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Studies on Glutamine Synthetase Activity in Sugar Beet (BetavulgarisL.) under Different Levels of Nitrogen 被引量:1
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作者 YanGuiping YanHui 《Journal of Northeast Agricultural University(English Edition)》 CAS 1995年第1期17-24,共8页
It was shown from the experiment that glutamine synthetase activity (GSA) in both leaf blades and roots under different nitrogen levels rose rapidly to reach its peak from seedling stage to foliage rapid growth stage ... It was shown from the experiment that glutamine synthetase activity (GSA) in both leaf blades and roots under different nitrogen levels rose rapidly to reach its peak from seedling stage to foliage rapid growth stage and declined to its lowest level at the latter stage of root rapid growth, and then increased slightly. GSA in leaf blades had positive correlation with nitrogen level during the whole period of growth. GSA in roots showed the same tendency as it in leaf blades at the early middle stage of growth, but at the latter stage of growth, no positive correlation was established. GSA in leaf blades was the strongest compared with crowns, petioles and roots, and could represent the highest enzyme activity of the whole plant. GSA had quadratic curvilinear correlation with root yield and sugar production. GSA in leaf blades had significant positive correlation with α-NH2-N at the foliage rapid growth stage. 展开更多
关键词 SUGARBEET glutamine synthetase nitrogen level root yield and quality
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活血地龟汤通过改善高糖足细胞铁死亡治疗糖尿病肾脏疾病的作用机制
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作者 李冰 王学艺 +2 位作者 韩佳瑞 王慧丽 王晨辉 《世界中医药》 北大核心 2025年第5期738-745,共8页
目的:研究活血地龟汤(HXDGT)对高糖诱导的足细胞铁死亡的调控作用,明确其治疗糖尿病肾脏疾病(DKD)的作用机制。方法:体外常规培养MPC-5足细胞,分为正常组、DKD组、HXDGT组、核转录因子红系2相关因子2(Nrf2)激动剂莱菔硫烷(Sulforaphane... 目的:研究活血地龟汤(HXDGT)对高糖诱导的足细胞铁死亡的调控作用,明确其治疗糖尿病肾脏疾病(DKD)的作用机制。方法:体外常规培养MPC-5足细胞,分为正常组、DKD组、HXDGT组、核转录因子红系2相关因子2(Nrf2)激动剂莱菔硫烷(Sulforaphane)组、Nrf2抑制剂ML385组,免疫荧光染色检测足突蛋白(Podocin)、肾病蛋白(Nephrin)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)、Nrf2、铁转运蛋白1(FPN1)的蛋白表达和定位;Western Blot法检测GPX4、ACSL4、Nrf2、FPN1蛋白的表达;普鲁士蓝染色观察足细胞内铁离子积累情况。结果:与正常组比较,DKD组Podocin、Nephrin、GPX4、Nrf2、FPN1荧光强度减弱,ACSL4荧光强度增强,GPX4、Nrf2、FPN1蛋白表达下调(P<0.01),ACSL4蛋白表达上调(P<0.01),普鲁士蓝染色加深;与DKD组比较,HXDGT组和Sulforaphane组Podocin、Nephrin、GPX4、Nrf2、FPN1荧光强度增强,ACSL4荧光强度减弱,GPX4蛋白表达上调(P<0.01)、Nrf2蛋白表达上调(P<0.05),FPN1蛋白表达上调(P<0.01,P<0.05),普鲁士蓝染色减轻。结论:HXDGT可能通过上调Nrf2蛋白表达,促进FPN1蛋白表达,减轻DKD足细胞铁沉积以减轻铁死亡,从而发挥保护足细胞、治疗DKD的作用。 展开更多
关键词 活血地龟汤 核转录因子红系2相关因子2 酰基辅酶A合成酶长链家族成员4 谷胱甘肽过氧化物酶4 铁转运蛋白1 铁死亡 足细胞 糖尿病肾脏疾病
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细胞转录组学和代谢组学整合策略表征突变影响谷氨酰胺合成酶酶活的关键代谢通路 被引量:1
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作者 凌婷 石京 +3 位作者 冯婷泽 裴劭君 李思怿 朴海龙 《色谱》 北大核心 2025年第3期207-219,共13页
谷氨酰胺合成酶(GS)是细胞中唯一可以从头合成谷氨酰胺的酶,在癌症代谢中扮演着重要角色。GS酶活缺陷突变往往导致严重的代谢疾病甚至是死亡。理解GS酶活降低对生理功能的影响可能为靶向治疗提供新的方向,同时对其内在机制的探索可以为... 谷氨酰胺合成酶(GS)是细胞中唯一可以从头合成谷氨酰胺的酶,在癌症代谢中扮演着重要角色。GS酶活缺陷突变往往导致严重的代谢疾病甚至是死亡。理解GS酶活降低对生理功能的影响可能为靶向治疗提供新的方向,同时对其内在机制的探索可以为治疗干预开辟新的途径。已报道的GS酶活缺陷突变包括R324C(第324位精氨酸突变为半胱氨酸)和R341C(第341位精氨酸突变为半胱氨酸)等,本研究新发现了GS的另一个酶活缺陷突变位点K241(第241位赖氨酸)。为了探究GS酶活缺陷突变带来的影响,本研究利用双组学技术对GS的酶活缺陷突变R324C和K241R(第241位赖氨酸突变为精氨酸)在肺癌细胞中的功能进行研究,通过对转录组和代谢组数据的整合揭示了GS酶活缺陷突变对一些重要生物过程的显著影响。GS的缺陷突变阻碍了细胞周期和多种氨基酸代谢途径。除了谷氨酰胺合成受到抑制,精氨酸-脯氨酸代谢、甘氨酸-丝氨酸-酪氨酸代谢以及天冬氨酸-谷氨酸-丙氨酸代谢在GS突变的细胞中表现出更强的活力,同时,氨酰-tRNA的生物合成途径也显著被激活。进一步的研究发现,GS酶活缺陷带来氨基酸代谢的改变源自谷氨酸的重新定向和相关代谢酶的表达变化,同时,氨酰-tRNA生物合成的激活源自谷氨酰胺在GS酶活缺陷细胞中带来的能量应激激活了特定蛋白的表达,如转录因子4(ATF4)。此外,细胞表型实验表明,GS酶活缺陷细胞的迁移能力低于野生型细胞。以上结果揭示了GS酶活缺陷突变体细胞中的代谢重编程现象,突出了癌细胞代谢的复杂性和适应性。 展开更多
关键词 谷氨酰胺合成酶突变 转录组学 代谢组学 肺癌 谷氨酰胺
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硫酯酶催化机制及结构生物学
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作者 周于聪 石婷 +2 位作者 芦晨阳 刘昊 白林泉 《生物化学与生物物理进展》 北大核心 2025年第3期537-553,共17页
聚酮类和非核糖体肽类化合物是活性天然产物的重要来源,更是丰富的临床药物先导资源库。位于聚酮合酶和非核糖体肽合成酶末端的硫酯酶结构域在这些活性天然产物的链释放过程中发挥了重要的底物选择功能,是其合成后期关键催化酶。本文综... 聚酮类和非核糖体肽类化合物是活性天然产物的重要来源,更是丰富的临床药物先导资源库。位于聚酮合酶和非核糖体肽合成酶末端的硫酯酶结构域在这些活性天然产物的链释放过程中发挥了重要的底物选择功能,是其合成后期关键催化酶。本文综述了各类硫酯酶的序列和结构特点,重点分析了硫酯酶结构和催化功能的对应性。此外,本文还围绕I型硫酯酶的催化机制,详细阐述了硫酯酶催化的链释放反应的化学本质,并总结了硫酯酶催化机制的计算模拟方面的研究进展和局限性,为硫酯酶的结构和机制解析以及理性设计提供参考。 展开更多
关键词 聚酮合成酶 非核糖体肽合成酶 硫酯酶 蛋白质结构 催化机制
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重组靛蓝色素合成酶快速定量检测L-谷氨酰胺
5
作者 袁天慧 李晗 +7 位作者 张怡婷 赵钰 成琦 韩雨洁 徐得磊 朱天择 罗兵 朱益波 《食品与生物技术学报》 北大核心 2025年第4期163-172,共10页
【目标】快速、经济且准确地检测复杂样品中L-谷氨酰胺(L-glutamine,Gln)的浓度。【方法】利用重组大肠杆菌(Escherichia coli)表达的靛蓝色素合成酶(blue pigment synthetaseA,BpsA),开发快速精确定量Gln的方法。通过对脱辅基BpsA(apo-... 【目标】快速、经济且准确地检测复杂样品中L-谷氨酰胺(L-glutamine,Gln)的浓度。【方法】利用重组大肠杆菌(Escherichia coli)表达的靛蓝色素合成酶(blue pigment synthetaseA,BpsA),开发快速精确定量Gln的方法。通过对脱辅基BpsA(apo-BpsA)进行体外活化及测定条件优化获得BpsA全酶(holo-BpsA)。【结果】所获holo-BpsA可在适宜条件下于30 min内完成对Gln的定量测定,该方法检测限为10.46μmol/L,定量限为31.68μmol/L,板间标准偏差为1.41μmol/L,板内标准偏差为0.85μmol/L;针对5种常用培养基的平均加标回收率为94.7%~106.6%,其标准偏差基本在5%以下。holo-BpsA在-20℃下保存2个月后,酶活力未见显著变化。【结论】作者开发的基于BpsA快速检测Gln的方法操作简便、专一性强、耗时短,具有较高灵敏度和准确度。 展开更多
关键词 L-谷氨酰胺 靛蓝色素合成酶 快速定量检测
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ARSs基因变异致腓骨肌萎缩症遗传学与临床特征分析
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作者 李一青 李桂河 +3 位作者 曹春艳 高缘 陈万金 何瑾 《中国现代神经疾病杂志》 北大核心 2025年第7期622-628,共7页
目的 总结ARSs基因变异致腓骨肌萎缩症(CMT)的临床表现和遗传学特征。方法与结果 选择1997年1月至2024年2月福建医科大学附属第一医院临床注册登记队列中临床拟诊腓骨肌萎缩症的12个家系共12例先证者。临床症状,10例四肢近端肌力正常,... 目的 总结ARSs基因变异致腓骨肌萎缩症(CMT)的临床表现和遗传学特征。方法与结果 选择1997年1月至2024年2月福建医科大学附属第一医院临床注册登记队列中临床拟诊腓骨肌萎缩症的12个家系共12例先证者。临床症状,10例四肢近端肌力正常,远端受累严重;肌萎缩多出现于踝关节及腕关节以下;2例主观肢体麻木感,1例对称性浅感觉减退;仅1例腱反射正常。电生理学特点,11例正中神经运动神经传导速度平均为36.67 m/s,正中神经复合肌肉动作电位平均为5.42 mV。ARSs基因变异分析,包括GARS1、YARS1、AARS1和SARS1共4种ARSs基因变异,8个GARS1基因突变位点(c.1235G>A、c.598G>C、c.362G>A、c.1415A>G、c.637C>T、c.374A>G、c.722G>T、c.1000A>T)中c.598G>C、c.722G>T国内外尚未见诸报道;肌电图提示5例先证者为中间型(ICMT型),3例为轴索型(CMT2型)。2个YARS1基因突变位点c.1333A>G、c.787T>C中c.787T>C国内外尚未见诸报道;2例先证者分别为脱髓鞘型(CMT1型)和ICMT型;AARS1基因c.896C>T突变1例,为CMT2型;SARS1基因c.1187C>T突变1例,为ICMT型。结论 ARSs基因变异致腓骨肌萎缩症主要引起伴或不伴感觉受累的遗传性运动神经病,主要临床分型为CMT2型及ICMT型,不同ARSs基因变异致腓骨肌萎缩症患者存在不同临床表现,应进行基因检测以明确诊断。本研究扩大了腓骨肌萎缩症的遗传谱,为疾病诊断和遗传咨询提供了依据。 展开更多
关键词 夏科-马里-图斯病 氨酰基tRNA合成酶类 基因 突变 表型 系谱
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定点突变改造谷胱甘肽合成相关酶及高效催化生产谷胱甘肽
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作者 张秀春 王骏之 +1 位作者 徐华栋 沈美华 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第6期91-96,共6页
谷胱甘肽(glutathione,GSH)是一种含有γ-酰胺键和巯基的三肽化合物,广泛应用于医药、食品和化妆品等领域。谷胱甘肽的生物合成主要由γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-glutamylcysteine synthetase,GSHA)和谷胱甘肽合成酶(glutathione synth... 谷胱甘肽(glutathione,GSH)是一种含有γ-酰胺键和巯基的三肽化合物,广泛应用于医药、食品和化妆品等领域。谷胱甘肽的生物合成主要由γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-glutamylcysteine synthetase,GSHA)和谷胱甘肽合成酶(glutathione synthetase,GSHB)两步催化得到。在利用天然酶催化生产谷胱甘肽的过程中,发现天然酶的催化效果较差,其中GSHA为反应过程中的限速酶,该酶会受到产物的反馈抑制。该文对来自大肠杆菌(Escherichia coli)的GSHA进行分子改造,对GSHA中参与转化的活性位点进行分析,通过丙氨酸扫描对关键氨基酸进行替换。对蛋白质表面非活性区域的氨基酸进行分析,引入带负电荷的氨基酸提高稳定性。将酶活力提升的突变位点进行组合,获得了催化效果较高的突变体Y131A-A511D,相比于野生型酶活力提高了6倍,并对最佳突变体的酶学性质进行分析。将突变体Y131A-A511D用于催化合成谷胱甘肽,在8 h内合成了76.8 mmol/L的谷胱甘肽,达到了高效催化生产谷胱甘肽的目的。 展开更多
关键词 谷胱甘肽 γ-谷氨酸半胱氨酸连接酶 定点突变 丙氨酸扫描 酶催化
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Bacillamide A生物合成中末端缩合功能域的功能表征
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作者 耿彤彤 王贵阳 +5 位作者 葛元洁 刘谈 马学洋 张中义 杨东辉 马明 《中国抗生素杂志》 北大核心 2025年第5期523-529,共7页
目的 对bacillamide A生物合成中末端缩合功能域C_(3)进行纯化并验证其催化功能。方法 采用酶切连接的方法,从产生bcaillamide A的芽孢杆菌Bacillus sp. PKU-TA00001中克隆和表达末端缩合功能域C_(3),并通过镍离子柱亲和层析纯化C_(3),... 目的 对bacillamide A生物合成中末端缩合功能域C_(3)进行纯化并验证其催化功能。方法 采用酶切连接的方法,从产生bcaillamide A的芽孢杆菌Bacillus sp. PKU-TA00001中克隆和表达末端缩合功能域C_(3),并通过镍离子柱亲和层析纯化C_(3),通过化学合成其底物类似物开展体外催化反应。结果 从芽孢杆菌Bacillus sp. PKU-TA00001提取分离出bacillamide A,并对其生物合成通路中的C_(3)蛋白进行表达纯化,通过体外催化确证了其能够催化色胺与非核糖体肽合成酶连接中间体之间的反应释放产物。结论 首次用实验的方法表征了bacillamide A生物合成中末端缩合功能域C_(3)的功能,确证了其在生物合成途径中发挥的重要作用,扩展了对非核糖体肽生物合成中末端缩合功能域功能的认识。 展开更多
关键词 Bacillamide 生物合成 非核糖体肽合成酶 缩合功能域C 催化功能
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基于单细胞测序技术揭示2'-5'-寡腺苷酸合成酶2在胰腺导管腺癌肿瘤相关巨噬细胞中的作用
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作者 汪子欣 杨玉洁 +1 位作者 王越 赵云鹏 《海军军医大学学报》 北大核心 2025年第5期567-576,共10页
目的 基于早期和晚期胰腺导管腺癌(PDAC)患者肿瘤组织巨噬细胞相关的差异基因,探索PDAC肿瘤免疫微环境的特征,为PDAC提供早诊早治新靶点。方法 收集3例早期与4例晚期PDAC患者肿瘤组织样本,利用单细胞测序技术分析组织转录组数据,结合癌... 目的 基于早期和晚期胰腺导管腺癌(PDAC)患者肿瘤组织巨噬细胞相关的差异基因,探索PDAC肿瘤免疫微环境的特征,为PDAC提供早诊早治新靶点。方法 收集3例早期与4例晚期PDAC患者肿瘤组织样本,利用单细胞测序技术分析组织转录组数据,结合癌症基因组图谱(TCGA)数据库,获取与预后有关的早期与晚期PDAC差异表达的巨噬细胞相关基因,采用最小绝对收缩和选择算子(LASSO)-Cox回归方法构建预后风险评分模型。利用基因表达谱交互分析2(GEPIA2)在线生存分析工具筛选出与PDAC预后相关的风险基因,使用通过估计RNA转录本相对子集进行细胞类型鉴定(CIBERSORT)方法对其免疫浸润情况进行分析,通过t-分布随机近邻嵌入(tSNE)聚类降维和Monocle包对其在不同时期不同亚群巨噬细胞中的表达情况进行解析,并进一步借助STRING数据库及人类蛋白质图谱(HPA)数据库对其蛋白质-蛋白质相互作用和免疫组织化学染色图片进行分析。结果 共发现48个早期与晚期PDAC差异表达的巨噬细胞相关基因与预后有关。筛选出11个差异表达的巨噬细胞基因作为PDAC预后基因,并利用这11个基因构建PDAC预后风险评分模型。筛选出2个不良预后基因,其中2'-5'-寡腺苷酸合成酶2(OAS2)基因主要在分泌型磷蛋白1(SPP1)阳性巨噬细胞中表达,人类异常纺锤体样小头畸形相关蛋白(ASPM)基因主要在增殖标志物Ki-67(MKI67)阳性巨噬细胞中表达,并且OAS2在不同时期PDAC巨噬细胞中的表达具有明显差异。免疫浸润研究表明OAS2和ASPM在调节性T细胞、M2型巨噬细胞中高表达(均P<0.05)。蛋白质-蛋白质相互作用网络显示了OAS2和ASPM间的表达关系以及更多其他共表达的蛋白。免疫组织化学分析表明OAS2在肿瘤组织中的表达水平高于正常组织。结论 OAS2和ASPM均为不良预后基因,分别在SPP1阳性巨噬细胞和MKI67阳性巨噬细胞中特异性表达并发挥负性免疫调节作用,进而促进PDAC的进展并导致不良预后,这有望为PDAC的防治提供新的靶点。 展开更多
关键词 胰腺导管腺癌 巨噬细胞 预后 肿瘤微环境 单细胞测序 拟时序分析 2'-5'-寡腺苷酸合成酶2
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鱼类水解蛋白肽对铜胁迫后大口黑鲈抗氧化能力及脂肪合成酶活性的影响
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作者 吴迪 范泽 +2 位作者 李晋南 刘红柏 王连生 《水产学杂志》 2025年第4期31-38,共8页
为探讨鱼水解蛋白肽(HFP)缓解铜胁迫对大口黑鲈(Micropterus salmoides)抗氧化能力及脂肪合成酶活性的影响,在水温(24.0±1.0)℃下,将体质量(9.51±0.01)g的大口黑鲈饲养在0.6 m×0.6 m×0.8 m的循环水养殖缸内,投喂以... 为探讨鱼水解蛋白肽(HFP)缓解铜胁迫对大口黑鲈(Micropterus salmoides)抗氧化能力及脂肪合成酶活性的影响,在水温(24.0±1.0)℃下,将体质量(9.51±0.01)g的大口黑鲈饲养在0.6 m×0.6 m×0.8 m的循环水养殖缸内,投喂以鱼粉、鸡肉粉、豆粕、大豆浓缩蛋白和棉籽蛋白为蛋白源,以鱼油和豆油为脂肪源配制的基础饲料,分别添加0 g/kg(CK)、10 g/kg(HFP1)、30 g/kg(HFP3)和50 g/kg HFP(HFP5)。饲养56 d后,在水中投放0.25 mg/L Cu(纯度99%的硫酸铜配制)14 d,关闭循环水系统。铜胁迫结束时测定大口黑鲈肠道、胃和幽门盲囊的抗氧化酶、脂肪合成酶和ATP酶活性。结果表明,与CK组相比,添加不同水平HFP组大口黑鲈肠道的总抗氧化能力(T-AOC)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力和丙二醛(MDA)含量显著降低(P<0.05);HFP3组和HFP5组大口黑鲈胃CAT活力和MDA含量显著降低(P<0.05);添加不同水平HFP显著降低大口黑鲈幽门盲囊T-AOC和CAT活性(P<0.05)。添加不同水平HFP显著降低大口黑鲈肠道苹果酸酶(ME)和6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PGD)活性(P<0.05),HFP5组大口黑鲈肠道脂肪酸合成酶(FAS)和葡萄糖6-磷酸脱氢酶(G6PD)活性显著低于CK组(P<0.05);添加不同水平HFP显著降低大口黑鲈胃ME和G6PD活性(P<0.05),HFP3组和HFP5组大口黑鲈胃FAS和6PGD活性显著低于CK组(P<0.05);HFP5组大口黑鲈幽门盲囊FAS和G6PD活性显著低于CK组(P<0.05);HFP1组、HFP3组和HFP5组大口黑鲈肠道、胃和幽门盲囊脂肪酶(LPS)活性显著升高(P<0.05);HFP3组和HFP5组大口黑鲈胃和幽门盲囊ATP酶水平显著高于CK组(P<0.05)。综上所述,HFP可通过提高铜胁迫后大口黑鲈肠道、胃和幽门盲囊的抗氧化酶能力,改善脂肪合成相关酶活性和ATP酶水平,减轻大口黑鲈抗氧化应激损伤,促进大口黑鲈在铜胁迫下内环境稳态的恢复。 展开更多
关键词 鱼类水解蛋白肽 大口黑鲈 抗氧化能力 脂肪合成酶
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紫花苜蓿LACS基因家族成员鉴定及表达分析
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作者 罗天蓉 马健芝 +3 位作者 杜明阳 多杰措 熊辉岩 段瑞君 《草业学报》 北大核心 2025年第4期124-136,共13页
长链脂酰辅酶A合成酶(LACS)基因家族是包含在酰基激活酶超家族中的一类,在脂肪酸合成代谢中具有重要的作用。基于紫花苜蓿基因组数据,采用生物信息学方法对紫花苜蓿LACS基因家族成员进行鉴定,构建系统发育树,进行理化性质、染色体定位... 长链脂酰辅酶A合成酶(LACS)基因家族是包含在酰基激活酶超家族中的一类,在脂肪酸合成代谢中具有重要的作用。基于紫花苜蓿基因组数据,采用生物信息学方法对紫花苜蓿LACS基因家族成员进行鉴定,构建系统发育树,进行理化性质、染色体定位、保守基序和基因结构、顺式作用原件及组织特异性表达分析,然后构建蛋白互作网络分析,通过qRT-PCR试验进行非生物胁迫表达分析。结果表明:在紫花苜蓿基因组中共鉴定得到10个MsLACS家族成员,分别位于5条染色体上;通过构建系统发育树,将MsLACS分为5支;保守基序分析发现12个不同的保守基序,Motif3构成了AMP保守结构域,MsLACS基因均含10~12个基序不等;基因结构分析发现,MsLACS基因结构大有不同,MsLACS基因的外显子数量为11~22个,所含内含子数量为0~3个不等,MsLACS1-1和MsLACS3不含内含子;MsLACS基因的启动子区域中主要有光反应元件、激素反应元件和非生物胁迫反应元件等;MsLACS基因在不同组织中表达不同,且具有明显的组织特异性;非生物胁迫表达分析表明:紫花苜蓿MsLACS基因对于干旱胁迫和盐胁迫响应水平整体较高,对冷胁迫响应水平偏低,表达量整体呈先升高后降低的起伏型,在叶片组织中偏高,根组织中较低;干旱和盐胁迫下,MsLACS基因在叶片中均高表达,胁迫时间段为6 h时,表达量水平整体达到最高;紫花苜蓿10个MsLACS基因共同互作,各蛋白与其他蛋白互作连线分别有18条,相互间有较强互作。研究结果可为探究紫花苜蓿中LACS基因表达以及胁迫育种提供一定研究基础。 展开更多
关键词 紫花苜蓿 长链脂酰辅酶A合成酶(LACS) 基因家族 非生物胁迫 表达
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SUMO特异性蛋白酶1在铁死亡中的潜在作用
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作者 谢滨 白蒙 +3 位作者 吴妍 沃璐璐 黄莺 张晶 《上海交通大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第1期11-19,共9页
目的:探究SUMO特异性蛋白酶1(SUMO-specific peptidase 1,SENP1)在铁死亡中的潜在作用。方法:通过肿瘤基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库分析SENP1基因与铁死亡相关基因酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(acyl-CoA synthetase... 目的:探究SUMO特异性蛋白酶1(SUMO-specific peptidase 1,SENP1)在铁死亡中的潜在作用。方法:通过肿瘤基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库分析SENP1基因与铁死亡相关基因酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(acyl-CoA synthetase long chain family member 4,ACSL4)和谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)表达的相关性。使用铁死亡诱导剂RSL3(RAS-selective lethal 3)诱导人纤维素瘤细胞HT1080、鼠纤维素瘤细胞MCA-205和人胚胎肾细胞293T发生铁死亡,通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,RT-qPCR)和Western blotting检测SENP1的表达。在293T细胞中通过免疫沉淀-质谱联用技术检测SENP1在铁死亡过程中的相互作用蛋白。在293T细胞中瞬转Flag-SENP1过表达质粒,并通过RT-qPCR和Western blotting实验检测SENP1的过表达效率以及铁死亡相关基因ACSL4和GPX4的表达水平。结果:TCGA数据库分析结果显示,在绝大多数的肿瘤组织中,SENP1和ACSL4的表达呈正相关,与GPX4的表达呈负相关。RT-qPCR和Western blotting结果显示,RSL3处理HT1080、MCA-205和293T细胞一段时间后,SENP1的表达水平均发生明显下调。免疫沉淀-质谱联用技术鉴定结果显示,SENP1在细胞铁死亡过程中富集SUMO分子。Western blotting结果显示,SENP1过表达后ACSL4蛋白水平上升,GPX4蛋白水平无明显变化;RT-qPCR结果显示,SENP1过表达后,ACSL4和GPX4 mRNA水平均无明显变化。结论:SENP1基因表达在铁死亡过程中发生下调,并可能参与调控铁死亡相关蛋白ACSL4的稳定性。 展开更多
关键词 铁死亡 SUMO特异性蛋白酶1 酰基辅酶A合成酶长链家族成员4 谷胱甘肽过氧化物酶4 小分子泛素相关修饰物蛋白
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糖基化神经酰胺相关代谢酶与动脉粥样硬化
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作者 谭欣 魏强 +1 位作者 廖园红 陆景坤 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第6期1005-1010,共6页
动脉粥样硬化是一种涉及脂质代谢异常和炎症反应的动脉病变,是许多心脑血管疾病的始动因素。糖基化神经酰胺是指神经酰胺分子上附加了糖基化基团的衍生物,其不仅影响细胞膜的结构完整性,还调控细胞凋亡、炎症及脂质代谢,糖基化神经酰胺... 动脉粥样硬化是一种涉及脂质代谢异常和炎症反应的动脉病变,是许多心脑血管疾病的始动因素。糖基化神经酰胺是指神经酰胺分子上附加了糖基化基团的衍生物,其不仅影响细胞膜的结构完整性,还调控细胞凋亡、炎症及脂质代谢,糖基化神经酰胺代谢紊乱与动脉粥样硬化发生、发展密切相关。该文主要探讨了糖基化神经酰胺相关的代谢酶——葡萄糖神经酰胺合成酶、葡萄糖脑苷酶、乳糖神经酰胺合成酶、半乳糖苷酶等在动脉粥样硬化中的具体功能,以及其对动脉粥样硬化发展的影响。同时,该文综述了这些代谢酶的靶向治疗策略、相关药物开发及在动脉粥样硬化防治中的重大潜力。 展开更多
关键词 糖基化神经酰胺 动脉粥样硬化 葡萄糖神经酰胺合成酶 葡萄糖脑苷酶 乳糖神经酰胺合成酶 半乳糖苷酶
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玉米籽粒淀粉生物合成及调控因素研究进展
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作者 王涛 胡社伟 +3 位作者 张宇 邓文文 尚春缘 王婉艺 《生物技术通报》 北大核心 2025年第3期1-13,共13页
玉米作为一种在全球范围内广泛栽培的作物,不仅是人类饮食结构中不可或缺的粮食来源,而且在饲料产业及清洁能源领域同样发挥着重要作用。其籽粒中富含的淀粉,构成了玉米生物量的主体,直接决定了玉米的产量水平,是农业生产和食品加工中... 玉米作为一种在全球范围内广泛栽培的作物,不仅是人类饮食结构中不可或缺的粮食来源,而且在饲料产业及清洁能源领域同样发挥着重要作用。其籽粒中富含的淀粉,构成了玉米生物量的主体,直接决定了玉米的产量水平,是农业生产和食品加工中不可或缺的原料。然而,随着全球人口的不断增长、城市化进程的加速推进,以及气候变化带来的农业用地减少和自然灾害频发,全球粮食供应体系正面临着前所未有的挑战。玉米作为世界重要农作物之一,通过解析其淀粉生物合成途径培育高产优良品种变得十分重要。本文总结了参与玉米淀粉生物合成途径的关键酶及转运蛋白,并探讨这些因子在淀粉合成过程中的具体作用。同时,对合成途径中关键酶的突变体籽粒表型进行综述,分析基因突变对淀粉产量与品质的影响。此外,本文还总结了调控淀粉生物合成的各种因素,探讨如何通过优化这些因素来提高玉米的产量与品质。最后,本文展望了未来的研究方向,旨在为优质高产玉米的分子设计育种提供坚实的理论基础与实践指导。 展开更多
关键词 玉米 胚乳 淀粉 淀粉合成酶 调控因素
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榴莲蔗糖磷酸合酶基因的全基因组鉴定与表达分析
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作者 周丽容 郑雪文 +5 位作者 任小玉 冯学杰 陈迪 何小龙 梁清志 杨转英 《热带作物学报》 北大核心 2025年第5期1064-1075,共12页
蔗糖磷酸合酶(sucrosephosphatesynthase,SPS)在蔗糖合成过程中起重要作用,研究榴莲SPS家族的生物学功能有助于提升榴莲果实品质。本研究在榴莲基因组中查找出10个榴莲SPS成员,分别命名为DzSPS1~DzSPS10,通过研究表明,其平均疏水系数小... 蔗糖磷酸合酶(sucrosephosphatesynthase,SPS)在蔗糖合成过程中起重要作用,研究榴莲SPS家族的生物学功能有助于提升榴莲果实品质。本研究在榴莲基因组中查找出10个榴莲SPS成员,分别命名为DzSPS1~DzSPS10,通过研究表明,其平均疏水系数小于0,等电点在5.70~6.68之间,推测为亲水酸性蛋白,亚细胞定位预测显示其主要集中在细胞膜和细胞核上。基因家族保守基序分析发现每个SPSmotif的数量和分布有差异,但均含有motif3,可见motif3是榴莲SPS基因家族重要的保守结构域。基因结构分析发现,榴莲SPS结构相似,含有8~15个外显子,7~13个内含子。系统发育树显示,榴莲SPS家族可分为2个亚族,亚类Ⅱ数量多达9个,亚类Ⅰ有1个,与可可树、柑橘等园艺果树的SPS相比,榴莲SPS与拟南芥SPS、水稻SPS亲缘关系更近。榴莲SPS中有7个成员空间结构相似度较高,二级结构多为α-螺旋和无规则卷曲。顺式作用元件分析表明,榴莲SPS可能较易受光、低温、干旱、赤霉素等响应元件的诱导表达。检测到榴莲果实中可溶性糖的主要成分为蔗糖、果糖和葡萄糖,蔗糖含量显著高于果糖和葡萄糖,且不同品种间存在显著差异。荧光定量分析发现,不同品种榴莲的SPS表达水平存在显著差异,其中DzSPS3和DzSPS7在不同品种中的表达规律与总糖含量的变化一致,推测DzSPS3和DzSPS7可能是糖分积累的关键成员。本研究通过分析榴莲SPS结构和理化性质,探究不同品种榴莲SPS的积累特点,为进一步探究SPS家族在榴莲中的生物学功能提供参考。 展开更多
关键词 榴莲 蔗糖磷酸合酶(SPS) 生物信息学 基因表达
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五指毛桃不同部位补骨脂素合成酶基因的表达及其代谢产物含量 被引量:3
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作者 杨琳 杨帆 +3 位作者 张杭颖 黄勃诚 邱清华 张君诚 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2024年第4期674-681,共8页
为探究五指毛桃(Ficus hirta Vahl)不同部位补骨脂素合成酶基因(psoralen synthetase,PS)表达与补骨脂素含量的关系,本研究分别采用实时荧光定量PCR法和高效液相色谱法测定来自广西和福建的五指毛桃根、茎、叶和果实PS基因的表达量及补... 为探究五指毛桃(Ficus hirta Vahl)不同部位补骨脂素合成酶基因(psoralen synthetase,PS)表达与补骨脂素含量的关系,本研究分别采用实时荧光定量PCR法和高效液相色谱法测定来自广西和福建的五指毛桃根、茎、叶和果实PS基因的表达量及补骨脂素含量,分析不同五指毛桃种质不同部位PS基因表达及其代谢产物含量的差异。结果显示:PS基因在广西和福建五指毛桃的根、茎、叶和果实中均有表达,且其表达量具有组织特异性,在根中的相对表达量最高(侧根高于主根),叶中次之(全缘叶高于缺刻叶),茎和果实的表达量极低。使用高效液相色谱测得广西和福建的五指毛桃中补骨脂素含量存在差异,在2个五指毛桃种质的主根、侧根、缺刻叶、全缘叶、茎、果实中均有积累,侧根中的含量最高,分别为3.206、2.947 mg/g,主根次之(2.136、0.419 mg/g),缺刻叶中的含量分别为0.022、0.028 mg/g,全缘叶中的含量分别为0.069、0.035 mg/g,茎(0.003、0.003 mg/g)和果实(0.002、0.001 mg/g)中含量较低。五指毛桃PS基因表达与补骨脂素含量具有相关性,该研究结果为解析PS基因在五指毛桃补骨脂素合成中的作用提供参考。 展开更多
关键词 五指毛桃 补骨脂素 补骨脂素合成酶 基因表达 工艺优化 含量
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香兰素下调cGAS/STING信号通路改善肝内胆汁淤积大鼠肝组织损伤 被引量:2
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作者 姜宁 蒲兰香 +4 位作者 黄峰 王艳 裴鑫 宋均亚 张恩胜 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1695-1700,共6页
目的探讨香兰素调节环鸟苷酸腺苷酸合成酶(cyclic guanylate adenylate synthetase,cGAS)/干扰素基因刺激因子(stimulator of interferon gene,STING)信号通路对肝内胆汁淤积(intrahepatic cholestasis,IC)大鼠肝组织损伤的影响。方法... 目的探讨香兰素调节环鸟苷酸腺苷酸合成酶(cyclic guanylate adenylate synthetase,cGAS)/干扰素基因刺激因子(stimulator of interferon gene,STING)信号通路对肝内胆汁淤积(intrahepatic cholestasis,IC)大鼠肝组织损伤的影响。方法将SD大鼠随机分为正常组、IC组、香兰素组、cGAS过表达组、香兰素+cGAS过表达组,连续给药7 d。测定大鼠体质量、肝质量和肝质量/体质量比值;酶联免疫吸附法测定肝功能指标(ALT、AST、ALP、LDH),IC指标(TBIL、TBA),肝纤维化指标(HA、LN、PCⅢ);HE、Masson染色分别观察肝脏病理学、纤维沉积变化,并计算胶原容积分数;蛋白印迹法检测肝组织cGAS/STING通路相关蛋白表达。结果香兰素可改善IC大鼠肝脏病理、纤维化,升高体质量,降低肝脏质量、ALT、AST、ALP、LDH、TBIL、TBA、HA、LN、PCⅢ、胶原容积分数、cGAS、STING蛋白(P<0.05);cGAS过表达可逆转香兰素对IC大鼠上述指标的影响(P<0.05)。结论香兰素可能通过下调cGAS/STING信号通路,改善IC大鼠肝功能、IC、肝纤维化和肝组织损伤。 展开更多
关键词 香兰素 环鸟苷酸腺苷酸合成酶 干扰素基因刺激因子 肝内胆汁淤积 肝损伤 肝纤维化
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短短芽胞杆菌分支酸合成酶基因BbaroC的鉴定及转录因子调控分析
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作者 车建美 赖恭梯 +6 位作者 许恒 贺丽媛 李思雨 陈冰星 王阶平 刘波 赖呈纯 《福建农业科技》 CAS 2024年第1期8-17,共10页
分支酸合成酶AroC是莽草酸途径中芳香族化合物合成的关键酶,探明短短芽胞杆菌aroC基因的特征及转录调控因子可为短短芽胞杆菌作用机理研究奠定基础。从短短芽胞杆菌FJAT-0809-GLX中克隆了aroC基因,进行生物信息学分析和转录因子预测。... 分支酸合成酶AroC是莽草酸途径中芳香族化合物合成的关键酶,探明短短芽胞杆菌aroC基因的特征及转录调控因子可为短短芽胞杆菌作用机理研究奠定基础。从短短芽胞杆菌FJAT-0809-GLX中克隆了aroC基因,进行生物信息学分析和转录因子预测。短短芽胞杆菌FJAT-0809-GLX中aroC基因序列长度为1 164 bp, GenBank登录号为OR475562。短短芽胞杆菌FJAT-0809-GLX与Brevibacillus brevis NBRC 100599的aroC基因序列同源性最高,为98.88%,与Brevibacillus brevis HNCS-1的AroC氨基酸序列同源性最高,为100%;其编码的蛋白为亲水性蛋白,无信号肽,定位于细胞质。靶向BbaroC的转录因子共有23个,分别来自10个物种,Escherichia coli(Strain K12 MG1655)和Bacillus subtilis(Strain 168)分别预测到12个和3个转录因子。BbaroC在短短芽胞杆菌抑菌活性物质产生中可能发挥着重要作用,这为其在农业上的广泛应用提供依据。 展开更多
关键词 短短芽胞杆菌 分支酸合成酶 氨基酸 莽草酸途径 转录因子
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不同砧木对赤霞珠葡萄果实糖酸代谢的影响
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作者 牛锐敏 沈甜 +2 位作者 黄小晶 许泽华 徐美隆 《宁夏农林科技》 2024年第8期42-48,53,共8页
以4种砧木嫁接的赤霞珠葡萄苗木及其自根苗为材料,研究砧木在赤霞珠果实发育过程中对糖酸积累及相关代谢酶活性的影响。结果表明,成熟葡萄果实中的糖分以葡萄糖和果糖为主,以蔗糖为辅,有机酸以酒石酸和苹果酸为主。3309C和SO4显著降低... 以4种砧木嫁接的赤霞珠葡萄苗木及其自根苗为材料,研究砧木在赤霞珠果实发育过程中对糖酸积累及相关代谢酶活性的影响。结果表明,成熟葡萄果实中的糖分以葡萄糖和果糖为主,以蔗糖为辅,有机酸以酒石酸和苹果酸为主。3309C和SO4显著降低果实中葡萄糖、果糖质量分数,提高蔗糖质量分数。3309C显著提高果实中酒石酸和苹果酸质量分数;SO4显著提高果实中酒石酸、苹果酸质量分数,降低柠檬酸质量分数;1103P显著提高果实中苹果酸质量分数;5BB显著降低果实中柠檬酸质量分数。从浆果膨大期到成熟期,可溶性酸性转化酶(S-AI)、中性转化酶(NI)、蔗糖磷酸合成酶(SPS)、蔗糖合成酶分解方向(SS-I)的活性均呈先上升后下降的趋势;苹果酸脱氢酶(NAD-MDH)、磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)的活性呈波动下降的趋势,苹果酸酶(NADP-ME)、柠檬酸合成酶(CS)的活性呈先增长后下降趋势。SO4降低S-AI、SS-c、NADP-ME、CS活性,提高SPS、NAD-MDH、PEPC活性;3309C降低S-AI、SS-c、NADP-ME活性,提高SPS、NAD-MDH、PEPC活性;5BB提高果实发育后期S-AI活性;1103P降低SPS和NADP-ME活性,提高NAD-MDH和CS活性。4种砧木通过影响S-AI、SS-c、SPS、NAD-MDH、PEPC、NADP-ME在果实不同发育阶段的酶活性调控果实糖酸积累和分解。 展开更多
关键词 酿酒葡萄 砧木 有机酸 转化酶 合成酶
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左旋精氨酸和氯化胆碱改善Aβ1-42诱导的痴呆大鼠学习记忆能力
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作者 刘丽霞 王浩玉 祁文秀 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期327-333,共7页
目的:探讨中枢神经元型一氧化氮合酶(nNOS)和α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR)在大鼠前额叶皮质和海马的表达变化以及对Aβ诱导的痴呆大鼠行为学的影响。方法:40只成年雄性SD大鼠均经侧脑室注射凝集态Aβ1-42制备痴呆模型,药物处理组分... 目的:探讨中枢神经元型一氧化氮合酶(nNOS)和α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR)在大鼠前额叶皮质和海马的表达变化以及对Aβ诱导的痴呆大鼠行为学的影响。方法:40只成年雄性SD大鼠均经侧脑室注射凝集态Aβ1-42制备痴呆模型,药物处理组分别注射一氧化氮(NO)前体左旋精氨酸(L-Arg)和(或)α7nAChR激动剂氯化胆碱(CC)。通过Y迷宫实验检测大鼠的空间学习和记忆功能,用免疫组织化学染色、Western Blot检测大鼠前额叶皮质和海马nNOS或α7nAChR的表达。结果:Aβ+L-Arg组或Aβ+CC组与Aβ+NS组比较,大鼠学习和记忆达标次数均减少(P<0.05或P<0.01),同时前额叶皮质和海马nNOS和α7nAChR表达均增加(P<0.05或P<0.01);与Aβ+L-Arg组或Aβ+CC组比较,联合用药的Aβ+L-Arg+CC组大鼠前额叶皮质和海马nNOS和α7nAChR表达水平均升高(P<0.05或P<0.01),同时学习和记忆达标次数均减少(P<0.05或P<0.01)。结论:侧脑室联合注入L-Arg和CC可明显提高二者在单独应用时对痴呆大鼠nNOS和α7nAChR表达的上调作用及认知功能障碍的改善效果。推测,中枢nNOS与烟碱系统的协同作用更有利于提高痴呆大鼠的认知功能。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 神经元型一氧化氮合酶 Α7烟碱型乙酰胆碱受体 Y-迷宫 学习和记忆 大鼠
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