肾上腺脑白质营养不良分子诊断中假基因干扰的排除 被引量：7

1

作者 黄梁浒 郑德柱 +2 位作者 曾健 辛娜 兰风华 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第6期572-575,共4页

在基因组DNA水平 ,应用基因突变分析的方法对肾上腺脑白质营养不良进行分子诊断十分重要 .由于人体内存在多个肾上腺脑白质营养不良假基因的拷贝 ,应用PCR RFLP和PCR产物直接测序等常规方法难以检测一部分的基因突变 .为了排除基因组DN... 在基因组DNA水平 ,应用基因突变分析的方法对肾上腺脑白质营养不良进行分子诊断十分重要 .由于人体内存在多个肾上腺脑白质营养不良假基因的拷贝 ,应用PCR RFLP和PCR产物直接测序等常规方法难以检测一部分的基因突变 .为了排除基因组DNA中假基因的干扰 ,利用扩增阻滞突变系统 ,成功地分析了一个肾上腺脑白质营养不良 (R6 17G突变 )家系成员的基因型 .结果表明 ,扩增阻滞突变系统是排除假基因干扰的有效方法之一 . 展开更多

关键词 肾上腺脑白质营养不良 分子诊断 ABCD1基因 假基因 扩增阻滞突变系统

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7个肾上腺脑白质营养不良家系的基因突变分析 被引量：3

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作者 黄梁浒 王志红 +3 位作者 杨渤生 郑德柱 吴玉水 兰风华 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期540-542,共3页

目的对7个肾上腺脑白质营养不良家系进行基因突变分析。方法应用RTPCR技术,对7位患者的ABCD1基因编码区分4个片段进行扩增并对PCR产物直接测序。应用PCR限制性酶切或DNA测序等方法分析相应的基因组DNA,进一步确证ABCD1基因的突变位点。... 目的对7个肾上腺脑白质营养不良家系进行基因突变分析。方法应用RTPCR技术,对7位患者的ABCD1基因编码区分4个片段进行扩增并对PCR产物直接测序。应用PCR限制性酶切或DNA测序等方法分析相应的基因组DNA,进一步确证ABCD1基因的突变位点。结果在7位患者的ABCD1基因上存在6个不同的碱基置换(709CA、807GA、1161CT、2065CT、2113TC和2235CT)、1个碱基缺失(1801delAG)和1个碱基插入(1126insGCCATCG),分别造成5个错义突变(A141T、R259W、P560L、L576P和R617C)、2个移码突变(fsI246和fsE471)和1个无义突变(S108X)。结论在中国人肾上腺脑白质营养不良患者中发现4个新的ABCD1基因突变,即S108X、fsI246、R259W和L576P突变。不同家系具有不同的突变位点,且突变类型和表型之间无特殊的相关性。 展开更多

关键词 肾上腺脑白质营养不良 突变 基因 ABCD1

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福州地区肺炎克雷伯氏菌和大肠埃希氏菌的药敏监测 被引量：18

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作者 林庆安 赖国祥 +3 位作者 黄梁浒 柳德灵 马洪玉 张鸿文 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期79-81,110,共4页

目的监测福州地区肺炎克雷伯氏菌和大肠埃希氏菌对14种常用抗生素的药敏情况,为临床合理选用抗生素提供依据。方法收集2001年3月～10月福州地区4家医院分离的肺炎克雷伯氏菌和大肠埃希氏菌426株,用K-B琼脂扩散法作药敏试验;用表型确认... 目的监测福州地区肺炎克雷伯氏菌和大肠埃希氏菌对14种常用抗生素的药敏情况,为临床合理选用抗生素提供依据。方法收集2001年3月～10月福州地区4家医院分离的肺炎克雷伯氏菌和大肠埃希氏菌426株,用K-B琼脂扩散法作药敏试验;用表型确认试验检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)。结果在14种抗生素中,敏感性最高的是亚胺培南(100%)、头孢哌酮/舒巴坦(100%)、哌拉西林/三唑巴坦(99.53%)、头孢吡肟(94.37%)和头孢美唑(91.08%),敏感性最低的是阿莫西林(12.68%)、哌拉西林(48.83%)和环丙沙星(50.70%);除头孢他啶外,第三代头孢菌素对肺炎克雷伯氏菌和大肠埃希氏菌的耐药率均在30%以上;产ESBLs菌检出率为33.33%(142/426);除亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/三唑巴坦和头孢美唑外,产ESBLs菌对其它10种抗生素的耐药率均显著高于非产ESBLs菌。结论亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/三唑巴坦、头孢吡肟和头孢美唑的敏感性最高,产ESBLs是肺炎克雷伯氏菌和大肠埃希氏菌产生耐药的主要机制之一,临床实验室有必要常规检测肺炎克雷伯氏菌和大肠埃希氏菌是否产ESBLs。 展开更多

关键词 肺炎克雷伯氏菌 大肠埃希氏菌 超广谱Β-内酰胺酶 耐药性 福州市 抗生素 药敏监测

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年龄对人骨髓间充质干细胞分离培养的影响 被引量：8

4

作者 陈津 马予洁 +3 位作者 黄梁浒 王庆华 付云烽 谭建明 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2010年第20期3694-3697,共4页

目的:探讨年龄对骨髓间充质干细胞分离培养的影响以及在临床治疗中的意义。方法:通过分析183例人骨髓间充质干细胞分离培养情况,对比不同年龄段骨髓单个核细胞数、原代间充质干细胞数量、细胞增殖速度、细胞形态等方面的差异。结果:不... 目的:探讨年龄对骨髓间充质干细胞分离培养的影响以及在临床治疗中的意义。方法:通过分析183例人骨髓间充质干细胞分离培养情况,对比不同年龄段骨髓单个核细胞数、原代间充质干细胞数量、细胞增殖速度、细胞形态等方面的差异。结果:不同年龄段骨髓有核细胞、间充质干细胞免疫表型没有明显差异,单个核细胞数随年龄增长逐渐减少,但没有统计学差异。不同年龄段收获原代间充质干细胞数量、细胞增殖速度有明显差异(P<0.01)。年轻组、中年组收获原代MSC细胞明显多于年老组,增殖能力明显强于年老组。结论:随着年龄的增长,骨髓中间充质干细胞的数量减少,增殖能力衰退,在干细胞临床治疗中,不适宜从老年患者中获取骨髓来源的间充质干细胞。 展开更多

关键词 间充质干细胞 年龄 细胞培养

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一起死亡事故中难辨尸体的个体基因识别 被引量：3

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作者 兰风华 郑德柱 +8 位作者 黄梁浒 柯龙凤 涂向东 程烽 王志红 王水良 张朵 庄岳鹏 董荔红 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期994-996,共3页

目的对某地一起死亡事故中难辨认尸体进行个体基因识别。方法从遇难者尸体取深部肌肉和软骨组织少许。对部分组织进行常规病理检查。从尸体组织提取基因组DNA,采用荧光多重PCR技术,扩增尸体基因组DNA的16个短串联重复序列(STR)基因座。... 目的对某地一起死亡事故中难辨认尸体进行个体基因识别。方法从遇难者尸体取深部肌肉和软骨组织少许。对部分组织进行常规病理检查。从尸体组织提取基因组DNA,采用荧光多重PCR技术,扩增尸体基因组DNA的16个短串联重复序列(STR)基因座。将遇难者STR基因型与父母的STR基因型进行比对,确定遇难者的家庭归属。结果常规病理检查示部分肌肉组织结构完全破坏,但软骨组织结构尚完整。肌肉组织基因组DNA的凝胶电泳呈3种类型:基本无降解、部分降解、完全降解。只有部分肌肉组织DNA可用于确定STR基因型,所有软骨的DNA样本均可用于STR-PCR。结论以STR基因型分析为基础的亲子鉴定技术是确定事故遇难者身份的有效方法。对腐烂尸体的STR分析而言,尸体软骨组织是首选。 展开更多

关键词 事故 DNA指纹法 DNA 卫星 聚合酶链反应

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DHPLC在X-连锁肾上腺脑白质营养不良分子诊断中的应用(附12例报告) 被引量：2

6

作者 柯龙凤 王志红 +4 位作者 黄梁浒 严爱贞 杨渤生 朱忠勇 兰风华 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期299-301,共3页

目的探讨DHPLC在X-连锁肾上腺脑白质营养不良(X-ALD)分子诊断中的应用。方法提取12个X-ALD家系及成员的外周血基因组DNA,分15个片段扩增ABCD1基因的10个外显子,应用DHPLC技术对其进行突变筛查,并对出现异常洗脱峰的PCR产物进行DNA序列测... 目的探讨DHPLC在X-连锁肾上腺脑白质营养不良(X-ALD)分子诊断中的应用。方法提取12个X-ALD家系及成员的外周血基因组DNA,分15个片段扩增ABCD1基因的10个外显子,应用DHPLC技术对其进行突变筛查,并对出现异常洗脱峰的PCR产物进行DNA序列测定,证实突变位点的存在。结果12个X-ALD家系存在12种不同的ABCD1基因突变,包括8个错义突变、2个移码突变和2个无义突变,即P534R、G343V、R259W、A141T、R401Q、K276E、Y174C、A314P、fs E471、fs A247、S108X和Q177X。结论DHPLC筛查结合DNA序列测定能快速有效检测出ABCD1基因突变。不同的X-ALD家系有不同的ABCD1基因突变位点,突变类型和表型之间无特殊相关关系。 展开更多

关键词 肾上腺脑白质营养不良 DHPLC ABCD1基因 分子诊断技术

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中国人遗传性高铁血红蛋白血症患者中一个新的突变基因型的鉴定 被引量：2

7

作者 郑德柱 兰风华 +3 位作者 黄梁浒 谢飞 吴玉水 朱忠勇 《医学研究生学报》 CAS 2007年第8期830-832,共3页

目的:报道一例遗传性高铁血红蛋白血症患者还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸-细胞色素b5还原酶(b5R)基因突变情况。方法:采用逆转录-聚合酶链反应产物直接测序法,分析遗传性高铁血红蛋白血症患者b5R基因的cDNA全部编码序列;PCR结合限制性内切... 目的:报道一例遗传性高铁血红蛋白血症患者还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸-细胞色素b5还原酶(b5R)基因突变情况。方法:采用逆转录-聚合酶链反应产物直接测序法,分析遗传性高铁血红蛋白血症患者b5R基因的cDNA全部编码序列;PCR结合限制性内切酶(PvuⅠ和AfaⅠ)酶切,分析患者和她的家庭成员b5R基因组DNA扩增片段。结果:两个b5R等位基因中,一个存在M176T(ATG→ACG)突变,另一个存在C203Y(TGC→TAC)突变,其中M176T(ATG→ACG)为新发现的b5R基因突变。结论:本研究鉴定的M176T/C203Y复合杂合子突变是该遗传性高铁血红蛋白血症患者的致病基础。 展开更多

关键词 高铁血红蛋白血症 细胞色素b5还原酶 突变 杂合子

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头孢吡肟对肺炎克雷伯氏菌和大肠埃希氏菌的体外敏感性 被引量：2

8

作者 林庆安 赖国祥 黄梁浒 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第12期738-740,共3页

目的　评价第四代头孢菌素头孢吡肟对 4 2 6株肺炎克雷伯氏菌和大肠埃希氏菌的体外敏感性。方法　收集 2 0 0 1年 3～ 10月福州地区 4家医院分离的肺炎克雷伯氏菌和大肠埃希氏菌 4 2 6株 ,用 Kirby-Bauer琼脂扩散法作药敏试验 :用表型... 目的　评价第四代头孢菌素头孢吡肟对 4 2 6株肺炎克雷伯氏菌和大肠埃希氏菌的体外敏感性。方法　收集 2 0 0 1年 3～ 10月福州地区 4家医院分离的肺炎克雷伯氏菌和大肠埃希氏菌 4 2 6株 ,用 Kirby-Bauer琼脂扩散法作药敏试验 :用表型确认试验检测 ESBL s。结果　 4 2 6株肺炎克雷伯氏菌和大肠埃希氏菌中 ,头孢吡肟的敏感性为 94 .37% ,仅次于亚胺培南 (10 0 % )、头孢哌酮 /舒巴坦 (10 0 % )和哌拉西林 /三唑巴坦(99.5 3% ) ,明显高于青霉素类抗生素哌拉西林 (48.83% )和第二代头孢菌素头孢呋辛 (6 0 .0 9% ) ,也高于第三代头孢菌素头孢曲松 (6 2 .91% )、头孢噻肟 (6 4 .79% )、头孢哌酮 (6 5 .73% )和头孢他啶 (88.2 6 % )。经表型确认试验证实 14 2株 (33.33% )为产超广谱 β-内酰胺酶 (ESBL s)菌 ;头孢吡肟对产 ESBL s菌和非产 ESBL s菌体外敏感性分别为 84 .5 1%、99.30 %。结论　头孢吡肟对肺炎克雷伯氏菌和大肠埃希氏菌的体外抗菌活性高于第三代头孢菌素 ,低于亚胺培南、头孢哌酮 /舒巴坦和哌拉西林 /三唑巴坦 ,头孢吡肟可考虑作为医院内感染的经验性一线用药。 展开更多

关键词 头孢吡肟 肺炎克雷伯氏菌 大肠埃希氏菌 体外敏感性

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X-连锁肾上腺脑白质营养不良分子诊断中排除假基因干扰的一个新方法 被引量：1

9

作者 柯龙凤 黄梁浒 +4 位作者 王志红 谢海花 杨渤生 朱忠勇 兰风华 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期217-219,共3页

目的:探讨X-连锁肾上腺脑白质营养不良分子诊断中排除假基因干扰的新方法。方法:应用长链RT-PCR技术扩增3个X-连锁肾上腺脑白质营养不良患者的ABCD1基因编码区全长,再分4个片段进行二次PCR,并对PCR产物直接测序;应用巢式PCR对ABCD1基因... 目的:探讨X-连锁肾上腺脑白质营养不良分子诊断中排除假基因干扰的新方法。方法:应用长链RT-PCR技术扩增3个X-连锁肾上腺脑白质营养不良患者的ABCD1基因编码区全长,再分4个片段进行二次PCR,并对PCR产物直接测序;应用巢式PCR对ABCD1基因相应区域进行扩增,其中第一轮PCR产物覆盖ABCD1基因从外显子6至3′非编码区的一个大片段,并对PCR产物进行测序,分析患者的基因组DNA,进一步确证其ABCD1基因突变。结果:在3个X-ALD患者的ABCD1基因上,存在3个不同的碱基改变(2235C>T,2065C>T和2190A>T),分别造成2个错义突变(R617C和P560L)和1个无义突变(K602X)。结论:应用巢式PCR能快速、有效地排除X-ALD分子诊断中ABCD1假基因的干扰。 展开更多

关键词 X-连锁肾上腺脑白质营养不良 ABCD1基因 基因突变 假基因 分子诊断

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儿童进行性脊肌萎缩症的分子诊断(附10例报告)

10

作者 曾健 柯龙凤 +5 位作者 涂向东 黄梁浒 李惠忠 郑德柱 杨渤生 兰风华 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期729-731,共3页

目的对10例儿童进行性脊肌萎缩症(SMA)患者进行分子诊断。方法提取10例SMA患者和其19例家系成员(患者的父母)以及20例健康正常人对照的基因组DNA。常规PCR扩增SMN基因第7外显子(E7),PCR产物经DraI酶切后,行琼脂糖凝胶电泳。同时行特异性... 目的对10例儿童进行性脊肌萎缩症(SMA)患者进行分子诊断。方法提取10例SMA患者和其19例家系成员(患者的父母)以及20例健康正常人对照的基因组DNA。常规PCR扩增SMN基因第7外显子(E7),PCR产物经DraI酶切后,行琼脂糖凝胶电泳。同时行特异性PCR扩增SMN1和SMN2的E7。结果常规PCR中,所有10例SMA患者的SMN1PCR产物(189bp)全部被DraI切割,所有39例对照组成员(包括19例家系成员和20例健康正常人对照)的SMN1PCR产物仅有部分可被DraI切割。在位点特异性PCR中,所有10例SMA患者只有SMN2的E7扩增,所有39例对照组成员既有SMN1、也有SMN2的E7扩增产物。结论所有10例SMA患者可见SMN1纯合性缺失。所有39例对照组成员未见SMN1纯合性缺失。本研究采用PCR-RFLP和位点特异性PCR相结合,相互佐证,形成一套特有的分子诊断方法,确保了诊断的准确性。 展开更多

关键词 肌萎缩 脊髓性 运动神经元 基因 分子诊断技术

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对老年患者耐甲氧西林葡萄球菌检测及感染因素分析

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作者 梅珍 王德春 +1 位作者 黄梁浒 祝梅华 《解放军护理杂志》 2003年第12期13-14,共2页

目的　对老年患者感染耐甲氧西林葡萄球菌 (MRS)的状况、原因及耐药性进行分析探讨 ,为今后对MRS的防治工作提供依据。方法　用ATB细菌鉴定仪和系统检测盒对近年本院临床老年患者各种标本进行检测分析。结果　老年组MRS的检出率为 80 .7... 目的　对老年患者感染耐甲氧西林葡萄球菌 (MRS)的状况、原因及耐药性进行分析探讨 ,为今后对MRS的防治工作提供依据。方法　用ATB细菌鉴定仪和系统检测盒对近年本院临床老年患者各种标本进行检测分析。结果　老年组MRS的检出率为 80 .7% ,明显高于对照组 ,较多MRS菌株对多种抗生素产生耐药性。结论　老年患者MRS的感染率及耐药率高 。 展开更多

关键词 老年 甲氧西林葡萄球菌 耐药性 医院感染 抗生素

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肾脏缺血再灌注损伤的分子机制 被引量：8

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作者 任冰霜 雷艳 黄梁浒 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第10期1710-1712,共3页

肾脏维持正常的重吸收功能依赖于充足的血供,肾脏缺血、肾毒性药物等均可引起缺血性肾损伤。肾脏缺血后,即刻出现细胞代谢和功能变化,并随着时间的推移呈进行性加重。缺血早期的损伤是可逆的,再灌注后机体会自行修复损伤。

关键词 肾脏结构 缺血再灌注损伤 肾损伤 腺嘌呤核苷酸 血管内皮细胞 细胞代谢 近端小管 肾毒性药物 缺血早期 再灌注

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肠杆菌科136株细菌对4种β内酰胺酶抑制剂复方制剂的敏感性 被引量：1

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作者 朱映 黄闻军 +1 位作者 黄梁浒 马洪玉 《中国抗感染化疗杂志》 2002年第2期105-107,共3页

目的 :检测肠杆菌科细菌对 4种加酶抑制剂抗生素的敏感性 ,并与青霉素类、第三代头孢菌素类、头霉素类、单环 β内酰胺类、碳青霉烯类、氨基糖苷类和喹诺酮类药物作比较 ;同时检测肠杆菌科细菌产超广谱 β内酰胺酶 (ESBLs)的情况。 方... 目的 :检测肠杆菌科细菌对 4种加酶抑制剂抗生素的敏感性 ,并与青霉素类、第三代头孢菌素类、头霉素类、单环 β内酰胺类、碳青霉烯类、氨基糖苷类和喹诺酮类药物作比较 ;同时检测肠杆菌科细菌产超广谱 β内酰胺酶 (ESBLs)的情况。 方法 :采用K B琼脂扩散法对 136株肠杆菌科临床分离菌株作药敏试验 ,同时用美国临床实验室标准委员会 (NCCLS)所推荐的ESBLs确证试验对其进行ESBLs检测。结果∶4种 β内酰胺类抗生素加入酶抑制剂后对肠杆菌科细菌的抗菌作用明显提高 ,肠杆菌科细菌对头孢哌酮 舒巴坦的敏感率最高 ,对其余 3种复合抗生素敏感率高低不一 ;17种抗菌药中对肠杆菌科细菌具有较好抗菌作用的 5种为亚胺培南、头孢哌酮 舒巴坦、阿米卡星、头孢西丁、哌拉西林 三唑巴坦 ;大肠埃希菌产ESBLs率为34 .3%,肺炎克雷伯菌产ESBLs率为 35 .1%。结论∶4种加 β内酰胺酶抑制剂的抗生素中 ,以头孢哌酮 舒巴坦对肠杆菌科细菌的抗菌作用最强 ,肠杆菌科细菌对其的敏感性高于头霉素类、氨基糖苷类、喹诺酮类等药物 ,但低于亚胺培南。 展开更多

关键词 Β内酰胺酶抑制剂 肠杆菌科细菌 药物敏感 超广谱Β内酰胺酶 ESBLS

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间充质干细胞及其外泌体促血管再生的分子机制研究进展 被引量：9

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作者 陈俊秋 黄梁浒 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期1858-1862,共5页

间充质干细胞具有多向分化潜能,并能招募血管内皮细胞,促进其增殖、迁移和血管形成,改善血流灌注和氧供。间充质干细胞分泌的外泌体含有其来源细胞特异性蛋白质和核酸,能够部分模拟间充质干细胞功能,具有成血管作用,且能透过血脑屏障和... 间充质干细胞具有多向分化潜能,并能招募血管内皮细胞,促进其增殖、迁移和血管形成,改善血流灌注和氧供。间充质干细胞分泌的外泌体含有其来源细胞特异性蛋白质和核酸,能够部分模拟间充质干细胞功能,具有成血管作用,且能透过血脑屏障和肠屏障等,可替代间充质干细胞治疗缺血性疾病的再血管化治疗。本文将对间充质干细胞及其外泌体的生物学特征、缺血性疾病中的促血管再生作用机制,以及低氧条件下低氧诱导因子-1α对间充质干细胞及其外泌体在缺血性疾病中的促血管再生作用机制的影响最新研究进展作一综述。 展开更多

关键词 间充质干细胞 间充质干细胞外泌体 促血管再生作用 低氧诱导因子-1Α

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