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β-淀粉样蛋白对培养神经细胞的毒性作用及神经节苷脂的保护作用 被引量:7
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作者 马晓峰 顾锦法 梅镇彤 《神经解剖学杂志》 CSCD 北大核心 1998年第4期303-308,共6页
向培养液中加入15mmol/L的β-AP1-40,48h后,发现原代培养的海马细胞内Ca2+的浓度明显增高,对照组为23.9±3.6(n=51)而β-AP组为36.5±15.8(n=30),两组比较P<0.001,有非常显著性的差别。对照组的乳酸脱氢酶没有... 向培养液中加入15mmol/L的β-AP1-40,48h后,发现原代培养的海马细胞内Ca2+的浓度明显增高,对照组为23.9±3.6(n=51)而β-AP组为36.5±15.8(n=30),两组比较P<0.001,有非常显著性的差别。对照组的乳酸脱氢酶没有明显变化,而β-AP组在加β-AP1-4048h后乳酸脱氢酶明显增加,从52iu/L增加到105iu/L,实增加了101%。实验结果表明,β-AP1-40对培养的神经细胞有明显的毒性作用,但没有发现形态学的变化和对细胞的特异性。如在培养液中加β-AP1-40的同时再加25mg/ml的神经节苷脂(GAs)可明显减弱β-AP1-40引发的胞内Ca2+浓度和培养液中LDH浓度的升高。β-AP+GAs组胞内Ca2+浓度为27.7±5.58,与β-AP组比较,有显著性差异(P<0.01)。β-AP组海马细胞培养液中乳酸脱氢酶的浓度增高为101%,而β-AP-GAs组培养液中乳酸脱氢酶的浓度增高仅为67%。在NG108-15细胞上也获得了相同的结果。单唾液酸神经节苷脂虽有与GAs类似的作用,但较弱。这些实验结果指出,神经节苷脂和单唾液酸神经节苷脂均能拮抗β-AP1-40的毒性作用,从而对细胞可起到保护作用。 展开更多
关键词 β粉样蛋白 神经细胞 神经节苷脂 毒性作用
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三种连接子多肽对抗癌融合蛋白翻译后剪切效果比较研究
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作者 李红艳 周志明 +5 位作者 潘强 杨冬梅 顾锦法 沈佳妮 王世兵 章康健 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2014年第6期558-566,共9页
IL-24和Smac为靶向癌症的多基因治疗研究中重要的候选基因.在构建IL-24和Smac双基因表达载体过程中,选择一个稳定高效的连接子非常关键.利用三个不同的连接子多肽序列IETD、EEED、F2A构建三个真核表达质粒pcDNA3.1(+)-IL-24-IETD-Smac、... IL-24和Smac为靶向癌症的多基因治疗研究中重要的候选基因.在构建IL-24和Smac双基因表达载体过程中,选择一个稳定高效的连接子非常关键.利用三个不同的连接子多肽序列IETD、EEED、F2A构建三个真核表达质粒pcDNA3.1(+)-IL-24-IETD-Smac、pcDNA3.1(+)-IL-24-EEED-Smac、pcDNA3.1(+)-IL-24-F2A-Smac,并联合5-氟尿嘧啶(5-FU)处理研究各连接子介导的融合蛋白剪切效果.上述实验结果表明,在三种IL-24-linker-Smac双基因表达载体中,F2A连接子剪切效果最佳且与caspase活性成正相关.IETD、EEED连接子介导的融合蛋白都有一定的剪切,但IETD/EEED多肽影响了上游IL-24蛋白的半衰期,加速了剪切后IL-24蛋白的泛素化降解.本研究为构建靶向癌症应用的双基因或多基因载体提供了设计参考. 展开更多
关键词 连接子多肽 IETD EEED F2A caspase活性
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