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甲基莲心碱对豚鼠心肌及猪冠状动脉平滑肌细胞钾通道的作用(英文) 被引量：18: 1; 作者杨艳税青林 +3 位作者曾晓荣刘智飞周文李妙龄《中国药理学与毒理学杂志》 CSCD 北大核心 2000年第6期405-410,共6页; 用膜片钳单通道技术 ,观察在细胞膜内侧加入甲基莲心碱 (Nef)后 K+通道特性的改变 ,以研究Nef对豚鼠心室肌细胞及猪冠状动脉平滑肌细胞K+通道的作用 .结果 :Nef可使心肌细胞及冠脉平滑肌细胞上 K+通道开放概率 (PO)降低 . 1 0 ,2 0μmol... 展开更多; 关键词甲基莲心碱膜片钳技术钾通道心肌冠状血管; 在线阅读下载PDF 职称材料

hTERT-siRNA表达载体的构建及对MCF-7细胞生长、端粒酶活性的抑制作用被引量：5: 2; 作者张志宏曾永秋 +3 位作者税青林田强黄燕赵小平《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期561-564,共4页; 目的构建人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的RNA干扰(RNAi)表达载体,并研究该载体对乳腺癌MCF-7细胞端粒酶活性及细胞增殖的影响,为针对端粒酶的乳腺癌基因治疗提供新的途径。方法设计针对人端粒酶逆转录酶催化亚基(hTERT)的干扰靶序列TGTTC... 展开更多; 关键词 RNA干扰 SIRNA表达载体基因 hTERT 细胞凋亡; 在线阅读下载PDF 职称材料

siRNA表达载体对MCF-7细胞生长及其hTERT基因表达抑制的研究被引量：4: 3; 作者赵矫曾永秋 +3 位作者税青林赵小平刘岚陈绍坤《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期246-249,共4页; 目的构建人端粒酶反转录酶(hTERT)基因的RNA干扰(RNAi)表达载体,探讨该载体对人乳腺癌MCF-7细胞生长及hTERT基因表达的影响。方法设计针对hTERT基因的干扰靶序列,构建siRNA重组表达质粒pGenesil-hTERT,将该质粒酶切测序鉴定后,以脂质体... 展开更多; 关键词 RNA 小分子干扰基因表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

特异性siRNA抑制hTERT基因表达的位置及时间效应被引量：3: 4; 作者曾永秋税青林 +3 位作者赵矫张志宏余红赵小平《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期857-862,共6页; 为了探讨不同位点siRNA在不同时间点对人乳腺癌细胞系MCF-7细胞中hTERT mRNA表达的抑制作用,设计并化学合成4对针对人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的特异性siRNA。以脂质体法转染入MCF-7细胞,在转染后12h、24h、48h、72h和5d,用半定量逆... 展开更多; 关键词 SIRNA HTERT基因位置效应时间效应; 在线阅读下载PDF 职称材料

双基因干扰对MCF-7细胞基因表达抑制及细胞凋亡影响的研究: 5; 作者刘岚陈绍坤 +2 位作者税青林曾永秋余红《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期749-754,共6页; 背景与目的:肿瘤细胞具有端粒酶高表达及端粒稳定性强两大特点。人端粒酶逆转录酶(hTERT@是端粒酶的催化亚单位,端粒重复序列结合因子2(TRF2@对维持端粒长度及端粒稳定性非常重要。本实验研究针对hTERT和TRF2的特异性RNAi腺病毒表达载... 展开更多; 关键词 HTERT TRF2 RNA干扰基因治疗肿瘤; 在线阅读下载PDF 职称材料

Dicer蛋白的晶体结构及其功能: 6; 作者张志宏税青林《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期648-649,共2页; 关键词 RNA干扰 Dicer蛋白核糖核酸酶类; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名甲基莲心碱对豚鼠心肌及猪冠状动脉平滑肌细胞钾通道的作用(英文) 被引量：18: 1; 作者杨艳税青林曾晓荣刘智飞周文李妙龄; 机构泸州医学院心肌电生理学研究室泸州医学院生物学教研室; 出处《中国药理学与毒理学杂志》 CSCD 北大核心 2000年第6期405-410,共6页; 基金四川省教委资助课题(97-12); 文摘用膜片钳单通道技术 ,观察在细胞膜内侧加入甲基莲心碱 (Nef)后 K+通道特性的改变 ,以研究Nef对豚鼠心室肌细胞及猪冠状动脉平滑肌细胞K+通道的作用 .结果 :Nef可使心肌细胞及冠脉平滑肌细胞上 K+通道开放概率 (PO)降低 . 1 0 ,2 0μmol· L-1Nef分别使心肌细胞 K+通道降低 (50± 32 ) %和 (96± 5) % ,30 ,50 μmol· L-1的 Nef分别使猪冠脉平滑肌细胞上 K+通道 PO 降低 (51±2 1 ) %和 (71± 1 4) % .结果表明 ,Nef可从通道内口阻断心肌及平滑肌细胞上 K+通道。; 关键词甲基莲心碱膜片钳技术钾通道心肌冠状血管; Keywords neferine patch clamp technique potassium channels myocardium coronary vessels; 分类号 R965 [医药卫生—药理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名hTERT-siRNA表达载体的构建及对MCF-7细胞生长、端粒酶活性的抑制作用被引量：5: 2; 作者张志宏曾永秋税青林田强黄燕赵小平; 机构泸州医学院医学生物学与遗传学教研室; 出处《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期561-564,共4页; 基金四川省应用基础研究项目(04JY029-020-1); 文摘目的构建人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的RNA干扰(RNAi)表达载体,并研究该载体对乳腺癌MCF-7细胞端粒酶活性及细胞增殖的影响,为针对端粒酶的乳腺癌基因治疗提供新的途径。方法设计针对人端粒酶逆转录酶催化亚基(hTERT)的干扰靶序列TGTTCAGCGTGCTCAACTA,构建重组siRNA表达质粒pGenesil-hTERT,同时构建不针对任何基因的阴性对照重组pGenesil-HK。两种重组质粒经酶切、电泳分析和测序鉴定后,用脂质体转染法分别转染乳腺癌MCF-7细胞,应用端粒酶重复序列扩增聚合酶链反应(TRAP-PCR)及聚丙烯酰胺凝胶电泳检测端粒酶活性,流式细胞仪测定细胞凋亡率。结果酶切电泳测序分析表明插入序列正确,重组质粒构建成功。转染pGenesil-hTERT的MCF-7细胞,凝胶电泳见端粒酶特征性条带明显减少,端粒酶活性受到明显抑制;pGenesil-hTERT转染细胞后凋亡率较对照组明显升高(P<0.01),且转染48h凋亡率最高,达54.7%±2.41%。结论hTERT-siRNA可有效抑制乳腺癌MCF-7细胞端粒酶活性、促进细胞凋亡,此法有望应用于肿瘤基因治疗。; 关键词 RNA干扰 SIRNA表达载体基因 hTERT 细胞凋亡; Keywords RNA interference siRNA expression vector genes, hTERT apoptosis; 分类号 R737.9 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名siRNA表达载体对MCF-7细胞生长及其hTERT基因表达抑制的研究被引量：4: 3; 作者赵矫曾永秋税青林赵小平刘岚陈绍坤; 机构泸州医学院生物学与遗传学教研室; 出处《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期246-249,共4页; 基金四川省应用基础研究项目(04JY029-020-1); 文摘目的构建人端粒酶反转录酶(hTERT)基因的RNA干扰(RNAi)表达载体,探讨该载体对人乳腺癌MCF-7细胞生长及hTERT基因表达的影响。方法设计针对hTERT基因的干扰靶序列,构建siRNA重组表达质粒pGenesil-hTERT,将该质粒酶切测序鉴定后,以脂质体转染MCF-7细胞,RT-PCR和Western blot技术分别检测hTERT基因及其蛋白的表达,MTT法观察转染后MCF-7细胞生长情况。结果酶切电泳和测序分析表明插入序列正确,重组质粒构建成功。该质粒转染MCF-7细胞后,hTERT基因mRNA和蛋白质的表达水平均显著降低,MCF-7细胞生长抑制。结论内源性短发夹状siRNA能有效抑制hTERT基因的表达,进而抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖生长,这也为肿瘤的基因治疗提供了实验依据。; 关键词 RNA 小分子干扰基因表达; Keywords RNA, small interfering gene expression; 分类号 R737.9 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名特异性siRNA抑制hTERT基因表达的位置及时间效应被引量：3: 4; 作者曾永秋税青林赵矫张志宏余红赵小平; 机构四川省泸州医学院医学生物学与遗传学教研室四川省泸州医学院医学生物学与遗传学教研室泸; 出处《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期857-862,共6页; 基金四川省教育厅课题项目(编号:04JY029-020-1)资助~~; 文摘为了探讨不同位点siRNA在不同时间点对人乳腺癌细胞系MCF-7细胞中hTERT mRNA表达的抑制作用,设计并化学合成4对针对人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的特异性siRNA。以脂质体法转染入MCF-7细胞,在转染后12h、24h、48h、72h和5d,用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞中hTERT mRNA的表达。与对照组相比,4段siRNA中有3段在转染后12h即对hTERT mRNA的表达产生抑制,48h抑制率最高,72h后下降,其中位于hTERT mRNA二级结构中的结构相对简单区域的siRNA抑制率最高,达到75%,说明特异性siRNA对hTERT基因有明显的抑制效果,且该抑制效应具有位置及时间依赖性。; 关键词 SIRNA HTERT基因位置效应时间效应; Keywords siRNA hTERT gene position effect time effect; 分类号 Q3 [生物学—遗传学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名双基因干扰对MCF-7细胞基因表达抑制及细胞凋亡影响的研究: 5; 作者刘岚陈绍坤税青林曾永秋余红; 机构四川泸州医学院医学生物学与遗传学教研室; 出处《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期749-754,共6页; 基金四川省教育厅自然基金重点资助项目(No:2006A054); 文摘背景与目的:肿瘤细胞具有端粒酶高表达及端粒稳定性强两大特点。人端粒酶逆转录酶(hTERT@是端粒酶的催化亚单位,端粒重复序列结合因子2(TRF2@对维持端粒长度及端粒稳定性非常重要。本实验研究针对hTERT和TRF2的特异性RNAi腺病毒表达载体单独和联合转染乳腺癌MCF-7细胞后,对两基因的抑制效率以及对细胞凋亡的影响,探索针对端粒的多基因干扰对乳腺癌基因治疗的可行性。方法:构建RNA干扰腺病毒载体rAd-hTERT和rAd-TRF2,单独和联合转染MCF-7细胞后实时荧光定量PCR检测hTERT和TRF2基因表达情况,流式细胞仪检测各组细胞凋亡率。结果:①转染后48h,与PBS组相比,rAd-hTERT对hTERT基因mRNA的抑制率约86%,对TRF2基因表达无明显抑制(P>0.05@;rAd-TRF2对TRF2基因mRNA的抑制率约80%,对hTERT基因表达无明显抑制(P>0.05@;rAd-hTERT/rAd-TRF2联合干扰组对hTERT基因表达抑制率约88%,TRF2基因表达抑制率约85%,联合干扰与单基因干扰相比,对hTERT和TRF2基因的表达抑制差异无显著性(P>0.05@。②干扰组转染后1～6d均能促进细胞凋亡。单基因干扰组转染后3～5d凋亡最明显,第5天达凋亡高峰;凋亡率rAd-hTERT组为46.2%,rAd-TRF2组为43.5%。联合组转染后第1天凋亡率为46.2%,第2天为68.5%,第3～6天均维持在较高水平,第6天达77.6%。转染后1～6d,联合干扰细胞凋亡率与单基因干扰细胞凋亡率相比,差异均有显著性(P<0.05@。结论:①rAd-hTERT和rAd-TRF2转染MCF-7细胞48h后可分别显著抑制hTERT和TRF2基因mRNA表达,但rAd-hTERT和rAd-TRF2在抑制hTERT和TRF2基因mRNA表达上无相互协同或相互抑制作用。②rAd-hTERT和rAd-TRF2均能有效促进MCF-7细胞凋亡,且两者联合干扰效果具有累加效应。因此利用联合干扰技术靶向抑制端粒酶活性和端粒稳定性相关的多基因的表达能更高效地促进乳腺癌细胞凋亡,抑制肿瘤细胞的增殖与生长。; 关键词 HTERT TRF2 RNA干扰基因治疗肿瘤; Keywords hTERT TRF2 RNA interference gene therapy tumor; 分类号 R73-362 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Dicer蛋白的晶体结构及其功能: 6; 作者张志宏税青林; 机构泸州医学院医学生物学与遗传学教研室; 出处《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期648-649,共2页; 关键词 RNA干扰 Dicer蛋白核糖核酸酶类; 分类号 Q7 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	甲基莲心碱对豚鼠心肌及猪冠状动脉平滑肌细胞钾通道的作用(英文)	杨艳税青林曾晓荣刘智飞周文李妙龄	《中国药理学与毒理学杂志》 CSCD 北大核心	2000	18	在线阅读下载PDF 职称材料
2	hTERT-siRNA表达载体的构建及对MCF-7细胞生长、端粒酶活性的抑制作用	张志宏曾永秋税青林田强黄燕赵小平	《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2007	5	在线阅读下载PDF 职称材料
3	siRNA表达载体对MCF-7细胞生长及其hTERT基因表达抑制的研究	赵矫曾永秋税青林赵小平刘岚陈绍坤	《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2008	4	在线阅读下载PDF 职称材料
4	特异性siRNA抑制hTERT基因表达的位置及时间效应	曾永秋税青林赵矫张志宏余红赵小平	《遗传》 CAS CSCD 北大核心	2008	3	在线阅读下载PDF 职称材料
5	双基因干扰对MCF-7细胞基因表达抑制及细胞凋亡影响的研究	刘岚陈绍坤税青林曾永秋余红	《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心	2009	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	Dicer蛋白的晶体结构及其功能	张志宏税青林	《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2007	0	在线阅读下载PDF 职称材料