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Agrobacterium-meditated Genetic Transformation of an Upland Cotton(Gossypium hirsutum cv Coker 310) Using a Novel Bt Gene Cry2Ac
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作者 THIRUVENGADAM V RASHMI J A UDYASURIAN V BALASUBRAMANIAN P RAVEENDRAN T S 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2008年第S1期66-,共1页
The development of transgenic cotton varieties resistant to bollworms has been a major success of applying plant genetic engineering technology to agriculture,evidenced by phenomenal increase in
关键词 Using a Novel Bt Gene Cry2Ac agrobacterium-meditated genetic transformation of an Upland Cotton Gossypium hirsutum cv Coker 310
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Cloning and genetic transformation of a novel rice gene OsAPT2
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作者 WENG Man-li1,WANG Wang1,ZHOU Chun-jiang1,QIAO li-xian1,WANG Wei1,FENG Yan-bin1,DUAN De-lin2,DENG Qi-yun3,WANG Bin1(1.The State Key Laboratory of Plant Genomics,Institute of Genetics and Developmental Biology,CAS,Beijing,100101,China 2.Institute of Oceanology,Chinese Academy of Sciences,Qingdao 266071,China 3.Hunan Hybrid Rice Research Center,Changsha 410125,China) 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第S1期205-,共1页
A novel rice gene OsAPT2,which encodes a putative adenine phosphoribosyl transferase(APRT),was cloned.Its full-length cDNA is 1125bp,composing an ORF encoding 212 amino acid residues and a stop cordon,a 5' UTR of ... A novel rice gene OsAPT2,which encodes a putative adenine phosphoribosyl transferase(APRT),was cloned.Its full-length cDNA is 1125bp,composing an ORF encoding 212 amino acid residues and a stop cordon,a 5' UTR of 123 bp and a 3' UTR of 363 bp.The sequence data have been submitted to the DDBJ/EMBL/GenBank databases(accession number:AY238894).The deduced amino acid sequence of OsAPT2 is highly homologous to those of previously reported APRTs.The genomic OsAPT2 gene contains 7 exons and 6 introns.Its total length is 4758 bp.Then,an antisense expression vector of the full-length OsAPT2 cDNA was constructed and transformed into rice variety Taibei309 by Agrobacterium tumefaciens mediated transformation method.In total,650 T0 transgenic plants were obtained based on both antibiotic screening and specific PCR identification.One hundred individuals of them were selected and planted in Hainan Island.From those 11 male sterile lines with seed-setting rate lower than 3% in bagged spike were obtained.Results suggest that OsAPT2 is involved in male sterility.Nine of the 11 male sterile lines were constitutive sterile lines;two of the 11 male sterile lines were thermo-sensitive genic male sterile lines,which may be useful in hybride rice breeding. 展开更多
关键词 Cloning and genetic transformation of a novel rice gene OsAPT2 LENGTH UTR DDBJ CDNA gene
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Advances in Genetic Transformation of Tea(Camellia sinensis)
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作者 Ya-Ping Yang Yue-Rong Liang Xin-Qiang Zheng 《茶叶》 2013年第4期287-293,共7页
Long-term fertility cycle,low self-compatibility and short flowering period limited the tea breeding by conventional method.It is necessary to apply biotechnology,especially genetic transformation method,to obtain new... Long-term fertility cycle,low self-compatibility and short flowering period limited the tea breeding by conventional method.It is necessary to apply biotechnology,especially genetic transformation method,to obtain new mutants and to accelerate tea breeding.This paper reviews the status and progress in genetic transformation and related influencing factors.It has been noticed that tea genetic transformation has advantages in getting useful target mutants.The genetic transformation by Agrobacterium-mediated and gene gun methods are usually used.However,further research should be focused on improvement of plant regeneration. 展开更多
关键词 遗传转化方法 茶树育种 茶叶 农杆菌介导 生育周期 生物技术 影响因素 植株再生
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An Orthogonal Wavelet Transform Fractionally Spaced Blind Equalization Algorithm Based on the Optimization of Genetic Algorithm
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作者 廖娟 郭业才 季童莹 《Defence Technology(防务技术)》 SCIE EI CAS 2011年第2期65-71,共7页
An orthogonal wavelet transform fractionally spaced blind equalization algorithm based on the optimization of genetic algorithm(WTFSE-GA) is proposed in viewof the lowconvergence rate,large steady-state mean square er... An orthogonal wavelet transform fractionally spaced blind equalization algorithm based on the optimization of genetic algorithm(WTFSE-GA) is proposed in viewof the lowconvergence rate,large steady-state mean square error and local convergence of traditional constant modulus blind equalization algorithm(CMA).The proposed algorithm can reduce the signal autocorrelation through the orthogonal wavelet transform of input signal of fractionally spaced blind equalizer,and decrease the possibility of CMA local convergence by using the global random search characteristics of genetic algorithm to optimize the equalizer weight vector.The proposed algorithm has the faster convergence rate and smaller mean square error compared with FSE and WT-FSE.The efficiency of the proposed algorithm is proved by computer simulation of underwater acoustic channels. 展开更多
关键词 information processing technique genetic algorithm orthogonal wavelet transform fractionally spaced equalizer blind equalization underwater acoustic channel
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Adaptive template filter method for image processing based on immune genetic algorithm 被引量:1
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作者 谭冠政 吴建华 +1 位作者 范必双 江斌 《Journal of Central South University》 SCIE EI CAS 2010年第5期1028-1035,共8页
To preserve the original signal as much as possible and filter random noises as many as possible in image processing,a threshold optimization-based adaptive template filtering algorithm was proposed.Unlike conventiona... To preserve the original signal as much as possible and filter random noises as many as possible in image processing,a threshold optimization-based adaptive template filtering algorithm was proposed.Unlike conventional filters whose template shapes and coefficients were fixed,multi-templates were defined and the right template for each pixel could be matched adaptively based on local image characteristics in the proposed method.The superiority of this method was verified by former results concerning the matching experiment of actual image with the comparison of conventional filtering methods.The adaptive search ability of immune genetic algorithm with the elitist selection and elitist crossover(IGAE) was used to optimize threshold t of the transformation function,and then combined with wavelet transformation to estimate noise variance.Multi-experiments were performed to test the validity of IGAE.The results show that the filtered result of t obtained by IGAE is superior to that of t obtained by other methods,IGAE has a faster convergence speed and a higher computational efficiency compared with the canonical genetic algorithm with the elitism and the immune algorithm with the information entropy and elitism by multi-experiments. 展开更多
关键词 image characteristic template match adaptive template filter wavelet transform elitist selection elitist crossover immune genetic algorithm
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Apprehending the potential of BABY BOOM transcription factors to mitigate cotton regeneration and transformation 被引量:2
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作者 YAVUZ Caner TILLABOEVA Shakhnozakhan BAKHSH Allah 《Journal of Cotton Research》 2020年第4期297-310,共14页
Since the advent of transgenic technology,the incorporation of gene(s)encoding traits of economic importance in cotton is being practiced worldwide.However,factors like recalcitrant nature of cotton cultivars,in vitro... Since the advent of transgenic technology,the incorporation of gene(s)encoding traits of economic importance in cotton is being practiced worldwide.However,factors like recalcitrant nature of cotton cultivars,in vitro regeneration via tissue culture(especially via somatic embryogenesis),genotype dependency,long and toilsome protocols impede the pace of development of transgenic cotton.Besides that,types and age of explants,media composition,plant growth regulators and other environmental factors affect in vitro cotton regeneration significantly.The studies of genetic control of in vitro regeneration in plants have elucidated the role of certain transcription factor genes that are induced and expressed during somatic embryogenesis.Among these transcription factors,BABY BOOM(BBM)plays a very important role in signal transduction pathway,leading to cell differentiation and somatic embryos formation.The role of BBM has been established in plant cell proliferation,growth and development even without exogenous growth regulators.This review intends to provide an informative summary of regeneration and transformation problems in cotton and the latest developments in utilization of BBM transcription factors in cotton.We believe that the use of BBM will not only ease cotton genetic improvement but will also accelerate cotton breeding programmes. 展开更多
关键词 COTTON genetic manipulations Regeneration and transformation BBM
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Development of High Efficient in vitro Regeneration and Transformation System in Strawberry
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作者 Li Wen-yan Zhou Jing +1 位作者 Wei You Wei Chi-zhang 《Journal of Northeast Agricultural University(English Edition)》 CAS 2018年第2期1-12,共12页
In this paper, several factors that affect the efficiency of in vitro adventitious bud regeneration and Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation of F. vesca were studied. The results showed that F. vesca see... In this paper, several factors that affect the efficiency of in vitro adventitious bud regeneration and Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation of F. vesca were studied. The results showed that F. vesca seeds germination rate was the highest while seeds were cultured in water, and the germination rate was the lowest while seeds were cultured on MS medium supplemented with hormone; the germination rates that seeds cultured on two and three layers filter paper were higher than that seeds cultured on four and five layers filter paper. In vitro adventitious regeneration efficiency was affected by different explants types. The significant difference was existed between petioles and leaves. When using the same type explants, in vitro adventitious buds regeneration rate and the average number of buds per explant between Ruegen (RE) and Yellow Wonder (YW) had no significant difference. RE to Agrobacterium tumefaciens was more sensitive than YW. Using seedling leaves of RE and YW as materials, an efficient Agrobacterium-mediated transformation system was developed. In this system, the concentration of bacteria was OD600=0.5, the explants were immersed in bacteria broth for 9 min, the co-cultured time was 2 days, and had no pre-cultured time. The percentage of explants with resistant buds of RE and YW was compared. The putative transformed plants were confirmed by PCR. 展开更多
关键词 F vesca in vitro regeneration AGROBACTERIUM genetic transformation
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塔里木盆地台盆区下古生界全油气系统碳酸盐岩油气藏改造特征与成因模式 被引量:1
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作者 曹鹏 赵振丞 +6 位作者 庞雄奇 李才俊 庞宏 林会喜 杨海军 马奎友 张思佳 《石油与天然气地质》 北大核心 2025年第4期1299-1315,共17页
塔里木盆地台盆区深层碳酸盐岩储层是中国重要油气产层,油气资源潜力巨大。受多期构造活动、多期油气充注和调整改造的影响,其油气藏改造特征、成因模式和分布规律尚不完全明确,制约了深层-超深层油气探勘的进展。基于全油气系统理论,... 塔里木盆地台盆区深层碳酸盐岩储层是中国重要油气产层,油气资源潜力巨大。受多期构造活动、多期油气充注和调整改造的影响,其油气藏改造特征、成因模式和分布规律尚不完全明确,制约了深层-超深层油气探勘的进展。基于全油气系统理论,系统研究了塔里木盆地台盆区下古生界碳酸盐岩油气藏改造特征与成因模式,研究结果表明:①台盆区碳酸盐岩改造类油气藏油气成藏动力边界和动力场均受到构造破坏;早期油气藏类型由连续致密油气藏转变为常规裂缝型、缝洞型或孔洞型油气藏。呈现叠复连续油气藏特征,形成断溶体油气藏新类型。②台盆区碳酸盐岩改造类油气藏受控于沉积演化、构造运动、成藏期次和保存条件等多因素动态耦合,历经3个演化阶段,油气成藏动力边界在物理化学的作用下被破坏。③改造类油气藏具有“纵向分层、横向分带”的有序分布特征。纵向分层性主要由岩性组合和沉积环境差异决定,横向分带性则受断裂和不整合面发育程度控制。礁滩体油气藏和不整合孔洞类油气藏主要位于自由动力场,断层裂缝类油气藏则位于浮力成藏下限与油气成藏底线之间的局限动力场。 展开更多
关键词 成因模式 改造特征 碳酸盐岩 下古生界 台盆区 全油气系统 塔里木盆地
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一种农杆菌介导的糜子高效遗传转化方法
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作者 夏启玉 降彦苗 +5 位作者 刘亚男 李海权 程汝宏 郭安平 刘国庆 赵辉 《热带作物学报》 北大核心 2025年第1期44-50,共7页
糜子(Panicum miliaceum L.)是我国传统的粮食作物,截至目前,针对糜子遗传转化方法的研究仍较少,本研究旨在建立农杆菌介导的糜子高效遗传转化方法。以糜子品种冀黍5号的成熟种子为外植体,在CIM和MSD诱导培养基上分别诱导糜子的胚性愈伤... 糜子(Panicum miliaceum L.)是我国传统的粮食作物,截至目前,针对糜子遗传转化方法的研究仍较少,本研究旨在建立农杆菌介导的糜子高效遗传转化方法。以糜子品种冀黍5号的成熟种子为外植体,在CIM和MSD诱导培养基上分别诱导糜子的胚性愈伤,以其作为转化受体材料,用含植物表达载体的农杆菌侵染60min并共培养6d,转接至含0.025g/L潮霉素的筛选培养基上筛选出抗性愈伤,接着在含0.015g/L潮霉素的分化培养基上分化,最后在含0.015g/L潮霉素的生根培养基上生根成苗,用载体特异性引物对再生植株进行PCR检测,鉴定其是否为阳性转基因植株。根据多个批次的转化实验统计糜子的抗性再生植株的筛选效率和转化效率。结果表明:CIM和MSD诱导培养基均能诱导出糜子胚性愈伤,但CIM培养基诱导的糜子胚性愈伤效果更好;糜子胚性愈伤在被农杆菌侵染及与农杆菌共培养后,经在含潮霉素的培养基上筛选、分化和生根后获得多株抗性再生糜子植株,3次试验获得的糜子抗性再生植株的PCR鉴定阳性率为100%,平均转化效率为30%以上。本研究成功建立了农杆菌介导的糜子遗传转化方法,操作简单,转化效率高,成本低廉,且转化不受季节限制,能规模化开展,为糜子的遗传改良提供有效的技术手段。 展开更多
关键词 糜子 农杆菌 遗传转化 转化效率
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农杆菌介导微型月季遗传转化中抗生素的优化
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作者 李燕 黄婧 +1 位作者 张启香 张敏 《江苏林业科技》 2025年第2期1-9,共9页
通过对3种抗生素的筛选,确立最适抑制农杆菌过度生长、促进微型月季愈伤组织生长与分化的抗生素及其浓度,从而建立稳定而有效的微型月季遗传转化体系。结果表明:微型月季叶片培养于150 mg/L头孢噻肟钠培养基可抑制农杆菌生长且利于材料... 通过对3种抗生素的筛选,确立最适抑制农杆菌过度生长、促进微型月季愈伤组织生长与分化的抗生素及其浓度,从而建立稳定而有效的微型月季遗传转化体系。结果表明:微型月季叶片培养于150 mg/L头孢噻肟钠培养基可抑制农杆菌生长且利于材料生长分化。侵染最佳条件为:侵染菌液OD_(600)为0.5—0.6,侵染5—10 min,共培养2 d。‘荷仙姑’‘彩虹’和‘笑脸’微型月季阳性愈伤的PCR阳性率分别为26.4%,18.4%和31.2%。该研究结果为微型月季农杆菌遗传转化的抗生素选择和培育条件的优化提供一定参考。 展开更多
关键词 微型月季 遗传转化 抗生素 培养 农杆菌
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应用再生相关基因突破小麦遗传转化基因型依赖性难题
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作者 石磊 马斯霜 《宁夏农林科技》 2025年第3期20-24,共5页
小麦是世界重要粮食作物之一,但其遗传转化受到转化效率低和基因型依赖强烈的制约。在转化过程中应用再生相关基因能够显著提高遗传转化效率和再生效率,是突破这一难题的有效途径。通过GRF4-GIF1和TaWOX5的过表达,实现了多个小麦品种遗... 小麦是世界重要粮食作物之一,但其遗传转化受到转化效率低和基因型依赖强烈的制约。在转化过程中应用再生相关基因能够显著提高遗传转化效率和再生效率,是突破这一难题的有效途径。通过GRF4-GIF1和TaWOX5的过表达,实现了多个小麦品种遗传转化效率的大幅提高,基本解决了小麦遗传转化过程中基因型依赖性难题,具有重要的理论借鉴和实际应用价值。 展开更多
关键词 小麦 遗传转化 再生相关基因
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杏组培技术研究进展及其在育种中的应用
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作者 王维 王毅敏 +4 位作者 吕丽霞 王秀荣 师阳阳 韩丽娜 丁洁 《辽宁农业科学》 2025年第2期81-87,共7页
杏组织培养技术是杏优良品种扩繁保存、新品种选育以及遗传转化体系建立的有效途径。文中综述了近些年来国内外杏组织培养研究现状,涵括了外植体选择及灭菌方法、培养基类型及其添加物、组培所需环境条件及存在问题、育种过程中的应用... 杏组织培养技术是杏优良品种扩繁保存、新品种选育以及遗传转化体系建立的有效途径。文中综述了近些年来国内外杏组织培养研究现状,涵括了外植体选择及灭菌方法、培养基类型及其添加物、组培所需环境条件及存在问题、育种过程中的应用现状以及对杏组培研究的前景展望,旨在对我国杏组培技术的研究进展和存在问题进行梳理并提出相应建议,以资借鉴。 展开更多
关键词 组培技术 遗传转化 研究进展
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‘京枣39’叶片遗传转化体系的建立 被引量:1
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作者 马灵 袁轶 +6 位作者 杨爽 高艺 陈学勋 焦立军 刘巍巍 薄文浩 庞晓明 《华中农业大学学报》 北大核心 2025年第1期43-49,共7页
为建立‘京枣39’高效遗传转化体系,以‘京枣39’叶片为外植体进行遗传转化,探究卡那霉素(kanamycin,Kan)质量浓度、头孢噻肟(cefotaxime, Cef)和特美汀(timentin, Tim)抑菌质量浓度、预培养时间、不同菌液浓度、侵染时间、乙酰丁香酮(a... 为建立‘京枣39’高效遗传转化体系,以‘京枣39’叶片为外植体进行遗传转化,探究卡那霉素(kanamycin,Kan)质量浓度、头孢噻肟(cefotaxime, Cef)和特美汀(timentin, Tim)抑菌质量浓度、预培养时间、不同菌液浓度、侵染时间、乙酰丁香酮(acetosyringone, AS)浓度及共培养时间对‘京枣39’叶片转化率的影响。结果显示‘,京枣39’叶片最佳遗传转化条件为,5 mg/L Kan选择压,50 mg/L Cef、250 mg/L Tim抑菌质量浓度,预培养4 d,农杆菌菌液OD600 nm值为0.6,侵染时间20 min,共培养基添加200μmol/L AS,共培养4 d。荧光检测和PCR试验证实外源目的基因已成功整合到‘京枣39’基因组中,实现了农杆菌介导的‘京枣39’叶片的遗传转化。 展开更多
关键词 根癌农杆菌 遗传转化 ‘京枣39’ 叶片 抗性筛选
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白菜类蔬菜遗传转化研究进展
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作者 张家新 张文静 +9 位作者 路翠玲 苏贺楠 赵艳艳 魏小春 杨双娟 王志勇 冯健起 张晓伟 原玉香 袁敬平 《中国瓜菜》 北大核心 2025年第2期1-6,共6页
遗传转化技术是研究白菜类蔬菜基因功能和开展遗传育种的重要手段。通过适宜的遗传转化方法,可以将目标基因导入生物基因组,实现对其生物学特性和经济性状的改良。然而,白菜类蔬菜的遗传转化面临着再生能力差、转化效率低等问题。通过... 遗传转化技术是研究白菜类蔬菜基因功能和开展遗传育种的重要手段。通过适宜的遗传转化方法,可以将目标基因导入生物基因组,实现对其生物学特性和经济性状的改良。然而,白菜类蔬菜的遗传转化面临着再生能力差、转化效率低等问题。通过查阅国内外白菜类蔬菜遗传转化相关文献,对影响白菜类蔬菜遗传转化效率的因素(基因型、再生体系、转化方法等)进行了分析和总结,探讨了CRISPR/Cas9在遗传转化中的应用,并对其再生与遗传转化的前景进行了展望。 展开更多
关键词 白菜类蔬菜 遗传转化 再生体系 转化方法 CRISPR/Cas9
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发根农杆菌介导的蓝莓遗传转化体系的建立
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作者 邬婷婷 刘凉琴 +5 位作者 姜燕琴 葛春峰 田亮亮 刘梦溪 曾其龙 於虹 《果树学报》 北大核心 2025年第8期1897-1904,共8页
【目的】建立蓝莓(Vaccinium corymbosum)简单、快速、经济的发根农杆菌转化体系。【方法】以蓝美1号蓝莓地栽植株当年生绿枝的茎段为外植体,使用携带GFP过表达质粒的发根农杆菌K599,在不同菌液浓度及不同添加剂组合(乙酰丁香酮和表面... 【目的】建立蓝莓(Vaccinium corymbosum)简单、快速、经济的发根农杆菌转化体系。【方法】以蓝美1号蓝莓地栽植株当年生绿枝的茎段为外植体,使用携带GFP过表达质粒的发根农杆菌K599,在不同菌液浓度及不同添加剂组合(乙酰丁香酮和表面活性剂)的筛选条件下,通过注射蓝莓茎段的芽点及两端切口进行侵染,利用GFP荧光检测和DNA检测进行转基因株系验证。【结果】GFP荧光检测发现茎段芽点及下端切口处分别产生表达荧光信号的侧芽及毛状根;在菌液OD600值为0.5~1.5的浓度区间,OD600值为1.0时诱导率最高达42.31%;不同添加剂组合对诱导率具有较大影响,200μmol·L-1乙酰丁香酮加0.05%表面活性剂的添加剂组合中诱导率最高达42.50%;最早在培养45 d时取材鉴定蓝莓遗传转化株系,从20个随机样本中测得14株转化植株,预期最高转化率为29.75%。【结论】建立了简单、快速的发根农杆菌介导的蓝美1号蓝莓遗传转化体系,为蓝莓的基因功能研究和良种选育提供技术支持。 展开更多
关键词 蓝美1号 遗传转化 发根农杆菌
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转基因抗虫大豆转化体CAL16定性PCR检测方法
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作者 陆佳雨 王沛然 +6 位作者 许学 吴爽 胡笑林 李晨 潘伟芹 江雅婷 汪秀峰 《生物安全学报(中英文)》 北大核心 2025年第2期137-144,共8页
【目的】转基因大豆CAL16的抗虫融合蛋白Cry1Ab/Vip3Da对大豆鳞翅目害虫有很好的抗性效果,但目前针对抗虫大豆CAL16及其衍生品种的定性检测的方法尚未建立,本研究旨在根据外源片段插入位置,设计CAL16转化体的特异的定性PCR检测引物,弥... 【目的】转基因大豆CAL16的抗虫融合蛋白Cry1Ab/Vip3Da对大豆鳞翅目害虫有很好的抗性效果,但目前针对抗虫大豆CAL16及其衍生品种的定性检测的方法尚未建立,本研究旨在根据外源片段插入位置,设计CAL16转化体的特异的定性PCR检测引物,弥补标准上的空白。【方法】根据技术资料公布的插入位置和载体信息,在左边界(LB端)和右边界(RB端)设计多对引物,分别对引物进行特异性测试、扩增反应优化、测序验证、稳健性测试、灵敏度测试、检出限测试等。【结果】数据显示,引物组合CAL16-F/R具有很好的特异性和稳健性,检出限为0.10%,符合相关转基因分子检测标准的要求,国内的8家转基因生物安全检测机构能够重复试验结果,因此,该方法可以在检测行业中推广使用。【结论】转基因抗虫大豆CAL16定性PCR检测方法的建立,为我国CAL16抗虫大豆及其衍生品种的安全监管提供技术支撑。 展开更多
关键词 转基因 大豆 CAL16转化体 PCR检测
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节旋藻同源重组载体的构建及自然转化研究
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作者 王康 崔红利 +1 位作者 李文军 秦松 《生物学杂志》 北大核心 2025年第2期52-58,共7页
节旋藻(Arthrospira)是一类具有较高经济价值的多细胞丝状蓝藻。然而,节旋藻的遗传改造极为困难,特别是缺乏易于操作的遗传转化技术。为了进一步开发节旋藻基因工程应用潜力,从12株不同的节旋藻中筛选具备自然转化能力藻株并评估同源侧... 节旋藻(Arthrospira)是一类具有较高经济价值的多细胞丝状蓝藻。然而,节旋藻的遗传改造极为困难,特别是缺乏易于操作的遗传转化技术。为了进一步开发节旋藻基因工程应用潜力,从12株不同的节旋藻中筛选具备自然转化能力藻株并评估同源侧翼序列和插入片段长度对自然转化效率的影响。结果显示,在12株节旋藻中仅S17和S39可通过自然转化实现遗传操作。同源侧翼序列与插入DNA片段长度均影响转化效率,当同源侧翼序列为1500 bp以上时可显著提升阳性率;相反,插入片段长度则与阳性率呈负相关,因此,当插入DNA较长时需要考虑增加同源侧翼序列长度以提高转化效率。此外,研究还表明节旋藻的同质化与持续筛选时间有关,在筛选120 d后同质化藻株可占阳性藻株的50%以上;同质化藻株可在至少6个月内保持遗传稳定。研究结果可为节旋藻作为高价值化合物生产的生物反应器的应用开发提供技术支持。 展开更多
关键词 节旋藻 自然转化 同源重组 基因工程 载体
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马铃薯川芋50遗传转化及基因编辑体系的建立
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作者 文博霖 万敏 +8 位作者 胡建军 王克秀 景晟林 王心悦 朱博 唐铭霞 李兵 何卫 曾子贤 《生物技术通报》 北大核心 2025年第4期88-97,共10页
【目的】构建马铃薯川芋50的遗传转化体系和基因编辑体系。【方法】以四川省主导品种川芋50无菌脱毒组培苗茎段和叶片为外植体,用农杆菌介导法将含有植物敲除载体质粒pJCV55-StU6-200-StUBI10-T#01转化马铃薯外植体,分析4种不同植物激... 【目的】构建马铃薯川芋50的遗传转化体系和基因编辑体系。【方法】以四川省主导品种川芋50无菌脱毒组培苗茎段和叶片为外植体,用农杆菌介导法将含有植物敲除载体质粒pJCV55-StU6-200-StUBI10-T#01转化马铃薯外植体,分析4种不同植物激素配比的培养基体系对马铃薯愈伤组织诱导和分化的影响,探究川芋50的基因编辑、阳性植株鉴定方法。【结果】1)最适马铃薯川芋50遗传转化的培养基体系为B体系。茎段和叶片预培养及愈伤组织诱导的培养基配方分别为:MS基础盐+20 g/L蔗糖+1 mL/L 1000×N&N维生素(1000×Nitsch&Nitsch Vitamin Solution,1000×N&N维生素)+1.0 mg/L TZR(trans-zeatin-riboside,TZR)+0.0278 mg/L GA_(3)(gibberellin A_(3),GA_(3))+0.02 mg/L NAA(1-naphthaleneacetic acid,NAA)+2.0 g/L Phytagel和MS基础盐+20 g/L蔗糖+1 mL/L 1000×N&N维生素+0.5 mg/L TZR+2.5 mg/L IAA(indole acetic acid,IAA)+2.0 g/L Phytagel,愈伤诱导率分别为93%和88%。愈伤组织分化的培养基为:MS基础盐+20 g/L蔗糖+1 mL/L 1000×N&N维生素+2.0 mg/L TZR+10 mg/L GA_(3)+2.0 g/L Phytagel;2)证明了二次生根筛选法可准确鉴定马铃薯转基因阳性植株,准确率100%;3)建立了针对川芋50的农杆菌介导CRISPR/Cas9基因编辑体系,编辑率63%。【结论】通过对愈伤再生过程中各个影响因素进行试验以及利用农杆菌介导的CRISPR/Cas9技术进行编辑,建立了马铃薯川芋50的遗传转化体系和基因编辑体系。 展开更多
关键词 马铃薯 川芋50 根癌农杆菌 遗传转化 基因编辑 CRISPR/Cas9
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发根农杆菌介导的桑遗传转化体系的优化
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作者 吴敏 廖扬振 +3 位作者 皮继岚 刘尚煜 魏渊 欧阳臻 《山东农业科学》 北大核心 2025年第3期27-36,共10页
本研究在已有桑遗传转化体系的基础上对其进行优化,以提高转化效率,为后续桑基因功能研究及分子育种奠定基础。首先分别从发根农杆菌种类、外植体类型、预培养时间、侵染时间和共培养时间五个方面对农杆菌介导的桑遗传转化体系进行优化... 本研究在已有桑遗传转化体系的基础上对其进行优化,以提高转化效率,为后续桑基因功能研究及分子育种奠定基础。首先分别从发根农杆菌种类、外植体类型、预培养时间、侵染时间和共培养时间五个方面对农杆菌介导的桑遗传转化体系进行优化,再构建MaCYP90A-pBI121质粒转入农杆菌诱导发根以验证优化体系的稳定性。结果表明,优化后的桑遗传转化条件为:采用OD_(600)为0.6的农杆菌LBA9402菌液侵染预培养2 d的无菌桑苗真叶10 min,共培养时间为2 d。在此优化条件下,毛状根诱导率可达到84.51%。同时利用该体系将重组质粒MaCYP90A-pBI121转化至桑叶中,经荧光定量PCR分析,阳性转基因毛状根中MaCYP90A基因表达量为空白对照的39.97倍。综上,本研究成功对已有桑遗传转化体系进行了优化,毛状根诱导率相比优化前(30.21%)提高了1.8倍,可为后续桑基因功能研究、次生代谢物合成途径解析以及分子育种提供技术支撑。 展开更多
关键词 遗传转化体系 发根农杆菌 毛状根诱导 转基因
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新疆大豆品种SY-50遗传转化体系建立
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作者 张佳伟 姑扎丽努尔·吐鲁洪 +3 位作者 王晓云 李悦 倪志勇 张霞 《大豆科学》 北大核心 2025年第4期27-34,共8页
为建立新疆高效大豆植株再生体系,本研究选用新疆本土大豆品种SY-50的子叶节作为外植体,通过摸索外植体消毒和植物激素使用条件,建立大豆植株再生体系。在此再生体系基础上,筛选该大豆品种子叶节再生诱导的潮霉素临界浓度,并建立其遗传... 为建立新疆高效大豆植株再生体系,本研究选用新疆本土大豆品种SY-50的子叶节作为外植体,通过摸索外植体消毒和植物激素使用条件,建立大豆植株再生体系。在此再生体系基础上,筛选该大豆品种子叶节再生诱导的潮霉素临界浓度,并建立其遗传转化体系。结果表明:使用10%NaClO处理4 min,然后使用0.1%HgCl 2处理3 min,能够高效地获得无菌苗,不定芽诱导培养基为MS+0.5 mg·L^(-1)6-BA+1.0 mg·L^(-1)噻苯隆,诱导效率为33.00%±1.73%。不定芽的茎伸长培养基为MS基础培养基,生根诱导培养基为MS+1.0 mg·L^(-1)IBA,最终获得完整的再生植株。在大豆不定芽器官再生体系的基础上,筛选出大豆子叶节再生诱导的最适潮霉素筛选浓度为15 mg·L^(-1),对转基因植株进行潮霉素抗性筛选和PCR鉴定,最终获得转基因阳性植株。研究结果可为新疆遗传转化体系介导大豆分子育种工作技术平台的建立奠定基础,并为用于分子育种技术改良的大豆基因型拓宽范围。 展开更多
关键词 大豆 不定芽 再生体系 遗传转化 SY-50
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