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猪接触传染性胸膜肺炎放线杆菌血清3型分子鉴定及药敏试验 被引量:9
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作者 李海利 徐引弟 +5 位作者 宋毓民 朱文豪 张青娴 王克领 冯亚杰 候自花 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第1期280-284,共5页
为了解猪接触传染性胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)的血清型及耐药情况,本研究根据GenBank数据库设计1对引物,特异性的扩增950bp核苷酸片段,对血清3型APP进行分子鉴定及药敏试验。结果显示,所得PCR产物经过测序... 为了解猪接触传染性胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)的血清型及耐药情况,本研究根据GenBank数据库设计1对引物,特异性的扩增950bp核苷酸片段,对血清3型APP进行分子鉴定及药敏试验。结果显示,所得PCR产物经过测序,与GenBank已发表的血清3型APP的同源性达99%以上,所分离菌株耐药性较强,大多为多重耐药。通过对血清3型APP进行分子鉴定及药敏试验,为猪传染性胸膜肺炎的鉴定、诊断及防制提供了基础。 展开更多
关键词 猪传染性胸膜肺炎 胸膜肺炎放线杆菌 血清3型 药敏试验
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一株精氨酸支原体的分离培养及分子生物学鉴定
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作者 杨康 马春江 +6 位作者 李海利 杨夷平 段进刚 古丽巴哈尔·卡德尔 陈建豪 张国新 杨帆 《草食家畜》 2025年第2期20-27,共8页
【目的】旨在探究新疆哈密市伊州区某养殖户羊发病死亡的原因。【方法】采集病死羊的肺组织,进行分离培养、实时荧光定量PCR鉴定、普通PCR扩增以及基因测序分析。【结果】在改良的PPLO固体培养基上培养出了支原体;实时荧光定量PCR检测... 【目的】旨在探究新疆哈密市伊州区某养殖户羊发病死亡的原因。【方法】采集病死羊的肺组织,进行分离培养、实时荧光定量PCR鉴定、普通PCR扩增以及基因测序分析。【结果】在改良的PPLO固体培养基上培养出了支原体;实时荧光定量PCR检测结果为支原体感染阳性;普通PCR扩增及基因测序,分离菌株与GenBank数据库中的精氨酸支原体同源性高达100%。【结论】研究结果表明,该养殖户羊发病死亡是由精氨酸支原体感染导致。 展开更多
关键词 精氨酸支原体 分离培养 PCR 16SrRNA 基因测序
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中草药提取物对多重耐药猪胸膜肺炎放线杆菌体外抑菌效果研究 被引量:9
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作者 李海利 方剑玉 +10 位作者 游一 郎利敏 张立宪 张青娴 朱文豪 焦文强 王治方 徐引弟 许峰 王克领 冯丽丽 《中国兽药杂志》 2022年第2期70-77,共8页
为筛选对猪接触传染性胸膜肺炎放线杆菌多重耐药菌株有较好抑菌作用的中草药,挑选穿心莲、黄芩、苦参、白头翁、芒果叶和百里香6种中草药,采用水提取和65%乙醇提取相结合的方法制备单剂中草药的提取液,然后浓缩至含原生药物1 g/mL。采... 为筛选对猪接触传染性胸膜肺炎放线杆菌多重耐药菌株有较好抑菌作用的中草药,挑选穿心莲、黄芩、苦参、白头翁、芒果叶和百里香6种中草药,采用水提取和65%乙醇提取相结合的方法制备单剂中草药的提取液,然后浓缩至含原生药物1 g/mL。采用二倍稀释法分别测定这6种中草药对传染性胸膜肺炎放线杆菌多重耐药菌株的最小抑菌浓度(minimal inhibition concentration,MIC)和最小杀菌浓度(minimal bacteriocidal concentration,MBC),以筛选出体外抑菌效果较好的中草药。结果表明,胸膜肺炎放线杆菌多重耐药菌株抑菌圈最大的是百里香和芒果叶,其抑菌圈直径分别为40 mm和35 mm,其次为白头翁、黄芩、穿心莲和苦参,其抑菌圈直径在8~16 mm之间。百里香、芒果叶、白头翁、黄芩、穿心莲和苦参的最小抑菌浓度分别为0.198、0.198、0.396、0.396、25、25 mg/mL。百里香、芒果叶、白头翁、黄芩、穿心莲和苦参的最小杀菌浓度分别为0.396、0.396、0.792、0.792、50、50 mg/mL。除穿心莲和苦参外,其余4种中草药对胸膜肺炎放线杆菌多重耐药菌株有很多好的抑菌和杀菌效果,其中百里香和芒果叶效果最佳。本结果为由传染性胸膜肺炎放线杆菌多重耐药菌引起的猪接触传染性胸膜肺炎的防控和治疗奠定了基础,为开发中草药相关无抗产品以及防治由多重耐药菌引起的猪接触传染性胸膜肺炎提供了参考。 展开更多
关键词 中草药 猪接触传染性胸膜肺炎 放线杆菌 多重耐药菌 体外抑菌 最小抑菌浓度 最小杀菌浓度
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谷草和羊草对生长獭兔的营养价值评定 被引量:5
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作者 李海利 周松涛 +2 位作者 巩耀进 崔秋佳 谷子林 《中国饲料》 北大核心 2014年第23期34-37,41,共5页
为评定谷草和羊草对生长獭兔的营养价值,本试验将18只62日龄、平均体重(1.65±0.43)kg的健康白色獭兔随机分为3组,每组6个重复,每个重复1只,分别饲喂基础日粮、谷草日粮(15%谷草原料+85%基础日粮)和羊草日粮(15%羊草原料+85%基础日... 为评定谷草和羊草对生长獭兔的营养价值,本试验将18只62日龄、平均体重(1.65±0.43)kg的健康白色獭兔随机分为3组,每组6个重复,每个重复1只,分别饲喂基础日粮、谷草日粮(15%谷草原料+85%基础日粮)和羊草日粮(15%羊草原料+85%基础日粮),并通过套算法测定两种原料营养物质的表观消化率。结果显示:(1)谷草和羊草中的总能(GE)、干物质(DM)、粗灰分(Ash)、粗蛋白质(CP)、粗纤维(CF)、中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)、酸性洗涤木质素(ADL)、粗脂肪(EE)、钙(Ca)、磷(P)和无氮浸出物(NFE)的含量分别为:15.39 MJ/kg、90.48%、10.03%、12.21%、28.25%、59.65%、37.37%、4.76%、1.22%、1.17%、0.13%、38.77%和16.61 MJ/kg、92.33%、5.77%、6.74%、26.77%、55.80%、34.30%、4.25%、3.78%、0.51%、0.12%、49.27%。(2)生长獭兔对谷草和羊草的表观消化能以及对GE、DM、Ash、CP、CF、NDF、ADF、ADL、EE、Ca、P和NFE的表观消化率分别为8.79 MJ/kg、57.18%、52.33%、30.07%、64.41%、21.02%、31.20%、21.10%、5.99%、86.34%、55.89%、39.65%、84.06%和7.86 MJ/kg、47.38%、59.53%、29.33%、71.88%、17.63%、34.93%、18.43%、5.16%、80.96%、56.51%、43.33%、85.88%。鉴于谷草和羊草的营养物质含量及其表观消化率存在一定差异,在配制獭兔日粮时要综合考虑其适宜添加比例。 展开更多
关键词 生长獭兔 谷草 羊草 营养价值
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携带新德里金属β-内酰胺酶的猪源大肠杆菌全基因组测序及植物提取物药物筛选 被引量:1
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作者 李海利 张青娴 +5 位作者 朱文豪 游一 王治方 郎利敏 张立宪 王克领 《中国兽药杂志》 2023年第6期23-34,共12页
为了解大肠杆菌携带新德里金属β-内酰胺酶(New Delhi metallo-β-lactamase,NDM)NDM耐药基因情况及筛选敏感植物提取物。采用16S rRNA菌种鉴定,PCR筛查菌耐药基因,bla NDM、bla TEM和AmpC酶耐药基因的确认,全基因组测序,BLAST和MEGA软... 为了解大肠杆菌携带新德里金属β-内酰胺酶(New Delhi metallo-β-lactamase,NDM)NDM耐药基因情况及筛选敏感植物提取物。采用16S rRNA菌种鉴定,PCR筛查菌耐药基因,bla NDM、bla TEM和AmpC酶耐药基因的确认,全基因组测序,BLAST和MEGA软件对序列进行生物信息学分析、系统进化树分析、NDM亚型鉴定和6种植物提取物药敏药物筛选研究。结果表明,从2021年(1-12月)临床猪腹泻病例中分离鉴定的91株大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)中鉴定出1株同时携带新德里金属β-内酰胺酶NDM4、NDM5和β内酰胺酶blaTEM、AmpC酶的大肠杆菌(HN2187)。对其进行11种抗生素和6种植物提取物药物敏感性测试,结果显示HN2187菌株对其均耐药。而HN2187对血根碱、贯叶连翘提取物敏感,对黄芩、姜黄素、千里光和大蒜提取物耐药。HN2187产B类酶,携带NDM4、NDM5、bla TEM、AmpC酶耐药基因,其中bla NDM-4位于质粒pNDM4-HN2187(Plasmid B)上,bla NDM-5位于质粒pNDM5-HN2187(Plasmid A)上,bla TEM1位于质粒pTEM1-HN2187(Plasmid B)上,AmpC酶耐药基因位于染色体上,分别介导bla NDM-4、bla NDM-5、bla TEM和AmpC耐药基因,是耐药菌传播的重要载体。以上研究表明,携带NDM4和NDM5的多重耐药菌已在养殖场传播和流行,应加强该类耐药基因的流行调查、监测和新药物研究,为临床超级细菌和多重耐药菌感染的流行和防治提供理论基础。 展开更多
关键词 碳青霉烯酶 Β内酰胺酶 新德里金属β-内酰胺酶 NDM5 NDM4 blaTEM AMPC 大肠埃希氏菌 细菌耐药
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汽车行李厢异响故障分析
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作者 李海利 张彬 黄宏 《汽车电器》 2022年第8期69-72,76,共5页
某新车型量产初期在进行路试检验时,批量出现行李厢异响问题。行李厢异响问题严重影响客户使用,引起客户极大抱怨,本文将从设计、品质、装配、对标等多个角度对该车型行李厢异响故障因素做出充分分析,并制定出有效措施,以解决此行李厢... 某新车型量产初期在进行路试检验时,批量出现行李厢异响问题。行李厢异响问题严重影响客户使用,引起客户极大抱怨,本文将从设计、品质、装配、对标等多个角度对该车型行李厢异响故障因素做出充分分析,并制定出有效措施,以解决此行李厢异响问题。 展开更多
关键词 汽车 行李厢 异响
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原花青素饲料添加剂在动物生产中的应用 被引量:2
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作者 李海利 周松涛 +2 位作者 巩耀进 崔嘉 谷子林 《北方牧业》 2014年第23期15-15,共1页
在饲料中长期添加抗生素,不但给从业者带来巨大经济效益,也给动物、畜牧业、农业乃至人类带来众多负面影响,导致许多国家对抗生素类饲料添加剂的使用持谨慎和消极的态度,甚至立法全面禁止使用。因此,寻找安全并能有效替代抗生素的... 在饲料中长期添加抗生素,不但给从业者带来巨大经济效益,也给动物、畜牧业、农业乃至人类带来众多负面影响,导致许多国家对抗生素类饲料添加剂的使用持谨慎和消极的态度,甚至立法全面禁止使用。因此,寻找安全并能有效替代抗生素的新型绿色饲料添加剂成为业界研究热点之一。 展开更多
关键词 抗生素类饲料添加剂 动物生产 原花青素 绿色饲料添加剂 应用 经济效益 畜牧业
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河南省猪链球菌的分离鉴定及耐药性分析 被引量:29
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作者 徐引弟 孙帅杰 +6 位作者 王治方 张青娴 朱文豪 焦文强 李海利 郎利敏 王克领 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第2期501-509,共9页
为探讨河南省猪链球菌的血清型分布和耐药性情况,本试验对2016年5月~2017年5月从河南省猪场采集的各种组织病料进行猪链球菌的分离培养、生化鉴定及PCR鉴定,并进行了血清群的分群鉴定和血清型的分型鉴定,对其中的2型猪链球菌进行了药敏... 为探讨河南省猪链球菌的血清型分布和耐药性情况,本试验对2016年5月~2017年5月从河南省猪场采集的各种组织病料进行猪链球菌的分离培养、生化鉴定及PCR鉴定,并进行了血清群的分群鉴定和血清型的分型鉴定,对其中的2型猪链球菌进行了药敏试验。结果显示,试验共鉴定出189株猪链球菌,流行的猪链球菌的血清群主要以D群为主,其次是G群和C群;优势的血清型是2型、7型、9型和1型。其中87株为2型猪链球菌,超过90%的2型菌株对β-内酰胺类(青霉素G、阿莫西林和头孢菌素类)、氯霉素、万古霉素、环丙沙星敏感,超过40%的2型菌株对多西环素、四环素、红霉素、复方新诺明、丁胺卡那霉素、克林霉素、链霉素、米诺环素产生耐药性。以上结果为指导猪场使用敏感药物及时控制疫情、选择血清型相符的疫苗进行预防及减少损失提供参考依据。 展开更多
关键词 猪链球菌 血清型 血清群 耐药性
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猪链球菌14型的分离鉴定及生物学特性研究 被引量:13
9
作者 王治方 徐引弟 +8 位作者 张青娴 朱文豪 白红杰 焦文强 李海利 许峰 王克领 张彬 娄治国 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第6期1861-1869,共9页
为了检测确定2019年5月河南某规模化猪场一栋保育仔猪发病猪群的病原,本研究从送检的发病猪关节液中分离获得1株细菌。通过细菌纯化培养、革兰氏染色、形态学观察及猪链球菌gdh基因PCR扩增,确定该分离菌株为猪链球菌。用猪链球菌分型引... 为了检测确定2019年5月河南某规模化猪场一栋保育仔猪发病猪群的病原,本研究从送检的发病猪关节液中分离获得1株细菌。通过细菌纯化培养、革兰氏染色、形态学观察及猪链球菌gdh基因PCR扩增,确定该分离菌株为猪链球菌。用猪链球菌分型引物对该菌株进行PCR扩增分型鉴定及软件比对分析,结果表明该分离菌株为猪链球菌14型,与猪链球菌JS14株(GenBank登录号:CP002465.1)同源性为100%。毒力基因检测结果表明,该菌株的同时携带有epf、mrp、sly、fbps、orf2毒力基因,属于高致病性菌株。小鼠致病性试验结果也证明该菌株是一株高致病性猪链球菌。药物敏感性试验结果显示,该菌株对β内酰胺类和喹诺酮类药物敏感,对氨基糖苷类、四环素类、大环内酯类和磺胺类高度耐药,表现出多重耐药现象。对该菌株进行5大类24种耐药基因检测,该菌株同时携带有blaTEM、aadA1、strA、strB、aacC2、aphA1、tet(B)、gyrA、parC、sul2耐药基因。该研究为后续进一步开展猪链球菌14型流行特点和致病机制研究奠定了基础,为猪链球菌14型临床防控提供了理论依据,同时具有重要的公共卫生意义。 展开更多
关键词 链球菌14型 分型鉴定 毒力基因 药敏试验 耐药基因
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副猪嗜血杆菌血清7型菌株毒力及耐药性分析 被引量:6
10
作者 王治方 徐引弟 +4 位作者 朱文豪 张青娴 焦文强 李海利 王克领 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第8期3245-3255,共11页
【目的】了解河南地区副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)血清7型流行菌株的毒力及耐药情况。【方法】以Hps血清7型参考菌株为对照,对6株Hps血清7型临床分离菌株进行16S rRNA基因扩增、序列分析、毒力基因检测、致病性试验和药敏... 【目的】了解河南地区副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)血清7型流行菌株的毒力及耐药情况。【方法】以Hps血清7型参考菌株为对照,对6株Hps血清7型临床分离菌株进行16S rRNA基因扩增、序列分析、毒力基因检测、致病性试验和药敏试验研究。【结果】16S rRNA基因测序及相似性比对结果显示,菌株1436与参考菌株0007相似性为100%,菌株1565、1624与参考菌株0007相似性均为98.6%。系统发育树分析表明,菌株1436与参考菌株0007亲缘关系最近;菌株1624与参考菌株0007亲缘关系最远。6株临床菌株与参考菌株表现为2种毒力基因型,菌株均携带有vta1、vta2、vta3、wza、nanH、cdtA、cdtB、cdtC和espP2毒力基因,其中5株临床菌株还携带ompP2毒力基因。豚鼠致病性试验结果显示,临床菌株毒力较参考菌株表现出不同程度的增强,参考菌株不能感染豚鼠发病,未表现任何临床症状;临床菌株可感染豚鼠发病,表现出一定的临床症状,发病率为20%~40%,死亡率为0。参考菌株和临床菌株均对头孢他啶和头孢噻呋敏感,对强力霉素、氟苯尼考中介,对新霉素、卡那霉素、阿米卡星、红霉素、替米考星等耐药,且均表现出多重耐药现象。【结论】Hps血清7型临床菌株有一定的致病性,但毒力较弱,对头孢类药物敏感,有明显的多重耐药现象,临床上应注意对该血清型的防控。本研究为Hps血清7型流行病学、致病机制研究奠定了基础,为Hps血清7型的临床防控提供了参考依据。 展开更多
关键词 副猪嗜血杆菌(Hps) 血清7型 分型鉴定 毒力基因 致病性试验 药敏试验
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猪源产超广谱β-内酰胺酶大肠杆菌的耐药性调查与耐药基因型分析 被引量:14
11
作者 张青娴 徐引弟 +8 位作者 王治方 郎利敏 李海利 焦文强 朱文豪 张立宪 游一 许峰 王克领 《养猪》 2019年第4期105-108,共4页
为了解猪源产超广谱β-内酰胺酶(Extended Spectrum Beta-Lactamases,ESBLs)大肠杆菌的耐药基因型分布情况,采用CLSI推荐方法进行ESBLs表型检测和确证试验,采用PCR方法ESBLs耐药基因型分析。结果表明,60.21%(112/186)的猪源大肠杆菌菌株... 为了解猪源产超广谱β-内酰胺酶(Extended Spectrum Beta-Lactamases,ESBLs)大肠杆菌的耐药基因型分布情况,采用CLSI推荐方法进行ESBLs表型检测和确证试验,采用PCR方法ESBLs耐药基因型分析。结果表明,60.21%(112/186)的猪源大肠杆菌菌株为ESBLs阳性。blaCTX-M、blaTEM、blaSHV和blaOXA型ESBLs菌株检出率分别为91.07%、68.75%、4.46%和1.78%。由此可见,河南部分猪场大肠杆菌广泛流行ESBLs,流行的主要基因型为blaCTX-M型和blaCTX-M+blaTEM型,且多为复合基因型耐药菌株。 展开更多
关键词 大肠杆菌 超广谱Β-内酰胺酶 基因型 耐药性
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副猪嗜血杆菌14型的分离鉴定和药敏试验 被引量:4
12
作者 徐引弟 王治方 +5 位作者 焦文强 朱文豪 李海利 张青娴 郞利敏 王克领 《动物医学进展》 北大核心 2023年第1期7-11,共5页
为了明确河南省某规模化猪场断奶保育猪副猪嗜血杆菌感染情况,从濒死期病猪的肺脏、心血样品中分离获得1株细菌,通过对该株细菌分离鉴定、血清型分型、致病性试验、毒力基因检测和药敏试验等一系列试验,证实该株细菌为副猪嗜血杆菌14型... 为了明确河南省某规模化猪场断奶保育猪副猪嗜血杆菌感染情况,从濒死期病猪的肺脏、心血样品中分离获得1株细菌,通过对该株细菌分离鉴定、血清型分型、致病性试验、毒力基因检测和药敏试验等一系列试验,证实该株细菌为副猪嗜血杆菌14型,该菌株携带有capd、vta1、vta2、vta3、wza、hhdA、hhdB、ompP2、nanH、cdtA、cdtB、cdtC、espP等13种主要毒力基因;该菌株对保育仔猪表现出较强的致病性,对头孢他啶、氟苯尼考、头孢噻呋、氨苄西林、强力霉素、土霉素、氧氟沙星敏感,对青霉素、阿米卡星、诺氟沙星、复方新诺明耐药。研究结果可为副猪嗜血杆菌血清14型流行病学研究提供参考。 展开更多
关键词 副猪嗜血杆菌血清14型 鉴定分型 毒力基因 毒力试验 药敏试验
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2型猪链球菌河南株的生物学特性研究 被引量:6
13
作者 王治方 徐引弟 +7 位作者 张青娴 朱文豪 焦文强 李海利 许峰 王克领 张彬 娄治国 《养猪》 2020年第3期97-102,共6页
从河南省豫东某规模化猪场保育猪群发生疫情的病死猪脑组织分离得到一株细菌,通过对该株细菌纯化鉴定、血清型分型鉴定、致病性试验及毒力基因检测、药敏试验和耐药基因检测等一系列研究,结果表明,该株细菌鉴定为2型猪链球菌,毒力较强,... 从河南省豫东某规模化猪场保育猪群发生疫情的病死猪脑组织分离得到一株细菌,通过对该株细菌纯化鉴定、血清型分型鉴定、致病性试验及毒力基因检测、药敏试验和耐药基因检测等一系列研究,结果表明,该株细菌鉴定为2型猪链球菌,毒力较强,为携带胞外因子epf基因、溶血素sly基因、溶菌酶释放蛋白mrp基因的3个毒力基因的强毒力菌株;该菌株对头孢他啶、阿莫西林、氨苄西林、青霉素、复方新诺明、左氟沙星、氧氟沙星等β-内酰胺类、磺胺类和喹诺酮类药物敏感;对氨基糖苷类、四环素类和大环内酯类药物高度耐药,携带有β-内酰胺类耐药基因blaTEM和氨基糖苷类耐药基因strB。该研究对临床防控猪链球菌病具有重要意义。 展开更多
关键词 猪链球菌 分型鉴定 毒力基因 药敏试验 耐药基因
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22味中药对犊牛腹泻大肠杆菌的体外抑菌试验 被引量:11
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作者 郎利敏 李海利 +5 位作者 方剑玉 张立宪 游一 朱文豪 张青娴 王二耀 《中兽医医药杂志》 CAS 2023年第1期53-56,共4页
开展了乌梅、白头翁、黄连、穿心莲等22味中药对犊牛腹泻大肠杆菌的体外抑菌试验。按照常规法制备中药水提物,采用平板打孔法和微量稀释法测定了22味中药对犊牛腹泻大肠杆菌的抑菌圈直径、最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果显... 开展了乌梅、白头翁、黄连、穿心莲等22味中药对犊牛腹泻大肠杆菌的体外抑菌试验。按照常规法制备中药水提物,采用平板打孔法和微量稀释法测定了22味中药对犊牛腹泻大肠杆菌的抑菌圈直径、最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果显示,22味中药中有10味中药对犊牛腹泻大肠杆菌有抑菌作用,其中乌梅、诃子、五倍子和半边莲对犊牛腹泻大肠杆菌的抑菌作用最佳,抑菌圈直径为15 mm以上,为高度敏感;其次是黄连、秦皮、穿心莲、连翘、金银花、石榴皮,抑菌圈直径均大于10 mm,为中度敏感;黄柏、紫花地丁等12味中药对犊牛腹泻大肠杆菌无抑菌作用。对五倍子、乌梅、诃子和半边莲等抑菌作用较好的中药可进一步开展研究。 展开更多
关键词 中药 犊牛腹泻 大肠杆菌 体外抑菌作用 最低抑菌浓度 最小杀菌浓度
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鸡毒支原体河南株的分离鉴定及生物学特性研究 被引量:4
15
作者 徐引弟 焦文强 +4 位作者 王治方 李海利 张青娴 朱文豪 王克领 《山东农业科学》 2018年第11期124-128,共5页
为确诊2017年4月引起河南省许昌市某蛋鸡场蛋鸡发生呼吸道、关节疾病的病原,采集发生呼吸困难、关节肿大蛋鸡的肺、气管、关节液共21份病料,通过病原分离培养、16S rRNA基因序列测定比对,确定病原为鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum... 为确诊2017年4月引起河南省许昌市某蛋鸡场蛋鸡发生呼吸道、关节疾病的病原,采集发生呼吸困难、关节肿大蛋鸡的肺、气管、关节液共21份病料,通过病原分离培养、16S rRNA基因序列测定比对,确定病原为鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG),共分离鉴定12株鸡毒支原体。对其中分离自肺的毒株HNMga1进行16S rRNA序列分析、动物试验和药敏试验,发现该菌对鸡具有较强毒力,对大观霉素、环丙沙星、左氟沙星、林可霉素、氟苯尼考、乙酰螺旋霉素、克林霉素最为敏感。本研究为下一步研制鸡毒支原体的诊断试剂和筛选疫苗毒株打下基础,同时为鸡毒支原体病的诊断和防治提供了依据。 展开更多
关键词 鸡毒支原体 分离鉴定 毒力 药敏试验
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副猪嗜血杆菌血清7型菌株的分离鉴定及生物学特性研究 被引量:3
16
作者 王治方 朱文豪 +4 位作者 徐引弟 张青娴 焦文强 李海利 王克领 《养猪》 2022年第4期89-93,共5页
为了掌握河南某规模化猪场保育猪发病猪群的感染病原,研究从濒死期病猪的肺脏、心血样品中分离获得一株细菌,通过对该株细菌分离鉴定、血清型分型、致病性试验、毒力基因检测和药敏试验等一系列研究工作。结果表明,该株细菌为副猪嗜血杆... 为了掌握河南某规模化猪场保育猪发病猪群的感染病原,研究从濒死期病猪的肺脏、心血样品中分离获得一株细菌,通过对该株细菌分离鉴定、血清型分型、致病性试验、毒力基因检测和药敏试验等一系列研究工作。结果表明,该株细菌为副猪嗜血杆菌,血清型为7型,与副猪嗜血杆菌vHPS7株(GenBank登录号:CP049089)同源性为100%。该菌株同时携带有vta1、vta2、vta3、wza、ompP2、nanH、cdtA、cdtB、dtC、espP等毒力基因,结合豚鼠致病性试验结果和临床发病情况,该菌株具有较强的致病性;对头孢噻呋、头孢他啶、强力霉素、土霉素、四环素、阿奇霉素6种药物敏感;对青霉素G、阿莫西林、氨苄西林、复方新诺明、左氟沙星、氧氟沙星、恩诺沙星、环丙沙星、壮观霉素、卡那霉素、阿米卡星11种药物耐药。该研究为今后副猪嗜血杆菌血清7型致病机制研究奠定了基础,为副猪嗜血杆菌血清7型的临床防控提供了理论基础。 展开更多
关键词 副猪嗜血杆菌血清7型 分型鉴定 毒力基因 药敏试验
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副猪嗜血杆菌河南分离株的优势血清型和毒力基因研究 被引量:8
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作者 张青娴 徐引弟 +3 位作者 王治方 朱文豪 焦文强 李海利 《养猪》 2020年第6期89-93,共5页
为了解河南省副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)的血清型和毒力基因的流行与分布情况,对2017-2018年河南地区分离到的46株HPS,利用PCR反应鉴定血清型与毒力基因。结果显示,46株HPS共检测出7种血清型(2、4、5/12、6、7、11、13),... 为了解河南省副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)的血清型和毒力基因的流行与分布情况,对2017-2018年河南地区分离到的46株HPS,利用PCR反应鉴定血清型与毒力基因。结果显示,46株HPS共检测出7种血清型(2、4、5/12、6、7、11、13),血清型5/12和4为优势血清型,最流行的血清型为5/12型(15/46,32.6%),其次是4型(12/46,26.1%)和7型(7/46,15.2%)。强毒株和中等毒力株含有大多数毒力基因,无毒力菌株一般只含有vta1、ompP2、nanH和espP2基因。可见,毒力基因与血清型有很强的相关性。 展开更多
关键词 副猪嗜血杆菌 血清型 毒力基因
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亚麻籽全麦对泌乳奶牛产奶量、乳成分和脂肪酸组成的影响 被引量:3
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作者 刘英丽 马全朝 +1 位作者 李海利 易先国 《中国饲料》 北大核心 2020年第10期49-52,共4页
本研究旨在确定全亚麻籽对奶牛生产性能和乳脂肪酸组成的影响。试验将平均产奶量为(165±6.8)kg、平均体重为(433±12)kg的42头荷斯坦奶牛随机分为3组,每组14头(每个重复1头),对照组饲喂8kg含21%粗蛋白质的浓缩料+300g棕榈油,处... 本研究旨在确定全亚麻籽对奶牛生产性能和乳脂肪酸组成的影响。试验将平均产奶量为(165±6.8)kg、平均体重为(433±12)kg的42头荷斯坦奶牛随机分为3组,每组14头(每个重复1头),对照组饲喂8kg含21%粗蛋白质的浓缩料+300g棕榈油,处理1组饲喂对照组日粮+344g/d全亚麻籽+150g棕榈油,处理2组饲喂对照组日粮+688g/d全亚麻籽+300g棕榈油。结果:处理组粗蛋白质的总摄入量较对照组分别提高了4.28%和6.83%(P<0.05)。此外,处理组净能中摄入量也较对照组分别提高了3.28%和3.75%(P<0.05)。处理2组中C18:1和C18:3脂肪酸较对照组分别提高了39.27%和191.30%(P<0.05)。同时,处理组乳中不饱和脂肪酸含量分别较对照组提高了18.10%和34.29%(P<0.05),但饱和脂肪酸含量分别较对照组降低了6.57%和13.34%(P<0.05)。结论:粮补充全珠亚麻籽对泌乳奶牛的产奶量和乳成分没有显著影响,但同时补充300g/d的棕榈油可以提高乳中C18:1和C18:3不饱和脂肪酸,降低饱和脂肪酸含量。 展开更多
关键词 亚麻籽 奶牛 乳成分 脂肪酸
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副猪格拉菌血清2型毒力及耐药性分析 被引量:1
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作者 王治方 徐引弟 +5 位作者 朱文豪 焦文强 张青娴 李海利 许峰 王克领 《广东农业科学》 CAS 2023年第5期112-120,共9页
【目的】副猪格拉菌是引起猪格拉泽氏病的病原,是危害养猪业最为严重的细菌性病原之一,该菌血清型众多,不同血清型之间交叉保护力弱。血清2型是中等毒力毒株,近年来临床分离比例越来越高,危害越来越严重。从河南某规模化猪场保育猪群分... 【目的】副猪格拉菌是引起猪格拉泽氏病的病原,是危害养猪业最为严重的细菌性病原之一,该菌血清型众多,不同血清型之间交叉保护力弱。血清2型是中等毒力毒株,近年来临床分离比例越来越高,危害越来越严重。从河南某规模化猪场保育猪群分离到副猪格拉菌血清2型并进行系列试验,为科学防控该病提供参考。【方法】对副猪格拉菌临床疑似病例猪只无菌采集肺脏、气管、心血等样品,通过细菌分离纯化、革兰氏染色镜检、常规PCR、豚鼠致病性试验及琼脂扩散药敏试验等方法,对疑似细菌进行形态观察、鉴定、血清型分型、毒力基因检测、耐药基因检测、致病性和耐药性等一系列生物学特性研究。【结果】从肺脏样品中分离获得1株副猪格拉菌,经鉴定为血清2型,该菌株携带vta1、vta2、vta3、wza、ompP2、nanH、cdtA、cdtB、cdtC、espP2毒力基因,对豚鼠有较强的致病力。该菌株携带有aadA1、strA、strB、aphA1、tet(B)、sul2多个耐药基因,对青霉素G、卡那霉素、阿米卡星、链霉素、四环素、土霉素、复方新诺明有较强的耐药性;对头孢噻呋、头孢他啶、阿莫西林、氨苄西林、左氟沙星、氧氟沙星、恩诺沙星、环丙沙星敏感性较好,临床用药效果显著。【结论】分离出的副猪格拉菌2型菌株毒力较强,且能透过血脑屏障,有明显的多重耐药性。研究结果可为副猪格拉菌血清2型流行病学调查、致病机制研究以及临床防控措施制定提供参考。 展开更多
关键词 副猪格拉菌血清2型 毒力基因 致病性 药敏试验 耐药基因
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快速直接PCR检测猪肺炎支原体方法的建立及其应用 被引量:3
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作者 徐引弟 张青娴 +4 位作者 王治方 焦文强 李海利 朱文豪 王克领 《养猪》 2019年第6期100-102,共3页
为了对河南省猪场猪肺炎支原体的感染情况进行调查,试验设计1对引物,对疑似猪肺炎支原体的肺组织进行直接PCR扩增,并进行了特异性、敏感性、重复试验,建立了猪肺炎支原体的快速直接PCR方法。2017年1月至2018年12月从河南省猪场发生重症... 为了对河南省猪场猪肺炎支原体的感染情况进行调查,试验设计1对引物,对疑似猪肺炎支原体的肺组织进行直接PCR扩增,并进行了特异性、敏感性、重复试验,建立了猪肺炎支原体的快速直接PCR方法。2017年1月至2018年12月从河南省猪场发生重症呼吸困难猪的实变肺脏共采集348份,用建立的PCR方法进行鉴定,猪肺炎支原体阳性226份,阳性率为64.94%。表明猪肺炎支原体的感染率极高,是危害猪场的较为普遍、严重的病原。 展开更多
关键词 猪肺炎支原体 快速直接PCR 感染情况
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