目的探讨RNA干扰沉默信号转导及转录活化因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)基因对人喉癌Hep-2细胞放射敏感性的影响。方法构建STAT3短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达质粒pshSTAT3,将pshSTAT...目的探讨RNA干扰沉默信号转导及转录活化因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)基因对人喉癌Hep-2细胞放射敏感性的影响。方法构建STAT3短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达质粒pshSTAT3,将pshSTAT3和阴性对照质粒(pshNeg)转染喉癌Hep-2细胞,24小时后以60Coγ射线0、2、4、6、8、10Gy照射,培养48小时后,MTT法检测细胞增殖状态,流式细胞术检测细胞凋亡率、6Gy射线照射后的STAT3、p-STAT3、B淋巴细胞2(bcl-2)蛋白的表达。结果成功构建STAT3重组质粒pshSTAT3,质粒转染人喉癌Hep-2细胞后,pshSTAT3与pshNeg组和空白对照组相比,细胞增殖明显受抑制,凋亡率明显升高(P<0.05)。pshSTAT3+照射组STAT3、p-STAT3、bcl-2的蛋白表达量均明显低于空白对照组、单纯照射组、pshNeg组、pshNeg+照射组和pshSTAT3组(P<0.05),p-STAT3蛋白表达与bcl-2表达呈正相关(r=0.974,P<0.05)。结论RNA干扰抑制STAT3基因表达能提高Hep-2细胞对放射线的敏感性,STAT3基因可能是联合放疗治疗头颈肿瘤的理想靶点。展开更多
文摘目的探讨RNA干扰沉默信号转导及转录活化因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)基因对人喉癌Hep-2细胞放射敏感性的影响。方法构建STAT3短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达质粒pshSTAT3,将pshSTAT3和阴性对照质粒(pshNeg)转染喉癌Hep-2细胞,24小时后以60Coγ射线0、2、4、6、8、10Gy照射,培养48小时后,MTT法检测细胞增殖状态,流式细胞术检测细胞凋亡率、6Gy射线照射后的STAT3、p-STAT3、B淋巴细胞2(bcl-2)蛋白的表达。结果成功构建STAT3重组质粒pshSTAT3,质粒转染人喉癌Hep-2细胞后,pshSTAT3与pshNeg组和空白对照组相比,细胞增殖明显受抑制,凋亡率明显升高(P<0.05)。pshSTAT3+照射组STAT3、p-STAT3、bcl-2的蛋白表达量均明显低于空白对照组、单纯照射组、pshNeg组、pshNeg+照射组和pshSTAT3组(P<0.05),p-STAT3蛋白表达与bcl-2表达呈正相关(r=0.974,P<0.05)。结论RNA干扰抑制STAT3基因表达能提高Hep-2细胞对放射线的敏感性,STAT3基因可能是联合放疗治疗头颈肿瘤的理想靶点。
