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饲喂乳源免疫调节肽对大鼠生长和免疫的影响 被引量：12
1
作者 李素萍 秦宜德 +3 位作者 董琼珠 方敏 张伟 刘慧 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2005年第6期499-501,共3页
目的探讨乳源免疫调节肽(PGPIPN)对大鼠生长和免疫的影响。方法取42只40日龄的SD大鼠(♀♂各半)随机分为两个实验组和一个对照组(每组14只且♀♂相等,分开饲养)。预饲1周后,实验组Ⅰ和Ⅱ分别被灌喂2.5×10-3g/L和2.5×10-2g/L... 目的探讨乳源免疫调节肽(PGPIPN)对大鼠生长和免疫的影响。方法取42只40日龄的SD大鼠(♀♂各半)随机分为两个实验组和一个对照组(每组14只且♀♂相等,分开饲养)。预饲1周后,实验组Ⅰ和Ⅱ分别被灌喂2.5×10-3g/L和2.5×10-2g/L免疫调节肽,对照组灌喂生理盐水,记录大鼠日采食量和体重。饲养1个月后检测对照组和实验组大鼠淋巴细胞转化、红细胞免疫、巨噬细胞吞噬、日采食量和体重等差别。结果乳源免疫调节肽对大鼠腹腔巨噬细胞吞噬和红细胞免疫有显著促进功能(P<0.05);而对淋巴细胞转化作用有增长的趋势,但未达到显著水平(P>0.05)。与对照组相比,实验组Ⅱ的大鼠日采食量显著地增加(P<0.05),♀♂大鼠分别提高了10.95%和8.03%;增重率有提高的趋势,♀♂大鼠增重率分别提高了5.13%和7.10%,但均未达显著水平(P>0.05)。实验组Ⅰ的大鼠,其日采食量和增重与对照组相比均变化不大。结论乳源免疫调节肽能促进机体的免疫功能,提高其免疫力;增加日采食量。 展开更多
关键词 大鼠 生长 免疫
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促肾上腺皮质激素释放激素受体在应激反应中的作用研究 被引量：9
2
作者 曾纯 严灿 +1 位作者 徐志伟 吴丽丽 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期517-520,共4页
促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)是应激反应中的关键调节因子,协调应激过程中内分泌、自主神经、免疫和行为反应。CRH的作用是由其受体所介导的。目前已知的CRH受体有CRH-R1、CRH-R2、CRH-R3 3种。应激时,CRH主要通过CRH-R1、CRH-R2产生... 促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)是应激反应中的关键调节因子,协调应激过程中内分泌、自主神经、免疫和行为反应。CRH的作用是由其受体所介导的。目前已知的CRH受体有CRH-R1、CRH-R2、CRH-R3 3种。应激时,CRH主要通过CRH-R1、CRH-R2产生一系列生理、病理效应。近年来通过对转基因动物、选择性CRH受体拮抗剂和特异性CRH受体激动剂等的应用,对CRH受体在应激中作用有了更深的了解,也进一步揭示了应激机制。 展开更多
关键词 促肾上腺皮质激素释放激素 受体 应激
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胰岛素原和胰淀素原水平与胰岛素抵抗和胰岛β细胞功能的相关性研究 被引量：5
3
作者 郑晓雅 任伟 +1 位作者 张素华 阳萍 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期169-172,共4页
目的分析糖代谢异常个体血清胰岛素原(proinsulin,PI)、胰岛素(insulin,INS)和胰淀素原(proamylin,PA)、胰淀素(amylin,AMY)的变化,探讨胰岛素原和胰淀素原水平与胰岛素抵抗和胰岛β细胞功能的关系。方法研究对象分为正常组、糖调节异常... 目的分析糖代谢异常个体血清胰岛素原(proinsulin,PI)、胰岛素(insulin,INS)和胰淀素原(proamylin,PA)、胰淀素(amylin,AMY)的变化,探讨胰岛素原和胰淀素原水平与胰岛素抵抗和胰岛β细胞功能的关系。方法研究对象分为正常组、糖调节异常组(IGR组)、2型糖尿病(T2DM)1组(FBG<10 mmol/L)和T2DM2组(FBG>15 mmol/L)。分别测定人体测量学指标、血生化指标,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和胰岛素敏感指数(HOMA-B)。结果不同血糖水平的个体PI和AMY差异无统计学意义(P>0.05),但4组间PA、PI/INS和PA/AMY有显著性差异(P<0.05);PI和PI/INS对HOMA-IR有显著性影响(P<0.01),PA和PA/AMY对HOMA-B有显著性影响(P<0.01)。结论胰岛素原在胰岛素抵抗产生中可能起着重要的作用,而胰淀素原在胰岛β细胞功能障碍中可能起着重要的作用。 展开更多
关键词 2型糖尿病 胰岛素原 胰淀素原 胰淀素 胰岛素抵抗
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酪丝亮肽荧光标记物的合成及其在肿瘤治疗靶点研究中的应用 被引量：4
4
作者 简序 傅正 +9 位作者 张燕玲 韩丽霞 朱志峰 徐琼 王莉 周春雷 石琳熙 刘俊燕 陆融 姚智 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1161-1167,共7页
酪丝亮肽是一种具有抗肿瘤活性的小分子三肽,它可以诱导造成肝癌细胞发生凋亡坏死,从而杀伤肿瘤细胞,但是酪丝亮肽在肝癌细胞的亚细胞定位尚不十分明确.为了达到对酪丝亮肽进行示踪进而观察其亚细胞定位的目的,使用荧光物质(5(6)-羧基... 酪丝亮肽是一种具有抗肿瘤活性的小分子三肽,它可以诱导造成肝癌细胞发生凋亡坏死,从而杀伤肿瘤细胞,但是酪丝亮肽在肝癌细胞的亚细胞定位尚不十分明确.为了达到对酪丝亮肽进行示踪进而观察其亚细胞定位的目的,使用荧光物质(5(6)-羧基四甲基罗丹明琥珀酰亚胺酯,5(6)-TAMRASE)对酪丝亮肽进行了标记,应用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、毛细管电泳和荧光分光光度法对标记酪丝亮肽进行纯化和鉴定.并在激光扫描共聚焦显微镜下观察了荧光标记酪丝亮肽在人肝癌BEL-7402细胞中的分布.结果显示,合成的酪丝亮肽荧光标记物性质稳定,标记的酪丝亮肽在人肝癌BEL-7402细胞的胞浆中呈聚集分布. 展开更多
关键词 酪丝亮肽 肝癌 荧光标记 激光扫描共聚焦显微镜
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β-CM-7对MCF-7、SKOV_3和SK-N-SH肿瘤细胞增殖和凋亡的影响 被引量：5
5
作者 周艳 秦宜德 +1 位作者 董华胜 顾芳 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2008年第1期5-9,共5页
目的探讨β-酪啡肽-7（β-CM-7）在体外对人乳腺癌细胞（MCF-7）、人卵巢癌细胞（SKOV3）和人神经母细胞瘤细胞（SK—N—SH）增殖和凋亡的影响。方法用MTT测定法观察β-CM-7在体外对MCF-7、SKOV3、SK—N—SH细胞增殖的影响。用流式细胞... 目的探讨β-酪啡肽-7（β-CM-7）在体外对人乳腺癌细胞（MCF-7）、人卵巢癌细胞（SKOV3）和人神经母细胞瘤细胞（SK—N—SH）增殖和凋亡的影响。方法用MTT测定法观察β-CM-7在体外对MCF-7、SKOV3、SK—N—SH细胞增殖的影响。用流式细胞仪测定β-CM-7在体外对MCF-7和SKOV3细胞凋亡的影响。结果β-CM-7作用于MCF-7细胞24和48h，对其增殖影响不明显（P〉0．05）。2．5×10^-6 -2．5×10^-2g／L的β-CM-7作用72h，能抑制MCF-7细胞增殖（P〈0．05或P〈0．01），抑制率为17．50％～32．08％。β-CM-7作用MCF-7细胞72h，在2．5×10^-7～2．5×10^-2g／L剂量下，诱导肿瘤细胞的凋亡（P〈0．05或P〈0．01），凋亡率为9．23％～29．41％，而在作用48h后，仅在2．5×10^-3g／L的高浓度下具有诱导肿瘤细胞的凋亡作用，凋亡率为10．12％。β-CM-7作用于SKOV3细胞24～72h，只有在高剂量（2．5×10^-2g／L和／或2．5×10^-3g／L）时，抑制肿瘤细胞增殖（P〈0．05），抑制率为10．50％～19．44％。β-CM-7作用SKOV、细胞48h和72h，在2．5×10^-3～2．5×10^-2g／L高剂量下能诱导肿瘤细胞的凋亡（P〈0．05或P〈0．01），凋亡率为8．72％～17．83％。β-CM-7对SK—N—SH肿瘤细胞增殖影响无显著性（P〉0．05）。结论β-CM-7能够抑制MCF-7和SKOV3细胞增殖，诱导细胞凋亡，作用结果与其剂量和作用时间有关。β-CM-7对SK—N—SH细胞的增殖无明显影响。 展开更多
关键词 内啡肽类 乳腺肿瘤/病理学 神经母细胞瘤/病理学 细胞凋亡 细胞分裂
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谷氨酰胺对烧伤大鼠肠三叶因子表达的影响 被引量：3
6
作者 彭曦 陈蓉春 +2 位作者 王裴 尤忠义 汪仕良 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期205-207,共3页
目的　探讨谷氨酰胺对烧伤大鼠肠三叶因子 (intestinaltrefoilfactor,ITF)表达的影响及其可能的机制。方法　采用 3 0 %体表面积Ⅲ度烧伤大鼠模型 ,随机分正常对照 (C)组 ,烧伤后普通肠道营养 (EN)组及烧伤后添加谷氨酰胺的肠道营养 (G... 目的　探讨谷氨酰胺对烧伤大鼠肠三叶因子 (intestinaltrefoilfactor,ITF)表达的影响及其可能的机制。方法　采用 3 0 %体表面积Ⅲ度烧伤大鼠模型 ,随机分正常对照 (C)组 ,烧伤后普通肠道营养 (EN)组及烧伤后添加谷氨酰胺的肠道营养 (GLN)组。EN组用等量甘氨酸补足氮量 ,使两组烧伤大鼠保持等氮、等热卡 ,动态观察伤后两组大鼠ITF及ITFmRNA的变化。结果　正常大鼠小肠中ITF及ITFmRNA均有一定表达 ,烧伤后其表达一过性增加 ,随后明显降低。两组比较 ,GLN组大鼠肠组织中ITF及ITFmRNA水平明显高于EN组 ,同时GLN组肠粘膜受损程度也明显低于EN组。结论　严重烧伤后肠粘膜结构受损是ITF合成下降的主要原因 ,谷氨酰胺能保护肠粘膜 ,维护杯状细胞的正常结构和功能 。 展开更多
关键词 谷氨酰胺 肠三叶因子 肠道营养 大鼠 烧伤
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EMAP-Ⅱ对紧密连接相关蛋白occludin和ZO-1相互作用的调节和机制 被引量：3
7
作者 王佐周 刘丽波 +1 位作者 薛一雪 刘云会 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期481-484,493,共5页
目的研究内皮—单核细胞激活多肽Ⅱ(EMAP-Ⅱ)对血肿瘤屏障(BTB)紧密连接相关蛋白occludin和ZO-1分布和相互作用的影响,以及蛋白激酶C(PKC)活性的变化,探讨PKC在EMAP-Ⅱ开放紧密连接中的作用。方法提取和培养大鼠脑微血管内皮细胞,建立体... 目的研究内皮—单核细胞激活多肽Ⅱ(EMAP-Ⅱ)对血肿瘤屏障(BTB)紧密连接相关蛋白occludin和ZO-1分布和相互作用的影响,以及蛋白激酶C(PKC)活性的变化,探讨PKC在EMAP-Ⅱ开放紧密连接中的作用。方法提取和培养大鼠脑微血管内皮细胞,建立体外BTB模型;实验分为7组,即模型组、EMAP-Ⅱ0.5 h组、EMAP-Ⅱ1 h组、EMAP-Ⅱ2 h组、EMAP-Ⅱ3h组、EMAP-Ⅱ6 h组和EMAP-Ⅱ12 h组。应用Milicell-ERS系统检测体外BTB模型跨内皮细胞阻抗值的变化;双重免疫荧光检测内皮细胞中紧密连接相关蛋白occludin和ZO-1的分布和定位;免疫共沉淀检测内皮细胞中occludin和ZO-1的结合水平;PKC活性检测试剂盒检测体外BTB模型内皮细胞中总PKC的活性。结果与模型组相比,EMAP-Ⅱ显著降低了体外BTB模型的跨内皮细胞阻抗值,增加了BTB通透性;在模型组,紧密连接相关蛋白occludin和ZO-1在内皮细胞边缘呈连续分布,并且二者存在共定位,EMAP-Ⅱ能够使occludin和ZO-1在内皮细胞边缘的分布减少,二者的共定位减弱;免疫共沉淀结果也显示EMAP-Ⅱ能够减弱occludin和ZO-1的结合;上述作用在EMAP-Ⅱ作用1 h时效果最显著(P<0.01);同时发现EMAP-Ⅱ作用后,BTB模型内皮细胞中PKC的活性显著升高,在EMAP-Ⅱ作用1 h时达峰值(P<0.01)。结论 EMAP-Ⅱ能够调节紧密连接相关蛋白occludin和ZO-1在内皮细胞的相互作用,开放紧密连接;PKC可能是EMAP-Ⅱ影响occludin和ZO-1相互作用、调节紧密连接的机制之一。 展开更多
关键词 内皮—单核细胞激活多肽Ⅱ OCCLUDIN ZO-1 蛋白激酶C 血肿瘤屏障
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肺癌特异性结合多肽的体外筛选和鉴定 被引量：2
8
作者 潘雪刁 何冰 +3 位作者 王桂香 刘金泳 曹成明 臧林泉 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期342-346,共5页
目的应用噬菌体随机肽库技术筛选出与肺癌细胞特异性结合的多肽。方法以人肺癌细胞NCI-H1299为靶细胞,人胚肺细胞MRC-5为吸附细胞,对噬菌体随机12肽库进行3轮全细胞减性筛选后,随机挑取噬菌体克隆进行ELISA鉴定;对亲和力较高的阳性克隆... 目的应用噬菌体随机肽库技术筛选出与肺癌细胞特异性结合的多肽。方法以人肺癌细胞NCI-H1299为靶细胞,人胚肺细胞MRC-5为吸附细胞,对噬菌体随机12肽库进行3轮全细胞减性筛选后,随机挑取噬菌体克隆进行ELISA鉴定;对亲和力较高的阳性克隆进行DNA测序并翻译为氨基酸序列;化学合成异硫氰酸荧光素标记的多肽(FITC-ZS-5),采用细胞和组织免疫荧光法鉴定FITC-ZS-5与肺癌细胞的亲和力及特异性。结果通过3轮减性筛选后,与NCI-H1299细胞结合的噬菌体克隆得到有效的富集;ELISA结果显示5号克隆对NCI-H1299细胞亲和力最高,将其命名为Phage ZS-5;测序结果显示Phage ZS-5所表达的多肽序列在国内外均未见报道,细胞及组织免疫荧光实验结果显示FITC-ZS-5对肺癌细胞及组织具有较高的亲和力和特异性。结论应用噬菌体随机肽库技术筛选到肺癌靶向性多肽ZS-5,为肺癌的靶向治疗和诊断奠定基础。 展开更多
关键词 肺癌 噬菌体展示技术 多肽 减性筛选 NCI-H1299细胞 肽库
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内毒素结合肽在烧伤合并内毒素血症大鼠模型中的作用 被引量：3
9
作者 麻莉 刘友生 +2 位作者 王晓东 章容 李永旺 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期373-377,共5页
目的　观察重组人内毒素结合肽蛋白在烧伤合并内毒素血症大鼠中的作用。方法　采用烧伤合并内毒素血症大鼠模型 ,分为模型组 (n =3 6)、治疗组 (n =3 6)及对照组 (n =6)。模型组在烧伤后立即腹腔内注射 1mg/kg内毒素(用 1ml生理盐水配制... 目的　观察重组人内毒素结合肽蛋白在烧伤合并内毒素血症大鼠中的作用。方法　采用烧伤合并内毒素血症大鼠模型 ,分为模型组 (n =3 6)、治疗组 (n =3 6)及对照组 (n =6)。模型组在烧伤后立即腹腔内注射 1mg/kg内毒素(用 1ml生理盐水配制 ) ;治疗组腹腔内注射 1mg/kg内毒素 (用 0 5ml生理盐水配制 )后 ,再注入 40 0 μg/kg制备好的内毒素结合肽 (用 0 5ml生理盐水配制 ) ;模型组和治疗组分别在处理后 1、3、6、12、2 4、48h取血和肝、肺组织 ,对照组仅在脱毛后腹腔内注入 1ml生理盐水 ,取血和肝、肺组织作总体对照。采用生化速率法、ELISA法及组织学切片染色和电镜制样等方法 ,测定血清中丙氨酸转氨酶 (ALT)、肿瘤坏死因子 α(TNF α)、白介素 6(IL 6)的含量变化以及光、电镜观察肝、肺组织的病理学变化。结果　模型组于伤后 1h血清TNFα显著高于对照组 (P <0 0 1) ,6h达峰值 ;治疗组与模型组比较各时相点血清TNFα含量均显著降低 (P <0 0 1,P <0 0 5 )。血清IL 6含量测定结果 ,模型组于伤后 1h血清IL 6显著高于对照组(P <0 0 1) ,12h达峰值。治疗组 3～ 48h各时相点血清IL 6含量均显著低于模型组 (P <0 0 1,P <0 0 5 )。大鼠血清中谷丙转氨酶的动态变化提示 。 展开更多
关键词 内毒素结合肽 脂多糖 内毒素血症
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大鼠坐骨神经结扎后降钙素基因相关肽的变化 被引量：2
10
作者 郑林丰 谢应桂 +4 位作者 许愿忠 张建伟 易西南 吴贤群 张灵芝 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第17期1791-1794,共4页
目的研究大鼠坐骨神经结扎模型的降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)的时空变化规律,为探讨其在神经再生中的机制与作用提供实验依据。方法SD大鼠随机分为假手术对照组和坐骨神经结扎组,实验组结扎后分别存活1d到2... 目的研究大鼠坐骨神经结扎模型的降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)的时空变化规律,为探讨其在神经再生中的机制与作用提供实验依据。方法SD大鼠随机分为假手术对照组和坐骨神经结扎组,实验组结扎后分别存活1d到28d,免疫组化结合图像分析技术观察CGRP在坐骨神经、背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)、脊髓分布和含量的变化。结果结扎后1d坐骨神经CGRP大量堆积,结扎近端多于远端,随后逐渐下降,近端至14d基本消失,远端至7d基本消失;结扎后7dDRGCGRP开始下降,21d达最低值,28d仍低于正常;结扎后14d脊髓后角CGRP下降,但后角免疫阳性面积未见明显变化;各时间点脊髓前角CGRP未见明显变化。结论神经结扎后CGRP表达变化呈现一定的时空模式,可能与靶源性神经营养因子的缺乏有密切关系。 展开更多
关键词 降钙素基因相关肽 大鼠 坐骨神经 结扎
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巨噬细胞和组织血管紧张素Ⅱ在动脉粥样硬化兔腹主动脉狭窄前后血管内膜的变化 被引量：3
11
作者 赵胜 刘伏元 +2 位作者 崇爱国 孟培娜 严激 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2008年第6期646-650,共5页
目的观察巨噬细胞和组织血管紧张素Ⅱ在动脉粥样硬化兔腹主动脉狭窄近远端血管内膜的变化情况。方法25只新西兰大白兔随机分为对照手术组(n=10)、高脂手术组(n=10)、高脂假手术组(n=5),饲养28周后,对照手术组和高脂手术组行腹主动脉缩窄... 目的观察巨噬细胞和组织血管紧张素Ⅱ在动脉粥样硬化兔腹主动脉狭窄近远端血管内膜的变化情况。方法25只新西兰大白兔随机分为对照手术组(n=10)、高脂手术组(n=10)、高脂假手术组(n=5),饲养28周后,对照手术组和高脂手术组行腹主动脉缩窄术,高脂假手术组行假手术。术后继续以原来的饲养方法饲养4周,在测量狭窄近远端压力后获取标本。采用HE染色和免疫组织化学分析检测血管内膜厚度、巨噬细胞数量、血管紧张素Ⅱ水平。结果平均内膜厚度(μm):高脂手术组狭窄近端(204.7±8.3)较高脂假手术组相同位置(175.8±4.3)增厚(P=0.001);而高脂手术组狭窄远端(140.1±1.3)较高脂假手术组相同位置(166.2±5.1)厚度降低(P=0.000)。巨噬细胞数量(/μm):高脂手术组狭窄近端(0.31±0.05)较狭窄远端(0.16±0.04)显著升高(P=0.000);高脂手术组狭窄近端(0.31±0.05)较高脂假手术组相同位置(0.20±0.02)显著升高(P=0.000)。组织血管紧张素Ⅱ水平(/μm):高脂手术组狭窄近端(0.26±0.01)较狭窄远端(0.12±0.01)显著升高(P=0.000),高脂手术组狭窄近端(0.26±0.01)较高脂假手术组狭窄远端(0.17±0.01)明显升高(P=0.000),高脂手术组狭窄近端(0.12±0.01)较高脂假手术组狭窄远端(0.15±0.02)明显降低(P=0.000)。结论在动脉粥样硬化兔腹主动脉狭窄近端,压力增高,血管组织内膜厚度和巨噬细胞数量增加,血管紧张素Ⅱ水平明显升高;在狭窄远端,血管组织内膜厚度变薄,巨噬细胞数量减少,血管紧张素Ⅱ水平降低。 展开更多
关键词 动脉硬化 巨噬细胞 血管紧张素Ⅱ 血管内膜/病理学
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反义B7-H1位置特异性腺病毒载体的构建与鉴定 被引量：2
12
作者 吴淼 余佩武 +4 位作者 王自强 赵永亮 雷晓 曾冬竹 朱自满 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期387-390,共4页
目的构建人反义B7-H1位置特异性腺病毒载体。方法将B7H1cDNA反向连接到穿梭质粒pDC315上以构建重组反义B7-H1穿梭质粒pDC315.ASB7-H1,用脂质体将pDC315.ASB7-H1和腺病毒质粒pBHGloxΔE1,3Cre转染293细胞,通过位置特异性重组产生反义B7-H... 目的构建人反义B7-H1位置特异性腺病毒载体。方法将B7H1cDNA反向连接到穿梭质粒pDC315上以构建重组反义B7-H1穿梭质粒pDC315.ASB7-H1,用脂质体将pDC315.ASB7-H1和腺病毒质粒pBHGloxΔE1,3Cre转染293细胞,通过位置特异性重组产生反义B7-H1腺病毒载体Ad.ASB7-H1。结果穿梭质粒经酶切、凝胶电泳和测序鉴定与预期结果一致,重组腺病毒载体经PCR扩增后得到564bp和872bp特征性片段;其病毒滴度达:5×1010pfu/ml。结论利用位置特性重组技术,成功的构建了人反义B7-H1的腺病毒载体,为后续对B7-H1的相关研究创造了条件。 展开更多
关键词 B7-H1 重组腺病毒载体 反义技术
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人ⅡA型磷脂酶A_2衍生肽P26抗菌作用与结构修饰的研究 被引量：4
13
作者 何睿林 梁宁生 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1300-1304,共5页
目的比较人ⅡA型磷脂酶A2(phospholipase A2,PLA2)C末端衍生的多肽和经修饰后的环肽对不同细菌在体外的杀菌效应,了解其作用机制。方法根据人ⅡA型PLA2氨基酸顺序C末端26个氨基酸残基,合成直链肽P26,同时将其修饰为环肽P26。采用琼脂铺... 目的比较人ⅡA型磷脂酶A2(phospholipase A2,PLA2)C末端衍生的多肽和经修饰后的环肽对不同细菌在体外的杀菌效应,了解其作用机制。方法根据人ⅡA型PLA2氨基酸顺序C末端26个氨基酸残基,合成直链肽P26,同时将其修饰为环肽P26。采用琼脂铺板计数法,将不同浓度的两种多肽分别与6种细菌在37℃孵育2 h,然后铺板并置于37℃恒温箱培养18～24 h,记录每一琼脂板上的菌落数(CFU),并计算多肽作用后的杀菌率。结果两种多肽对革兰阳性菌金黄色葡萄球菌、枯草杆菌和炭疽杆菌有较强的杀菌活性,环肽P26的作用比直链肽P26强4倍左右;对革兰阴性菌大肠杆菌、变形杆菌和绿脓杆菌的杀菌作用较弱,而环肽P26的作用更弱。结论衍生自人ⅡA型PLA2 C末端26个氨基酸残基的肽P26和修饰得到的环肽P26对G+菌有较强的杀菌活性,经修饰成环肽后作用更强,可能与环肽分子带的正电荷更集中有关。 展开更多
关键词 人ⅡA型磷脂酶A2 C末端 抗菌肽 直链肽 环肽 抗菌活性 结构修饰
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乳源抗菌-免疫调节融合蛋白原核表达和纯化 被引量：2
14
作者 江良梁 秦宜德 +2 位作者 周艳 王超 刘滋康 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2008年第3期260-263,共4页
目的构建乳铁蛋白抗菌肽(LfcinB)与免疫调节肽(PGPIPN)融合肽表达质粒,并在大肠杆菌BL21中表达及纯化。方法采用重叠延伸PCR技术获得融合肽基因片段,并构建到原核表达载体pGEX-KG中,挑选阳性重组子,经限制性内切酶鉴定后转化到大肠杆菌B... 目的构建乳铁蛋白抗菌肽(LfcinB)与免疫调节肽(PGPIPN)融合肽表达质粒,并在大肠杆菌BL21中表达及纯化。方法采用重叠延伸PCR技术获得融合肽基因片段,并构建到原核表达载体pGEX-KG中,挑选阳性重组子,经限制性内切酶鉴定后转化到大肠杆菌BL21,然后用IPTG诱导表达,通过SDS-PAGE及Western-blot方法鉴定表达的融合蛋白。用Glutathione Sepharose4B亲和层析方法纯化融合蛋白。结果成功构建原核表达质粒pGEX-KG-FP,并在大肠杆菌BL21中诱导其高表达。SDS-PAGE及Western-blot分析显示,特异性的抗GST单克隆抗体所识别的融合蛋白分子量与理论值相近。经Glutathione Sepharose4B纯化后,得到较纯的GST-FP融合蛋白。结论构建了原核表达的融合蛋白质粒,并高效表达和纯化了该融合蛋白。 展开更多
关键词 大肠杆菌 肽类/遗传学 基因表达 重组融合蛋白 质类
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合成棕点湍蛙抗菌肽的抗菌活性评价 被引量：2
15
作者 赵铁华 程玉洁 李哲 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1292-1294,共3页
目的对合成棕点湍蛙抗菌肽的抗菌作用进行分析,探讨合成产物与天然产物的一致性以及临床应用价值。方法体外抗菌试验测定合成抗菌肽及与庆大霉素、青霉素和链霉素联合应用对金色葡萄球菌和大肠埃希菌的最小杀菌浓度(MBC)。结果合成抗菌... 目的对合成棕点湍蛙抗菌肽的抗菌作用进行分析,探讨合成产物与天然产物的一致性以及临床应用价值。方法体外抗菌试验测定合成抗菌肽及与庆大霉素、青霉素和链霉素联合应用对金色葡萄球菌和大肠埃希菌的最小杀菌浓度(MBC)。结果合成抗菌肽对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌均有一定的杀菌作用,MBC值分别为200 mg.L-1和100 mg.L-1,但活性低于生物化学方法提取的天然产物。合成抗菌肽与青霉素、链霉素联合使用后抗菌作用有增强趋势,其中与青霉素联合使用的效果较明显,MBC值达到青霉素/合成肽为0.625 mg.L-1/25 mg.L-1。结论抗菌肽的联合应用可能有助于改善病原性细菌对传统抗生素的耐药性。 展开更多
关键词 抗菌肽 棕点湍蛙 合成 金黄色葡萄球菌 大肠埃希 菌 最小杀菌浓度
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胃癌gp96多肽复合物树突状细胞疫苗对Th1/Th2平衡的影响 被引量：1
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作者 赵永亮 余佩武 +4 位作者 吴淼 唐波 钱锋 石彦 饶芸 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期414-415,共2页
目的探讨gp96多肽复合物树突状细胞(dendriticcells,DCs)疫苗对Th1/Th2平衡的影响。方法从胃癌组织中提取gp96多肽复合物负载从外周血单个核细胞诱导培养的DCs,用gp96多肽复合物DC疫苗诱导同一患者Th0淋巴细胞,ELISA检测培养上清中IFNγ... 目的探讨gp96多肽复合物树突状细胞(dendriticcells,DCs)疫苗对Th1/Th2平衡的影响。方法从胃癌组织中提取gp96多肽复合物负载从外周血单个核细胞诱导培养的DCs,用gp96多肽复合物DC疫苗诱导同一患者Th0淋巴细胞,ELISA检测培养上清中IFNγ和IL10的水平;以胃癌细胞裂解物负载的DC疫苗作对照。结果gp96多肽复合物DC疫苗诱导的T细胞分泌IFNγ的量为(2875±177.66)pg/ml,显著高于对照组(1765±289.07)pg/ml(P<0.01);分泌IL10的量为(36±6.72)pg/ml,显著低于对照组(90±11.26)pg/ml(P<0.05),二者之间存在显著的负相关(r=-0.915,P<0.01)。结论gp96多肽复合物DC疫苗可诱导Th1/Th2平衡向Th1漂移,显示了gp96多肽复合物DC疫苗可显著提高机体的免疫能力,为临床免疫干预治疗奠定基础。 展开更多
关键词 gp96多肽复合物 树突状细胞 疫苗 TH1细胞 TH2细胞
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噬菌体展示耐药突变HIV-1蛋白酶敏感切割位点六肽随机文库的构建 被引量：1
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作者 卢海妹 周波 +6 位作者 潘卫 贾建安 王锦红 温宗梅 何俊 陈露 邓松华 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期403-406,共4页
目的构建耐药性突变HIV-1蛋白酶(protease PR)敏感切割位点序列体外噬菌体筛选模型,研究HIV-1蛋白酶耐药性突变与敏感切割序列的关系。方法用含随机核苷酸序列的引物PCR方法对HIV-1gag基因上的CAP2片段的PR切割位点处的氨基酸序列进行... 目的构建耐药性突变HIV-1蛋白酶(protease PR)敏感切割位点序列体外噬菌体筛选模型,研究HIV-1蛋白酶耐药性突变与敏感切割序列的关系。方法用含随机核苷酸序列的引物PCR方法对HIV-1gag基因上的CAP2片段的PR切割位点处的氨基酸序列进行随机化,再将重组CAP2片段和NC片段拼接克隆于噬菌体展示载体LD3-pCANT-AB5S上,建立HIV-1蛋白酶靶蛋白切割位点随机化的噬菌体展示文库。结果该噬菌体展示文库库容量为2.6×106,滴度为4.1×1015TU·L-1,CAP2片段插入率为47.8%;序列分析显示切割位点中随机化的核苷酸与氨基酸均呈随机性分布。结论成功地构建HIV-1蛋白酶的敏感切割序列噬菌体筛选文库,为筛选到突变PR敏感切割序列噬菌体及研究耐药HIV-1蛋白酶抑制剂与突变PR的关系打下基础。 展开更多
关键词 人类免疫缺陷病毒-1 蛋白酶 耐药突变 噬菌体展示文库
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大鼠坐骨神经损伤早期NF-κB和Bcl-2在脊髓运动神经元的诱导激活 被引量：1
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作者 王岐本 谢乐斯 +3 位作者 邝满元 蒙艳斌 黄河 曾志成 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2008年第4期405-408,共4页
目的:探讨大鼠坐骨神经损伤早期NF-κB和Bcl-2在脊髓中的表达变化。方法:健康成年SD大鼠48只,随机分为正常组、假手术组和右侧坐骨神经压榨组,动物存活不同时间(6,12,24和72h)获取L4￣6脊髓段,用免疫组织化学方法检测脊髓内NF-κB和Bcl-... 目的:探讨大鼠坐骨神经损伤早期NF-κB和Bcl-2在脊髓中的表达变化。方法:健康成年SD大鼠48只,随机分为正常组、假手术组和右侧坐骨神经压榨组,动物存活不同时间(6,12,24和72h)获取L4￣6脊髓段,用免疫组织化学方法检测脊髓内NF-κB和Bcl-2的表达变化。结果:(1)正常L4￣6脊髓内,NF-κB和Bcl-2免疫阳性产物主要位于前角运动神经元胞浆内,NF-κB活化少,Bcl-2表达低;(2)损伤后双侧脊髓中NF-κB免疫阳性产物则主要位于胞核内,呈活化状态,损伤侧活化起始时间(6h)早于损伤对照侧(12h),且6、12、24hNF-κB活化细胞数明显高于对照侧(P<0.05),72h双侧比较无明显差异(P>0.05)。(3)损伤后6h损伤侧脊髓中Bcl-2免疫阳性反应即增强,12h达到高峰,24h下降,72h又增高;其中6、12、72h损伤侧Bcl-2免疫阳性反应灰度值与对照侧和正常组相比差别具有统计学意义(P<0.05),而24h损伤侧与对照侧和正常组比较无统计学差异(P>0.05)。结论:坐骨神经损伤后脊髓前角细胞中NF-κB的活化,激活了其下游抗凋亡基因Bcl-2的转录,两者可能在损伤早期参与抑制细胞凋亡,促进细胞存活和神经再生。 展开更多
关键词 坐骨神经损伤 NF—κB BCL-2 脊髓
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坐骨神经压榨后早期iNOS在大鼠脊髓中的表达变化 被引量：1
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作者 王岐本 谢乐斯 +4 位作者 谢应桂 黄庆红 郑林丰 黄河 曾志成 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2007年第5期547-549,共3页
目的:研究坐骨神经压榨损伤后早期iNOS在大鼠脊髓内的表达变化情况。方法:健康成年SD大鼠随机分为正常组、假手术组和坐骨神经压榨组,存活不同时间(6,12,24和72h)后获取L4～6脊髓节段,用免疫组织化学方法结合图像分析技术检测脊髓内iNO... 目的:研究坐骨神经压榨损伤后早期iNOS在大鼠脊髓内的表达变化情况。方法:健康成年SD大鼠随机分为正常组、假手术组和坐骨神经压榨组,存活不同时间(6,12,24和72h)后获取L4～6脊髓节段,用免疫组织化学方法结合图像分析技术检测脊髓内iNOS的表达。结果:正常组及假手术组脊髓内iNOS呈低表达,两者比较差异无统计学意义(P>0.05);坐骨神经压榨后损伤侧前、后角iNOS免疫阳性染色随损伤时间逐渐增加,各时间点损伤侧前、后角分别与对侧和正常组相比有统计学意义(P<0.05)。结论:坐骨神经压榨后iNOS在脊髓内的表达上调,可能与神经损伤后的再生过程及伤后神经性痛有关。 展开更多
关键词 坐骨神经损伤 大鼠 INOS 脊髓
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免疫固定电泳技术在鉴定M蛋白上的应用 被引量：1
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作者 张志成 杨沛 黄维佳 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第7期623-624,共2页
目的　探讨免疫固定电泳技术在鉴定M蛋白上的应用。方法　采用琼脂糖凝胶免疫固定技术 (IFE)和速率散射比浊法检测了 43例病人和 2 0例正常健康人血清M蛋白。结果　其中 2 9例病人检出M蛋白 ,M蛋白分型为IgGκ型2 0例 ,IgGλ型 5例 ,Ig... 目的　探讨免疫固定电泳技术在鉴定M蛋白上的应用。方法　采用琼脂糖凝胶免疫固定技术 (IFE)和速率散射比浊法检测了 43例病人和 2 0例正常健康人血清M蛋白。结果　其中 2 9例病人检出M蛋白 ,M蛋白分型为IgGκ型2 0例 ,IgGλ型 5例 ,IgMκ型 2例 ,IgAλ型 1例 ,单纯λ型 1例 ;14例其它疾病未检出M带。结论　采用免疫固定电泳技术 ,沉淀带易识别 ,操作简单、快速。对鉴定各类型M蛋白有重要价值。 展开更多
关键词 免疫固定电泳 M蛋白 免疫球蛋白
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