分别选取DEAE浓度为28.125μg/mL和14.0625μg/mL的无血清DMEM培养基对CEMx174细胞预处理3 h。再加入SHIV-KB9病毒液,定期测定培养上清中的P24水平,同时做正常病毒对照和DEAE-1640对照,比对不同处理下的病毒扩增情况。结果使用了DEAE后,SHIVchn19p7的TCID50达到了3.16×104 TCID50/mL,不使用DEAE,病毒的TCID50测定为阴性。DEAE对CEMx174细胞的IC50为44.85μg/mL。经浓度为28.125μg/mL和14.0625μg/mL的DEAE预处理后,SHIV-KB9病毒扩增在13 d～17 d达到高峰。而用不含DEAE的1640生长液培养的实验孔在19 d才开始出现阳性反应。结论高浓度的DEAE对细胞有较强的杀伤作用,低浓度的DEAE对细胞的破坏率较低,并且能显著促进病毒扩增。DEAE在病毒进入细胞的过程中确实起了重要的作用。 展开更多

关键词 DEAE-葡聚糖 TZM-bl细胞 半数组织培养感染剂量 半数抑制浓度

在线阅读 下载PDF 职称材料

敲减单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)UL30蛋白表达可抑制HSV-2复制 被引量：7

2

作者 冯海 张浩 +3 位作者 屠静 罗凌琪 周琦 彭宜红 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1025-1030,共6页

按照shRNA(small hairpin RNA)设计要求,选择编码单纯疱疹病毒Ⅱ型DNA多聚酶催化亚单位的UL30(unique long 30,UL30)基因序列保守区域,设计、合成并构建表达UL30序列特异性siRNA(short interfering RNA)的质粒载体pUL30.通过磷酸钙转染... 按照shRNA(small hairpin RNA)设计要求,选择编码单纯疱疹病毒Ⅱ型DNA多聚酶催化亚单位的UL30(unique long 30,UL30)基因序列保守区域,设计、合成并构建表达UL30序列特异性siRNA(short interfering RNA)的质粒载体pUL30.通过磷酸钙转染法将其转染入HEK(human embryonic kidney)293细胞中,用蛋白印迹法检测对HSV-2 UL30蛋白表达的影响,观察受染细胞病变效应(cytopathic effect,CPE),终点滴定法测定细胞上清液中病毒感染滴度(50%tissue culture infective dose,TCID50).结果表明,针对UL30基因的siRNA能有效抑制UL30蛋白表达,同时显著抑制受染细胞的CPE,降低上清液中病毒感染滴度.提示本研究建立的针对UL30基因特异性siRNA能有效阻断HSV-2在HEK293细胞内的复制,UL30基因是一个潜在的抗HSV-2复制的药物靶标. 展开更多

关键词 RNA干扰 单纯疱疹病毒Ⅱ型 UL30 tcid50

在线阅读 下载PDF 职称材料

核酸杂交技术在禽白血病病毒TCID_(50)测定中的应用 被引量：7

3

作者 孟凡峰 范建华 +4 位作者 徐步 时建蓬 董宣 崔治中 赵鹏 《中国家禽》 北大核心 2015年第1期13-16,共4页

为探索核酸杂交技术在测定J亚群禽白血病病毒(ALV-J)细胞半数感染量(TCID50)中的可行性,将ALV-J传染性克隆r NX0101株以10倍梯度稀释后按常规方法接种已长满单层鸡胚成纤维细胞(CEF)的96孔板,在维持7 d后收集细胞培养上清。上清液部分... 为探索核酸杂交技术在测定J亚群禽白血病病毒(ALV-J)细胞半数感染量(TCID50)中的可行性,将ALV-J传染性克隆r NX0101株以10倍梯度稀释后按常规方法接种已长满单层鸡胚成纤维细胞(CEF)的96孔板,在维持7 d后收集细胞培养上清。上清液部分按照试剂盒说明书进行p27抗原的ELISA检测,另一部分提取RNA后以鸡致病性外源性禽白血病病毒特异性核酸探针交叉斑点杂交检测试剂盒进行Dot-blot检测,每孔中细胞固定后以ALV-J特异性单克隆抗体进行IFA检测,确定病毒感染孔后按照Reed-Muench法分别计算三种方法测定的TCID50。结果显示ELISA法、IFA法和Dot-blot法在确定病毒感染中能够相互验证和补充,该病毒在CEF的TCID50分别为10-4.7TCID50/0.1 m L、10-5.2TCID50/0.1 m L和10-5.3TCID50/0.1 m L。表明采用Dot-blot法测定ALV-J的TCID50是可行的,不仅能够排除内源性的干扰,并且比ELISA和IFA具有更高的灵敏度。 展开更多

关键词 J亚群禽白血病病毒 斑点杂交 间接免疫荧光试验 酶联免疫吸附试验 tcid50

在线阅读 下载PDF 职称材料

猪流行性乙型脑炎弱毒活疫苗的效价测定及保存稳定性研究 被引量：4

4

作者 滕蔓 罗俊 +5 位作者 樊剑鸣 禹乐乐 胡博 李秀杰 邓瑞广 张改平 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2015年第2期119-122,131,共5页

为评估市售商品化猪乙型脑炎(JE)弱毒活疫苗的质量以及实验室条件下疫苗的保存稳定性,采用TCID50效价测定和RT-PCR检测病毒的保守基因(E基因和C/pr M基因)2种方法对2012年市场销售的主要国产疫苗产品进行了质量评估,同时将供试疫苗产品... 为评估市售商品化猪乙型脑炎(JE)弱毒活疫苗的质量以及实验室条件下疫苗的保存稳定性,采用TCID50效价测定和RT-PCR检测病毒的保守基因(E基因和C/pr M基因)2种方法对2012年市场销售的主要国产疫苗产品进行了质量评估,同时将供试疫苗产品置-30℃保存3、6、9、12个月后分别取样测定乙脑病毒(JEV)TCID50效价。结果表明,市售的猪乙脑同类疫苗中不同品牌产品之间活病毒含量差异较大,最高可达104.33TCID50/头份,但部分产品含量极低,甚至难以检测到活病毒;E基因和C/pr M基因的RT-PCR扩增产物丰度的差异与TCID50测定结果基本一致。多数疫苗产品在有效期内病毒效价基本稳定,同一厂家生产的疫苗保存期越短,其中相对活病毒越多,效价越高。 展开更多

关键词 猪 乙型脑炎 疫苗 tcid50 RT-PCR

在线阅读 下载PDF 职称材料

猪圆环病毒2型陕西杨凌株的分离鉴定及全基因组分析 被引量：7

5

作者 汤智慧 郭抗抗 +3 位作者 张彦明 王津津 李宇立 向华 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2011年第4期7-13,18,共8页

【目的】分离得到猪圆环病毒2型(PCV-2)陕西杨凌株,测定病毒滴度(TCID50),并进行全基因组序列比对,为研制针对性更强的PCV-2疫苗提供理论依据。【方法】从经PCR检测为猪圆环病毒2型阳性的病料中,分离病毒并接种PK-15细胞,通过PCR检测、... 【目的】分离得到猪圆环病毒2型(PCV-2)陕西杨凌株,测定病毒滴度(TCID50),并进行全基因组序列比对,为研制针对性更强的PCV-2疫苗提供理论依据。【方法】从经PCR检测为猪圆环病毒2型阳性的病料中,分离病毒并接种PK-15细胞,通过PCR检测、间接免疫荧光试验及电镜观察,对分离病毒进行鉴定;用免疫过氧化物酶细胞单层试验(IPMA),测定分离毒株的TCID50,并对其全基因组序列进行测定与分析。【结果】分离得到1株猪圆环病毒2型毒株,分离株在PK-15细胞上的TCID50为10-4.75。全基因组序列同源性比对发现,分离株与一加拿大分离株(DQ200735)同源性最高(99.4%)。【结论】从陕西杨凌分离得到了1个猪圆环病毒2型分离株。 展开更多

关键词 猪圆环病毒2型 分离鉴定 tcid50 陕西杨凌株

在线阅读 下载PDF 职称材料

松果提取物的体外抗腺病毒活性研究 被引量：6

6

作者 王洪斌 董丹 +2 位作者 许冰 周向红 阎斌伦 《湖北农业科学》 北大核心 2011年第3期525-529,共5页

用95%的乙醇沸腾回流提取,制备松果提取物。MTT法确定提取物对细胞的最大无毒浓度;用梯度滴定法观察腺病毒所携带的绿色荧光蛋白基因的蛋白表达量确定病毒液的效价(TCID50);参照所得数据,设计3个松果提取物潜在的抗腺病毒靶位,分别探究... 用95%的乙醇沸腾回流提取,制备松果提取物。MTT法确定提取物对细胞的最大无毒浓度;用梯度滴定法观察腺病毒所携带的绿色荧光蛋白基因的蛋白表达量确定病毒液的效价(TCID50);参照所得数据,设计3个松果提取物潜在的抗腺病毒靶位,分别探究松果提取物对腺病毒的直接灭活作用、对病毒吸附的抑制作用和对病毒生物合成的抑制作用。结果表明,试验所用腺病毒原液感染HEK293细胞的效价为106.1 TCID50/mL;乙醇溶剂和松果提取物均对腺病毒具有直接灭活作用,但提取物可以加强这种灭活作用;两者对于腺病毒的吸附并不起什么作用;松果提取物能够抑制腺病毒的生物合成作用,而且该抑制效果较乙醇更为显著。 展开更多

关键词 松果提取物 抗病毒作用 腺病毒 MTT 梯度滴定法 tcid50

在线阅读 下载PDF 职称材料

禽腺病毒江苏分离株的细胞培养特性 被引量：6

7

作者 周斌 郑其升 +2 位作者 刘华雷 曹瑞兵 陈溥言 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期140-143,共4页

为进一步研究的生物学特性,应用鸡胚成纤维细胞(CEF)和鸡胚肾细胞(CEK)培养禽腺病毒江苏分离株,进行培养特性、血凝特性、理化特性、超薄切片观察和PCR检测。实验结果表明,CEF感染病毒后没有出现病变。CEK感染病毒后则表现出很强的聚集... 为进一步研究的生物学特性,应用鸡胚成纤维细胞(CEF)和鸡胚肾细胞(CEK)培养禽腺病毒江苏分离株,进行培养特性、血凝特性、理化特性、超薄切片观察和PCR检测。实验结果表明,CEF感染病毒后没有出现病变。CEK感染病毒后则表现出很强的聚集性并形成细胞团,有的成束状,最后脱落;ReedMuench方法测得其TCID50为每0.1mL10-5.4。CEK核内存在大量70～80nm、呈典型的晶格状排列的腺病毒颗粒。 展开更多

关键词 培养特性 禽腺病毒 分离株 江苏 鸡胚成纤维细胞 tcid50 生物学特性 PCR检测 血凝特性 理化特性 超薄切片 病毒颗粒 肾细胞 CEF 细胞团 聚集性 感染

在线阅读 下载PDF 职称材料

BHK-21细胞稳定测定猪乙型脑炎病毒半数细胞感染量效价(TCID_(50))的条件优化及应用 被引量：6

8

作者 滕蔓 罗俊 +4 位作者 樊剑鸣 邢广旭 赵东 杨苏珍 张改平 《中国动物传染病学报》 CAS 2010年第6期15-21,共7页

为建立BHK-21细胞测定乙型脑炎病毒(Japenese encephalitis virus,JEV)病毒效价的方法,对96孔细胞板中不同初始接种量BHK-21细胞在多种维持液中的生长状态进行探讨,发现当BHK-21细胞以1250～2500个/孔接种96孔板培养24 h后,更换含3%新... 为建立BHK-21细胞测定乙型脑炎病毒(Japenese encephalitis virus,JEV)病毒效价的方法,对96孔细胞板中不同初始接种量BHK-21细胞在多种维持液中的生长状态进行探讨,发现当BHK-21细胞以1250～2500个/孔接种96孔板培养24 h后,更换含3%新生牛血清的DMEM后在37℃、5%CO2条件下可至少良好维持72～96 h。在此条件下并基于Reed-Muench法测定病毒效价的原理,本文建立了准确测定JEV TCID50的方法,利用该方法对JEV野毒分离株及商品疫苗进行测定,均获得稳定、准确的病毒效价。本实验为JEV的体外培养、病毒定量、疫苗评价等提供了一种准确、稳定、易判定的参考方法。 展开更多

关键词 乙型脑炎病毒 BHK-21细胞 效价测定 tcid50

在线阅读 下载PDF 职称材料

一株2型牛病毒性腹泻病毒的分离鉴定及其在MDBK细胞上的克隆纯化 被引量：6

9

作者 聂兆晶 田夫林 姜世金 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期21-25,共5页

为了解牛病毒性腹泻病毒(BVDV)在猪用活疫苗生产过程中的污染情况,利用抗原捕获ELISA方法对用于制作原代睾丸细胞的犊牛血清进行检测。将检测结果为阳性的1份犊牛血清,接种于MDBK细胞上,盲传3代,出现明显细胞病变。用BVDV 5′-UTR端特... 为了解牛病毒性腹泻病毒(BVDV)在猪用活疫苗生产过程中的污染情况,利用抗原捕获ELISA方法对用于制作原代睾丸细胞的犊牛血清进行检测。将检测结果为阳性的1份犊牛血清,接种于MDBK细胞上,盲传3代,出现明显细胞病变。用BVDV 5′-UTR端特异性引物进行RT-PCR扩增,并对扩增片段进行克隆测序和序列分析。结果表明,分离得到一株2型牛病毒性腹泻病毒,并将其命名为JN-2。将该病毒用蚀斑方法进行克隆纯化,并对纯化前后病毒的TCID50进行测定比较,结果发现纯化后病毒滴度显著提高。 展开更多

关键词 BVDV 分离鉴定 序列分析 tcid50

在线阅读 下载PDF 职称材料

重组鸡痘病毒vFV282疫苗株理化特性测定 被引量：5

10

作者 徐敬龙 金扩世 +4 位作者 夏志平 贾雷立 郭建顺 金明兰 金宁一 《动物医学进展》 CSCD 2005年第3期84-85,共2页

将重组鸡痘病毒疫苗株vFV282经酸、碱、热、氯仿、乙醚以及胰蛋白酶处理,接种到CEF上,观察处理前后重组鸡痘病毒疫苗株vFV282毒力活性的变化,分析这些理化因子对重组鸡痘病毒疫苗株vFV282的影响.结果在pH 3.0～pH 9.0范围内,pH变化不会... 将重组鸡痘病毒疫苗株vFV282经酸、碱、热、氯仿、乙醚以及胰蛋白酶处理,接种到CEF上,观察处理前后重组鸡痘病毒疫苗株vFV282毒力活性的变化,分析这些理化因子对重组鸡痘病毒疫苗株vFV282的影响.结果在pH 3.0～pH 9.0范围内,pH变化不会造成该重组鸡痘病毒疫苗株vFV282毒力活性的显著变化.该重组鸡痘病毒疫苗株vFV282经50 ℃ 60 min、55 ℃ 30 min或60 ℃ 15 min即可被灭活,对氯仿敏感,经胰蛋白酶37 ℃作用1 h,TCID50降低2.55 logTCID50/0.1 mL,对乙醚不敏感,经乙醚作用24 h, TCID50下降1.0 log TCID50/0.1 mL. 展开更多

关键词 疫苗株 FV 重组鸡痘病毒 tcid50 胰蛋白酶 乙醚 活性 毒力 PH3 理化因子

在线阅读 下载PDF 职称材料

IBD细胞适应毒对鸡法氏囊重与体重比值的影响 被引量：4

11

作者 张玉杨 肖治军 +2 位作者 郭成留 董森 孙全友 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2006年第12期91-92,共2页

以IBDV—CM株10^4TCID50和IBDV—B87鸡胚中毒力活疫苗1羽份分别免疫14日龄非免疫健康三黄鸡．并于免疫后第3，7，10，14，21天，抽样称取每只鸡的体重和法氏囊重量，计算法氏囊重与体重的比值（B：B值）。试验结果表明：IBDV—CM细胞适... 以IBDV—CM株10^4TCID50和IBDV—B87鸡胚中毒力活疫苗1羽份分别免疫14日龄非免疫健康三黄鸡．并于免疫后第3，7，10，14，21天，抽样称取每只鸡的体重和法氏囊重量，计算法氏囊重与体重的比值（B：B值）。试验结果表明：IBDV—CM细胞适应毒免疫鸡只后，免疫前期（7～10d）对雏鸡法氏囊有轻度损伤，免疫后期（免疫10d后）恢复较好，可抵抗IBD强毒攻击。 展开更多

关键词 鸡传染性法氏囊 细胞适应毒 B:B值 tcid50

在线阅读 下载PDF 职称材料

一株小反刍兽疫病毒的分离鉴定与生长曲线测定 被引量：4

12

作者 张永强 吴晓东 +3 位作者 邹艳丽 包静月 王筱真 王志亮 《中国动物检疫》 CAS 2015年第10期76-79,共4页

将含高滴度小反刍兽疫病毒的新鲜病料研磨后接种VERO DS细胞系进行病毒分离,出现细胞病变后连续传代,取3代以上培养物,进行RT-PCR和间接免疫荧光试验及生长曲线测定。生长曲线测定分别以0.01和0.1MOI接种VERO DS细胞,每隔12h测定病毒滴... 将含高滴度小反刍兽疫病毒的新鲜病料研磨后接种VERO DS细胞系进行病毒分离,出现细胞病变后连续传代,取3代以上培养物,进行RT-PCR和间接免疫荧光试验及生长曲线测定。生长曲线测定分别以0.01和0.1MOI接种VERO DS细胞,每隔12h测定病毒滴度,连续培养168h,绘制病毒生长曲线,分析生长特性。结果显示,病料接种细胞72h后,出现细胞病变,经RT-PCR和间接免疫荧光试验鉴定为小反刍兽疫病毒;生长特性研究显示,0.01和0.1 MOI两种病毒接种量,病毒滴度最高均为106 TCID50左右,但峰值出现时间和下降速度存在差异,0.01 MOI接种量出现峰值晚,但是维持高滴度时间较长。本文成功分离一株小反刍兽疫病毒,并对两种接毒量的生长特性差异进行了初步分析,为探索该病毒培养方法和收毒时间提供了借鉴。 展开更多

关键词 小反刍兽疫病毒 病毒分离 病毒培养 tcid50 生长曲线

在线阅读 下载PDF 职称材料

水疱性口炎病毒荧光RT-PCR鉴别检测方法的建立与应用 被引量：4

13

作者 臧京帅 高志强 +6 位作者 王丽萍 郭金玉 傅毅 牛建蕊 刘文晓 张乐萃 张鹤晓 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2015年第5期73-76,共4页

本研究建立荧光定量RT-PCR鉴别检测水疱性口炎病毒的方法。针对Gen Bank登录的水疱性口炎两血清型-新泽西型(VSV-NJ)和印第安纳型(VSV-IND)的L基因保守区,设计1对引物和2条探针。通过对荧光定量RT-PCR反应条件的优化,建立了Taq Man荧光... 本研究建立荧光定量RT-PCR鉴别检测水疱性口炎病毒的方法。针对Gen Bank登录的水疱性口炎两血清型-新泽西型(VSV-NJ)和印第安纳型(VSV-IND)的L基因保守区,设计1对引物和2条探针。通过对荧光定量RT-PCR反应条件的优化,建立了Taq Man荧光定量RT-PCR快速检测VSV的方法。与常规RT-PCR试验比较表明,所建立的荧光RT-PCR检测技术快速、敏感,检测时限3 h以内,具有很好的特异性和重复性,可以实现水疱性口炎病毒的快速检测分型。通过对342份临床样品进行检测,结果表明,所建立的检测方法适用于样品中水疱性口炎病毒的直接检测。 展开更多

关键词 水疱性口炎病毒 荧光RT-PCR tcid50 鉴别检测

在线阅读 下载PDF 职称材料

马动脉炎病毒RT-PCR检测方法的建立 被引量：3

14

作者 杜建 王志亮 +2 位作者 陈继明 金宁一 张念祖 《中国动物检疫》 CAS 北大核心 2005年第5期28-30,共3页

根据已报道的马动脉炎病毒基因组保守基因核苷酸序列,设计并合成了1对引物,通过对影响PCR扩增因素的筛选,成功地从病毒感染的细胞中扩增出约200bp的片段,与理论设计值(204bp)大小一致。而正常的RK-13、BHK-21和Vero细胞和同为动脉炎病... 根据已报道的马动脉炎病毒基因组保守基因核苷酸序列,设计并合成了1对引物,通过对影响PCR扩增因素的筛选,成功地从病毒感染的细胞中扩增出约200bp的片段,与理论设计值(204bp)大小一致。而正常的RK-13、BHK-21和Vero细胞和同为动脉炎病毒科的猪繁殖与呼吸道综合征病毒(PRRSV)作为对照的扩增结果均为阴性。敏感性试验表明,该方法可以检测出10-4个TCID50的病毒含量,说明具有较好的敏感性。 展开更多

关键词 PCR检测方法 马动脉炎病毒 RT 呼吸道综合征 Vero细胞 tcid50 核苷酸序列 病毒基因组 PCR扩增 敏感性试验 病毒感染 病毒含量 设计值 猪繁殖

在线阅读 下载PDF 职称材料

鸽新城疫病毒毒价的血凝价、ELD_(50)和TCID_(50)值相关性比较 被引量：4

15

作者 崔晓萍 崔治中 +1 位作者 秦爱建 郑明 《中国兽药杂志》 北大核心 1998年第3期1-3,共3页

本文比较了用血凝反应（ＨＡ），在鸡胚成纤维细胞上的ＴＣＩＤ５０及用发育鸡胚做ＥＬＤ５０来测定鸽新城疫病毒（ＮＤＶ）毒价的相关性。结果表明，鸽ＮＤＶ毒价的ＴＣＩＤ５０和ＥＬＤ５０的值基本相同。ＨＡ滴度虽然与ＴＣＩＤ５０... 本文比较了用血凝反应（ＨＡ），在鸡胚成纤维细胞上的ＴＣＩＤ５０及用发育鸡胚做ＥＬＤ５０来测定鸽新城疫病毒（ＮＤＶ）毒价的相关性。结果表明，鸽ＮＤＶ毒价的ＴＣＩＤ５０和ＥＬＤ５０的值基本相同。ＨＡ滴度虽然与ＴＣＩＤ５０值有一定的相关性，但远不如ＴＣＩＤ５０准确。接种病毒后死亡鸡胚的新鲜尿囊液经冻融后，其中鸽ＮＤＶ的ＨＡ滴度和ＴＣＩＤ５０均逐渐下降。每经一次冻融，毒价几乎减少５０％。 展开更多

关键词 鸽 新城疫病毒 ELD50 tcid50 毒价 血凝价

在线阅读 下载PDF 职称材料

B亚群禽白血病病毒SDAU09C2株的TCID_(50)与p27抗原之间的相关性研究 被引量：1

16

作者 李薛 董宣 +2 位作者 赵鹏 牛星 崔治中 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第2期14-17,共4页

为了研究B亚群禽白血病病毒(ALV-B)的半数细胞培养物感染量(TCID50)与p27抗原的酶联免疫吸附试验(ELISA)的S/P值之间的相关性,本试验将ALV-B SDAU09C2株接种鸡胚成纤维细胞(CEF细胞),换维持液后连续10d取样,检测10d的TCID50值与p27抗原... 为了研究B亚群禽白血病病毒(ALV-B)的半数细胞培养物感染量(TCID50)与p27抗原的酶联免疫吸附试验(ELISA)的S/P值之间的相关性,本试验将ALV-B SDAU09C2株接种鸡胚成纤维细胞(CEF细胞),换维持液后连续10d取样,检测10d的TCID50值与p27抗原的S/P值之间的相关性;同时,将该毒株在DF-1细胞系上传代至20代,取其中的第1、5、10、15和20代分别进行TCID50滴度的测定和p27抗原检测。结果表明,在CEF细胞上接种的ALV-B SDAU09C2株连续10d的TCID50值与p27抗原之间存在显著的正相关(r=0.94002;P<0.0001);在DF-1细胞系上传的不同代数之间也呈显著正相关(r=0.96449;P=0.0080)。由此可推测ALV-B的TCID50与p27抗原呈显著正相关,可以用ELISA法测得的p27抗原的S/P值来估测病毒的TCID50值。 展开更多

关键词 B亚群禽白血病病毒 tcid50 P27抗原 Pearson相关

在线阅读 下载PDF 职称材料

基于两种动物模型测定猪伪狂犬病病毒LD_(50)与TCID_(50)比较研究 被引量：1

17

作者 魏凤 郭广君 +2 位作者 吕素芳 李振伟 沈志强 《中国动物检疫》 CAS 2011年第1期52-54,共3页

伪狂犬病活疫苗作为一种安全有效、全国广泛推广使用的疫苗,其效力检验十分必要,而伪狂犬强毒毒价测定则是效力检验的一个必要前提。本实验选用BHK-21细胞及家兔和小鼠实验动物,来检测PRV的TCID50和LD50,旨在找出基于家兔和小鼠两种实... 伪狂犬病活疫苗作为一种安全有效、全国广泛推广使用的疫苗,其效力检验十分必要,而伪狂犬强毒毒价测定则是效力检验的一个必要前提。本实验选用BHK-21细胞及家兔和小鼠实验动物,来检测PRV的TCID50和LD50,旨在找出基于家兔和小鼠两种实验动物PRVTCID50和LD50之间的关系,以简化该苗的效力检验过程。结果表明:用兔子做效力检验时,可以用TCID50代替测LD50。 展开更多

关键词 猪伪狂犬病病毒 tcid50 LD50 动物模型

在线阅读 下载PDF 职称材料

奶牛卵巢中一株IBRV的分离鉴定 被引量：1

18

作者 程凯慧 朱彤 +5 位作者 任亚初 张云飞 楚会萌 解晓莉 张亮 杨宏军 《山东农业科学》 2019年第2期117-120,共4页

利用MDBK细胞从奶牛卵巢中分离到一株牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)毒株。设计扩增IBRV的通用引物,对卵巢组织中的病毒进行PCR扩增及测序;对卵巢组织感染MDBK细胞,进行IBRV的分离培养;测定IBRV的TCID_(50),同时利用IBRV FA进行鉴定。结果... 利用MDBK细胞从奶牛卵巢中分离到一株牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)毒株。设计扩增IBRV的通用引物,对卵巢组织中的病毒进行PCR扩增及测序;对卵巢组织感染MDBK细胞,进行IBRV的分离培养;测定IBRV的TCID_(50),同时利用IBRV FA进行鉴定。结果表明,分离到的病毒在MDBK细胞上产生了明显的病变;用特异性引物可扩增出特异性目的条带,目的序列与IBRV基因序列一致;该毒株的病毒滴度为10^(6.75) TCID_(50)/mL。 展开更多

关键词 卵巢 牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV) 鉴定 细胞病变 tcid50

在线阅读 下载PDF 职称材料

猪繁殖与呼吸综合征病毒TCID_(50)的测定 被引量：14

19

作者 韩先杰 王宏伟 王金宝 《莱阳农学院学报》 2005年第2期132-134,共3页

本文建立一种测定猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)滴度的新方法-免疫染色法。用免疫染色法测得病毒在Mark-145细胞系上的滴度为105.8TCID50/0.1ml,常规法测得病毒滴度为105.2FCID50/0.1ml,这表明前者敏感性和准确率高于后者。

关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 tcid50 免疫染色

在线阅读 下载PDF 职称材料

减毒流感病毒A/California/07/2009ca疫苗候选株在雪貂上的保护性研究

20

作者 段跃强 李晓楠 +5 位作者 曹东 魏澍 杨鹏辉 邢丽 王希良 李培锋 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第S1期1167-1170,共4页

目的:评价减毒A/California/07/2009ca流感病毒在雪貂上的减毒性及免疫保护性。方法:减毒A/California/07/2009ca流感病毒和BJ501病毒滴鼻免疫雪貂。应用TCID50的方法检测雪貂不同时间点的各个器官的病毒载量。结果:减毒A/California/07... 目的:评价减毒A/California/07/2009ca流感病毒在雪貂上的减毒性及免疫保护性。方法:减毒A/California/07/2009ca流感病毒和BJ501病毒滴鼻免疫雪貂。应用TCID50的方法检测雪貂不同时间点的各个器官的病毒载量。结果:减毒A/California/07/2009ca流感病毒初次免疫后雪貂的精神状态、死亡率、体重没有变化,一免4天后雪貂鼻腔内无病毒复制,A/California/07/2009ca流感病毒二免14天免疫BJ501病毒,BJ501病毒在鼻腔、肺中的毒力(TCID50)显著降低。结论:实验证明减毒A/California/07/2009ca病毒在雪貂上无致病性,是减毒的流感病毒株。通过雪貂免疫保护性实验证明,减毒A/California/07/2009ca病毒具有一定的免疫保护效果,这些实验结论的获得为今后流感减毒喷鼻疫苗的研制提供了有力的数据支持。 展开更多

关键词 A/California/07/2009ca病毒 雪貂 tcid50

在线阅读 下载PDF 职称材料