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实时荧光定量PCR定量方法研究进展 被引量:17
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作者 廉红霞 高腾云 +2 位作者 傅彤 孙宇 李改英 《江西农业学报》 CAS 2010年第10期128-129,132,共3页
实时荧光定量PCR以其特异性强、灵敏度高、重复性好、定量准确、速度快、全封闭反应等优点而成为了分子生物学研究中的重要工具,综述了实时荧光定量PCR技术及其定量方法的研究进展,并展望了其应用前景。
关键词 实时荧光定量 PCR技术 定量方法 研究进展 polymerase chain Reaction quantitative real-time Method of 分子生物学研究 应用前景 特异性强 灵敏度高 封闭反应 重复性 速度 工具
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受体酪氨酸激酶EphA1 mRNA在膀胱癌中的表达及临床意义 被引量:1
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作者 杨国良 蔡霞 +7 位作者 薄隽杰 张连华 侯恺林 蒋海锋 朱寅杰 张超 刘东明 黄翼然 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期760-763,共4页
背景与目的:EphA1基因是受体酪氨酸激酶家族的成员之一,其过表达可能在恶性肿瘤的发生、发展中起重要的作用。本研究旨在探讨受体酪氨酸激酶EphA1 mRNA在膀胱癌中的表达及其临床意义。方法:采用实时荧光定量PCR法检测50例膀胱癌组织和1... 背景与目的:EphA1基因是受体酪氨酸激酶家族的成员之一,其过表达可能在恶性肿瘤的发生、发展中起重要的作用。本研究旨在探讨受体酪氨酸激酶EphA1 mRNA在膀胱癌中的表达及其临床意义。方法:采用实时荧光定量PCR法检测50例膀胱癌组织和15例相应癌旁组织中EphA1 mRNA的表达,分析基因表达的差异与临床病理特征间的关系。结果:EphA1 mRNA在膀胱癌中的表达量为106.86±30.40,高于癌旁组织的表达量10.37±2.69,差异有显著性统计学意义(P<0.001);EphA1 mRNA在高级别膀胱癌中的表达量为210.94±50.51,高于低级别膀胱癌组的52.64±16.01(P<0.001),肌层浸润性膀胱癌EphA1 mRNA的表达量为174.69±43.57,显著高于非肌层浸润性膀胱癌的63.14±17.60(P=0.001)。EphA1 mRNA的表达与性别、年龄、肿瘤大小、数目无显著相关性(P>0.05)。结论:EphA1 mRNA的表达在肿瘤组织中明显高于正常组织,且与病理分级、临床分期呈正相关,因此EphA1基因的过表达可能促进膀胱癌的进展。 展开更多
关键词 膀胱癌 EphA1 实时荧光定量逆转录聚合酶连反应
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外参照PCR及其产物酶联杂交定量检测HBV DNA
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作者 缪晓辉 戚中田 孔宪涛 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期120-123,共4页
目的 :建立一种敏感、特异和精确的乙型肝炎病毒 (HBV )基因 PCR及其产物的酶联杂交定量分析技术。方法 :(1)常规 PCR法扩增 HBV DNA质粒和血清 HBV DNA,引物 (SP1 ,SP2 )为一对 HBV DNA S区基因特异引物 ,扩增片段长 319bp,SP2 的 5′... 目的 :建立一种敏感、特异和精确的乙型肝炎病毒 (HBV )基因 PCR及其产物的酶联杂交定量分析技术。方法 :(1)常规 PCR法扩增 HBV DNA质粒和血清 HBV DNA,引物 (SP1 ,SP2 )为一对 HBV DNA S区基因特异引物 ,扩增片段长 319bp,SP2 的 5′端用生物素修饰。扩增条件经过严格优化组合 ,以最大限度减少非特异片段 ,包括引物二聚体的产生。设定 5个不同梯度的 HBV DNA外参照管 ,制作标准曲线。 (2 )酶联杂交分析 :PCR产物经 10 0℃解链并稀释后 ,与捕获探针 (长 2 0 nt,3′端用氨基修饰 ,借氨基与 DNA- BINDTM反应板结合 )杂交 ;用亲和素 -碱性磷酸酶及相应显色系统检测杂交信号。结果 :目的片段含量较低的 PCR产物 ,在琼脂糖凝胶电泳时未见光带 ,但可被后续的酶联杂交检出 ,故灵敏度可超过普通 PCR定性法。 结论 :本定量方法操作相对简单 ,结果数据化 ,不受主观因素干扰 ,灵敏度很高 ,而且省时、省材。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 乙型肝炎 HBV DNA
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