瘦素对水牛体外卵泡颗粒细胞凋亡的影响 被引量：3

1

作者 毕方方 杨勇 +2 位作者 黎江 凌泽继 何宝祥 《广西畜牧兽医》 2010年第2期79-81,共3页

为探讨瘦素(leptin)对水牛体外卵巢卵泡颗粒细胞(GCs)凋亡的影响,用三组含不同浓度(10ng/ml、100ng/ml、1000ng/ml)leptin的培养基体外培养水牛卵泡颗粒细胞,以不含leptin的培养基做对照。采用An-nexin V法通过流式细胞仪检测其卵泡颗... 为探讨瘦素(leptin)对水牛体外卵巢卵泡颗粒细胞(GCs)凋亡的影响,用三组含不同浓度(10ng/ml、100ng/ml、1000ng/ml)leptin的培养基体外培养水牛卵泡颗粒细胞,以不含leptin的培养基做对照。采用An-nexin V法通过流式细胞仪检测其卵泡颗粒细胞的凋亡率。结果发现leptin浓度在100ng/ml时颗粒细胞凋亡率显著降低,其他浓度组与对照组的凋亡率之间无显著性差异,提示一定浓度的瘦素对卵泡颗粒细胞凋亡有抑制作用。 展开更多

关键词 瘦素 颗粒细胞 凋亡

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奶水牛分娩前后血浆瘦素及抗氧化等指标的变化及意义

2

作者 毕方方 唐阳国 +2 位作者 方治山 何宝祥 杜玉兰 《中国饲料》 北大核心 2022年第8期33-36,共4页

为揭示奶水牛分娩前后血浆瘦素(leptin,LEP)与部分氧化/抗氧化指标的变化特征及其意义,本试验采用动态监测方法,选择南宁市某牛场的水牛11头,分析产前1周至产后6周内血浆LEP、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)、超氧化物歧化酶... 为揭示奶水牛分娩前后血浆瘦素(leptin,LEP)与部分氧化/抗氧化指标的变化特征及其意义,本试验采用动态监测方法,选择南宁市某牛场的水牛11头,分析产前1周至产后6周内血浆LEP、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)、超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(TAC)、丙二醛(MDA)的水平,产后逐日测定产奶量,分析其平均值、变异情况、动态变化特点及各指标间的相关性。结果显示,LEP平均值为1.26 ng/mL、CAT平均值为0.14 U/mL、GPX平均值为105.26 umol/L、SOD平均值为36.68 U/mL、TAC平均值为0.54(OD值)、MDA平均值为7.76 nmol/mL。变异系数以SOD最小(0.18)、GPX最大(0.66)。LEP在分娩当天达峰值,产后2周降到低谷,之后出现次波峰。TAC、CAT、GPX、SOD在产后3周降到最低,之后渐升,MDA产后1周降至低谷,产后3周接近峰值。产奶量2周内急增,之后趋于平稳。相关性分析为SOD-TAC,CAT-GPX间呈极显著正相关,MDA-SOD间呈极显著负相关。综上所述,LEP作为能量调节信号,水牛LEP在分娩与产后出现明显波动,且在产后2周内幅度最大,结合产奶量变化提示,此时能量调节力度最大。抗氧化水平在产后3周最低,因此,加强分娩与产后营养管理非常必要。这些数据可为奶水牛临床健康检查与管理提供参考。 展开更多

关键词 奶水牛 瘦素 分娩前后 抗氧化 血浆水平

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产后轻度疾病对奶水牛产奶量和抗氧化指标的影响

3

作者 毕方方 唐阳国 +2 位作者 方治山 杜玉兰 何宝祥 《广西畜牧兽医》 2022年第1期26-30,共5页

本研究回溯性分析奶水牛产后6周内患轻度疾病与否对产奶量(MY)和部分血液生化指标的影响。在试验选取的11头奶水牛中,5头在产后6周内患轻度疾病(轻度乳房炎1头,产后厌食4头、其中1头伴发胎衣不下、1头伴发轻度乳房炎)分为轻度疾病组(D),... 本研究回溯性分析奶水牛产后6周内患轻度疾病与否对产奶量(MY)和部分血液生化指标的影响。在试验选取的11头奶水牛中,5头在产后6周内患轻度疾病(轻度乳房炎1头,产后厌食4头、其中1头伴发胎衣不下、1头伴发轻度乳房炎)分为轻度疾病组(D),6头未患病者分为对照组(C)。结果显示,产后6周内D组的日均产奶量(5.3±0.93kg)极显著地低于C组的日均产奶量(8.1±1.61 kg)。D组血浆瘦素(leptin,LEP)水平极显著高于C组(P<0.001),两组水牛在其余9项指标上无显著差异。D组在氧化/抗氧化指标间存在显著相关性,C组在MY与超氧化物歧化酶(SOD)间存在显著负相关。11头奶水牛产后6周内MY与SOD呈显著负相关,产后30日内MY与总抗氧化能力(TAC)呈显著正相关。结论:奶水牛产后患轻度疾病对MY有显著影响,亦显著提高血浆LEP水平,提高氧化与抗氧化指标间的相关性。提示奶水牛产后厌食等轻度疾病使体内能量急缺,不仅影响MY、能量代谢,还影响氧化与抗氧化关系,今后应加强其发生机理与预防研究。 展开更多

关键词 奶水牛 产奶量 抗氧化 轻度疾病

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预处理固定化脂肪酶催化合成生物柴油 被引量：12

4

作者 黄凌云 赵希岳 +2 位作者 蔡志强 裴俊慧 毕方方 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期47-50,共4页

探讨了预处理固定化Candida antarctica脂肪酶催化餐饮废油合成生物柴油的过程。将固定化Candida antarctica脂肪酶用叔丁醇处理3h后再用废油浸泡4h,用于催化酯交换反应,酯交换反应速率明显加快。研究发现,固定化Candida antarctica脂... 探讨了预处理固定化Candida antarctica脂肪酶催化餐饮废油合成生物柴油的过程。将固定化Candida antarctica脂肪酶用叔丁醇处理3h后再用废油浸泡4h,用于催化酯交换反应,酯交换反应速率明显加快。研究发现,固定化Candida antarctica脂肪酶预处理后,过量甲醇对酶的抑制作用仍然存在。采用分步添加甲醇工艺,按总醇油摩尔比3∶1,分别在0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5h等量加入甲醇,反应4h后,体系中甲酯含量达到97.86%,反应效率是未处理固定化酶催化合成生物柴油体系的6倍。固定化酶重复使用仍具有较高活性。 展开更多

关键词 生物柴油 固定化Candida antarctica脂肪酶 餐饮废油 预处理 酯交换反应

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山羊Sox2基因克隆、原核表达和GST融合蛋白纯化 被引量：4

5

作者 郑喜邦 杨照海 +4 位作者 刘平 赵华 卢晟盛 卢克焕 毕方方 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1454-1459,共6页

本研究旨在克隆山羊Sox2基因,构建pGEX-Sox2原核表达重组质粒,从大肠杆菌中获得纯化的GST-Sox2融合蛋白。应用RT-PCR方法从6周龄胎山羊生殖嵴扩增Sox2基因编码全序列,将其克隆到pMD18-T载体,然后再亚克隆到pGEX-KG表达载体。重组质粒pGE... 本研究旨在克隆山羊Sox2基因,构建pGEX-Sox2原核表达重组质粒,从大肠杆菌中获得纯化的GST-Sox2融合蛋白。应用RT-PCR方法从6周龄胎山羊生殖嵴扩增Sox2基因编码全序列,将其克隆到pMD18-T载体,然后再亚克隆到pGEX-KG表达载体。重组质粒pGEX-Sox2转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,用SDS-PAGE电泳及Western blotting检测GST-Sox2融合蛋白表达,用谷胱甘肽Sepharose 4B介质分离纯化该融合蛋白。结果表明,山羊Sox2基因编码序列全长为960 bp;在优化的表达条件(1 mmol.L-1IPTG,22℃诱导16h)下,重组质粒(pGEX-Sox2)在大肠杆菌得到了高效表达;谷胱甘肽Sepharose 4B颗粒纯化蛋白得到预期大小的融合蛋白(约60 ku)。结论,本研究克隆了山羊Sox2基因,获得了纯化的GST-Sox2融合蛋白,为制备其多克隆抗体奠定了基础,为进一步研究山羊iPS细胞(Induced pluripotent stem cells)创造了条件。 展开更多

关键词 Sox2基因 原核表达 蛋白纯化 山羊

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^(60)Co-γ射线诱变提高长枝木霉菌株利用糖蜜酒精废液产生物量能力 被引量：3

6

作者 李玮 曹慕明 +5 位作者 陈国品 谢蜀豫 李献 毕方方 韦俏娜 丁苏 《中国酿造》 CAS 北大核心 2016年第1期82-85,共4页

该研究采用^(60)Co-γ射线辐射的方法,对生物防治菌株长枝木霉(Trichoderma longibrachiatum)JK-15进行诱变育种,以提高其利用甘蔗糖蜜酒精废液产菌体和孢子的能力。经过平板初筛和摇瓶复筛,获得了能够利用单一的甘蔗糖蜜酒精废液大量... 该研究采用^(60)Co-γ射线辐射的方法,对生物防治菌株长枝木霉(Trichoderma longibrachiatum)JK-15进行诱变育种,以提高其利用甘蔗糖蜜酒精废液产菌体和孢子的能力。经过平板初筛和摇瓶复筛,获得了能够利用单一的甘蔗糖蜜酒精废液大量生成生物量的系列优良突变株,并通过平板对峙试验验证了各突变株的对灰霉病菌的生物防治效果,最终得到优良突变菌株CM-5,其在平板培养基上生长速率达到42.33 mm/d,在50 m L液体培养体系中生物量(以细胞干质量计)达到2.22 g,平板对峙抑菌率达到66.7%,较出发菌株均有显著提高。经过5次传代培养,菌株CM-5生长速率和抑菌率仍保持较高且稳定,表明其遗传性状稳定。该研究对长枝木霉在炎热地区的生物防治应用具有重要的推动作用。 展开更多

关键词 长枝木霉 诱变 ^60CO-Γ射线辐射 生物防治 微生物育种

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长枝木霉原生质体制备及再生条件研究 被引量：2

7

作者 丁苏 李献 +4 位作者 李玮 毕方方 林玲 韦俏娜 张瑛 《中国酿造》 CAS 北大核心 2015年第6期58-61,共4页

研究优化了长枝木霉(Trichoderma longibrachiatum)JK-15菌株菌丝体制备原生质体细胞及再生的条件。通过单因素试验和正交试验对影响原生质体形成和再生的菌龄、破壁酶组成、酶解反应温度及时间、渗透压稳定剂等因素进行了筛选优化。结... 研究优化了长枝木霉(Trichoderma longibrachiatum)JK-15菌株菌丝体制备原生质体细胞及再生的条件。通过单因素试验和正交试验对影响原生质体形成和再生的菌龄、破壁酶组成、酶解反应温度及时间、渗透压稳定剂等因素进行了筛选优化。结果表明,长枝木霉菌株JK-15的最适条件为菌丝体菌龄18 h,混合酶组成配比为1.5%蜗牛酶∶1.5%纤维素酶∶0.1%溶壁酶,酶解条件为30℃条件下酶解2.5 h,原生质体制备过程中渗透压稳定剂为0.7 mol/L山梨醇,原生质体再生培养基中渗透压稳定剂为0.7 mol/L蔗糖,实验结果为长枝木霉JK-15的育种工作奠定了良好的技术基础。 展开更多

关键词 长枝木霉 原生质体 生物防治 育种

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颞叶癫痫大鼠海马Akt蛋白表达变化的研究 被引量：4

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作者 吴志国 毕方方 +2 位作者 黄志凌 李国良 肖波 《中国医学工程》 2007年第4期338-340,344,共4页

目的动态观察颞叶癫痫大鼠神经元磷酸化Akt(phospho-Akt)蛋白的表达变化,探讨其在癫痫发生发展中的作用。方法清洁级SD雄性成年大鼠36只,随机分为正常对照组、诱发大鼠癫痫持续状态(statusepilepticus,SE)后3h、6h、12h、24h、3d组。用... 目的动态观察颞叶癫痫大鼠神经元磷酸化Akt(phospho-Akt)蛋白的表达变化,探讨其在癫痫发生发展中的作用。方法清洁级SD雄性成年大鼠36只,随机分为正常对照组、诱发大鼠癫痫持续状态(statusepilepticus,SE)后3h、6h、12h、24h、3d组。用氯化锂LiCl和匹罗卡品(PILO)制备癫痫动物模型,应用免疫组织化学染色技术检测致痫后各时间点磷酸化Akt蛋白表达情况。结果免疫组织化学法显示正常组与假手术组大鼠海马CA1、CA3区可见少量磷酸化Akt阳性细胞,两组间差异无统计学意义(P>0.05);模型组可见CA1、CA3区Akt阳性细胞增加(P<0.01),6h达到高峰,3d回到对照组水平。结论上调磷酸化Akt蛋白表达有利于减少海马神经元凋亡,可能是保护神经损伤的机制之一。 展开更多

关键词 氯化锂 匹罗卡品 癫痫模型 Akt 马来酸桂哌齐特

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一头死于酮病奶牛的部分血液生化指标分析

9

作者 张朝胜 何山红 +5 位作者 何宝祥 苏文伟 蓝勇 韦家周 毕方方 覃庆玉 《广西畜牧兽医》 2009年第5期295-297,共3页

关键词 血液生化指标 奶牛酮病 奶牛场 营养代谢性疾病 实验室检测 挥发性脂肪酸 消化机能紊乱 碳水化合物

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广西奶水牛产后主要脂类指标的动态监测 被引量：3

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作者 韦志坚 张朝胜 +5 位作者 何宝祥 林以营 毕方方 覃庆玉 宋伟 付强 《广西畜牧兽医》 2010年第1期42-43,共2页

关键词 脂类代谢 奶水牛 产后 动态监测 血液生化指标 广西 动态变化规律 营养物质

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新型隐球菌性脑膜炎51例临床分析

11

作者 李富勇 毕方方 《临床荟萃》 CAS 北大核心 2006年第15期1107-1108,共2页

关键词 脑膜炎 隐球菌性 误诊

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