PCR技术应用的新进展 被引量：6

1

作者 张红缨 张今 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1996年第6期509-513,共5页

近年来，随着ＰＣＲ技术方法学的逐步改进和完善，更加显示出它的实用性这不仅扩大了其用武之地，也促进了分子生物学的快速发展文章着重介绍ＰＣＲ在基因工程和蛋白质工程应用中的某些新进展，包括不需连接的克隆技术、随机引导／定位... 近年来，随着ＰＣＲ技术方法学的逐步改进和完善，更加显示出它的实用性这不仅扩大了其用武之地，也促进了分子生物学的快速发展文章着重介绍ＰＣＲ在基因工程和蛋白质工程应用中的某些新进展，包括不需连接的克隆技术、随机引导／定位ＰＣＲ、ＣＤＮＡ末端随机快速扩增、重组ＰＣＲ和大引物ＰＣＲ． 展开更多

关键词 聚合酶链反应 分子生物学 应用

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无色杆菌蛋白酶Ⅰ肽链N端作用的突变研究

2

作者 张红缨 张今 +1 位作者 李绍良 崎山文夫 《生物化学杂志》 CAS CSCD 1997年第1期67-72,共6页

无色杆菌蛋白酶Ⅰ（AchromobacterproteaseⅠ，APⅠ）是高度专一于赖氨酸的丝氨酸蛋白酶．比较其它典型同类蛋白酶的一级结构，该酶的成熟体肽键在N端和C端分别长出9个和26个氨基酸践基．在其N端设计和构建了一些突变体，它们分别具有... 无色杆菌蛋白酶Ⅰ（AchromobacterproteaseⅠ，APⅠ）是高度专一于赖氨酸的丝氨酸蛋白酶．比较其它典型同类蛋白酶的一级结构，该酶的成熟体肽键在N端和C端分别长出9个和26个氨基酸践基．在其N端设计和构建了一些突变体，它们分别具有缩短或延长的N端．这些突变体低于天然酶的活性和稳定性的结果揭示，N端这部分延长在稳定该酶的活性构象方面起着重要作用． 展开更多

关键词 无色杆菌 蛋白酶Ⅰ 肽链 N端 突变

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无色杆菌蛋白酶Ⅰ突变体的结构与稳定性研究

3

作者 张红缨 张今 +1 位作者 李绍良 崎山文夫 《生物化学杂志》 CAS CSCD 1997年第1期73-78,共6页

报道了用定住诱变技术，改变无色杆菌蛋白酶Ⅰ的酶原加工位点，使其向左或向右移动，导致突变体成熟酶的肽链从N端延长或缩短若干氨基酸残基．所获突变体显示了低于野生酶的活性．突变体的园二色谱和荧光光谱研究表明，它们的结构发生... 报道了用定住诱变技术，改变无色杆菌蛋白酶Ⅰ的酶原加工位点，使其向左或向右移动，导致突变体成熟酶的肽链从N端延长或缩短若干氨基酸残基．所获突变体显示了低于野生酶的活性．突变体的园二色谱和荧光光谱研究表明，它们的结构发生了某些微小的改变．在不同的pH值、温度和不同浓度的SDS和盐酸胍条件下，也表现了低于天然酶的稳定性．在N端延长的突变体中，酶原加工位点越远离天然加工位点的突变体，显示了越低的活性和稳定性．缩短的突变体活性和稳定性最低．这些结果表明，天然成熟酶的N端可能比较靠近酶的活性中心，并参与构成活性中心附近的局部构象由此可见N端区在成熟酶的结构与功能方面的重要作用． 展开更多

关键词 无色杆菌 蛋白酶Ⅰ 突变体 结构 稳定性

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一种预测蛋白质二级结构的简便方法

4

作者 张红缨 张今 《吉林大学自然科学学报》 CAS CSCD 1991年第3期81-84,共4页

以“广义摆动假说”为理论基础,从基因密码子的第二位碱基入手,把氨基酸——“词”简并成核苷酸——“语言”,可直接预测蛋白质的二级结构,从对一些蛋白质的预测结果可见,准确度与Chou-Fasman法相近。

关键词 蛋白 二级结构 摆动假说

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米曲氨基酰化酶的纯化及固定化酶法拆分D,L-丙氨酸 被引量：10

5

作者 王晓平 刘一鸣 +2 位作者 王丽娟 张红缨 张今 《吉林大学自然科学学报》 CAS CSCD 1998年第4期81-84,共4页

利用硫酸铵分级与双水相萃取结合的方法从米曲霉中提取米曲氨基酰化酶，并将其固定在ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ－２５上，用于拆分Ｄ，Ｌ－丙氨酸。

关键词 氨基酰化酶 固定化酶法 丙氨酸 米曲霉 氨基酸

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大豆叶片过氧化物酶及其同工酶的研究 被引量：6

6

作者 刘学军 苗以农 张红缨 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 1991年第1期37-45,共9页

不同生育期大豆叶片过氧化物酶活性和同工酶谱存在着明显的品种间差异。新品种较老品种过氧化物酶活力高比活较低;高蛋白与低蛋白品种相比,高蛋白品种过氧化物酶活力较高,比活较低;结荚期,随植株节位降低,叶片过氧化物酶比活、活力和同... 不同生育期大豆叶片过氧化物酶活性和同工酶谱存在着明显的品种间差异。新品种较老品种过氧化物酶活力高比活较低;高蛋白与低蛋白品种相比,高蛋白品种过氧化物酶活力较高,比活较低;结荚期,随植株节位降低,叶片过氧化物酶比活、活力和同工酶活性均呈增强趋势,但最下部老叶过氧化物酶活力和同工酶活性降低;未展开叶较展开叶的过氧化物酶同工酶谱阳极区酶活性所占比例较大;中部书位叶片酶谱清晰,条带数多,适于品种间比较。 展开更多

关键词 大豆 叶片 过氧化物酶 同功酶

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人参多肽基因的酶法体外随机——定位诱变 被引量：4

7

作者 张今 李正强 张红缨 《生物化学杂志》 CAS CSCD 1992年第1期115-120,共6页

本文报道了酶法体外随机——定位诱变人参多肽基因的原理和方法。该法把传统的随机诱变和现代的定位诱变融合起来,可灵活控制基因突变的随机性和定位性。我们用双脱氧末端终止法测定了三个突变株的结果证实了该法的合理性和可行性,

关键词 人参 多肽基因 随机 定位 诱变

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α-天冬氨酰二肽酶基因工程菌的固定化及其应用 被引量：1

8

作者 王晓平 孔祥铎 +2 位作者 陆军 张红缨 张今 《吉林大学自然科学学报》 CAS CSCD 1999年第3期85-87,共3页

报道 α天冬氨酰二肽酶基因工程菌的固定化及其细胞性质， 并用于 Ａｓｐａｒｔａｍ ｅ的合成．

关键词 天冬氨酰二肽酶 基因工程菌 固定化细胞 甜味剂

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人参种子DNA诱导小麦变异的研究——从人参种子DNA处理过的小麦幼苗鉴别出异样的蛋白质和多肽 被引量：3

9

作者 张今 张红缨 +2 位作者 滕利荣 杜文媛 吴小侠 《吉林大学自然科学学报》 CSCD 1989年第1期109-112,共4页

用针刺麦胚,果胶酶和纤维素酶处理,镁离子洗涤,钙离子调节,DNA浸泡,将人参种子DNA导入小麦种子中。然后置于25℃暗室培养数日,在小麦幼苗提取液中鉴别出异样的蛋白质和多肽。

关键词 人参DNA 诱导 变异 小麦 多肽

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人参多肽基因的化学合成和克隆 被引量：1

10

作者 张今 张红缨 +3 位作者 陈冬松 杜文媛 郑兆鑫 严维跃 《生物化学杂志》 CAS CSCD 1990年第3期193-197,共5页

本文报道了具有降血糖作用的人参多肽基因的设计及用固相亚磷酰胺法的合成。再以质粒pUC19作为克隆载体,以大肠杆菌JM101为受体菌,克隆了人参多肽基因,并成功地获得了克隆菌株。

关键词 人参 多肽基因 合成 克隆

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溶液中d(AT)_6的构象转化

11

作者 张今 张红缨 +1 位作者 滕利荣 丁忠田 《生物化学杂志》 CAS CSCD 1990年第2期107-110,共4页

本文报道了溶液中d(AT)_6构象研究的结果。探讨了d(AT)_6的物化特征。d(AT)_6在0.05mol/L NaCl和4.5 mol/L NaCl中的UV和CD谱是典型的Z-和B-型DNA谱,UV熔化曲线形状依赖于盐的浓度。当盐浓度低于0.05 mol/L NaCl时,曲线有负斜率;而盐浓... 本文报道了溶液中d(AT)_6构象研究的结果。探讨了d(AT)_6的物化特征。d(AT)_6在0.05mol/L NaCl和4.5 mol/L NaCl中的UV和CD谱是典型的Z-和B-型DNA谱,UV熔化曲线形状依赖于盐的浓度。当盐浓度低于0.05 mol/L NaCl时,曲线有负斜率;而盐浓度大于0.05mol/L NaCl时,曲线的斜率变为正,即随盐浓度增加,T_m值增加。在链浓度的依赖性基础上,计算了两种构象的△H和△S。 展开更多

关键词 d(AT)6 构象转化 核苷酸

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酵母菌中海藻糖的提取方法与糖代谢研究 被引量：5

12

作者 刘洋 张红缨 +1 位作者 张今 高俊芳 《吉林大学自然科学学报》 CAS CSCD 1998年第4期85-88,共4页

采用多种方法（三氯乙酸提取法、冷乙醇提取法、热乙醇提取法和热蒸馏水提取法）从酵母菌中提取非还原性二糖海藻糖，产率分别为１３．３８％，９．６８％，９．７５％和９．５５％．并对酵母菌中海藻糖的代谢进行研究，发现随培养条件... 采用多种方法（三氯乙酸提取法、冷乙醇提取法、热乙醇提取法和热蒸馏水提取法）从酵母菌中提取非还原性二糖海藻糖，产率分别为１３．３８％，９．６８％，９．７５％和９．５５％．并对酵母菌中海藻糖的代谢进行研究，发现随培养条件恶化，酵母菌体内海藻糖含量有不同程度的提高．提高培养基中Ｔｒｉｓ含量。 展开更多

关键词 海藻糖 酵母菌 提取 代谢

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抗脂解活性的人参十四肽的结构预测 被引量：2

13

作者 张富贵 朱敏慧 +2 位作者 汪大伟 张今 张红缨 《物理化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1990年第5期562-567,共6页

本文对抗脂解活性的人参多肽的结构进行了分析.在一级结构的基础上预测了其二级结构含有较多的α螺旋,后接一段无规卷曲.应用分子力学方法,结合晶体数据库信息,计算了人参中抗脂解十四肽分子的相对构家能量和原子坐标,模拟了构象能量优... 本文对抗脂解活性的人参多肽的结构进行了分析.在一级结构的基础上预测了其二级结构含有较多的α螺旋,后接一段无规卷曲.应用分子力学方法,结合晶体数据库信息,计算了人参中抗脂解十四肽分子的相对构家能量和原子坐标,模拟了构象能量优化过程,得到了可能的最低能量构象.并利用计算机分子图形技术建立了相应的人参抗脂解十四肽的三维分子模型.模型的空间结构表明构象分析结果与二级预测的结论很好地相符。 展开更多

关键词 人参 十四肽 结构预测

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天冬氨酸酶基因工程菌质粒pXZ70的稳定性 被引量：2

14

作者 陆军 张晓宇 +1 位作者 张红缨 张今 《吉林大学自然科学学报》 CAS CSCD 1997年第4期75-78,共4页

将pSC101质粒上的Par区域（控制质粒分配的基因座）克隆到含有天冬氨酸酶基因的质粒pXZ70上，构建成重组质粒pZZ1，将pZZ1质粒转化入大肠杆菌JM109细胞中，得到一株质粒可稳定遗传的重组子细胞，培养100代后，含质粒菌数仍在90％以上．

关键词 天冬氨酸酶 Par区域 稳定性 基因工程 重组质粒

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长白山天池水中一株产海藻糖菌种的鉴定 被引量：3

15

作者 谢慧敏 张红缨 郑玉娟 《吉林大学自然科学学报》 CAS CSCD 1999年第3期77-80,共4页

从长白山天池水中分离得到一株产海藻糖的菌株 Ｃ Ｂ３９， 并进行鉴定． 结果表明， 该菌株为胶样菌属（

关键词 海藻糖 菌种鉴定 胶样菌 发酵

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天冬氨酸酶C端缺失突变酶基因的克隆和表达 被引量：2

16

作者 陆军 王晓平 +1 位作者 张红缨 张今 《吉林大学自然科学学报》 CAS CSCD 1998年第1期71-74,共4页

利用多聚酶链反应（PCR）技术，从天冬氨酸酶基因的3'-端删除42个碱基，缺失突变基因经克隆、转化和筛选，得到一株有C端缺失14肽的天冬氨酸酶突变体表达的转化子．突变酶纯酶活性为野生型酶的1．21倍．圆二色谱和荧光光谱的研究表... 利用多聚酶链反应（PCR）技术，从天冬氨酸酶基因的3'-端删除42个碱基，缺失突变基因经克隆、转化和筛选，得到一株有C端缺失14肽的天冬氨酸酶突变体表达的转化子．突变酶纯酶活性为野生型酶的1．21倍．圆二色谱和荧光光谱的研究表明，突变酶的结构比野生型酶松散或更具柔性，天冬氨酸酶C端14肽不是其功能所必需的． 展开更多

关键词 C端缺失 天冬氨酸酶 突变酶 基因表达

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