Bacillus subtilis B2产1-脱氧野尻霉素(DNJ)发酵条件优化 被引量：7

1

作者 朱运平 李秀婷 李里特 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第17期290-293,共4页

为探索制备含有1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojimycin,DNJ)的降血糖功能性食品的新方法,以产DNJ的菌株Bacillus subtilisB2为初始菌株,以价廉的农产品加工副产物豆渣为原料,通过对发酵条件的优化,获得富含功能因子DNJ的发酵液。结果表明:接... 为探索制备含有1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojimycin,DNJ)的降血糖功能性食品的新方法,以产DNJ的菌株Bacillus subtilisB2为初始菌株,以价廉的农产品加工副产物豆渣为原料,通过对发酵条件的优化,获得富含功能因子DNJ的发酵液。结果表明:接种量对α-葡萄糖苷酶抑制活性影响不明显,当接种量大于104个/mL时,发酵液的α-葡萄糖苷酶抑制活性均在20以上。而豆渣浓度、发酵温度、培养基初始pH值及发酵时间对发酵液α-葡萄糖苷酶抑制活性影响较大,在豆渣质量浓度30mg/mL,初始pH值6～8,发酵温度40℃的条件下发酵48h,发酵液表现出较高的α-葡萄糖苷酶抑制活性。以Bacillus subtilisB2发酵豆渣的发酵液为原料开发含DNJ的降糖功能食品,可以大大提高豆渣的利用价值,为降糖功能食品的开发利用开辟新途径。 展开更多

关键词 1-脱氧野尻霉素 bacillus subtilis B2 豆渣 降血糖 功能性食品

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menD表达强度对枯草芽孢杆菌中维生素K2产量的影响

2

作者 黄俊宝 黄茜琳 +7 位作者 陈宇 高旭丽 罗雅妮 陶伟 郭明雨 刘永圆 吴晶 刘艳 《食品与发酵工业》 CAS 北大核心 2025年第1期32-40,共9页

维生素K2(Vitamin K2,MK)是一种重要的天然化合物,在治疗多种疾病方面都有着重要的作用。为探究枯草芽孢杆菌甲萘醌途径中关键基因menD表达量的不同对于细菌生长、生物膜形态与MK合成的影响,以枯草芽孢杆菌168(Bacillus subtilis 168,BS... 维生素K2(Vitamin K2,MK)是一种重要的天然化合物,在治疗多种疾病方面都有着重要的作用。为探究枯草芽孢杆菌甲萘醌途径中关键基因menD表达量的不同对于细菌生长、生物膜形态与MK合成的影响,以枯草芽孢杆菌168(Bacillus subtilis 168,BS168)为出发菌株,构建BS168-ΔmenD、BS168-P_(43)-menD、BS168-P_(xylA)-menD突变菌株,使用HPLC检测菌株中MK的含量,使用western-blot检测蛋白质的表达强度,以确定menD在枯草芽孢杆菌中对于MK合成的作用。研究发现,BS168-ΔmenD菌株生长缓慢,无法很好的产生生物膜,在培养基中需要添加甲萘醌标准品细胞才能生长;BS168-P_(43)-menD、BS168-P_(xylA)-menD突变菌株的生物膜和MK的含量与原始菌株都有较为显著的差异。静态发酵时,孔板中重组菌株BS168-P_(43)-menD、BS168-P_(xylA)-menD生物膜的形成量和褶皱程度相较于原始菌株得到较大的提升,BS168-P_(43)-menD、BS168-P_(xylA)-menD重组菌株的生物膜形成量分别为原始菌株的1.36倍与1.59倍,同时,BS168-P_(43)-menD、BS168-P_(xylA)-menD MK产量分别为原始菌株的1.64倍和1.87倍,BS168-P_(xylA)-menD的最大产量达39.27 mg/L。结果表明,作为枯草芽孢杆菌中MK合成途径的关键酶,menD的表达量是影响枯草芽孢杆菌中生物膜与MK形成的重要因素。 展开更多

关键词 枯草芽孢杆菌 维生素K2 启动子 表达强度 菌株选育

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枯草杆菌二联活菌肠溶胶囊调节2型糖尿病合并昼夜节律紊乱小鼠糖脂代谢的作用机制

3

作者 韩瑞敏 赵曼可 +3 位作者 袁俊芳 史振红 王珍 王德峰 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第7期1490-1497,共8页

目的分析枯草杆菌二联活菌肠溶胶囊(LCBE)对2型糖尿病合并昼夜节律紊乱糖脂代谢的影响以及作用机制。方法将KM小鼠随机分为3组,正常组8只,给予正常饲料喂养,高脂组8只,给予高脂饲料喂养,节律干预组16只,给予节律干预和高脂喂养,8周后给... 目的分析枯草杆菌二联活菌肠溶胶囊(LCBE)对2型糖尿病合并昼夜节律紊乱糖脂代谢的影响以及作用机制。方法将KM小鼠随机分为3组,正常组8只,给予正常饲料喂养,高脂组8只,给予高脂饲料喂养,节律干预组16只,给予节律干预和高脂喂养,8周后给予链脲佐菌素100 mg/kg腹腔注射,将节律干预糖尿病造模成功的小鼠随机分为2组,灌胃干预的2型糖尿病合并昼夜节律紊乱组(n=8)和2型糖尿病合并昼夜节律紊乱对照组(n=8),给予灌胃干预组225 mg/kg的LCBE灌胃干预,其余3组给予等体积的生理盐水,持续8周。使用鱼跃血糖仪测小鼠血糖,ELISA法检测Bmal 1、PER 2、胰岛素、C肽和血脂水平,HE染色观察小鼠结肠变化,油红O染色观察对肝脏脂代谢的影响,液相色谱-质谱法检测粪便短链脂肪酸的水平,qPCR和Western blotting法检测小鼠GPR43和GLP-1基因及蛋白表达情况。结果与CRD-DM组比较,LCBE-CRD-DM组体质量、周期节律调节因子2(PER2)、胰岛素、C肽、T-CHO、TC和LDL-C水平明显下降(P<0.001),Bmal 1和HDL-C水平明显升高(P<0.001);灌胃干预后,LCBE-CRD-DM组短链脂肪酸、GPR43和GLP-1基因和蛋白表达水平明显高于CRD-DM组(P<0.001)。结论LCBE能够降低节律紊乱2型糖尿病的体质量,改善小鼠的血脂水平,LCBE对节律紊乱2型糖尿病小鼠糖脂代谢的影响可能与SCFAs/GPR43/GLP-1通路有关。 展开更多

关键词 2型糖尿病 昼夜节律 枯草杆菌二联活菌肠溶胶囊 短链脂肪酸 糖脂代谢

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内生枯草芽孢杆菌BS-2防治荔枝霜疫病及其生化机理 被引量：8

4

作者 蔡学清 胡方平 +2 位作者 陈炜 林娜 林建强 《热带作物学报》 CSCD 2010年第2期241-247,共7页

研究内生枯草芽孢杆菌BS-2(Bacillus subtilis)菌株对荔枝采后果实霜疫病的防治效果,及其对体内活性氧代谢(SOD、POD、CAT、MDA、超氧阴离子自由基的产生速率)和病程相关蛋白(β-1,3葡聚糖酶活性、几丁质酶活性)等的影响。结果表明,BS-... 研究内生枯草芽孢杆菌BS-2(Bacillus subtilis)菌株对荔枝采后果实霜疫病的防治效果,及其对体内活性氧代谢(SOD、POD、CAT、MDA、超氧阴离子自由基的产生速率)和病程相关蛋白(β-1,3葡聚糖酶活性、几丁质酶活性)等的影响。结果表明,BS-2菌株对荔枝霜疫病具有较好的防治效果,接种处理后6d,其防治效果为37.83%;经内生细菌处理的荔枝果皮的β-1,3葡聚糖酶活性、几丁质酶活性、CAT和SOD酶活性均比病菌处理的高,而POD、PPO酶活性以及膜透性、MDA含量与超氧阴离子自由基的产生速率却比病菌处理的低。当接种后6d,经内生细菌处理的荔枝果皮的β-1,3葡聚糖酶活性、几丁质酶活性和SOD酶活性分别比病菌处理的高70.73%、30.76%和297.43%;而POD、PPO酶活性和超氧阴离子自由基的产生速率却分别比病菌处理的低15.11%、4.96%和28.95%。 展开更多

关键词 内生枯草芽孢杆菌bs-2 防治效果 防病机制 荔枝霜疫病

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枯草芽孢杆菌PW2挥发性产物对黄曲霉的抑制作用 被引量：1

5

作者 张凯歌 魏琛 +4 位作者 余璐 杜明艳 李晓冉 林亲录 王青云 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期122-129,共8页

为探寻安全、高效的黄曲霉新型抑制物,采用顶空固相微萃取-气质联用(HS-SPME-GC-MS)技术对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)PW2所产具有抗霉活性的挥发性有机化合物(volatile organic compounds,VOCs)进行了成分鉴定,并利用平板对扣法... 为探寻安全、高效的黄曲霉新型抑制物,采用顶空固相微萃取-气质联用(HS-SPME-GC-MS)技术对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)PW2所产具有抗霉活性的挥发性有机化合物(volatile organic compounds,VOCs)进行了成分鉴定,并利用平板对扣法从鉴定出的成分中筛选具有强抗霉活性的目标化合物,通过平板对扣法和96孔板梯度稀释法测定目标化合物对黄曲霉的最小抑菌体积分数(MIC),使用黄曲霉毒素B_(1)(aflatoxin B_(1),AFB_(1))ELISA检测试剂盒分析了目标化合物对黄曲霉产AFB_(1)的抑制作用,使用扫描电子显微镜(scanning electron microscope,SEM)观察受试黄曲霉孢子形态的变化和采用分光光度法测定受试黄曲霉细胞膜麦角甾醇相对含量,以探讨抗霉机理。结果显示,从PW2所产VOCs中共鉴定出41种组分,并从中筛选出异辛醇为目标化合物;平板对扣法和96孔板梯度稀释法测得异辛醇对黄曲霉的MIC分别为0.169μL/mL和6.25μL/mL;PDB培养基中异辛醇体积分数分别为3.13、6.25、12.50μL/mL时,均能有效抑制AFB_(1)的产生,且随异辛醇体积分数的升高,抑制效果增强;异辛醇处理可导致黄曲霉孢子表面凹陷和孢子破裂,并且影响细胞膜中麦角甾醇的相对含量,造成细胞膜受损。该研究可为开发以异辛醇为功能成分的黄曲霉抑制剂提供理论参考。 展开更多

关键词 枯草芽孢杆菌 挥发性有机化合物 异辛醇 黄曲霉

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多粘类芽孢杆菌BRF-1和枯草芽孢杆菌BRF-2对黄瓜和番茄枯萎病的防治效果 被引量：70

6

作者 陈雪丽 王光华 +1 位作者 金剑 吕宝林 《中国生态农业学报》 CAS CSCD 2008年第2期446-450,共5页

采用室内培养方法，对生防细菌多粘类芽孢杆菌BRF-1和枯草芽孢杆菌BRF-2不同稀释倍数的代谢产物抑制黄瓜尖孢镰刀菌、番茄枯萎病菌分生孢子萌发和菌丝生长的试验结果表明，当两菌株代谢产物稀释5倍时，对分生孢子萌发的抑制率达到80％... 采用室内培养方法，对生防细菌多粘类芽孢杆菌BRF-1和枯草芽孢杆菌BRF-2不同稀释倍数的代谢产物抑制黄瓜尖孢镰刀菌、番茄枯萎病菌分生孢子萌发和菌丝生长的试验结果表明，当两菌株代谢产物稀释5倍时，对分生孢子萌发的抑制率达到80％以上；两菌株代谢产物在稀释2倍和5倍时，对2种病原真菌菌丝生长的抑制率在40％-80％之间，与对照差异极显著（P〈0．01）。盆栽试验表明，BRF-1和BRF-2生防细菌菌悬液及其无菌代谢物对黄瓜和番茄枯萎病不仅具有较好的防治效果，而且具有明显的促进生长作用。 展开更多

关键词 多粘类芽孢杆菌BRF-1 枯草芽孢杆菌BRF-2 黄瓜枯萎病 番茄枯萎病 生物量 生物防治

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纳豆芽孢杆菌B4对Caco-2细胞活性、黏附与细胞因子分泌的影响 被引量：5

7

作者 尚沁沁 黄琴 +3 位作者 徐歆 史艳云 李卫芬 余东游 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期279-286,共8页

本试验以Caco-2细胞为体外模型研究纳豆芽孢杆菌B4对其活性、黏附与细胞因子分泌的影响。采用台盼蓝排斥试验和乳酸脱氢酶细胞毒性检测研究纳豆芽孢杆菌B4对Caco-2细胞活性的影响;采用荧光标记法评价大肠杆菌K88和霍乱沙门氏菌的黏附性... 本试验以Caco-2细胞为体外模型研究纳豆芽孢杆菌B4对其活性、黏附与细胞因子分泌的影响。采用台盼蓝排斥试验和乳酸脱氢酶细胞毒性检测研究纳豆芽孢杆菌B4对Caco-2细胞活性的影响;采用荧光标记法评价大肠杆菌K88和霍乱沙门氏菌的黏附性能,并通过竞争、排斥和置换试验检测纳豆芽孢杆菌B4对这2株病原菌黏附的阻断作用;采用酶联免疫试剂盒测定Caco-2细胞分泌的细胞因子含量。结果表明:1)纳豆芽孢杆菌B4对Caco-2细胞存活率无显著影响(P>0.05),且对其无毒害作用。2)纳豆芽孢杆菌B4对大肠杆菌K88和霍乱沙门氏菌黏附Caco-2细胞的黏附率无显著影响(P>0.05),且对这2株病原菌黏附Caco-2细胞无阻断作用。3)纳豆芽孢杆菌B4极显著提高了Caco-2细胞分泌促炎细胞因子增殖诱导配体含量(P<0.01),对白细胞介素-6和白细胞介素-8含量无显著影响(P>0.05),极显著降低了Caco-2细胞分泌抗炎细胞因子白细胞介素-10含量(P<0.01)。综上所述,纳豆芽孢杆菌B4对Caco-2细胞无毒性,对大肠杆菌K88和霍乱沙门氏菌黏附Caco-2细胞无阻断作用,可通过调节Caco-2细胞的细胞因子分泌发挥一定的免疫功能。 展开更多

关键词 纳豆芽孢杆菌 CACO-2细胞 细胞活力 黏附 细胞因子

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枯草芽孢杆菌拮抗病原菌黏附和入侵Caco-2细胞的研究 被引量：4

8

作者 叶小兰 李鹏成 杨倩 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期81-84,共4页

为探讨枯草芽孢杆菌及其培养上清液对产肠毒素大肠杆菌和鼠伤寒沙门氏菌的抗黏附作用,本试验将产肠毒素大肠杆菌K88或鼠伤寒沙门氏菌SL1344与枯草芽孢杆菌及其培养上清液先后加到Caco-2细胞上,用活菌计数的方法观察产肠毒素大肠杆菌、... 为探讨枯草芽孢杆菌及其培养上清液对产肠毒素大肠杆菌和鼠伤寒沙门氏菌的抗黏附作用,本试验将产肠毒素大肠杆菌K88或鼠伤寒沙门氏菌SL1344与枯草芽孢杆菌及其培养上清液先后加到Caco-2细胞上,用活菌计数的方法观察产肠毒素大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌及枯草芽孢杆菌黏附Caco-2细胞的情况。结果显示:在排斥、竞争和置换试验中,枯草芽孢杆菌菌体均能够明显抑制K88和SL1344的黏附及SL1344的内化,在竞争试验时K88的黏附减少了71.2%、SL1344的黏附及内化减少了92.9%,但枯草芽孢杆菌的培养上清液只有在竞争试验中才能明显抑制K88和SL1344的黏附及SL1344内化。提示:枯草芽孢杆菌通过与病原菌竞争黏附位点来抑制病原菌对Caco-2细胞的黏附和入侵。 展开更多

关键词 病原菌 枯草芽孢杆菌 培养上清液 CACO-2细胞 黏附 入侵

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枯草杆菌Ki－2－132高表达遗传工程系统的研究 被引量：2

9

作者 潘学峰 章银梅 汤懋 《高技术通讯》 CAS CSCD 1996年第6期46-51,共6页

利用芽孢杆菌多效调控基因ｈｐｒ、ｄｅｑＱａ、ｄｅｇＲ、ｄｅｇＵ／５３２（Ｈｙ）等和枯草杆菌Ｋｉ－２－１３２自身的积生孢、感受态相关基因的协调作用，构建了系列的高表达遗传工程宿主。这些宿主对于ＡＰｒＥ都实现了较高水平的... 利用芽孢杆菌多效调控基因ｈｐｒ、ｄｅｑＱａ、ｄｅｇＲ、ｄｅｇＵ／５３２（Ｈｙ）等和枯草杆菌Ｋｉ－２－１３２自身的积生孢、感受态相关基因的协调作用，构建了系列的高表达遗传工程宿主。这些宿主对于ＡＰｒＥ都实现了较高水平的表达。其中，由ｈｐｒ和ｃｏｍ、ｓｐｏ等配合的宿主表达ＡｐｒＥ的能力比野生型宿主提高了１００—２００倍。 展开更多

关键词 枯草杆菌 调控基因 遗传工程系统

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产奶香枯草芽孢杆菌的筛选及其在雪茄烟叶中的应用

10

作者 李天笑 张大元 +5 位作者 王跃 雷金山 曹源 许春平 张倩颖 李东亮 《轻工学报》 北大核心 2025年第2期90-99,共10页

为解决国产雪茄烟叶原料香气量不足、刺激感较强等问题,通过嗅香评价筛选烟草源特色产奶香菌株,利用显微特征和16S rDNA测序进行菌株鉴定,结合机制雪茄加香感官评价得分和菌液OD_(600)确定最优菌株培养条件,利用GC-MS分析确定发酵上清... 为解决国产雪茄烟叶原料香气量不足、刺激感较强等问题,通过嗅香评价筛选烟草源特色产奶香菌株,利用显微特征和16S rDNA测序进行菌株鉴定,结合机制雪茄加香感官评价得分和菌液OD_(600)确定最优菌株培养条件,利用GC-MS分析确定发酵上清液中的关键香味成分,并进行国产雪茄烟叶原料发酵增香应用研究。结果表明:筛选到1株产奶香细菌(F2A),经鉴定其为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis);该菌株适宜的培养时间为24 h、培养温度为32℃,培养基中碳源和无机盐为葡萄糖和氯化钙;菌株发酵上清液的主要奶香和甜香成分为2-羟基-3-甲基-2-环戊烯酮,且含量较高(7.58μg/mL);经枯草芽孢杆菌F2A发酵处理后的楚雪14中,香兰素、香豆素、6-乙基-5,6-二氢吡喃-2-酮、2-羟基-3-甲基-2-环戊烯酮等奶香和甜香成分含量均显著增加,奶香香韵及甜感提升明显,巨豆三烯酮、3-羟基-β-大马士革酮、新植二烯等成分含量增加,清香和花香气息增强;由发酵后的楚雪14制成的雪茄中,奶香和甜香香韵显著提升,刺激感降低。该研究首次发现枯草芽孢杆菌F2A能产生2-羟基-3-甲基-2-环戊烯酮等奶甜香香韵成分,可为国产雪茄烟叶品质提升提供新的途径和理论支持。 展开更多

关键词 枯草芽孢杆菌 奶香香韵 雪茄烟叶 2-羟基-3-甲基-2-环戊烯酮

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枯草芽孢杆菌PW2产挥发性物质对赭曲霉的抑制作用 被引量：6

11

作者 余璐 魏琛 +2 位作者 张凯歌 林亲录 王青云 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第14期125-133,共9页

采用固相微萃取-气相色谱-质谱联用技术对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)PW2菌株所产抗霉活性挥发性物质(volatile compound,VC)进行成分鉴定,选取所鉴定出的单个成分采用平板对扣法测定其对赭曲霉(Aspergillus ochraceus)的抑制率,... 采用固相微萃取-气相色谱-质谱联用技术对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)PW2菌株所产抗霉活性挥发性物质(volatile compound,VC)进行成分鉴定,选取所鉴定出的单个成分采用平板对扣法测定其对赭曲霉(Aspergillus ochraceus)的抑制率,以活性最强的VC作为关键抗霉挥发性物质(key antifungal volatile compound,KAVC),进一步研究KAVC对赭曲霉生长和产毒的作用效果及机理。结果表明:PW2菌株所产VC中鉴定出酯、醛、烷烃、醇、酮、酸、烯烃等41种成分,单个成分抗霉实验发现异辛醇对赭曲霉的抑制活性最强。在接触条件下异辛醇剂量为1562.5μL/L时可以完全抑制赭曲霉生长,且使赭曲霉毒素A含量降低23.67%。在挥发条件下异辛醇剂量为112μL/L时可以完全抑制赭曲霉生长,281μL/L时可以完全杀死赭曲霉。经异辛醇处理后的赭曲霉孢子外观褶皱、凹陷和干瘪,且细胞膜完整性被破坏,菌丝麦角甾醇含量降低了42.68%~65.40%,胞内核酸和蛋白泄漏。说明异辛醇能够通过破坏赭曲霉细胞膜抑杀赭曲霉,可为其在食品防霉中的应用提供理论依据。 展开更多

关键词 枯草芽孢杆菌 挥发性物质 异辛醇 赭曲霉 赭曲霉毒素A 抑制作用

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枯草芽孢杆菌结合3506-2基质使用防治甘蓝根肿病药效试验初报 被引量：5

12

作者 王贵斌 马金彩 +5 位作者 杨红芬 张轴 徐得云 杨晓龙 吴毅歆 何月秋 《农药科学与管理》 CAS 2017年第4期58-62,共5页

本研究比较了5种不同措施防治甘蓝根肿痛的效果,结果表明:采用枯草芽孢杆菌粉剂(2.0×10~6cfu/g)400倍液结合3506—2基质处理防治根肿病平均发病率最低(13.70%)、病情指数最低(5.23)、防治效果最好(79.12%)、产量最高(8 094.05kg/66... 本研究比较了5种不同措施防治甘蓝根肿痛的效果,结果表明:采用枯草芽孢杆菌粉剂(2.0×10~6cfu/g)400倍液结合3506—2基质处理防治根肿病平均发病率最低(13.70%)、病情指数最低(5.23)、防治效果最好(79.12%)、产量最高(8 094.05kg/667m^2),而且无农药残留,成本约180元/667m^2,符合生产绿色甘蓝食品发展方向,建议在大田防治甘蓝根肿痛中推广应用。 展开更多

关键词 枯草芽孢杆菌粉剂(2.0×10^6cfu/g) 3506-2基质 甘蓝根肿病 药效

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枯草芽孢杆菌菌株ZT4-2电击转化体系的建立

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作者 蔡露 秦艳秋 +3 位作者 高坦坦 王旭东 任争光 赵晓燕 《北京农学院学报》 2022年第1期32-36,共5页

【目的】建立枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)菌株ZT4-2的高效电击转化体系。【方法】带有荧光蛋白标记的穿梭质粒pGFP78,通过电击转化法将其转入枯草芽孢杆菌菌株ZT4-2。【结果】菌株培养阶段、感受态细胞浓度、感受态细胞量、质粒体... 【目的】建立枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)菌株ZT4-2的高效电击转化体系。【方法】带有荧光蛋白标记的穿梭质粒pGFP78,通过电击转化法将其转入枯草芽孢杆菌菌株ZT4-2。【结果】菌株培养阶段、感受态细胞浓度、感受态细胞量、质粒体积量、转化电压等条件的不同,会对电击转化效率造成影响。其中试验条件:制备感受态细胞的菌株培养阶段的OD_(600 nm)值=1.0,重悬菌体时每100mL起始菌液加入600μL的40%PEG6000;电击转化体系中,感受态细胞量200μL,质粒体积10μL,转化电压2.5kV。最高转化效率可达6823.67CFU/μg。【结论】建立了枯草芽孢杆菌菌株ZT4-2的电击转化体系,电击转化效率较高。 展开更多

关键词 枯草芽孢杆菌菌株ZT4-2 电击转化 聚乙二醇 体系建立

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2-羟基查尔酮类化合物的合成及体外抗菌活性评价

14

作者 胡家栋 文雯 +2 位作者 范晨 陈乐 江宣 《化学与生物工程》 CAS 2021年第3期29-32,58,共5页

以取代水杨醛(Ⅲ)和膦叶立德(Wittig试剂,Ⅳ)为底物,通过Wittig反应合成了一系列2-羟基查尔酮类化合物(Ⅴ),并运用纸片扩散法对该系列化合物进行体外抗菌活性初筛。结果表明,化合物Ⅴe和Ⅴl均表现出对枯草芽孢杆菌的抗菌活性;同时,化合... 以取代水杨醛(Ⅲ)和膦叶立德(Wittig试剂,Ⅳ)为底物,通过Wittig反应合成了一系列2-羟基查尔酮类化合物(Ⅴ),并运用纸片扩散法对该系列化合物进行体外抗菌活性初筛。结果表明,化合物Ⅴe和Ⅴl均表现出对枯草芽孢杆菌的抗菌活性;同时,化合物Ⅴe还表现出对金黄色葡萄球菌、蜡状芽孢杆菌和大肠杆菌的抗菌活性。这一发现为该类化合物的抗菌活性研究提供了参考。 展开更多

关键词 2-羟基查尔酮 抗菌活性 WITTIG反应 枯草芽孢杆菌

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重组枯草芽孢杆菌全细胞催化高效合成2′-脱氧腺苷

15

作者 陈伟 陈令伟 +1 位作者 李文超 郑玲辉 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第11期2436-2444,共9页

以枯草芽孢杆菌168(简写为BS)为宿主,以脱氧胸苷和腺嘌呤为底物,异源表达组合来源于大肠杆菌(E.coli)的嘧啶核苷磷酸化酶(PyNP)与嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)作为催化酶源,全细胞催化合成2′-脱氧腺苷(dA)。首先,以BS敲除内源性的PNP(由基因d... 以枯草芽孢杆菌168(简写为BS)为宿主,以脱氧胸苷和腺嘌呤为底物,异源表达组合来源于大肠杆菌(E.coli)的嘧啶核苷磷酸化酶(PyNP)与嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)作为催化酶源,全细胞催化合成2′-脱氧腺苷(dA)。首先,以BS敲除内源性的PNP(由基因deoD编码,Gene ID:940038)后的菌株BS0为出发菌株,经过PyNP1酶(来源于E.coli,Gene ID:948901)与PNP3酶(来源于E.coli,Gene ID:945654)的重组表达得到CW3,再优化PyNP1与PNP3的对核糖体结合位点(RBS)序列得到重组菌株CW3-3,在CW3-3作用下,dA的产量为133.4 g/L,脱氧胸苷的转化率为64.3%;其次,以CW3-3为出发菌株,利用互作短肽构建自组装多酶复合物,经过PyNP1酶N端融合RIAD,PNP3酶C端融合RIDD(其中RIAD和RIDD为互作短肽标签)处理后,PyNP1酶N端融合4个RIAD标签得到重组菌株CW17,在其作用下,dA的产量达到179.6 g/L,显著提升了底物转化率;最后,对重组菌株CW17全细胞催化条件细胞添加质量浓度及催化反应温度进行了优化,在细胞添加质量浓度为150g/L,反应温度50℃条件下,dA的产量达到200.3g/L,脱氧胸苷的转化率为96.6%。 展开更多

关键词 2′-脱氧腺苷 嘧啶核苷磷酸化酶 嘌呤核苷磷酸化酶 互作短肽 枯草芽孢杆菌 全细胞催化 生物工程

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二株石斑鱼源芽孢杆菌的生物学特征与益生性研究

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作者 邹文政 黄文树 +2 位作者 李忠琴 杨求华 张光明 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期775-786,共12页

为了解从云龙石斑鱼(Epinephelus moara♀×Epinephelus lanceolatus♂)肠道分离出的地衣芽孢杆菌GM-2(Bacillus subtilis GM-2)、枯草芽孢杆菌GM-39(Bacillus licheniformis GM-39)的生物学特征与益生特性,通过对胃肠液、pH、鱼胆... 为了解从云龙石斑鱼(Epinephelus moara♀×Epinephelus lanceolatus♂)肠道分离出的地衣芽孢杆菌GM-2(Bacillus subtilis GM-2)、枯草芽孢杆菌GM-39(Bacillus licheniformis GM-39)的生物学特征与益生特性,通过对胃肠液、pH、鱼胆汁的耐受性等试验进行生物学特征分析,并通过抑菌作用、黏附性、产酶活性、体外抗氧化等试验进行益生特性研究。结果显示,二株芽孢杆菌经人工胃肠液、5%鱼胆汁溶液分别处理1~3 h处理后,存活率分别达70%以上、80%以上以及50%;经不同pH生理盐水处理30 min后,二株菌的存活率分别从0逐渐提高到87.83%、88.25%;二株菌对18种抗生素均不产生耐药性,血琼脂平板培养均未出现溶血现象,菌悬液分别对6株指示菌有抑制作用;二株菌的自聚率达到30%以上,疏水率居于30%~50%;GM-39对黏液蛋白的黏附性显著强于GM-2;GM-39的产酶活力均高于GM-2;GM-2的羟基自由基清除能力和还原能力强于GM-39,而GM-39的DPPH自由基、超氧阴离子自由基的清除能力优于GM-2。结果表明:二株芽孢杆菌均具备较好的耐受性、安全性、抑菌性、产酶活力和抗氧化能力,因而二株芽孢杆菌均具有益生菌开发潜能,为其后续作为益生菌制剂的研究提供了科学理论依据。 展开更多

关键词 云龙石斑鱼 枯草芽孢杆菌GM-39 地衣芽孢杆菌GM-2 生物学特征 益生特性

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两步固态发酵法酿造功能性豆豉 被引量：3

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作者 龚福明 宋园亮 +3 位作者 张忠华 李晓然 罗义勇 柳陈坚 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期127-133,共7页

运用分离自云南传统发酵豆豉的Bacillus subtilis SP-8-5与Lactobacillus plantarum YM-5-2菌株对大豆进行两步固态混合发酵。首先,将菌株B.subtilis SP-8-5接种至经室温浸泡10 h(20℃,质量比为1∶3),110℃(20min)蒸煮处理并冷却至30℃... 运用分离自云南传统发酵豆豉的Bacillus subtilis SP-8-5与Lactobacillus plantarum YM-5-2菌株对大豆进行两步固态混合发酵。首先,将菌株B.subtilis SP-8-5接种至经室温浸泡10 h(20℃,质量比为1∶3),110℃(20min)蒸煮处理并冷却至30℃的大豆中,于26℃进行初步发酵42 h;随后再接种L.plantarum YM-5-2,并于30℃发酵2 d,最后置于4℃进行后发酵。经两步固态混合发酵处理后,得到一种纤溶活性较强,生产周期短,保质期相对较长,风味独特且易于被大众接受的新型功能性发酵豆豉。当后发酵时间为21 d时,样品豆豉中B.subtilisSP-8-5活菌数为(5.88±0.53)×108 CFU/g,而L.plantarum YM-5-2活菌数则高达(3.50±0.35)×1011 CFU/g,此时检测豆豉纤溶酶的纤溶圈直径高达(2.99±0.06)cm(37℃,静置培养48 h)。 展开更多

关键词 bacillus subtilis SP-8-5 LACTObacillus PLANTARUM YM-5-2 纤溶酶 两步固态发酵法 功能性发酵豆豉

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枯草芽孢杆菌对多环芳烃的降解能力研究 被引量：11

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作者 李丽 钟鸣 +3 位作者 周启星 李坤 杨铮 姜树坤 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2007年第4期62-64,71,共4页

从长期受多环芳烃污染的土壤中分离出1株菲降解菌——菌Ⅱ,经生理生化及16S rDNA分析鉴定,该菌株为枯草芽孢杆菌。在单基质菲、芘反应体系中,该菌株具有较强的降解能力。菌Ⅱ不但可以在高浓度的多环芳烃存在下生长良好而且对高浓度多环... 从长期受多环芳烃污染的土壤中分离出1株菲降解菌——菌Ⅱ,经生理生化及16S rDNA分析鉴定,该菌株为枯草芽孢杆菌。在单基质菲、芘反应体系中,该菌株具有较强的降解能力。菌Ⅱ不但可以在高浓度的多环芳烃存在下生长良好而且对高浓度多环芳烃有较高的降解能力。多环芳烃与重金属Cu2+的加入对多环芳烃降解菌有很大的影响。在Cu2+浓度小于15 mg/L时,菌Ⅱ能在以多环芳烃为唯一碳源的培养基中生长良好,Cu2+浓度过高将导致菌体死亡。 展开更多

关键词 多环芳烃 生物降解 枯草芽孢杆菌 铜离子

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枯草芽孢杆菌固态发酵产脂肽培养基优化及脂肽的初步鉴定 被引量：4

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作者 李萌 李丽 +1 位作者 张坦 牟海津 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2019年第6期198-204,共7页

利用枯草芽孢杆菌N-2,以豆粕为主要基质,优化固态发酵产抗菌脂肽以提高脂肽产量。利用高效液相色谱法对发酵产生的抗菌物质进行初步鉴定;随后通过Plackett-Burman设计法和响应面优化,对枯草芽孢杆菌产脂肽的关键因子进行筛选并优化最佳... 利用枯草芽孢杆菌N-2,以豆粕为主要基质,优化固态发酵产抗菌脂肽以提高脂肽产量。利用高效液相色谱法对发酵产生的抗菌物质进行初步鉴定;随后通过Plackett-Burman设计法和响应面优化,对枯草芽孢杆菌产脂肽的关键因子进行筛选并优化最佳培养基条件组合。结果表明,初步分析该抗菌物质主要成分为脂肽,其组分包括伊枯草菌素(m/z 1043.6、1057.5、1070.2、1084.0),丰原素(m/z 717.4、734.7);筛选确定MgSO_4、K_2HPO_4、FeSO_4添加量为3个影响发酵的显著性(p <0.05)因素,确定发酵培养基成分的最优组合为MgSO_4 0.39%、K_2HPO_4 1.70%、FeSO_4 0.13%,在其条件下脂肽的抑菌率达到75.62%±0.36%,该结果为脂肽的工业化生产奠定基础。 展开更多

关键词 枯草芽孢杆菌N-2 脂肽 发酵 抑菌活性

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枯草芽孢杆菌拮抗病原菌对细胞微丝的影响 被引量：1

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作者 叶小兰 李鹏成 杨倩 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期1150-1154,共5页

本研究旨在探讨枯草芽孢杆菌拮抗2种病原菌(鼠伤寒沙门氏菌和产肠毒素大肠杆菌)对人结肠癌细胞Caco-2细胞中微丝的影响。将枯草芽孢杆菌及上述2种病原菌加到Caco-2细胞上,用异硫氰酸荧光素-鬼笔环肽标记细胞微丝,在倒置荧光显微镜下观... 本研究旨在探讨枯草芽孢杆菌拮抗2种病原菌(鼠伤寒沙门氏菌和产肠毒素大肠杆菌)对人结肠癌细胞Caco-2细胞中微丝的影响。将枯草芽孢杆菌及上述2种病原菌加到Caco-2细胞上,用异硫氰酸荧光素-鬼笔环肽标记细胞微丝,在倒置荧光显微镜下观察细胞微丝的变化;利用Western blotting检测细胞微丝调节蛋白Rac1蛋白的表达变化。结果显示正常Caco-2细胞内微丝呈散在的平行排列;加鼠伤寒沙门氏菌后微丝呈小区域聚集;加产肠毒素大肠杆菌后细胞微丝重排聚集在细胞中央放射状分布或分布紊乱;单独加枯草芽孢杆菌后细胞微丝排列方式变化不大;同时分别加2种病原菌和枯草芽孢杆菌后,大部分的细胞内微丝排列整齐,只是在少部分细胞内存在微丝的聚集。产肠毒素大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌可使细胞微丝调节蛋白Rac1的表达显著上调,而枯草芽孢杆菌则可抑制病原菌对Rac1的影响。本试验证明产肠毒素大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌可影响细胞微丝的表达和分布;而枯草芽孢杆菌及其培养上清液可抑制病原菌的这种破坏作用。 展开更多

关键词 病原菌 枯草芽孢杆菌 CACO-2细胞 微丝

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