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绵羊十二指肠中β-防御素-1原核表达和抑菌效果分析
1
作者 王鑫 秦少杰 +3 位作者 毛伟 巩志国 王志 曹贵方 《动物医学进展》 北大核心 2025年第11期38-43,共6页
哺乳动物防御素具有抗肿瘤、广谱抗菌和免疫调节的作用,但目前防御素在大规模生产上存在一定困难而未被广泛应用。为开发利用防御素,通过构建pET-22b-SUMO-SBD-1重组质粒及诱导表达的方法表达绵羊β-防御素-1(SBD-1),从蒙古绵羊十二指... 哺乳动物防御素具有抗肿瘤、广谱抗菌和免疫调节的作用,但目前防御素在大规模生产上存在一定困难而未被广泛应用。为开发利用防御素,通过构建pET-22b-SUMO-SBD-1重组质粒及诱导表达的方法表达绵羊β-防御素-1(SBD-1),从蒙古绵羊十二指肠中提取的总RNA经PCR扩增后可获得绵羊SBD-1 cDNA基因。为了大量表达SBD-1,采用了原核表达系统,并添加了SUMO作为标签蛋白。用SalⅠ、NotⅠ双酶切分别处理原核表达载体pET-22b和阳性重组质粒pMD19-T-SUMO-SBD-1,得到约4000 bp的pET-22b和约400 bp的SBD-1。将重组质粒pET-22b-SUMO-SBD-1转化入BL21(DE3),并对转入pET-22b-SUMO-SBD-1重组质粒进行检测,得到单一条带为阳性重组菌。结果表明,在低温条件下,大肠埃希氏菌表达的SUMO-SBD-1融合蛋白的蛋白表达水平和活性可能都会提高。Western blot检测获得特异性条带,结果与预期相符。通过体外表达绵羊防御素,并研究其抗菌作用,为进一步开发利用防御素奠定了基础。 展开更多
关键词 绵羊β-防御素 SUMO 原核表达 抗菌肽
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不同年龄牦牛肺脏中JAK2、STAT3、P-JAK2/STAT3及PCNA蛋白的表达分析 被引量：1
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作者 牛悦悦 崔燕 +6 位作者 余四九 何俊峰 杨珊珊 祁正满 豆婉婉 陈春燕 邓演江 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第6期2957-2967,共11页
本研究旨在探究JAK2/STAT3信号通路及其调节的细胞增殖关键蛋白PCNA在不同年龄牦牛肺脏中的表达分布及可能发挥的作用。本试验以初生、幼年、成年和老年健康牦牛肺脏为研究对象,利用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR... 本研究旨在探究JAK2/STAT3信号通路及其调节的细胞增殖关键蛋白PCNA在不同年龄牦牛肺脏中的表达分布及可能发挥的作用。本试验以初生、幼年、成年和老年健康牦牛肺脏为研究对象,利用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测JAK2、STAT3和PCNA mRNA在不同年龄牦牛肺脏中的表达情况,采用免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)和免疫蛋白印迹(Western blot)方法检测JAK2、STAT3、P-JAK2/STAT3及PCNA蛋白在不同年龄牦牛肺脏中的表达分布情况。结果显示:JAK2、STAT3、P-JAK2/STAT3和PCNA的表达分布基本一致,主要分布在支气管上皮与血管内皮,支气管壁平滑肌层、血管平滑肌以及肺泡细胞等部位。JAK 2 mRNA的表达量在不同年龄牦牛肺脏中呈现先升高后降低趋势,成年组表达最高;STAT 3 mRNA在肺脏中的表达量随牦牛年龄的增加而增加,老年组表达最高;PCNA mRNA在成年组和老年组的表达量明显高于初生组及幼年组。此外,JAK2、STAT3、P-JAK2/STAT3及PCNA蛋白在不同年龄牦牛肺脏中表达不同,P-JAK2/STAT3与JAK2/STAT3趋势基本一致,JAK2、P-JAK2蛋白在幼年组表达量最高,STAT3、P-STAT3蛋白在初生组和成年组表达量显著高于幼年组及老年组,其中初生组高于成年组;PCNA蛋白在初生组表达量明显高于幼年、成年和老年三组。综上,JAK2/STAT3信号通路及其调节的PCNA在不同年龄牦牛肺脏中的表达分布存在差异,提示JAK2/STAT3信号通路参与了牦牛肺脏发育过程。研究结果为进一步明确JAK2/STAT3信号通路及其靶向调节的PCNA在牦牛肺脏对高原低氧适应过程中发挥的作用提供研究依据。 展开更多
关键词 牦牛 肺脏 JAK2/STAT3信号通路 低氧性肺动脉高压
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圆小囊结构和功能的研究进展
3
作者 李佳 马卓 +3 位作者 于畅 王丹丹 张金龙 马志禹 《动物医学进展》 北大核心 2025年第6期105-109,共5页
圆小囊(SR)是兔回肠末端与盲肠相接处形成的一个壁厚而膨大的圆囊,主要由丰富的淋巴组织构成,为兔特有的外周免疫器官。圆小囊在兔的生理活动中具有重要地位,发挥着消化吸收、免疫防御、神经内分泌等多种生理功能。圆小囊结构特殊、功... 圆小囊(SR)是兔回肠末端与盲肠相接处形成的一个壁厚而膨大的圆囊,主要由丰富的淋巴组织构成,为兔特有的外周免疫器官。圆小囊在兔的生理活动中具有重要地位,发挥着消化吸收、免疫防御、神经内分泌等多种生理功能。圆小囊结构特殊、功能复杂,在科学试验中具有重要研究价值和参考意义,在实际应用中具有广阔发展前景。论文从圆小囊的解剖学、组织学、影像学等方面总结了其结构特征,对圆小囊多种生理功能的研究进展做了综述,并对圆小囊抗菌肽的研究和应用进行了总结与展望。旨在为今后以圆小囊为研究对象的学者提供借鉴和参考,同时为宠物兔疾病临床诊断以及推动圆小囊抗菌肽的研究应用提供理论依据和支撑。 展开更多
关键词 圆小囊 结构 生理功能 神经-内分泌-免疫网络 抗菌肽
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牦牛肺脏气道肺神经内分泌细胞及其相关因子的分布和表达分析
4
作者 豆婉婉 崔燕 +2 位作者 张倩 牛悦悦 何俊峰 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第11期5888-5900,共13页
肺神经内分泌细胞(PNEC)位于气道上皮层内,可分泌活性胺和肽类物质,兼有神经细胞及内分泌细胞的特征,与陆生哺乳动物肺脏发育和适应外界环境功能密切相关。为探究PNEC在不同年龄牦牛肺脏中的分布和低氧适应性结构形成过程中的可能作用,... 肺神经内分泌细胞(PNEC)位于气道上皮层内,可分泌活性胺和肽类物质,兼有神经细胞及内分泌细胞的特征,与陆生哺乳动物肺脏发育和适应外界环境功能密切相关。为探究PNEC在不同年龄牦牛肺脏中的分布和低氧适应性结构形成过程中的可能作用,本研究选取初生(1~6日龄)、幼年(1~3岁)、成年(4~6岁)及老年(7~10岁)牦牛各6头,利用Grimelius嗜银染色、免疫组织化学染色、免疫荧光染色对PNEC及其相关因子嗜铬粒蛋白A(CGA)、S100蛋白(S100 A1)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)和神经源性分化因子(NEUROD1)的分布特征进行研究,同时采用Western blot和qRT-PCR检测这些相关因子在蛋白水平的表达及基因水平的转录。结果显示,牦牛肺脏气道上皮中PNEC数量以初生组最多;PNEC相关因子主要分布于气道上皮细胞、II型肺泡上皮细胞、肺动脉内皮细胞及气管腺腺上皮细胞;CGA、S100A1和NEUROD1的表达趋势基本一致,均在初生组牦牛肺脏中表达最高,之后呈递减趋势,蛋白水平上的表达各组差异均显著(P<0.05)。基因水平上的转录各组趋势虽然一致,但4种因子组间差异较大,NSE在成年组牦牛肺脏中表达最高,且显著高于初生组、幼年组、老年组牦牛,呈现先递增再递减的趋势。本研究表明PNEC及其相关因子通过动态表达调控可能参与了牦牛肺脏对低氧环境的适应性调节,同时为牦牛生存繁衍提供关键能量支持,也为进一步研究牦牛肺脏低氧适应机制提供了资料。 展开更多
关键词 牦牛 肺 神经内分泌细胞
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Ghrelin对非洲雏鸵鸟胸腺生长发育的影响
5
作者 蒋金凤 李白涛 +2 位作者 周峰 王家乡 李鹏 《中国家禽》 北大核心 2025年第1期89-96,共8页
为探明注射外源性生长素释放肽(Ghrelin)对非洲雏鸵鸟胸腺生长发育的影响,试验将16只7日龄非洲雏鸵鸟随机分为4组,每组4个重复,饲养33 d后采用趾静脉内注射不同剂量(0、10μg/kg、50μg/kg、100μg/kg)Ghrelin,取胸腺组织进行石蜡包埋... 为探明注射外源性生长素释放肽(Ghrelin)对非洲雏鸵鸟胸腺生长发育的影响,试验将16只7日龄非洲雏鸵鸟随机分为4组,每组4个重复,饲养33 d后采用趾静脉内注射不同剂量(0、10μg/kg、50μg/kg、100μg/kg)Ghrelin,取胸腺组织进行石蜡包埋、切片,采用HE染色、TUNEL技术、免疫组织化学染色、qPCR技术,对雏鸵鸟胸腺形态学、胸腺细胞凋亡及胸腺中Foxn1基因进行研究。结果显示:①与对照组相比,注射10μg/kg、50μg/kg、100μg/kg Ghrelin后,非洲雏鸵鸟胸腺指数和胸腺重量都会降低(P<0.05),其中100μg/kg剂量组的胸腺指数显著低于50μg/kg剂量组(P<0.05);②注射不同剂量Ghrelin后,随着剂量的增加,胸腺形态结构变化显著,其中50μg/kg剂量组胸腺皮质厚度和皮髓面积比明显降低(P<0.05),皮髓质交界模糊,皮质和髓质淋巴细胞减少,排列疏松,并且有少量淋巴细胞体积减小,胞浆减小,胞核固缩深染;③在胸腺的髓质部,皮质和皮髓交界处均有凋亡细胞,其中10μg/kg剂量组TUNEL染色阳性率极显著高于对照组(P<0.01);④Foxn1阳性细胞主要分布在髓质中,皮质部和皮髓交界处也有少量分布;各剂量组胸腺内Foxn1阳性细胞MD值均低于对照组,以100μg/kg剂量组显著降低(P<0.05);⑤qPCR结果显示,注射不同剂量Ghrelin的胸腺内Foxn1 mRNA表达水平均低于对照组(P<0.01),这与免疫组化得到的结果相似。综合以上结果,注射不同剂量Ghrelin会抑制雏鸵鸟胸腺的生长,诱导胸腺细胞凋亡,抑制胸腺内Foxn1基因表达,从而抑制胸腺的正常发育,影响雏鸵鸟的免疫调节能力。 展开更多
关键词 非洲鸵鸟 GHRELIN 胸腺 Foxn1基因 细胞凋亡
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POPC对绵羊卵母细胞体外成熟及体外受精的影响
6
作者 吴佳慧 张美佳 +3 位作者 张传强 曹鹏波 曹贵方 张涌 《动物医学进展》 北大核心 2025年第10期7-12,共6页
旨在探究1-棕榈酰-2-油酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱(POPC)对绵羊卵母细胞体外成熟和体外受精的影响,探索POPC的最佳添加剂量,以优化体外胚胎生产技术。通过免疫荧光染色、体外成熟培养和体外发育试验,研究POPC对绵羊卵母细胞体外成熟和体外... 旨在探究1-棕榈酰-2-油酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱(POPC)对绵羊卵母细胞体外成熟和体外受精的影响,探索POPC的最佳添加剂量,以优化体外胚胎生产技术。通过免疫荧光染色、体外成熟培养和体外发育试验,研究POPC对绵羊卵母细胞体外成熟和体外受精的影响,将POPC以不同浓度添加至IVM培养基中,观察卵丘细胞扩张程度、第一极体排出率、ROS水平以及体外受精后的卵裂率和囊胚率。结果显示,添加150或200μg/mL的POPC可以促进卵丘细胞扩张,提高卵母细胞体外成熟效率;加入100μg/mL的POPC能极显著提高绵羊卵母细胞的第一极体排出率,并且极显著降低ROS水平,而加入150μg/mL的POPC则能极显著提升其受精后的发育效率。 展开更多
关键词 绵羊卵母细胞 1-棕榈酰-2-油酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱(POPC) 体外成熟 体外受精
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AMPK/SIRT1介导脂联素促进牦牛睾丸支持细胞乳酸转运的分子机制
7
作者 张虔 马睿 +1 位作者 崔燕 余四九 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第7期3495-3506,共12页
AMPK/SIRT1通路在睾丸乳酸转运过程中发挥重要调控作用,且近年来脂联素对动物生殖的调控功能也逐渐被证明,但AMPK/SIRT1通路如何介导脂联素调控牦牛睾丸支持细胞的乳酸转运尚不明确。采集不同年龄牦牛睾丸(初生、幼年、成年及老年)各3头... AMPK/SIRT1通路在睾丸乳酸转运过程中发挥重要调控作用,且近年来脂联素对动物生殖的调控功能也逐渐被证明,但AMPK/SIRT1通路如何介导脂联素调控牦牛睾丸支持细胞的乳酸转运尚不明确。采集不同年龄牦牛睾丸(初生、幼年、成年及老年)各3头份,通过Western blot、组织免疫荧光染色、细胞免疫荧光染色等实验技术,探究AMPK/SIRT1通路介导脂联素促进牦牛睾丸支持细胞乳酸转运的分子机制。结果表明,AMPK、P-AMPK及SIRT1蛋白在不同年龄牦牛睾丸组织中均有表达,在幼年和老年时期的蛋白相对表达量极显著高于初生和成年(P<0.01)。且AMPK及SIRT1蛋白在不同年龄牦牛睾丸中分布相似,主要分布在睾丸支持细胞、间质细胞及各级生精细胞。用不同浓度脂联素(0、5、10、20、50、100 ng·mL^(-1))处理牦牛睾丸支持细胞,当脂联素浓度为10 ng·mL^(-1)时,极显著激活APNR1、AMPK、P-AMPK及SIRT1的蛋白表达(P<0.01),同时MCT1蛋白表达量最高,并且乳酸释放量最大。添加Compound C(AMPK蛋白抑制剂)能极显著抑制AMPK的蛋白表达(P<0.01),但脂联素和Compound C共处理能极显著提高AMPK、P-AMPK及MCT1蛋白表达量(P<0.01)。结果提示,脂联素主要通过结合APNR1,激活AMPK/SIRT1信号通路促进牦牛睾丸支持细胞乳酸转运,在牦牛睾丸发育和精子发生中发挥作用。本研究为促进牦牛生产繁殖提供一定的理论基础和依据。 展开更多
关键词 牦牛 睾丸支持细胞 脂联素 乳酸
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“1+X”证书制度下高职院校宠物解剖生理课程改革路径研究
8
作者 李晓娟 李树东 +1 位作者 姜鑫 牛静华 《中国工作犬业》 2025年第11期16-18,共3页
为了更好地促进我国职业教育健康有序发展,满足社会企业对人才的需求,2019年教育部在高职院校和应用型本科高校全面启动“学历证书+职业技能等级证书”制度(简称“1+X”证书制度)。在宠物行业中,犬作为饲养量最高、服务场景最广的宠物品... 为了更好地促进我国职业教育健康有序发展,满足社会企业对人才的需求,2019年教育部在高职院校和应用型本科高校全面启动“学历证书+职业技能等级证书”制度(简称“1+X”证书制度)。在宠物行业中,犬作为饲养量最高、服务场景最广的宠物品类,在犬健康护理、犬病防治技术、犬行为训练等岗位对人才的专业能力要求尤为精细。宠物解剖生理作为高职宠物医疗技术、宠物养护与训导等专业基础课程,其教学质量不但影响学生后续其他专业课程的掌握程度,而且直接影响学生的职业技能水平。 展开更多
关键词 课程改革 宠物解剖生理 1X证书制度 高职院校 职业技能等级证书
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基于声纹技术的动物身份识别研究进展
9
作者 南兆营 喻洪江 孔庆波 《动物医学进展》 北大核心 2025年第7期115-119,共5页
动物身份识别是进行动物管理、动物保护与生态学研究的基础。随着技术的进步,动物身份识别的方法也不断丰富,而基于声纹技术的动物身份识别在识别距离、识别准确率、系统运行成本及环境适应性等方面拥有明显的优势,是动物身份识别领域... 动物身份识别是进行动物管理、动物保护与生态学研究的基础。随着技术的进步,动物身份识别的方法也不断丰富,而基于声纹技术的动物身份识别在识别距离、识别准确率、系统运行成本及环境适应性等方面拥有明显的优势,是动物身份识别领域的研究热点,其研究内容主要集中在动物物种识别、个体识别和声音状态识别等方面。目前,在实际应用中还存在复杂场景中识别精度和稳定性不够、数据采集难度大、缺乏标准数据集等问题,需要探讨相应的解决方法。 展开更多
关键词 声纹技术 动物身份识别 深度学习
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线上线下结合融入课程思政的教学模式在高职“动物解剖生理”教学中的建设与应用
10
作者 加春生 毛泽明 +5 位作者 莫胜军 李玉平 高明 陈爽 刘树声 柏健淞 《饲料博览》 2025年第3期71-74,共4页
文章从分析我国高等职业教育“动物解剖生理”的教学模式现状与存在的问题入手,通过查阅相关文献对国内外“动物解剖生理”线上线下结合融入课程思政的教学模式和经验总结开展相关研究,通过分析此教学模式中学生实践情况的调研结果,以... 文章从分析我国高等职业教育“动物解剖生理”的教学模式现状与存在的问题入手,通过查阅相关文献对国内外“动物解剖生理”线上线下结合融入课程思政的教学模式和经验总结开展相关研究,通过分析此教学模式中学生实践情况的调研结果,以培养高素质技术技能型职业人才为逻辑起点,以人才培养中实行的“动物解剖生理”线上线下结合融入课程思政的教学模式为研究对象,探索该模式开展教学的实际状况,总结在开展教学中取得的成功经验和存在的问题,进而对问题进行深入剖析。结合国内外高职院校开展教学的实际情况,提出构建“动物解剖生理”线上线下结合融入课程思政教学模式的策略。力争实现加强高职“动物解剖生理”课堂管理工作的效果,推动高等职业教育课程教学工作健康、有序开展。 展开更多
关键词 线上+线下结合 课程思政 教学模式
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丁酸钠对体外3D培养的小鼠早期有腔卵泡发育和抗氧化能力的影响
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作者 刘晓欢 陆庄婕 +5 位作者 杨相坐 余佳忆 刘琪 许显玉 袁玉国 陈风雷 《动物医学进展》 北大核心 2025年第11期81-87,共7页
利用小鼠卵泡体外3D培养体系,探究丁酸钠(sodium butyrate,NaBu)处理对体外培养早期有腔卵泡发育及其抗氧化能力的影响。将小鼠腔前卵泡进行体外3D培养发育至早期有腔卵泡阶段,第4天丁酸钠组更换含有0.10 mmol/L丁酸钠卵泡生长培养液处... 利用小鼠卵泡体外3D培养体系,探究丁酸钠(sodium butyrate,NaBu)处理对体外培养早期有腔卵泡发育及其抗氧化能力的影响。将小鼠腔前卵泡进行体外3D培养发育至早期有腔卵泡阶段,第4天丁酸钠组更换含有0.10 mmol/L丁酸钠卵泡生长培养液处理48 h,第6天更换为正常卵泡生长培养液,第8天更换为正常卵母细胞成熟培养液继续处理16 h诱导排卵,培养期间观察卵泡形态,统计卵泡直径、存活率和卵母细胞排出率,并检测卵泡和卵母细胞抗氧化能力。结果显示,与对照组相比,丁酸钠处理对卵泡形态无显著影响;但是经丁酸钠处理后,丁酸钠组卵泡直径与对照组相比显著增加;卵母细胞排出率和卵泡存活率方面虽有所增加,但丁酸钠组和对照组无显著差异;对照组卵泡腔形成率是47.50%±6.25%,丁酸钠组是60.00%±6.25%,丁酸钠组显著高于对照组;此外,丁酸钠组卵母细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)荧光强度显著低于对照组。结果表明,短时间低剂量丁酸钠处理能够显著提高卵泡的发育和抗氧化能力,为利用丁酸钠提高畜禽繁殖性能提供了理论依据。 展开更多
关键词 3D培养 有腔卵泡 丁酸钠 抗氧化
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碱性蛋白酶在动物骨骼标本制作上的技术探索与应用
12
作者 麻文静 丁常根 +4 位作者 苏红萍 沈娜 杨兴林 陈佳佳 冯平 《现代畜牧科技》 2025年第5期35-38,共4页
动物骨骼标本制作过程中,分解筋肉是保证骨骼完整性的关键步骤,但传统方法繁琐且耗时,鉴于碱性蛋白酶在人体骨骼标本制作中展现出的高效性与便捷性,可推广应用于动物骨骼标本的制作。为探究碱性蛋白酶在不同体型动物骨骼标本制作中的适... 动物骨骼标本制作过程中,分解筋肉是保证骨骼完整性的关键步骤,但传统方法繁琐且耗时,鉴于碱性蛋白酶在人体骨骼标本制作中展现出的高效性与便捷性,可推广应用于动物骨骼标本的制作。为探究碱性蛋白酶在不同体型动物骨骼标本制作中的适用量及时间控制,该试验选取佳米驴、陕北白绒山羊、犬类、猕猴、兔等动物的头骨为试验对象,均剖解剔肉至90%程度,以15只兔头骨为样本,探究碱性蛋白酶在不同时间、浓度下的处理效果;进一步探究同一浓度的蛋白酶制剂对不同动物头骨的处理效果;通过分析不同动物头骨及同种动物头骨在碱性蛋白酶处理下的结果。结果表明,0.6%浓度的碱性蛋白酶分解液对小型动物头骨软组织具有较好的分解效果,随着头骨尺寸的增大,需相应延长处理时间以达到最佳分解效果。该研究旨在为碱性蛋白酶在动物骨骼标本制作中的实际应用提供科学依据。 展开更多
关键词 蛋白酶 标本 肌肉 头骨
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虚拟仿真赋能动物医学专业课程思政建设——以《动物解剖学》课程为例 被引量：2
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作者 蒋南 姜忠玲 +4 位作者 韩先杰 黄玉风 郇延军 马淑慧 李方正 《畜牧兽医杂志》 2025年第3期147-150,共4页
推动数字化教育是中国重要的战略发展目标。随着计算机技术的迅速发展,利用信息技术提升专业课程的思政教育效果成为当代高等教育的重要命题。本文分析目前高等院校动物解剖学课程教学面临的形势,列举动物解剖学课程思政教育的实施目标... 推动数字化教育是中国重要的战略发展目标。随着计算机技术的迅速发展,利用信息技术提升专业课程的思政教育效果成为当代高等教育的重要命题。本文分析目前高等院校动物解剖学课程教学面临的形势,列举动物解剖学课程思政教育的实施目标;探讨基于虚拟仿真技术建设动物解剖学课程思政的新思路。本文介绍利用虚拟仿真技术丰富动物医学专业课程资源,将思政元素充分融入课堂教学的实施路径,从课程目标、教学资源、教学模式以及课程评价等多方面赋能专业课思政教育建设,提升高等院校动物医学专业的课程思政育人水平。 展开更多
关键词 动物医学 虚拟仿真 课程思政 动物解剖学
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氧化应激诱导卵巢颗粒细胞凋亡过程中调控线粒体自噬的关键因子研究
14
作者 杨礼莲 隋世燕 +1 位作者 蒋蓉 徐琳杰 《动物医学进展》 北大核心 2025年第4期6-14,共9页
为了筛选氧化应激诱导人卵巢颗粒细胞(KGN细胞)凋亡过程中参与线粒体自噬的关键蛋白,取对数生长的KGN细胞,分为对照组、过氧化氢(H_(2)O_(2))组、羰基氰化氯苯腙(CCCP)组,待细胞融合率达85%~90%时,H_(2)O_(2)组加入250μmol/L H_(2)O_(2... 为了筛选氧化应激诱导人卵巢颗粒细胞(KGN细胞)凋亡过程中参与线粒体自噬的关键蛋白,取对数生长的KGN细胞,分为对照组、过氧化氢(H_(2)O_(2))组、羰基氰化氯苯腙(CCCP)组,待细胞融合率达85%~90%时,H_(2)O_(2)组加入250μmol/L H_(2)O_(2)作用6 h建立氧化应激模型,CCCP组加入20μmol/L CCCP作用12 h建立线粒体自噬模型,对照组正常培养,收集细胞样本进行蛋白质组学分析,并使用蛋白免疫印迹(Western blot)法对关键蛋白进行验证。经生物信息学分析,结合参考文献,3个组之间有40个蛋白的表达存在差异,其中与线粒体自噬有关的蛋白有BNIP3、IRS2、GATA4和ENDOG;BNIP3与ENDOG存在相互联系。Western blot检测结果显示,BNIP3、IRS2和GATA4蛋白的表达水平与测序结果一致;与对照组相比,CCCP组ENDOG蛋白表达显著下调,但H_(2)O_(2)组无显著性差异。结果表明,BNIP3、IRS2和GATA4可能是氧化应激诱导KGN细胞凋亡过程中参与线粒体自噬的关键因子。 展开更多
关键词 人卵巢颗粒细胞 线粒体自噬 细胞凋亡 氧化应激 卵泡闭锁
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山羊睾丸支持细胞外泌体对精子液态保存效果的影响
15
作者 张梦美 徐英环 +2 位作者 李鑫康 牛劲聪 刘腾飞 《动物医学进展》 北大核心 2025年第9期68-72,共5页
精子液态保存在山羊养殖业中应用广泛,但精子活力下降较快等弊端极大限制了该技术的发展应用。睾丸支持细胞外泌体(sertoli cells-exosomes,SCs-EXOs)含有多种活性物质,对精子的发育和成熟具有重要作用。目前关于SCs-EXOs对山羊精子液... 精子液态保存在山羊养殖业中应用广泛,但精子活力下降较快等弊端极大限制了该技术的发展应用。睾丸支持细胞外泌体(sertoli cells-exosomes,SCs-EXOs)含有多种活性物质,对精子的发育和成熟具有重要作用。目前关于SCs-EXOs对山羊精子液态保存影响的研究较少,论文探究山羊SCs-EXOs对4℃液态保存过程中精子质量的影响,用超高速差速离心法提取山羊SCs-EXOs,从微观结构、粒径大小以及标志蛋白等方面进行鉴定,结果表明提取的外泌体纯度较高。进一步将不同浓度的SCs-EXOs(10、20、40μg/mL)与精子共孵育,用伊红染色法和计算机辅助精子分析系统(computer-aided spermatozoa analysis,CASA)检测4℃液态保存不同时间(6、12、24、48 h)精子质量的变化,显示精子活率及运动性能随着液态保存时间延长逐渐降低,添加SCs-EXOs能够显著提高精子活率及运动性能。这些结果表明,山羊SCs-EXOs能够改善4℃液态保存过程中精子的质量,研究结果可为SCs-EXOs在提升家畜精液品质方面的应用提供理论基础。 展开更多
关键词 山羊 精子 4℃液态保存 睾丸支持细胞 外泌体
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中草药复方制剂对青脚麻鸡法氏囊免疫功能、抗氧化性及增殖凋亡基因表达的影响 被引量：21
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作者 靳二辉 熊宪献 +4 位作者 孙雨豪 裴亚琼 孙启 任曼 金光明 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期66-77,共12页
试验旨在研究由金银花、黄连、蒲公英等药材组成的中草药复方制剂,对青脚麻鸡法氏囊组织结构、抗氧化功能、细胞因子和抗体分泌及增殖凋亡相关基因(PCNA和Caspase-3)表达的影响。采用单因子试验设计,将400羽青脚麻鸡按照体重相近原则分... 试验旨在研究由金银花、黄连、蒲公英等药材组成的中草药复方制剂,对青脚麻鸡法氏囊组织结构、抗氧化功能、细胞因子和抗体分泌及增殖凋亡相关基因(PCNA和Caspase-3)表达的影响。采用单因子试验设计,将400羽青脚麻鸡按照体重相近原则分为对照组(基础日粮)和试验Ⅰ-Ⅲ组(分别添加0.5%、1.0%和1.5%中草药复方制剂),每组5个重复(n=20),试验期56 d。结果表明,28日龄时,添加1.0%中草药复方制剂可增加青脚麻鸡法氏囊细胞因子(IL-2和IFN-γ)、IBDV抗体和GSH-Px含量及PCNA mRNA和蛋白表达量(P<0.05),降低Caspase-3 mRNA和蛋白表达量(P<0.05)。56日龄时,添加1.0%中草药复方制剂可增加青脚麻鸡法氏囊IFN-γ、IBDV抗体和GSH-Px含量(P<0.05),降低MDA含量及Caspase-3蛋白表达量(P<0.05)。显微观察可见,28和56日龄时,添加1.0%中草药复方制剂可显著增加法氏囊小叶和淋巴小结面积(P<0.05),降低法氏囊Caspas-3阳性细胞数量,说明日粮中添加1.0%中草药复方制剂对法氏囊组织结构及免疫抗氧化功能均有明显改善,对法氏囊增殖和凋亡相关基因表达有明显调控作用。文章分别从分子和组织水平揭示中草药复方制剂对青脚麻鸡法氏囊生长发育和免疫功能的影响及可能机制,为新型中草药复方制剂研发及其在青脚麻鸡生产中的应用提供科学依据。 展开更多
关键词 中草药复方制剂 法氏囊 组织结构 免疫功能 抗氧化功能 细胞增殖凋亡
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鸡胚盲肠上皮细胞原代培养与鉴定 被引量：14
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作者 古少鹏 王敏霞 +1 位作者 赵素芬 郑明学 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1699-1704,共6页
为研究鸡E.tenella的宿主细胞——盲肠上皮细胞体外培养技术,为E.tenella损伤机制及抗球虫药的研究提供体外模型,分别用胰蛋白酶法、胶原酶Ⅰ法、嗜热菌蛋白酶法、嗜热菌蛋白酶+胶原酶Ⅰ法和中性蛋白酶Ⅰ+胶原酶Ⅺ法分离纯化原代鸡胚盲... 为研究鸡E.tenella的宿主细胞——盲肠上皮细胞体外培养技术,为E.tenella损伤机制及抗球虫药的研究提供体外模型,分别用胰蛋白酶法、胶原酶Ⅰ法、嗜热菌蛋白酶法、嗜热菌蛋白酶+胶原酶Ⅰ法和中性蛋白酶Ⅰ+胶原酶Ⅺ法分离纯化原代鸡胚盲肠上皮细胞,通过测定细胞活力、细胞团块比例、总细胞产量和细胞团块产量,筛选出鸡胚盲肠上皮细胞最佳分离方法,并进行了纯化和培养,对培养细胞进行了鉴定。结果表明:嗜热菌蛋白酶消化、低速离心去除单细胞、差速贴壁除去成纤维细胞,为最佳分离和纯化盲肠上皮细胞的方法;分离纯化的细胞接种后分别于第3-5天、第10-11天进入对数生长期,可存活14 d以上;经形态学观察、碱性磷酸酶染色、扫描电镜鉴定为盲肠上皮细胞,所分离的细胞培养至第4、7、11天时上皮细胞比例分别为81.67%、84.33%和72.00%。用该法可获得纯度较高的原代鸡胚盲肠上皮细胞。 展开更多
关键词 盲肠上皮细胞 细胞分离 体外培养 鉴定 鸡胚
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Ghrelin在成年皖西白鹅小肠内的免疫组化定位研究 被引量：12
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作者 李福宝 方富贵 +4 位作者 李梅清 涂健 陶勇 蒋书东 李培英 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期206-208,共3页
采用免疫组化SABC法并结合DAB显色技术研究了皖西白鹅小肠内Ghrelin阳性细胞及其分布。结果:①Ghrelin免疫阳性细胞主要位于小肠的黏膜层,而黏膜下层和肌层未见Ghrelin阳性细胞。这些阳性细胞,胞浆着色,主要有两类,一类为“闭合型”细胞... 采用免疫组化SABC法并结合DAB显色技术研究了皖西白鹅小肠内Ghrelin阳性细胞及其分布。结果:①Ghrelin免疫阳性细胞主要位于小肠的黏膜层,而黏膜下层和肌层未见Ghrelin阳性细胞。这些阳性细胞,胞浆着色,主要有两类,一类为“闭合型”细胞,呈圆形或椭圆形,其顶部不露于腔面,另一类为“开放型”细胞,呈锥体型,细胞顶部达到腔面。②在十二指肠,“开放型”和“闭合型”两种阳性细胞均可观察到,而在空肠和回肠,主要为“闭合型”阳性细胞。产生Ghrelin的细胞在成年皖西白鹅小肠黏膜层有广泛的分布,揭示Ghrelin可能调节小肠的功能。 展开更多
关键词 GHRELIN 皖西白鹅 小肠 免疫组化
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猪流行性腹泻病毒的研究进展 被引量：34
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作者 高君恺 刘浩飞 杨倩 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期1-5,共5页
猪流行性腹泻是一种急性、接触性、高度传染性消化道疾病,近年来给我国养猪业带来巨大经济损失。本文就近年来国内外对猪流行性腹泻病毒的研究进展(包括猪流行性腹泻病毒的结构蛋白和非结构蛋白、病毒的细胞培养特点、病毒感染的宿主受... 猪流行性腹泻是一种急性、接触性、高度传染性消化道疾病,近年来给我国养猪业带来巨大经济损失。本文就近年来国内外对猪流行性腹泻病毒的研究进展(包括猪流行性腹泻病毒的结构蛋白和非结构蛋白、病毒的细胞培养特点、病毒感染的宿主受体、遗传变异和疫苗的开发等)进行综述,以期为猪流行性腹泻的预防和控制提供帮助。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 结构蛋白 细胞培养特性 猪氨基肽酶N受体 疫苗开发
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犬股骨头和股骨颈切除术 被引量：12
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作者 袁占奎 陈宏武 +3 位作者 董悦农 彭勃 王志勇 杨泽胜 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2006年第5期41-42,共2页
关键词 股骨头 切除术 髋关节脱位 犬 临床实践 发育不良 20世纪 小轿车 and 可选择
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