羊源枯草芽孢杆菌分离鉴定及益生特性分析

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作者 李永健 张润泽 +5 位作者 吴忧 赵鹏飞 焦陇玲 周明 齐亚银 任静静 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第4期1590-1602,共13页

【目的】筛选益生特性好的枯草芽孢杆菌。【方法】从规模化羊场采集10份粪便和6份环境样品,通过LB固体培养基进行细菌分离纯化。利用形态学观察、生化鉴定和16S rRNA基因PCR扩增技术对菌株进行鉴定。然后通过溶血性测试、药敏试验、耐... 【目的】筛选益生特性好的枯草芽孢杆菌。【方法】从规模化羊场采集10份粪便和6份环境样品,通过LB固体培养基进行细菌分离纯化。利用形态学观察、生化鉴定和16S rRNA基因PCR扩增技术对菌株进行鉴定。然后通过溶血性测试、药敏试验、耐药与毒力基因分析、体外抑菌试验、酸碱及胆盐耐受性测试,以及小鼠安全性评估,全面评价菌株的益生特性。【结果】分离到的2株细菌在血平板上形成不规则白色突出菌落,表面粗糙呈山脉状,周围呈现明显的溶血环。生化鉴定结果显示,分离到的2株菌触酶、VP、葡萄糖、木糖、L-阿拉伯糖、甘露醇、蔗糖、柠檬酸盐、硝酸盐还原、淀粉水解、明胶液化、麦芽糖、蕈糖试验结果均呈阳性,硫化氢、枸橼酸盐、半乳糖试验均呈阴性,初步判定为枯草芽孢杆菌并分别命名为K1、K2。16S rRNA基因PCR扩增测序结果显示,分离株与枯草芽孢杆菌参考菌株的相似性为98%~100%,在系统进化树中处于同一分支,而与贝莱斯芽孢杆菌、沙门菌、屎肠球菌处于不同分支。抑菌试验结果表明,分离菌株K1、K2的上清对金黄色葡萄球菌有较好的抑菌效果,对大肠杆菌和沙门菌没有抑菌效果。药敏试验结果表明,分离菌株K1、K2对受试的青霉素、阿莫西林、头孢噻肟、恩诺沙星、氧氟沙星、复方新诺明、氟苯尼考、万古霉素具有较高的敏感性,对庆大霉素、大观霉素、罗红霉素中介,对四环素、多黏菌素B、林可霉素耐药。毒力基因检测结果表明,分离菌K1和K2不携带nheA、bceT、entFM、ces、cytK、hblA、hblC、hblD等毒力基因。耐药基因检测结果表明,分离菌K1携带aph(3′)-Ⅰa耐药基因,不携带MCR-1、bcr、floR、rpsl、strB、aadB、aac(6′)-Ⅰb、blaTEM、blaCTX、ermA、ermC、qnrA、qnrB、sul1、sul2、tetC、tetA、tetM、catA2耐药基因,而K2株携带ermA耐药基因,不携带其他验证的耐药基因。2株分离菌在pH为4.0、5.0、6.0、8.0、9.0、10.0的LB液体培养基中均有较好的生长活性,其中菌株K2在pH为3.0的LB液体培养基中仍然具有较好的生长活性,在含0.3%、0.5%、0.7%、1.0%牛胆盐的LB液体培养基中,2株分离菌仍然可以存活,并保持相对较好的生长活性。小鼠体内安全性试验表明,小鼠未出现明显的病理变化。【结论】本研究分离的2株细菌均为枯草芽孢杆菌,具有溶血性,对金黄色葡萄球菌有抑菌作用并具备较强的生长活性。在模拟胃肠道环境中,其耐酸、耐碱、耐胆盐能力方面表现出多样性,且对多数抗菌药保持敏感性,未检测到主要毒力基因,对小鼠具有良好的安全性,具有作为益生菌的潜力,可进一步探索其在畜牧养殖和人类健康领域的应用。 展开更多

关键词 枯草芽孢杆菌 分离鉴定 益生特性

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安格斯母牛大肠杆菌性乳房炎的诊断与防治

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作者 陈如龙 李永健 +1 位作者 张霞 齐亚银 《现代畜牧科技》 2025年第6期97-99,共3页

研究旨在鉴定新疆某规模化安格斯肉牛牧场中母牛乳房炎的主要病原菌,并评估其耐药性,为该牧场制定有效的乳房炎防控措施提供科学依据。无菌采集患病牛乳汁样本,通过常规微生物学方法和分子生物学技术对病原菌进行分离鉴定,并开展药敏试... 研究旨在鉴定新疆某规模化安格斯肉牛牧场中母牛乳房炎的主要病原菌,并评估其耐药性,为该牧场制定有效的乳房炎防控措施提供科学依据。无菌采集患病牛乳汁样本,通过常规微生物学方法和分子生物学技术对病原菌进行分离鉴定,并开展药敏试验以评估其耐药性。鉴定结果显示,21份乳房炎样本中有19份检出大肠杆菌。药敏试验表明,19株大肠杆菌对链霉素的耐药率最高,达到42.10%,对青霉素和氨苄西林的耐药率为36.84%。对四环素的敏感性为73.68%,而对头孢噻肟和万古霉素的敏感性最高,为84.21%。此外,多数菌株呈现多重耐药性。本研究明确了该牧场乳房炎的主要病原菌为大肠杆菌,提出科学合理的防控措施,为该牧场的防治及健康养殖提供参考依据。 展开更多

关键词 安格斯肉牛 乳房炎 大肠杆菌 分离鉴定 耐药性

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新疆部分地区犊牛曼氏杆菌病的流行病学调查 被引量：1

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作者 王峰 王志伟 +5 位作者 何宏 陈钊明 王晨豫 魏勇 李智星 齐亚银 《现代畜牧科技》 2024年第8期19-21,共3页

牛溶血性曼氏杆菌是导致牛呼吸道疾病(BRD)的重要细菌性病原之一,给养牛业带来较大的经济损失,牛曼氏杆菌病的主要预防措施为疫苗免疫,但牧场经常忽略该病的存在。为调查曼氏杆菌在新疆地区的整体流行情况,通过对南北疆20个牧场具有肺... 牛溶血性曼氏杆菌是导致牛呼吸道疾病(BRD)的重要细菌性病原之一,给养牛业带来较大的经济损失,牛曼氏杆菌病的主要预防措施为疫苗免疫,但牧场经常忽略该病的存在。为调查曼氏杆菌在新疆地区的整体流行情况,通过对南北疆20个牧场具有肺炎临床症状的犊牛进行鼻拭子采集,通过PCR进行分子生物学检测,根据检测给牧场提供该病科学的防控意见。检测结果表明,肺炎发病牛共计116头,感染溶血性曼氏杆菌的牛96头,阳性率为82.76%(96/116),其中南疆肺炎犊牛曼氏杆菌病发病率为83.3%(50/60),北疆肺炎犊牛曼氏杆菌病发病率为82.14%(46/56)。临床病例表明,新疆地区该病主要高发于2~8月龄牛群,在全疆各地牧场均有不同程度的出现。研究结果证实,新疆地区的牧场急需进行曼氏杆菌疫苗的免疫防控工作。 展开更多

关键词 犊牛 杆菌 流行病学

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某规模化牧场致奶牛乳房炎停乳链球菌的分离鉴定和药敏实验

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作者 李永健 张立强 +2 位作者 韩丽芸 雷静 齐亚银 《中国动物保健》 2024年第9期120-122,共3页

某规模化牧场乳房炎频发,为探究引起奶牛乳房炎情况及分析原因,并制定防控方案。本研究采集某规模化牧场患临床型乳房炎的奶样,采用常规微生物学方法,通过分离培养、纯化、生理生化鉴定、PCR鉴定以确定种属,然后采用纸片法对分离菌的药... 某规模化牧场乳房炎频发,为探究引起奶牛乳房炎情况及分析原因,并制定防控方案。本研究采集某规模化牧场患临床型乳房炎的奶样,采用常规微生物学方法,通过分离培养、纯化、生理生化鉴定、PCR鉴定以确定种属,然后采用纸片法对分离菌的药敏特性进行分析。试验结果表明,分离到4株停乳链球菌,药物敏感性试验表明该菌株对青霉素、氨苄西林、阿莫西林、恩诺沙星高度敏感;对红霉素中度敏感;而对大观霉素、庆大霉素、四环素、复方磺胺甲噁唑、林可霉素耐药。牧场根据药敏试验结果,结合卧床管理、环境改善、挤奶设备检修等措施,很快控制了本次疫情。 展开更多

关键词 停乳链球菌 分离鉴定 奶牛乳房炎 药敏试验

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规模化猪场副猪嗜血杆菌的部分生物学特性研究 被引量：2

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作者 齐亚银 武磊 +2 位作者 莫敏 曹玉洁 张莉 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第5期73-75,共3页

为了查明流行于新疆北部部分地区部分规模化养猪场副猪嗜血杆菌的存在情况及其部分生物学特性,本试验以新疆北部地区几个规模化猪场为研究对象,从可疑副猪嗜血杆菌病病料中分离目标菌,采用微生物学与免疫学的试验手段,调查其主要流行株... 为了查明流行于新疆北部部分地区部分规模化养猪场副猪嗜血杆菌的存在情况及其部分生物学特性,本试验以新疆北部地区几个规模化猪场为研究对象,从可疑副猪嗜血杆菌病病料中分离目标菌,采用微生物学与免疫学的试验手段,调查其主要流行株的生物学特性,包括生理生化特性、培养特性及分子特性,并对分离株进行了药敏试验及对小白鼠的致病性试验。试验结果表明,该地区规模化猪场中已普遍存在副猪嗜血杆菌病的感染,5株分离株对小白鼠均有较强的致病性,而且对硫酸庆大霉素和盐酸土霉素已经产生了耐药性。 展开更多

关键词 副猪嗜血杆菌 生物学特性 耐药性 致病性

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犊牛支原体混合感染巴氏杆菌、曼氏杆菌的诊断与防控

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作者 王峰 王志伟 +5 位作者 何宏 陈钊明 王晨豫 魏勇 李智星 齐亚银 《现代畜牧科技》 2024年第7期13-15,共3页

新疆某规模化奶牛场犊牛呈现严重的呼吸道综合症,治疗后无果出现死亡,为查明发病原因,采用现场调查结合实验室PCR方法对病死牛病料进行确诊。结果表明,发病犊牛出现咳喘、呼吸急促、流黏脓性分泌物;剖检后观察到肺脏出现严重出血、充血... 新疆某规模化奶牛场犊牛呈现严重的呼吸道综合症,治疗后无果出现死亡,为查明发病原因,采用现场调查结合实验室PCR方法对病死牛病料进行确诊。结果表明,发病犊牛出现咳喘、呼吸急促、流黏脓性分泌物;剖检后观察到肺脏出现严重出血、充血、实变、纤维素性渗出,且胸腔积液;经牛支原体、巴氏杆菌、曼氏杆菌的特异性引物进行PCR检测可扩增出相应大小目的条带。针对检测结果,建议牧场通过改善环境、加强饲喂、免疫防控,采用中西医药物防治相结合的方式进行防控,取得了较好的防控效果。 展开更多

关键词 犊牛 巴氏杆菌 曼氏杆菌 支原体 防控

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兽医微生物学实验教学改革探析 被引量：1

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作者 齐亚银 张莉 +1 位作者 王晓兰 曾宗波 《现代农业科技》 2018年第18期266-267,共2页

兽医微生物学是动物医学专业课程设置中理论与实践结合较紧密的学科之一,实验教学是其中一个重要的必须环节,只有认真负责地加强实验教学的每个环节、踏踏实实地深化实验教学改革、认认真真地上好每一节实验课,方可确保顺利地完成兽医... 兽医微生物学是动物医学专业课程设置中理论与实践结合较紧密的学科之一,实验教学是其中一个重要的必须环节,只有认真负责地加强实验教学的每个环节、踏踏实实地深化实验教学改革、认认真真地上好每一节实验课,方可确保顺利地完成兽医微生物学的实验教学任务。本文根据笔者数年兽医微生物学实验教学的经验,结合当前学生的个性、思维和创新能力,就如何深化兽医微生物学实验教学改革进行初步探讨,以期为兽医微生物学实验教学改革提供借鉴。 展开更多

关键词 兽医微生物学 实验教学 教学改革

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冷应激对湖羊血清因子及热休克蛋白70 mRNA表达的影响 被引量：12

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作者 杨莉 张莉 +3 位作者 齐亚银 沈文 李岩 张鲁安 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第4期890-895,共6页

为研究冷应激对湖羊免疫系统及热休克蛋白70(heat stress proteins 70,Hsp70)的影响,试验分别采用实时荧光定量PCR和ELISA方法检测冷应激前后湖羊肝脏、肺脏、脾脏、淋巴结组织中Hsp70mRNA表达量及血清中白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素... 为研究冷应激对湖羊免疫系统及热休克蛋白70(heat stress proteins 70,Hsp70)的影响,试验分别采用实时荧光定量PCR和ELISA方法检测冷应激前后湖羊肝脏、肺脏、脾脏、淋巴结组织中Hsp70mRNA表达量及血清中白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)浓度。结果显示,与冷应激前相比,冷应激后湖羊肝脏、肺脏及脾脏组织中Hsp70mRNA表达量均极显著增加(P<0.01),其中肝脏的表达量尤为显著;冷应激后湖羊血清中IL-2、IL-4的浓度均呈下降趋势,其中IL-4浓度下降尤为显著(P<0.01)。结果表明,冷应激条件下湖羊各组织中Hsp70mRNA表达增强,可提高动物机体的自我保护机能,增强对外界不良刺激的抵抗力,但细胞因子IL-2和IL-4的浓度下降,表明冷应激抑制机体免疫系统。 展开更多

关键词 冷应激 热休克蛋白70 白细胞介素-2 白细胞介素-4 湖羊

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粪肠球菌生长曲线的测定及其对小鼠脑组织的影响 被引量：21

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作者 王蒙蒙 张莉 +6 位作者 李慧 汪骁轩 魏殿华 高静雯 高建鹏 张华雷 齐亚银 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第4期1041-1049,共9页

为测定致羔羊脑炎粪肠球菌(Enterococcus faecalis)的生长曲线,寻求一种快速而准确的方法测定不同生长时期粪肠球菌数量,并客观评价其毒性强弱及其对小鼠脑组织的影响,试验采用平板菌落计数法和OD-Monitor振荡比浊法(Dλ值法)测定粪肠... 为测定致羔羊脑炎粪肠球菌(Enterococcus faecalis)的生长曲线,寻求一种快速而准确的方法测定不同生长时期粪肠球菌数量,并客观评价其毒性强弱及其对小鼠脑组织的影响,试验采用平板菌落计数法和OD-Monitor振荡比浊法(Dλ值法)测定粪肠球菌的生长曲线,探究该菌在合适时间段内的吸光值(D600nm)与平板菌落计数法测定的活菌数(CFU)的关系。用粪肠球菌感染小鼠,观察记录小鼠的死亡情况,最后采用Karber法计算粪肠球菌感染小鼠的半数致死量(LD50)。用LD50的剂量感染小鼠,及时采集死亡小鼠脑组织,未死亡的小鼠72h后全部剖杀取脑组织,一部分做涂片染色,制作病理切片,观察病理变化;一部分进行培养,用于PCR方法进行细菌的回收鉴定。结果显示,用两种方法测定此株粪肠球菌的生长曲线基本一致,在2~8h生长迅速,为对数生长期,8~14h生长缓慢,为稳定期,14h之后死亡数增加,进入衰亡期;对12h粪肠球菌D600nm与CFU的关系进行探讨,成功建立回归方程:y=20.769x-1.3422,R2=0.997;其感染小鼠的LD50为7.77×1011个活菌。以此剂量感染小鼠,脑组织涂片染色和培养染色,均能看到革兰氏阳性球菌;PCR结果显示,均出现了大小为112bp的条带。对脑组织进行病理学观察发现该菌可导致脑组织充血、出血、形成微血栓,脑膜充血。通过生长曲线和其D600nm与CFU关系的建立,可实时监测粪肠球菌数量,为后期更深入研究粪肠球菌穿越血脑屏障的机制奠定重要的理论基础。 展开更多

关键词 粪肠球菌 Dλ值法 平板菌落计数法 半数致死量

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石河子地区隐性乳房炎奶牛源大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析 被引量：21

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作者 许丹丹 许追 +4 位作者 齐向涛 欧都 杨莉 齐亚银 剡根强 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第3期701-707,共7页

为了解引起石河子地区规模化奶牛场隐性乳房炎奶牛源大肠杆菌的流行情况及其耐药性,本试验采用兰州乳房炎检测板(Lanzhou mastitis test,LMT)对石河子地区11个规模化奶牛场进行了检测,同时对无菌采集的检测为阳性的乳样进行了大肠杆菌... 为了解引起石河子地区规模化奶牛场隐性乳房炎奶牛源大肠杆菌的流行情况及其耐药性,本试验采用兰州乳房炎检测板(Lanzhou mastitis test,LMT)对石河子地区11个规模化奶牛场进行了检测,同时对无菌采集的检测为阳性的乳样进行了大肠杆菌分离鉴定及耐药性分析。结果显示,石河子地区11个规模化奶牛场的隐性乳房炎感染阳性率为44.56%(313/1950);对313份无菌采集的乳样进行细菌分离鉴定,结果共分离出病原菌108株,其中大肠杆分离率为14.81%(16/108);药敏试验结果显示16株大肠杆菌对氧氟沙星、头孢唑啉、克林霉素高度敏感,对庆大霉素、氨苄西林、链霉素中度敏感,对阿莫西林、四环素有耐药性。本试验为该地区大肠杆菌源性隐性乳房炎的防制提供科学依据。 展开更多

关键词 奶牛隐性乳房炎 大肠杆菌 药敏试验

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天山北坡放牧绵羊面部湿疹的临床病理学研究 被引量：3

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作者 刘良波 韩玉霞 +6 位作者 孙焕林 柳建新 杨祎 王建华 卜万喜 齐亚银 剡根强 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期1481-1486,共6页

本研究为探讨放牧绵羊面部湿疹的发病机理，对天山北坡天然草场放牧绵羊面部湿疹的临床发病过程，病理解剖与组织学，血清肝功能指标进行了调查和测定；并对100只发病羊和100只健康羊及5只病死羔羊进行了真菌的分离培养和真菌类型统计... 本研究为探讨放牧绵羊面部湿疹的发病机理，对天山北坡天然草场放牧绵羊面部湿疹的临床发病过程，病理解剖与组织学，血清肝功能指标进行了调查和测定；并对100只发病羊和100只健康羊及5只病死羔羊进行了真菌的分离培养和真菌类型统计学分析。结果显示，绵羊发病只在特定区域草场发病，以6月龄内细毛羊多发，以面部（耳，眼睑）及颌下炎性水肿为特征，病死羔羊肝肿大，表面有黄白色斑状坏死灶，切面有结节性硬变及纤维化，肝组织学显示肝淤血，肝细胞和胆管严重坏死，脂肪变性。发病羊血清中的谷氨酰转肽酶（GGT）活性为94．93～260．78U·L-1，明显高于健康羊16．47～61．59u·L-1谷丙转氨酶（ALT）、总胆红素（TBIL）也明显高于健康绵羊（P〈0．01），而发病羊和健康羊的谷草转氨酶（AsT）活性差异不显著（P〉0．05）；发现205只试验羊都有真菌的感染，发病羊的分离菌中纸皮思霉属、链格孢菌属、镰刀菌属和曲霉属真菌4种菌的分离率较其他属真菌高，其中纸皮思霉属分离率为最高，酵母菌、根霉属和毛霉属真菌在发病羊和健康羊都有分离，但是分离率都较低。表明本地区放牧绵羊湿疹属肝功能不全和肝坏死引发的肝原性光过敏性湿疹，其病原可能为纸皮思霉属、链格孢菌属、镰刀菌属和曲霉属4种真菌。 展开更多

关键词 绵羊 面部湿疹 临床病理学 肝功酶 谷氨酰转肽酶

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致羔羊脑炎粪肠球菌生物被膜形成能力及相关基因检测研究 被引量：5

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作者 孔静雅 郭强强 +3 位作者 孔科委 李劼 周霞 齐亚银 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第3期679-685,共7页

为观察致羔羊脑炎粪肠球菌XJ05株生物被膜(BF)的形成能力并检测致羔羊脑炎粪肠球菌BF形成相关基因的携带情况,本研究以XJ05为研究对象,运用96孔板建立不同时间BF模型,染色后酶标仪测定D595nm值,并用倒置显微镜观察BF形态。同时检测11株... 为观察致羔羊脑炎粪肠球菌XJ05株生物被膜(BF)的形成能力并检测致羔羊脑炎粪肠球菌BF形成相关基因的携带情况,本研究以XJ05为研究对象,运用96孔板建立不同时间BF模型,染色后酶标仪测定D595nm值,并用倒置显微镜观察BF形态。同时检测11株菌中与BF形成相关基因(gelE、esp、ace、asa1、asa373、efaA、ef0591、ef3314、ahrc、eep)的携带情况,并对相关基因片段做同源性分析。结果显示,在不同时间段XJ05株BF的生成量与空白对照组相比差异显著(P<0.05),24h时D595nm值最高且与其他各个时间段相比均差异显著(P<0.05)。显微镜下观察6h时BF初具规模,可见散落的网状结构,12~24h矩阵网格结构明显,24h时形成高度有序的网格结构,24h后网状结构逐渐脱落,BF开始降解。11株菌中10种相关基因的携带情况不同,有6株携带8种基因,1株携带7种基因,1株携带6种基因,1株携带2种基因,有2株未检测到10种基因的任何一种。检出的基因片段同源性均在93.3%~100.0%之间。结果表明,XJ05株能形成完整的BF,11株分离的致羔羊脑炎粪肠球菌中有9株携带部分与BF形成相关的基因。 展开更多

关键词 粪肠球菌 生物被膜 生物被膜相关基因 同源性分析

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天山地区牦牛主要传染病流行病学调查 被引量：12

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作者 袁立岗 李静 +2 位作者 蒲敬伟 李岩 齐亚银 《中国草食动物科学》 CAS 2015年第3期37-38,共2页

通过流行病学和血清学方法对新疆天山地区放牧牦牛主要传染病进行调查。结果显示:口蹄疫感染率7.4%,冠状病毒病感染率100%,牛副流感感染率85.0%,传染性鼻气管炎感染率81.9%,牛病毒性腹泻感染率52.0%,衣原体感染率44.0%,牛呼吸道胞合体... 通过流行病学和血清学方法对新疆天山地区放牧牦牛主要传染病进行调查。结果显示:口蹄疫感染率7.4%,冠状病毒病感染率100%,牛副流感感染率85.0%,传染性鼻气管炎感染率81.9%,牛病毒性腹泻感染率52.0%,衣原体感染率44.0%,牛呼吸道胞合体感染率20.0%,附红细胞体细胞变形率20.0%,布氏杆菌病感染率12.8%,支原体感染率10.4%,结核病感染率2.7%。巴氏杆菌(牛出败)、大肠杆菌等环境致病菌随气候环境变化亦经常发生感染。 展开更多

关键词 天山牦牛 流行病学

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新疆地区4种猪病多重PCR检测方法的建立与初步应用 被引量：3

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作者 张勋 § +8 位作者 吴鹏 李世震 伏寅峰 许追 梁田 杨素芳 陈新凯 齐亚银 盛金良 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第10期2612-2618,共7页

本试验旨在建立一种可同时检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)、猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)、猪伪狂犬病病毒(porcine pseudorabies virus,PRV)、猪肺炎支原... 本试验旨在建立一种可同时检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)、猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)、猪伪狂犬病病毒(porcine pseudorabies virus,PRV)、猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mh)的多重PCR检测方法。参考相关文献合成PRRSV、PCV2、PRV、Mh的特异性引物,通过对反应条件优化、特异性、敏感性测定,建立了可同时检测以上4种猪多发传染病的PCR诊断方法。扩增的片段长度分别为424bp(PRRSV)、490bp(PCV2)、298bp(PRV)和360bp(Mh),对其他常见猪病病原无特异性扩增,采用Multiplex PCR Master Mix对PRRSV、PCV2、PRV、Mh的核酸最低检出量为3个拷贝。采用多重PCR方法对60份临床样本反复检测,与单重PCR相比,4种病原符合率均为100%。结果表明,建立的多重PCR诊断方法可用于猪群中上述4种病原的单一或混合感染的快速鉴别诊断和流行病学调查。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪圆环病毒2型 猪伪狂犬病病毒 猪肺炎支原体 多重PCR 检测

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奶牛肺外结核病的综合诊断与病原分离鉴定 被引量：4

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作者 许芳 田莉莉 +5 位作者 齐亚银 孙世雄 孙翔翔 剡根强 曾巧英 范伟兴 《中国动物检疫》 CAS 2017年第12期1-4,19,共5页

为揭示牛型提纯结核菌素(PPD)检测阳性牛与剖检肺脏病变不吻合的真实原因,综合运用皮内变态反应(SIT)、比较变态反应(SICCT)、IFN-γ试验,以及牛型PPD点眼反应、ELISA抗体检测等5种免疫学方法,对我国西部5个奶牛场进行牛结核病综合诊断... 为揭示牛型提纯结核菌素(PPD)检测阳性牛与剖检肺脏病变不吻合的真实原因,综合运用皮内变态反应(SIT)、比较变态反应(SICCT)、IFN-γ试验,以及牛型PPD点眼反应、ELISA抗体检测等5种免疫学方法,对我国西部5个奶牛场进行牛结核病综合诊断,然后对锁定的后期感染牛进行扑杀、剖检,采集病料进行病理学和病原学诊断。结果显示:用5种方法综合检测确诊的95头后期感染牛中,有84头(88.42%)剖检可见明显结核病变,其中12头(14.29%)的病变发生在肺和肺门淋巴结,72头(85.71%)的病变发生在肝、脾、肠系膜淋巴结等肺外组织器官;95头后期感染牛中,有54头病料培养阳性;阳性菌经Xpert MTB/RIF和Enigma鉴定,均为牛分枝杆菌。该研究结果表明:我国牛结核病存在肺结核和肺外结核两种,因而增加了牛结核病的诊治难度;牛结核病确诊仅靠单一检测方法十分困难,需运用多种免疫学方法进行综合诊断;该结果可以解释目前出现的检测阳性与肺部剖检病变结果不一致的困惑。 展开更多

关键词 牛结核病 综合诊断 病原学诊断 肺外结核

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新疆北疆地区猪源粪肠球菌的耐药性分析 被引量：11

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作者 王蒙蒙 张子荣 +3 位作者 欧都.吾吐那生 蒲敬伟 袁立岗 齐亚银 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第5期1374-1381,共8页

为了解新疆北疆地区猪源粪肠球菌的耐药性及相关耐药基因型的分布情况,本试验采用K-B(Kirby-Baller)琼脂扩散法检测了49株猪源粪肠球菌对8种抗菌药物的敏感性,并采用PCR法对9种相关耐药基因进行检测并测序,测序结果与GenBank中的相应基... 为了解新疆北疆地区猪源粪肠球菌的耐药性及相关耐药基因型的分布情况,本试验采用K-B(Kirby-Baller)琼脂扩散法检测了49株猪源粪肠球菌对8种抗菌药物的敏感性,并采用PCR法对9种相关耐药基因进行检测并测序,测序结果与GenBank中的相应基因序列比对。药敏试验结果显示,分离菌对链霉素耐药率最高,其次为青霉素和红霉素,对呋喃妥因、氨苄西林高度敏感。PCR检测结果显示,β-内酰胺类耐药基因tem的检出率最高,为93.88%,其次是四环素类耐药基因tetM,为85.71%,喹诺酮类基因gyrA和parC检出率均为42.86%,氨基糖苷类耐药基因aph(3′)-Ⅲ、aac(6′)/aph2″和ant(6′)-Ⅰ的检出率分别为36.73%、16.33%和16.33%,未检出mefA和ermB基因。本试验从表型与基因型分析发现,北疆地区猪源粪肠球菌的多重耐药现象非常严重,且其耐药表型与基因型并不完全一致。 展开更多

关键词 粪肠球菌 抗菌药物 耐药基因

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冷应激对新疆阿勒泰羊脂蛋白脂酶mRNA表达的影响 被引量：2

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作者 杨莉 齐亚银 +3 位作者 张莉 沈文 李岩 张鲁安 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第12期230-234,共5页

为研究冷应激对阿勒泰羊脂蛋白脂酶(lipoprotein lipase,LPL)mRNA表达的影响,试验分别采集冷应激前与冷应激后阿勒泰羊6个部位的组织,采用实时荧光定量PCR方法检测各组织中LPL mRNA的表达水平,分析其在不同部位中表达的变化。结果显示,... 为研究冷应激对阿勒泰羊脂蛋白脂酶(lipoprotein lipase,LPL)mRNA表达的影响,试验分别采集冷应激前与冷应激后阿勒泰羊6个部位的组织,采用实时荧光定量PCR方法检测各组织中LPL mRNA的表达水平,分析其在不同部位中表达的变化。结果显示,阿勒泰羊LPL mRNA表达量在冷应激后显著或极显著升高(P<0.05;P<0.01),其中颈部肌间脂肪和尾部脂肪冷应激后表达量最高。表明阿勒泰羊在低温下脂肪组织的动员能力较强,使机体产热增加,以抵抗冷应激。 展开更多

关键词 冷应激 脂蛋白脂酶 阿勒泰羊

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驴乳房炎大肠杆菌的分离鉴定及生物学特性研究 被引量：2

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作者 高静雯 曾宗波 +1 位作者 张莉 齐亚银 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第11期3211-3220,共10页

为了查明导致新疆某规模化奶驴场乳房炎的主要病原菌及其生物学特性,试验采用常规微生物学方法对病原菌进行分离,采用生化鉴定管和16SrRNA的PCR扩增方法对病原菌进行鉴定,采用K-B药敏纸片法测定其耐药性,D_(600nm)值绘制细菌生长曲线,... 为了查明导致新疆某规模化奶驴场乳房炎的主要病原菌及其生物学特性,试验采用常规微生物学方法对病原菌进行分离,采用生化鉴定管和16SrRNA的PCR扩增方法对病原菌进行鉴定,采用K-B药敏纸片法测定其耐药性,D_(600nm)值绘制细菌生长曲线,最后分析同源性并构建系统进化树。结果显示,分离株为革兰氏阴性短杆菌,能在麦康凯培养基上长出粉红色菌落,在伊红-美兰培养基上长出有金属光泽的菌落;生化鉴定分离株的葡磷胨水、赖氨酸、鸟氨酸、棉子糖、山梨醇、侧金盏花醇、木胶糖试验均呈阳性,而苯丙氨酸和硫化氢试验均为阴性;PCR扩增后测序得到205bp的1号菌株和203bp的2号菌株,其特性符合大肠杆菌的特性;药敏结果表明,分离株对链霉素和氯霉素高度敏感,对青霉素、阿莫西林和庆大霉素耐药;生长曲线表明,分离株在2～16h时为高度繁殖期,16～32h处于稳定期,32h以后开始进入衰退期;1号菌株与2号菌株同源性高达99%,1号菌株与大肠杆菌11J和RCB800的同源性最高(100%);2号菌株与大肠杆菌675SK2和DTU-1的同源性最高(100%);由系统进化树分析可知,1号菌株与大肠杆菌11J和RCB800处于同一个小分支,2号菌株与大肠杆菌675SK2和DTU-1处于同一个小分支。因此,导致本次驴乳房炎的病原菌为大肠杆菌,本研究结果为进一步系统研究导致驴乳房炎大肠杆菌的致病机制提供参考。 展开更多

关键词 驴乳房炎 大肠杆菌 分离鉴定 生物学特性

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新疆石河子地区猪瘟免疫抗体水平检测与分析 被引量：3

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作者 许追 齐向涛 +1 位作者 齐亚银 张莉 《养猪》 2013年第5期97-99,共3页

为了解石河子地区猪瘟免疫抗体水平及其消长规律，试验采集其周边7个不同地区的36个猪场2012--2013年不同类别猪血样1613份，采用间接ELISA方法检测其猪瘟免疫抗体水平并进行分析。结果表明，石河子地区猪瘟免疫抗体阳性率为78．5％，... 为了解石河子地区猪瘟免疫抗体水平及其消长规律，试验采集其周边7个不同地区的36个猪场2012--2013年不同类别猪血样1613份，采用间接ELISA方法检测其猪瘟免疫抗体水平并进行分析。结果表明，石河子地区猪瘟免疫抗体阳性率为78．5％，达到国家的规定水平（70％）；从养殖规模分析，散养户的猪瘟免疫抗体阳性率为71．6％，低于规模化猪场；从猪群结构分析，母猪阳性率最高（83．9％），肥育猪最低（63．4％）；从母猪胎次分析，后备母猪抗体阳性率最低（80．7％），2—3胎母猪最高（85．7％），4～6胎母猪为82．6％；从仔猪日龄分析，28日龄前抗体阳性率为74％，29～35日龄最低（68．1％），36～50日龄为72.3％，51—70日龄为70．8％。该结果可为进一步了解石河子地区猪瘟的免疫状况、制定合理的免疫程序提供参考。 展开更多

关键词 猪瘟 免疫抗体 阳性率 ELISA 石河子

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北疆地区7个规模化猪场猪伪狂犬病的净化试验 被引量：3

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作者 齐向涛 曹玉洁 +4 位作者 许追 欧都 许丹丹 杨莉 齐亚银 《养猪》 2013年第4期121-123,共3页

为了掌握北疆地区7个规模化猪场猪伪狂犬病野毒感染情况,给养殖户提供一个合理的猪伪狂犬病净化方案,采用PRV-gE蛋白的ELISA(酶联免疫吸附试验)抗体检测试剂盒,对试验区7个猪场的公猪、母猪、仔猪和肥育猪共525份血清进行检测,同时收集... 为了掌握北疆地区7个规模化猪场猪伪狂犬病野毒感染情况,给养殖户提供一个合理的猪伪狂犬病净化方案,采用PRV-gE蛋白的ELISA(酶联免疫吸附试验)抗体检测试剂盒,对试验区7个猪场的公猪、母猪、仔猪和肥育猪共525份血清进行检测,同时收集现场流行病学调查结果进行分析。结果表明,525份血清总阳性率为27.8%(146/525),7个猪场的野毒感染率分别为20.27%、30.30%、58.16%、0、47.83%、29.69%、2.38%;不同阶段猪伪狂犬病野毒抗体阳性率存在较大的差异,母猪、后备母猪、仔猪(15～18天)、公猪、肥育猪和断奶仔猪伪狂犬病野毒抗体阳性率分别为35.71%、34.46%、22.86%、21.28%、21.21%和20.83%。该调查结果表明,猪伪狂犬病在北疆地区猪场野毒感染较为严重,同时根据对各场的感染规律和特点的调查与分析,分别选择了A、B、E 3个猪场制定猪伪狂犬病净化方案,结果该方案在3个猪场推广使用半年后取得了很好的净化效果:猪伪狂犬病野毒感染率A场从净化前20.27%下降到净化后8.70%,差异极显著;B场从净化前30.30%下降到净化后5.88%,差异极显著;E场从净化前47.83%下降到净化后12.50%,差异极显著。 展开更多

关键词 猪伪狂犬病 抗体 净化

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