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人SCF基因5′旁侧-1190~- 853 AT富集区功能研究
被引量:
4
1
作者
聂怡玲
谭文斌
+5 位作者
朱敏
罗赛群
郭小珊
成光杰
胡维新
彭兴华
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第3期315-318,共4页
已有的报告基因和EMSA实验研究表明 ,人干细胞生长因子 (SCF)基因 5′旁侧AT富集区- 1 1 90~ - 853在HeLa和MCF 7细胞中均能增强下游基因转录 ,可能为一个核基质结合区(MAR) ,对人SCF基因的转录发挥调控作用 .为进一步研究该AT富集区...
已有的报告基因和EMSA实验研究表明 ,人干细胞生长因子 (SCF)基因 5′旁侧AT富集区- 1 1 90~ - 853在HeLa和MCF 7细胞中均能增强下游基因转录 ,可能为一个核基质结合区(MAR) ,对人SCF基因的转录发挥调控作用 .为进一步研究该AT富集区的功能 ,将人SCF基因 5′旁侧 - 1 1 90~ - 853AT富集区分别克隆入SV40或CMV启动子前后紧接着CAT报告基因 ,瞬时转染Jurkat,HepG2和 3T3细胞 ,检测CAT报告基因的瞬时表达活性 .结果表明 :人SCF基因 5′旁侧- 1 1 90~ - 853AT富集区在Jurkat和HepG2细胞中 ,对分别由SV40和CMV启动子引导的CAT基因表达均有抑制作用 ;但在 3T3细胞中对SV40启动子的转录活性表现出增强作用 ,对CMV启动子的转录活性无明显影响 .这些结果提示 ,人SCF基因 5′旁侧 - 1 1 90~ - 853AT富集区转录调控具有组织细胞特异性 。
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关键词
人干细胞因子基因
调控元件
启动子
报告基因检测
SCF
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职称材料
人vigilin基因5'端调控区域的研究
被引量:
1
2
作者
曾星
《生物化学杂志》
CSCD
1997年第4期385-390,共6页
在克隆了人基因组全长vigilin基因的基础上,对其5端转录调控区域再克隆,获得Vig-CG5-7E克隆,再用限制酶ApaⅠ和EcoRⅠ切除3端约4kb部分,得到Vig-CG5-7E3AE克隆,并对该克隆进行双向...
在克隆了人基因组全长vigilin基因的基础上,对其5端转录调控区域再克隆,获得Vig-CG5-7E克隆,再用限制酶ApaⅠ和EcoRⅠ切除3端约4kb部分,得到Vig-CG5-7E3AE克隆,并对该克隆进行双向测序分析.结果表明:克隆Vig-CG5-7E用ApaⅠ酶消化后,用cDNA上游开始的20个碱基组成的寡聚核苷酸做探针进行分子杂交,可见一条小于0.1kb杂交带,根据物理图谱分析,位于Vig-CG5-7E3AE克隆的ApaⅠ端,从而推断该克隆含有转录调控元件,5端序列分析得到二个TATA盒,一个CAAT盒和一个GC盒以及二个可能的Ap-1和Ap-2结合位点.
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关键词
人
vigilin基因
调控序列
分子遗传学
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职称材料
人类Pax-5基因外显子1B的5'侧翼区碱基序列分析
3
作者
刘茂林
Mizanur Rahman
+1 位作者
平林泰彦
佐佐木毅
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第5期318-321,共4页
目的:探讨Pax- 5基因表达在B细胞分化发育的调节机制。方法:利用分子克隆及亚克隆技术对Pax-5基因外显子1B的5’侧翼区分离克隆。用双链双脱氧终止法进行核苷酸序列测定,并对侧序资料进行序列程序分析。结果:整段碱基序列(6671 hp...
目的:探讨Pax- 5基因表达在B细胞分化发育的调节机制。方法:利用分子克隆及亚克隆技术对Pax-5基因外显子1B的5’侧翼区分离克隆。用双链双脱氧终止法进行核苷酸序列测定,并对侧序资料进行序列程序分析。结果:整段碱基序列(6671 hp)分析表明:无TATA盒共同序列存在,近段启动子包括3个CAT盒,1个SP1和1个E盒;上游进一步推测的调节位点显示6个LMO2COM,5个NFAT,2个LPOLYA-B,3个GATA1,2个AP4,10个AZF1,1个ETS1-B,1个GATA3,1个NKX25,2个RORA1,1个LYFI,2个Ikaros2,2个ICF11,1个GATA-C和1个FREAC7确定在序列上。结论:Pax-5基因外显子1B的5’侧翼区与Pax-5表达的调节有关,且对保证B细胞谱系和B细胞发育起重要调节作用。
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关键词
Pax-5基因
5′侧翼区序列
启动子
推测调节位点
基因表达
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职称材料
bax嵌合基因克隆及其在人舌癌细胞的表达
4
作者
马英红
陈俊杰
+3 位作者
高家让
王若菡
彭文珍
杨绍华
《中国癌症杂志》
CAS
CSCD
2002年第1期1-4,共4页
目的 :构建能在人舌癌细胞中高效表达Bax蛋白的bax嵌合基因。方法 :将RT PCR获得bax基因编码序列克隆至原核表达载体pGEX 5T ,再将baxcDNA插入人α1(Ⅰ )胶原基因顺式作用元件 (CIP)与报告基因CAT之间 ,构成 pSV CIP bax CAT嵌合基因 ;...
目的 :构建能在人舌癌细胞中高效表达Bax蛋白的bax嵌合基因。方法 :将RT PCR获得bax基因编码序列克隆至原核表达载体pGEX 5T ,再将baxcDNA插入人α1(Ⅰ )胶原基因顺式作用元件 (CIP)与报告基因CAT之间 ,构成 pSV CIP bax CAT嵌合基因 ;用阳离子脂质体DOSPER将此嵌合基因转染至人舌鳞癌细胞Tca8113;用免疫狭缝印迹和ELISA方法分析报告基因CAT和目的基因bax在细胞中的表达。结果 :bax基因编码序列及嵌合基因限制性酶谱正确 ;CAT表达的ELISA检测证实 ,转染是成功的 ,且CIP在Tca8113细胞中有促进其下游基因表达的作用 (为对照组的 15倍 ) ;免疫狭缝印迹和ELISA证实 ,转染细胞能高效表达Bax蛋白 (为对照组的 8倍 )。结论 :bax嵌合基因 pSV CIP bax CAT能在人舌癌细胞中高效表达Bax蛋白 ,为进一步研究bax基因对舌癌细胞生长与凋亡的影响奠定了基础。
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关键词
BAX基因
人胶原基因调节元件
报造基因CAT
人舌鳞癌细胞
嵌合基因
克隆
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职称材料
题名
人SCF基因5′旁侧-1190~- 853 AT富集区功能研究
被引量:
4
1
作者
聂怡玲
谭文斌
朱敏
罗赛群
郭小珊
成光杰
胡维新
彭兴华
机构
中南大学湘雅医学院分子生物学研究中心
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第3期315-318,共4页
基金
国家自然科学基金 (No .3 970 0 0 5 0
3 990 0 15 9)资助项目&&
文摘
已有的报告基因和EMSA实验研究表明 ,人干细胞生长因子 (SCF)基因 5′旁侧AT富集区- 1 1 90~ - 853在HeLa和MCF 7细胞中均能增强下游基因转录 ,可能为一个核基质结合区(MAR) ,对人SCF基因的转录发挥调控作用 .为进一步研究该AT富集区的功能 ,将人SCF基因 5′旁侧 - 1 1 90~ - 853AT富集区分别克隆入SV40或CMV启动子前后紧接着CAT报告基因 ,瞬时转染Jurkat,HepG2和 3T3细胞 ,检测CAT报告基因的瞬时表达活性 .结果表明 :人SCF基因 5′旁侧- 1 1 90~ - 853AT富集区在Jurkat和HepG2细胞中 ,对分别由SV40和CMV启动子引导的CAT基因表达均有抑制作用 ;但在 3T3细胞中对SV40启动子的转录活性表现出增强作用 ,对CMV启动子的转录活性无明显影响 .这些结果提示 ,人SCF基因 5′旁侧 - 1 1 90~ - 853AT富集区转录调控具有组织细胞特异性 。
关键词
人干细胞因子基因
调控元件
启动子
报告基因检测
SCF
Keywords
human
stem cell factor
gene
,
regulatory
element
s,promoter,reporter
gene
assay
分类号
Q75 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
人vigilin基因5'端调控区域的研究
被引量:
1
2
作者
曾星
机构
同济医科大学实验医学研究中心分子生物学研究室
出处
《生物化学杂志》
CSCD
1997年第4期385-390,共6页
文摘
在克隆了人基因组全长vigilin基因的基础上,对其5端转录调控区域再克隆,获得Vig-CG5-7E克隆,再用限制酶ApaⅠ和EcoRⅠ切除3端约4kb部分,得到Vig-CG5-7E3AE克隆,并对该克隆进行双向测序分析.结果表明:克隆Vig-CG5-7E用ApaⅠ酶消化后,用cDNA上游开始的20个碱基组成的寡聚核苷酸做探针进行分子杂交,可见一条小于0.1kb杂交带,根据物理图谱分析,位于Vig-CG5-7E3AE克隆的ApaⅠ端,从而推断该克隆含有转录调控元件,5端序列分析得到二个TATA盒,一个CAAT盒和一个GC盒以及二个可能的Ap-1和Ap-2结合位点.
关键词
人
vigilin基因
调控序列
分子遗传学
Keywords
human
vigilin
gene
,
regulatory
element
s
分类号
Q75 [生物学—分子生物学]
在线阅读
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职称材料
题名
人类Pax-5基因外显子1B的5'侧翼区碱基序列分析
3
作者
刘茂林
Mizanur Rahman
平林泰彦
佐佐木毅
机构
江西医学院第三附属医院肾病风湿病科
日本东北大学医学部风湿病血液病制御学教室
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第5期318-321,共4页
文摘
目的:探讨Pax- 5基因表达在B细胞分化发育的调节机制。方法:利用分子克隆及亚克隆技术对Pax-5基因外显子1B的5’侧翼区分离克隆。用双链双脱氧终止法进行核苷酸序列测定,并对侧序资料进行序列程序分析。结果:整段碱基序列(6671 hp)分析表明:无TATA盒共同序列存在,近段启动子包括3个CAT盒,1个SP1和1个E盒;上游进一步推测的调节位点显示6个LMO2COM,5个NFAT,2个LPOLYA-B,3个GATA1,2个AP4,10个AZF1,1个ETS1-B,1个GATA3,1个NKX25,2个RORA1,1个LYFI,2个Ikaros2,2个ICF11,1个GATA-C和1个FREAC7确定在序列上。结论:Pax-5基因外显子1B的5’侧翼区与Pax-5表达的调节有关,且对保证B细胞谱系和B细胞发育起重要调节作用。
关键词
Pax-5基因
5′侧翼区序列
启动子
推测调节位点
基因表达
Keywords
Keywords:
human
Pax-5
gene
5'-flanking sequence Promoter
element
Putative
regulatory
sites
分类号
Q756 [生物学—分子生物学]
Q753 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
bax嵌合基因克隆及其在人舌癌细胞的表达
4
作者
马英红
陈俊杰
高家让
王若菡
彭文珍
杨绍华
机构
四川大学华西医学中心生物化学与分子生物学研究所
四川大学华西医学中心口腔医学院
出处
《中国癌症杂志》
CAS
CSCD
2002年第1期1-4,共4页
基金
国家自然科学基金 (No .39370 742 )
文摘
目的 :构建能在人舌癌细胞中高效表达Bax蛋白的bax嵌合基因。方法 :将RT PCR获得bax基因编码序列克隆至原核表达载体pGEX 5T ,再将baxcDNA插入人α1(Ⅰ )胶原基因顺式作用元件 (CIP)与报告基因CAT之间 ,构成 pSV CIP bax CAT嵌合基因 ;用阳离子脂质体DOSPER将此嵌合基因转染至人舌鳞癌细胞Tca8113;用免疫狭缝印迹和ELISA方法分析报告基因CAT和目的基因bax在细胞中的表达。结果 :bax基因编码序列及嵌合基因限制性酶谱正确 ;CAT表达的ELISA检测证实 ,转染是成功的 ,且CIP在Tca8113细胞中有促进其下游基因表达的作用 (为对照组的 15倍 ) ;免疫狭缝印迹和ELISA证实 ,转染细胞能高效表达Bax蛋白 (为对照组的 8倍 )。结论 :bax嵌合基因 pSV CIP bax CAT能在人舌癌细胞中高效表达Bax蛋白 ,为进一步研究bax基因对舌癌细胞生长与凋亡的影响奠定了基础。
关键词
BAX基因
人胶原基因调节元件
报造基因CAT
人舌鳞癌细胞
嵌合基因
克隆
Keywords
bax
gene
regulatory element of human collagen gene
reporter
gene
CAT
human
squamous lingual carcinoma cell
分类号
R739.86 [医药卫生—肿瘤]
Q782 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人SCF基因5′旁侧-1190~- 853 AT富集区功能研究
聂怡玲
谭文斌
朱敏
罗赛群
郭小珊
成光杰
胡维新
彭兴华
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
人vigilin基因5'端调控区域的研究
曾星
《生物化学杂志》
CSCD
1997
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
人类Pax-5基因外显子1B的5'侧翼区碱基序列分析
刘茂林
Mizanur Rahman
平林泰彦
佐佐木毅
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
4
bax嵌合基因克隆及其在人舌癌细胞的表达
马英红
陈俊杰
高家让
王若菡
彭文珍
杨绍华
《中国癌症杂志》
CAS
CSCD
2002
0
在线阅读
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职称材料
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