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基于细胞代谢组学的低分子量岩藻聚糖硫酸酯对铅诱导HepG2细胞氧化损伤的保护作用
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作者 于凡 李娜 +5 位作者 郭莹莹 代心悦 朱文嘉 姚琳 江艳华 王联珠 《食品工业科技》 北大核心 2025年第15期392-402,共11页
目的:研究低分子量岩藻聚糖硫酸酯对铅诱导HepG2细胞氧化损伤的保护作用及代谢调控机制。方法:以低分子量岩藻聚糖硫酸酯F1(F1)为受试物,构建铅诱导及F1干预的体外HepG2细胞模型,采用CCK-8法检测细胞存活率,生物化学法检测细胞内活性氧(... 目的:研究低分子量岩藻聚糖硫酸酯对铅诱导HepG2细胞氧化损伤的保护作用及代谢调控机制。方法:以低分子量岩藻聚糖硫酸酯F1(F1)为受试物,构建铅诱导及F1干预的体外HepG2细胞模型,采用CCK-8法检测细胞存活率,生物化学法检测细胞内活性氧(ROS)水平、谷胱甘肽(GSH)含量、丙二醛(MDA)含量及抗氧化酶活力,采用AnnexinV-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡情况。选取保护作用最优的高浓度组F1对铅诱导HepG2细胞进行干预,利用超高效液相色谱串联质谱法(UHPLC-MS/MS)检测细胞内源性代谢物水平,筛选潜在差异代谢物并分析相关代谢通路。结果:与铅模型组相比,F1干预处理能够显著缓解铅诱导的细胞存活率降低(P<0.05),显著抑制细胞内ROS和MDA含量升高(P<0.05),恢复GSH含量及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和过氧化氢酶(CAT)的酶活力(P<0.05),同时减少细胞凋亡(P<0.05)。代谢组学结果显示,F1能显著回调谷氨酸、谷胱甘肽、硒代-L-蛋氨酸等17种潜在差异代谢物(P<0.01);对F1调控的关键代谢物进行富集分析表明,F1主要影响D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,硒化合物代谢和精氨酸生物合成等多个涉及氧化还原等功能的代谢通路。结论:低分子量岩藻聚糖硫酸酯F1对铅诱导的HepG2细胞氧化损伤具有保护作用,其机制可能与调节氨基酸代谢和谷胱甘肽合成等代谢途径有关。 展开更多
关键词 低分子量岩藻聚糖硫酸酯 hepg2 细胞 氧化应激 代谢调控
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马铃薯StAS2-15基因的克隆及盐胁迫下功能分析
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作者 宋慧洋 苏宝杰 +4 位作者 李京昊 梅超 宋倩娜 崔福柱 冯瑞云 《生物技术通报》 北大核心 2025年第5期119-128,共10页
【目的】ASYMMETRICLEAVES2(AS2)基因家族是植物特有的转录家族,在植物生长发育和胁迫响应中发挥重要作用。研究AS2转录因子在马铃薯响应逆境胁迫特别是盐胁迫中的功能与机制,为培育抗盐马铃薯新品种提供理论和技术支撑。【方法】通过... 【目的】ASYMMETRICLEAVES2(AS2)基因家族是植物特有的转录家族,在植物生长发育和胁迫响应中发挥重要作用。研究AS2转录因子在马铃薯响应逆境胁迫特别是盐胁迫中的功能与机制,为培育抗盐马铃薯新品种提供理论和技术支撑。【方法】通过克隆野生型马铃薯品种底西芮(DES)叶片中的StAS2-15基因,并通过同源重组方法构建StAS2-15过表达载体,转化DES得到阳性植株,进行抗盐农艺性状分析及生理生化实验。【结果】盐胁迫表型实验表明,随着盐浓度的增加,过表达植株(OEs)和野生型(DES)的株高、鲜重、根数和根长显著降低,其中株高分别降低了2.42%-43.21%和28.77%-58.49%;同一盐浓度下,OEs的株高、鲜重、根数和根长较DES显著增加。不同盐浓度处理下,过表达StAS2-15基因阳性植株叶片中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性和脯氨酸含量显著高于野生型,丙二醛(MDA)含量显著低于野生型。RT-qPCR结果显示,盐胁迫下马铃薯相关胁迫响应基因ABI3、MYB2、SnRK2s等在过表达植株中的表达量显著高于野生型。【结论】StAS2-15基因的过表达使马铃薯体内一些抗氧化酶活性、渗透调节物质含量和其他盐胁迫响应基因的表达水平发生改变,且盐胁迫下植株生长状态呈现脱敏感表型,影响了马铃薯的生长发育。 展开更多
关键词 马铃薯 StAS2-15 愈伤组织转化体系 盐胁迫 RT-QPCR
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欧李原花青素通过PI3K-Akt-GSK-3β信号通路改善HepG2细胞胰岛素抵抗
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作者 刘欣慧 赵悦 +5 位作者 褚天旭 邹蓉 高哲 赵文 刘严聪 孙亚赛 《食品工业科技》 北大核心 2025年第8期382-390,共9页
目的:基于网络药理学推测欧李原花青素(Cerasus humilis Proanthocyanidin,CPC)调控肝胰岛素抵抗(Insulin Resistance,IR)的潜在靶点和信号通路,运用人肝HepG2细胞构建胰岛素抵抗(IR-HepG2)模型验证并讨论。方法:首先通过TCMSP、Swiss T... 目的:基于网络药理学推测欧李原花青素(Cerasus humilis Proanthocyanidin,CPC)调控肝胰岛素抵抗(Insulin Resistance,IR)的潜在靶点和信号通路,运用人肝HepG2细胞构建胰岛素抵抗(IR-HepG2)模型验证并讨论。方法:首先通过TCMSP、Swiss Target Prediction等数据库筛选CPC靶点,OMIM、GeneCards等数据库获取IR关键控制点,借助Venny平台获取交集;其次用Cytoscape、STRING和生信平台对交集靶点进行拓扑分析、基因本体(Gene Ontology,GO)功能注释和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析;最后胰岛素诱导HepG2细胞建立IR-HepG2模型,考察CPC干预后细胞葡萄糖消耗量和摄取量、糖原合成以及糖酵解相关酶的活性,用抑制剂从蛋白水平确证CPC具体调控信号通路。结果:网络药理学分析筛选出AKT1、GSK-3β等66个关键靶点。主要富集在调节激酶活性、蛋白质磷酸化等GO条目,PI3K-Akt等KEGG信号通路。细胞实验结果显示,高剂量CPC(High Dosage CPC,H-CPC)增加36.02%细胞葡萄糖消耗量、22.03%葡萄糖摄取量和27.99%糖原含量,提高18.89%糖酵解酶己糖激酶(Hexokinase,HK)和26.89%丙酮酸激酶(Pyruvate Kinase,PK)活性并降低8.77%糖异生酶葡萄糖-6-磷酸酶(Glucose-6-Phosphatase,G6Pase)含量,上调p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt和p-GSK-3β/GSK-3β蛋白表达(87.60%、64.14%和68.31%)。此外,PI3K抑制剂LY294002显著削弱CPC通过PI3K-Akt-GSK-3β调控HepG2细胞的葡萄糖消耗(29.09%)和糖原合成(6.07%)。结论:本研究证实CPC主要通过PI3K-Akt-GSK-3β信号通路改善肝脏IR,调节糖代谢紊乱,为欧李高值化产品开发提供理论基础。 展开更多
关键词 欧李原花青素 胰岛素抵抗 网络药理学 hepg2细胞 PI3K-Akt-GSK-3β信号通路
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miR-224-5p对人肝癌细胞HepG2增殖、凋亡、侵袭及迁移的作用机制
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作者 顾铃毓 王利新 +1 位作者 崔洁 董辉 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第6期1022-1029,共8页
目的 探讨miR-224-5p对人肝癌细胞HepG2细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的作用机制。方法 从TCGA数据集获取肝细胞癌患者中miR-224-5p和早期生长反应因子2(EGR2)的RNA表达水平;体外培养人正常肝细胞LO2和肝癌细胞HepG2细胞,并在HepG2细胞中... 目的 探讨miR-224-5p对人肝癌细胞HepG2细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的作用机制。方法 从TCGA数据集获取肝细胞癌患者中miR-224-5p和早期生长反应因子2(EGR2)的RNA表达水平;体外培养人正常肝细胞LO2和肝癌细胞HepG2细胞,并在HepG2细胞中转染慢病毒载体(敲低miR-224-5p)、小干扰RNA片段或过表达载体(干扰及过表达EGR2)。实时荧光定量PCR实验(qPCR)检测肝癌cDNA芯片及细胞中miR-224-5p及EGR2的RNA表达水平;Western blot检测细胞中EGR2蛋白表达水平;双荧光素酶报告基因实验检测miR-224-5p与EGR2结合情况;EdU实验检测HepG2细胞阳性率,流式细胞术检测细胞凋亡率,Transwell实验检测细胞侵袭数,划痕实验检测细胞迁移率。结果 与癌旁组织相比,HCC组织中miR-224-5p表达升高,EGR2 mRNA水平表达下降;与LO2组细胞相比,HepG2细胞中miR-224-5p表达升高,EGR2 mRNA及蛋白表达下降;与Lv-sh-NC组相比,Lv-sh-miR-224-5p组HepG2细胞24 h EdU阳性细胞率、细胞侵袭数及48 h细胞迁移率降低,细胞凋亡率增加;与Oe-NC组相比,Oe-EGR2组HepG2细胞24 h EdU阳性细胞率、细胞侵袭数及48 h细胞迁移率降低,细胞凋亡率增加;与Lv-sh-NC组相比,Lv-sh-miR-224-5p组EGR2蛋白水平表达升高;与Lv-sh-miR-224-5p+si-NC组相比,Lv-sh-miR-224-5p+si-EGR2组HepG2细胞24 h EdU阳性细胞率、细胞侵袭数及48 h细胞迁移率升高,细胞凋亡率下降。结论 miR-224-5p通过与EGR2结合从而促进HepG2细胞增殖、侵袭和迁移,抑制细胞凋亡。 展开更多
关键词 miR-224-5p hepg2 增殖 凋亡 侵袭及迁移 早期生长反应因子2
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环氧二十碳三烯酸通过调节PI3K/AKT信号通路改善HepG2细胞胰岛素抵抗
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作者 金君健 斯日古楞 +4 位作者 李子怡 牛雅如 于雯 贺星川 么宏强 《动物医学进展》 北大核心 2025年第8期71-75,共5页
旨在探讨环氧二十碳三烯酸(EETs)是否可改善由HepG2细胞模拟的小鼠2型糖尿病模型中的胰岛素抵抗。用HepG2细胞建立胰岛素抵抗(IR)模型,用CCK-8法测定细胞活力,用葡萄糖氧化酶法测定细胞上清液中葡萄糖消耗量,通过Western blot检测PI3K/... 旨在探讨环氧二十碳三烯酸(EETs)是否可改善由HepG2细胞模拟的小鼠2型糖尿病模型中的胰岛素抵抗。用HepG2细胞建立胰岛素抵抗(IR)模型,用CCK-8法测定细胞活力,用葡萄糖氧化酶法测定细胞上清液中葡萄糖消耗量,通过Western blot检测PI3K/AKT及其磷酸化蛋白表达。结果表明,当胰岛素浓度为0.1μmol/L时,HepG2细胞的葡萄糖消耗量最低,产生的胰岛素抵抗程度最高;EETs、TPPU干预后,IR-HepG2细胞的葡萄糖消耗量均有所提升,表明可以有效改善IR-HepG2细胞的胰岛素抵抗程度;测定发现IR-HepG2细胞中的p-PIK/PI3K和p-AKT/AKT比值显著降低,而EETs组和TPPU组的PIK/PI3K和p-AKT/AKT比值显著上升,表明EETs能够通过激活PI3K/AKT信号通路改善胰岛素抵抗。 展开更多
关键词 环氧二十碳三烯酸(EETs) hepg2细胞 胰岛素抵抗 磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K) 蛋白激酶B(AKT)
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食叶草酵素对HepG2细胞酒精性损伤的保护作用及机制 被引量:1
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作者 李宪秀 何涛 +4 位作者 毛旸晨 毛建卫 赖晓金 邵逸怀 沙如意 《食品科学》 北大核心 2025年第14期179-186,共8页
本实验通过建立HepG2细胞酒精性损伤模型,测定食叶草酵素预处理后细胞存活率、乙醇脱氢酶(alcohol dehydrogenase,ADH)活力、乳酸脱氢酶(lactatedehydrogenase,LDH)活力、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量和超氧化物歧化酶(superoxide d... 本实验通过建立HepG2细胞酒精性损伤模型,测定食叶草酵素预处理后细胞存活率、乙醇脱氢酶(alcohol dehydrogenase,ADH)活力、乳酸脱氢酶(lactatedehydrogenase,LDH)活力、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力,探究食叶草酵素对HepG2细胞酒精性损伤的保护作用;通过气相色谱-质谱技术分析乙醇和食叶草酵素对HepG2细胞代谢产物的影响,鉴定差异代谢物及相关的代谢途径,从细胞代谢组学的角度探究食叶草酵素对HepG2细胞酒精性损伤的保护机制。结果表明,与模型组相比,食叶草酵素能够显著提高细胞的ADH和SOD活力,降低细胞的LDH泄漏率和MDA含量,抑制酒精性损伤造成的细胞死亡;细胞代谢组学共鉴定出11种胞内差异代谢物和16种胞外差异代谢物,其中关键胞内代谢物为L-丙氨酸、L-缬氨酸、L-正亮氨酸、L-脯氨酸、甘氨酸和L-苏氨酸,关键胞外代谢物为琥珀酸、阿拉伯糖醇、D-吡喃半乳糖、硬脂酸和单硬脂酸甘油酯;食叶草酵素通过调节细胞的氨基酸代谢和能量代谢等对HepG2细胞酒精性损伤发挥保护作用。本研究结果可为食叶草酵素在护肝功能性食品中的应用提供理论依据。 展开更多
关键词 食叶草 酵素 hepg2细胞 酒精性损伤 代谢产物
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CO_(2)和N_(2)混合气氛中GCr15轴承钢的氧化行为
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作者 杜严伟 张学湛 +2 位作者 王波 张守意 左小伟 《材料工程》 北大核心 2025年第8期101-109,共9页
为了探索GCr15轴承钢在25%CO_(2)+75%N_(2)(体积分数)混合气氛下的氧化生长机制,采用模拟气氛和非连续称重的方法,研究了GCr15轴承钢的氧化动力学。采用光学显微镜、扫描电镜和X射线衍射仪观察分析了腐蚀产物的形貌和相组成,并通过热力... 为了探索GCr15轴承钢在25%CO_(2)+75%N_(2)(体积分数)混合气氛下的氧化生长机制,采用模拟气氛和非连续称重的方法,研究了GCr15轴承钢的氧化动力学。采用光学显微镜、扫描电镜和X射线衍射仪观察分析了腐蚀产物的形貌和相组成,并通过热力学计算混合气氛及实验温度下主要反应的吉布斯自由能△G。结果表明:氧化增重随保温时间延长和加热温度升高而增加,符合抛物线规律;1150、1175、1200℃下的氧化速率常数KT分别为1.24、1.53、2.17 mg^(2)·mm^(−4)·min^(−1),混合气氛下GCr15轴承钢的氧化激活能为194.97 kJ/mol。氧化层厚度和致密度随保温时间的延长和加热温度的升高而增加。轴承钢氧化层外层中O和Fe在致密层更为富集,氧化产物主要由FeO和Fe3O4组成;氧化层内层Si、Cr、C 3种元素更为富集,氧化产物主要由FeO组成。氧化铁皮外层的铁氧化物颗粒呈金字塔状,颗粒之间具有一些细小的孔隙可供气体流通。反应物的扩散速率影响氧化行为,后期氧化速率降低的原因是:(1)氧化皮隔绝外部反应气氛与基体;(2)氧化皮中疏松层多孔结构减少基体中Fe向氧化层扩散;(3)氧化产物中硅酸盐熔融堵塞孔隙减少氧化层中反应气氛流通。 展开更多
关键词 CO_(2)-N_(2)混合气氛 GCR15轴承钢 氧化 加热温度 保温时间
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皮蛋模拟胃肠道消化物对HepG2细胞迁移和侵袭的影响机制
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作者 张研 朱进 +4 位作者 朱悦 王晶 赵怡欣 何立超 靳国锋 《食品科学技术学报》 北大核心 2025年第4期105-114,共10页
肿瘤细胞的迁移和侵袭是肿瘤扩散的重要过程。为了探究摄食皮蛋对HepG2细胞迁移和侵袭的影响机制,利用细胞划痕实验和Transwell细胞侵袭实验研究皮蛋模拟胃肠道消化物(preserved eggs simulated gastrointestinal digests,PESD)对HepG2... 肿瘤细胞的迁移和侵袭是肿瘤扩散的重要过程。为了探究摄食皮蛋对HepG2细胞迁移和侵袭的影响机制,利用细胞划痕实验和Transwell细胞侵袭实验研究皮蛋模拟胃肠道消化物(preserved eggs simulated gastrointestinal digests,PESD)对HepG2细胞迁移和侵袭的影响规律;并通过Western blot法测定PESD对HepG2细胞中细胞迁移和侵袭相关因子的表达,采用实时荧光定量PCR法研究PESD对上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)过程的影响。结果表明,PESD是以时间-剂量依赖性的方式抑制HepG2细胞的迁移,在72 h时,4 mg/mL PESD实验组细胞迁移率仅为空白对照组的1/3;以剂量依赖性的方式抑制HepG2细胞的侵袭,PESD为4 mg/mL时,HepG2细胞穿过膜的细胞数仅为20.33±3.06个,与空白对照组相比具有显著性差异(P<0.001)。研究发现,摄食皮蛋对HepG2细胞迁移和侵袭的抑制作用机制是PESD通过降低β-catenin蛋白的表达,抑制Wnt/β-catenin信号通路,再通过增加HepG2细胞中E-cadherin基因表达,降低N-cadherin和Vimentin基因表达,抑制HepG2细胞中EMT的过程增加细胞间的黏附性和基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase)2和9的表达来减少细胞外基质和基底膜的降解,从而抑制HepG2细胞迁移和侵袭。希望研究可为探究皮蛋的健康功效帮助提供理论依据。 展开更多
关键词 皮蛋 hepg2细胞 细胞迁移 细胞侵袭 上皮-间充质转化过程
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党参炔苷对HepG2细胞胆固醇代谢的影响及机制研究
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作者 杨瑞玲 陈强 +4 位作者 熊桂斌 张小明 李杰 吴发明 孙成新 《世界科学技术-中医药现代化》 北大核心 2025年第1期154-160,共7页
目的探讨党参炔苷(Lobetyolin)干预HepG2细胞胆固醇代谢异常的作用机制。方法该研究以油酸(Oleic acid,OA)刺激HepG2细胞为模型,利用MTT检测、油红O染色、生化试剂盒法检测、qRT-PCR检测、Western blot检测、NBD标记胆固醇外排实验检测... 目的探讨党参炔苷(Lobetyolin)干预HepG2细胞胆固醇代谢异常的作用机制。方法该研究以油酸(Oleic acid,OA)刺激HepG2细胞为模型,利用MTT检测、油红O染色、生化试剂盒法检测、qRT-PCR检测、Western blot检测、NBD标记胆固醇外排实验检测等方法,研究党参炔苷对HepG2细胞胆固醇代谢的作用。结果党参炔苷可降低OA刺激下HepG2细胞的脂滴含量以及甘油三酯(Triglyceride,TG)、总胆固醇(Total cholesterol,TC)水平,使胆固醇外排率升高,同时,上调细胞色素7A1(Cytochrome 7A1,CYP7A1)、肝x受体α(Liver x receptorα,LXRα)、ATP结合盒转运体A1(ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1)、过氧化物酶体增殖物激活受体(Peroxisome proliferators-activated receptor,PPARγ)等mRNA或蛋白表达水平。然而,使用PPARγ拮抗剂Mifobate(SR-202)联合干预,可明显抑制党参炔苷对HepG2细胞胆固醇代谢的促进作用。结论该研究揭示党参炔苷可提高OA刺激下HepG2细胞的胆固醇外排率,促进胆固醇分解代谢,其作用机制可能与调控PPARγ/CYP7A1途径有关。 展开更多
关键词 党参炔苷 hepg2细胞 代谢 胆固醇 PPARγ/CYP7A1
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邻苯二甲酸酯对HepG2细胞血红素加氧酶1表达的影响及基于该酶的三维定量构效关系模型的构建
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作者 刘焕 李康兴 +3 位作者 翁文洁 时煜筠 柳春红 农镇艺 《中国药理学与毒理学杂志》 北大核心 2025年第9期681-688,共8页
目的评价邻苯二甲酸酯类(PAEs)化合物对HepG2细胞中血红素加氧酶1(HO-1)表达的影响,并构建基于HO-1的三维定量构效关系(3D-QSAR)模型。方法①HepG2细胞分别与邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)、邻苯二甲酸二正辛酯(DnOP)、邻苯二甲酸... 目的评价邻苯二甲酸酯类(PAEs)化合物对HepG2细胞中血红素加氧酶1(HO-1)表达的影响,并构建基于HO-1的三维定量构效关系(3D-QSAR)模型。方法①HepG2细胞分别与邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)、邻苯二甲酸二正辛酯(DnOP)、邻苯二甲酸二甲酯(DMP)、邻苯二甲酸二乙酯(DEP)、邻苯二甲酸二己酯(DHXP)、邻苯二甲酸二甲氧乙酯(DMEP)、邻苯二甲酸二丁酯(DBP)〔终浓度均分别为0(DMSO,溶剂对照)、0.0625、0.125、0.25、0.5和1 mmol·L^(-1),n=6〕培养48 h,Western印迹法检测细胞中HO-1蛋白表达水平。②基于各组HO-1蛋白水平,采用比较分子相似性指数分析(CoMSIA)法构建3D-QSAR模型。通过杠杆值(leverge)法验证模型的适用域,采用KNIMEEnalos+节点评估模型拟合质量与预测能力,验证模型稳定性,并通过分子对接验证PAEs与HO-1的结合效应。结果①与溶剂对照组相比,浓度为0.0625 mmol·L^(-1)的DMP、DMEP、DEHP、DnOP和DEP分别处理48 h后,细胞中HO-1蛋白表达水平均显著提高,而1 mmol·L^(-1)的DBP、DnOP、DEHP和DHXP则显著抑制HO-1表达。②构建的3D-QSAR模型的非交叉验证系数(R^(2))和交叉验证系数(Q^(2))分别为0.996和0.548。3D-QSAR模型7种PAEs均位于模型的适用域范围内,且通过了外部验证。分子对接结果表明DBP、DnOP、DEHP和DHXP与HO-1具有较强的结合活性。结论HepG2细胞经1 mmol·L^(-1)PAEs培养48 h显著抑制HO-1蛋白表达,构建的3D-QSAR模型为预测新型PAEs对HO-1的毒性作用提供有效工具。 展开更多
关键词 邻苯二甲酸酯 hepg2细胞 血红素加氧酶1 比较分子相似性指数分析 三维定量构效关系模型 分子对接
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Cideb促进棕榈酸诱导的HepG2细胞脂质沉积
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作者 杨林泉 佟斯羽 +2 位作者 朱慧明 张会欣 王超 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第3期509-517,共9页
目的:探讨诱导细胞死亡DNA片段化因子α(DNA fragmentation factor alpha,DFFA)样效应因子B(cell death-inducing DFFA-like effector B,Cideb)促进棕榈酸(palmitic acid,PA)诱导的人肝母细胞瘤HepG2细胞脂质沉积的作用及机制。方法:将H... 目的:探讨诱导细胞死亡DNA片段化因子α(DNA fragmentation factor alpha,DFFA)样效应因子B(cell death-inducing DFFA-like effector B,Cideb)促进棕榈酸(palmitic acid,PA)诱导的人肝母细胞瘤HepG2细胞脂质沉积的作用及机制。方法:将HepG2细胞分为对照组、模型组、沉默对照(siR-NC)组和Cideb沉默(siR-Cideb)组,采用PA诱导HepG2细胞建立脂质沉积细胞模型,利用特异性siRNA沉默Cideb的表达,检测细胞内脂质含量,油红O染色观察脂质沉积,RT-qPCR和Western blot法检测细胞中Cideb、固醇调节元件结合蛋白1c(sterol regulatory element-binding protein 1c,SREBP1c)、乙酰辅酶A羧化酶1(acetyl-CoA carboxylase 1,ACC1)、脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)、硬脂酰辅酶A去饱和酶1(stearoyl-CoA desaturase 1,SCD1)和AMP活化蛋白激酶α(AMP-activated protein kinaseα,AMPKα)表达。通过转染Cideb真核表达质粒,观察过表达Cideb对HepG2细胞的脂质沉积影响。结果:与对照组比较,PA模型组出现脂质沉积,甘油三酯(triglyceride,TG)和总胆固醇(total cholesterol,TC)含量显著上升,Cideb、SREBP1c、ACC、FAS和SCD1表达水平升高,AMPKα表达水平降低(P<0.05);与siR-NC组比较,siR-Cideb能够抑制HepG2细胞脂质沉积,降低细胞内TG和TC含量,降低SREBP1c、ACC、FAS和SCD1表达水平,增加AMPKα表达(P<0.05);Cideb过表达能够增加HepG2细胞脂质沉积及TG和TC含量,增加SREBP1c、ACC、FAS和SCD1表达,降低AMPKα表达水平。结论:降低Cideb水平可通过下调SREBP1c/ACC/FAS/SCD1通路,上调AMPKα,从而抑制PA诱导的HepG2细胞脂质沉积。 展开更多
关键词 Cideb蛋白 非酒精性脂肪性肝病 hepg2细胞 脂质沉积 SREBP1c/ACC/FAS/SCD1通路 AMPKα通路
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基于BP神经网络的15Cr14Co12Mo5Ni2齿轮钢本构模型建立及热加工图研究
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作者 朱鹏 冯玮 《塑性工程学报》 北大核心 2025年第8期177-186,共10页
为了建立15Cr14Co12Mo5Ni2钢本构模型,利用Gleeble-3500热模拟试验机在变形温度为860~1160℃,应变速率为0.01~5 s^(-1)下进行了单道次热压缩实验,得到了15Cr14Co12Mo5Ni2钢在不同工艺参数下的应力-应变曲线。基于应力-应变实验数据,通... 为了建立15Cr14Co12Mo5Ni2钢本构模型,利用Gleeble-3500热模拟试验机在变形温度为860~1160℃,应变速率为0.01~5 s^(-1)下进行了单道次热压缩实验,得到了15Cr14Co12Mo5Ni2钢在不同工艺参数下的应力-应变曲线。基于应力-应变实验数据,通过试凑法确定了层数为3×10×3×1(双隐含层)的BP神经网络本构关系预测模型,建立了不同变形条件下的三维功率耗散图、三维失稳图及热加工图。计算了基于应变补偿的Arrhenius模型和基于BP神经网络的本构模型的应力-应变预测值与实验值的误差,确定了齿轮钢最佳变形工艺条件。基于BP神经网络的本构模型和基于应变补偿的Arrhenius本构模型预测的流动应力均方误差分别为20.9415和109.2035,平均相对误差分别为0.0216和0.0501,确定的齿轮钢最佳成形温度和应变速率范围分别为1110~1160℃和0.01~0.33 s^(-1)。结果表明:基于BP神经网络建立的本构模型能更准确地预测15Cr14Co12Mo5Ni2钢的流动行为。 展开更多
关键词 15Cr14Co12Mo5Ni2 热压缩实验 BP神经网络 本构模型 热加工图
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纳米黏结剂添加量对(85Cu-15Ni) / NiFe_(2)O_(4) 基 金属陶瓷性能的影响
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作者 王永麒 肖峰 +3 位作者 王雪芹 王永庆 钱映 张志刚 《材料与冶金学报》 北大核心 2025年第3期266-270,共5页
采用两步烧结法制备纳米黏结剂/(85Cu-15Ni)/NiFe_(2)O_(4)基金属陶瓷材料,重点研究了纳米黏结剂添加量(质量分数,下同)对(85Cu-15Ni)/NiFe_(2)O_(4)基金属陶瓷致密度、抗弯强度、抗热震性和耐腐蚀性的影响.研究结果表明:随着纳米黏结... 采用两步烧结法制备纳米黏结剂/(85Cu-15Ni)/NiFe_(2)O_(4)基金属陶瓷材料,重点研究了纳米黏结剂添加量(质量分数,下同)对(85Cu-15Ni)/NiFe_(2)O_(4)基金属陶瓷致密度、抗弯强度、抗热震性和耐腐蚀性的影响.研究结果表明:随着纳米黏结剂添加量的增加,金属陶瓷晶粒结合变紧密,气孔数量减少;当纳米黏结剂添加量为2%时,气孔率达到最小值4.82%,此时金属陶瓷的抗弯强度达到最大值71.21 MPa,一次热震后强度剩余率为98.13%,表现出良好的抗热震性;当纳米黏结剂添加量超过2%时,金属陶瓷容易过度烧结,导致晶粒过度生长,出现较大的畸变晶粒,从而形成晶内气孔或微裂纹,降低了金属陶瓷的力学性能和耐腐蚀性能. 展开更多
关键词 (85Cu-15Ni)/NiFe_(2)O_(4)基金属陶瓷 纳米黏结剂 气孔率 抗弯强度 耐腐蚀性
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铁甲草多糖的分离纯化结构表征及其抑制HepG2细胞增殖的研究
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作者 朱菲菲 孙正阳 +2 位作者 刘颖 陈建平 叶盛权 《农产品加工》 2025年第14期71-74,78,共5页
以铁甲草为原料,采用热水浸提法提取铁甲草粗多糖(CMLCP)并用DEAE-52型纤维柱对其进行分离纯化得CMLCP-A、CMLCP-B和CMLCP-C组分;进一步测定4种组分的总糖、蛋白质和糖醛酸的含量,采用紫外分光光度计、傅立叶红外光谱和扫描电镜鉴定其结... 以铁甲草为原料,采用热水浸提法提取铁甲草粗多糖(CMLCP)并用DEAE-52型纤维柱对其进行分离纯化得CMLCP-A、CMLCP-B和CMLCP-C组分;进一步测定4种组分的总糖、蛋白质和糖醛酸的含量,采用紫外分光光度计、傅立叶红外光谱和扫描电镜鉴定其结构,采用MTT法测定CMLCP对HepG2细胞存活率的影响。结果表明,CMLCP、CMLCP-A、CMLCP-B和CMLCP-C这4种组分的总糖质量分数分别为83.33%,29.43%,27.34%和26.93%,糖醛酸质量分数分别为58.00%,8.40%,8.34%和8.56%,蛋白质质量分数分别为15.21%,0.20%,0.20%和0.19%。进一步对4种组分进行结构鉴定发现,4种组分中只有CMLCP含少量核酸和蛋白质,且4种组分都具有多糖-OH和-CH的伸缩振动特征吸收峰。体外细胞试验结果表明,CMLCP对HepG2细胞增殖有明显的抑制作用且呈质量浓度依赖性,当CMLCP质量浓度为800μg/mL时,细胞存活率降低至47%,表明CMLCP能够抑制HepG2细胞的增殖。 展开更多
关键词 铁甲草 粗多糖 结构鉴定 hepg2细胞
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热处理绞股蓝皂苷对油酸诱导的HepG2细胞脂质代谢的影响
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作者 谢鹏 姜舒 +3 位作者 裴文婧 段宇 胡长平 朴香兰 《甘肃农业大学学报》 北大核心 2025年第4期1-10,21,共11页
【目的】探讨热处理绞股蓝皂苷中两对同分异构体(gypenoside L/LI和damulin A/B)对油酸诱导的HepG2细胞脂质代谢的影响及机制。【方法】采用药效团比对和分子对接预测化合物与固醇调节元件结合蛋白(SREBP)的亲和力;CCK-8法评价细胞毒性... 【目的】探讨热处理绞股蓝皂苷中两对同分异构体(gypenoside L/LI和damulin A/B)对油酸诱导的HepG2细胞脂质代谢的影响及机制。【方法】采用药效团比对和分子对接预测化合物与固醇调节元件结合蛋白(SREBP)的亲和力;CCK-8法评价细胞毒性;构建油酸(OA)诱导的HepG2高脂细胞模型,测定总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)水平及油红O染色观察脂质积累;Western blot检测SREBP、PPARα/δ、HMGCR等脂质代谢关键蛋白表达。【结果】4种化合物通过氢键与SREBP结合,显著降低OA处理细胞的TC和TG水平,改善脂类堆积。机制方面,damulin A/B和gypenoside L通过抑制SREBP1、激活PPARα/δ,抑制HMGCR表达;gypenoside LI激活PPARα;damulin A特异性抑制SREBP2,gypenoside L/LI抑制HMGCR表达。【结论】绞股蓝皂苷通过多靶点调控脂质合成与氧化,有效降低HepG2细胞脂质积累,其降脂活性与结构差异密切相关。 展开更多
关键词 绞股蓝 皂苷 同分异构体 脂质代谢 hepg2细胞
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桂花提取物的抗氧化活性及对t-BHP诱导HepG2细胞氧化损伤的保护作用
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作者 冯庆 徐思远 +5 位作者 任梦 郝思怡 袁欣 陈佳蕊 杨旭 马萍 《化学与生物工程》 北大核心 2025年第1期53-58,共6页
采用DPPH法、ABTS法、FRAP法评价了桂花水提取物、95%乙醇提取物、正丁醇提取物、乙酸乙酯提取物、石油醚提取物的抗氧化活性,并探究了桂花水提取物对叔丁基过氧化氢(t-BHP)诱导的人肝癌细胞HepG2氧化损伤的保护作用。结果表明,桂花提... 采用DPPH法、ABTS法、FRAP法评价了桂花水提取物、95%乙醇提取物、正丁醇提取物、乙酸乙酯提取物、石油醚提取物的抗氧化活性,并探究了桂花水提取物对叔丁基过氧化氢(t-BHP)诱导的人肝癌细胞HepG2氧化损伤的保护作用。结果表明,桂花提取物具有一定的抗氧化活性,但不同溶剂提取物的抗氧化活性存在差异;桂花水提取物与HepG2细胞具有良好的生物相容性,可以抑制t-BHP诱导的HepG2细胞中8-羟基-2′-脱氧鸟苷(8-OHdG)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-1β(IL-1β)的产生,还显著降低了丙二醛(MDA)水平。 展开更多
关键词 桂花 抗氧化 hepg2 叔丁基过氧化氢(t-BHP) 氧化损伤
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降脂理肝汤提取工艺优化及其对HepG2细胞脂质蓄积的改善作用
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作者 季敬 孙妍华 +2 位作者 侯付强 姜昊 何珊 《中成药》 北大核心 2025年第1期36-42,共7页
目的优化降脂理肝汤提取工艺,并考察其对HepG2细胞脂质蓄积的改善作用。方法在单因素试验基础上,以提取时间、提取次数、溶剂用量为影响因素,丹参素、荷叶碱、儿茶素含量及浸膏得率的综合评分为评价指标,Box-Behnken响应面法优化提取工... 目的优化降脂理肝汤提取工艺,并考察其对HepG2细胞脂质蓄积的改善作用。方法在单因素试验基础上,以提取时间、提取次数、溶剂用量为影响因素,丹参素、荷叶碱、儿茶素含量及浸膏得率的综合评分为评价指标,Box-Behnken响应面法优化提取工艺。采用棕榈酸诱导的HepG2细胞建立非酒精性脂肪肝模型,考察含药血清对TC、TG水平的影响。结果最佳条件为提取时间90 min,提取次数3次,溶剂用量11倍,综合评分为99.34分。与对照组比较,模型组TC、TG水平升高(P<0.01);与模型组比较,降脂理肝汤高剂量组TC、TG水平降低(P<0.05,P<0.01),以优化后更明显(P<0.05,P<0.01)。结论降脂理肝汤可减轻棕榈酸诱导的HepG2细胞脂质蓄积,其提取工艺优化后的药效优于文献报道。 展开更多
关键词 降脂理肝汤 提取工艺 Box-Behnken响应面法 hepg2细胞 脂质蓄积 非酒精性脂肪肝
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2,3,5,4'-Tetrahydroxystilbene-2-O-β-glucoside Alleviates PCOS-like Characteristics by Upregulating The Expression of CYP19A1 in Granular Cells of Sinus Follicles to Inhibit Inflammatory Response
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作者 YAO Jian-Feng XU Bo +5 位作者 LIU Pin-Yue CHENG Di WEI Le PAN Xin-Yun MO Zhong-Cheng LI Ming 《生物化学与生物物理进展》 北大核心 2025年第3期735-750,共16页
Objective To investigate whether 2,3,5,4'-tetrahydroxystilbene-2-O-β-glucoside(TSG)ameliorated polycystic ovary syndrome(PCOS)-like characteristics by inhibiting inflammation.Methods PCOS models were established ... Objective To investigate whether 2,3,5,4'-tetrahydroxystilbene-2-O-β-glucoside(TSG)ameliorated polycystic ovary syndrome(PCOS)-like characteristics by inhibiting inflammation.Methods PCOS models were established by injecting subcutaneously with dehydroepiandrosterone into female Sprague-Dawley rats,followed by receiving intraperitoneal injection of TSG.The granular cells(GCs)KGN were transfected with small interfering RNAs(si-NC and si-CYP19A1).The cells were preincubated with lipopolysaccharide(LPS)and then treated with or without TSG.The estrous cycle was monitored using vaginal exfoliated cells.The morphology of ovarian follicles was analyzed by H&E staining.ELISA was used to analyze estradiol(E2),testosterone(T),follicle stimulating hormone(FSH),luteinizing hormone(LH),IL-6,TNF-α,AGEs,CRP and Omentin-1 levels in serum.Immunohistochemistry was performed to analyze PCNA and CYP19A1 expressions in the GCs of ovaries.Tunel staining was executed to detect the apoptosis of GCs.Quantitative polymerase chain reaction(qPCR)and Western blot were implemented to measure the expression of CYP19A1 in the ovaries and transfected cells.qPCR was used to analyze the expression of IL-6 and TNF-αin the transfected cells treated with LPS and TSG.Results The estrous cycles were restored in TSG group.Compared with model group,the sinus follicles were reduced and corpus luteums were increased in TSG group.TSG group showed increased E2,and decreased T and LH,compared with model group.Pro-inflammatory factors(IL-6,TNF-α,CRP and AGEs)were decreased,and anti-inflammatory factor(Omentin-1)was increased in TSG group compared with those in model group.TSG could partially inhibit decrease of PNCA-positive GCs and increase of Tunel-positive GCs caused by PCOS.The CYP19A1 expression of GCs in TSG group was upregulated compared with model group.The expressions of IL-6 and TNFαin si-CYP19A1 cells were increased compared with si-NC cells.Compared with cells(si-NC and si-CYP19A1)treated without LPS,the expressions of IL-6 and TNF-αcells were increased,and the expression of CYP19A1 was downregulated in LPS-preincubated cells.Compared with cells treated with LPS,the expression of IL-6 and TNF-αwere decreased,and the expression of CYP19A1 was increased in cells treated with LPS and TSG.Compared with si-NC cells treated with LPS and TSG,the expressions of IL-6 and TNF-αcells were increased in the si-CYP19A1 cells treated with LPS and TSG.Conclusion TSG could alleviate PCOS-like characteristics by increasing the expression of CYP19A1 in GCs to inhibit inflammatory response. 展开更多
关键词 2 3 5 4'-tetrahydroxystilbene-2-O-β-glucoside granular cells CYP19A1 polycystic ovary syndrome inflammatory response
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1511 cm-1处SO_(2)F_(2)的光声光谱探测研究
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作者 齐汝宾 丁金峰 +8 位作者 陈东升 张一博 张伊涛 任林娇 秦自瑞 张培 姜利英 李新田 赫树开 《激光与红外》 北大核心 2025年第1期85-90,共6页
氟化硫酰(SO_(2)F_(2))是SF_(6)早期分解产物的代表,对SO_(2)F_(2)的精准定量分析,可以有效预判电气设备的潜在故障,进而避免设备的损坏以维护电力系统的安全稳定运行,因此对SO_(2)F_(2)的快速、高灵敏度检测显得尤为重要。为此,研制了... 氟化硫酰(SO_(2)F_(2))是SF_(6)早期分解产物的代表,对SO_(2)F_(2)的精准定量分析,可以有效预判电气设备的潜在故障,进而避免设备的损坏以维护电力系统的安全稳定运行,因此对SO_(2)F_(2)的快速、高灵敏度检测显得尤为重要。为此,研制了一种基于中红外波段的高灵敏度SO_(2)F_(2)气体光声传感系统,该检测系统结合小型共振式光声池与QCL激光器,首次在中心波长为1511 cm^(-1)的肩峰吸收波段,实现了对SO_(2)F_(2)的高灵敏的光声探测。研究结果表明,该光声系统响应度为63.32 mV/ppm,当积分时间为13s,最低检出限可达1.7 ppb。 展开更多
关键词 SO_(2)F_(2) QCL激光器 光声光谱 小型光声池 肩峰
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续断-熟地黄提取物对IR-HepG2细胞糖代谢的调节及作用靶点分析
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作者 赫英辉 岳自鹏 +3 位作者 郝淋耀 李树鹏 李玉荣 霍书英 《中兽医医药杂志》 2025年第5期1-11,共11页
采用网络药理学、分子对接分析以及细胞试验探讨续断-熟地黄提取物调节HepG2细胞糖代谢的作用机制,为采用中药治疗犬猫Ⅱ型糖尿病提供参考依据。首先通过TCMSP、Gene-Cards、OMIM等数据库获取续断和熟地黄的活性成分及成分-疾病作用靶点... 采用网络药理学、分子对接分析以及细胞试验探讨续断-熟地黄提取物调节HepG2细胞糖代谢的作用机制,为采用中药治疗犬猫Ⅱ型糖尿病提供参考依据。首先通过TCMSP、Gene-Cards、OMIM等数据库获取续断和熟地黄的活性成分及成分-疾病作用靶点;然后通过PPI网络分析、GO功能富集分析、KEGG通路分析以及分子对接验证核心成分与核心靶点的结合能力;最后通过MTT法筛选出合适的中药浓度,采用高糖联合胰岛素作用于细胞建立胰岛素抵抗-HepG2(IR-HepG2)细胞模型,通过RT-qPCR检测核心靶点及糖代谢相关酶的mRNA表达水平,验证续断-熟地黄对IR-HepG2细胞糖代谢的作用效果。结果显示,筛选获得续断-熟地黄活性成分26种,其中核心成分为林生续断苷Ⅲ-qt、臭山羊碱、葳岩仙皂苷A-qt等;交集靶点402个,其中STAT3、EGFR、HSP90AA1、AKT1、IL-6为治疗Ⅱ型糖尿病(T2DM)的核心靶点。细胞试验结果显示,续断-熟地黄提取物最佳作用浓度为10-6g/mL,可显著促进细胞增殖(P<0.05)。RT-qPCR结果表明,续断-熟地黄提取物可显著上调AKT1(P<0.01)、INSR(P<0.01)、GLUT4(P<0.05)、AMPK(P<0.05)、GCK(P<0.01)以及GYS2(P<0.01)的mRNA表达水平,并显著下调STAT3(P<0.001)、EGFR(P<0.05)、HSP90AA1(P<0.01)、IL-6(P<0.001)、GSK-3β(P<0.01)、PEPCK(P<0.05)以及G6Pase(P<0.001)的mRNA表达水平。续断-熟地黄可通过多成分、多靶点、多通路改善胰岛素抵抗,降低炎症反应,上调胰岛素信号转导通路关键蛋白的表达水平,有效改善胰岛素抵抗造成的细胞损伤与糖代谢紊乱。试验结果可为后续采用续断-熟地黄临床治疗犬猫糖尿病提供理论参考。 展开更多
关键词 续断-熟地黄 网络药理 hepg2细胞 胰岛素抵抗 糖代谢
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