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玉米黑粉菌CYP51稀有密码子和mRNA二级结构分析及与杀菌剂戊唑醇分子对接
被引量:
3
1
作者
李书祥
韩睿
+5 位作者
袁利玲
熊丽
袁永泽
杨江科
闫云君
刘德立
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2011年第8期751-758,共8页
通过截短玉米黑粉菌CYP51(P450-14DM,UmCYP51)基因(去除编码跨膜区部分)和选取不同的表达载体,构建了9种重组表达质粒,在大肠杆菌中进行UmCYP51基因的表达,发现只有BL21(DE3)/pET32-Um-35重组表达工程菌获得了表达.对稀有密码子和mRNA...
通过截短玉米黑粉菌CYP51(P450-14DM,UmCYP51)基因(去除编码跨膜区部分)和选取不同的表达载体,构建了9种重组表达质粒,在大肠杆菌中进行UmCYP51基因的表达,发现只有BL21(DE3)/pET32-Um-35重组表达工程菌获得了表达.对稀有密码子和mRNA翻译起始区二级结构进行分析,结果表明稀有密码子和mRNA翻译起始区二级结构对UmCYP51蛋白的表达都有影响.适用于稀有密码子表达的菌株Rosetta(DE3)不利于UmCYP51蛋白的表达;同时只有翻译起始区二级结构自由能值最低的重组载体pET32-Um-35可以表达.为了设计以UmCYP51为靶标的新型抗真菌抑制剂,基于最新解析的真核生物人类的CYP51晶体结构,利用同源模建的方法构建了UmCYP51的三维结构并进行了分子动力学模拟优化.通过与商品化杀菌剂戊唑醇进行分子对接获得了此类抑制剂与UmCYP51的理论结合方式,阐述了戊唑醇分子的杀菌机理,为开发新型的抗真菌抑制剂奠定了基础.
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关键词
UmCYP51
翻译起始区
稀有密码子
同源模建
分子对接
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职称材料
黑曲霉脂肪酶全基因合成及其在毕赤酵母中的表达
被引量:
2
2
作者
李娜
袁利玲
+5 位作者
张玮莹
李书祥
袁永泽
杨江科
闫云君
刘德立
《化学与生物工程》
CAS
2010年第6期45-49,共5页
黑曲霉脂肪酶是重要的工业用酶,在食品、制药、前体化合物的合成和手性化合物的拆分等方面有广泛的用途。获得高效表达黑曲霉脂肪酶的基因工程菌是该酶工业化生产的前提。根据黑曲霉脂肪酶LIP的氨基酸序列及毕赤酵母密码子的偏爱性,设...
黑曲霉脂肪酶是重要的工业用酶,在食品、制药、前体化合物的合成和手性化合物的拆分等方面有广泛的用途。获得高效表达黑曲霉脂肪酶的基因工程菌是该酶工业化生产的前提。根据黑曲霉脂肪酶LIP的氨基酸序列及毕赤酵母密码子的偏爱性,设计合成26条相互重叠20 bp的引物,通过组装PCR分别合成lip基因的4个片段lipA1(300bp)l、ipA2(237 bp)l、ipA3(234 bp)和lipA4(210 bp)。再以基因头lip1和基因尾lip26为引物,以lipA1l、ipA2l、ipA3和lipA4混合物为模板进行第二轮PCR扩增,得到的产物经加A处理后,连接到载体pMD18-T上,挑取重组子测序。通过PCR扩增对人工合成的基因进行校正,得到完全正确的lip基因。将优化后的基因克隆到表达载体pPIC9K上,获得的重组质粒pPIC9K-lip经线性化后转化毕赤酵母GS115菌株,构建分泌型表达LIP的酵母工程菌,G418梯度筛选,得到高拷贝稳定整合菌株。为重组黑曲霉脂肪酶的规模化制备奠定了基础。
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关键词
黑曲霉
脂肪酶
全基因合成
毕赤酵母
表达
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职称材料
生猪屠宰场病害生猪和产品生物安全处理监管措施
被引量:
4
3
作者
王雅
陈大林
+1 位作者
李书祥
李本强
《养殖与饲料》
2012年第2期65-66,共2页
为进一步加强巴中市各生猪屠宰场(厂)病害生猪和产品生物安全处理监管工作、有效防止动物疫病的发生和传播、确保上市生猪产品的质量安全,近期,巴中市畜牧食品局就进一步加强各生猪屠宰场(厂)病害生猪和产品生物安全处理监管工作,...
为进一步加强巴中市各生猪屠宰场(厂)病害生猪和产品生物安全处理监管工作、有效防止动物疫病的发生和传播、确保上市生猪产品的质量安全,近期,巴中市畜牧食品局就进一步加强各生猪屠宰场(厂)病害生猪和产品生物安全处理监管工作,提出了5项关键措施。
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关键词
生猪屠宰场
生猪产品
安全处理
监管措施
生物
病害
监管工作
动物疫病
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职称材料
棉田地膜麦秸覆盖增产防衰研究报告
被引量:
2
4
作者
张世贵
刘冬青
+2 位作者
曲道明
李书祥
贾润生
《中国棉花》
北大核心
1995年第4期13-14,共2页
棉田覆盖地膜虽能增温保墒、促棉早发,但棉花根系分布浅,抗旱抗倒能力差。高温期膜下温度高,棉花根系衰老快,管理不当易早衰。盛蕾期揭膜、培土、施肥、浇水后每亩覆盖麦秸500公斤,能够改善土壤环境,高温季节降低地温,棉花生...
棉田覆盖地膜虽能增温保墒、促棉早发,但棉花根系分布浅,抗旱抗倒能力差。高温期膜下温度高,棉花根系衰老快,管理不当易早衰。盛蕾期揭膜、培土、施肥、浇水后每亩覆盖麦秸500公斤,能够改善土壤环境,高温季节降低地温,棉花生长后期提高地温。覆盖麦秸可减少土表蒸发,遇旱时保墒,可避免雨水对地面的直接侵蚀,减轻地表巨烈的干湿交替,保护棉花根系,降低土壤容重。麦秸富含钾等养分,经腐烂分解,可不断供棉花吸收利用,并可提高棉田速效磷和速效钾含量,从而延长叶片功能期,增加后期叶面积,防止棉花早衰,增加铃重,提高产量。
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关键词
棉花
麦秸覆盖
塑料覆盖
产量
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职称材料
山东棉区棉花密植化调栽培模式初探
被引量:
1
5
作者
张世贵
刘冬青
+3 位作者
曲道明
郑安川
李书祥
王树勋
《中国棉花》
北大核心
1996年第9期17-17,共1页
山东棉区棉花密植化调栽培模式初探张世贵,刘冬青,曲道明山东棉花研究中心济南250100郑安川,李书祥,王树勋山东临清市棉花办公室252600为探索山东棉区皮棉2250kg·hm(-2)的生育规律、产量结构和栽培技...
山东棉区棉花密植化调栽培模式初探张世贵,刘冬青,曲道明山东棉花研究中心济南250100郑安川,李书祥,王树勋山东临清市棉花办公室252600为探索山东棉区皮棉2250kg·hm(-2)的生育规律、产量结构和栽培技术途径,特设置增密化调栽培模式,试图通...
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关键词
棉花
栽培
密植化调
山东棉区
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职称材料
“对症下药”抓好保护地蔬菜生产
6
作者
李书祥
《现代农村科技》
2015年第2期7-7,共1页
永年县南沿村区域站位于永年蔬菜种植区,根据多年的菜农反映,发现当前制约保护地蔬菜生产的主要难题有三个方面:一是土传病害引起的生理性死苗。由低温障碍、大水沤根、化肥烧苗、光照不足等引起的生理性死苗和由立枯病、瘁倒病、根茎...
永年县南沿村区域站位于永年蔬菜种植区,根据多年的菜农反映,发现当前制约保护地蔬菜生产的主要难题有三个方面:一是土传病害引起的生理性死苗。由低温障碍、大水沤根、化肥烧苗、光照不足等引起的生理性死苗和由立枯病、瘁倒病、根茎腐病、枯萎病、拟茎点根茎腐病等引起的土传病害死苗。二是盲目施肥引起的早衰死苗。由偏施氮肥和追施含有大量硫酸镁或激素的假劣冲施肥而造成的叶片老化,后期营养不足而引起的早衰。
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关键词
保护地蔬菜
土传病害
茎腐病
枯萎病
蔬菜病害
烧苗
冲施肥
沿村
蔬菜种植区
区域站
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职称材料
番茄黄化曲叶病毒病防治技术
7
作者
李书祥
《现代农村科技》
2015年第1期29-29,共1页
番茄黄化曲叶病毒病在永年县主要发生在露地越夏番茄上。2014年在保护地番茄上爆发流行,全年形成四个发病高峰期。 1番茄黄化曲叶病毒病发病周期 1.1春季冬春茬番茄上发生较重。3月上旬表现症状,11日调查病株率14.8%,3月下旬达到28.7%...
番茄黄化曲叶病毒病在永年县主要发生在露地越夏番茄上。2014年在保护地番茄上爆发流行,全年形成四个发病高峰期。 1番茄黄化曲叶病毒病发病周期 1.1春季冬春茬番茄上发生较重。3月上旬表现症状,11日调查病株率14.8%,3月下旬达到28.7%。3月25日在南马庄村调查,发病棚率70%,平均病株率28.7%,最高88.2%,其中严重五户的3.4亩毁种。1.2在春夏茬番茄上也有发生。
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关键词
曲叶病毒
保护地番茄
平均病株率
冬春茬
秋冬茬番茄
发病高峰期
大棚温室
日光温室
缓苗
菇类蛋白多糖
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职称材料
秋季西红柿定植时应注意的问题
8
作者
贡冬梅
籍红民
+1 位作者
李书祥
孙秀英
《现代农村科技》
2016年第9期20-21,共2页
邯郸地区秋季的气候特点是前期温度高、降雨多,对于秋季定植的西红柿来说是个很大的挑战。所以有三个问题应该引起菜农的注意:一是栽苗前的准备;二是栽苗时防死棵;三是栽苗后培育壮苗防雨水。1栽苗前的准备进口西红柿品种喜欢土质疏松...
邯郸地区秋季的气候特点是前期温度高、降雨多,对于秋季定植的西红柿来说是个很大的挑战。所以有三个问题应该引起菜农的注意:一是栽苗前的准备;二是栽苗时防死棵;三是栽苗后培育壮苗防雨水。1栽苗前的准备进口西红柿品种喜欢土质疏松、富含有机质的沙质壤土,这是栽培是否成功的关健。一般对于施肥做以下要求:亩施充分腐熟的粪肥10方、
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关键词
西红柿
秋季
定植
气候特点
邯郸地区
培育壮苗
土质疏松
栽苗
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职称材料
菜农在农药使用上的“八大误区”
9
作者
贡冬梅
李书祥
《河北农业》
2006年第5期19-20,共2页
菜农在蔬菜上使用农药时,由于受传统和农技知识的限制,往往出现不良现象,总结起来主要有八大误区:
关键词
农药使用
菜农
不良现象
蔬菜
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职称材料
题名
玉米黑粉菌CYP51稀有密码子和mRNA二级结构分析及与杀菌剂戊唑醇分子对接
被引量:
3
1
作者
李书祥
韩睿
袁利玲
熊丽
袁永泽
杨江科
闫云君
刘德立
机构
华中师范大学生命科学学院遗传调控与整合生物学湖北省重点实验室
青海大学农林科学院园艺研究所
华中科技大学生命科学与技术学院
出处
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2011年第8期751-758,共8页
基金
国家自然科学基金(30771429
31071653)
+1 种基金
国家高技术研究发展计划(863)(2007AA05Z417)
教育部博士点基金(20060511002)资助项目~~
文摘
通过截短玉米黑粉菌CYP51(P450-14DM,UmCYP51)基因(去除编码跨膜区部分)和选取不同的表达载体,构建了9种重组表达质粒,在大肠杆菌中进行UmCYP51基因的表达,发现只有BL21(DE3)/pET32-Um-35重组表达工程菌获得了表达.对稀有密码子和mRNA翻译起始区二级结构进行分析,结果表明稀有密码子和mRNA翻译起始区二级结构对UmCYP51蛋白的表达都有影响.适用于稀有密码子表达的菌株Rosetta(DE3)不利于UmCYP51蛋白的表达;同时只有翻译起始区二级结构自由能值最低的重组载体pET32-Um-35可以表达.为了设计以UmCYP51为靶标的新型抗真菌抑制剂,基于最新解析的真核生物人类的CYP51晶体结构,利用同源模建的方法构建了UmCYP51的三维结构并进行了分子动力学模拟优化.通过与商品化杀菌剂戊唑醇进行分子对接获得了此类抑制剂与UmCYP51的理论结合方式,阐述了戊唑醇分子的杀菌机理,为开发新型的抗真菌抑制剂奠定了基础.
关键词
UmCYP51
翻译起始区
稀有密码子
同源模建
分子对接
Keywords
UmCYP51, translation initiation region (TIR), rare codon, homology modeling, molecular docking
分类号
Q617 [生物学—生物物理学]
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
黑曲霉脂肪酶全基因合成及其在毕赤酵母中的表达
被引量:
2
2
作者
李娜
袁利玲
张玮莹
李书祥
袁永泽
杨江科
闫云君
刘德立
机构
华中师范大学生命科学学院遗传调控与整合生物学湖北省重点实验室
华中科技大学生命科学与技术学院
出处
《化学与生物工程》
CAS
2010年第6期45-49,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(30771429)
科技部"863"资助项目(2007AA05Z417)
+2 种基金
教育部博士点基金资助项目(20060511002)
湖北省科技攻关项目(2007AA201C50
2007AA301C26)
文摘
黑曲霉脂肪酶是重要的工业用酶,在食品、制药、前体化合物的合成和手性化合物的拆分等方面有广泛的用途。获得高效表达黑曲霉脂肪酶的基因工程菌是该酶工业化生产的前提。根据黑曲霉脂肪酶LIP的氨基酸序列及毕赤酵母密码子的偏爱性,设计合成26条相互重叠20 bp的引物,通过组装PCR分别合成lip基因的4个片段lipA1(300bp)l、ipA2(237 bp)l、ipA3(234 bp)和lipA4(210 bp)。再以基因头lip1和基因尾lip26为引物,以lipA1l、ipA2l、ipA3和lipA4混合物为模板进行第二轮PCR扩增,得到的产物经加A处理后,连接到载体pMD18-T上,挑取重组子测序。通过PCR扩增对人工合成的基因进行校正,得到完全正确的lip基因。将优化后的基因克隆到表达载体pPIC9K上,获得的重组质粒pPIC9K-lip经线性化后转化毕赤酵母GS115菌株,构建分泌型表达LIP的酵母工程菌,G418梯度筛选,得到高拷贝稳定整合菌株。为重组黑曲霉脂肪酶的规模化制备奠定了基础。
关键词
黑曲霉
脂肪酶
全基因合成
毕赤酵母
表达
Keywords
Aspergillus niger
lipase
total gene synthesis
Pichia pastoris
expression
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
生猪屠宰场病害生猪和产品生物安全处理监管措施
被引量:
4
3
作者
王雅
陈大林
李书祥
李本强
机构
四川省巴中市畜牧食品局
四川省巴中市巴州区动物卫生监督所
四川省巴中市巴州区城区动物检疫站
出处
《养殖与饲料》
2012年第2期65-66,共2页
文摘
为进一步加强巴中市各生猪屠宰场(厂)病害生猪和产品生物安全处理监管工作、有效防止动物疫病的发生和传播、确保上市生猪产品的质量安全,近期,巴中市畜牧食品局就进一步加强各生猪屠宰场(厂)病害生猪和产品生物安全处理监管工作,提出了5项关键措施。
关键词
生猪屠宰场
生猪产品
安全处理
监管措施
生物
病害
监管工作
动物疫病
分类号
S851.43 [农业科学—预防兽医学]
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职称材料
题名
棉田地膜麦秸覆盖增产防衰研究报告
被引量:
2
4
作者
张世贵
刘冬青
曲道明
李书祥
贾润生
机构
山东棉花研究中心
出处
《中国棉花》
北大核心
1995年第4期13-14,共2页
文摘
棉田覆盖地膜虽能增温保墒、促棉早发,但棉花根系分布浅,抗旱抗倒能力差。高温期膜下温度高,棉花根系衰老快,管理不当易早衰。盛蕾期揭膜、培土、施肥、浇水后每亩覆盖麦秸500公斤,能够改善土壤环境,高温季节降低地温,棉花生长后期提高地温。覆盖麦秸可减少土表蒸发,遇旱时保墒,可避免雨水对地面的直接侵蚀,减轻地表巨烈的干湿交替,保护棉花根系,降低土壤容重。麦秸富含钾等养分,经腐烂分解,可不断供棉花吸收利用,并可提高棉田速效磷和速效钾含量,从而延长叶片功能期,增加后期叶面积,防止棉花早衰,增加铃重,提高产量。
关键词
棉花
麦秸覆盖
塑料覆盖
产量
分类号
S562.04 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
山东棉区棉花密植化调栽培模式初探
被引量:
1
5
作者
张世贵
刘冬青
曲道明
郑安川
李书祥
王树勋
机构
山东棉花研究中心
出处
《中国棉花》
北大核心
1996年第9期17-17,共1页
文摘
山东棉区棉花密植化调栽培模式初探张世贵,刘冬青,曲道明山东棉花研究中心济南250100郑安川,李书祥,王树勋山东临清市棉花办公室252600为探索山东棉区皮棉2250kg·hm(-2)的生育规律、产量结构和栽培技术途径,特设置增密化调栽培模式,试图通...
关键词
棉花
栽培
密植化调
山东棉区
分类号
S562.04 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
“对症下药”抓好保护地蔬菜生产
6
作者
李书祥
机构
河北省永年县农牧局南大堡综合区域站
出处
《现代农村科技》
2015年第2期7-7,共1页
文摘
永年县南沿村区域站位于永年蔬菜种植区,根据多年的菜农反映,发现当前制约保护地蔬菜生产的主要难题有三个方面:一是土传病害引起的生理性死苗。由低温障碍、大水沤根、化肥烧苗、光照不足等引起的生理性死苗和由立枯病、瘁倒病、根茎腐病、枯萎病、拟茎点根茎腐病等引起的土传病害死苗。二是盲目施肥引起的早衰死苗。由偏施氮肥和追施含有大量硫酸镁或激素的假劣冲施肥而造成的叶片老化,后期营养不足而引起的早衰。
关键词
保护地蔬菜
土传病害
茎腐病
枯萎病
蔬菜病害
烧苗
冲施肥
沿村
蔬菜种植区
区域站
分类号
S63 [农业科学—蔬菜学]
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职称材料
题名
番茄黄化曲叶病毒病防治技术
7
作者
李书祥
机构
河北省永年县农牧局南大堡综合区域站
出处
《现代农村科技》
2015年第1期29-29,共1页
文摘
番茄黄化曲叶病毒病在永年县主要发生在露地越夏番茄上。2014年在保护地番茄上爆发流行,全年形成四个发病高峰期。 1番茄黄化曲叶病毒病发病周期 1.1春季冬春茬番茄上发生较重。3月上旬表现症状,11日调查病株率14.8%,3月下旬达到28.7%。3月25日在南马庄村调查,发病棚率70%,平均病株率28.7%,最高88.2%,其中严重五户的3.4亩毁种。1.2在春夏茬番茄上也有发生。
关键词
曲叶病毒
保护地番茄
平均病株率
冬春茬
秋冬茬番茄
发病高峰期
大棚温室
日光温室
缓苗
菇类蛋白多糖
分类号
S436.412 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
秋季西红柿定植时应注意的问题
8
作者
贡冬梅
籍红民
李书祥
孙秀英
机构
河北省永年农牧局
河北省临漳农牧局
出处
《现代农村科技》
2016年第9期20-21,共2页
文摘
邯郸地区秋季的气候特点是前期温度高、降雨多,对于秋季定植的西红柿来说是个很大的挑战。所以有三个问题应该引起菜农的注意:一是栽苗前的准备;二是栽苗时防死棵;三是栽苗后培育壮苗防雨水。1栽苗前的准备进口西红柿品种喜欢土质疏松、富含有机质的沙质壤土,这是栽培是否成功的关健。一般对于施肥做以下要求:亩施充分腐熟的粪肥10方、
关键词
西红柿
秋季
定植
气候特点
邯郸地区
培育壮苗
土质疏松
栽苗
分类号
S641.2 [农业科学—蔬菜学]
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职称材料
题名
菜农在农药使用上的“八大误区”
9
作者
贡冬梅
李书祥
机构
永年县农业局南沿村区域中心站
出处
《河北农业》
2006年第5期19-20,共2页
文摘
菜农在蔬菜上使用农药时,由于受传统和农技知识的限制,往往出现不良现象,总结起来主要有八大误区:
关键词
农药使用
菜农
不良现象
蔬菜
分类号
S48 [农业科学—农药学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
玉米黑粉菌CYP51稀有密码子和mRNA二级结构分析及与杀菌剂戊唑醇分子对接
李书祥
韩睿
袁利玲
熊丽
袁永泽
杨江科
闫云君
刘德立
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2011
3
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职称材料
2
黑曲霉脂肪酶全基因合成及其在毕赤酵母中的表达
李娜
袁利玲
张玮莹
李书祥
袁永泽
杨江科
闫云君
刘德立
《化学与生物工程》
CAS
2010
2
在线阅读
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职称材料
3
生猪屠宰场病害生猪和产品生物安全处理监管措施
王雅
陈大林
李书祥
李本强
《养殖与饲料》
2012
4
在线阅读
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职称材料
4
棉田地膜麦秸覆盖增产防衰研究报告
张世贵
刘冬青
曲道明
李书祥
贾润生
《中国棉花》
北大核心
1995
2
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职称材料
5
山东棉区棉花密植化调栽培模式初探
张世贵
刘冬青
曲道明
郑安川
李书祥
王树勋
《中国棉花》
北大核心
1996
1
在线阅读
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职称材料
6
“对症下药”抓好保护地蔬菜生产
李书祥
《现代农村科技》
2015
0
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职称材料
7
番茄黄化曲叶病毒病防治技术
李书祥
《现代农村科技》
2015
0
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职称材料
8
秋季西红柿定植时应注意的问题
贡冬梅
籍红民
李书祥
孙秀英
《现代农村科技》
2016
0
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下载PDF
职称材料
9
菜农在农药使用上的“八大误区”
贡冬梅
李书祥
《河北农业》
2006
0
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职称材料
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