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电化学发光PCR技术检测转基因植物被引量：18: 1; 作者刘晋峰邢达 +1 位作者沈行燕朱德斌《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第4期375-378,共4页; 随着转基因植物种类的增多 ,转基因植物的检测也成了当今的热门话题 .电化学发光法是将电化学与化学发光两种高灵敏度方法相结合 ,实现了检测的高效、准确、无毒害 .电化学发光PCR法首次将电化学发光技术、PCR技术和双探针杂交技术结合... 展开更多; 关键词转基因植物电化学发光 PCR技术 CaMV35 S启动子蛋白质; 在线阅读下载PDF 职称材料

传染性支气管炎病毒核衣壳蛋白基因克隆及在E.coli中的表达被引量：6: 2; 作者周继勇丁红梅 +1 位作者程丽琴沈行燕《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期450-455,共6页; 核衣壳蛋白基因 (N基因 )是传染性支气管炎病毒的重要结构基因 .根据已报道的序列设计引物 ,利用RT PCR技术从病毒RNA中扩增和克隆到了N基因的cDNA ,并测定了核苷酸序列 .克隆的N基因片段ORF全长 12 30bp ,编码 4 0 9个氨基酸 .将该片... 展开更多; 关键词禽病毒传染性支气管炎病毒核衣壳蛋白基因克隆 E.COLI 表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

电化学发光PCR定量检测H-ras癌基因点突变被引量：6: 3; 作者朱德斌邢达 +1 位作者沈行燕刘晋峰《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2005年第7期1248-1251,M005,共5页; 提出了一种电化学发光PCR(ECL-PCR)分析方法, 该法可用于定量检测基因点突变. 其检测H-ras癌基因PCR扩增产物的灵敏度可达100 fmol;线性范围为0.1～500 pmol. 用ECL-PCR分析法对膀胱癌组织中H-ras癌基因进行突变检测, 只需要10 μL样品,... 展开更多; 关键词电化学发光PCR 膀胱癌 H—ras癌基因点突变; 在线阅读下载PDF 职称材料

直接和间接法测量人膀胱对激光的总衰减系数被引量：3: 4; 作者魏华江邢达 +2 位作者鲁建军沈行燕巫国勇《激光技术》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期420-422,共3页; 利用积分球系统以及采用直接和间接法测量了人正常膀胱和膀胱癌组织对476.5nm,488nm,496.5nm,514.5nm,532nm和808nm激光及其线偏振激光的总衰减系数。结果表明,在这6个波长范围内,采用直接和间接法所得到的膀胱或膀胱癌组织对激光或其... 展开更多; 关键词人膀胱人膀胱癌组织光学特性多波长激光积分球线偏振激光; 在线阅读下载PDF 职称材料

禽传染性支气管炎病毒S1基因植物表达载体的构建被引量：2: 5; 作者吴建祥周继勇 +2 位作者程丽琴沈行燕丁红梅《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期293-296,共4页; :以含传染性支气管炎病毒 ( ZJ971毒株 ) S1基因的质粒 PBS为模板 ,根据其序列设计引物进行PCR扩增 ,得到 1.7kb左右的 S1基因产物 ;用 Xbal I和 Bam HI酶切纯化 ,并在 T4 DNA连接酶的作用下 ,定向克隆到植物表达载体 PBI12 1中 ,PCR及... 展开更多; 关键词禽传染性支气管炎病毒 S1基因植物表达载体质粒PBS 酚切鉴定三亲交配定向克隆; 在线阅读下载PDF 职称材料

鸡传染性支气管炎病毒H52毒株S基因的克隆及序列分析: 6; 作者程丽琴周继勇 +2 位作者沈行燕陈吉刚陈声明《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期303-306,共4页; 将含有鸡传染性支气管炎病毒 (IBV) H5 2毒株的尿囊液浓缩 ,用 TRIzol试剂抽提病毒 RNA作为反转录 -聚合酶链反应 (RT- PCR)的模板 ,参照已发表的 IBV- Beaudette株 S基因序列 ,设计并合成一对特异性引物 ,扩增得到长度约 3.6 kb的 S基... 展开更多; 关键词鸡传染性支气管炎病毒H52毒株 S基因克隆序列分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名电化学发光PCR技术检测转基因植物被引量：18: 1; 作者刘晋峰邢达沈行燕朱德斌; 机构华南师范大学激光生命科学研究所; 出处《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第4期375-378,共4页; 基金国家自然科学基金面上资助项目 ( 60 3 780 43 ) 广东省自然科学基金团队资助项目 ( 0 15 0 12 ) 广东省科技计划资助项目( 2 0 0 2C2 0 60 7)~~; 文摘随着转基因植物种类的增多 ,转基因植物的检测也成了当今的热门话题 .电化学发光法是将电化学与化学发光两种高灵敏度方法相结合 ,实现了检测的高效、准确、无毒害 .电化学发光PCR法首次将电化学发光技术、PCR技术和双探针杂交技术结合起来 ,用于检测CaMV (cauliflowermosaicvirus) 35S启动子 ,从而判断其是否含有转基因成分 .PCR产物与生物素标记的探针杂交 ,可以起到筛选的作用 ;与三联吡啶钌标记的探针杂交则可用于电化学发光检测 .两种探针同时与转基因样品PCR产物杂交 ,使结果避免假阳性的影响而更加准确 .实验表明 :此方法可以准确地检测到 35S启动子的存在 .该方法灵敏度高 ,可靠性强 ,操作简便 ,结果准确 ,有望成为一种高效的转基因检测方法 .; 关键词转基因植物电化学发光 PCR技术 CaMV35 S启动子蛋白质; Keywords electrochemiluminescence genetically modified plant CaMV35S promoter; 分类号 Q943.2 [生物学—植物学] Q503 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名传染性支气管炎病毒核衣壳蛋白基因克隆及在E.coli中的表达被引量：6: 2; 作者周继勇丁红梅程丽琴沈行燕; 机构浙江大学动物预防医学研究所; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期450-455,共6页; 基金国家自然科学基金 (No.3 0 0 70 5 70 ) 浙江省自然科学基金 (No .3 99411) 浙江省重点项目 (No .99110 2 0 3 0 )资助GenBankNo:AF3 5 2 3 0 8; 文摘核衣壳蛋白基因 (N基因 )是传染性支气管炎病毒的重要结构基因 .根据已报道的序列设计引物 ,利用RT PCR技术从病毒RNA中扩增和克隆到了N基因的cDNA ,并测定了核苷酸序列 .克隆的N基因片段ORF全长 12 30bp ,编码 4 0 9个氨基酸 .将该片段序列与其他IBV病毒株比较 ,核苷酸的同一性为 87 0 %～ 98 6 %,氨基酸的同一性为 91 0 %～ 98 1%.将该cDNA亚克隆到pBV2 2 0表达载体 ,转化大肠杆菌DH5α菌株 ,Western印迹检测 ,获得了分子量约 4; 关键词禽病毒传染性支气管炎病毒核衣壳蛋白基因克隆 E.COLI 表达; Keywords infectious bronchitis virus, nucleocapsid gene, cloning, non fusion expression; 分类号 S852.659.6 [农业科学—基础兽医学] S858.315.3 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名电化学发光PCR定量检测H-ras癌基因点突变被引量：6: 3; 作者朱德斌邢达沈行燕刘晋峰; 机构华南师范大学激光生命科学研究所; 出处《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2005年第7期1248-1251,M005,共5页; 基金国家重大基础研究前期专项基金(批准号:2002CCC00400) 国家自然科学基金(批准号:60378043) 广东省自然科学基金团队项目(批准号:015012)资助; 文摘提出了一种电化学发光PCR(ECL-PCR)分析方法, 该法可用于定量检测基因点突变. 其检测H-ras癌基因PCR扩增产物的灵敏度可达100 fmol;线性范围为0.1～500 pmol. 用ECL-PCR分析法对膀胱癌组织中H-ras癌基因进行突变检测, 只需要10 μL样品, 20 min的孵育时间和30 s的采集时间, 得出20例膀胱癌样品中有7例存在点突变, 通过标准曲线方程定量计算出突变样品的量. ECL-PCR分析方法在灵敏度、线性范围、分析时间等方面都优于传统的检测方法, 是一种安全、快速、灵敏、定量检测基因点突变的分析方法.; 关键词电化学发光PCR 膀胱癌 H—ras癌基因点突变; Keywords Electrochemiluminescence polymerase chain reaction(ECL-PCR) Bladder cancer H-ras oncogene Point mutation; 分类号 O657 [理学—分析化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名直接和间接法测量人膀胱对激光的总衰减系数被引量：3: 4; 作者魏华江邢达鲁建军沈行燕巫国勇; 机构华南师范大学激光生命科学研究所中山医科大学第一附属医院心胸外科; 出处《激光技术》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期420-422,共3页; 基金国家重大基础研究前期专项基金资助项目(2002CCC00400) 广东省自然科学基金资助项目(015012); 文摘利用积分球系统以及采用直接和间接法测量了人正常膀胱和膀胱癌组织对476.5nm,488nm,496.5nm,514.5nm,532nm和808nm激光及其线偏振激光的总衰减系数。结果表明,在这6个波长范围内,采用直接和间接法所得到的膀胱或膀胱癌组织对激光或其线偏振激光的总衰减系数均有显著性差异(P(0.05),6个波长的激光辐照膀胱或膀胱癌组织的总衰减系数在直接与间接法之间的差值,均明显较其相应的线偏振激光辐照组织的总衰减系数在直接与间接法之间的差值大(P(0.05)。; 关键词人膀胱人膀胱癌组织光学特性多波长激光积分球线偏振激光; Keywords normal human bladder tissues eanerous human bladder tissuesi optieal properties multi-wavelength laser integrating-sphere linearly polarized laser; 分类号 R318.51 [医药卫生—生物医学工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名禽传染性支气管炎病毒S1基因植物表达载体的构建被引量：2: 5; 作者吴建祥周继勇程丽琴沈行燕丁红梅; 机构浙江大学动物预防医学研究所; 出处《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期293-296,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目!(30 0 70 5 70 ); 文摘 :以含传染性支气管炎病毒 ( ZJ971毒株 ) S1基因的质粒 PBS为模板 ,根据其序列设计引物进行PCR扩增 ,得到 1.7kb左右的 S1基因产物 ;用 Xbal I和 Bam HI酶切纯化 ,并在 T4 DNA连接酶的作用下 ,定向克隆到植物表达载体 PBI12 1中 ,PCR及酶切鉴定表明。; 关键词禽传染性支气管炎病毒 S1基因植物表达载体质粒PBS 酚切鉴定三亲交配定向克隆; Keywords WT5”BZ]avian infectious bronchitis virus S1 gene plant expression vector; 分类号 S858.3 [农业科学—临床兽医学] Q782 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鸡传染性支气管炎病毒H52毒株S基因的克隆及序列分析: 6; 作者程丽琴周继勇沈行燕陈吉刚陈声明; 机构浙江大学动物预防医学研究所浙江大学生物科学系; 出处《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期303-306,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目 (39970 0 30 ); 文摘将含有鸡传染性支气管炎病毒 (IBV) H5 2毒株的尿囊液浓缩 ,用 TRIzol试剂抽提病毒 RNA作为反转录 -聚合酶链反应 (RT- PCR)的模板 ,参照已发表的 IBV- Beaudette株 S基因序列 ,设计并合成一对特异性引物 ,扩增得到长度约 3.6 kb的 S基因片段 ,利用引物设计中 Eco R I和 Bam H I酶切位点插入到克隆载体 p Blue Script SK的多克隆位点中 ,转化感受态 E.coli DH5 α。经酶切分析和 PCR等方法鉴定 ,筛选出阳性克隆 ,进行核苷酸序列测定 ,证实获得了 S基因的全长序列。利用 DNAstar等分析软件与 Gen Bank中其它 IBV毒株的核苷酸及其推导的氨基酸进行序列同源性比较分析 ,结果表明 ,H5 2毒株与已报道的核苷酸的同源性在 83.4 5 %～ 99.71%之间 ,氨基酸的同源性在 82 .10 %～ 99.2 6 %之间。; 关键词鸡传染性支气管炎病毒H52毒株 S基因克隆序列分析; Keywords avian infectious bronchitis virus RT PCR S gene cloning sequencing; 分类号 S858.315.3 [农业科学—临床兽医学] S852.659.6 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	电化学发光PCR技术检测转基因植物	刘晋峰邢达沈行燕朱德斌	《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心	2004	18	在线阅读下载PDF 职称材料
2	传染性支气管炎病毒核衣壳蛋白基因克隆及在E.coli中的表达	周继勇丁红梅程丽琴沈行燕	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2002	6	在线阅读下载PDF 职称材料
3	电化学发光PCR定量检测H-ras癌基因点突变	朱德斌邢达沈行燕刘晋峰	《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心	2005	6	在线阅读下载PDF 职称材料
4	直接和间接法测量人膀胱对激光的总衰减系数	魏华江邢达鲁建军沈行燕巫国勇	《激光技术》 CAS CSCD 北大核心	2005	3	在线阅读下载PDF 职称材料
5	禽传染性支气管炎病毒S1基因植物表达载体的构建	吴建祥周继勇程丽琴沈行燕丁红梅	《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2001	2	在线阅读下载PDF 职称材料
6	鸡传染性支气管炎病毒H52毒株S基因的克隆及序列分析	程丽琴周继勇沈行燕陈吉刚陈声明	《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2002	0	在线阅读下载PDF 职称材料