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食品中铜绿假单胞菌实时荧光PCR检测的研究 被引量:12
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作者 杨滴 刘彦泓 +1 位作者 刘岑杰 夏元凤 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2017年第21期154-157,共4页
根据铜绿假单胞菌外毒素A基因片段序列,用Primer express 3.0设计一对特异性引物和一个Taq Man探针,建立铜绿假单胞菌实时荧光PCR检测方法。通过对梯度含量的铜绿假单胞菌标准菌液样品DNA和多种细菌的DNA进行实时荧光PCR检测,来检测其... 根据铜绿假单胞菌外毒素A基因片段序列,用Primer express 3.0设计一对特异性引物和一个Taq Man探针,建立铜绿假单胞菌实时荧光PCR检测方法。通过对梯度含量的铜绿假单胞菌标准菌液样品DNA和多种细菌的DNA进行实时荧光PCR检测,来检测其灵敏度和验证引物和探针的特异性。试验结果表明,只有铜绿假单胞菌产生扩增曲线,其他细菌无扩增,说明引物及Taq Man探针特异性较好,检测灵敏度为1×10~3 CFU/m L。该方法具有很好的研究价值和应用前景。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 实时PCR 检测
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实时荧光PCR检测饲料中鸭源性成分 被引量:6
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作者 杨滴 刘彦泓 +2 位作者 刘岑杰 夏元凤 崔岚 《粮食与饲料工业》 CAS 北大核心 2012年第11期62-63,共2页
根据GenBank中的鸭线粒体DNA基因片段序列,用Primer6.0软件设计针对鸭的特异性扩增引物及探针,建立一种检测鸭源性成分的实时荧光PCR方法。以鸭、鸡、鹅、牛、羊、猪、马、鸽、水貂、鱼、猫肌肉组织DNA进行实时荧光PCR反应,只有鸭具扩... 根据GenBank中的鸭线粒体DNA基因片段序列,用Primer6.0软件设计针对鸭的特异性扩增引物及探针,建立一种检测鸭源性成分的实时荧光PCR方法。以鸭、鸡、鹅、牛、羊、猪、马、鸽、水貂、鱼、猫肌肉组织DNA进行实时荧光PCR反应,只有鸭具扩增曲线,其余样品和空白对照则无扩增曲线,说明该引物及探针只对鸭有特异性。对不同含量的鸭肉粉进行实时荧光PCR反应,结果表明灵敏度约为0.01%(质量分数)。 展开更多
关键词 实时荧光PCR 鸭源性 饲料
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食品中单核细胞增生李斯特氏菌测定能力验证分析 被引量:1
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作者 杨滴 《食品安全导刊》 2022年第26期85-88,共4页
目的:为掌握本实验室食品中单核细胞增生李斯特氏菌的检测能力情况,自愿参加中国食品药品检定研究院组织的食品中单核细胞增生李斯特氏菌检测能力验证。方法:采用常规培养法、全自动酶联免疫荧光分析仪法和实时荧光PCR法3种检测方法进... 目的:为掌握本实验室食品中单核细胞增生李斯特氏菌的检测能力情况,自愿参加中国食品药品检定研究院组织的食品中单核细胞增生李斯特氏菌检测能力验证。方法:采用常规培养法、全自动酶联免疫荧光分析仪法和实时荧光PCR法3种检测方法进行食品中单核细胞增生李斯特氏菌的检测分析。结果:CODE034样品检出单核细胞增生李斯特氏菌,CODE164样品未检出。结论:3种方法均取得了较好的实验结果。以常规培养法为基础,以其他检测方法为辅助,能够准确、快速地取得实验结果,并应用于其他能力样品的检测。 展开更多
关键词 单核细胞增生李斯特氏菌 能力验证 检测
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肉制品中大肠埃希氏菌O157:H7实时荧光PCR检测方法的研究
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作者 杨滴 《食品安全导刊》 2023年第19期95-98,共4页
以大肠埃希氏菌O157:H7菌体抗原基因rfbE基因为靶标,设计特异性引物和探针,建立大肠埃希氏菌O157:H7实时荧光PCR检测方法。对方法的特异性与灵敏性研究,并选取市售的10种肉类制品验证方法可行性。实验结果表明该方法具有良好的特异性和... 以大肠埃希氏菌O157:H7菌体抗原基因rfbE基因为靶标,设计特异性引物和探针,建立大肠埃希氏菌O157:H7实时荧光PCR检测方法。对方法的特异性与灵敏性研究,并选取市售的10种肉类制品验证方法可行性。实验结果表明该方法具有良好的特异性和灵敏性,具有很好的研究价值和应用前景。 展开更多
关键词 大肠埃希氏菌O157:H7 实时荧光PCR 检测
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转基因植物成分检测方法及标准概述 被引量:2
5
作者 刘岑杰 杨滴 《食品安全导刊》 2020年第21期24-24,26,共2页
本文详细介绍了转基因植物成分的检测方法,查阅资料,对国内转基因植物成分的检测方法进行了分析归类,对目前为止现行有效的检测方法进行分类总结。目前现行有效的检测标准主要分为国家标准、农业部标准及公告、行业标准和地方标准。
关键词 转基因植物成分 检测方法 标准
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聚合酶链式反应法检测饲料中鸡源性成分
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作者 刘彦泓 郝苗 +3 位作者 闵建 杨滴 刘岑杰 夏元凤 《粮食与饲料工业》 CAS 北大核心 2010年第4期59-60,共2页
选择鸡线粒体DNA为研究对象,通过特异性引物,建立了饲料中鸡源性成分的PCR检测方法,该方法的最低检出限为0.1%。运用该方法成功检测出饲料中的鸡源性成分。该方法具有很高的特异性和灵敏性,而且简便易行,可以作为鸡源性成分鉴别检测的... 选择鸡线粒体DNA为研究对象,通过特异性引物,建立了饲料中鸡源性成分的PCR检测方法,该方法的最低检出限为0.1%。运用该方法成功检测出饲料中的鸡源性成分。该方法具有很高的特异性和灵敏性,而且简便易行,可以作为鸡源性成分鉴别检测的常规方法。 展开更多
关键词 饲料 PCR检测 鸡源性成分 特异性引物
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豆粉中大豆转基因成分检测能力验证项目检验方法分析
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作者 刘彦泓 杨滴 《食品安全导刊》 2019年第15期129-130,共2页
为进行能力验证,以阳性样品转基因大豆GTS40-3-2为例,采用普通PCR和实时荧光PCR两种检测方法进行检测,得出准确的定性检验结果,。针对PCR实验中容易出现假阳性的情况,给出避免污染的建议,采取正确的应对措施。同时建议选择两种以上检验... 为进行能力验证,以阳性样品转基因大豆GTS40-3-2为例,采用普通PCR和实时荧光PCR两种检测方法进行检测,得出准确的定性检验结果,。针对PCR实验中容易出现假阳性的情况,给出避免污染的建议,采取正确的应对措施。同时建议选择两种以上检验方法,比较后得出检验结论。 展开更多
关键词 转基因大豆 定性检测 能力验证
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基于改进的预扩增实时荧光定量聚合酶链式反应法检验虹鳟源性成分
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作者 白朵兰 洪麟 +5 位作者 杨滴 陈文超 王佳琪 方蕾 刘彦泓 郑秋月 《食品安全质量检测学报》 2025年第13期18-25,共8页
目的建立改进的预扩增实时荧光定量聚合酶链式反应法(quantitative real-time polymerase chain reaction,q PCR)法检验虹鳟源性成分的方法。方法基于对现行标准中虹鳟q PCR方法进行验证和改进提高,建立改进的预扩增q PCR方法,并对两种q... 目的建立改进的预扩增实时荧光定量聚合酶链式反应法(quantitative real-time polymerase chain reaction,q PCR)法检验虹鳟源性成分的方法。方法基于对现行标准中虹鳟q PCR方法进行验证和改进提高,建立改进的预扩增q PCR方法,并对两种q PCR方法进行比较。结果经验证,在采用标准中q PCR方法对虹鳟的近种鱼种银鲑、大西洋鲑等鱼种进行特异性验证时有交叉反应,基于设置预扩增反应步骤的改进q PCR方法特异性良好,对于银鲑、大西洋鲑等近种鱼种未出现交叉扩增。q PCR和预扩增q PCR方法的扩增效率分别为90.25%、104.91%,最低检出限分别为2.99×10^(-3)ng/μL(0.83~8.87 pg/μL,95%置信区间)和1.50×10^(-4)ng/μL(0.09~0.27 pg/μL,95%置信区间)。结论所改进的虹鳟源性成分预扩增q PCR方法具有高特异性、高灵敏度,适用于食品样品中虹鳟源性成分的真实性和掺假检验。 展开更多
关键词 虹鳟源性成分 真实性检验 实时荧光定量聚合酶链式反应法 预扩增实时荧光定量聚合酶链式反应法
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