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IL2-TNFα基因诱导大鼠C6胶质瘤细胞凋亡
1
作者 李永宁 任祖渊 +3 位作者 苏长保 王任直 马文斌 幸兵 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2001年第2期88-92,共5页
目的　为深入进行胶质瘤细胞凋亡的分子生物学研究及为提高胶质瘤辅助免疫治疗打下基础。方法　通过光镜、电镜、荧光显微镜分析 ,DNA断裂分析及流式细胞仪分析 ,进行通过IL2 TNFα诱导C6胶质瘤细胞凋亡研究。结果　本研究用脂质体将pL... 目的　为深入进行胶质瘤细胞凋亡的分子生物学研究及为提高胶质瘤辅助免疫治疗打下基础。方法　通过光镜、电镜、荧光显微镜分析 ,DNA断裂分析及流式细胞仪分析 ,进行通过IL2 TNFα诱导C6胶质瘤细胞凋亡研究。结果　本研究用脂质体将pLXSN IL2 TNFα基因导入病毒包装细胞PA31 7,经G41 8抗性筛选 ,用NIH3T3细胞测得病毒滴度为 5×1 0 5CFU ml的细胞克隆 ,利用病毒上清感染C6细胞 ,测得IL2的生物活性为 2 0～ 8 0U 1 0 6 cells 2 4h ,测得TNFα生物活性为 3～ 1 1 0U 1 0 6 cells 2 4h ,实验证实在作用 72h后 ,C6细胞出现细胞凋亡 ;光镜和电镜可见细胞形态学上出现细胞皱缩 ,染色质浓集贴边 ;流式细胞仪结果显示有凋亡峰出现 ,凋亡细胞占细胞总数 1 4 0 %± 1 3% ;荧光显微镜观察出现染色质浓集、断裂 ;DNA电泳表现出DNA呈梯状带断裂。结论　上述结果提示用IL2 TNFα成功诱导大鼠C6胶质瘤细胞发生凋亡。 展开更多
关键词 凋亡 c6胶质瘤细胞 TNFΑ基因 诱导 c6细胞 大鼠 电镜 浓集 抗性筛选 荧光显微镜
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刃天青法检测mtDNA缺失C6ρ0细胞的活力
2
作者 靳有才 张一鸣 +2 位作者 李忌 王洪伦 白波 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1136-1141,共6页
目的建立以刃天青为氧化还原指示剂测定mtDNA被完全清除的大鼠胶质瘤C6细胞(C6ρ0)增殖及活力的方法,并对其有效性进行验证。方法取对数生长期的C6ρ0细胞,采用刃天青法比较不同细胞数量、刃天青浓度、孵育时间对荧光强度的影响,优化测... 目的建立以刃天青为氧化还原指示剂测定mtDNA被完全清除的大鼠胶质瘤C6细胞(C6ρ0)增殖及活力的方法,并对其有效性进行验证。方法取对数生长期的C6ρ0细胞,采用刃天青法比较不同细胞数量、刃天青浓度、孵育时间对荧光强度的影响,优化测定C6ρ0细胞活力的条件。比较MTT法和刃天青法测定C6ρ0和C6细胞活力的灵敏性,并以天然化合物熊果酸对C6ρ0和C6细胞活力的影响对该方法进行验证。结果 C6ρ0细胞数为0~30 000/孔,25μg/mL刃天青培养基避光孵育1~4 h,细胞数量与荧光强度呈良好线性关系,灵敏性高于MTT法。熊果酸0~50μmol/L对C6ρ0和C6细胞具有增殖抑制作用,且增殖抑制率差异有统计学意义(P<0.05),IC50分别为20.82、14.62μg/mL。结论刃天青法灵敏、简单、安全无毒、经济便宜、重复性好,特别适用于生长代谢缓慢的细胞系,可用于其细胞增殖测定、活力分析及化合物细胞毒的高通量筛选。 展开更多
关键词 刃天青 神经胶质瘤c6细胞 c6ρ0细胞 细胞活力 熊果酸
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脂质体介导B7基因在C6胶质瘤细胞中表达的实验研究
3
作者 李永宁 幸兵 +3 位作者 任祖渊 苏长保 王任直 马文斌 《中国实验动物学杂志》 2001年第1期35-38,共4页
目的　通过脂质体介导基因转移方法 ,将含B7基因的重组逆转录病毒表达质粒导入C6细胞中 ,使之能有效的表达B7分子 ,探索胶质瘤免疫基因治疗的新方法。方法　用脂质体将pLXSN -B7重组表达质粒导入Wistar大鼠胶质瘤细胞系C6中 ,经G418筛... 目的　通过脂质体介导基因转移方法 ,将含B7基因的重组逆转录病毒表达质粒导入C6细胞中 ,使之能有效的表达B7分子 ,探索胶质瘤免疫基因治疗的新方法。方法　用脂质体将pLXSN -B7重组表达质粒导入Wistar大鼠胶质瘤细胞系C6中 ,经G418筛选出阳性克隆。通过PCR、狭缝杂交及B7单克隆抗体免疫荧光方法检测B7基因在C6细胞中的整合、转录及表达情况。结果　PCR可从B7基因转导的C6细胞 (C6pLXSN -B7)基因组中扩增出 0 8Kb的B7基因片断 ;以B7为探针狭缝杂交显示C6pLXSN -B7细胞中有B7基因的转录 ;以抗 -B7单克隆抗体进行的免疫荧光检测显示C6pLXSN -B7细胞表面有B7分子的表达 ,而对照组肿瘤细胞 (C6pLXSN、C6 )则无B7分子的表达。结论　脂质体介导B7基因转移方法可将B7基因完整整合到C6细胞基因组中并使之能稳定、有效的表达。 展开更多
关键词 B7基因 表达 c6细胞 脂质体介导 B7分子 c6胶质瘤细胞 单克隆抗体 转录 阳性克隆 基因组
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NOX4/TRPC6在糖尿病肾病足细胞损伤中的作用
4
作者 岳汝驰 李惠敏 +1 位作者 胡斌 宋志霞 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第2期250-260,共11页
目的:探讨NADPH氧化酶4(NADPH oxidase 4,NOX4)/瞬时受体电位阳离子通道C亚家族成员6(transient receptor potential channel subfamily C member 6,TRPC6)在糖尿病肾病足细胞损伤中的作用及其机制。方法:(1)将雄性Sprague-Dawley大鼠... 目的:探讨NADPH氧化酶4(NADPH oxidase 4,NOX4)/瞬时受体电位阳离子通道C亚家族成员6(transient receptor potential channel subfamily C member 6,TRPC6)在糖尿病肾病足细胞损伤中的作用及其机制。方法:(1)将雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为对照组、糖尿病肾病组、NOX4抑制剂(GKT137831)组、糖尿病肾病+GKTl37831组,每组8~10只。通过一次性腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)(70 mg/kg)构建1型糖尿病模型,模型构建成功后腹腔注射GKT137831(5 mg/kg)。定期监测血糖和24 h尿白蛋白定量,并收集血液及肾脏组织。(2)使用小鼠肾小球足细胞为体外实验研究对象,细胞分为正常对照组、高糖组、GKTl37831组及高糖+GKTl37831组。体外高糖培养足细胞2周。使用NOX4抑制剂及使用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染足细胞。免疫印迹、免疫组化及实时荧光反转录PCR(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-qPCR)等技术检测NOX4和TRPC6表达水平。(3)使用荧光共聚焦显微镜观察高糖条件下足细胞线粒体形态变化,通过免疫印迹法检测足细胞中过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1α,PGC1α)、线粒体转录因子A(mitochondrial transcription factor A,TFAM)、细胞色素C氧化酶亚单位I(cytochrome C oxidase subunit I,COX I)和COX IV蛋白表达水平。结果:(1)与正常对照组相比,糖尿病肾病大鼠肾小球显著肥大、基底膜增厚,系膜区增宽,尿白蛋白定量显著增加,免疫印迹及免疫组化结果显示肾组织NOX4蛋白表达水平升高,肾小球足细胞蛋白(nephrin)表达减少,间质细胞标志物如结蛋白(desmin)表达增加,TRPC6表达水平升高(P<0.05);使用GKT137831可降低肾组织desmin表达,保留肾小球nephrin,减少尿白蛋白定量(P<0.05)。(2)在体外足细胞实验中,高糖背景下,足细胞中NOX4和TRPC6表达上调(P<0.05);免疫荧光及免疫印迹检测结果显示GKT137831可减轻足细胞TRPC6和desmin表达,部分恢复nephrin表达(P<0.05);免疫印迹结果显示使用TRPC6 siRNA转染足细胞,可进一步促进GKT137831对足细胞的保护作用(P<0.05)。(3)荧光共聚焦显微镜显示高糖背景下足细胞线粒体形态受损,使用GKT137831及转染TRPC6 siRNA后,线粒体损伤得到部分恢复。免疫印迹结果显示高糖背景下足细胞PGC1α、TFAM、COX I和COX IV蛋白水平降低,使用GKT137831及转染TRPC6 siRNA后PGC1α、TFAM、COX I和COX IV表达水平升高(P<0.05)。结论:在糖尿病肾病的病理过程中,肾脏中NOX4表达增加,在一定程度上通过TRPC6通道介导足细胞的损伤,抑制NOX/TRPC6可改善足细胞线粒体功能障碍。这一发现为糖尿病肾病的临床诊疗提供了新的视角和策略。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 足细胞损伤 NADPH氧化酶4 瞬时受体电位阳离子通道C亚家族成员6
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槲皮素对大鼠脑胶质瘤C6细胞增殖调控的作用 被引量：16
5
作者 周立祥 罗毅男 +2 位作者 付双林 葛鹏飞 庄汉亭 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期251-253,256,共4页
目的:研究类黄酮化合物槲皮素(quercetin,QUE)对体外培养的大鼠脑胶质瘤C6细胞增殖调控的作用。方法:按QUE浓度分成10、25、50、75及100μmol.L-15个处理组和空白对照组(生理盐水)及溶剂对照组(二甲亚砜),大鼠脑胶质瘤C6细胞在RPMI 164... 目的:研究类黄酮化合物槲皮素(quercetin,QUE)对体外培养的大鼠脑胶质瘤C6细胞增殖调控的作用。方法:按QUE浓度分成10、25、50、75及100μmol.L-15个处理组和空白对照组(生理盐水)及溶剂对照组(二甲亚砜),大鼠脑胶质瘤C6细胞在RPMI 1640培养基中生长达1×106.mL-1后,在96孔板中分别加入上述浓度的QUE继续培养,每组设3复孔,作用24、48及72 h,采用MTT比色法检测QUE对大鼠脑胶质瘤C6细胞的增殖抑制情况,流式细胞术(FCM)对50及100μmol.L-1的QUE作用48 h的大鼠脑胶质瘤C6细胞进行周期分析,免疫组化法检测50μmol.L-1的QUE作用48 h的p53和bcl-2基因产物。结果:与空白对照组比较,QUE处理组随药物浓度增加和作用时间的延长,A值减小(P<0.05),对C6细胞的增殖抑制作用增强,使停滞在G0/G1期的细胞增加(P<0.01),而S和G2/M期细胞减少(P<0.05)。P53蛋白表达增加和Bcl-2蛋白表达减少。结论:QUE对C6细胞增殖抑制作用具有浓度、时间依赖性,通过P53蛋白表达增加和Bcl-2蛋白表达减少诱导细胞凋亡来实现。 展开更多
关键词 神经胶质瘤 胶质瘤c6细胞 槲皮素 细胞凋亡
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异甘草素对大鼠C6胶质瘤细胞增殖和分化的影响 被引量：11
6
作者 李雅娟 甘露 +7 位作者 王占洋 邱理红 佀营营 张红 马成俊 李忌 孙喜灵 王振华 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1298-1303,共6页
目的研究异甘草素对大鼠C6胶质瘤细胞增殖和分化的影响。方法采用磺酰罗丹明B(SRB)比色法和克隆形成实验考察异甘草素对C6胶质瘤细胞增殖抑制作用;Giemsa染色观察细胞形态学变化;半定量RT-PCR、Western blot鉴定细胞分化相关基因及蛋白... 目的研究异甘草素对大鼠C6胶质瘤细胞增殖和分化的影响。方法采用磺酰罗丹明B(SRB)比色法和克隆形成实验考察异甘草素对C6胶质瘤细胞增殖抑制作用;Giemsa染色观察细胞形态学变化;半定量RT-PCR、Western blot鉴定细胞分化相关基因及蛋白表达水平。结果大鼠C6胶质瘤细胞经异甘草素诱导后,以浓度依赖性抑制细胞增殖(P<0.01);光镜观察到异甘草素诱导前的C6胶质瘤细胞呈两极长梭形或多角形,胞质多,胞突短;而诱导后细胞突起数目不同程度增多,细胞形态变细变长。诱导前克隆形成出现早,数量多,直径大,克隆形成率高;异甘草素处理组克隆形成率降低,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。RT-PCR、Western blot结果显示,异甘草素诱导后C6细胞GFAP mRNA和蛋白表达均明显上升(P<0.01)。结论异甘草素能抑制大鼠C6胶质瘤细胞的增殖,并能诱导C6细胞分化。 展开更多
关键词 异甘草素 c6胶质瘤 增殖 分化 克隆形成 吉姆萨染色 星形胶质细胞 GFAP
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注射后留置时间对大鼠C6脑胶质瘤模型的影响 被引量：12
7
作者 邱大胜 徐丽莹 +3 位作者 尹明媛 熊婷 郭小芳 孔祥泉 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2008年第10期1260-1263,共4页
目的:采用不同的留置时间建立大鼠C6胶质瘤模型,比较不同的留置时间对于模型成功率的影响,提高肿瘤种植成功率。方法:36只SD大鼠按留置时间3min、5min、10min分为3组,C6细胞体积10μl细胞悬液、注射时间5min。第一次未种植成功者再次种... 目的:采用不同的留置时间建立大鼠C6胶质瘤模型,比较不同的留置时间对于模型成功率的影响,提高肿瘤种植成功率。方法:36只SD大鼠按留置时间3min、5min、10min分为3组,C6细胞体积10μl细胞悬液、注射时间5min。第一次未种植成功者再次种植。术后用骨蜡封骨窗并清创缝合。造模术后2周和3周分别行MRI平扫及增强证实模型肿瘤生长。统计学方法采用Fisher精确检验。结果:36只大鼠,16只第一次种植成功,20只种植失败,改变条件再次种植,2只死于麻醉意外,18只成功。留置时间3min与5min,其0.01<P<0.05,留置时间对于肿瘤种植成功二者差异具有统计学意义,留置5min肿瘤成功率高于3min;留置时间5min与10min,其P<0.01,留置5min与10min两种不同的留置时间对于肿瘤种植成功二者差异具有显著的统计学意义,留置10min,肿瘤成功率明显高于5min。结论:微量注射器的留置时间与肿瘤种植成功率有关,随着留置时间的延长,肿瘤种植成功率也会提高。 展开更多
关键词 c6细胞 SD大鼠 模型 胶质瘤
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立体定向建立大鼠C6脑胶质瘤模型 被引量：13
8
作者 余永强 陈骏 +3 位作者 钱银锋 沈玉先 张玲玲 张诚 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期222-225,共4页
目的　建立大鼠C6脑胶质瘤模型 ,采用影像学方法观察肿瘤的生长规律和时间窗 ,为肿瘤的疗效检测提供可行的方法。方法　 16只SD大鼠随机分成两组 ,每组 8只 ,用立体定向技术将C6细胞接种在大鼠的右侧尾状核 ,接种细胞量分别为 1 0×... 目的　建立大鼠C6脑胶质瘤模型 ,采用影像学方法观察肿瘤的生长规律和时间窗 ,为肿瘤的疗效检测提供可行的方法。方法　 16只SD大鼠随机分成两组 ,每组 8只 ,用立体定向技术将C6细胞接种在大鼠的右侧尾状核 ,接种细胞量分别为 1 0× 10 6 个 (第 1组 )和 1 5× 10 6 个 (第 2组 )。观察大鼠生存期 ,测量肿瘤的最大径 ,计算肿瘤体积 ,计算观察时间窗。结果　两组大鼠皆成功接种肿瘤 ,成功率为10 0 %。第 1组大鼠平均生存期为 ( 2 3 5 0± 3 93 )d ,明显大于第 2组 ( 17 75± 2 3 8)d(P <0 0 1)。肿瘤最大直径与瘤龄呈直线关系 ,体积与瘤龄呈指数关系。观察时间窗第 1组为 ( 12 0 0± 3 5 1)d ,大于第 2组 ( 8 88± 1 73 )d(P <0 0 5 )。结论　立体定向脑内定量注射C6细胞制作大鼠脑胶质瘤模型成功率高 ,肿瘤最大径和体积增长有规律性。 展开更多
关键词 c6细胞株 胶质瘤模型 颅内注射
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Tenuifoliside A基于ERK通路保护皮质酮损伤C6细胞作用研究 被引量：7
9
作者 余冰颖 董宪喆 +3 位作者 胡园 穆丽华 黄志雄 刘屏 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期506-511,共6页
目的探讨远志寡糖酯成分Tenuifoliside A(TFSA)对皮质酮诱导大鼠神经胶质瘤细胞(C6)损伤的保护作用及其分子机制。方法建立以0.8 mmol.L-1的皮质酮作用于C6细胞48h的损伤模型;用皮质酮预处理C6细胞30 min后加入30、10和3μmol.L-1的TFSA... 目的探讨远志寡糖酯成分Tenuifoliside A(TFSA)对皮质酮诱导大鼠神经胶质瘤细胞(C6)损伤的保护作用及其分子机制。方法建立以0.8 mmol.L-1的皮质酮作用于C6细胞48h的损伤模型;用皮质酮预处理C6细胞30 min后加入30、10和3μmol.L-1的TFSA,共同作用48 h,CCK试剂盒检测TFSA对皮质酮诱导C6细胞损伤的存活率;荧光显微镜观察C6细胞Hoechst 33258染核后凋亡形态变化;Western blot检测C6细胞内ERK及凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达;Caspase检测试剂盒检测C6细胞内Caspase激酶活力的变化。结果与正常对照组比,0.8 mmol.L-1的皮质酮对C6细胞有明显的损伤作用,其细胞存活率降低至69.58%(与正常组相比,P<0.01);细胞核形态改变,出现凋亡小体;胞内ERK蛋白和抗凋亡蛋白Bcl-2表达量明显降低(与正常组相比,P<0.01),Caspase-3激酶的活力增加(P<0.01)。与模型组相比,各剂量组的TFSA均有不同程度对抗皮质酮损伤的作用,细胞存活率明显提高至84.48%(与模型组相比,P<0.01),同时细胞核形态有明显改善;细胞内的ERK蛋白和抗凋亡蛋白Bcl-2表达量明显增加(P<0.01);Caspase-3激酶活力明显降低。结论 TFSA对皮质酮诱导损伤的C6细胞具有保护作用,其机制可能与TFSA能激活C6细胞内ERK通路,提高抗凋亡蛋白Bcl-2表达,降低Caspase-3激酶活性有关。 展开更多
关键词 TenuifolisideA 远志 c6细胞 ERK 凋亡 神经保护
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低频超声体外诱导C6胶质瘤细胞凋亡的研究 被引量：7
10
作者 张震 杨松涛 +2 位作者 樊立林 刘云会 薛一雪 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期87-88,95,共3页
目的应用低频超声辐照体外培养的C6胶质瘤细胞,探讨低频超声对肿瘤细胞的影响。方法应用不同强度(10%～100%)的低频超声(1MHz,20s)作用于体外培养的C6细胞,采用MTT法检测光密度(OD)值,计算超声辐照后C6细胞的生长率,应用TUNEL法观察C6... 目的应用低频超声辐照体外培养的C6胶质瘤细胞,探讨低频超声对肿瘤细胞的影响。方法应用不同强度(10%～100%)的低频超声(1MHz,20s)作用于体外培养的C6细胞,采用MTT法检测光密度(OD)值,计算超声辐照后C6细胞的生长率,应用TUNEL法观察C6细胞的凋亡形态及计算细胞凋亡率。结果低频超声辐照体外培养的C6胶质瘤细胞后,在超声强度<50%范围内,随超声强度增加C6细胞的生长率显著下降,细胞形态出现核浓缩和核碎裂等凋亡改变,细胞凋亡率随超声辐照强度增加而增加;当超声强度>50%时,C6细胞的生长率和凋亡率不随超声强度增加而改变。C6胶质瘤细胞凋亡率与生长率显著负相关。结论低频超声辐照能够在体外诱导C6胶质瘤细胞凋亡。 展开更多
关键词 低频超声 诱导 c6细胞 凋亡
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工频交流电压下C6F12O与N2混合气体的击穿特性和分解特性 被引量：28
11
作者 田双双 张晓星 +4 位作者 肖淞 卓然 王邸博 邓载韬 李祎 《中国电机工程学报》 EI CSCD 北大核心 2018年第10期3125-3132,共8页
探索了新型环保绝缘气体C6F12O与N2混合气体在交流电压下的击穿特性和分解特性。讨论了C6F120与N2在设备中使用的混合比，并在工频交流平台下进行击穿实验，探究C6F12O与N2混合气体在准均匀场下的击穿性能并与SF6混合气体进行比较。对3... 探索了新型环保绝缘气体C6F12O与N2混合气体在交流电压下的击穿特性和分解特性。讨论了C6F120与N2在设备中使用的混合比，并在工频交流平台下进行击穿实验，探究C6F12O与N2混合气体在准均匀场下的击穿性能并与SF6混合气体进行比较。对3％C6F120与N2混合气体进行100次击穿实验后采用GC．MS定性检测混合气体击穿后的分解产物，最后采用密度泛函理论计算分解产物的生成过程，分析温度对生成能量的影响并计算分解产物分子轨道间隙。实验结果表明：在0．10MPa下3％C6F120与N2混合气体的击穿电压约为纯N2的1．7倍，与10％SF6与N2混合气体的击穿电压相当。击穿后检测到的分解产物主要为cF4、C2F6、c3F6、C3F8、C4F10和C5F12。计算表明：生成主要分解产物的反应能量随着温度升高呈现不同的变化趋势，且分解产物的分子轨道间隙值由大到小的排序依次为CF4，C2F6，C3F8，C4F10，C5F12，C3F6。CF4分子的轨道间隙值最大，约为12．590eV。 展开更多
关键词 c6F12O N2 击穿特性 分解特性 密度冷函理论
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小柴胡汤对C6胶质瘤抑瘤作用的实验研究 被引量：6
12
作者 于慧玲 麻春杰 +2 位作者 韩雪梅 赵鹏伟 赵灵燕 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期988-991,共4页
目的：探讨不同剂量小柴胡汤对体外培养的C6胶质瘤细胞的抑瘤作用及其作用机理。方法：将C6胶质瘤细胞分别接种于96孔、24孔及6孔培养板中,每种培养板均分为4组：对照组、小柴胡汤低剂量组、中剂量组和高剂量组,待细胞铺满培养板底80%~9... 目的：探讨不同剂量小柴胡汤对体外培养的C6胶质瘤细胞的抑瘤作用及其作用机理。方法：将C6胶质瘤细胞分别接种于96孔、24孔及6孔培养板中,每种培养板均分为4组：对照组、小柴胡汤低剂量组、中剂量组和高剂量组,待细胞铺满培养板底80%~90%,开始加药,培养24小时后终止培养。采用CCK-8、活体染色、ELISA、免疫细胞化学及流式细胞仪检测细胞增殖活性、细胞存活率、ESM-1和VEGF的蛋白含量及蛋白阳性表达强度和细胞的早期、晚期凋亡状况。结果：CCK-8法检测显示小柴胡汤低、中、高剂量组对C6胶质瘤细胞的生长均有抑制作用;ELISA和免疫细胞化学法显示,小柴胡汤低、中、高剂量组均能降低ESM-1和VEGF的蛋白阳性表达强度及蛋白含量水平;流式细胞仪检测显示小柴胡汤低、中、高剂量组均能促进细胞凋亡;倒置显微镜观察可见随剂量增加细胞排列逐渐松散、萎缩,细胞漂浮死亡数量增多;各种检测法均显示随剂量增加抑制作用增强且具有剂量依赖性,组间差异均有统计学意义（P〈0.01）。结论：小柴胡汤对C6胶质瘤细胞的生长具有明显的抑制作用,它可能通过下调ESM-1和VEGF蛋白水平、促进细胞凋亡,从而发挥抑瘤作用。 展开更多
关键词 小柴胡汤 c6胶质瘤 CCK-8 ESM-1 VEGF 流式细胞仪
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核糖核酸酶抑制因子对H_2O_2损伤的大鼠神经胶质瘤细胞系C6的影响 被引量：11
13
作者 潘东宁 傅攀峰 +1 位作者 王红 崔秀云 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期767-771,共5页
核糖核酸酶抑制因子 (ribonucleaseinhibitor,RI)是广泛存在于哺乳动物细胞浆中的一种酸性糖蛋白 .为了进一步了解RI的功能 ,根据RI分子结构富含巯基的特点 ,研究了RI对过氧化氢(H2 O2 )损伤的大鼠神经胶质瘤细胞 (C6 )的影响 .用不同... 核糖核酸酶抑制因子 (ribonucleaseinhibitor,RI)是广泛存在于哺乳动物细胞浆中的一种酸性糖蛋白 .为了进一步了解RI的功能 ,根据RI分子结构富含巯基的特点 ,研究了RI对过氧化氢(H2 O2 )损伤的大鼠神经胶质瘤细胞 (C6 )的影响 .用不同浓度的H2 O2 分别作用于转染有RIcDNA并且RI过表达的C6细胞和正常C6细胞 ,对比损伤前后 2者的细胞存活率、LDH漏出量、细胞内GSH和MDA含量差别 ,以及细胞内抗氧化酶类GPX、CAT和GST活性的差别 .结果表明 ,与正常C6细胞相比 ,RI过表达的C6细胞在H2 O2 作用下存活率高 ,LDH漏出量、MDA含量明显减少 ,而细胞内GSH较多 ;RI过表达的C6细胞在损伤前后均表现出更强的CAT和GST活性 .提示RI具有抗氧化功能 ,能够减轻H2 O2 所致的细胞过氧化损伤 . 展开更多
关键词 过氧化氢 抗氧化活性 核糖核酸酶抑制因子 H2O2损伤 大鼠 神经胶质瘤细胞系c6
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CRISPR/Cas9建立IL-12p35基因敲除大鼠C6细胞系表达研究 被引量：6
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作者 孙瑾 张俊卿 +3 位作者 黄延林 杨芳裕 董桂江 田新华 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第20期2452-2456,共5页
目的:运用CRISPR/Cas9技术敲除大鼠C6细胞系的IL-12p35基因,构建IL-12p35基因稳定敲除细胞株。方法:构建Lenti-sgRNA-EGFP质粒CRISPR/Cas9系统的Cas9核酸内切酶基因,慢病毒感染C6细胞后进行MTT[3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphen... 目的:运用CRISPR/Cas9技术敲除大鼠C6细胞系的IL-12p35基因,构建IL-12p35基因稳定敲除细胞株。方法:构建Lenti-sgRNA-EGFP质粒CRISPR/Cas9系统的Cas9核酸内切酶基因,慢病毒感染C6细胞后进行MTT[3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide]检测及PI-FACS(Facial Action Coding System)细胞周期检测。结果:针对IL-12p35基因的KO1、KO2、KO3三个靶点,进行慢病毒转染,转染效率均大于80%。酶切前后靶点活性均下调,免疫印迹验证C6细胞中靶点有效性。MTT检测结果IL-12p35基因敲除后于第5天细胞增殖倍数明显降低。IL-12p35基因敲除后显著影响细胞周期G1期,G2/M期。结论:本研究构建IL-12p35基因的CRISPR/Cas9敲除系统,获得稳定的IL-12p35基因敲除细胞株,为后期IL-12p35与胶质瘤细胞的发生、发展机制方面研究提供基础。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9 c6 IL-12p35 慢病毒源性载体
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替莫唑胺联合姜黄素对C6胶质瘤细胞凋亡的作用 被引量：10
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作者 王亚华 应雪 +3 位作者 张春春 轩亚茹 闫荷露 李霞 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第10期1564-1567,共4页
目的:研究替莫唑胺联合姜黄素用药对C6胶质瘤细胞的抑制作用和诱导凋亡作用。方法:SRB法考察替莫唑胺联合姜黄素对C6细胞的抑制作用;流式细胞法检测联合用药对C6细胞的凋亡作用;激光共聚焦扫描显微镜观察联合用药对细胞的诱导作用及在... 目的:研究替莫唑胺联合姜黄素用药对C6胶质瘤细胞的抑制作用和诱导凋亡作用。方法:SRB法考察替莫唑胺联合姜黄素对C6细胞的抑制作用;流式细胞法检测联合用药对C6细胞的凋亡作用;激光共聚焦扫描显微镜观察联合用药对细胞的诱导作用及在细胞中的定位作用。结果:SRB法结果显示替莫唑胺联合姜黄素在48 h时对C6细胞的抑制率为(91.22±0.51)%,显著高于24 h的抑制率(83.66±0.18)%(P<0.05);流式细胞仪检测结果表明,替莫唑胺(10μmol/L)联合姜黄素(5μmol/L)用药时C6细胞的早期凋亡率为(33.15±0.79)%;通过激光共聚焦扫描显微镜观察,姜黄素联合替莫唑胺组诱导C6细胞的凋亡细胞数量多于游离药物组。结论:替莫唑胺联合姜黄素用药能够抑制C6细胞的生长,同时可诱导C6细胞的凋亡。 展开更多
关键词 替莫唑胺 姜黄素 c6胶质瘤细胞 凋亡 抑制率
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键合紫杉醇的纳米胶束与C6胶质瘤细胞的相互作用 被引量：6
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作者 王占峰 罗毅男 +3 位作者 郑勇辉 韩海玲 洪新雨 景遐斌 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2008年第8期1671-1676,共6页
制备了键合紫杉醇(PTX)的聚乙二醇-聚乳酸嵌段共聚物(PEG-PLA/PTX)的纳米胶束,采用四氮唑(MTT)比色法、流式细胞术、透射电镜及激光共聚焦显微镜等技术,考察了PEG-PLA/PTX胶束对C6胶质瘤细胞的影响,包括C6细胞超微结构的变化和细胞周期... 制备了键合紫杉醇(PTX)的聚乙二醇-聚乳酸嵌段共聚物(PEG-PLA/PTX)的纳米胶束,采用四氮唑(MTT)比色法、流式细胞术、透射电镜及激光共聚焦显微镜等技术,考察了PEG-PLA/PTX胶束对C6胶质瘤细胞的影响,包括C6细胞超微结构的变化和细胞周期的改变,以及纳米颗粒在细胞内的分布,探讨了PEG-PLA/PTX胶束对肿瘤细胞的作用机理.结果表明,PEG-PLA/PTX胶束进入到C6细胞内,聚集于细胞浆中,通过与细胞核中DNA的作用改变细胞生长的周期,造成在G2-M期的阻滞,引起细胞的凋亡.因此,PEG-PLA/PTX胶束有望用于脑胶质瘤的化疗. 展开更多
关键词 键合紫杉醇 聚乙二醇-聚乳酸嵌段共聚物 流式细胞术 透射电镜 激光共聚焦显微镜 c6胶质瘤 细胞 诱导凋亡 细胞周期
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全反式维甲酸诱导大鼠C6脑胶质瘤细胞凋亡的实验研究 被引量：6
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作者 綦斌 谭岩 +3 位作者 罗毅男 付双林 毕春华 田宇 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期44-48,共5页
目的:探讨全反式维甲酸对大鼠C6脑胶质瘤细胞的增殖抑制及其分子机制。方法:MTT法检测全反式维甲酸作用于大鼠C6脑胶质瘤细胞后,观察其对细胞增殖抑制率的影响。流式细胞仪观察肿瘤细胞周期及凋亡率的变化。电镜观察C6细胞超微结构变化... 目的:探讨全反式维甲酸对大鼠C6脑胶质瘤细胞的增殖抑制及其分子机制。方法:MTT法检测全反式维甲酸作用于大鼠C6脑胶质瘤细胞后,观察其对细胞增殖抑制率的影响。流式细胞仪观察肿瘤细胞周期及凋亡率的变化。电镜观察C6细胞超微结构变化。Western blot法在不同时间点对凋亡相关基因caspase-3活性蛋白产物的表达进行了检测。结果:MTT结果表明ATRA对C6细胞的抑制作用具有时间和浓度依赖性。流式细胞仪检测证明与对照组相比,处理组C6细胞发生G1期阻滞;S、G2期细胞比例下降;细胞出现亚二倍峰,凋亡比例明显增加。电镜下全反式维甲酸作用72h后处理组C6细胞呈凋亡改变:如核固缩、染色质趋边凝聚。Western blot检测发现,处理组出现了caspase-3蛋白活性裂解片段。结论:全反式维甲酸抑制C6脑胶质瘤细胞生长,全反式维甲酸抑制脑胶质瘤的作用机理可能至少通过改变细胞周期分布、诱导凋亡来实现。 展开更多
关键词 c6脑胶质瘤 凋亡 全反式维甲酸 CASPASE-3
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C6脑胶质瘤动物模型肿瘤细胞的超微结构观察 被引量：5
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作者 赵世光 张建华 +3 位作者 姜宝红 吴振铎 谢向晨 李红 《电子显微学报》 CAS CSCD 2000年第1期23-27,共5页
本文对C6脑胶质瘤动物模型肿瘤标本进行了超微结构观察,以判定肿瘤生长方式及恶性程度。取成年雄性Wistar大鼠作为实验对象,采用立体定向方法将对数生长期的C6胶质瘤细胞悬液(1×106ml)注入靶点。2～3周后手术切除肿瘤并进行电镜标... 本文对C6脑胶质瘤动物模型肿瘤标本进行了超微结构观察,以判定肿瘤生长方式及恶性程度。取成年雄性Wistar大鼠作为实验对象,采用立体定向方法将对数生长期的C6胶质瘤细胞悬液(1×106ml)注入靶点。2～3周后手术切除肿瘤并进行电镜标本制备,H600A型透射电镜观察。观察结果显示:肿瘤中心区有两种肿瘤细胞核型;不规则核型大于55%,细胞浆结构发育较差,核浆比例明显大于1。肿瘤与正常脑组织无明显边界,亦无包膜,呈浸润型生长,病理分级约有Grade～(WHO1993)。我们认为:C6细胞脑胶质瘤动物模型超微结构的观察,对进一步研究人类脑胶质瘤的恶性程度。 展开更多
关键词 c6细胞 胶质瘤 超微结构 肿瘤细胞 脑
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C6细胞肝与脾原位接种模型的建立及比较 被引量：5
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作者 李世宁 阮思蓓 +5 位作者 朱小霞 张翠薇 熊小明 倪江涛 张元 唐明希 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期280-283,共4页
目的探讨大鼠肝癌细胞系C6肝与脾原位接种成瘤在不同内环境情况下对肿瘤发生与侵袭转移等能力的影响,并筛选最佳C6肝细胞癌肺转移动物模型。方法 C6进行体外培养。将雌性BALB/cA裸鼠随机分为肝与脾原位接种2组。观察裸鼠C6成瘤率、裸鼠... 目的探讨大鼠肝癌细胞系C6肝与脾原位接种成瘤在不同内环境情况下对肿瘤发生与侵袭转移等能力的影响,并筛选最佳C6肝细胞癌肺转移动物模型。方法 C6进行体外培养。将雌性BALB/cA裸鼠随机分为肝与脾原位接种2组。观察裸鼠C6成瘤率、裸鼠存活率、肿瘤病理学特点和远处脏器癌细胞转移等情况。结果肝原位接种组成瘤率100%,肿瘤呈结节状膨胀性生长,对周围肝组织和腹壁有粘连、侵袭,肺转移率100%。脾原位接种组脾成瘤率100%,肿瘤呈结节状膨胀性生长,对周围组织和腹壁亦有粘连、侵袭,肝、肺转移率分别为100%和71.4%。结论 C6细胞肝和脾原位接种均易成瘤和转移,可作为肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)体内研究和转移模型。脾原位接种模型可能与HCC自发性肿瘤发生和转移的生物学特性更相似,更适合于HCC发生和转移的机制,以及治疗干预等研究。 展开更多
关键词 肝细胞肿瘤 c6肝癌细胞系 癌发生 转移 原位移植 动物模型
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Wistar大鼠C6胶质瘤脑移植模型的应用 被引量：6
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作者 易林华 傅相平 +1 位作者 李安民 闫润民 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期277-279,共3页
目的通过观察C6胶质瘤大鼠脑移植模型,了解该模型的生物学特点,以帮助实验中有效应用。方法 Wistar大鼠20只,将活性较好的C6胶质瘤细胞微量移植入大鼠大脑半球,观察肿瘤生长特点及行为学改变。结果肿瘤移植后第3天,TW2即可出现轻微高信... 目的通过观察C6胶质瘤大鼠脑移植模型,了解该模型的生物学特点,以帮助实验中有效应用。方法 Wistar大鼠20只,将活性较好的C6胶质瘤细胞微量移植入大鼠大脑半球,观察肿瘤生长特点及行为学改变。结果肿瘤移植后第3天,TW2即可出现轻微高信号改变。15/18的大鼠在第5天至少能看到2个层面的信号改变。16/18的大鼠在第11天能看见实质性肿瘤。13/18的大鼠第14天生长至半侧大脑的1/2。14/18的大鼠第20天大部分肿瘤达到半侧大脑的2/3,部分生长至对侧半球。结论实验可能的最佳时间窗在14～18 d。同时,肿瘤移植的初始细胞浓度、细胞活性和移植部位可能也对实验时间窗会有较大影响。 展开更多
关键词 c6胶质瘤 移植模型 疾病模型 动物 磁共振成像 实验时间窗
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