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三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2与痛风病关联的病理机制研究进展
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作者 韩宇 黄锦坚 +2 位作者 林志健 张冰 王雨 《世界中医药》 CAS 北大核心 2024年第3期437-443,共7页
痛风病是指与高尿酸血症、尿酸盐沉积(关节、肾脏)等尿酸代谢紊乱密切相关的进展性代谢疾病,根据其病理进展特点和临床表现,其病程可分为高尿酸血症阶段、尿酸盐沉积阶段、痛风性炎症阶段。三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2(ABCG2)是高通量... 痛风病是指与高尿酸血症、尿酸盐沉积(关节、肾脏)等尿酸代谢紊乱密切相关的进展性代谢疾病,根据其病理进展特点和临床表现,其病程可分为高尿酸血症阶段、尿酸盐沉积阶段、痛风性炎症阶段。三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2(ABCG2)是高通量的尿酸转运体,既参与了机体尿酸外排的肠-肾途径,又与痛风性炎症密切相关。通过切入ABCG2,对痛风病病理机制研究进展进行综述,以期为临床痛风病的深入研究及防治提供新的见解。 展开更多
关键词 三磷酸腺苷结合盒转运蛋白g2 痛风病 高尿酸血症 痛风性关节炎 尿酸盐沉积 尿酸代谢 病理机制 研究进展
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苦参碱通过诱导NKG2D配体高表达增强NK细胞对ABCG2high耐药鼻咽癌细胞杀伤活性 被引量:10
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作者 黄宇贤 王杨 +3 位作者 孙明 周雪云 邓兰 郭坤元 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期1329-1332,共4页
目的探讨苦参碱提高ABCG2High[三磷酸腺苷(ATP)结合转运蛋白G超家族成员2]耐药鼻咽癌细胞对Allo-NK细胞杀伤敏感性的机制。方法利用免疫磁珠技术分离ABCG2HighCNE2/DDP细胞及Allo-NK细胞,流式细胞技术检测分离后细胞纯度及经苦参碱处理... 目的探讨苦参碱提高ABCG2High[三磷酸腺苷(ATP)结合转运蛋白G超家族成员2]耐药鼻咽癌细胞对Allo-NK细胞杀伤敏感性的机制。方法利用免疫磁珠技术分离ABCG2HighCNE2/DDP细胞及Allo-NK细胞,流式细胞技术检测分离后细胞纯度及经苦参碱处理前后靶细胞NKG2D配体表达率,LDH释放测定法检测经苦参碱处理前后ABCG2HighCNE2/DDP细胞对Allo-NK细胞的杀伤敏感性。结果ABCG2HighCNE2/DDP细胞分离后ABCG2表达率为(91.40±2.32)%,分选后NK细胞CD3-CD16+CD56+细胞的纯度达90%以上,经苦参碱处理之后靶细胞MICA、MICB、ULBP1、ULBP2、ULBP3表达率,由药物处理之前的(2.92±0.33)%、(4.27±0.33)%、(5.80±0.62)%、(11.10±3.15)%、(7.75±1.14)%分别上升到(11.30±0.89)%、(14.29±2.61)%、(12.56±1.06)%、(43.24±4.43)%、(12.77±1.06)%。在效靶比为10:1、20:1,Allo-NK细胞对苦参碱处理前后ABCG2HighCNE2/DDP细胞的杀伤率分别为(15.32±1.34)%、(27.26±6.81)%及(28.53±1.37)%、(42.72±2.80)%。处理前后杀伤率有显著性差异(F=29.05,P=0.000)。结论苦参碱通过诱导肿瘤细胞高表达NKG2D配体(MICA/B、ULBP1-3),使肿瘤细胞对Allo-NK细胞的杀伤敏感性增强。 展开更多
关键词 苦参碱 三磷酸腺苷(ATP)结合转运蛋白g超家族成员2 自然杀伤细胞 NKg2D 杀伤敏感性
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苦参碱对高表达ABCG2人耐药鼻咽癌细胞NKG2D配体表达的诱导作用 被引量:8
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作者 黄宇贤 王杨 +3 位作者 孙明 周雪云 邓兰 郭坤元 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期279-282,286,共5页
目的:探讨苦参碱对高表达三磷酸腺苷(ATP)结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)人耐药鼻咽癌细胞CNE2/DDP(简写作ABCG_2H^High CNE2/DDP)NKG2D配体表达的诱导作用及其对NK细胞杀伤敏感性的机制。方法:利用免疫磁珠技术分离ABCG_2^... 目的:探讨苦参碱对高表达三磷酸腺苷(ATP)结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)人耐药鼻咽癌细胞CNE2/DDP(简写作ABCG_2H^High CNE2/DDP)NKG2D配体表达的诱导作用及其对NK细胞杀伤敏感性的机制。方法:利用免疫磁珠技术分离ABCG_2^High CNE2/DDP细胞及NK细胞,流式细胞技术检测分离后细胞纯度及经苦参碱处理前后靶细胞NKG2D配体表达率,LDH释放测定法检测经苦参碱处理前后ABCG_2^High CNE2/DDP细胞对NK细胞的杀伤敏感性。结果:ABCG_2^High CNE2/DDP细胞分离后ABCG2表达率为(91.40±2.32)%,分选后NK细胞CD3^-CD16^+CD56^+细胞的纯度达90%以上,经苦参碱处理之后靶细胞MICA、MICB、ULBP1、ULBP2、ULBP3表达率,由药物处理之前的(2.92±0.33)%、(4.27±0.33)%、(5.80±0.62)%、(11.10±3.15)%、(7.75±1.14)%分别上升到(11.30±0.89)%、(14.29±2.61)%、(12.56±1.06)%、(43.24±4.43)%、(12.77±1.06)%。在效靶比为10:1、20:1时,NK细胞对苦参碱处理前后ABCG^2^High CNE2/DDP细胞的杀伤率分别为(15.32±1.34)%、(27.26±6.81)%及(28.53±1.37)%、(42.72±2.80)%。处理前后杀伤率有显著性差异(F=29.05,P=0.000)。结论:苦参碱通过诱导肿瘤细胞高表达NKG2D配体(MICA/B、ULBP1-3),使肿瘤细胞对NK细胞的杀伤敏感性增强。 展开更多
关键词 苦参碱三磷酸腺苷(ATP)结合转运蛋白g超家族成员2 自然杀伤细胞 NKg2D 鼻咽癌
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人大肠癌组织中ABCG2 mRNA的表达 被引量:5
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作者 高阳 庄竟 +1 位作者 刘永刚 张勇超 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2008年第4期746-748,共3页
目的:检测人大肠癌组织中耐药基因ABCG2mRNA的表达并探讨其与临床病理特征的关系。方法:采用RT-PCR方法检测102例大肠癌组织(男60例,女42例;≥60岁63例,<60岁39例;乳头状腺癌21例,管状腺癌48例,黏液腺癌13例,腺鳞癌20例;肿瘤直径≥5c... 目的:检测人大肠癌组织中耐药基因ABCG2mRNA的表达并探讨其与临床病理特征的关系。方法:采用RT-PCR方法检测102例大肠癌组织(男60例,女42例;≥60岁63例,<60岁39例;乳头状腺癌21例,管状腺癌48例,黏液腺癌13例,腺鳞癌20例;肿瘤直径≥5cm者58例,<5cm者44例;高分化23例,中分化49例,低分化30例;有淋巴结转移72例,无淋巴转移30例;Duke's分期:A期14例,B期20例,C期42例,D期26例)及15例正常大肠黏膜组织中ABCG2mRNA的表达。结果:大肠癌和正常黏膜组织中ABCG2mRNA的阳性表达率分别为58.8%和0(P<0.05)。大肠癌组织中ABCG2mRNA的阳性表达率与患者的性别、年龄、肿瘤大小、组织学类型、淋巴结转移情况、Duke's分期等均无关(P均>0.05),与分化程度有关(P<0.05)。结论:ABCG2的表达可以作为判断大肠癌分化程度及预测化疗效果的指标之一。 展开更多
关键词 大肠肿瘤 ABCg2基因
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苹果酸舒尼替尼诱导高表达三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2的耐药鼻咽癌细胞高表达NKG2D配体 被引量:3
5
作者 黄宇贤 郭坤元 +2 位作者 王杨 陈锦章 宋朝阳 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2008年第4期311-315,共5页
目的:探讨苹果酸舒尼替尼(sunitinib malate,SU11248)对高表达三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ATP-binding cassette superfamily G member2,ABCG2)耐药鼻咽癌细胞CNE2/DDP(ABCG2highCNE2/DDP)表达NKG2D配体的诱导作用。方法:利用... 目的:探讨苹果酸舒尼替尼(sunitinib malate,SU11248)对高表达三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ATP-binding cassette superfamily G member2,ABCG2)耐药鼻咽癌细胞CNE2/DDP(ABCG2highCNE2/DDP)表达NKG2D配体的诱导作用。方法:利用免疫磁珠技术分离ABCG2highCNE2/DDP细胞及同种异体反应性自然杀伤细胞(allo-reactive natural kill cell,Allo-NK),流式细胞技术检测分离后细胞的纯度及苹果酸舒尼替尼处理前后ABCG2highCNE2/DDP细胞NKG2D配体表达率,LDH释放测定法检测苹果酸舒尼替尼处理前后ABCG2highCNE2/DDP细胞对Allo-NK细胞的杀伤敏感性。结果:ABCG2highCNE2/DDP细胞分离后ABCG2的表达率为(91.40±2.32)%,Allo-NK细胞分选后CD3-CD16+CD56+细胞的纯度达90%以上。经苹果酸舒尼替尼处理后,ABCG2highCNE2/DDP细胞的NKG2D配体MICA、MICB、ULBP1、ULBP2、ULBP3的表达率由药物处理之前的(2.92±0.33)%、(4.27±0.33)%、(5.80±0.62)%、(11.10±3.15)%、(7.75±1.14)%分别上升到(89.12±4.56)%、(66.10±2.22)%、(67.56±4.19)%、(69.37±8.83)%、(63.28±3.31)%。在效靶比为10∶1、20∶1时,苹果酸舒尼替尼处理前后Allo-NK细胞对ABCG2highCNE2/DDP细胞的杀伤率分别为(15.32±13.86)%、(27.26±6.81)%及(41.12±4.12)%、(57.25±2.37)%,处理后的杀伤率有明显的提高(F=15.58,P=0.000)。结论:苹果酸舒尼替尼通过诱导高表达NKG2D配体(MICA/B、ULBP1-3),使ABCG2highCNE2/DDP细胞对Allo-NK细胞的杀伤敏感性明显增强。 展开更多
关键词 苹果酸舒尼替尼 三磷酸腺苷结合转运蛋白g超家族成员2 鼻咽癌细胞 自然杀伤细胞 NKg2D
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分子靶向药物诱导耐药鼻咽癌CNE2/DDP细胞NKG2DLs的表达 被引量:3
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作者 黄宇贤 王杨 +5 位作者 李玉华 宋朝阳 陈锦章 贺艳杰 周雪云 郭坤元 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期250-255,共6页
目的:探讨不同分子靶向药物对高表达与低表达ATP结合转运蛋白G超家族成员2(ATP-binding cassette super-family Gmember 2,ABCG2)的人耐药鼻咽癌CNE2/DDP细胞(分别简写为ABCG2highCNE2/DDP和ABCG2lowCNE2/DDP)表面NKG2D配体(natural kil... 目的:探讨不同分子靶向药物对高表达与低表达ATP结合转运蛋白G超家族成员2(ATP-binding cassette super-family Gmember 2,ABCG2)的人耐药鼻咽癌CNE2/DDP细胞(分别简写为ABCG2highCNE2/DDP和ABCG2lowCNE2/DDP)表面NKG2D配体(natural killer group 2 member Dligands,NKG2DLs)表达的诱导作用及其对NK细胞杀伤敏感性的影响。方法:免疫磁珠法分选ABCG2highCNE2/DDP、ABCG2lowCNE2/DDP细胞及NK细胞。流式细胞术检测分选细胞的纯度和不同分子靶向药物(硼替佐米、索拉非尼、舒尼替尼)处理前后ABCG2highCNE2/DDP和ABCG2lowCNE2/DDP细胞NKG2DLs的表达率。LDH释放法检测不同药物处理前后ABCG2highCNE2/DDP和ABCG2lowCNE2/DDP细胞对NK细胞杀伤的敏感性。结果:ABCG2highCNE2/DDP和ABCG2lowCNE2/DDP细胞表面ABCG2的表达率分别为(91.40±2.32)%和(1.70±0.24)%。分选后NK细胞中CD3-CD16+CD56+细胞的比例达90%以上。药物处理前,ABCG2highCNE2/DDP和ABCG2lowCNE2/DDP细胞MICA、MICB、ULBP1、ULBP2和ULBP3呈弱表达;经不同分子靶向药物处理后,5种NKG2DLs的表达率均明显上升(P<0.01),以舒尼替尼处理后NKG2DLs的表达率升高最明显。随着NKG2DLs表达的上调,ABCG2highCNE2/DDP和ABCG2lowCNE2/DDP细胞对NK细胞杀伤的敏感性也随之升高。结论:不同分子靶向药物可诱导耐药鼻咽癌CNE2/DDP细胞NKG2DLs的表达,以舒尼替尼的诱导作用最强,且肿瘤细胞NKG2DLs的表达与其对NK细胞杀伤敏感性之间存在线性关系。 展开更多
关键词 分子靶向药物 三磷酸腺苷(ATP)结合转运蛋白g超家族成员2(ABCg2) 鼻咽癌细胞株 NKg2D配体 自然杀伤细胞
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上皮性卵巢癌中ALDH1和ABCG2的表达及其与微血管形成的关系 被引量:6
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作者 俞岚 宋文庆 +2 位作者 周蕾 武世伍 王丹娜 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1807-1814,共8页
目的:本文旨在探讨上皮性卵巢癌(epithelial ovarian cancer,EOC)中乙醛脱氢酶1(ALDH1)、腺苷三磷酸结合盒转运体G2(ABCG2)蛋白表达及微血管密度(microvessel density,MVD)之间的关系。方法:收集198例EOC术后标本和60例卵巢良性上皮性... 目的:本文旨在探讨上皮性卵巢癌(epithelial ovarian cancer,EOC)中乙醛脱氢酶1(ALDH1)、腺苷三磷酸结合盒转运体G2(ABCG2)蛋白表达及微血管密度(microvessel density,MVD)之间的关系。方法:收集198例EOC术后标本和60例卵巢良性上皮性肿瘤标本,应用免疫组织化学法检测EOC和卵巢良性上皮性肿瘤组织中ALDH1、ABCG2及CD105蛋白(微血管标志物)的表达情况。结果:在EOC和卵巢良性上皮性肿瘤组织中,ALDH1和ABCG2的阳性表达率分别为64.1%、61.6%和8.3%、6.7%;MVD分别为22.6±9.7和5.03±3.35,差异均有统计学显著性(P<0.05);ALDH1和ABCG2的表达与EOC的组织学分化、FIGO分期、腹腔器官及淋巴结转移有关(P<0.05),MVD与EOC的组织学分化、FIGO分期、腹腔器官及淋巴结转移和腹水形成有关(P<0.05);MVD分别与ALDH1和ABCG2的表达呈正相关(P<0.01),同时,ALDH1和ABCG2的表达亦呈正相关(P<0.01)。Kaplan-Meier生存分析表明,ALDH1和ABCG2的过表达以及MVD的增加均与患者的生存率有关,ALDH1和ABCG2表达阳性及MVD≥23的患者生存率明显低于ALDH1和ABCG2表达阴性及MVD<23的患者(P<0.05)。多因素分析显示FIGO分期、ALDH1表达、ABCG2表达和MVD是影响EOC根治术后患者预后的独立因素(P<0.05)。结论:EOC组织中ALDH1和ABCG2过表达以及MVD与肿瘤的分化程度、转移和预后等因素相关,这些指标的联合检测可能作为对EOC的进展及患者预后判断的重要指标。 展开更多
关键词 上皮性卵巢癌 乙醛脱氢酶1 腺苷三磷酸结合盒转运体g2 微血管密度 预后
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ABCG2在人绒毛膜癌耐药细胞株中的表达研究 被引量:2
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作者 蔡净亭 张静莉 +4 位作者 唐迪红 刘艳琼 夏蛮 胡慧 刘惠宁 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期748-751,共4页
目的:研究多药耐药基因ABCG2在人绒毛膜癌亲本细胞株(JEG-3)及耐药细胞株(JEG-3/VP16)中的表达情况,探讨ABCG2在绒毛膜癌耐药性中所起的作用。方法:用逆转录聚合酶链式扩增反应(RT-PCR)检测ABCG2的mRNA表达,用蛋白质印迹法(Western blot... 目的:研究多药耐药基因ABCG2在人绒毛膜癌亲本细胞株(JEG-3)及耐药细胞株(JEG-3/VP16)中的表达情况,探讨ABCG2在绒毛膜癌耐药性中所起的作用。方法:用逆转录聚合酶链式扩增反应(RT-PCR)检测ABCG2的mRNA表达,用蛋白质印迹法(Western blot)检测ABCG2的蛋白质水平的表达,并采用流式细胞技术测试出两种细胞株中ABCG2阳性细胞的比例。结果:RT-PCR和Western blot结果显示:在JEG-3细胞及JEG-3/VP16细胞中均可检测到ABCG2 mRNA和蛋白的表达,但JEG-3/VP16细胞中ABCG2 mRNA的表达(1.74±0.07)和蛋白的表达(1.13±0.09)水平要明显高于JEG-3细胞(0.86±0.06和0.64±0.05),差异有统计学意义(P<0.01);流式细胞检测结果示:ABCG2在JEG-3/VP16细胞中的阳性表达率(50.66±3.82)%要明显高于在JEG-3细胞中的阳性表达率(14.78±1.02)%,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:ABCG2在耐药性人绒毛膜癌细胞株JEG-3/VP16中高表达,提示ABCG2可能参与了绒毛膜癌的耐药机制。 展开更多
关键词 耐药基因 ABCg2 绒毛膜癌 化疗耐药机制
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低强度超声逆转胶质瘤ABCG2表达的实验研究 被引量:3
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作者 张震 戚勋 +1 位作者 徐克 毕永华 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期488-492,共5页
目的探讨低强度超声对胶质瘤多药耐药蛋白三磷酸腺苷结合盒超家族G家族第2个成员(ABCG2)表达的影响。方法应用不同强度超声体外辐照胶质瘤(C6)细胞,MTT法检测C6细胞增殖活性,HE染色观察C6细胞形态。大鼠胶质瘤中,TUNEL法观察胶质瘤细胞... 目的探讨低强度超声对胶质瘤多药耐药蛋白三磷酸腺苷结合盒超家族G家族第2个成员(ABCG2)表达的影响。方法应用不同强度超声体外辐照胶质瘤(C6)细胞,MTT法检测C6细胞增殖活性,HE染色观察C6细胞形态。大鼠胶质瘤中,TUNEL法观察胶质瘤细胞的凋亡,免疫组化及Western blot法检测ABCG2蛋白在胶质瘤细胞内表达的变化。结果低强度超声辐照后,C6细胞的增殖活性显著降低(P<0.05)。大鼠胶质瘤内脑肿瘤组织小血管内红细胞渗出增加,胶质瘤细胞凋亡数显著增加(P<0.05),ABCG2蛋白在胶质瘤细胞内表达显著下调(P<0.05)。结论低强度超声通过降低C6细胞活性,诱导细胞凋亡和下调ABCG2表达,实现逆转多药耐药蛋白的表达。 展开更多
关键词 低强度超声 多药耐药 胶质瘤 三磷酸腺苷结合盒超家族g家族第2个成员 凋亡
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IL-4对肺腺癌细胞株ABCG2表达调节的研究 被引量:1
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作者 张宇飞 戚好文 +4 位作者 赵峰 李召峰 郭丽 穆德广 徐兴祥 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期810-812,共3页
目的:探讨IL-4是否影响肺腺癌细胞株ABCG2(ATP-binding cassette superfamily G member2)的表达。方法:应用半定量RT-PCR检测不同浓度IL-4刺激对肺腺癌细胞株A549和SPC-A-1中ABCG2基因表达的影响。以Western blot检测不同浓度IL-4对A549... 目的:探讨IL-4是否影响肺腺癌细胞株ABCG2(ATP-binding cassette superfamily G member2)的表达。方法:应用半定量RT-PCR检测不同浓度IL-4刺激对肺腺癌细胞株A549和SPC-A-1中ABCG2基因表达的影响。以Western blot检测不同浓度IL-4对A549和SPC-A-1肺腺癌细胞株中AB-CG2蛋白表达的影响。结果:在不同浓度IL-4刺激下肺腺癌细胞株A549和SPC-A-1中ABCG2基因与蛋白的表达无统计学意义(P>0.05)。结论:ABCG2在腺癌细胞株A549和SPC-A-1中表达,但IL-4对细胞株中ABCG2的表达不具有调节作用。 展开更多
关键词 肺肿瘤 白介素-4 ABCg2 逆转录聚合酶链反应
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水牛ABCG2基因第9外显子群体遗传特征分析 被引量:2
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作者 李卓然 李卫真 +5 位作者 苗永旺 李大林 袁跃云 袁峰 刘丽仙 章纯熙 《云南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期188-192,197,共6页
三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)对普通奶牛泌乳性状有直接影响。水牛中该基因的遗传特征与产奶性状间是否有遗传关联目前还不十分清楚。本文采用PCR-SSCP和PCR产物直接测序相结合的技术,对4个河流型水牛群体和9个沼泽型水... 三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)对普通奶牛泌乳性状有直接影响。水牛中该基因的遗传特征与产奶性状间是否有遗传关联目前还不十分清楚。本文采用PCR-SSCP和PCR产物直接测序相结合的技术,对4个河流型水牛群体和9个沼泽型水牛群体共计466个个体的ABCG2基因第9外显子进行了变异检测。结果表明,水牛ABCG2基因第9外显子由251个核苷酸组成,所有的河流型和沼泽型水牛序列相同,未发现SNP位点,但在第9内含子内检测到1个T>C替换(g.SNP44769 T>C)。与GenBank数据库中已发表的牛科物种同源序列比对后发现,数据库中一条河流型水牛序列该外显子第66位核苷酸处有1个G>A替换(c.SNP1018 G>A),导致所编码的氨基酸发生p.V340I的改变;与普通牛、山羊和绵羊该基因第9外显子序列的核苷酸差异位点个数分别为5,8和11个,表明水牛与其他牛科物种间具有较大的遗传差异。本文结果提示ABCG2基因第9外显子在水牛中已纯化固定,且与水牛产奶量性状间无直接关联性。 展开更多
关键词 河流型水牛 沼泽型水牛 三磷酸腺苷结合转运蛋白 第9外显子 PCR-SSCP
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三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2特异性人源肺癌噬菌体单链抗体的筛选和鉴定 被引量:2
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作者 赵文思 罗弋 +1 位作者 黎博一 张涛 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第23期2343-2347,共5页
目的通过噬菌体展示库技术构建人肺癌单链抗体库,并筛选出抗多药耐药蛋白ABCG2的特异性单链抗体。方法取肺腺癌患者癌旁阳性淋巴结提RNA,PCR扩增重链和轻链可变区基因VH、VL,SOE-PCR扩增单链抗体可变区基因sc Fv,克隆入噬菌体表达载体p ... 目的通过噬菌体展示库技术构建人肺癌单链抗体库,并筛选出抗多药耐药蛋白ABCG2的特异性单链抗体。方法取肺腺癌患者癌旁阳性淋巴结提RNA,PCR扩增重链和轻链可变区基因VH、VL,SOE-PCR扩增单链抗体可变区基因sc Fv,克隆入噬菌体表达载体p CANTAB5E,制备初级抗体库。以A549细胞及ABCG2蛋白对抗体库进行6轮淘选。Western blot检测单链抗体的可溶性表达和对ABCG2蛋白表达的影响,ELISA和ICC鉴定其特异性,CCK-8检测其顺铂增敏作用。结果成功筛选出抗ABCG2人源肺腺癌噬菌体单链抗体。Western blot证实其可溶性表达,大小约为34×103且可明显下调ABCG2蛋白的表达。ELISA和ICC检测到该抗体对ABCG2抗原的识别率高达75%,并与A549细胞具有结合特异性。CCK8结果则显示该sc Fv可增加A549细胞对顺铂的敏感性,明显减小其IC50值。结论成功构建了人源肺腺癌噬菌体单链抗体库,并筛选出了能与ABCG2蛋白特异性结合的单链抗体,为后续体内可视化研究和靶向ABCG2+的肺癌干样细胞奠定基础。 展开更多
关键词 噬菌体单链抗体scFv 肺腺癌 ABCg2 靶向治疗 化疗增敏
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微小RNA-218-5p靶向三磷酸腺苷结合盒超家族G家族第2个成员基因对人口腔鳞状细胞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响 被引量:1
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作者 魏薇 唐祎 +1 位作者 代婧 陈胡杰 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2019年第10期984-988,共5页
目的:研究微小RNA(microRNA,miR)-218-5p靶向调控三磷酸腺苷结合盒超家族G家族第2个成员(ATP-binding cassette sub-family G member 2,ABCG2)基因对Tca-8113细胞的增殖、迁移和侵袭的影响,并探讨其机制。方法:运用实时荧光定量聚合酶... 目的:研究微小RNA(microRNA,miR)-218-5p靶向调控三磷酸腺苷结合盒超家族G家族第2个成员(ATP-binding cassette sub-family G member 2,ABCG2)基因对Tca-8113细胞的增殖、迁移和侵袭的影响,并探讨其机制。方法:运用实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative Real-time PCR,qRT-PCR)与Western blot检测Tca-8113细胞和NOK细胞中miR-218-5p和ABCG2的表达。通过双荧光素酶报告基因实验检测miR-218-5p和ABCG2靶向关系。用脂质体法将miR-218-5p mimic、ABCG2小干扰RNA(interfering RNA,siRNA)、miR-218-5p mimic+pcDNA-ABCG2分别转染至Tca-8113细胞中,噻唑蓝(methyl thiazol tetrazolium,MTT)法、Transwell法检测Tca-8113细胞的增殖、迁移和侵袭。结果:与NOK细胞比较,Tca-8113细胞miR-218-5p呈显著低表达,ABCG2呈显著高表达(P<0.05)。过表达miR-218-5p、抑制ABCG2均可抑制Tca-8113细胞的增殖和迁移(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验证实miR-218-5p与ABCG2的靶向结合关系。过表达ABCG2可逆转上调miR-218-5p对Tca-8113细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用。结论:上调miR-218-5p的表达可靶向调控ABCG2,抑制Tca-8113细胞的增殖、迁移和侵袭,将可为口腔鳞状细胞癌的治疗提供新的靶点。 展开更多
关键词 口腔鳞状细胞癌 微小RNA-218-5p 三磷酸腺苷结合盒超家族g家族第2个成员 增殖 迁移侵袭
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三河牛ABCG2基因Y367C位点与产奶性状的关联分析 被引量:1
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作者 卢振峰 秦春华 +6 位作者 杨艳 刘莉莉 俞英 吴宏军 刘爱荣 王雅春 史远刚 《中国牛业科学》 2013年第2期24-26,30,共4页
[目的]旨在检测三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)基因Y367C位点此在三河牛群体中的多态性,并分析了其与产奶性状之间的关系。[方法]利用Sequen-om Mass ARRAY Genotype分析技术对该位点进行检测,通过SAS软件(9.1)对6个产奶性... [目的]旨在检测三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)基因Y367C位点此在三河牛群体中的多态性,并分析了其与产奶性状之间的关系。[方法]利用Sequen-om Mass ARRAY Genotype分析技术对该位点进行检测,通过SAS软件(9.1)对6个产奶性状与该位点的关联程度进行了统计分析。[结果]表明,Y367C位点在三河牛中均处于Hardy-Weinberg平衡状态(P<0.05);ABCG2基因Y367C位点的YY基因型个体体细胞评分最低,CC个体产奶量、乳脂量、乳蛋白量最高;Y等位基因降低体细胞评分,提高乳蛋白率;而C等位基因则有助于提高产奶量、乳脂率、乳脂量和乳蛋白量,但三种基因型之间差异不显著(P<0.05)。[结论]该位点可以为三河牛的分子育种提供参考。 展开更多
关键词 三河牛 ABCg2基因 产奶性状 关联分析
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ABCG2在非小细胞肺癌厄洛替尼耐药中的作用 被引量:3
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作者 张靖 马虎 +2 位作者 韩静 李雪涛 陈正堂 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期987-991,共5页
目的探讨ABCG2在非小细胞肺癌厄洛替尼耐药中的作用。方法厄洛替尼不同浓度(1、5、25μmol/L)处理A549细胞及其获得性耐厄洛替尼细胞(A549/ER)12、24、48 h后,荧光实时定量PCR观察ABCG2 mRNA表达变化,Western blot检测p-AKT、ABCG2蛋白... 目的探讨ABCG2在非小细胞肺癌厄洛替尼耐药中的作用。方法厄洛替尼不同浓度(1、5、25μmol/L)处理A549细胞及其获得性耐厄洛替尼细胞(A549/ER)12、24、48 h后,荧光实时定量PCR观察ABCG2 mRNA表达变化,Western blot检测p-AKT、ABCG2蛋白表达变化。PI3K/AKT通路激活剂(IGF-1)和抑制剂(LY294002)分别作用于A549细胞及A549/ER细胞24 h后,荧光实时定量PCR和Western blot方法分别检测ABCG2 mRNA及p-AKT、ABCG2蛋白表达变化。流式细胞仪检测加入IGF-1和LY294002后ABCG2外排作用。结果与未加入厄洛替尼的A549、A549/ER细胞相比,厄洛替尼(1、5、25μmol/L)作用12、24、48 h后,随着剂量的增加和作用时间的延长,ABCG2的表达与p-AKT水平呈正相关。加入IGF-1 24 h后,A549细胞中ABCG2表达量升高,而加入LY294002的A549/ER细胞,ABCG2表达量下降,并且IGF-1作用24 h后ABCG2外排明显增高。LY294002作用24 h后A549/ER细胞ABCG2外排明显降低。结论 ABCG2经由PI3K/AKT信号通路介导非小细胞肺癌中厄洛潜尼耐药,且阻断PI3K/AKT通路可逆转由ABCG2介导的耐药。 展开更多
关键词 肺癌 厄洛替尼 P13K AKT ABCg2
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海绵来源的smenospongine通过抑制非小细胞肺癌细胞中的EGFR-Akt-ABCG2信号通路抑制顺铂耐药 被引量:2
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作者 廖雅慧 刘丽云 +3 位作者 朱泓睿 林厚文 严继舟 孙凡 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期997-1007,共11页
目的·研究海绵来源的倍半萜胺醌类化合物smenospongine(SME)对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞A549及其顺铂耐药株A549/DDP的抗肿瘤活性及作用机制。方法·利用2种细胞(母本细胞A549和顺铂耐药细胞A549/D... 目的·研究海绵来源的倍半萜胺醌类化合物smenospongine(SME)对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞A549及其顺铂耐药株A549/DDP的抗肿瘤活性及作用机制。方法·利用2种细胞(母本细胞A549和顺铂耐药细胞A549/DDP)作为研究模型,采用CCK-8实验检测2株细胞对一线化学治疗药物的半抑制浓度(half maximum inhibitory concentration,IC50)以验证A549/DDP多药耐药的情况;通过克隆形成实验检测SME对母本及耐药细胞增殖的影响,同时采用Transwell侵袭实验以及蛋白质印迹法(Western blotting)检测SME对A549/DDP上皮间质转化(epithelial to mesenchymal transition,EMT)的影响;应用Western blotting和实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测2株细胞中受到SME调节的多药耐药基因的蛋白和mRNA表达水平,探讨其耐药分子机制;进一步采用Western blotting检测SME对多药耐药蛋白ATP结合盒蛋白G超家族成员2(ATP-binding cassette superfamily G member 2,ABCG2)上游蛋白的影响;通过流式细胞技术检测SME对母本细胞和顺铂耐药株细胞周期的影响,同时应用TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-end labeling)染色以及Western blotting检测SME对2株细胞凋亡的影响。结果·与母本细胞相比,顺铂耐药株A549/DDP细胞对顺铂表现出显著耐药性,同时对多种临床一线肺癌化学治疗药物表现出多药耐药的特征;SME显著抑制A549和A549/DDP的增殖、克隆形成,同时抑制耐药株的EMT;通过筛选多药耐药蛋白发现,SME显著下调ABCG2的蛋白以及mRNA表达;SME可抑制ABCG2上游的表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(serine/threonine kinase,Akt)信号通路,进而下调ABCG2,并上调FoxO1;SME诱导母本细胞和耐药株细胞周期阻滞在G0/G1期,同时诱导2株细胞凋亡。结论·SME作为抑制NSCLC耐药的新小分子化合物通过抑制EGFR-Akt信号通路,下调ABCG2蛋白、上调FoxO1蛋白,进而抑制A549和A549/DDP的细胞活力,抑制耐药株的EMT,最终促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 smenospongine(SME) 非小细胞肺癌 顺铂耐药 ATP结合盒蛋白g超家族成员2 丝氨酸苏氨酸蛋白激酶
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胶质瘤对MPPa-PDT敏感性研究中ABCG2的作用 被引量:1
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作者 潘黎 田思 +8 位作者 张利 林海丹 苟慧 陈青 李开庭 白定群 孔渝菡 欧云生 虞乐华 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期81-88,共8页
背景与目的:三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(adenosine triphosphate-binding cassette superfamily G member 2,ABCG2)在多种肿瘤细胞中表达,能通过外排抗癌药物参与肿瘤耐药。本研究的目的旨在探讨人胶质瘤细胞对焦脱镁叶绿酸甲... 背景与目的:三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(adenosine triphosphate-binding cassette superfamily G member 2,ABCG2)在多种肿瘤细胞中表达,能通过外排抗癌药物参与肿瘤耐药。本研究的目的旨在探讨人胶质瘤细胞对焦脱镁叶绿酸甲酯(pyropheophorbide-a methyl ester,MPPa)介导的光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)杀伤效应的敏感性及其与ABCG2的关系。方法:选取处于对数生长期的胶质瘤细胞株U87、A172,分别经MPPa-PDT或MPPa-PDT+烟曲霉毒素C(fumitremorgin C,FTC)处理后,采用CCK-8法检测细胞活性;采用蛋白[质]印迹法(Western blot)检测细胞内ABCG2的表达;流式细胞技术法检测未光照前各组细胞内MPPa的含量;AnnexinⅤ-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率;DCFH-DA染色观察细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生。结果:MPPa-PDT能抑制A172、U87细胞的活性,且呈一定的光能量依赖性,A172达到半数致死量所需光能量密度为U87的8倍;A172较U87细胞对MPPa-PDT不敏感;A172细胞内高表达的ABCG2影响MPPa在细胞内的聚集;抑制ABCG2后,不仅可以增强MPPa-PDT对A172细胞的杀伤作用,同时可增加MPPa-PDT触发产生的ROS的量及细胞对MPPa的摄取。结论:人胶质瘤细胞株A172对MPPa-PDT相对不敏感,并且产生这种现象的机制可能是ABCG2外排MPPa,减少MPPa的细胞内聚集,进而减弱光敏剂活化后对肿瘤细胞的杀伤作用。 展开更多
关键词 三磷酸腺苷结合转运蛋白g超家族成员2 焦脱镁叶绿酸甲酯 光动力疗法 敏感性 胶质瘤
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ATP结合盒蛋白G超家族成员2在肺癌中的表达及意义 被引量:2
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作者 徐建华 江萍 邓炯 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期830-833,共4页
肺癌细胞的干性及耐药性是重要的恶性指标。ATP结合盒蛋白G超家族成员2(ATP-binding cassette superfamily G member 2,ABCG2)是细胞表面的ATP结合盒蛋白家族的成员之一,依赖ATP可将药物排到细胞外。ABCG2定位于人多种肿瘤细胞的膜上,... 肺癌细胞的干性及耐药性是重要的恶性指标。ATP结合盒蛋白G超家族成员2(ATP-binding cassette superfamily G member 2,ABCG2)是细胞表面的ATP结合盒蛋白家族的成员之一,依赖ATP可将药物排到细胞外。ABCG2定位于人多种肿瘤细胞的膜上,它的表达与肿瘤化学治疗多药耐药性紧密相关,目前被认为是肺癌干细胞鉴定的辅助群体标志物。此外,ABCG2的一些单核苷酸多态性与肺癌多药耐药性存在显著相关性。该文就最新ABCG2相关研究进展进行总结和归纳,重点介绍ABCG2基因的表达调控、ABCG2与肺癌干性的关系以及ABCG2的单核苷酸多态性与肺癌耐药性的相关性研究,以期为肺癌患者的临床治疗提供新的策略。 展开更多
关键词 ATP结合盒蛋白g超家族成员2 肺癌 细胞干性 耐药性
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环磷酰胺体内干预对肾上腺皮质癌细胞ABCG2表达的影响 被引量:1
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作者 陈小舟 罗佐杰 +5 位作者 邝晓聪 秦映芬 曾文清 黄振兴 覃苑 吴峰萍 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2014年第9期915-917,共3页
目的肿瘤高表达多药耐药相关转运蛋白三磷酸腺苷结合转运蛋白G家族成员2(ATP-binding cassette super family G member 2,ABCG2)是造成耐药及化疗失败的主要原因。文中旨在探讨环磷酰胺体内干预后肾上腺皮质癌细胞中ABCG2表达的意义。方... 目的肿瘤高表达多药耐药相关转运蛋白三磷酸腺苷结合转运蛋白G家族成员2(ATP-binding cassette super family G member 2,ABCG2)是造成耐药及化疗失败的主要原因。文中旨在探讨环磷酰胺体内干预后肾上腺皮质癌细胞中ABCG2表达的意义。方法 BALB/C-nu裸鼠共10只,雌雄不拘,随机数表法分为对照组和环磷酰胺组,每组5只。将SW-13细胞注射入裸鼠皮下建立裸鼠皮下移植瘤模型,环磷酰胺组予腹腔注射环磷酰胺,对照组予注射等量等渗盐水,并对获得的2组瘤体组织进行原代培养。用免疫组化法(阳性肿瘤细胞百分比<10%者为阴性,≥10%为阳性)和流式细胞法分别检测瘤体组织及原代细胞株ABCG2的表达。结果流式细胞法检测ABCG2在环磷酰胺组细胞中表达率[(97.89±1.36)%]高于对照组细胞[(81.88±8.31)%],差异有统计学意义(P<0.05),免疫组化结果提示环磷酰胺组瘤体组织中ABCG2表达阳性率[(69.1±1.83)%]高于对照组[(53.4±1.65)%],差异有统计学意义(P<0.05)。结论多药耐药基因ABCG2参与肾上腺皮质癌耐药,可能为肾上腺皮质癌干预靶点。 展开更多
关键词 三磷酸腺苷结合转运蛋白g家族成员2 肾上腺皮质癌 环磷酰胺 耐药
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IL-1β对BeWo细胞ABCG2 mRNA表达的影响
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作者 梁慧超 王自能 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期844-847,共4页
目的:探讨人滋养细胞ABC膜转运蛋白家族G2蛋白(ABCG2)mRNA的表达与白细胞介素-1β(IL-1β)的关系。方法:体外培养人胎盘滋养细胞BeWo,分为IL-1β干预组和空白对照组,每组重复3次,干预组分别于12、24、48、72小时收集BeWo细胞,抽提总RNA... 目的:探讨人滋养细胞ABC膜转运蛋白家族G2蛋白(ABCG2)mRNA的表达与白细胞介素-1β(IL-1β)的关系。方法:体外培养人胎盘滋养细胞BeWo,分为IL-1β干预组和空白对照组,每组重复3次,干预组分别于12、24、48、72小时收集BeWo细胞,抽提总RNA。采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测两组细胞ABCG2 mRNA表达。结果:实时荧火定量PCR检测干预12、24、48、72小时ABCG2 mRNA表达量:IL-1β干预组1.19±0.02、1.90±0.04、2.59±0.03、2.98±0.07(×106copies/μg RNA),空白对照组1.00±0.03、1.01±0.03、0.99±0.03、1.04±0.02(×106copies/μg RNA),IL-1β干预组ABCG2 mRNA表达量显著高于相应时间点空白对照组的表达(F=6657.235,P=0.000)。IL-1β干预组后一时间点的表达量显著高于前一时间点的表达量(F=783.772,P=0.000),且IL-1β干预各组的表达量显著高于任一时间点空白对照组的表达量(F=744.127,P=0.000)。结论:IL-1β能增强BeWo细胞ABCG2的表达,提示IL-1β可能在转录水平上调ABCG2 mRNA表达。 展开更多
关键词 滋养细胞 ABC膜转运蛋白家族g2蛋白 白细胞介素-1Β
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