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大鼠大脑皮层运动区生物素化葡聚糖胺神经示踪标记的全景和局部组织学观察
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作者 陆嘉盈 徐东升 +5 位作者 崔晶晶 王雨晴 苏雨昕 刘一寒 王佳 白万柱 《首都医科大学学报》 北大核心 2025年第1期83-90,共8页
目的采用传统生物素化葡聚糖胺(biotinylated dextran amine,BDA)神经示踪技术结合全景和局部显微镜成像技术显示大脑初级运动皮层(primary motor cortex,M1)锥体神经元胞体及其轴突沿皮质脊髓束投射的详细组织学特征。方法使用脑立体... 目的采用传统生物素化葡聚糖胺(biotinylated dextran amine,BDA)神经示踪技术结合全景和局部显微镜成像技术显示大脑初级运动皮层(primary motor cortex,M1)锥体神经元胞体及其轴突沿皮质脊髓束投射的详细组织学特征。方法使用脑立体定位系统将100 nL 10%(质量分数)BDA(相对分子质量10000)注射到大鼠M1脑区,通过全景组织扫描分析系统连续追踪BDA神经标记沿皮质脊髓束通路在脑和脊髓组织中的分布,通过激光共聚焦显微镜详细观察BDA神经标记的组织学特征。结果采用全景组织扫描分析系统更便于对BDA神经标记的总体分布进行观察,在M1注射点周围,BDA标记显示在第Ⅴ层锥体神经元胞体;在注射点对侧对应的M1脑区以及同侧的初级感觉皮层,BDA主要显示顺行标记的神经纤维同时伴有少量逆行标记的神经元胞体;在大脑皮层以下的区域,BDA均显示顺行标记的神经纤维,包括神经纤维束和神经纤维终末,其投射区域有同侧的纹状体、丘脑、内囊、大脑脚和脑桥,以及经脑干锥体交叉后到达对侧的脊髓。在此基础上,采用共聚焦显微成像及其三维重建操作系统可以实现对BDA神经标记的局部显微特征进行详细的观察和解析,其中包括逆行标记的神经元胞体、树突及其树突棘,以及顺行标记的神经纤维及其终末。结论传统的BDA神经示踪技术与全景组织扫描分析和共聚焦显微成像技术的有机结合可以成为从全景到局部对长投射神经环路观察和解析的有效途径并具有广泛的应用前景。 展开更多
关键词 运动皮层 神经环路 皮质脊髓束 全景扫描 显微成像 三维重建
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组织透明化三维显示全包埋耳皮肤神经血管网
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作者 张锴文 郭亚婷 +5 位作者 苏雨昕 王雨晴 崔晶晶 张建梁 王佳 白万柱 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1473-1479,共7页
目的结合组织学染色技术和组织透明化策略研究耳部皮肤中神经纤维和血管的空间对应关系。方法将耳廓前面和后面的皮肤从其中间软骨仔细剥离,然后直接分别用蛋白基因产物9.5(PGP 9.5)和鬼笔环肽对耳部皮肤的神经纤维和血管进行免疫荧光... 目的结合组织学染色技术和组织透明化策略研究耳部皮肤中神经纤维和血管的空间对应关系。方法将耳廓前面和后面的皮肤从其中间软骨仔细剥离,然后直接分别用蛋白基因产物9.5(PGP 9.5)和鬼笔环肽对耳部皮肤的神经纤维和血管进行免疫荧光染色并进行组织透明化处理。随后,以全包埋方式将耳皮肤组织裱贴在载玻片上用于荧光显微镜和共聚焦显微镜观察。结果本研究显示PGP 9.5阳性神经纤维伴随鬼笔环肽标记的血管一道从耳廓的基部走行到其外围区域形成耳廓的神经血管网。在传统的免疫荧光染色技术基础上,后续的组织透明化技术可以更好地展示耳部皮肤中神经纤维和血管的形态学细节。结论从方法学的角度来看,组织透明化技术增进了耳部皮肤中免疫荧光标记的可视性,它可能成为有效的技术手段用于解析正常和病理状态下耳部神经血管网的空间结构。 展开更多
关键词 组织透明化 耳部皮肤 神经纤维 血管 神经血管网
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