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基于模拟婴儿胃肠消化的骆驼初乳和常乳中蛋白质和脂肪消化特性的比较分析 被引量:1
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作者 吴秋菊 何静 +2 位作者 明亮 伊丽 吉日木图 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第4期154-161,共8页
该研究采用婴儿体外消化模型,对驼初乳与常乳中的蛋白质、脂质和微观结构的消化特征进行了比较分析,旨在揭示两者消化行为上的差异。结果表明,在胃消化30 min和肠消化30 min后,驼初乳和常乳的蛋白浓度急剧下降,水解度存在显著差异。驼... 该研究采用婴儿体外消化模型,对驼初乳与常乳中的蛋白质、脂质和微观结构的消化特征进行了比较分析,旨在揭示两者消化行为上的差异。结果表明,在胃消化30 min和肠消化30 min后,驼初乳和常乳的蛋白浓度急剧下降,水解度存在显著差异。驼初乳中含有对婴儿免疫系统有益的蛋白质,水解后释放更多必需氨基酸,有利于婴儿生长发育。两者脂质在胃消化后脂解程度差异不大,进入肠消化后迅速脂解,消化结束时存在显著差异。驼初乳脂解产物中甘油三酯、甘油二酯和单甘酯较多,而常乳产生更多游离脂肪酸,其中C16:0、C16:1和C14:0含量较高,对婴儿细胞结构和生长发育,以及神经系统和脑部发育至关重要。上述研究结果表明,驼初乳和常乳中的蛋白质和脂肪可以被婴儿很好地消化,产生的游离氨基酸和游离脂肪酸有利于婴儿的生长发育,为今后驼初乳和常乳基婴儿配方乳粉的开发提供了参考。 展开更多
关键词 体外消化 驼初乳 驼常乳 蛋白质 脂质
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Ghrelin对牛卵母细胞体外成熟和体外受精的影响
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作者 李阔 王子馨 +6 位作者 赵高平 鲁静 孙伟 李云霞 李喜和 曹贵方 张传强 《动物医学进展》 北大核心 2025年第3期64-69,共6页
研究不同浓度生长激素释放肽(growth hormone releasing peptide,GHRL)对牛卵母细胞体外成熟和发育的影响。应用免疫荧光染色法检测GHRL及生长激素促分泌素受体(growth hormone secretagogue receptor,GHSR)在牛卵和卵丘细胞中的定位,添... 研究不同浓度生长激素释放肽(growth hormone releasing peptide,GHRL)对牛卵母细胞体外成熟和发育的影响。应用免疫荧光染色法检测GHRL及生长激素促分泌素受体(growth hormone secretagogue receptor,GHSR)在牛卵和卵丘细胞中的定位,添加0、10、50、100 ng/mL的GHRL对牛卵母细胞进行体外成熟24 h后,检测卵丘细胞扩散程度;GDF 9、BMP 15 mRNA的相对表达量;统计卵母细胞成熟及胚胎发育情况。结果表明,牛卵胞质区有GHRL的表达,且GHSR主要定位于细胞膜上。与对照组相比,添加GHRL 50 ng/mL组卵丘细胞扩散程度显著增加(P<0.05),GHRL 100 ng/mL组显著减少(P<0.01);添加50 ng/mL组的极体排出率显著提高(P<0.05),且BMP 15和GDF 9 mRNA的相对表达量均显著高于对照组(P<0.01);体外成熟16 h时,添加50 ng/mL组极体排出率显著高于对照组(P<0.01),体外受精后,GHRL 50 ng/mL组卵裂率相比对照组无显著差异(P>0.05);添加GHRL 50 ng/mL体外成熟24 h和16 h受精后的卵裂率无显著差异(P>0.05),但24 h囊胚率(63.24%)显著高于16 h(P<0.05)。在试验条件下,添加50 ng/mL可促进卵母细胞的成熟,但抑制了囊胚的形成。研究结果可为牛卵母细胞体外成熟、体外受精的应用提供理论依据。 展开更多
关键词 生长激素释放肽 牛卵母细胞 体外成熟 体外受精
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FSH+LH添加方式、半胱氨酸、EGF对猪IVM卵母细胞早期孤雌发育的影响 被引量:4
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作者 许惠艳 苏克同 +3 位作者 何若钢 梁世忠 卢晟盛 卢克焕 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2010年第3期885-889,共5页
为探讨IVM液中FSH+LH添加方式、半胱氨酸和表皮生长因子(EGF)不同浓度对猪IVM卵母细胞早期孤雌发育的影响,将在不同成熟体系中IVM44 h后的卵母细胞经化学激活后放入NCSU-23中培养,分别于第2、7天统计分裂率和囊胚发育率。结果表明:①IV... 为探讨IVM液中FSH+LH添加方式、半胱氨酸和表皮生长因子(EGF)不同浓度对猪IVM卵母细胞早期孤雌发育的影响,将在不同成熟体系中IVM44 h后的卵母细胞经化学激活后放入NCSU-23中培养,分别于第2、7天统计分裂率和囊胚发育率。结果表明:①IVM液添加有FSH+LH且在培养22 h后更换添加有FSH+LH的IVM液继续培养22 h,其分裂率(83.76±9.95)%和囊胚发育率(23.49±7.74)%显著高于添加FSH+LH连续培养44 h、中间不换液的处理(P<0.05);②IVM液中添加1.2 mmol/L半胱氨酸的囊胚发育率(28.13±10.9)%显著高于添加0、0.3、0.6 mmol/L半胱氨酸的处理,差异显著(P<0.05);③IVM液中添加10 ng/mL EGF的囊胚发育率(23.49±7.74)%显著高于其他浓度处理(P<0.05)。可见:在该研究条件下,IVM液添加有FSH+LH且在培养22 h后更换添加有FSH+LH的IVM液继续培养22 h,并添加1.2 mmol/L半胱氨酸、10 ng/mL EGF,有利于促进猪IVM卵母细胞早期孤雌发育。 展开更多
关键词 卵母细胞 体外成熟 FSH+LH添加方式 半胱氨酸 表皮生长因子(EGF)
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FLI通过增加糖代谢途径促进牛卵母细胞体外成熟
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作者 韩僖彤 张楠 +1 位作者 张宁 张家新 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第6期2778-2789,共12页
为了明确FGF2、LIF和IGF1(FLI)改善牛卵母细胞体外成熟的作用机制。本研究使用屠宰场收集的卵巢,将从卵巢中抽取的卵丘卵母细胞复合体(COCs)随机分为对照组和FLI组,进行体外成熟,每组30枚COCs,每个试验重复3次。体外成熟24 h后检测第一... 为了明确FGF2、LIF和IGF1(FLI)改善牛卵母细胞体外成熟的作用机制。本研究使用屠宰场收集的卵巢,将从卵巢中抽取的卵丘卵母细胞复合体(COCs)随机分为对照组和FLI组,进行体外成熟,每组30枚COCs,每个试验重复3次。体外成熟24 h后检测第一极体排出率、卵丘扩展情况、线粒体膜电位、皮质颗粒分布、培养基中葡萄糖消耗量和丙酮酸含量、卵母细胞氧化还原态、TZPs数量、活性氧含量、相关基因的表达;并统计后续胚胎发育的卵裂率、囊胚率和囊胚细胞数。结果表明,FLI组卵丘扩展指数显著高于对照组(分别为3.16±0.04和2.43±0.02,P<0.001)。与对照组相比,FLI组卵母细胞的卵丘扩展相关基因表达升高(P<0.05),皮质颗粒向卵周迁移增多(P<0.05),但是卵母细胞第一极体排出率、线粒体膜电位没有显著变化(P>0.05)。与对照组相比,FLI组的培养基中葡萄糖的消耗、丙酮酸的含量显著增加(P<0.05),卵母细胞内NADPH显著增加(P<0.001),并且糖代谢相关基因的表达显著上升(P<0.05)。添加FLI可以显著降低卵母细胞内氧化还原水平、FAD++和ROS水平(P<0.05)。IVM 8 h时,FLI组TZPs数量显著高于对照组(分别为106±6.91和78±8.76,P<0.001)。体外受精后,FLI组卵裂率和囊胚率显著高于对照组(分别为(86.49±0.80)%、(37.44±0.42)%和(74.08±0.91)%、(27.34±1.08)%,P<0.05)。结果显示,FLI通过增加糖代谢提高了卵母细胞体外成熟质量和胚胎发育。 展开更多
关键词 卵母细胞体外成熟 FLI 糖代谢
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牛体外胚胎生产技术研发与应用进展
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作者 冷璇 陈思颍 +3 位作者 李伉 安忍 王栋 庞云渭 《中国畜禽种业》 2025年第4期36-47,3,共13页
基于活体采卵、体外受精和胚胎移植的体外胚胎生产技术,通过挖掘良种母畜的卵子资源,借助大量受体母畜快速扩繁,可上百倍提升母牛繁殖效率,是牛良种培育的新赛道。经过几十年的发展,体外胚胎生产技术体系不断优化,并已取得积极进展。然... 基于活体采卵、体外受精和胚胎移植的体外胚胎生产技术,通过挖掘良种母畜的卵子资源,借助大量受体母畜快速扩繁,可上百倍提升母牛繁殖效率,是牛良种培育的新赛道。经过几十年的发展,体外胚胎生产技术体系不断优化,并已取得积极进展。然而,该技术是一个高度集成的技术体系,涉及活体采卵、体外成熟、体外受精、体外培养等多个步骤,目前仍存在采卵效率不稳定、回收卵母细胞质量不均一和体外受精胚胎发育能力差等问题。该文综述了牛体外胚胎生产技术的产生背景、研发历程、应用现状及未来发展方向,旨在为完善牛体外胚胎生产技术体系,加快推动该技术的产业化应用提供参考。 展开更多
关键词 体外胚胎生产 体外受精 体外成熟 活体采卵 体外培养
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短程运输温度对牛卵母细胞体外胚胎生产的影响
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作者 韩修远 张利军 +6 位作者 丁红波 姜宏星 王洪亮 张震 陈保君 李伟 韩志强 《黑龙江动物繁殖》 2025年第2期35-39,共5页
少于6 h的短程运输是牛卵巢采集后体外胚胎生产(IVP)的核心环节,温度选择将直接影响卵母细胞发育。试验在4~6 h短程运输条件下,对比15℃与37℃温度条件对卵母细胞成熟及胚胎发育的影响。结果表明:37℃组卵母细胞成熟率与囊胚形成率显著... 少于6 h的短程运输是牛卵巢采集后体外胚胎生产(IVP)的核心环节,温度选择将直接影响卵母细胞发育。试验在4~6 h短程运输条件下,对比15℃与37℃温度条件对卵母细胞成熟及胚胎发育的影响。结果表明:37℃组卵母细胞成熟率与囊胚形成率显著高于15℃组(P<0.05),复温后37℃组HSP70表达量更高,且复温4 h后37℃组卵母细胞的丙二醛(MDA)浓度显著低于15℃组(P<0.05)。说明短程运输中37℃与15℃相比更有利于维持生理代谢与结构完整性,能够显著提升卵母细胞质量,推荐作为标准化操作温度。 展开更多
关键词 体外胚胎生产 运输 温度 卵巢 卵母细胞成熟率 囊胚
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烟酸通过SIRT3/SOD2通路改善老龄小鼠体外成熟的卵母细胞质量
7
作者 郭爽 倪曼 +4 位作者 程丽 严正杰 高莉 宁松 刘嘉茵 《南京医科大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第8期1101-1109,1177,共10页
目的:探究体外成熟(in vitro maturation,IVM)培养液中添加烟酸(niacin,NA)能否改善老龄小鼠卵母细胞质量及其机制。方法:以8周龄C57BL/6J小鼠为年轻对照组,40周龄小鼠为老龄组,取生发泡(germinal vesicle,GV)期卵母细胞,分别添加100、... 目的:探究体外成熟(in vitro maturation,IVM)培养液中添加烟酸(niacin,NA)能否改善老龄小鼠卵母细胞质量及其机制。方法:以8周龄C57BL/6J小鼠为年轻对照组,40周龄小鼠为老龄组,取生发泡(germinal vesicle,GV)期卵母细胞,分别添加100、200、300μmol/L NA,观察二细胞和囊胚形成率以确定最适作用浓度。通过第一极体排出(first polar body extrusion,PBE)率、皮质颗粒(cortical granule,CG)分布、纺锤体形态和染色体排列异常比例评估卵母细胞质量。采用免疫荧光分析线粒体膜电位和三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)生成水平来评估线粒体功能;通过检测卵母细胞内和线粒体内活性氧(re⁃active oxygen species,ROS)水平评估氧化应激水平。采用Western blot检测氧化应激相关蛋白:沉默信息调节因子相关酶3(si⁃lent information regulator 3,SIRT3)、超氧化物歧化酶2(superoxide dismutase 2,SOD2)、乙酰化超氧化物歧化酶2(acetylated su⁃peroxide dismutase 2,Ac⁃SOD2)。结果:IVM培养液中NA浓度200μmol/L时囊胚形成率最高(P<0.05),因此选择该浓度为最适作用浓度。NA可改善老龄小鼠卵母细胞PBE率和CG分布,降低异常纺锤体率和染色体排列异常率,提高线粒体膜电位,提高ATP生成水平,降低卵母细胞和线粒体内ROS水平(P均<0.05)。Western blot结果显示添加NA培养后SIRT3和SOD2蛋白表达显著增加(P均<0.05),而Ac⁃SOD2蛋白表达显著下降(P<0.05)。结论:IVM培养液中添加200μmol/L NA可通过改善线粒体氧化应激水平以改善老龄小鼠卵母细胞质量,且可能通过SIRT3⁃SOD2信号通路发挥作用。 展开更多
关键词 烟酸 卵母细胞 体外成熟 老龄 氧化应激
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不同FBS及BSA产品对牛体外胚胎发育的影响
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作者 李婧轩 王兆琛 +4 位作者 曹志棋 吕晴霁 张桢妮 安磊 席广银 《黑龙江动物繁殖》 2025年第3期8-12,共5页
试验旨在比较不同来源胎牛血清(FBS)及牛血清白蛋白(BSA)产品对牛体外胚胎发育效率的影响。选取2种品牌的FBS和3个货号的BSA产品,采用体外成熟、体外受精、胚胎培养方法,测定了卵母细胞成熟液和后期胚胎发育液中添加不同FBS及BSA产品后... 试验旨在比较不同来源胎牛血清(FBS)及牛血清白蛋白(BSA)产品对牛体外胚胎发育效率的影响。选取2种品牌的FBS和3个货号的BSA产品,采用体外成熟、体外受精、胚胎培养方法,测定了卵母细胞成熟液和后期胚胎发育液中添加不同FBS及BSA产品后的胚胎卵裂率和囊胚率。结果表明:在后期胚胎发育液(受精48 h后)中使用BSA-A7030的囊胚率显著高于BSA-A3311(P<0.05);在后期胚胎发育液中使用FBS-ExCell的囊胚率、孵化率显著高于FBS-VISTECH(P<0.05),囊胚形态明显优于FBS-VISTECH和BSA-A7030联合添加;在卵母细胞成熟液中使用BSA-A8806和FBS-ExCell的囊胚率显著高于BSA-A7030(P<0.05),BSA-A8806和FBS-ExCell相比囊胚率差异不显著(P>0.05)。综上所述,在卵母细胞成熟液和后期胚胎发育液中使用FBS-ExCell有助于改善卵母细胞成熟和胚胎发育,在成熟液中使用BSA-A8806可以起到与FBS-ExCell相当的作用。 展开更多
关键词 体外胚胎生产 后期胚胎发育液 卵母细胞成熟液 胎牛血清(FBS) 牛血清白蛋白(BSA)
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FGF2、LIF和IGF-1细胞因子组合对绵羊体外胚胎发育的影响
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作者 宁煜婷 郝佳 +8 位作者 龚璐 范利宏 包梅荣 仇春娟 乌日嘎 程磊 田见晖 陈大勇 席广银 《中国畜禽种业》 2025年第7期46-53,共8页
该研究在绵羊卵母细胞体外成熟液中添加40 ng/mL成纤维生长因子2 (FGF2)、 20 ng/mL白血病抑制因子(LIF)和20 ng/mL类胰岛素生长因子1 (IGF-1)细胞因子组合(FLI),设置对照组(常规成熟液)与试验组(FLI添加组),体外成熟后进行统一体外受... 该研究在绵羊卵母细胞体外成熟液中添加40 ng/mL成纤维生长因子2 (FGF2)、 20 ng/mL白血病抑制因子(LIF)和20 ng/mL类胰岛素生长因子1 (IGF-1)细胞因子组合(FLI),设置对照组(常规成熟液)与试验组(FLI添加组),体外成熟后进行统一体外受精和胚胎培养,统计胚胎卵裂率和囊胚率,探究体外成熟液添加FLI对绵羊体外胚胎发育效率的作用。使用免疫荧光染色检测囊胚的H3K4me3水平,使用TUNEL染色检测囊胚细胞凋亡水平,使用荧光定量PCR检测多能性基因和凋亡基因表达水平,探究体外成熟液添加FLI对绵羊体外胚胎质量的影响。结果表明:FLI组卵裂率和囊胚率均高于对照组,但均无显著差异(P>0.05)。不同处理对囊胚的总细胞数、H3K4me3水平、凋亡细胞比率无显著影响(P>0.05)。然而,与对照组相比,FLI组囊胚中凋亡相关基因(P53、CASPASE3和BAX)表达水平显著降低(P<0.05),多能性基因OCT4表达显著升高(P<0.05)。可见,绵羊卵母细胞体外成熟液添加FLI虽不影响胚胎发育率,但可能对胚胎质量有提高作用。 展开更多
关键词 绵羊 卵母细胞 体外成熟 体外胚胎生产
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牛卵母细胞体外成熟研究进展
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作者 张依 王鸽 +2 位作者 郭济源 张逸松 刘光磊 《中国牛业科学》 2025年第1期93-96,共4页
牛体外胚胎生产程序包括卵母细胞体外成熟(in vitro maturation,IVM)、精子获能(sperm capacitation)、体外受精(in vitro fertilization,IVF)和体外培养(in vitro culture,IVC)。体外成熟卵母细胞的发育能力低于体内成熟卵母细胞,是目... 牛体外胚胎生产程序包括卵母细胞体外成熟(in vitro maturation,IVM)、精子获能(sperm capacitation)、体外受精(in vitro fertilization,IVF)和体外培养(in vitro culture,IVC)。体外成熟卵母细胞的发育能力低于体内成熟卵母细胞,是目前体外胚胎生产面临的难题之一。虽然体外成熟期似乎很难影响卵母细胞的质量,但基本成熟条件的改变会显著影响卵母细胞的发育能力,故卵母细胞体外成熟是体外胚胎生产的关键环节。目前大部分改善卵母细胞体外成熟的研究都是在培养液中添加激素、血清、牛卵泡液、生长因子或抗氧化剂等物质,以此促进卵母细胞的成熟度,使其更好地与精子结合,故文章就不同体外成熟条件对卵母细胞体外成熟后最终囊胚产量的影响研究进行了综述。 展开更多
关键词 牛卵母细胞 体外成熟 体外培养
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Proteomic-based identification of maternal proteins in mature mouse oocytes 被引量:8
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作者 Zhang, P. Ni, X.J. Guo, Y. Guo, X. J. Wang, Y. F. Zhou, Z. M. Huo, R. Sha, J. H. 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1513-1513,共1页
关键词 老鼠 卵母细胞 母体 蛋白质
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卵丘细胞对卵母细胞IVM及分子机制的研究进展
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作者 侯伟媛 赵红卫 《黄牛杂志》 2005年第3期46-48,52,共4页
卵母细胞的成熟是当前胚胎工程及相关动物生物技术的基础及重要环节,对体外受精、转基因、胚胎克隆以及相关生物技术的发展具有重要的意义,本文主要将卵母细胞体外成熟的分子机制、卵丘细胞对卵母细胞成熟影响因素、目前取得成果以及存... 卵母细胞的成熟是当前胚胎工程及相关动物生物技术的基础及重要环节,对体外受精、转基因、胚胎克隆以及相关生物技术的发展具有重要的意义,本文主要将卵母细胞体外成熟的分子机制、卵丘细胞对卵母细胞成熟影响因素、目前取得成果以及存在的问题等方面进行归纳总结,为进一步的研究提供理论依据。 展开更多
关键词 分子机制 卵丘细胞 研究进展 ivm 动物生物技术 卵母细胞成熟 重要环节 胚胎工程 体外受精 胚胎克隆 体外成熟 归纳总结 转基因 相关
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不同成熟度桑椹多糖在体外粪菌发酵中的代谢特性
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作者 过尘杰 陈健乐 +3 位作者 吴家雄 程焕 陈士国 叶兴乾 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2024年第10期156-161,共6页
[目的]研究不同成熟度桑椹多糖的体外酵解特性和肠道菌群调节作用。[方法]对桑椹青果、红果和紫果中的多糖进行体外粪菌发酵,测定体系的pH、短链脂肪酸和底物的变化情况,利用16S rDNA测序分析菌群结果。[结果]3种桑椹多糖均能被降解利用... [目的]研究不同成熟度桑椹多糖的体外酵解特性和肠道菌群调节作用。[方法]对桑椹青果、红果和紫果中的多糖进行体外粪菌发酵,测定体系的pH、短链脂肪酸和底物的变化情况,利用16S rDNA测序分析菌群结果。[结果]3种桑椹多糖均能被降解利用,并产生高含量的乙酸、丙酸和丁酸等代谢产物。而紫果和红果桑椹多糖的促短链脂肪酸生成能力强于青果。此外,它们还能选择性地调节肠道菌群,促进拟杆菌属(Bacteroides)、副拟杆菌属(Parabacteroides)、考拉杆菌属(Phascolarctobacterium)等的增殖,抑制梭杆菌属(Fusobacterium)等有害菌的生长。[结论]不同成熟度桑椹中的多糖均具有益生活性,可有效调节肠道菌群和产生有益代谢产物。其中,成熟度最高的紫果桑椹中的多糖效果最佳。 展开更多
关键词 桑椹 成熟度 多糖 体外发酵
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补充褪黑素的人卵母细胞体外培养成熟技术在COH周期中的应用 被引量:1
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作者 任宇 韩星星 +4 位作者 张琦琦 刘璐 许孝凤 章志国 邹慧娟 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第6期983-988,共6页
目的比较同一控制性超促排卵(COH)治疗周期中,体内成熟与改良技术体外培养成熟(IVM)的卵母细胞的早期胚胎发育能力及临床结局,探讨补充褪黑素的IVM技术在临床中的应用。方法收集159例患者在COH周期中的920个成熟卵母细胞进行常规体外受... 目的比较同一控制性超促排卵(COH)治疗周期中,体内成熟与改良技术体外培养成熟(IVM)的卵母细胞的早期胚胎发育能力及临床结局,探讨补充褪黑素的IVM技术在临床中的应用。方法收集159例患者在COH周期中的920个成熟卵母细胞进行常规体外受精(IVF/ICSI)处理,同时收集同周期中1283个未成熟卵母细胞,在添加褪黑素的改良IVM培养基中培养成熟后行ICSI处理。通过回顾性分析,比较常规助孕技术与改良IVM技术这两种方式,对辅助生殖治疗的助孕结局和妊娠结局的影响。结果与从COH周期中收集到的行常规IVF/ICSI处理的成熟卵母细胞相比,经改良IVM技术促成熟的卵母细胞的优质囊胚形成率较低。但经胚胎移植后,两种方式获得的成熟卵母细胞的临床结局包括临床妊娠率、足月产率、婴儿体长、新生儿Apgar评分,差异均无统计学意义。结论IVM可以提高从COH周期中回收的未成熟卵母细胞的卵子利用率,改善辅助生殖技术助孕患者的妊娠结局。 展开更多
关键词 卵母细胞 体外培养成熟技术 体外受精 控制性超促排卵 妊娠结局
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抗着丝点抗体阳性患者体外受精结局分析 被引量:1
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作者 田雨晴 周易尔 +6 位作者 范宇航 陈素峰 郭晓燕 俞亦奇 吴香丽 徐维海 舒静 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期342-350,共9页
目的:通过观察抗着丝点抗体(ACA)阳性患者体外受精-胚胎移植和自然试孕结局,探讨此类患者的生育策略。方法:采用病例对照研究回顾性分析2016年6月至2023年6月在浙江省人民医院接受体外受精-胚胎移植治疗且有抗核抗体(ANA)谱检查结果的3... 目的:通过观察抗着丝点抗体(ACA)阳性患者体外受精-胚胎移植和自然试孕结局,探讨此类患者的生育策略。方法:采用病例对照研究回顾性分析2016年6月至2023年6月在浙江省人民医院接受体外受精-胚胎移植治疗且有抗核抗体(ANA)谱检查结果的3955例患者的临床资料。根据ACA结果将所纳入患者分为ACA阳性组和ACA阴性组。采用倾向评分匹配方法对两组进行1∶3配对,分别比较两组体外受精的胚胎结局;并采用自身对照分析不同授精方法和是否应用免疫抑制剂对结局的影响;对ACA阳性患者体外受精失败后的自然试孕和疾病进展进行随访。结果:ACA阳性患者34例,占总病例数的0.86%,占ANA阳性体外受精患者数的2.51%。无论是接受常规体外受精(c-IVF)还是卵胞质内单精子注射(ICSI)的患者,ACA阳性组卵母细胞成熟度和受精情况均与ACA阴性组有明显差异(均P<0.01),且ACA阳性组授精后第三日(D3)次优胚数和D3优胚数均减少(均P<0.05)。5例ACA阳性患者自身ICSI周期相比c-IVF周期双原核(2PN)率未提高(P>0.05),D3优胚数和D3次优胚数减少(均P<0.05)。12例ACA阳性患者经过免疫抑制剂治疗1~2个月后再行c-IVF/ICSI,用药前后获卵和受精情况均未改变(均P>0.05),2PN胚胎卵裂率改善(P<0.05)。ACA阳性组与ACA阴性组移植胚胎数相近,但ACA阳性组胚胎着床率、临床妊娠率显著低于ACA阴性组(均P<0.05),流产率差异无统计学意义(P>0.05)。27例ACA阳性患者体外受精失败后尝试自然试孕或人工授精,共获临床妊娠7例。结论:血清ACA阳性会干扰卵母细胞的成熟和正常受精过程,使用ICSI和免疫抑制剂不能改善受精结局,但ACA阳性患者有可能获得自然妊娠。 展开更多
关键词 抗着丝点抗体 体外受精-胚胎移植 多原核受精 卵母细胞成熟度 胚胎发育结局 妊娠结局
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滩羊卵母细胞体外成熟和孤雌激活试验 被引量:2
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作者 杨文琳 许斌 +2 位作者 李冉 张秀陶 李生虎 《畜牧兽医杂志》 2024年第6期29-33,共5页
为建立滩羊卵母细胞体外成熟和孤雌激活培养体系,对离体卵巢来源的滩羊卵母细胞进行体外成熟培养,并用化学激活法进行孤雌激活。结果显示:滩羊离体卵巢平均得卵数为3.07枚,卵母细胞成熟率为54.78%,卵裂率为61.92%,囊胚率为17.72%,试验... 为建立滩羊卵母细胞体外成熟和孤雌激活培养体系,对离体卵巢来源的滩羊卵母细胞进行体外成熟培养,并用化学激活法进行孤雌激活。结果显示:滩羊离体卵巢平均得卵数为3.07枚,卵母细胞成熟率为54.78%,卵裂率为61.92%,囊胚率为17.72%,试验各重复之间差异不显著(P>0.05)。研究认为,本试验建立的培养体系较稳定,适合滩羊卵母细胞体外成熟培养,为体外受精胚和克隆胚生产奠定实验基础。 展开更多
关键词 滩羊 卵母细胞 体外成熟培养 产业发展
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青春初期女性行卵巢组织冷冻过程中发现成熟卵母细胞一例 被引量:1
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作者 张豪城 施丽冰 +1 位作者 王海潮 竺海燕 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期527-530,共4页
一例15岁霍奇金淋巴瘤患者行一个疗程化疗后来浙江大学医学院附属邵逸夫医院生殖中心进行生育力保存。在卵巢组织冷冻保存期间发现1枚MⅡ成熟卵母细胞和3枚生发泡期卵母细胞。3枚未成熟卵母细胞行体外成熟培养未获得成熟卵子,最终玻璃... 一例15岁霍奇金淋巴瘤患者行一个疗程化疗后来浙江大学医学院附属邵逸夫医院生殖中心进行生育力保存。在卵巢组织冷冻保存期间发现1枚MⅡ成熟卵母细胞和3枚生发泡期卵母细胞。3枚未成熟卵母细胞行体外成熟培养未获得成熟卵子,最终玻璃化冷冻1枚成熟卵母细胞和12片卵巢皮质。提示对于青春期性腺轴反馈已建立患者,卵巢组织冷冻不是唯一的生育力保存方式,可考虑促排卵取卵冻存卵母细胞,或根据月经周期判断处于排卵期者,在卵巢组织冷冻前尝试穿刺取卵获得自然周期成熟卵母细胞行卵母细胞冷冻,从而提高患者生育力保存概率。 展开更多
关键词 生育力保存 青春初期 卵巢 冷冻 卵子 体外成熟培养 病例报告
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克百威纳米抗体的结构解析与体外进化研究
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作者 刘飞 潘秋月 +6 位作者 梁一凡 李家冬 方如玉 杨金易 沈玉栋 徐振林 王弘 《农药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期901-910,共10页
克百威曾是一种广泛用于农业虫害防治领域的氨基甲酸酯类农药,由于其对哺乳动物具有高毒性,对人畜安全及环境造成较大威胁,因此各国陆续出台了克百威禁限用政策,但其在农产品中被检出超标的问题仍时有报道,故对其加强监测十分必要。纳... 克百威曾是一种广泛用于农业虫害防治领域的氨基甲酸酯类农药,由于其对哺乳动物具有高毒性,对人畜安全及环境造成较大威胁,因此各国陆续出台了克百威禁限用政策,但其在农产品中被检出超标的问题仍时有报道,故对其加强监测十分必要。纳米抗体是一种新型的基因工程片段抗体,具有高稳定性、结构简单和高表达量等优势。本研究通过体外亲和力成熟技术,对实验室已有的克百威纳米抗体Nb5进行改造,进一步提升其灵敏度。首先,基于AlphaFold系统,预测纳米抗体三维结构并验证模型合理性;以分子对接结合丙氨酸扫描技术,研究克百威与纳米抗体的识别机制,并验证关键结合位点。结果表明:克百威分子进入了由CDR2、CDR3及FR3区组成的活性口袋腔,纳米抗体通过氢键和疏水作用力识别克百威,所涉及的关键氨基酸分别为Arg56、Trp58、Thr101、Val102、Ala103、Asp104和Cys105。基于噬菌体展示技术,构建了克百威纳米抗体的定点饱和突变库,并筛选到一株突变体H10,其IC_(50)值为17.6 ng/mL,其灵敏度比野生型Nb5提升了1倍,亲和力常数为1.54×10^(6)L/mol。该研究结果为开发针对小分子药物的纳米抗体体外亲和力成熟技术提供了一种有效的新思路。 展开更多
关键词 克百威 纳米抗体 体外进化 亲和力成熟 分子识别机制
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哺乳动物小卵泡卵母细胞体外成熟的研究进展
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作者 李有为 程亚倬 +2 位作者 商继勇 张廷龙 孙铭菊 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期1171-1182,共12页
体外成熟是哺乳动物胚胎工程获得成熟卵母细胞的主要途径,卵母细胞质量直接影响早期胚胎发育,妊娠的建立及维持,胎儿的发育等。哺乳动物卵巢表面数量众多的小卵泡可以作为胚胎工程卵母细胞的来源,但从哺乳动物卵巢获取的卵母细胞成熟差... 体外成熟是哺乳动物胚胎工程获得成熟卵母细胞的主要途径,卵母细胞质量直接影响早期胚胎发育,妊娠的建立及维持,胎儿的发育等。哺乳动物卵巢表面数量众多的小卵泡可以作为胚胎工程卵母细胞的来源,但从哺乳动物卵巢获取的卵母细胞成熟差异较大,存在处于发育各个时期的卵母细胞,小卵泡卵母细胞体外成熟质量差,发育能力不足。如何提高小卵泡卵母细胞体外成熟的发育能力以充分挖掘优良母畜的遗传资源,提高胚胎工程效率成为研究热点。基于此,文章概述哺乳动物小卵泡卵母细胞体外成熟的研究进展,比较大、小卵泡卵母细胞物质积累差异、卵泡的卵泡液成分及含量差异以及卵泡颗粒细胞和卵丘细胞的差异,分析哺乳动物小卵泡卵母细胞体外成熟质量差的原因,分析总结提高哺乳动物小卵泡体外成熟卵母细胞发育能力的措施,包括抑制核成熟、成熟前培养、颗粒细胞及卵丘细胞与卵母细胞共培养,期望能够为小卵泡卵母细胞发育调控机制的研究及发育能力的提高提供理论指导。 展开更多
关键词 哺乳动物 小卵泡 卵母细胞 体外成熟
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核膜孔亚复合物Nup98/Rae1对小鼠卵母细胞体外减数分裂成熟的影响
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作者 罗安凤 华再东 +1 位作者 杨彩侠 陈矾 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1998-2006,共9页
【目的】探究核膜孔蛋白98(Nup98)和核糖核酸输出因子1(Rae1)对小鼠卵母细胞体外减数分裂成熟的影响。【方法】选择4周龄SPF级雌性昆明小鼠,分离小鼠卵母细胞并进行体外成熟培养,利用实时荧光定量PCR检测小鼠卵母细胞中Nup 98和Rae 1基... 【目的】探究核膜孔蛋白98(Nup98)和核糖核酸输出因子1(Rae1)对小鼠卵母细胞体外减数分裂成熟的影响。【方法】选择4周龄SPF级雌性昆明小鼠,分离小鼠卵母细胞并进行体外成熟培养,利用实时荧光定量PCR检测小鼠卵母细胞中Nup 98和Rae 1基因表达量;利用免疫荧光法检测Nup98和Rae1共定位情况;利用电转siRNA干扰技术敲低小鼠卵母细胞中Nup 98和Rae 1基因,通过实时荧光定量PCR检测干扰效率,并观察小鼠卵母细胞生发泡破裂(germinal vesicle breakdown,GVBD)和第一极体排出(first polar body extruction,PBE)情况;利用免疫荧光法检测敲低Nup 98和Rae 1基因后小鼠卵母细胞纺锤体组装和染色体排列情况;利用染色体爬片技术检测染色体非整倍体率。【结果】Nup 98和Rae 1基因在小鼠卵母细胞中均有表达。在小鼠卵母细胞生发泡(germinal vesicle,GV)时期,Nup98和Rae1共定位于核膜边缘;在减数分裂过程中,Nup98和Rae1聚集于染色体动粒上。siRNA干扰试验结果显示,与对照组相比,单独敲低Nup 98和Rae 1基因后,对另一基因表达无显著影响(P<0.05);双敲Nup 98和Rae 1基因后,对卵母细胞减数分裂恢复率无显著影响(P>0.05),小鼠卵母细胞发育9.5 h时的PBE率极显著升高(P<0.01),染色体分离比率和非整倍体率极显著或显著增加(P<0.01;P<0.05)。【结论】Nup 98和Rae 1基因在小鼠卵母细胞减数分裂中参与染色体分离,影响非整倍体的发生,从而影响受精胚胎的发育潜力。 展开更多
关键词 小鼠卵母细胞 Nup98 Rae1 体外成熟 减数分裂
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