转录因子GmWRI1b促进大豆油脂合成的功能研究

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作者 杨红丽 向旭敏 +5 位作者 曹东 陈李淼 肖春梅 李丽 郭葳 陈海峰 《中国油料作物学报》 北大核心 2025年第4期912-919,共8页

为深入了解大豆转录因子GmWRI1b在提高产量和含油量方面的机制和功能,利用创制的GmWRI1b过表达及RNAi干扰转基因大豆材料,进一步分析该基因对大豆种子油脂含量及油脂成分组成的调控作用。结果显示,GmWRI1b过表达株系种子含油量提高了4.6... 为深入了解大豆转录因子GmWRI1b在提高产量和含油量方面的机制和功能,利用创制的GmWRI1b过表达及RNAi干扰转基因大豆材料,进一步分析该基因对大豆种子油脂含量及油脂成分组成的调控作用。结果显示,GmWRI1b过表达株系种子含油量提高了4.66%~9.80%,而干涉株系种子含油量则下降7.98%。气相色谱检测脂肪酸的成分,发现GmWRI1b的表达主要促进棕榈酸(C16:0)及亚油酸(C18:2)的积累。荧光定量结果显示GmWRI1b基因过表达植株的GmPKP1、GmCAC、GmACP、GmLPD等糖酵解途径和脂肪酸合成途径相关基因上调表达。通过双荧光素酶报告实验及凝胶阻滞EMSA实验,明确了转录因子GmWRI1b可直接结合GmCAC2的启动子上调其表达。 展开更多

关键词 大豆 GmWRI1b 种子含油量 脂肪酸成分

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不同染色方法在大豆锈菌侵染过程中的显微观察效果

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作者 屈艳慧 杨红丽 +13 位作者 郝青南 陈水莲 邓克林 詹高淼 曹东 陈李淼 郭葳 袁松丽 张婵娟 黄毅 杨中路 陈海峰 单志慧 周新安 《中国油料作物学报》 北大核心 2025年第1期186-191,共6页

由豆薯层锈菌引起的大豆锈病是热带、亚热带地区大豆的主要病害,可造成大豆严重减产。了解大豆锈菌的侵染特征有利于更好地开展抗锈育种研究。本研究利用番红固绿、DAPI(4′,6-二脒基-2-苯基吲哚)、荧光增白剂和麦胚凝集素WGA488(wheat ... 由豆薯层锈菌引起的大豆锈病是热带、亚热带地区大豆的主要病害,可造成大豆严重减产。了解大豆锈菌的侵染特征有利于更好地开展抗锈育种研究。本研究利用番红固绿、DAPI(4′,6-二脒基-2-苯基吲哚)、荧光增白剂和麦胚凝集素WGA488(wheat germ agglutinin,Alexa Fluor^(TM)488 conjugate)四种染料对接种锈菌叶片进行染色观察,比较4种染色方法的效果。结果显示:采用番红固绿染色可清晰地观察到叶肉组织排列特征、孢子堆和新生夏孢子等;DAPI染色适于观察细胞核的状态和数量;荧光增白剂可将菌丝和植物细胞明确区分开,利于观察孢子入侵以及菌丝在叶肉组织内的分布特征;WGA488染料只能使真菌着色,适合观察菌丝在叶肉组织中扩展的整体性和连续性。根据研究目的及需要选取适合的染色方法,有助于精准地掌握大豆锈菌的显微结构特征及其侵染过程。 展开更多

关键词 大豆锈菌 显微观察 侵染过程 番红固绿 荧光增白剂 DAPI WGA488

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一种高通量的CRISPR/Cas9材料靶点检测方法在大豆中的应用研究

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作者 彭丽华 欧阳文琦 +9 位作者 曹东 郭葳 杨红丽 郝青南 陈水莲 张婵娟 袁松丽 陈海峰 沙爱华 陈李淼 《中国油料作物学报》 北大核心 2025年第4期920-928,共9页

CRISPR/Cas9基因编辑技术已经被广泛地应用于多种植物中,常规基因编辑靶点检测方法实验繁琐且耗时,成本较高,开发更简便和高通量的方法可以极大提高靶点检测的效率。本实验以南方大豆品种天隆一号为材料,开发了一种叶片DNA的快速提取方... CRISPR/Cas9基因编辑技术已经被广泛地应用于多种植物中,常规基因编辑靶点检测方法实验繁琐且耗时,成本较高,开发更简便和高通量的方法可以极大提高靶点检测的效率。本实验以南方大豆品种天隆一号为材料,开发了一种叶片DNA的快速提取方法——水磨法,缩短DNA提取和检测时间,并且提取的DNA可以保存20 d。此外,本文还进一步研究了将提取液替换为TE buffer后,在煮沸条件下,DNA的稳定性分析。结果表明:煮沸1 min、3 min、5 min和10 min后,4℃或-20℃放置的DNA样品均可以保存45 d。然后,将天隆一号为遗传背景的待测材料中的靶点序列PCR产物进行毛细管电泳,与对照材料相比,观察是否存在差异碱基的特异性条带,进而判断待测材料是否发生基因编辑及可能存在的编辑类型种类。本文将植物叶片DNA快速提取法和毛细管电泳技术相结合,更加快速、高通量地筛选大豆材料的突变情况及突变种类,为大豆重要性状基因功能分析提供技术支持。 展开更多

关键词 大豆 CRISPR/Cas9 DNA快速提取法 靶点检测 高通量

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基于累积损伤的三维复合材料层合板疲劳寿命研究 被引量：1

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作者 郭葳 万小朋 +1 位作者 赵美英 刘凤楠 《机械强度》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期743-748,共6页

基于渐进疲劳损伤模型,建立复合材料层合板的三维疲劳寿命预测模型,模型以单向板单轴疲劳试验数据为基础,结合正则化剩余刚度模型、正则化剩余强度模型和等寿命曲线,通过层合板三维应力分析、失效分析和材料性能退化的循环迭代进行疲劳... 基于渐进疲劳损伤模型,建立复合材料层合板的三维疲劳寿命预测模型,模型以单向板单轴疲劳试验数据为基础,结合正则化剩余刚度模型、正则化剩余强度模型和等寿命曲线,通过层合板三维应力分析、失效分析和材料性能退化的循环迭代进行疲劳寿命计算,在Ansys软件平台上利用APDL语言编写相应的计算程序,估算不同铺层参数层合板在单轴和多轴不同循环应力水平作用下的疲劳寿命。寿命预测结果与试验结果吻合良好,与已有文献的二维模型计算结果相比,计算误差更小。 展开更多

关键词 复合材料 层合板 累积损伤 疲劳寿命 程序

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鲍鱼壳水溶性基质抗氧化活性研究 被引量：8

5

作者 梁红宝 郭葳 +4 位作者 董声雄 伍久林 彭臻菲 刘志彬 张其清 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第9期113-116,共4页

考察鲍鱼壳水溶性基质(WSMA)抗氧化活性。利用DEAE-Sephadex A-25离子交换层析法(IEC)对WSMA进行纯化。以珍珠水溶性基质(WSMP)及VC为对照,通过对二苯代苦味肼基自由基(DPPH·)、羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O2·)的... 考察鲍鱼壳水溶性基质(WSMA)抗氧化活性。利用DEAE-Sephadex A-25离子交换层析法(IEC)对WSMA进行纯化。以珍珠水溶性基质(WSMP)及VC为对照,通过对二苯代苦味肼基自由基(DPPH·)、羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O2·)的清除能力和Fe3+还原能力的研究考察其抗氧化作用。结果表明,WSMA与WSMP具有相似的Fe3+还原能力和O2·清除能力,而对DPPH·和·OH无清除作用。通过IEC纯化得到的AⅡ组分为主要活性成分,当质量浓度为1.0mg/mL时,对O2·清除率达80%,与0.1mg/mL的VC相当。 展开更多

关键词 鲍鱼壳 水溶性基质 抗氧化性 离子交换层析

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民机风挡结构抗鸟撞仿真分析与设计 被引量：5

6

作者 王文智 万小朋 郭葳 《西北工业大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第4期481-485,共5页

针对某民机风挡结构鸟撞试验,采用LS-DYNA有限元软件再现了风挡结构的鸟撞动响应结果,计算所得结构破坏区域与破坏形式及试验结果吻合。分析认为导致龙骨破坏的原因是夹持玻璃的龙骨整体刚度不够,而局部刚度又相对过强。为此参考波音飞... 针对某民机风挡结构鸟撞试验,采用LS-DYNA有限元软件再现了风挡结构的鸟撞动响应结果,计算所得结构破坏区域与破坏形式及试验结果吻合。分析认为导致龙骨破坏的原因是夹持玻璃的龙骨整体刚度不够,而局部刚度又相对过强。为此参考波音飞机风挡结构构型,提出将原风挡夹持结构改为螺栓连接悬挂结构,并对新构型的风挡结构进行了动响应分析。计算结果表明:风挡玻璃采用螺栓连接悬挂于龙骨结构上的安装构型能有效提高风挡结构的抗鸟撞特性。 展开更多

关键词 飞机 有限元 鸟撞 风挡结构 民机

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梅花在中日古典园林设计中的应用

7

作者 郭葳 《现代园艺》 2012年第17期57-58,共2页

本文分析了梅花在中日古典园林中应用的相似性和差异性。其相似性主要表现在梅文化、植物配植和种植方式等方面,而差异性主要表现在两国梅花栽培应用、配植特点、植梅面积和数量、咏梅古诗画应用、栽培品种和观赏特性等方面。

关键词 梅花 古典园林 梅文化 应用

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17β-雌二醇通过microRNA-29b调节NK细胞干扰素γ的分泌 被引量：2

8

作者 李鹏飞 郭葳 +3 位作者 赵俊丽 王亚平 胡娅莉 侯亚义 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期418-423,共6页

目的:研究17β-雌二醇(E2)对人自然杀伤细胞株NK92中干扰素γ(IFN-γ)分泌的影响及其可能的机制。方法:用E2和poly I:C处理NK92细胞,分别在4、8、12和24小时后用实时定量PCR、酶联免疫吸附法和流式细胞术测定NK92细胞中IFN-γ的表达情况... 目的:研究17β-雌二醇(E2)对人自然杀伤细胞株NK92中干扰素γ(IFN-γ)分泌的影响及其可能的机制。方法:用E2和poly I:C处理NK92细胞,分别在4、8、12和24小时后用实时定量PCR、酶联免疫吸附法和流式细胞术测定NK92细胞中IFN-γ的表达情况,用实时定量PCR检测microRNA-29b(miR-29b)的变化。进一步,构建含有IFN-γ3'UTR的pEGFP-C1质粒,并转染pre-29b和pEGFP-IFN-γ3'UTR质粒至HEK293A细胞中,用流式细胞术检测绿色荧光蛋白(GFP)的变化。结果:E2抑制NK92细胞的IFN-γ分泌和上调miR-29b的表达;miR-29b能够直接靶向调节IFN-γ3'UTR mRNA。结论:E2可能通过调节NK92的miR-29b而影响IFN-γ的分泌水平,进而影响其免疫功能。 展开更多

关键词 17Β-雌二醇 NK92 miR-29b IFN-Γ

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一种机翼前缘抗鸟撞结构设计与分析 被引量：4

9

作者 王文智 万小朋 郭葳 《机械设计与制造》 北大核心 2009年第12期33-35,共3页

针对某型民机机翼前缘抗鸟撞设计,提出一种内嵌铝合金斜支板的抗鸟撞结构。采用ANSYS/LS—DYNA有限元分析软件,在不同鸟撞速度下,分析了斜支板角度、蒙皮与支板的连接方式对机翼前缘抗鸟撞性能的影响。分析结果表明:在不显著增加结构重... 针对某型民机机翼前缘抗鸟撞设计,提出一种内嵌铝合金斜支板的抗鸟撞结构。采用ANSYS/LS—DYNA有限元分析软件,在不同鸟撞速度下,分析了斜支板角度、蒙皮与支板的连接方式对机翼前缘抗鸟撞性能的影响。分析结果表明:在不显著增加结构重量的情况下,采用30°单斜板结构可有效提高机翼前缘抗鸟撞特性。 展开更多

关键词 鸟撞 斜支板结构 数值仿真 ANSYS/LS—DYNA

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Cyr61对外周血NK细胞的增殖和活性调节 被引量：1

10

作者 赵俊丽 李鹏飞 +3 位作者 郭葳 郝莎 胡雅莉 侯亚义 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期997-1002,共6页

目的:体外实验探讨Cyr61对外周血NK(pNK)细胞的增殖和活性的影响。方法:磁珠分选得到纯化的pNK细胞;流式细胞术检测pNK细胞的抑制性和活化性受体、细胞因子IFN-γ的生成和细胞毒性。结果:Cyr61促进外周血淋巴细胞中pNK细胞的增殖,降低C... 目的:体外实验探讨Cyr61对外周血NK(pNK)细胞的增殖和活性的影响。方法:磁珠分选得到纯化的pNK细胞;流式细胞术检测pNK细胞的抑制性和活化性受体、细胞因子IFN-γ的生成和细胞毒性。结果:Cyr61促进外周血淋巴细胞中pNK细胞的增殖,降低CD16的表达;降低淋巴细胞中pNK细胞的活化性受体NKG2D、NKp30和CD244的表达,提高抑制性受体KIR3DL1的表达;能够促进纯化pNK细胞的KIR2DL1表达,降低纯化pNK细胞的胞内IFN-γ生成和细胞毒性。结论:Cyr61对pNK细胞活化的抑制作用,支持了其他学者关于Cyr61在正常妊娠和子痫前期的发病方面可能发挥重要作用的研究结果。 展开更多

关键词 CYR61 自然杀伤细胞 细胞增殖 细胞活性

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复合材料层合板准静态压痕损伤分析 被引量：2

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作者 刘凤楠 赵美英 郭葳 《机械科学与技术》 CSCD 北大核心 2011年第5期804-806,812,共4页

基于累积损伤理论,在Ansys软件平台上采用APDL语言编制的程序对准静态压痕试验进行仿真分析,并根据准静态压痕试验所得到的载荷-位移曲线计算了相应试验状态下复合材料层合板的损伤情况。在模拟过程中,采用三维基体破坏,纤维断裂和分层... 基于累积损伤理论,在Ansys软件平台上采用APDL语言编制的程序对准静态压痕试验进行仿真分析,并根据准静态压痕试验所得到的载荷-位移曲线计算了相应试验状态下复合材料层合板的损伤情况。在模拟过程中,采用三维基体破坏,纤维断裂和分层失效判据,以判断层合板不同的失效模式,并根据失效模式对失效单元进行不同的刚度退化。损伤模拟结果与试验结果吻合较好。 展开更多

关键词 复合材料 层合板 累积损伤 准静态压痕 有限元

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野生大豆转录因子GsWRKY57基因的克隆与抗旱性功能分析 被引量：9

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作者 王岩岩 张永兴 +4 位作者 郭葳 代文君 周新安 矫永庆 沈欣杰 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期524-530,共7页

WRKY转录因子是近年来在植物中发现的一类重要转录因子,在植物抗逆相关过程中发挥重要作用。本研究通过对野生大豆转录组数据进行分析,从野生大豆中克隆得到GsWRKY57基因的CDS序列。该基因开放阅读框为903bp,编码300个氨基酸残基,分子量... WRKY转录因子是近年来在植物中发现的一类重要转录因子,在植物抗逆相关过程中发挥重要作用。本研究通过对野生大豆转录组数据进行分析,从野生大豆中克隆得到GsWRKY57基因的CDS序列。该基因开放阅读框为903bp,编码300个氨基酸残基,分子量为34.23kD,等电点为5.88。氨基酸序列分析显示该蛋白含有一个WRKY保守结构域,属于III类WRKY转录因子。系统发育树分析表明该蛋白与栽培大豆同源性最高、其次是赤豆、木豆。启动子作用元件分析预测显示该基因可能存在多种非生物胁迫作用元件。组织特异性表达分析表明该基因在大豆叶片中高丰度表达,然后依次是茎、花、荚、根。GsWRKY57基因表达受茉莉酸、水杨酸、脱落酸、干旱等植物逆境诱导。过表达GsWRKY57基因的转基因拟南芥植株相对于野生型耐旱能力增强。 展开更多

关键词 野生大豆 GsWRKY57 转录因子 过表达 干旱胁迫

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大豆MYB转录因子GmMYB010与其拟南芥同源基因的功能差异 被引量：5

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作者 陆捡花 李祥 +5 位作者 赵为 沈欣杰 郭葳 王笑一 周新安 矫永庆 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期281-293,共13页

MYB-related转录因子在植物生长发育和响应逆境胁迫过程中具有重要作用。本研究旨在分析大豆MYB转录因子GmMYB010与其在拟南芥中的同源基因AtMYB010的功能差异。序列分析表明,大豆的GmMYB010与拟南芥中AtMYB010都属于MYB-related转录因... MYB-related转录因子在植物生长发育和响应逆境胁迫过程中具有重要作用。本研究旨在分析大豆MYB转录因子GmMYB010与其在拟南芥中的同源基因AtMYB010的功能差异。序列分析表明,大豆的GmMYB010与拟南芥中AtMYB010都属于MYB-related转录因子家族中R-R-type类型;亚细胞定位结果表明两种蛋白均定位在核上;qRT-PCR检测结果表明,GmMYB010在大豆叶片中表达量最高,而AtMYB010在花中表达量最高;酵母检测发现,GmMYB010具有转录自激活活性,而AtMYB010不具有转录自激活活性。将GmMYB010与其拟南芥同源基因AtMYB010分别在野生型拟南芥中过量表达,表型观察发现GmMYB010过表达植株表型与野生型拟南芥一样,而AtMYB010过表达植株出现了矮小、多分枝等生长表型。对MAXs作用途径基因的检测发现,AtMYB010过量表达影响了独脚金内酯代谢途径,从而出现多分枝的表型。以上结果表明,GmMYB010和AtMYB010虽然是直系同源基因,但功能却发生了明显的分化。大豆GmMYB010在大豆中可能具有独特的功能,有待进一步研究。 展开更多

关键词 MYB-related GmMYB010 直系同源基因 模式植物 过表达

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野生大豆(Glycine soja)YD63和栽培大豆(G. max)ZD19茎秆解剖结构比较 被引量：2

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作者 要燕杰 油清波 +8 位作者 赵为 郭葳 沈欣杰 李祥 张永兴 周蓉 赵剑 周新安 矫永庆 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期199-208,共10页

以野生大豆YD63和栽培大豆ZD19为研究对象,通过组织化学方法观察茎秆解剖结构的差异,分析和阐述这些解剖结构与功能和环境适应性间的关系,旨在为大豆抗逆性研究提供解剖学依据。结果表明:1.野生大豆表皮毛和腺毛多于栽培大豆,且角质层... 以野生大豆YD63和栽培大豆ZD19为研究对象,通过组织化学方法观察茎秆解剖结构的差异,分析和阐述这些解剖结构与功能和环境适应性间的关系,旨在为大豆抗逆性研究提供解剖学依据。结果表明:1.野生大豆表皮毛和腺毛多于栽培大豆,且角质层厚度、表皮厚度和表皮比例均大于栽培大豆,表皮和外皮层细胞的木质化和木栓化程度也高于栽培大豆;2.野生大豆皮层、韧皮部、木薄壁组织和髓的比例均大于栽培大豆,茎秆机械强度降低,可塑性升高,抗逆性增强;3.栽培大豆木质部、木纤维和总纤维比例均大于野生大豆,并且表皮细胞壁、韧皮纤维壁、木纤维壁和导管壁厚度均大于野生大豆。栽培大豆组织木质化的比例大于野生大豆,茎秆的机械强度升高,可以更好地维持直立生长和形态构建;4.栽培大豆微管形成层的细胞层数和厚度均大于野生大豆。栽培大豆木质部的比例大于韧皮部的比例,而野生大豆两者比例基本相同;5.野生大豆韧皮部厚壁组织几乎是连续分布,仅在髓射线处中断,而栽培大豆是不连续的,呈片状分布,野生大豆韧皮部厚壁组织的比例大于栽培大豆;6.野生大豆导管壁强度(t/b)2和小导管比例大于栽培大豆,水分运输的安全性较高,但野生大豆木质部的连通性和水分运输的效率低于栽培大豆。 展开更多

关键词 野生大豆 栽培大豆 解剖结构 进化 抗性

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大豆骨干亲本中豆41主要农艺性状的配合力分析 被引量：1

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作者 杨配配 易志杰 +13 位作者 袁松丽 郝青南 陈水莲 杨中路 单志慧 陈李淼 张婵娟 曹东 郭葳 黄毅 杨红丽 陈海峰 王贤智 周新安 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期833-842,共10页

骨干亲本是新品种培育的重要种质材料,明确骨干亲本的配合力及遗传特点,可以为在育种中高效利用骨干亲本提供理论依据。本研究以骨干亲本中豆41和其他9个大豆材料为亲本,采用不完全双列杂交法组配30个杂交组合,分析杂种F1的10个产量和... 骨干亲本是新品种培育的重要种质材料,明确骨干亲本的配合力及遗传特点,可以为在育种中高效利用骨干亲本提供理论依据。本研究以骨干亲本中豆41和其他9个大豆材料为亲本,采用不完全双列杂交法组配30个杂交组合,分析杂种F1的10个产量和品质相关性状的配合力及遗传参数。配合力分析表明:中豆41具有较高的一般配合力(GCA),除蛋白质含量为负值外,其余9个性状的GCA均为正值,且均为10个亲本中最大值。中豆41组配的杂交组合大部分表现优异,具有较高的特殊配合力(SCA),在30个杂交组合中,中豆41×郑196、中豆41×新四粒黄和中豆41×中黄319在产量相关性状上均表现出较高的SCA。遗传分析表明,株高、主茎节数、有效分枝数、单株荚数、单株粒数、百粒重、单株产量、蛋白含量和脂肪含量主要受基因加性效应影响,底荚高度则受基因加性效应和非加性效应共同影响。本研究明确了大豆骨干亲本中豆41的配合力特点,为育种中高效利用中豆41提供了理论依据。 展开更多

关键词 骨干亲本 中豆41 农艺性状 配合力

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大豆抗咀嚼式害虫的遗传改良研究进展 被引量：1

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作者 张倩倩 陈李淼 +5 位作者 曹东 杨红丽 董雪 陈井生 郭葳 陈海峰 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1275-1283,共9页

大豆在生长过程中遭受多种咀嚼式害虫的严重侵害,如斜纹夜蛾、棉铃虫等。现有的防治方法存在农药污染环境、干扰生态平衡以及抗药性增强等问题。培育种植抗虫品种是解决虫害问题的关键。本文阐述了大豆对咀嚼式害虫抗性研究的现状和进展... 大豆在生长过程中遭受多种咀嚼式害虫的严重侵害,如斜纹夜蛾、棉铃虫等。现有的防治方法存在农药污染环境、干扰生态平衡以及抗药性增强等问题。培育种植抗虫品种是解决虫害问题的关键。本文阐述了大豆对咀嚼式害虫抗性研究的现状和进展,包括大豆害虫种类及大豆抗虫性研究、大豆抗咀嚼式害虫资源的研究与开发、大豆抗咀嚼式害虫QTL定位研究进展等方面。综合研究认为,关注野生大豆资源,寻找优异的大豆抗虫材料,发掘优良抗性基因,利用生物技术及大豆转育得到新资源,是提高大豆抗虫性、增加产量及品质、降低农业生产成本的经济环保且行之有效的途径。本文旨在为大豆抗虫育种提供理论依据和实践指导,为油料产业的可持续发展奠定基础。 展开更多

关键词 大豆 咀嚼式害虫 抗虫性 QTL 基因

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转基因科普系列——转基因技术提高大豆油脂品质 被引量：1

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作者 边妙 郭葳 +1 位作者 周新安 矫永庆 《大豆科技》 2018年第4期54-58,共5页

大豆是中国重要的油料作物，是食用油和植物蛋白的重要来源[1]，。中国是大豆的原产地，早在五千年前就已经开始种植大豆[2]。1938年，中国的大豆产量占世界大豆总产量的90％以上。

关键词 大豆产量 转基因技术 油脂品质 科普 油料作物 植物蛋白 中国 食用油

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大豆根瘤菌Y63菌株的分离与鉴定

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作者 孙帅 冷飘 +15 位作者 杨姝琦 周顺馨 张婵娟 黄毅 单志慧 杨中路 郝青南 陈水莲 曹东 陈李淼 郭葳 杨红丽 王贤智 周新安 袁松丽 陈海峰 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期920-929,共10页

在大豆生产中充分发挥共生固氮作用,在减少氮肥的施用、增加土壤微生物的活性、保证耕地及农业生态系统健康、促进绿色农业的可持续性发展等方面具有重要意义。本研究以高产、优质、多抗、广适的大豆品种中豆63为捕获宿主,对湖北省洪湖... 在大豆生产中充分发挥共生固氮作用,在减少氮肥的施用、增加土壤微生物的活性、保证耕地及农业生态系统健康、促进绿色农业的可持续性发展等方面具有重要意义。本研究以高产、优质、多抗、广适的大豆品种中豆63为捕获宿主,对湖北省洪湖市高产示范田中的中豆63根瘤菌进行分离与鉴定。采用平板划线分离、BTB反应试验等方法筛选出符合根瘤菌表观特征的菌株,并将获得的菌株进行16S rDNA序列扩增,构建系统发育树,鉴定从中豆63的单个根瘤中分离得到的2个大豆根瘤菌菌株,分别命名为Y63-1与Y63-2。通过抗生素抗性分析表明,Y63-1具有羧苄青霉素(Carbenicillin)、头孢霉素(Cefotaximesodium)、氨苄青霉素(Ampicillin)和利福平(Rifampin)4种抗性,Y63-2具有硫酸卡那霉素(Kanamycin)、羧苄青霉素(Carbenicillin)、氨苄青霉素(Ampicillin)和利福平(Rifampin)4种抗性。最后以慢生型根瘤菌113-2及快生型根瘤菌HH103作为对照,将获得的两个根瘤菌Y63-1与Y63-2按一定的比例通过盆栽回接中豆63,在接种后42天及51天分别对不同接种比例下中豆63植株地上部分鲜重、结瘤数及根瘤干重进行统计学分析,结果表明Y63-1∶Y63-2=2∶1接种中豆63时结瘤效应最佳。混合接种后根瘤中Y63-1与Y63-2的比例初步鉴定结果显示,Y63-1为主效根瘤菌。本研究丰富了我国的根瘤菌资源,研究结果为大豆根瘤菌混合接种技术在大豆生产中的推广应用提供了理论依据,也为生产中通过接种高效根瘤菌提升中豆63及其它品种产量潜力奠定了理论基础。 展开更多

关键词 大豆 中豆63 根瘤菌 分离与鉴定 根瘤共生

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利用激光光源的荧光成像系统高通量计数大豆孢囊线虫褐化孢囊

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作者 张凤 油清波 +6 位作者 李泽宇 陈井生 代文君 程怡慧 周新安 郭葳 矫永庆 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期420-425,共6页

高效准确的孢囊计数方法对大豆孢囊线虫研究具有重要意义。为改善普通的荧光成像系统激发光能量偏低,褐化孢囊被激发的荧光减弱,难以清晰成像且计数效果欠佳的问题,本研究改用激光为激发光源,在470nm的激发波长和535nm的发射波长组合或5... 高效准确的孢囊计数方法对大豆孢囊线虫研究具有重要意义。为改善普通的荧光成像系统激发光能量偏低,褐化孢囊被激发的荧光减弱,难以清晰成像且计数效果欠佳的问题,本研究改用激光为激发光源,在470nm的激发波长和535nm的发射波长组合或532nm激发波长和620nm发射波长组合条件下,可得到褐化孢囊对比度高且清晰的图片,配合使用自动计数软件,可以准确高效地进行孢囊计数。 展开更多

关键词 大豆 大豆孢囊线虫 荧光成像系统 激光

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银鲫ZP3的表达特征和卵壳ZP3蛋白的分离

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作者 陈波 郭葳 桂建芳 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期233-238,共6页

克隆得到银鲫(Carassius auratus gibelio)ZP3基因全长cDNA,在体外表达出银鲫的ZP3融合蛋白,并制备出多抗血清;通过免疫印迹和RT-PCR分析,研究了银鲫ZP3在卵子发生过程中的表达特征和在早期发育胚胎中的状态变化。研究结果表明,银鲫ZP3... 克隆得到银鲫(Carassius auratus gibelio)ZP3基因全长cDNA,在体外表达出银鲫的ZP3融合蛋白,并制备出多抗血清;通过免疫印迹和RT-PCR分析,研究了银鲫ZP3在卵子发生过程中的表达特征和在早期发育胚胎中的状态变化。研究结果表明,银鲫ZP3的转录发生在卵黄发生以前,而ZP3蛋白的翻译起始于卵黄形成阶段,且随着卵母细胞进一步成熟,其含量不断增加。ZP3蛋白的存在状态在受精后和早期胚胎发育过程中发生了明显变化。在受精后5—30min期间,抽提液中原始的ZP3蛋白带迅速消失,取而代之的是分子量大约为90KD以及更高分子量的蛋白带;而在受精后80min和8—16胞期的胚胎抽提液中,二聚体和多聚体复合体蛋白带也相继消失。这种状态变化意味着ZP3蛋白在卵子受精后有可能与自身或其他蛋白共价结合转变成了二聚体和多聚体。接着,用获得的ZP3抗体作为检测指标,通过卵壳蛋白的凝胶分离,从卵壳中分离纯化出银鲫ZP3蛋白。 展开更多

关键词 ZP3蛋白 银鲫 分离 纯化 卵壳 基因克隆 基因表达 卵母细胞透明带

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