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蓖麻毒素A链蛋白的表达、活性及其对人肺腺癌细胞SPC的毒性作用 被引量:4
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作者 乔生军 莫忠根 林琳 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2000年第1期27-30,共4页
目的 :研究构建重组单链免疫毒素 ,对人体肿瘤进行导向治疗。方法 :采用PCR方法从克隆化载体中拉出蓖麻毒素A链 (ricinA)基因 ,装入经过改建的pTSA 18F表达载体 ,进行目的基因DNA序列分析后导入E .coliBL2 1(DE3)中进行表达 ,表达产物进... 目的 :研究构建重组单链免疫毒素 ,对人体肿瘤进行导向治疗。方法 :采用PCR方法从克隆化载体中拉出蓖麻毒素A链 (ricinA)基因 ,装入经过改建的pTSA 18F表达载体 ,进行目的基因DNA序列分析后导入E .coliBL2 1(DE3)中进行表达 ,表达产物进行SDS PAGE和Westernblot检查 ,表达产物的生物活性通过RNAN 糖苷酶活性检查、无细胞体系中对蛋白质生物合成的抑制以及对肿瘤细胞的毒性作用来分析。结果 :SDS PAGE检查表明 ,转化子E .coliBL2 1(DE3) (pTSRA)中出现 1条Mr约 30× 10 3 大小、较空载体对照E .coliBL2 1(DE3) (pTS)明显浓黑的条带 ;Westernblot检查表明 ,转化子E .coliBL2 1(DE3) (pTSRA)中有杂交条带出现 ,而E .coliBL2 1(DE3) (pTS)中没有 ;表达蓖麻毒素A链蛋白能够特异地作用于大鼠肝 2 8S核糖体RNA ,使其产生约 45 0nt大小的核酸片段 ;对无细胞体系中蛋白质生物合成的IC50 为 3 7× 10 -9mol/L ,略高于天然蓖麻毒蛋白 ;具有与天然蓖麻毒蛋白相近的肿瘤细胞毒性。结论 :蓖麻毒素A链基因在转化子E .coliBL2 1(DE3) (pTSRA)中获得表达 ,表达产物具有与天然蓖麻毒蛋白相近的RNAN 糖苷酶活性 ,在无细胞体系中对蛋白质生物合成具有抑制作用 。 展开更多
关键词 蓖麻毒素A链 肺腺癌 SPC 基因表达
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抗人小细胞肺癌单克隆抗体导向治疗的实验研究 被引量:4
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作者 李斯德 洪锦心 +5 位作者 张毅 王平 谈立松 蒋茂松 莫忠根 姚明 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1991年第1期1-5,共5页
用移植人小细胞肺癌的裸鼠作为肿瘤模型,研究了碘标记单克隆抗体2F7在体内的肿瘤显fi,抗体、药物偶合物的连接,导向药物2F7-HSA-MTX的体外细胞毒及体内肿瘤抑制作用。结果显示,碘标记抗体在荷瘤小鼠体内有确切的肿瘤定位作用,清晰的肿... 用移植人小细胞肺癌的裸鼠作为肿瘤模型,研究了碘标记单克隆抗体2F7在体内的肿瘤显fi,抗体、药物偶合物的连接,导向药物2F7-HSA-MTX的体外细胞毒及体内肿瘤抑制作用。结果显示,碘标记抗体在荷瘤小鼠体内有确切的肿瘤定位作用,清晰的肿瘤显像持续到168h以后。间接连接的导向药物可携带更多的MTX分子,细胞毒作用比直接连接提高2倍。导向药物可使荷瘤小鼠的长瘤潜伏期延长,长瘤率降低,抑瘤率为84%和自然生存期延长。 展开更多
关键词 小细胞肺癌 单克隆抗体 导向治疗
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单克隆抗体及F(ab′)_2片段在小鼠体内的药物动力学研究 被引量:1
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作者 李斯德 洪锦心 +4 位作者 蒋茂松 张毅 周嘉昌 莫忠根 娄葆金 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1991年第1期32-34,57,共4页
用^(125)I标记单克隆抗体(IgG2a)和相应片段F(ab′)_2,比较它们经静脉或腹腔不同途径注射后在小鼠体内的药物动力学变化。结果显示,同一种抗体形式(完整抗体或F(ab′)_2经iv或ip不同途径给药时,整体排泄率、血液清除率和生物半衰期等无... 用^(125)I标记单克隆抗体(IgG2a)和相应片段F(ab′)_2,比较它们经静脉或腹腔不同途径注射后在小鼠体内的药物动力学变化。结果显示,同一种抗体形式(完整抗体或F(ab′)_2经iv或ip不同途径给药时,整体排泄率、血液清除率和生物半衰期等无明显差异(P>0.05);而相同途径给药时,完整抗体与F(ab′)_2比较,二者的Ke、T1/2、TBCL显著差异(P<0.05-0.01),完整抗体腹腔注射的生物利用度94%。提示:F(ab′)_2片段有利于改善肿瘤体内定位显象,腹腔注射是有效的给药途径。 展开更多
关键词 单克隆抗体 F(ab`)2 药物动力学
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用单克隆抗体筛选小细胞肺癌相关抗原基因
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作者 李斯德 曹晓波 +2 位作者 王斌 张倩 莫忠根 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1995年第4期263-263,共1页
用分子生物学技术克隆肿瘤相关抗原基因对认识肿瘤抗原本质、深入研究肿瘤抗原的结构和功能、研究肿瘤多肽疫苗有重要意义。我们已获得一组抗人小细胞肺癌单克隆抗体,并在体外证实该抗体所识别的抗原在靶细胞有较好的特异性和较高分布... 用分子生物学技术克隆肿瘤相关抗原基因对认识肿瘤抗原本质、深入研究肿瘤抗原的结构和功能、研究肿瘤多肽疫苗有重要意义。我们已获得一组抗人小细胞肺癌单克隆抗体,并在体外证实该抗体所识别的抗原在靶细胞有较好的特异性和较高分布密度,是多肽性抗原决定簇。在此基础上,以抗体为探针,筛选小细胞肺癌基因库,目的在于寻找编码抗体所识别抗原的肿瘤相关基因。 展开更多
关键词 小细胞肺癌 单克隆抗体 肿瘤相关抗原 肿瘤抗原 基因 体外 多肽疫苗 原基 结构和功能 筛选
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适于杂交瘤细胞长期大量繁殖的SCI-8910培基的研制
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作者 沈翠英 沈棣 +4 位作者 肖忠明 莫忠根 李斯德 谭文松 陈志宏 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1994年第1期18-22,75,共6页
单抗的免疫导向治疗已成为国内外肿瘤研究的热点之一。目前杂交瘤分泌单抗的来源一部分是小鼠腹水,另一部分培养于含血清的培养基内,这对单抗纯化带来困难,对免疫导向治疗也带来许多不利条件,如牛的IgG、鼠的病毒等的污染。因此... 单抗的免疫导向治疗已成为国内外肿瘤研究的热点之一。目前杂交瘤分泌单抗的来源一部分是小鼠腹水,另一部分培养于含血清的培养基内,这对单抗纯化带来困难,对免疫导向治疗也带来许多不利条件,如牛的IgG、鼠的病毒等的污染。因此,我们着手研制一种能适应于杂交瘤长期培养的无血清培基,定名为SCI-8910。现已进行了9株杂交瘤细胞的长期培养,同时用该培基在1.5L的Celliger(NBSUSA)搅拌生物反应器中长期培养鼠-鼠杂交瘤细胞2F7(分泌抗人小细胞肺癌单抗)获得成功,经检测单抗纯度达到一定要求,产品在8mg/L以上。结果提示,该无血清培基制备的MCAb用于免疫导向治疗的可行性及大规模生产的可能性。 展开更多
关键词 杂交瘤 单克隆抗体 肿瘤免疫疗法
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