重组人酸性成纤维细胞生长因子促进创伤愈合的研究 被引量：41

1

作者 李校堃 许华 +4 位作者 付小兵 郑青 黄亚东 赵文 吴晓萍 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期312-315,共4页

目的　研究重组人酸性成纤维细胞生长因子 (rh-a FGF)对兔创伤的促愈合作用。方法　采用兔背部刀割伤模型 ,将 rh-a FGF溶液隔日一次滴注于创面 ,用创面照像、透明膜描记称量法记录伤后第 4、8、1 2、1 6天创面面积 ,用注水法测量伤腔容... 目的　研究重组人酸性成纤维细胞生长因子 (rh-a FGF)对兔创伤的促愈合作用。方法　采用兔背部刀割伤模型 ,将 rh-a FGF溶液隔日一次滴注于创面 ,用创面照像、透明膜描记称量法记录伤后第 4、8、1 2、1 6天创面面积 ,用注水法测量伤腔容积 ,伤后第 8、1 6天取创面组织 ,观察创面的病理学变化 ,包括肉芽组织生长与再上皮化情况。结果　rh-a FGF可明显加速兔皮肤创伤的愈合 ,使创面面积明显缩小 (P<0 .0 5 ) ,使伤腔容积明显减少 (P<0 .0 5 )。组织学检查 :rh-a FGF组创面伤后 8天成纤维细胞生长活跃、数量多 ,其毛细血管胚芽与成纤维细胞数量显著多于对照组 ;伤后 1 6天 ,创面收缩与再上皮化明显 ,新生上皮向创面中心爬行较快。结论　 rh-a FGF对兔背部刀伤创面有明显的促修复作用。 展开更多

关键词 重组人酸性成纤维细胞生长因子 创伤 创面修复 动物实验

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人酸性成纤维细胞生长因子的高效表达 被引量：10

2

作者 李校堃 吴晓萍 +4 位作者 郑青 黄亚东 许华 姚成灿 赵文 《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2001年第12期61-64,共4页

构建能高效表达人酸性成纤维细胞生长因子 (haFGF)的基因工程菌 ,优化产物分离纯化条件 ,并对纯化产物进行理化性质鉴定 .采用PCR方法扩增haFGFcDNA ,将该cDNA片段插入表达载体 pET3c的表达框架中 ,筛选得到了重组质粒pET3c_haFGF ,转... 构建能高效表达人酸性成纤维细胞生长因子 (haFGF)的基因工程菌 ,优化产物分离纯化条件 ,并对纯化产物进行理化性质鉴定 .采用PCR方法扩增haFGFcDNA ,将该cDNA片段插入表达载体 pET3c的表达框架中 ,筛选得到了重组质粒pET3c_haFGF ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,构建了表达菌株BL2 1(DE3) / pET3c_haFGF .IPTG诱导表达 ,通过离子交换、肝素亲和两步层析的方法分离纯化产物 .用MTT法测定产物的活性 .haFGF的表达量约为 2 0 % .经过两步层析纯化 ,获得了电泳纯的haFGF样品 .纯化haFGF样品的比活性为ED50 小于 4 .0ng/mL .BL2 1(DE3) / pET3c表达系统能高效表达haFGF ,经过纯化得到了理化性质及生物活性与天然haFGF对照品一致的重组人酸性成纤维细胞生长因子 . 展开更多

关键词 人酸性成纤维细胞生长因子 诱导表达 分离纯化 基因工程 氨基酸残基 理化性质 生物活性

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bFGF对庆大霉素及缺血性肾损伤的保护作用 被引量：9

3

作者 李校堃 黄巨恩 +1 位作者 梁钢 梁祖鼎 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期316-320,共5页

目的　探索碱性成纤维细胞生长因子 (b FGF)对庆大霉素 (GM)和缺血性肾损伤的保护作用。方法　实验分两部分 :GM肾毒性拮抗作用研究及缺血性肾损伤拮抗作用研究。结果　两部分研究中对照组或模型组均可见肾小管上皮细胞明显肿胀、变性... 目的　探索碱性成纤维细胞生长因子 (b FGF)对庆大霉素 (GM)和缺血性肾损伤的保护作用。方法　实验分两部分 :GM肾毒性拮抗作用研究及缺血性肾损伤拮抗作用研究。结果　两部分研究中对照组或模型组均可见肾小管上皮细胞明显肿胀、变性和坏死 ;实验组的肾小管上皮细胞损伤较轻或形态基本正常 ,而且b FGF可明显降低血清 BUN、Scr、MDA含量和组织 MDA、NO含量 ,增强 Ca2 + -Mg2 + -ATP酶活性。结论　b FGF对庆大霉素和缺血性肾小管损伤有很好的保护作用。 展开更多

关键词 碱性成纤维细胞生长因子 庆大霉素 肾毒性 缺血-再灌注损伤 动物实验

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茶多酚和茶色素对紫外线照射致小鼠皮肤光老化的防护作用 被引量：17

4

作者 张素慧 吕俊华 +1 位作者 李校堃 郑青 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期561-564,共4页

目的 :研究茶多酚、茶色素对紫外线照射致小鼠皮肤光老化的防护作用。方法 :光镜下观察茶多酚、茶色素对真皮弹性纤维的影响 ;通过嵌套PCR检测皮肤组织线粒体DNA(mtDNA)的缺失突变。结果 :茶多酚、茶色素组的弹性纤维断裂、卷曲的程度... 目的 :研究茶多酚、茶色素对紫外线照射致小鼠皮肤光老化的防护作用。方法 :光镜下观察茶多酚、茶色素对真皮弹性纤维的影响 ;通过嵌套PCR检测皮肤组织线粒体DNA(mtDNA)的缺失突变。结果 :茶多酚、茶色素组的弹性纤维断裂、卷曲的程度较模型组轻 ,且mtDNA的缺失突变也无模型组严重。结论 :茶多酚、茶色素能改善光老化模型小鼠真皮弹性纤维的病变 ,两者可不同程度地缓解小鼠皮肤组织mtDNA的缺失突变。 展开更多

关键词 茶多酚 茶色素 紫外线 弹性纤维 线粒体DNA 防护作用

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非促有丝分裂型人酸性成纤维细胞生长因子的受体结合特性及对MAPK信号通路的影响 被引量：18

5

作者 汪小凤 郑青 +6 位作者 蔡绍晖 吴晓萍 许华 赵文 苏志坚 李校堃 张敏 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期179-182,共4页

目的:研究非促分裂人酸性成纤维细胞生长因子(non- mitogenetichumanacidicfibroblastgrowthfac tor,nm haFGF)促细胞增殖活性的变化及其作用机制。方法:采用MTT法测定人酸性成纤维细胞生长因子(haFGF)和nm- haFGF对NIH3T3细胞株的增殖... 目的:研究非促分裂人酸性成纤维细胞生长因子(non- mitogenetichumanacidicfibroblastgrowthfac tor,nm haFGF)促细胞增殖活性的变化及其作用机制。方法:采用MTT法测定人酸性成纤维细胞生长因子(haFGF)和nm- haFGF对NIH3T3细胞株的增殖活性;采用受体放射性配基结合法,测定haFGF和nm- haFGF与其受体结合的亲和力及受体总结合位点数RT ;利用Western印迹检测haFGF和nm- haFGF分别作用于NIH3T3细胞后MAPK信号通路中ERK信号分子的表达。结果:与haFGF比较,nm- haFGF对NIH3T3细胞的促增殖活性降低,nm -haFGF与NIH3T3细胞胞膜上aFGF受体结合的亲和力下降,但与受体结合的总位点数不变。Western半定量检测结果显示,nm -haFGF组信号蛋白ERK的表达水平明显低于haFGF组。结论:nm -haFGF与受体结合能力下降,下调MAPK信号通路是导致nm haFGF的促分裂活性降低的主要原因之一。 展开更多

关键词 非促分裂人酸性成纤维细胞生长因子 受体 信号通路

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nmhaFGF对SD大鼠缺血再灌注视网膜SOD、MDA、NO的影响 被引量：9

6

作者 郑青 湛敏 +2 位作者 许华 吴晓萍 李校堃 《山东医药》 CAS 北大核心 2005年第34期15-16,共2页

目的观察非促分裂人酸性成纤维细胞生长因子(nmhaFGF)对大鼠视网膜缺血再灌注损伤后视网膜超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)的影响。方法40只SD大鼠随机分为对照组10只,实验组(nmhaFGF组)30只。实验组(大鼠左眼)又分为nm... 目的观察非促分裂人酸性成纤维细胞生长因子(nmhaFGF)对大鼠视网膜缺血再灌注损伤后视网膜超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)的影响。方法40只SD大鼠随机分为对照组10只,实验组(nmhaFGF组)30只。实验组(大鼠左眼)又分为nmhaFGF低剂量组(1.25μg组)、nmhaFGF中剂量组(2.5μg组)、nmhaFGF高剂量组(5μg组)各10只,右眼为模型组(给予等量生理盐水)。采用升高眼内压的方法建立大鼠视网膜缺血再灌注模型。再灌注24h后分光光度法测定视网膜MDA、SOD含量,GRIESS反应测定NO含量。结果与模型组相比,nmhaFGF中剂量组、nmhaFGF高剂量组MDA含量显著降低(P<0.01),SOD、NO含量显著升高(P<0.05);nmhaFGF低剂量组和模型组之间SOD、MDA、NO含量没有显著差异(P>0.05)。结论nmhaFGF具有抗视网膜缺血再灌注氧自由基的作用;视网膜缺血再灌注损伤时,nmhaFGF可以增加视网膜内NO的含量,并呈现一定的量效关系。 展开更多

关键词 非促分裂人酸性成纤维细胞生长因子 视网膜 缺血再灌注 超氧化物歧化酶 丙二醛 一氧化氮

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重组人酸性成纤维细胞生长因子皮肤用药的长期毒性研究 被引量：12

7

作者 许华 李校堃 +6 位作者 郑青 杨晓明 黄亚东 赵文 姚成灿 吴晓萍 黄芝瑛 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期46-50,共5页

目的 :研究重组人酸性成纤维细胞生长因子 (rhaFGF)皮肤用药的长期毒性。方法 :对新西兰兔破损皮肤连续给药 2 8d ,剂量分别为 3 60 0 ,180 0 ,90 0U/cm2 ,观察rhaFGF用药期间和停药后对动物血液学、血液生化学、组织学等方面的影响。结... 目的 :研究重组人酸性成纤维细胞生长因子 (rhaFGF)皮肤用药的长期毒性。方法 :对新西兰兔破损皮肤连续给药 2 8d ,剂量分别为 3 60 0 ,180 0 ,90 0U/cm2 ,观察rhaFGF用药期间和停药后对动物血液学、血液生化学、组织学等方面的影响。结果 :rhaFGF的无毒剂量为 90 0U/cm2 ;rhaFGF180 0U/cm2 用药可见个别动物出现淋巴结、脾白髓、圆小囊固有层及胸腺滤泡增生 ;3 60 0U/cm2 用药可见半数以上动物淋巴结出现淋巴等器官滤泡增生 ,偶见大脑血管周围出现少量淋巴细胞浸润 ,个别动物睾丸生精小管精子细胞数量增加。停药 2周 ,上述病理改变减轻。未观察到rhaFGF的延迟性毒性反应。结论 :rhaFGF在有效剂量及大于有效 展开更多

关键词 重组人酸性成纤维细胞生长因子 皮肤用药 长期毒性

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急性肝损伤实验动物模型的研究进展 被引量：11

8

作者 凌银婵 刘海燕 +1 位作者 黄巨恩 李校堃 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期389-391,共3页

肝是人体最大的消化腺，堪称人体的能量化学工厂。因此，肝功能是否正常与人体的生活质量密切相关。临床上，急性肝损伤是十分常见的病症，多种因素如化学性肝毒物、病毒感染、免疫性因素、乙醇性因素以及外科手术等均可引起急性肝损伤... 肝是人体最大的消化腺，堪称人体的能量化学工厂。因此，肝功能是否正常与人体的生活质量密切相关。临床上，急性肝损伤是十分常见的病症，多种因素如化学性肝毒物、病毒感染、免疫性因素、乙醇性因素以及外科手术等均可引起急性肝损伤，甚至肝功能衰竭，其防治研究一直是热门课题。现就已经开展的关于急性肝损伤的实验研究进行了归总，为以后进一步对肝损伤保护进行实验及临床研究提供参考。 展开更多

关键词 急性肝损伤 实验动物模型 肝功能衰竭 临床研究 免疫性因素 肝损伤保护 生活质量 病毒感染

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抗菌肽和人酸性成纤维细胞生长因子融合蛋白在毕赤酵母中的表达及其活性鉴定 被引量：5

9

作者 苏志坚 吴晓萍 +4 位作者 郑青 黄亚东 庞实锋 冯雅 李校堃 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期63-68,共6页

目的 :构建和表达一种抗菌肽和人酸性成纤维细胞生长因子的融合蛋白 ,在创伤皮肤表面应用时能裂解成有功能的抗菌肽和人酸性成纤维细胞生长因子 ,预防伤口感染和促进皮肤修复。方法 :利用PCR技术分别扩增出带有凝血酶切割位点的天蚕素... 目的 :构建和表达一种抗菌肽和人酸性成纤维细胞生长因子的融合蛋白 ,在创伤皮肤表面应用时能裂解成有功能的抗菌肽和人酸性成纤维细胞生长因子 ,预防伤口感染和促进皮肤修复。方法 :利用PCR技术分别扩增出带有凝血酶切割位点的天蚕素杂合肽基因和人酸性成纤维细胞生长因子基因。再将两者作为模板 ,用PCR方法扩增出编码融合蛋白的DNA。将该DNA片段插入到载体pPICZαA中 ,并利用电转法将质粒转入毕赤酵母smd116 8中 ,Zeocin抗性筛选重组转化子。甲醇诱导 96h ,SDS PAGE电泳检测融合蛋白的表达 ,并用Western blot杂交检测融合蛋白的免疫原性。利用肝素亲和层析纯化融合蛋白 ,同时检测融合蛋白的抑菌和促3T3Bal/b细胞分裂活性。结果 :筛选出能表达相对分子质量约为 19kD融合蛋白的重组转化株 ,SDS PAGE电泳检测显示甲醇诱导 96h后 ,融合蛋白表达量达到最高 ,且能与人酸性成纤维细胞生长因子抗体产生免疫反应。融合蛋白没有抑菌活性 ,而裂解产物则具有抑菌活性。此外 ,融合蛋白的促细胞分裂活性与野生型人酸性成纤维细胞生长因子相比没有明显的降低。结论 :获得含凝血酶切割位点的抗菌肽和人酸性成纤维细胞生长因子的融合蛋白 ,并在毕赤酵母中实现了表达。融合蛋白的裂解产物具有抑菌活性。 展开更多

关键词 抗菌肽 人酸性成纤维细胞生长因子 融合蛋白 毕赤酵母 构建 表达

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地塞米松诱导小鼠胸腺细胞凋亡和ERK1/2 MAPK及钙离子浓度关系的研究 被引量：5

10

作者 王通 曾耀英 +4 位作者 李校堃 何贤辉 肇静娴 吴晓萍 付小兵 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期77-81,共5页

目的 :研究胸腺细胞凋亡和ERK1/ 2途径及钙离子内流之间关系 ,以进一步探讨细胞凋亡可能的信号通路机制。方法 :以地塞米松 (DEX)诱导小鼠胸腺细胞凋亡为模型 ,通过流式细胞术和电镜测定模型的稳定性 ,利用激光扫描共聚焦分析测定细胞内... 目的 :研究胸腺细胞凋亡和ERK1/ 2途径及钙离子内流之间关系 ,以进一步探讨细胞凋亡可能的信号通路机制。方法 :以地塞米松 (DEX)诱导小鼠胸腺细胞凋亡为模型 ,通过流式细胞术和电镜测定模型的稳定性 ,利用激光扫描共聚焦分析测定细胞内 [Ca2 + ] i、SDS PAGE及Westernblot检测细胞内总量和磷酸化ERK1/ 2MAPK。结果 :仅在完全RMPI 1640培养基培养条件下 ,小鼠胸腺细胞自发凋亡百分率为 (2 90±0 62 ) % ,而在 2 5× 10 -6mol/LDEX诱导下 ,3h培养组 (12 70± 2 44) %、6h培养组 (53 55± 4 59) %发生了细胞凋亡 ,细胞内Fluo 3绿色荧光明显增强 ;正常细胞ERK1/ 2总量随时间变化不明显 ,而DEX刺激下 ,ERK1/ 2总量随时间呈递减趋势。结论 :DEX诱导小鼠胸腺细胞凋亡过程中 ,磷酸化ERK1/ 2信号被迅速抑制 ,细胞内 [Ca2 + ] i迅速上升 ,推论磷酸化ERK1/ 2信号阻断与 [Ca2 + ] 展开更多

关键词 地塞米松 钙离子 ERK 线粒体 膜电势

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1株解淀粉芽孢杆菌发酵培养基的设计及发酵条件的优化 被引量：28

11

作者 车晓曦 李社增 李校堃 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第18期9402-9405,9437,共5页

[目的]为解淀粉芽孢杆菌的应用提供科学依据。[方法]从最佳碳源、氮源、初始pH值、发酵时间、发酵温度、接菌量和装液量的确定出发,针对一株新发现的解淀粉芽孢杆菌SAB-1进行发酵培养基的设计及发酵条件的优化。[结果]从8种不同的碳源... [目的]为解淀粉芽孢杆菌的应用提供科学依据。[方法]从最佳碳源、氮源、初始pH值、发酵时间、发酵温度、接菌量和装液量的确定出发,针对一株新发现的解淀粉芽孢杆菌SAB-1进行发酵培养基的设计及发酵条件的优化。[结果]从8种不同的碳源和氮源中确定了长效碳源水溶性淀粉、长效氮源棉籽粉与速效碳源葡萄糖、速效氮源酵母浸膏。并优化了基础发酵培养基的发酵条件:温度31℃、转速180 r/min、发酵时间26 h、初始pH值6.0、接菌量1%、装液量50 ml/250 ml。该条件下发酵后菌体产量为46.0×109/ml。[结论]该解淀粉芽孢杆菌在设计发酵条件下基本达到了工业规模化生产的要求。 展开更多

关键词 解淀粉芽孢杆菌 碳源 氮源 基础培养基

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人转化生长因子TGF-β_3基因合成及其在大肠杆菌中的表达 被引量：6

12

作者 黄亚东 苏志坚 +6 位作者 郑青 赵文 许华 吴晓萍 胡晓辉 李校堃 刘丙萍 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期264-267,共4页

目的 :构建能高效表达人转化生长因子 β3 (TGF β3 )的基因工程菌。方法 :用PCR方法扩增人转化生长因子 β3 的cDNA ,将该cDNA片段插入表达载体pET3c的表达框架中 ,构建了表达菌株BL2 1/pET TGF β3 。IPTG诱导表达。通过阳离子交换、... 目的 :构建能高效表达人转化生长因子 β3 (TGF β3 )的基因工程菌。方法 :用PCR方法扩增人转化生长因子 β3 的cDNA ,将该cDNA片段插入表达载体pET3c的表达框架中 ,构建了表达菌株BL2 1/pET TGF β3 。IPTG诱导表达。通过阳离子交换、变性分子筛层析纯化重组蛋白。用Western blot杂交检测重组蛋白的免疫原性。结果 :所构建的表达菌株 ,其TGF β3 的表达量占菌体总蛋白 2 5 %以上。经纯化获得了银染一条带的重组蛋白。免疫学检测表明重组蛋白具有较强的抗原特异性。结论 :人转化生长因子 β3 在大肠杆菌中实现了高效表达 ,获得了具有免疫原性的重组TGF β3 。 展开更多

关键词 人转化生长因子β3 克隆 表达

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bFGF-胶原蛋白海绵对宫颈糜烂的治疗作用 被引量：6

13

作者 郑青 高树生 +4 位作者 彭菲 李黎 许华 刘蓓 李校堃 《山东医药》 CAS 北大核心 2006年第11期41-42,共2页

对58例宫颈糜烂患者采用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)-胶原蛋白海绵治疗;将bFGF-胶原蛋白海绵1片贴敷于宫颈糜烂面,每3d放置1片,2～4片为一疗程,观察糜烂面愈合情况。结果58例患者均取得了显效和痊愈的治疗效果。轻度(100%)和中度(96.... 对58例宫颈糜烂患者采用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)-胶原蛋白海绵治疗;将bFGF-胶原蛋白海绵1片贴敷于宫颈糜烂面,每3d放置1片,2～4片为一疗程,观察糜烂面愈合情况。结果58例患者均取得了显效和痊愈的治疗效果。轻度(100%)和中度(96.4%)糜烂痊愈率无明显差异,但明显高于重度(37.5%)糜烂,P<0.01。证明bFGF-胶原蛋白海绵对宫颈糜烂有良好的治疗效果。 展开更多

关键词 碱性成纤维细胞生长因子 胶原蛋白海绵 宫颈糜烂

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瑞安陶山温郁金规范化种植基地适宜性研究 被引量：6

14

作者 姜程曦 熊伟 +3 位作者 陶正明 王晓慧 刘敏 李校堃 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第4期1807-1810,共4页

[目的]对瑞安陶山温郁金产地环境的适宜性进行分析与评价,为建立温郁金规范化种植基地提供科学依据。[方法]采用相关的文献方法和国家规定的相关标准及分析方法,对瑞安陶山温郁金种植基地进行评价。[结果]温州瑞安地区种植温郁金已有100... [目的]对瑞安陶山温郁金产地环境的适宜性进行分析与评价,为建立温郁金规范化种植基地提供科学依据。[方法]采用相关的文献方法和国家规定的相关标准及分析方法,对瑞安陶山温郁金种植基地进行评价。[结果]温州瑞安地区种植温郁金已有1000多年历史,陶山是温郁金的地道产区;该地区大气、土壤、灌溉水等环境因子均符合国家标准。[结论]瑞安陶山是建立温郁金规范化种植基地的适宜区。 展开更多

关键词 温郁金 适宜性 区域 安全性 可操作性

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新疆红花组织培养与快速繁殖的研究 被引量：12

15

作者 杨晶 邵明龙 +1 位作者 李天航 李校堃 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第8期3439-3440,共2页

[目的]筛选新疆红花组织培养的调控体系,以获得离体培养的再生植株。[方法]将无菌材料置于不同的培养基上培养构建愈伤组织无性系,进行继代培养,最终将生根的炼苗移栽至基质中使其生长。[结果]子叶是用于红花再生较理想的材料,愈伤组织... [目的]筛选新疆红花组织培养的调控体系,以获得离体培养的再生植株。[方法]将无菌材料置于不同的培养基上培养构建愈伤组织无性系,进行继代培养,最终将生根的炼苗移栽至基质中使其生长。[结果]子叶是用于红花再生较理想的材料,愈伤组织的分化能力在不同培养基上明显不同。筛选出的适合红花建立再生体系的最佳诱导培养基为MS+1.0 mg/L NAA+2.0 mg/L BA+3.0%蔗糖+0.7%琼脂,分化培养基为MS+0.2 mg/L NAA+2.0 mg/L BA+3.0%蔗糖+0.7%琼脂,生根培养基为1/2 MS+2mg/L IBA+0.2 mg/L BA。[结论]该研究为红花的资源保护、扩大繁殖和进一步推广应用及利用其作受体系统研究植物生物反应器奠定了基础。 展开更多

关键词 红花 组织培养 培养基

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肉桂酰胺类化合物的合成及其体外抗肿瘤活性 被引量：8

16

作者 左明明 周健民 +2 位作者 胡国辉 姜集苗 李校堃 《化学世界》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期239-242,共4页

以具有广泛生物活性的取代肉桂酸为先导化合物制备一系列肉桂酰胺类化合物2a-2p,其中有四个为新化合物。以肉桂酰氯与苯胺合成肉桂酰胺的反应探索了反应时间、物料摩尔比以及反应温度对目的产物收率的影响,从而确定了合成肉桂酰胺类化... 以具有广泛生物活性的取代肉桂酸为先导化合物制备一系列肉桂酰胺类化合物2a-2p,其中有四个为新化合物。以肉桂酰氯与苯胺合成肉桂酰胺的反应探索了反应时间、物料摩尔比以及反应温度对目的产物收率的影响,从而确定了合成肉桂酰胺类化合物的最佳条件。采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)对其体外抗肿瘤活性进行初步的研究,通过计算肿瘤细胞抑制率、IC50值,以确定不同浓度的肉桂酰胺类化合物对体外培养的3种癌细胞株的影响,MTT法筛选结果表明,2f,2k,2p抗肿瘤谱广,活性较好。 展开更多

关键词 肉桂酰胺类化合物 合成 抗肿瘤活性

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温莪术不同溶剂提取物体外抗氧化活性评价 被引量：3

17

作者 娄依依 向铮 +3 位作者 陈瑞峰 李丽丽 高红昌 李校堃 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第3期39-43,共5页

目的:探讨温莪术不同溶剂提取物体外的抗氧化活性。方法:分别用蒸馏水、95%乙醇、乙酸乙酯等不同极性溶剂提取温莪术中活性物质,采用清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基、羟自由基(.OH)、亚铁离子螯合和还原能力等方法考察温莪术... 目的:探讨温莪术不同溶剂提取物体外的抗氧化活性。方法:分别用蒸馏水、95%乙醇、乙酸乙酯等不同极性溶剂提取温莪术中活性物质,采用清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基、羟自由基(.OH)、亚铁离子螯合和还原能力等方法考察温莪术不同提取物的抗氧化活性。同时用Folin-Cioeaile法测定不同提取物中的总酚含量,考察总酚含量与抗氧化清除率的关系。结果:DPPH自由基、.OH清除能力及还原能力结果表明95%乙醇及乙酸乙酯提取物在较低的质量浓度显示了较高的清除率;同时总酚含量测定结果显示95%乙醇和乙酸乙酯提取物所含总酚含量较高,这表明这两种溶剂提取物的抗氧化性与其提取物含有较高的酚类密切相关;亚铁离子螯合实验结果显示水提物的螯合效果优于其他溶剂提取物。结论:不同溶剂提取物抗氧化能力差别较大,总酚含量与抗氧化清除率具有相关性。 展开更多

关键词 温莪术 DPPH自由基 羟自由基 亚铁离子螯合 还原能力 Folin-Cioeaile

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苜蓿叶绿体DNA的提取及其Rbcl基因片段的克隆 被引量：5

18

作者 朱海林 刘秀明 +4 位作者 江莺 杜美丽 李巍 李海燕 李校堃 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第22期13306-13308,共3页

[目的]获得高纯度的苜蓿叶绿体DNA(cpDNA)和Rbcl基因片段。[方法]采用改进的高盐低pH法分离和纯化苜蓿叶绿体DNA;利用叶绿体基因组进化中高度保守的特点,设计引物,从苜蓿叶绿体基因组中扩增Rbcl基因,利用生物学软件对测序结果进行分析。... [目的]获得高纯度的苜蓿叶绿体DNA(cpDNA)和Rbcl基因片段。[方法]采用改进的高盐低pH法分离和纯化苜蓿叶绿体DNA;利用叶绿体基因组进化中高度保守的特点,设计引物,从苜蓿叶绿体基因组中扩增Rbcl基因,利用生物学软件对测序结果进行分析。[结果]经检测分析,获得了产率较高和纯度较好的苜蓿叶绿体DNA,并用PCR方法扩增获得了1 130 bp的Rbcl基因片段。该基因片段有17个常用的限制性内切酶酶切位点,与烟草、水稻、菜豆、玉米、甘薯和甜菜中Rbcl基因核苷酸的同源性为85.6%～90.6%。[结论]为构建苜蓿叶绿体表达载体和通过叶绿体生物反应器生产药用蛋白等奠定了基础。 展开更多

关键词 苜蓿 叶绿体DNA 提取 RBCL基因 克隆

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aFGF植物表达载体构建及转化紫花苜蓿的初步研究 被引量：4

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作者 蒋世翠 王义 +3 位作者 孙春玉 王艳芳 李校堃 张美萍 《草业学报》 CSCD 北大核心 2011年第4期180-186,共7页

主要将aFGF基因按照植物偏爱的密码子进行基因优化,同时加上信号肽、6-组氨酸标签及凝血酶切割因子,合成全基因,再将基因插入到改造的TΩ4AB质粒中,将aFGF基因和质粒上的增强子、启动子、Ω序列及ployA加尾序列双酶切,命名为TΩ4AB-aF,... 主要将aFGF基因按照植物偏爱的密码子进行基因优化,同时加上信号肽、6-组氨酸标签及凝血酶切割因子,合成全基因,再将基因插入到改造的TΩ4AB质粒中,将aFGF基因和质粒上的增强子、启动子、Ω序列及ployA加尾序列双酶切,命名为TΩ4AB-aF,将TΩ4AB-aF插入到pBI121载体中命名为pBI121-TΩ4AB-aF。利用三亲融合法将pBI121-TΩ4AB-aF转入到农杆菌菌株LBA4404中,转化苜蓿。转基因苗用卡那霉素进行筛选;并对抗性苗进行PCR、RT-PCR、Western Blot检测。结果表明,aFGF在苜蓿中得到表达。为苜蓿作为植物生物反应器奠定理论基础。 展开更多

关键词 AFGF 植物生物反应器 紫花苜蓿

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重组人酸性成纤维细胞生长因子的生殖毒性 被引量：3

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作者 姚成灿 许华 +4 位作者 郑青 赵文 吴晓萍 黄亚东 李校堃 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期461-463,共3页

目的:研究重组人酸性成纤维细胞生长因子(rhaFGF)在破损皮肤表面给药时的生殖毒性。方法:从SD大鼠怀孕第6天起对破损皮肤连续给药10 d,剂量分别为3 600 U/cm2,1 800 U/cm2,900 U/cm2,观察rhaFGF对大鼠的生育能力、胎鼠的生长发育及骨骼... 目的:研究重组人酸性成纤维细胞生长因子(rhaFGF)在破损皮肤表面给药时的生殖毒性。方法:从SD大鼠怀孕第6天起对破损皮肤连续给药10 d,剂量分别为3 600 U/cm2,1 800 U/cm2,900 U/cm2,观察rhaFGF对大鼠的生育能力、胎鼠的生长发育及骨骼发育的影响。结果:大鼠破损皮肤外用相当于有效剂量603、0和15倍的rhaFGF对母体的毒性、胚胎毒性和致畸作用均无明显的影响。结论:在相当于有效剂量60倍的剂量下使用rhaFGF对母体和胎儿是安全的。 展开更多

关键词 重组人酸性成纤维细胞生长因子 生殖毒性 皮肤用药

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