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人SCF基因5′旁侧-1190~- 853 AT富集区功能研究 被引量:4
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作者 聂怡玲 谭文斌 +5 位作者 朱敏 罗赛群 郭小珊 成光杰 胡维新 彭兴华 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期315-318,共4页
已有的报告基因和EMSA实验研究表明 ,人干细胞生长因子 (SCF)基因 5′旁侧AT富集区- 1 1 90~ - 853在HeLa和MCF 7细胞中均能增强下游基因转录 ,可能为一个核基质结合区(MAR) ,对人SCF基因的转录发挥调控作用 .为进一步研究该AT富集区... 已有的报告基因和EMSA实验研究表明 ,人干细胞生长因子 (SCF)基因 5′旁侧AT富集区- 1 1 90~ - 853在HeLa和MCF 7细胞中均能增强下游基因转录 ,可能为一个核基质结合区(MAR) ,对人SCF基因的转录发挥调控作用 .为进一步研究该AT富集区的功能 ,将人SCF基因 5′旁侧 - 1 1 90~ - 853AT富集区分别克隆入SV40或CMV启动子前后紧接着CAT报告基因 ,瞬时转染Jurkat,HepG2和 3T3细胞 ,检测CAT报告基因的瞬时表达活性 .结果表明 :人SCF基因 5′旁侧- 1 1 90~ - 853AT富集区在Jurkat和HepG2细胞中 ,对分别由SV40和CMV启动子引导的CAT基因表达均有抑制作用 ;但在 3T3细胞中对SV40启动子的转录活性表现出增强作用 ,对CMV启动子的转录活性无明显影响 .这些结果提示 ,人SCF基因 5′旁侧 - 1 1 90~ - 853AT富集区转录调控具有组织细胞特异性 。 展开更多
关键词 人干细胞因子基因 调控元件 启动子 报告基因检测 SCF
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人vigilin基因5'端调控区域的研究 被引量:1
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作者 曾星 《生物化学杂志》 CSCD 1997年第4期385-390,共6页
在克隆了人基因组全长vigilin基因的基础上,对其5端转录调控区域再克隆,获得Vig-CG5-7E克隆,再用限制酶ApaⅠ和EcoRⅠ切除3端约4kb部分,得到Vig-CG5-7E3AE克隆,并对该克隆进行双向... 在克隆了人基因组全长vigilin基因的基础上,对其5端转录调控区域再克隆,获得Vig-CG5-7E克隆,再用限制酶ApaⅠ和EcoRⅠ切除3端约4kb部分,得到Vig-CG5-7E3AE克隆,并对该克隆进行双向测序分析.结果表明:克隆Vig-CG5-7E用ApaⅠ酶消化后,用cDNA上游开始的20个碱基组成的寡聚核苷酸做探针进行分子杂交,可见一条小于0.1kb杂交带,根据物理图谱分析,位于Vig-CG5-7E3AE克隆的ApaⅠ端,从而推断该克隆含有转录调控元件,5端序列分析得到二个TATA盒,一个CAAT盒和一个GC盒以及二个可能的Ap-1和Ap-2结合位点. 展开更多
关键词 vigilin基因 调控序列 分子遗传学
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人类Pax-5基因外显子1B的5'侧翼区碱基序列分析
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作者 刘茂林 Mizanur Rahman +1 位作者 平林泰彦 佐佐木毅 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期318-321,共4页
目的:探讨Pax- 5基因表达在B细胞分化发育的调节机制。方法:利用分子克隆及亚克隆技术对Pax-5基因外显子1B的5’侧翼区分离克隆。用双链双脱氧终止法进行核苷酸序列测定,并对侧序资料进行序列程序分析。结果:整段碱基序列(6671 hp... 目的:探讨Pax- 5基因表达在B细胞分化发育的调节机制。方法:利用分子克隆及亚克隆技术对Pax-5基因外显子1B的5’侧翼区分离克隆。用双链双脱氧终止法进行核苷酸序列测定,并对侧序资料进行序列程序分析。结果:整段碱基序列(6671 hp)分析表明:无TATA盒共同序列存在,近段启动子包括3个CAT盒,1个SP1和1个E盒;上游进一步推测的调节位点显示6个LMO2COM,5个NFAT,2个LPOLYA-B,3个GATA1,2个AP4,10个AZF1,1个ETS1-B,1个GATA3,1个NKX25,2个RORA1,1个LYFI,2个Ikaros2,2个ICF11,1个GATA-C和1个FREAC7确定在序列上。结论:Pax-5基因外显子1B的5’侧翼区与Pax-5表达的调节有关,且对保证B细胞谱系和B细胞发育起重要调节作用。 展开更多
关键词 Pax-5基因 5′侧翼区序列 启动子 推测调节位点 基因表达
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bax嵌合基因克隆及其在人舌癌细胞的表达
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作者 马英红 陈俊杰 +3 位作者 高家让 王若菡 彭文珍 杨绍华 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2002年第1期1-4,共4页
目的 :构建能在人舌癌细胞中高效表达Bax蛋白的bax嵌合基因。方法 :将RT PCR获得bax基因编码序列克隆至原核表达载体pGEX 5T ,再将baxcDNA插入人α1(Ⅰ )胶原基因顺式作用元件 (CIP)与报告基因CAT之间 ,构成 pSV CIP bax CAT嵌合基因 ;... 目的 :构建能在人舌癌细胞中高效表达Bax蛋白的bax嵌合基因。方法 :将RT PCR获得bax基因编码序列克隆至原核表达载体pGEX 5T ,再将baxcDNA插入人α1(Ⅰ )胶原基因顺式作用元件 (CIP)与报告基因CAT之间 ,构成 pSV CIP bax CAT嵌合基因 ;用阳离子脂质体DOSPER将此嵌合基因转染至人舌鳞癌细胞Tca8113;用免疫狭缝印迹和ELISA方法分析报告基因CAT和目的基因bax在细胞中的表达。结果 :bax基因编码序列及嵌合基因限制性酶谱正确 ;CAT表达的ELISA检测证实 ,转染是成功的 ,且CIP在Tca8113细胞中有促进其下游基因表达的作用 (为对照组的 15倍 ) ;免疫狭缝印迹和ELISA证实 ,转染细胞能高效表达Bax蛋白 (为对照组的 8倍 )。结论 :bax嵌合基因 pSV CIP bax CAT能在人舌癌细胞中高效表达Bax蛋白 ,为进一步研究bax基因对舌癌细胞生长与凋亡的影响奠定了基础。 展开更多
关键词 BAX基因 人胶原基因调节元件 报造基因CAT 人舌鳞癌细胞 嵌合基因 克隆
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