期刊文献+
共找到51篇文章
< 1 2 3 >
每页显示 20 50 100
聚丙烯酰胺凝胶银染技术在半定量RT-PCR中的应用 被引量:12
1
作者 边杉 王颖 +4 位作者 于涛 丁选胜 吴梧桐 叶波平 奚涛 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期178-182,共5页
目的 :探讨聚丙烯酰胺凝胶银染技术在半定量RT PCR中的应用。方法 :提取正常组大鼠和链脲佐菌素致糖尿病模型组大鼠心肌组织总RNA ,逆转录得到cDNA第一链 ,以此为模板进行PCR扩增 ,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳和DNA银染技术分析不同循环数... 目的 :探讨聚丙烯酰胺凝胶银染技术在半定量RT PCR中的应用。方法 :提取正常组大鼠和链脲佐菌素致糖尿病模型组大鼠心肌组织总RNA ,逆转录得到cDNA第一链 ,以此为模板进行PCR扩增 ,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳和DNA银染技术分析不同循环数及模板量与PCR产物量间的关系。结果 :PCR扩增反应在第 2 0~ 2 5个循环 ,起始模板量为 0 8~ 2 4 μg时 ,PCR产物量与起始模板量呈现较好的线性关系。 结论 :通过控制起始模板量 ,减少PCR循环数使目的基因的扩增处于PCR扩增指数期 ,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳和DNA银染技术 。 展开更多
关键词 聚丙烯酰胺凝胶电泳 DNA银染 半定量rt-pcr
在线阅读 下载PDF
绵羊MC4R基因的半定量RT-PCR及生物信息学分析 被引量:13
2
作者 张菊 杜立新 +1 位作者 李宏滨 魏彩虹 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期804-810,共7页
本研究旨在对绵羊MC4R基因进行组织表达谱和生物信息学分析。参考牛MC4R基因序列设计引物,采用PCR技术克隆绵羊MC4R基因序列,并利用半定量RT-PCR进行组织表达谱分析;同时对其进行生物信息学分析。结果表明,克隆的绵羊MC4R基因全长1 919 ... 本研究旨在对绵羊MC4R基因进行组织表达谱和生物信息学分析。参考牛MC4R基因序列设计引物,采用PCR技术克隆绵羊MC4R基因序列,并利用半定量RT-PCR进行组织表达谱分析;同时对其进行生物信息学分析。结果表明,克隆的绵羊MC4R基因全长1 919 bp,含有999 bp的完整CDS编码区,编码332个氨基酸。其CDS编码区的核苷酸序列与牛、人、猪、大鼠、小鼠MC4R基因对应序列的同源性分别为95.2%、68.8%、82.7%、76.6%、77.1%,预测的氨基酸序列同源性分别为97.0%、92.8%、93.7%、92.2%、91.6%。组织表达谱分析表明MC4R基因在各组织均不同程度的表达,其中在大脑表达量很高,其他组织较低。生物信息学预测MC4R蛋白功能发现,绵羊的MC4R蛋白存在7个跨膜螺旋结构域,同时预测MC4R存在10个磷酸化位点和1个特异性蛋白激酶磷酸化位点。结果表明,MC4R是一个非常保守的蛋白,在绵羊的生长发育中起着重要作用。 展开更多
关键词 黑素皮质素受体-4 基因克隆 半定量rt-pcr 生物信息学
在线阅读 下载PDF
三黄鸡ST3Gal6基因的半定量RT-PCR及生物信息学分析 被引量:1
3
作者 周飞 崔连成 +1 位作者 安玉甫 宁章勇 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第3期51-54,共4页
本研究旨在对三黄鸡ST3Gal6基因进行组织表达谱和生物信息学分析。参考三黄鸡ST3Gal6基因序列设计引物,采用PCR技术克隆三黄鸡ST3Gal6基因序列,并利用半定量RT-PCR进行组织表达谱分析;同时对其进行生物信息学分析。结果表明,克隆的三黄... 本研究旨在对三黄鸡ST3Gal6基因进行组织表达谱和生物信息学分析。参考三黄鸡ST3Gal6基因序列设计引物,采用PCR技术克隆三黄鸡ST3Gal6基因序列,并利用半定量RT-PCR进行组织表达谱分析;同时对其进行生物信息学分析。结果表明,克隆的三黄鸡ST3Gal6基因全长1169bp,含有1059bp的完整CDS编码区,编码352个氨基酸。其CDS编码区的核苷酸序列与人、黑猩猩、牛、大鼠、蟾ST3Gal6基因对应序列的同源性分别为62%、62%、61.9%、59%、54.4%。组织表达谱分析表明,ST3Gal6基因在各组织均不同程度地表达,其中在大脑表达量很高,肺脏中最低。生物信息学预测ST3Gal6蛋白结构发现,三黄鸡的ST3Gal6蛋白存在2个跨膜螺旋结构域,同时预测ST3Gal6存在22个磷酸化位点和1个特异性蛋白激酶磷酸化位点。 展开更多
关键词 唾液酸转移酶 流感受体 半定量 生物信息学
在线阅读 下载PDF
猪繁殖与呼吸综合征病毒主要结构蛋白基因半定量RT-PCR方法的建立及其在RNA干扰研究中的应用 被引量:1
4
作者 黄娟 单虎 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第6期22-26,共5页
为了建立以GAPDH基因为参照的半定量RT-PCR检测方法,根据PRRSV VR2332株病毒基因组和GAPDH序列设计4对特异性引物,分别扩增GP5、M、N和GAPDH基因序列,将shRNA表达质粒和GP5、M、N真核表达质粒共转染HEK293A细胞,应用该法检测了转染孔中... 为了建立以GAPDH基因为参照的半定量RT-PCR检测方法,根据PRRSV VR2332株病毒基因组和GAPDH序列设计4对特异性引物,分别扩增GP5、M、N和GAPDH基因序列,将shRNA表达质粒和GP5、M、N真核表达质粒共转染HEK293A细胞,应用该法检测了转染孔中GP5、M、N的相对表达量。同管和分管扩增法均建立了以GAPDH基因为参照的半定量RT-PCR检测方法。靶向GP5、M和N蛋白基因的shRNA表达质粒对其各自蛋白的抑制率为36%~69%,其中pSi-N3和pSi-G1抑制效果最为显著。结果表明,建立的半定量RT-PCR可以用于PRRSV主要结构蛋白基因表达水平的检测分析中。 展开更多
关键词 PRRSV 结构蛋白 半定量rt-pcr RNA干扰
在线阅读 下载PDF
半定量RT-PCR法检测原代培养脂肪细胞生脂基因mRNA转录表达 被引量:6
5
作者 卢建雄 臧荣鑫 +3 位作者 潘和平 杨具田 陈粉粉 杨公社 《中兽医医药杂志》 2005年第6期16-18,共3页
在原代培养脂肪细胞生脂机制研究中,为了检测生脂基因ACC l和FAS mRNA表达水平变化,细胞总RNA经反转录合成cDNA,以β-actin为内参照,分别与ACC l和FAS等基因同管扩增。通过探讨和优化PCR体系中引物设计、退火温度、MgC l2浓度和循环次... 在原代培养脂肪细胞生脂机制研究中,为了检测生脂基因ACC l和FAS mRNA表达水平变化,细胞总RNA经反转录合成cDNA,以β-actin为内参照,分别与ACC l和FAS等基因同管扩增。通过探讨和优化PCR体系中引物设计、退火温度、MgC l2浓度和循环次数等参数,以及引物对间的扩增竞争,建立了检测脂肪细胞生脂相关基因mRNA表达的半定量多重RT-PCR体系。结果显示,RT-PCR产物经电泳后,β-actin及生脂基因电泳带清晰,与预期产物大小一致,引物对间无扩增竞争,其扩增效率和特异性与单重RT-PCR体系相同,实验重复性好。因此,该方法和体系可用于快速、灵敏、可靠地检测特异基因mRNA的表达。 展开更多
关键词 原代培养脂肪细胞 生脂基因 半定量rtpcr
在线阅读 下载PDF
半定量RT-PCR方法检测NaCl胁迫下杂花苜蓿mvNHX基因表达及体系优化
6
作者 许磊 石庆华 +3 位作者 代培红 杨云尧 王永超 张桦 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期2484-2488,共5页
【目的】优化半定量RT-PCR反应体系,并用优化体系检测杂花苜蓿mvNHX基因的表达情况。【方法】提取用150 mmol/L盐浓度、处理不同时间的苜蓿叶片组织总RNA;反转录得到cDNA;利用优化半定量RT-PCR法检测。【结果】检测到mvNHX基因随胁迫时... 【目的】优化半定量RT-PCR反应体系,并用优化体系检测杂花苜蓿mvNHX基因的表达情况。【方法】提取用150 mmol/L盐浓度、处理不同时间的苜蓿叶片组织总RNA;反转录得到cDNA;利用优化半定量RT-PCR法检测。【结果】检测到mvNHX基因随胁迫时间基因表达量总体上逐渐升高。【结论】通过半定量RT-PCR法检测基因在胁迫条件的表达量的变化。同时对该方法进行优化,为进一步研究该基因克隆及其功能验证奠定了一定的实验基础。 展开更多
关键词 半定量rt-pcr 盐胁迫 mvNHX基因
在线阅读 下载PDF
半定量RT-PCR法检测SPRN基因在小鼠各组织中的mRNA表达 被引量:1
7
作者 王海鹰 王惟 +4 位作者 万家余 廖翔宇 徐静 廖鹏 高宏伟 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第11期5558-5559,5579,共3页
[目的]研究SPRN基因在不同组织中的表达水平和机制。[方法]选择3种不同品系的小鼠为试验材料,利用半定量RT-PCR方法,测定不同品系小鼠各组织中SPRN基因的mRNA表达水平,并对其循环次数进行研究。[结果]SPRN基因主要在脑组织中表达,在肺... [目的]研究SPRN基因在不同组织中的表达水平和机制。[方法]选择3种不同品系的小鼠为试验材料,利用半定量RT-PCR方法,测定不同品系小鼠各组织中SPRN基因的mRNA表达水平,并对其循环次数进行研究。[结果]SPRN基因主要在脑组织中表达,在肺脏和胃中表达量较低,而在淋巴结和脾脏中仅有微量的表达;半定量RT-PCR体系的最佳扩增循环数为23。[结论]成功地建立了检测SPRN基因mRNA表达的半定量RT-PCR方法,该方法具有简便、快速、准确和精密度高等优点。 展开更多
关键词 SPRN基因 半定量rt-pcr MRNA
在线阅读 下载PDF
青海家牦牛HIF-1α基因组织特异性表达 被引量:11
8
作者 王德朋 李红阁 +3 位作者 郭松长 杨洁 祁得林 赵新全 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2007年第29期9173-9175,共3页
[目的]探究青海家牦牛HIF-1α基因组织的特异性表达。[方法]应用半定量反转录PCR和实时定量反转录PCR(SYBRGreen)技术对青海家牦牛HIF-1α基因的组织特异性表达进行检测。通过提取不同组织总RNA,经DNase I消化后,用随机引物进行反转录合... [目的]探究青海家牦牛HIF-1α基因组织的特异性表达。[方法]应用半定量反转录PCR和实时定量反转录PCR(SYBRGreen)技术对青海家牦牛HIF-1α基因的组织特异性表达进行检测。通过提取不同组织总RNA,经DNase I消化后,用随机引物进行反转录合成cDNA,采用特异性引物分别对HIF-1α和β-actin基因进行RT-PCR和Real Time RT-PCR扩增。[结果]结果表明,HIF-1α基因在心、肝、脾、肺、肾、脑、肌肉、睾丸组织中均有表达,其中以睾丸和脾中HIF-1α基因表达量最高,肌肉的表达量最低。[结论]该研究为进一步揭示HIF-1α在高原土著动物低氧适应过程中的分子机制有着重要的意义。 展开更多
关键词 青海家牦牛 HIF-1 α半定量反转录pcr 实时定量反转录pcr 组织分布
在线阅读 下载PDF
甜瓜化感自毒作用响应基因的cDNA-AFLP分析 被引量:11
9
作者 张志忠 孙志浩 +1 位作者 陈文辉 林文雄 《中国生态农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1514-1520,共7页
本研究以甜瓜种质"新银辉"为试验材料,利用浓度为0.03 g.mL 1的新鲜甜瓜植株水浸提液处理甜瓜幼苗,通过cDNA-AFLP技术分析甜瓜化感自毒作用相关基因及其表达情况。试验中利用82对引物进行扩增,共获得3 600多条差异表达转录衍生片段(T... 本研究以甜瓜种质"新银辉"为试验材料,利用浓度为0.03 g.mL 1的新鲜甜瓜植株水浸提液处理甜瓜幼苗,通过cDNA-AFLP技术分析甜瓜化感自毒作用相关基因及其表达情况。试验中利用82对引物进行扩增,共获得3 600多条差异表达转录衍生片段(TDFs),平均每个引物组合可扩增出30~50条条带,片段大小集中在50~800 bp之间,根据条带强弱和有无的变化,其表达模式可以分为持续表达、瞬时表达、上调表达和下调表达4种情况。选取其中103条TDFs进行回收、测序,共获得75条有效序列,其中上调表达39条,下调表达21条,瞬时表达15条。BLAST结果分析显示其中55条与已知功能基因具有较高的同源性,选取其中10条TDFs,以甜瓜Actin基因为内参照,对其在不同胁迫处理时间的表达情况进行半定量RT-PCR验证,分析结果与cDNA-AFLP结果基本吻合,表明cDNA-AFLP技术是研究甜瓜化感自毒作用相关基因差异表达的有效方法。55条TDFs的BLAST结果显示,甜瓜自毒作用涉及到的基因表达情况较为复杂,与信号转导、能量代谢、蛋白合成、离子运输、逆境响应和转录调控等过程均有关系,这一结果为探讨甜瓜化感自毒作用的分子机理和相关基因的克隆提供了理论依据。 展开更多
关键词 甜瓜 化感自毒作用 CDNA-AFLP 差异表达转录衍生片段 半定量rt-pcr 化感基因
在线阅读 下载PDF
RNAi干扰油菜Δ^(12)-脂肪酸脱饱和酶基因的表达效果 被引量:4
10
作者 田保明 廉玉利 +5 位作者 凌华 杨光圣 赵珍 范兴福 李旭娇 师恭曜 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期132-136,共5页
为进一步研究RNA i介导的Δ12-脂肪酸脱饱和酶(FAD2)干扰基因对油菜内源FAD2基因表达的影响,以油菜肌动蛋白(-βActin)基因为内参照基因,提取转基因油菜幼嫩种子总RNA,通过半定量RT-PCR检测内源FAD2基因的相对表达量。结果表明,T1,T3代... 为进一步研究RNA i介导的Δ12-脂肪酸脱饱和酶(FAD2)干扰基因对油菜内源FAD2基因表达的影响,以油菜肌动蛋白(-βActin)基因为内参照基因,提取转基因油菜幼嫩种子总RNA,通过半定量RT-PCR检测内源FAD2基因的相对表达量。结果表明,T1,T3代转基因种子中FAD2基因的相对表达量与对照相比明显降低。对T3代种子的油酸含量的分析表明,转基因油菜种子中油酸的含量比野生型增加了13.90到32.20个百分点,直接说明RNA i干扰体下调了FAD2基因的表达。因此,种子内源表达的FAD2基因被RNA i干扰体有效沉默,并且产生了能够稳定遗传两代的表型变化。 展开更多
关键词 RNAI Δ12-脂肪酸脱饱和酶(FAD2) 半定量rt-pcr 油酸 油菜
在线阅读 下载PDF
猪泛素-B基因的克隆及组织表达谱分析 被引量:3
11
作者 谢水华 李加琪 +5 位作者 陈瑶生 张豪 王翀 梅盈洁 莫德林 李泽月 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期399-404,共6页
从人泛素-B(Ubiquitin B,UbB)基因mRNA序列出发,在猪的ESTs库中进行同源性搜索,通过电子克隆和进一步RT-PCR方法从猪肌肉组织总RNA中扩增出泛素-B基因部分cDNA序列(GenBank登录号:EF688558),长894bp,其中在89~778bp处包含一... 从人泛素-B(Ubiquitin B,UbB)基因mRNA序列出发,在猪的ESTs库中进行同源性搜索,通过电子克隆和进一步RT-PCR方法从猪肌肉组织总RNA中扩增出泛素-B基因部分cDNA序列(GenBank登录号:EF688558),长894bp,其中在89~778bp处包含一个完整的开放阅读框,编码229个氨基酸。猪泛素-B基因由2个外显子和1个内含子构成(GenBank登录号:EF688559),内含子长657bp,符合GT-AG规则。序列分析结果表明:猪泛素-B基因与已报道的人、黑猩猩、小家鼠、大鼠、鸡等物种的泛素-B基因高度同源,同源性分别为92%、91%、91%、91%、89%,氨基酸序列同源性为100%。半定量RT-PCR结果表明:泛素-B基因在150日龄肥育猪心脏、肝脏、肾脏、小脑中的表达量较高,脾脏、肺脏、胃、膀胱、背最长肌、大脑次之,脂肪和下丘脑中的表达量最低,其在蓝塘与长白猪肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胃、膀胱、背最长肌等7个组织中的表达量存在差异。 展开更多
关键词 泛素-B基因 半定量rtpcr 序列分析 基因表达
在线阅读 下载PDF
转录靶向猪瘟病毒3′-UTRshRNA细胞株干扰猪瘟病毒增殖的检测 被引量:2
12
作者 郭抗抗 徐浩 +5 位作者 张彦明 张为民 冶贵生 熊奎州 谢林红 党如意 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期746-751,共6页
对筛选的转录猪瘟病毒石门株3-′UTR shRNA的PK-15细胞株P-1(114-132位)、P-2(136-154位)和P-3(209-227位)分别接种猪瘟病毒(CSFV),在接毒后第72和96小时用半定量反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测CSFVNS3基因及-βactin基因... 对筛选的转录猪瘟病毒石门株3-′UTR shRNA的PK-15细胞株P-1(114-132位)、P-2(136-154位)和P-3(209-227位)分别接种猪瘟病毒(CSFV),在接毒后第72和96小时用半定量反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测CSFVNS3基因及-βactin基因,以研究构建细胞株在转录水平上对CSFV增殖干扰的效果;接毒后第72、96和148小时以酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测细胞NS3蛋白表达量,通过OD490值分析构建细胞株在病毒蛋白表达水平上对CSFV增殖的影响。检测结果表明:(1)接毒后第72和96小时P-1、P-2和P-3细胞株中NS3基因的量明显减少,与接毒的空白PK-15细胞比较差异显著(P〈0.05),说明P-1、P-2和P-3细胞株转录的shRNA能干扰CSFV RNA的转录;(2)接毒后第72和96小时P-1、P-2、P-3细胞株中NS3蛋白的表达量明显少于接毒的PK-15细胞(P〈0.05),说明转录的shRNA在病毒蛋白水平上能干扰CSFVNS3基因的表达,但接毒后第148小时干扰效果有所降低。 展开更多
关键词 半定量rt-pcr ELISA 猪瘟病毒 3′-UTR
在线阅读 下载PDF
藜麦β-香树酯醇合酶和鲨烯合酶基因的克隆与表达 被引量:3
13
作者 姜晓东 李新凤 +4 位作者 郝艳平 赵靓 吕晋慧 贾举庆 张春来 《土壤》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期1214-1221,共8页
为了探明藜麦皂苷生物合成的分子机制,试验以藜麦品种陇藜1号为材料,利用已有的转录数据,通过RT-PCR技术鉴定参与三萜皂苷生物合成关键酶基因,采用生物信息学分析方法进行了基因编码蛋白保守结构域、蛋白二级结构及系统发育树的构建,并... 为了探明藜麦皂苷生物合成的分子机制,试验以藜麦品种陇藜1号为材料,利用已有的转录数据,通过RT-PCR技术鉴定参与三萜皂苷生物合成关键酶基因,采用生物信息学分析方法进行了基因编码蛋白保守结构域、蛋白二级结构及系统发育树的构建,并利用半定量RT-PCR方法进行了目的基因在籽粒不同发育时期和植株不同部位(根、茎、叶和籽粒)表达水平的研究。试验克隆得到三萜烯皂苷生物合成途径中关键酶编码基因CqSS1、CqSS2和CqbAS的cDNA全长序列。半定量RT-PCR表达分析表明,CqSS1和CqbAS在叶片、籽粒中表达量最高,各基因在籽粒不同发育时期的表达量间无显著差异。本研究对藜麦三萜皂苷生物合成途径中关键酶基因表达模式的研究,将为进一步探明藜麦皂苷生物合成的分子机制及发掘影响藜麦皂苷含量的关键基因奠定基础。 展开更多
关键词 藜麦 籽粒发育 关键酶基因 克隆 半定量rt-pcr
在线阅读 下载PDF
日龄对仔猪股骨骨髓组织抗菌肽PR-39 mRNA表达的影响 被引量:2
14
作者 赵玉蓉 周灿 +1 位作者 范志勇 贺建华 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期305-308,共4页
为探明日龄对仔猪非特异性免疫形成的影响,分别于仔猪出生当天,3,14,23,28 d,随机屠宰杜长大仔公猪4头,采集股骨骨髓组织.用一优化的RT-PCR方法,以18S rRNA作内标,半定量分析不同日龄仔猪骨髓组织抗菌肽PR-39 mRNA表达的差异.结果表明:... 为探明日龄对仔猪非特异性免疫形成的影响,分别于仔猪出生当天,3,14,23,28 d,随机屠宰杜长大仔公猪4头,采集股骨骨髓组织.用一优化的RT-PCR方法,以18S rRNA作内标,半定量分析不同日龄仔猪骨髓组织抗菌肽PR-39 mRNA表达的差异.结果表明:不同日龄间仔猪骨髓组织PR-39 mRNA相对表达量存在明显的差异.出生时最低,吮吸初乳2 d后显著增加,14日龄时较3日龄显著下降,随后随日龄的增加,其表达量呈上升趋势. 展开更多
关键词 仔猪 半定量rt-pcr 抗菌肽 PR-39 基因表达 日龄
在线阅读 下载PDF
柔嫩艾美耳球虫卵囊免疫后鸡盲肠扁桃体GM-CSF基因表达的动态变化 被引量:1
15
作者 徐赓 王彩霞 +2 位作者 王黎霞 安健 李卫东 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期950-954,共5页
为检测和评价鸡粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(ChGM-CSF)在抗球虫免疫过程中的作用,以RT-PCR技术从鸡盲肠扁桃体中克隆获得了ChGM-CSF编码基因的开放阅读框(ORF),其长为435 bp。将试验鸡随机分为对照组和试验组,试验组于12、22日龄时用E.... 为检测和评价鸡粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(ChGM-CSF)在抗球虫免疫过程中的作用,以RT-PCR技术从鸡盲肠扁桃体中克隆获得了ChGM-CSF编码基因的开放阅读框(ORF),其长为435 bp。将试验鸡随机分为对照组和试验组,试验组于12、22日龄时用E.tenella孢子化卵囊进行免疫,分别于设定时间每次取5只鸡采集盲肠扁桃体,以鸡β-actin为参照建立半定量RT-PCR方法检测ChGM-CSF的表达动态。结果表明,在第1次免疫后的第1天(13日龄,P<0.05)和第2次免疫后的第7天(29日龄,P<0.01),试验组ChGM-CSF的表达量显著高于对照组;在第1次免疫后的第9天(21日龄)和第2次免疫后的第3天(25日龄)ChGM-CSF的表达量显著低于对照组(P<0.01)。本研究提示ChGM-CSF参与了鸡体的抗球虫感染过程,为进一步探讨ChGM-CSF的生物学活性及作为鸡球虫病基因工程疫苗佐剂的研究奠定基础。 展开更多
关键词 盲肠扁桃体 GM—CSF 半定量rtpcr
在线阅读 下载PDF
拟南芥β-1,3-葡聚糖酶基因(BG1)在不同组织及非生物胁迫下的表达研究 被引量:3
16
作者 赵娟 兰海燕 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期712-718,共7页
【目的】研究拟南芥β-1,3-葡聚糖酶基因(BG1)在不同组织及胁迫条件下的表达规律。【方法】研究以拟南芥为材料,以28SrRNA为内参,利用半定量RT-PCR法研究了低温(4℃)、高温(37℃)、NaCl胁迫(200 mmol/L)和与之等渗的PEG(21.5%)干旱胁迫... 【目的】研究拟南芥β-1,3-葡聚糖酶基因(BG1)在不同组织及胁迫条件下的表达规律。【方法】研究以拟南芥为材料,以28SrRNA为内参,利用半定量RT-PCR法研究了低温(4℃)、高温(37℃)、NaCl胁迫(200 mmol/L)和与之等渗的PEG(21.5%)干旱胁迫处理在不同组织(叶、薹、花、果)中BG1的表达情况。【结果】(1)正常植株中,BG1在不同组织的表达量不同:花、果>叶>薹。(2)胁迫处理对BG1的表达量有影响。在叶中,盐胁迫不影响其表达,其他处理都使其表达量减少;在薹中,除低温处理使其表达量明显增加,其他情况的表达都减少,37℃和干旱胁迫后几乎不表达;在花中,NaCl胁迫处理后表达量明显增加,PEG处理及高温胁迫后表达量下降;在果实中,BG1在PEG胁迫后表达量稍有增加,而37℃和盐胁迫表达稍有下降。【结论】在正常植株中,BG1的表达具有差异性;BG1对各种胁迫处理的响应不同。 展开更多
关键词 拟南芥 β-1 3-葡聚糖酶基因(BG1) 半定量rt-pcr 非生物胁迫
在线阅读 下载PDF
玉米1-吡咯啉-5-羧酸合成酶在非生物胁迫下的表达分析 被引量:1
17
作者 董晨 决登伟 +2 位作者 胡会刚 赵秋芳 贾利强 《广东农业科学》 CAS 2016年第2期8-13,共6页
脯氨酸在植物渗透调节中起举足轻重的作用,1-吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS)是脯氨酸的谷氨酸合成途径中的关键酶,为了研究玉米P5CS基因家族与玉米抗逆性的关系,对玉米幼苗进行了非生物胁迫(干旱、低温、盐胁迫)处理,利用半定量RT-PCR技术... 脯氨酸在植物渗透调节中起举足轻重的作用,1-吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS)是脯氨酸的谷氨酸合成途径中的关键酶,为了研究玉米P5CS基因家族与玉米抗逆性的关系,对玉米幼苗进行了非生物胁迫(干旱、低温、盐胁迫)处理,利用半定量RT-PCR技术分析了ZMP5CS基因家族在不同胁迫条件下的表达特性。结果表明,ZMP5CS基因家族中除ZM02G27230以外的基因不论地上部叶还是地下部根均被干旱胁迫诱导上调表达,但各成员之间其表达量最高点出现的时间不同;相同处理同一基因相同的处理时间点地上部与地下部基因表达量存在差异,在干旱胁迫下ZM08G14210的表达量最高,在盐胁迫下ZM08G31890的表达量最高,在低温胁迫下ZM06G25580的表达量最高,说明ZMP5CS基因家族表达受非生物胁迫的诱导。 展开更多
关键词 玉米 1-吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS) 非生物胁迫 表达分析 半定量rtpcr
在线阅读 下载PDF
溆浦鹅肌肉生成抑制因子基因(MSTN)的克隆及其表达量与日粮能量、血清IGF-I和GH的关系研究
18
作者 胡骏鹏 何瑞国 +1 位作者 范卫星 曹爱青 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期582-587,共6页
从淑浦鹅(Xupu geese)的腿肌中抽提总RNA,用两步法RT-PCR扩增出MSTN基因的cDNA编码序列,以pGEM-T Vector为载体,将该片段克隆到大肠杆菌(Escherichi acoli)中。通过筛选阳性克隆,双酶切鉴定后测序;以MSTN基因的克隆为基础,以... 从淑浦鹅(Xupu geese)的腿肌中抽提总RNA,用两步法RT-PCR扩增出MSTN基因的cDNA编码序列,以pGEM-T Vector为载体,将该片段克隆到大肠杆菌(Escherichi acoli)中。通过筛选阳性克隆,双酶切鉴定后测序;以MSTN基因的克隆为基础,以β-actin为内标,构建优化的半定量RT—PCR方法,研究高、中、低(A:13.38MJ/kg、B:12.13MJ/kg、C:10.87MJ/kg)3种不同能量对淑浦鹅21和70日龄2个时期肌肉组织MSTN基因表达的差异;同时用放免法测定21、70日龄的血清GH和IGF-I浓度。结果表明:克隆的淑浦鹅MSTN基因cDNA的部分序列,其片段大小为1128bp,编码375个氨基酸组成的多肽,淑浦鹅与鸡、鸭、朗德鹅的核苷酸相似性分别为94%、94%、99%;推导氨基酸的相似性分别为98%、97%、98%。21日龄时,日粮能量水平对淑浦鹅MSTN表达量的影响不显著;70日龄时淑浦鹅MSTN的表达量为C〉B〉A。对于淑浦鹅21~70日龄阶段的生长,MSTN基因的表达量和血清IGF-I的变化趋势基本一致;与血清GH含量之间并不存在很大关联,日粮能量对21日龄后淑浦鹅MSTN基因的表达有影响。本研究为MSTN基因在水禽中的进一步研究和应用打下了基础。 展开更多
关键词 淑浦鹅 MSTN 肌肉组织 半定量rtpcr IGF-I GH
在线阅读 下载PDF
不同日龄猪腹脂中脂肪酸合成酶(FAS)基因表达规律的研究 被引量:20
19
作者 单体中 汪以真 +2 位作者 刘建新 许梓荣 冯杰 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期662-666,共5页
从猪腹脂中提取总RNA,用RT-PCR扩增脂肪酸合成酶基因(FAS),获得一条206bp的片段,以pGEM-TEasyvector为载体,将该基因片段克隆到大肠杆菌E.coli DH5α,筛选阳性克隆并测序。测序结果表明,得到的片段为FAS基因的部分序列,与GenB... 从猪腹脂中提取总RNA,用RT-PCR扩增脂肪酸合成酶基因(FAS),获得一条206bp的片段,以pGEM-TEasyvector为载体,将该基因片段克隆到大肠杆菌E.coli DH5α,筛选阳性克隆并测序。测序结果表明,得到的片段为FAS基因的部分序列,与GenBank中登录的猪FAS基因(AY183428)494~699之间序列同源性达到100%。以FAS基因片段的克隆为基础,构建了优化的半定量RT-PCR法,以18S rRNA为内标,研究从1日龄到28周龄杜长大腹脂中FAS基因表达的规律。结果显示,从1日龄到28周龄,FAS基因在腹脂mRNA水平呈逐渐升高的趋势;统计分析发现,1日龄与28周龄FAS在腹脂中mRNA水平存在显著性差异(P〈0.05)。 展开更多
关键词 脂肪酸合成酶 基因克隆 腹脂 半定量rt-pcr
在线阅读 下载PDF
孕酮对体外培养的牛子宫内膜细胞上孕酮受体表达的影响 被引量:8
20
作者 张明 甘潇 +4 位作者 郑洁 赖松家 张华 王雄清 朱庆 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1190-1195,共6页
本试验分别用50、100、200和400 ng/mL浓度的孕酮处理体外培养的牛子宫内膜细胞1、3、6、12、24 h,然后收集细胞通过半定量RT-PCR分析孕酮对子宫内膜细胞孕酮受体(PR)表达的影响。结果表明:在细胞层次水平上,孕酮能够抑制子宫内膜体外... 本试验分别用50、100、200和400 ng/mL浓度的孕酮处理体外培养的牛子宫内膜细胞1、3、6、12、24 h,然后收集细胞通过半定量RT-PCR分析孕酮对子宫内膜细胞孕酮受体(PR)表达的影响。结果表明:在细胞层次水平上,孕酮能够抑制子宫内膜体外培养细胞上孕酮受体的表达。 展开更多
关键词 子宫内膜 孕酮受体 半定量rt-pcr
在线阅读 下载PDF
上一页 1 2 3 下一页 到第
使用帮助 返回顶部