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RNA干扰MAD2基因对细胞增殖的影响 被引量：2
1
作者 施琼 王箭 +7 位作者 舒朝忠 翁亚光 王应雄 徐远久 蒋洪彦 刘子杰 刘青松 蔡燕 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期400-404,共5页
目的:探讨MAD2对HepG2细胞周期的影响。方法:构建针对MAD2基因的shRNA表达载体,MAD2基因与GFP融合的绿色荧光蛋白真核表达质粒pmad2-EGFP共转染HepG2细胞株,用Western印迹法检测shRNA的抑制效应;用MTT法测定细胞增殖率;用流式细胞仪检... 目的:探讨MAD2对HepG2细胞周期的影响。方法:构建针对MAD2基因的shRNA表达载体,MAD2基因与GFP融合的绿色荧光蛋白真核表达质粒pmad2-EGFP共转染HepG2细胞株,用Western印迹法检测shRNA的抑制效应;用MTT法测定细胞增殖率;用流式细胞仪检测细胞周期。结果:shRNA的重组质粒表达载体能明显抑制MAD2绿色荧光融合蛋白的表达。HepG2细胞转染有效干扰质粒48h后,细胞增殖抑制率达65%。有效干扰质粒引起G0/G1期和S期细胞的明显降低,G2/M期细胞增多。结论:在细胞水平,可通过RNA干扰特异性抑制MAD2基因来抑制细胞的增殖,为研究MAD2基因在细胞增殖中的作用机制奠定基础。 展开更多
关键词 MAD2基因 RNA干扰 细胞增殖
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RNA 干扰抑制 BUB1基因表达对染色体分离的影响 被引量：1
2
作者 施琼 王箭 +5 位作者 朱旦 翁亚光 王应雄 蔡燕 刘青松 刘子杰 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期35-38,107,共5页
目的：研究 BUB1基因表达调控对染色体分离的影响。方法：用定量 RT-PCR 比较 RNA 干扰前后的胚胎细胞内源性基因 BUB1的 mRNA 水平,同时对染色体数目异常率进行比较分析。结果：干扰后 BUB1基因 mRNA 拷贝数/GAPDH 基因 mRNA 拷贝数的... 目的：研究 BUB1基因表达调控对染色体分离的影响。方法：用定量 RT-PCR 比较 RNA 干扰前后的胚胎细胞内源性基因 BUB1的 mRNA 水平,同时对染色体数目异常率进行比较分析。结果：干扰后 BUB1基因 mRNA 拷贝数/GAPDH 基因 mRNA 拷贝数的均值为干扰前的21．80%,染色体数目异常率均值由干扰前 5．02%上升到29．61%。经统计分析,RNA 干扰前后 BUB1基因 mRNA 水平和染色体数目异常率有显著差异。结论：BUB1基因表达的降低会导致染色体分离的异常,本研究为染色体分离相关蛋白功能研究建立了新的研究手段和实验评价体系。 展开更多
关键词 BUB1基因 RNA干扰 定量RT-PCR 胚胎细胞
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mTOR/p-4EBn,p-p70S6k信号通路对绒癌细胞株JEG-3的作用 被引量：1
3
作者 李荣 陈雪梅 +5 位作者 黄玲 何俊琳 王应雄 丁裕斌 鲁之中 刘学庆 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期80-81,共2页
目的:运用雷帕霉素对mTOR的特异性抑制作用,探讨mTOR信号通路对人绒癌细胞株JEG-3的作用的分子机制。方法:运用RTPCR检测雷帕霉素对其靶点mTOR的mRNA表达量的影响;用western-blot检测雷帕霉素处理后mTOR及调控的下游蛋白p-4EBP1和p-P70... 目的:运用雷帕霉素对mTOR的特异性抑制作用,探讨mTOR信号通路对人绒癌细胞株JEG-3的作用的分子机制。方法:运用RTPCR检测雷帕霉素对其靶点mTOR的mRNA表达量的影响;用western-blot检测雷帕霉素处理后mTOR及调控的下游蛋白p-4EBP1和p-P70S6K的蛋白表达量的变化。结果:绒癌细胞JEG-3中mTOR/p-4EBP1,p-P70S6k信号通路对绒癌细胞的增殖起着重要作用。 展开更多
关键词 雷帕霉素 绒癌细胞 mTOR/p-4EBP1 P-P70S6k
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唐氏综合征产前筛查的研究进展 被引量：3
4
作者 景春梅 王应雄 《国外医学（计划生育．生殖健康分册）》 2006年第6期314-318,共5页
回顾近年来国外产前筛查唐氏综合征的最新研究进展。从母血清筛查方法、细胞学及分子生物学检查方法和国外采用的最新筛查方法3个方面对产前筛查唐氏综合征系统地进行综述。每种方法各有其优缺点,如母血清筛查方法的特异性不高,细胞学... 回顾近年来国外产前筛查唐氏综合征的最新研究进展。从母血清筛查方法、细胞学及分子生物学检查方法和国外采用的最新筛查方法3个方面对产前筛查唐氏综合征系统地进行综述。每种方法各有其优缺点,如母血清筛查方法的特异性不高,细胞学及分子生物学方法的影响因素较多;检测母体血液中的有核红细胞,是目前筛查唐氏综合征的非创伤性方法,为其筛查提供了更好的选择。 展开更多
关键词 唐氏综合征 产前筛查 分子生物学 细胞遗传学
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性表达对发情雄性小鼠血清睾酮、雌二醇和间质细胞表达芳香化酶的影响
5
作者 谢怡 孔燕 +4 位作者 刘孝云 魏莎莉 杨戎 蔡家春 王应雄 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期711-713,共3页
目的:研究性表达对发情雄性小鼠血清睾酮、雌二醇水平及睾丸组织芳香化酶表达的影响。方法:采用放射免疫法检测发情雄性小鼠性表达组与禁欲组血清睾酮、雌二醇水平以及睾丸组织雌二醇含量;采用原位杂交、免疫组织化学技术检测睾丸组织... 目的:研究性表达对发情雄性小鼠血清睾酮、雌二醇水平及睾丸组织芳香化酶表达的影响。方法:采用放射免疫法检测发情雄性小鼠性表达组与禁欲组血清睾酮、雌二醇水平以及睾丸组织雌二醇含量;采用原位杂交、免疫组织化学技术检测睾丸组织芳香化酶表达水平。结果:发情雄性小鼠性表达组血清雌激素水平显著性增高,性表达显著上调睾丸间质细胞芳香化酶表达;发情雄性小鼠性表达组睾丸组织匀浆上清液雌二醇浓度较禁欲组显著性升高。结论:性表达可能通过上调发情雄性小鼠睾丸间质细胞芳香化酶表达而提高外周血雌二醇水平。 展开更多
关键词 性表达 睾酮 雌二醇 芳香化酶 间质细胞 睾丸
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Hsa-miR-200a真核表达载体的构建及鉴定
6
作者 陈倩 陈雪梅 +4 位作者 何俊琳 王应雄 丁裕斌 杨德辉 刘学庆 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期76-77,共2页
目的:通过构建及鉴定miR-200a的真核表达载体pcDNA3.1(+)-miR-200a,为进一步研究miR-200a的功能奠定实验基础。方法:RT-PCR扩增pre-miR-200a基因序列,连接于表达载体pcDNA3.1(+)中,对重组质粒双酶切鉴定并测序验证。结果:pcDNA3.1(+)-mi... 目的:通过构建及鉴定miR-200a的真核表达载体pcDNA3.1(+)-miR-200a,为进一步研究miR-200a的功能奠定实验基础。方法:RT-PCR扩增pre-miR-200a基因序列,连接于表达载体pcDNA3.1(+)中,对重组质粒双酶切鉴定并测序验证。结果:pcDNA3.1(+)-miR-200a真核表达载体经酶切及测序鉴定正确。结论:pcDNA3.1(+)-miR-200a真核表达载体构建成功,为下一步深入研究miR-200a的生物学功能和验证miR-200a的靶基因提供有效工具。 展开更多
关键词 MICRORNAS hsa-miR-200a 真核表达载体 肿瘤
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子宫内膜胚胎容受性相关因素研究进展
7
作者 徐以民 王应雄 《国外医学（计划生育．生殖健康分册）》 2006年第2期80-83,共4页
胚胎着床是从受精卵植入子宫内膜开始的一系列细胞、分子信号传递过程。胚胎着床成功与否与子宫内膜容受性密切相关,影响子宫内膜容受性的相关因素较多,如胞饮突、白血病抑制因子、整和素、基质金属蛋白酶(MMPs)、Ley寡糖、转化生长因... 胚胎着床是从受精卵植入子宫内膜开始的一系列细胞、分子信号传递过程。胚胎着床成功与否与子宫内膜容受性密切相关,影响子宫内膜容受性的相关因素较多,如胞饮突、白血病抑制因子、整和素、基质金属蛋白酶(MMPs)、Ley寡糖、转化生长因子、同源盒基因及相关蛋白产物等,但各相关因素之间不是彼此孤立,而是相互联系、相互影响、相互作用,构成一个井然有序的调节网络。综述目前胞饮突、白血病抑制因子、整和素、MMPs、Ley寡糖、转化生长因子、同源盒基因等相关因素的国外研究进展。 展开更多
关键词 胚胎 着床 子宫内膜 容受性
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雷帕霉素对绒癌JEG-3细胞株的影响 被引量：2
8
作者 黄玲 陈雪梅 +5 位作者 何俊琳 王应雄 丁裕斌 鲁之中 李荣 刘学庆 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期93-94,共2页
用雷帕霉素对人绒癌层细胞株JEG-3进行处理,探讨其对JEG-3的作用。分别采用MTT法、流式细胞术、Transwell技术检测雷帕霉素处理前后JEG-3细胞在增殖、凋亡和侵袭能力的改变。结果显示雷帕霉素对绒癌细胞的增殖、侵袭能力起着抑制作用,... 用雷帕霉素对人绒癌层细胞株JEG-3进行处理,探讨其对JEG-3的作用。分别采用MTT法、流式细胞术、Transwell技术检测雷帕霉素处理前后JEG-3细胞在增殖、凋亡和侵袭能力的改变。结果显示雷帕霉素对绒癌细胞的增殖、侵袭能力起着抑制作用,并对凋亡起促进作用。 展开更多
关键词 雷帕霉素 绒癌JEG-3 增殖 凋亡 侵袭能力
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“包死价”合同方式的投标报价风险及决策分析
9
作者 王应雄 《建设监理》 1995年第5期41-42,共2页
“包死价”合同方式的投标报价风险及决策分析王应雄（同济大学建设监理研究所）在招投标过程中。投标报价往往是业主确定中标单位的重采依据．而一些业主在招标文件中声明：最后以中标单位的投标报价为合同价；合同价为“包死价”，除... “包死价”合同方式的投标报价风险及决策分析王应雄（同济大学建设监理研究所）在招投标过程中。投标报价往往是业主确定中标单位的重采依据．而一些业主在招标文件中声明：最后以中标单位的投标报价为合同价；合同价为“包死价”，除非因工程量变更引起造价增加（按实计... 展开更多
关键词 投标 报价风险 决策分析 合同方式 基本建设
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高脂饮食诱导的肥胖早孕小鼠子宫内膜蜕膜反应受损 被引量：1
10
作者 陈子轩 李伟轲 +6 位作者 陈雪梅 刘学庆 丁裕斌 李方方 何俊琳 王应雄 高茹菲 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期204-214,共11页
目的:探讨高脂饮食诱导的肥胖对小鼠子宫内膜蜕膜反应的影响。方法:将12只4周龄健康C57BL/6J雌性小鼠随机分为高脂组和对照组(每组6只),分别饲喂高脂(22 kJ/g)、正常(16 kJ/g)饲料12周。每周测量小鼠体重,喂养12周后测量小鼠体长、体宽... 目的:探讨高脂饮食诱导的肥胖对小鼠子宫内膜蜕膜反应的影响。方法:将12只4周龄健康C57BL/6J雌性小鼠随机分为高脂组和对照组(每组6只),分别饲喂高脂(22 kJ/g)、正常(16 kJ/g)饲料12周。每周测量小鼠体重,喂养12周后测量小鼠体长、体宽并检测空腹血清三酰甘油和总胆固醇水平。将雌鼠与健康C57BL/6J雄鼠合笼交配,收集妊娠第7天子宫组织,采用苏木精-伊红染色观察子宫内膜细胞形态,Masson染色观察子宫内膜胶原纤维;采用免疫组织化学法、蛋白质印迹法检测子宫内膜蜕膜反应相关蛋白表达。分离原代小鼠子宫内膜基质细胞,油酸、棕榈酸模拟高脂环境进行干预,雌二醇、孕酮诱导细胞发生蜕膜反应后,油红O、Bodipy染色观察脂滴累积情况,鬼笔环肽染色观察细胞骨架,实时荧光定量PCR、蛋白质印迹法检测蜕膜反应相关标志物的基因和蛋白表达。结果:饲养12周后,高脂组体重明显高于对照组(P<0.01),两组体长无明显差异(P>0.05),但高脂组体宽显著大于对照组(P<0.01),血清三酰甘油和总胆固醇水平均显著高于对照组(均P<0.05)。高脂组胚胎着床数显著少于对照组(P<0.01),高脂组子宫内膜基质细胞向蜕膜细胞转换缓慢且形态异常,蜕膜反应标志物骨形成蛋白(BMP)2、同源异形框A10(HOXA10)表达水平均低于对照组,其中两组HOXA10表达水平差异有统计学意义(P<0.01)。油红O、Bodipy染色结果显示,原代小鼠子宫内膜基质细胞经高脂处理后,脂滴堆积明显增多,鬼笔环肽染色发现其细胞骨架形态异常,蜕膜反应相关基因dtprp、HOXA10以及蛋白BMP2、HOXA10、环氧合酶2的表达水平均明显低于对照组(均P<0.05)。结论:高脂饮食诱导的肥胖会损伤小鼠子宫内膜的蜕膜反应。 展开更多
关键词 高脂饮食 肥胖 胚胎着床 蜕膜反应 小鼠 子宫内膜基质细胞
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