人胚鼻咽上皮细胞cDNA文库的构建及鼻咽癌相关基因的筛选 被引量：8

1

作者 张必成 曹利 +4 位作者 钱骏 余鹰 李伟芳 向娟娟 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第2期302-306,共5页

为了进一步分离人鼻咽组织特异性表达基因和鼻咽癌特异相关基因 ,采用SMART (switchingmechanismat 5′endofRNAtranscript)技术 ,构建了人胚鼻咽上皮cDNA文库 .从原代培养的人胚鼻咽上皮分离总RNA并纯化mRNA ,利用经修饰的oligo (dT)引... 为了进一步分离人鼻咽组织特异性表达基因和鼻咽癌特异相关基因 ,采用SMART (switchingmechanismat 5′endofRNAtranscript)技术 ,构建了人胚鼻咽上皮cDNA文库 .从原代培养的人胚鼻咽上皮分离总RNA并纯化mRNA ,利用经修饰的oligo (dT)引物 (含sfiⅠB酶切位点 )合成cDNA第一链 ,同时根据真核生物mRNA5′端帽子结构特点 ,利用SMART核苷酸 (含sfiⅠA酶切位点 )作为cDNA第一链在mRNA 5′端延伸出去的模板 ,进而以此序列为引物利用LD PCR (long distance PCR)合成双链cDNA ,双链cDNA经sfiⅠ (ⅠA和ⅠB)酶切和过柱分级分离后 ,克隆入经sfiⅠ酶切的λTrip1EX2载体后经体外包装而成cDNA文库 .结果表明 ,原始人胚鼻咽上皮cDNA文库获得 1 0× 10 6个重组子 ,重组率达 96 % .文库扩增后 ,滴度达 7 8× 10 9pfu ml,插入cDNA平均长度为 1 2kb ,用PCR从该文库扩增出本实验室新克隆的鼻咽癌相关基因NAG4的全长cDNA .构建的人胚鼻咽上皮cDNA文库具有良好的质量 ,该cDNA文库为进一步筛选。 展开更多

关键词 鼻咽上皮细胞 CDNA文库 鼻咽癌 筛选 胚胎 基因克隆 NAG4

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鼻咽癌差异表达基因PROL4特性分析 被引量：5

2

作者 张必成 周鸣 +6 位作者 周后德 肖炳燚 聂新民 朱诗国 李伟芳 李小玲 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第2期262-265,共4页

在正常成人鼻咽与鼻咽癌活检组织之间进行抑制性消减杂交和微阵列 (microarray)杂交 ,获得了鼻咽癌差异表达基因PROL4的全长cDNA序列 ,其GenBank登录号为 :AF5 30 4 72 .该基因包含 5 6 7个核苷酸 ,其编码产物是由 134个氨基酸组成的富... 在正常成人鼻咽与鼻咽癌活检组织之间进行抑制性消减杂交和微阵列 (microarray)杂交 ,获得了鼻咽癌差异表达基因PROL4的全长cDNA序列 ,其GenBank登录号为 :AF5 30 4 72 .该基因包含 5 6 7个核苷酸 ,其编码产物是由 134个氨基酸组成的富含脯氨酸蛋白 .采用RT PCR证实了PROL4基因在鼻咽癌细胞株HNE1和鼻咽癌活检组织中表达下调或缺失 (42 /48) .12种组织RNA印迹显示 :PROL4基因在人骨骼肌、胸腺和肺组织中表达 ,其转录本大小约为 0 6kb ,与所克隆的PROL4基因的cDNA大小一致 .进而通过肿瘤表达谱阵列(cancerprofilingarray)杂交检测了其在乳腺癌、子宫癌、结肠癌、胃癌、卵巢癌、肺癌、肾癌、直肠癌、甲状腺癌、子宫颈癌、前列腺癌、胰腺癌、小肠癌组织及其配对的正常组织的表达状况 . 展开更多

关键词 鼻咽癌 差异表达基因 PROL4 特性 克隆 基因表达

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石墨探针采集／石墨探针炉原子吸收法直接测定APM中痕量铟 被引量：7

3

作者 张必成 蔡火操 周立群 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1994年第6期99-103,共5页

采用一定气孔性的石墨探针直接收集大气微粒物质（ＡＰＭ），然后，立即采用石墨探针炉原于吸收法测定收集在探针上的ＡＰＭ中痕量铟。方法准确、灵敏、简便、快速。在０～５０ｎｇ／ｍｌ范围内，铟的浓度与峰面积吸光度呈良好的线性关... 采用一定气孔性的石墨探针直接收集大气微粒物质（ＡＰＭ），然后，立即采用石墨探针炉原于吸收法测定收集在探针上的ＡＰＭ中痕量铟。方法准确、灵敏、简便、快速。在０～５０ｎｇ／ｍｌ范围内，铟的浓度与峰面积吸光度呈良好的线性关系。铟的浓度大于３００ｎｇ／ｍｌ时，产生记忆效应。铟的特征量为４．８ｐｇ，检测限为２１．５Ｐｇ。分析标准参比材料，铟的回收率为９２．４～１０８．４％，相对标准偏差为８．１％。 展开更多

关键词 石墨探针 大气微粒物质 原子吸收法 铟

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鼻咽癌上皮细胞株HNE1差异表达基因的分离与鉴定 被引量：2

4

作者 张必成 周洁 +7 位作者 朱诗国 龚佳蕾 聂新民 吕红斌 何显锋 李小玲 胡赓熙 李桂源 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期743-750,共8页

为了分离鼻咽癌差异表达基因 ,应用抑制性扣除杂交技术 ,在正向抑制性扣除杂交中 ,以鼻咽癌上皮细胞株HNE1cDNA作为检测子 ,以人胚鼻咽上皮细胞cDNA作为驱赶子 ;在反向抑制性扣除杂交中 ,以人胚鼻咽上皮细胞cDNA作为检测子 ,以鼻咽癌上... 为了分离鼻咽癌差异表达基因 ,应用抑制性扣除杂交技术 ,在正向抑制性扣除杂交中 ,以鼻咽癌上皮细胞株HNE1cDNA作为检测子 ,以人胚鼻咽上皮细胞cDNA作为驱赶子 ;在反向抑制性扣除杂交中 ,以人胚鼻咽上皮细胞cDNA作为检测子 ,以鼻咽癌上皮细胞株HNE1cDNA作为驱赶子 ,分别通过抑制性扣除杂交 ,构建了鼻咽癌上皮细胞株HNE1表达下调和表达上调的两个扣除cDNA文库 .从鼻咽癌相关的扣除cDNA文库中随机挑取 1 2 0 0个克隆 ,采用菌落PCR扩增其插入cDNA片段 ,自动点膜制备成cDNA微阵列膜 ,分别用鼻咽癌上皮细胞株HNE1、人胚鼻咽上皮mRNA经逆转录标记cDNA探针 ,分别与cDNA微阵列膜杂交 ,通过杂交信号的自动扫描分析 ,对杂交信号存在 5倍差异的克隆进行测序 ,获得了 1 0个鼻咽癌差异表达基因的cDNA片段 ,其中 3个为新基因序列 ,其GenBank登录号为 :AF5 1 0 1 88、AF5 1 0 1 89和AF5 1 0 1 90 ,7个代表已知基因序列 .采用RT PCR证实S1 0 0A8,CK1 9和RBP1基因在人胚鼻咽上皮中高表达而在鼻咽癌细胞株HNE1中低表达 . 展开更多

关键词 鼻咽癌细胞株HNEl 抑制性扣除杂交 CDNA微阵列 差异表达基因

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渤海、黄海、东海海面热量平衡的平均状况——Ⅰ.资料处理和计算方法 被引量：4

5

作者 张必成 任允武 赵永平 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 1990年第3期26-30,共5页

渤、黄、东海海面热量平衡状况对该海域海洋水文和中国气候有着重要的影响。我们对该海域热量平衡各分量的年平均和年变化进行了计算,并分别就资料处理和计算方法、年平均状况、年变化特征等几个方面进行了分析。本文作为该项研究的第... 渤、黄、东海海面热量平衡状况对该海域海洋水文和中国气候有着重要的影响。我们对该海域热量平衡各分量的年平均和年变化进行了计算,并分别就资料处理和计算方法、年平均状况、年变化特征等几个方面进行了分析。本文作为该项研究的第一部分,讨论了所用的资料和计算公式,提出了在稳定温度层结条件下的交换系数的校正方法。 展开更多

关键词 海面 热量 平衡 资料 处理 计算

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自发性高血压大鼠的饲养管理与生长发育初探 被引量：11

6

作者 张必成 方加胜 彭兴华 《中国实验动物学杂志》 1995年第2期65-68,共4页

本文报告生产繁殖自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）适宜的环境和营养以及ＳＨＲ的生长、发育、繁殖情况。０～２６周的ＳＨＲ体重增长情况表明，从第７周开始，雄鼠体重明显高于雌鼠（Ｆ＜０．０５），４～１２周龄是ＳＨＲ体重增长最迅速的... 本文报告生产繁殖自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）适宜的环境和营养以及ＳＨＲ的生长、发育、繁殖情况。０～２６周的ＳＨＲ体重增长情况表明，从第７周开始，雄鼠体重明显高于雌鼠（Ｆ＜０．０５），４～１２周龄是ＳＨＲ体重增长最迅速的时期。ＳＨＲ种鼠繁殖四胎后及时淘汰，配种一周后雌雄种鼠及时分开饲养，这两条措施可提高ＳＨＲ的产量。 展开更多

关键词 自发性高血压 大鼠 饲养管理 生长发育

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长期饲喂中药西蒙Ⅰ号胶囊BGS对大鼠的毒性研究 被引量：1

7

作者 张必成 苏志杰 +2 位作者 方加胜 唐果成 王志纯 《中国实验动物学杂志》 1995年第4期219-222,共4页

将中药西蒙Ⅰ号（ＢＧＳ）胶囊拌食饲喂Ｗｉｓｔａｒ大鼠四个月余（１３５ｄ）．设高剂量组（１２００ｍｇ／ｋｇ），低剂量组（４５０ｍｇ／ｋｇ）和正常对照组。高剂量组大鼠在给药初期出现活动性下降、消瘦、腹泻等症状，其中３例大... 将中药西蒙Ⅰ号（ＢＧＳ）胶囊拌食饲喂Ｗｉｓｔａｒ大鼠四个月余（１３５ｄ）．设高剂量组（１２００ｍｇ／ｋｇ），低剂量组（４５０ｍｇ／ｋｇ）和正常对照组。高剂量组大鼠在给药初期出现活动性下降、消瘦、腹泻等症状，其中３例大鼠在给药后１３周出现死亡，３周以后大鼠逐渐恢复正常。三组大鼠体重增长、日耗饲料无明显差异。该药对大鼠血红蛋白、白细胞、血小板、尿素氮、尿常规、脏器系数、骨髓增生程度和巨核细胞值无明显影响。给药四个月后，高剂量组大鼠血清谷丙转氨酶值明显高于正常对照组，提示长期饲喂高剂量的西蒙Ｉ号（ＢＧＳ）会影响大鼠肝功能。对脏器作病理组织学观察表明，未发现药物毒性所致的病理学改变。 展开更多

关键词 中药 西蒙Ⅰ号胶囊 大鼠 毒性

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石墨探针采样／石墨炉原子吸收光谱测定大气微粒物质中的痕量铁

8

作者 张必成 《应用化学》 CAS CSCD 北大核心 1994年第2期85-88,共4页

采用一定规格的石墨探针直接收集大气微粒物质，并采用原子吸收光谱法测定其中的痕量铁。

关键词 GFAAS 石墨探针 铁 大气监测

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辉光放电、阴极溅射／瞬变原子化原子吸收光谱中阴极材料的研究

9

作者 张必成 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1994年第7期997-999,共3页

辉光放电、阴极溅射／瞬变原子化原子吸收光谱中阴极材料的研究张必成（湖北大学化学系，武汉，４３００６２）关键词辉光放电，阴极溅射，阴极材料辉光放电、阴极溅射／瞬变原子化原子吸收光谱（ＴＡＣＳＧＤ／ＡＡＳ）是近年来出现的... 辉光放电、阴极溅射／瞬变原子化原子吸收光谱中阴极材料的研究张必成（湖北大学化学系，武汉，４３００６２）关键词辉光放电，阴极溅射，阴极材料辉光放电、阴极溅射／瞬变原子化原子吸收光谱（ＴＡＣＳＧＤ／ＡＡＳ）是近年来出现的高灵敏度痕量分析技术［１］．它是通... 展开更多

关键词 辉光放电 阴极材料 原子吸收光谱

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富亮氨酸重复超家族新成员LRRC4的克隆与在脑瘤中的表达分析 被引量：19

10

作者 王洁如 钱骏 +6 位作者 董利 李小玲 谭琛 李江 张必成 周洁 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第2期233-239,共7页

在染色体 7q31 32多种肿瘤杂合性丢失 (lossofheterozygosity ,LOH)高频区 ,采用表达序列标签(expressedsequencetag ,EST)介导的定位候选克隆策略获得了一个定位于人染色体 7q31 32的新基因 (GenBank登录号 :AF196 976 ) .该基因编码 6... 在染色体 7q31 32多种肿瘤杂合性丢失 (lossofheterozygosity ,LOH)高频区 ,采用表达序列标签(expressedsequencetag ,EST)介导的定位候选克隆策略获得了一个定位于人染色体 7q31 32的新基因 (GenBank登录号 :AF196 976 ) .该基因编码 6 5 3个氨基酸 ,蛋白质理论pI m :6 5 8 72 7ku .它包含七个典型的LRR、一个IgC2样结构域 .此外 ,它还包含一个N端信号肽、一个C端跨膜区 .其结构特征表明它是富亮氨酸重复(leucine richrepeat,LRR)超家族的新成员 .经过人类基因组命名委员会的同意 ,将该基因命名为LRRC4.此外 ,通过序列相似性匹配还获得了定位于小鼠 6号染色体的LRRC4的同源基因 (GenBank登录号 :AF2 90 5 42 ) .RNA印迹和RT PCR检测发现LRRC4在正常人脑组织相对特异表达 ,而在多种原发性脑瘤表达明显下调或缺失 .综合考虑LRRC4基因的序列特征及表达谱 。 展开更多

关键词 富亮氨酸重复 超家族新成员 LRRC4 脑瘤 基因表达

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表达序列标签数据库搜索鉴定小鼠UBAP1基因及其数字化表达分析 被引量：13

11

作者 钱骏 董利 +6 位作者 张必成 王洁如 周鸣 李忠花 李伟芳 李小玲 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第2期323-327,共5页

UBAP1(ubiquitinassociatedprotein 1)基因是最近克隆的一个定位于人类染色体 9p2 1 2 2鼻咽癌杂合性丢失高频区的泛肽相关蛋白家族新成员 .为了深入研究UBAP1基因的功能 ,利用计算机对表达序列标签(expressedsequencetag ,EST)、UniGen... UBAP1(ubiquitinassociatedprotein 1)基因是最近克隆的一个定位于人类染色体 9p2 1 2 2鼻咽癌杂合性丢失高频区的泛肽相关蛋白家族新成员 .为了深入研究UBAP1基因的功能 ,利用计算机对表达序列标签(expressedsequencetag ,EST)、UniGene等数据库进行综合搜索分析 ,结合cDNA克隆测序的方法 ,成功地获得了UBAP1基因在小鼠中的同源基因 .小鼠UBAP1基因cDNA全长为 2 6 76bp ,编码一个由 44 1个氨基酸组成的蛋白质 ,在其蛋白质C端只有一个泛肽相关功能域 (UBAdomain) .与人UBAP1基因相比 ,两者编码的氨基酸序列有 89%相同 .基于EST的数字化表达分析显示UBAP1基因在小鼠正常组织中广泛高表达 . 展开更多

关键词 表达序列标签 数据库搜索 小鼠 UBAP1基因 数字化表达分析 鼻咽癌 组织表达 基因克隆

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实验教学内容改革的实践与思考 被引量：33

12

作者 陈怀侠 张必成 +1 位作者 蔡火操 黄建林 《实验技术与管理》 CAS 2001年第5期103-105,共3页

本文全面总结了近年来我室对高校分析化学实验内容改革的经验,分析了实验教学内容改革的必要性和紧迫性,提出了实验教学内容改革应建立在加强基本技能训练之上,逐步开设综合性实验的观点,探讨了实验教学内容改革的新模式,对整个实验教... 本文全面总结了近年来我室对高校分析化学实验内容改革的经验,分析了实验教学内容改革的必要性和紧迫性,提出了实验教学内容改革应建立在加强基本技能训练之上,逐步开设综合性实验的观点,探讨了实验教学内容改革的新模式,对整个实验教学改革做出了一些思考. . 展开更多

关键词 教学改革 高校 实验教学 分析化学

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BRD7单核苷酸多态性及鼻咽癌易感性分析 被引量：10

13

作者 余鹰 朱诗国 +4 位作者 向娟娟 李忠花 张必成 曹利 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第4期568-572,共5页

为了探讨BRD7基因的遗传变异在鼻咽癌发生的作用 ,采用PCR SSCP和直接测序方法对BRD7基因的编码区进行单核苷酸多态性 (coding regionsinglenucleotidepolymorphism ,cSNP)分析 ,并对两个鼻咽癌家系的高危成员、 5 7个散发性鼻咽癌病人... 为了探讨BRD7基因的遗传变异在鼻咽癌发生的作用 ,采用PCR SSCP和直接测序方法对BRD7基因的编码区进行单核苷酸多态性 (coding regionsinglenucleotidepolymorphism ,cSNP)分析 ,并对两个鼻咽癌家系的高危成员、 5 7个散发性鼻咽癌病人和 5 0个正常人进行了BRD7等位基因分型 .在BRD7基因的编码区发现了 3个cSNP (C45 0T、A5 38C和A737G) ,其中A5 38C颠换导致其编码蛋白的第 16 2个氨基酸由Asp变为Ala ;C45 0T改变与同义的A737C多态性偶联发生在 87 7%的鼻咽癌活检组织和配对的外周血、所有的鼻咽癌家系的患者及8个易感成员 ,但是仅存在于 2 2 %的正常人血标本中 .C45 0T多态性变化可以导致其编码蛋白在第 133位氨基酸的翻译终止 (G133Ter) .以上结果说明 ,C45 0T和A737C偶联的多态性改变是鼻咽癌发生和发展的重要遗传易感风险因子之一 (P <0 0 1) ;BRD7基因有两种翻译方式 ,G133Ter可以导致另一种截断的翻译本 (truncatedisoform) . 展开更多

关键词 鼻咽肿瘤 BRD7基因 易感基因 单核苷酸多态性

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微分脉冲阴极溶出伏安法测定环境水样中的痕量硒 被引量：29

14

作者 徐晖 张必成 王升富 《环境化学》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期386-391,共6页

采用微分脉冲阴极溶出伏安法测定环境水样中的痕量硒,以银电极为工作电极,在酸性介质０．０６ｍｏｌ·ｌ－１ＨＣｌ－０．０７ｍｏｌ·ｌ－１ＨＮＯ３溶液中于－０．３５Ｖ(ｖｓＳＣＥ)处富集２０ｍｉｎ,使Ｓｅ(Ⅳ)电沉积为硒... 采用微分脉冲阴极溶出伏安法测定环境水样中的痕量硒,以银电极为工作电极,在酸性介质０．０６ｍｏｌ·ｌ－１ＨＣｌ－０．０７ｍｏｌ·ｌ－１ＨＮＯ３溶液中于－０．３５Ｖ(ｖｓＳＣＥ)处富集２０ｍｉｎ,使Ｓｅ(Ⅳ)电沉积为硒化银．然后,以４０ｍＶ·ｓ－１的扫速,在碱性介质２．０ｍｏｌ·ｌ－１ＮａＯＨ溶液中阴极溶出至－１．２Ｖ(ｖｓＳＣＥ),硒化银被还原为银的溶出峰峰电位约为－０．８５Ｖ(ｖｓＳＣＥ) 硒的分析校正曲线直到４０ｎｇ·ｍｌ－１仍然成线性,检测下限为１１．５ｐｇ·ｍｌ－１,相关系数为０．９９８２,灵敏度为１０．９３μＡ/ｎｇ·ｍｌ－１．２０ｎｇ·ｍｌ－１的 ＲＳＤ(ｎ＝５)为 ｌ．２６%,检出限(３σ)为 ３．４６ｐｇ·ｍｌ－１．环境水样中常见离子的存在不干扰痕量硒的测定． 展开更多

关键词 微分脉冲阴极溶出伏安法 硒 环境水样 水质监测

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鼻咽癌侯选抑瘤基因BRD7原核表达载体的构建及其表达( 英文) 被引量：6

15

作者 聂新民 张必成 +6 位作者 向娟娟 朱诗国 周鸣 董利 余鹰 李小玲 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第4期631-634,共4页

BRD7基因是一个鼻咽癌侯选抑瘤基因 ,为了构建BRD7基因的原核表达载体并使其在大肠杆菌得到表达 ,设计了带有SalⅠ ,NotⅠ酶切位点的引物 ,以已构建好的质粒 pGEM TEasy/BRD7为模板 ,用PCR扩增出BRD7基因的完整阅读框架 ,并用SalⅠ ,No... BRD7基因是一个鼻咽癌侯选抑瘤基因 ,为了构建BRD7基因的原核表达载体并使其在大肠杆菌得到表达 ,设计了带有SalⅠ ,NotⅠ酶切位点的引物 ,以已构建好的质粒 pGEM TEasy/BRD7为模板 ,用PCR扩增出BRD7基因的完整阅读框架 ,并用SalⅠ ,NotⅠ酶切PCR产物和原核表达载体PGEX 4T 2 ,然后用T4DNA连接酶将其连接 ,得到重组表达质粒PGEX 4T 2 /BRD7,经双酶切鉴定和测序验证 ,表达载体构建正确 .重组表达质粒转化感受态大肠杆菌Jm10 5后用IPTG诱导 ,成功表达了一分子质量约为 90ku的融合蛋白 ;37℃诱导 4h后 ,SDS 聚丙烯酰胺凝胶 (PAGE)电泳后 ,经扫描分析该融合蛋白产量占菌体蛋白总量 2 8 4 8% ,蛋白质印迹 (Western blot)证实了该融合蛋白的表达获得成功 .这为BRD7基因的蛋白纯化及抗体制备 ,进一步开展其功能研究奠定了基础 . 展开更多

关键词 鼻咽癌 侯选抑瘤基因 BRD7 构建 表达 原核表达载体

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定位于染色体9p21-22的一个新基因UBAP1的克隆测序及在鼻咽癌中的表达分析 被引量：8

16

作者 钱骏 王洁如 +6 位作者 向秋 阳剑波 张小慧 张必成 曹莉 李伟芳 李桂源 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期299-305,共7页

在染色体 9p2 1 2 2鼻咽癌杂合性丢失 (lossofheterozygosity,LOH)高频区 ,应用EST介导的定位 侯选克隆策略 ,用RT PCR及Northern杂交检测了 2 2个表达序列标记 (expressedsequencetag ,EST)在鼻咽癌细胞株HNE1和原代培养的正常鼻咽上... 在染色体 9p2 1 2 2鼻咽癌杂合性丢失 (lossofheterozygosity,LOH)高频区 ,应用EST介导的定位 侯选克隆策略 ,用RT PCR及Northern杂交检测了 2 2个表达序列标记 (expressedsequencetag ,EST)在鼻咽癌细胞株HNE1和原代培养的正常鼻咽上皮细胞中的表达差异 ,并对其中一个在鼻咽癌细胞株HNE1中表达下调的EST检测了在鼻咽癌活检组织中的表达 .用生物信息学方法获得其全长cDNA序列 ,GenBank登录号AF2 2 2 0 4 3.该基因cDNA全长 2 70 1bp ,其开放阅读框 (openreadingframe ,ORF)编码一个含 50 2个氨基酸、分子量为 55kD的碱性蛋白质 ,在蛋白羧基端含有 2个连续的重要UBA功能域 (ubiquitinassociateddomain) ,属于遍在蛋白相关蛋白家族的一个新成员 ,经国际人类基因命名委员会同意 ,将其命名为UBAP1 (ubiquitinassociatedprotein 1 ) .Northern表达分析显示UBAP1在所检测的人组织中广泛表达 ,但在人的心脏、骨骼肌及肝脏中的表达较强 .UBAP1基因在63 2 % ( 1 2 1 9)的鼻咽癌活检组织中表达下调 .UBAP1基因作为一个遍在蛋白相关蛋白家族的新成员 ,结合其在 9p的重要定位信息 ,有必要进一步研究其表达下调参与鼻咽癌发生发展的可能机制 . 展开更多

关键词 鼻咽癌 染色体9p 基因克隆 表达分析 UBA功能域

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海上不同高度风速换算关系的研究 被引量：21

17

作者 陈永利 赵永平 +3 位作者 张必成 杨连素 吴术礼 宋珊 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 1989年第3期27-31,共5页

本文用海上石油平台上观测的风梯度资料,计算了在不同风况下海面摩擦速度和粗糙高度。结果表明,海面摩擦速度u_*与海上10m高度处风速u_(10)的关系为u_*=0.055u_(10)-0.058。在4—5级风时,海面平均摩擦速度为50cm/s,粗糙度为0.022m,它相... 本文用海上石油平台上观测的风梯度资料,计算了在不同风况下海面摩擦速度和粗糙高度。结果表明,海面摩擦速度u_*与海上10m高度处风速u_(10)的关系为u_*=0.055u_(10)-0.058。在4—5级风时,海面平均摩擦速度为50cm/s,粗糙度为0.022m,它相当于陆上的平均粗糙高度。在风速为2—3级时,二者与海上通常采用的数据接近。文中最后给出了上述两种风况下海上不同高度的换算系数。 展开更多

关键词 风速 风梯度 粗糙度 海风

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一个与化学因素致鼻咽癌相关的硝基还原酶基因的克隆与鉴定(英文) 被引量：6

18

作者 聂新民 周鸣 +6 位作者 唐珂 张必成 向娟娟 熊炜 吕红斌 李小玲 李桂源 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期423-428,共6页

在运用cDNAmicroarray分析鼻咽癌细胞系CNE1与正常鼻咽上皮细胞差异表达基因的基础上 ,发现ESTW 95 442在细胞系CNE1中存在明显表达下调 .随后采用生物信息学的方法克隆出了该EST所代表的硝基还原酶基因NOR1(GenBank登录号为AF4 6 2 348... 在运用cDNAmicroarray分析鼻咽癌细胞系CNE1与正常鼻咽上皮细胞差异表达基因的基础上 ,发现ESTW 95 442在细胞系CNE1中存在明显表达下调 .随后采用生物信息学的方法克隆出了该EST所代表的硝基还原酶基因NOR1(GenBank登录号为AF4 6 2 348) .Northern印迹分析表明 ,该基因在脑、心脏、肺等正常组织中均有 2个转录产物 (1.6kb ,1.2kb) .RT PCR分析显示 ,NOR1基因在鼻咽癌活检组织中也存在表达下调 .但酶活性测定实验表明 ,它在鼻咽癌细胞系CNE1中的活性比正常鼻咽上皮细胞高 .通过基因转染实验发现NOR1基因具有与细菌硝基还原酶NTR相似的功能 ,能够将单功能烷基化试剂 2 硝基苯氮丙啶类化合物CB195 4的第 4位硝基还原成亚硝基从而生成细胞毒性物质 .研究结果表明 。 展开更多

关键词 化学因素 鼻咽癌 硝基还原酶 基因克隆

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石墨探针直接收集和石墨探针炉原子吸收法测定APM中痕量镉 被引量：5

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作者 葛伊莉 周立群 +1 位作者 张必成 蔡火操 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1998年第4期446-449,共4页

本文采用多孔石墨探针直接采集大气微粒物质（ＡＰＭ）后，立即用石墨探针炉原子吸收法测定收集在探针上的ＡＰＭ中的镉。实验表明：峰面积吸光度与镉的浓度在０～５０μｇ／Ｌ呈良好的线性关系，镉的特征量和检出限（３σ）分别为２．... 本文采用多孔石墨探针直接采集大气微粒物质（ＡＰＭ）后，立即用石墨探针炉原子吸收法测定收集在探针上的ＡＰＭ中的镉。实验表明：峰面积吸光度与镉的浓度在０～５０μｇ／Ｌ呈良好的线性关系，镉的特征量和检出限（３σ）分别为２．４８和１．８６ｐｇ，其相对标准偏差为２．０６％（ｎ＝１１），分析标准参比材料，其回收率和相对标准偏差（ｎ＝１１）。分别为９０．１５～９９．２９％和４．０９％。方法准确、灵敏、快速、简便。 展开更多

关键词 石墨探针 原子吸收法 APM 镉 测定 大气微粒物质

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一个有假基因特点的鼻咽癌相关基因的分离和克隆(英文) 被引量：4

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作者 向娟娟 余鹰 +4 位作者 王洁如 朱诗国 张必成 李忠花 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第1期51-54,共4页

用定位候选克隆法克隆了一个与鼻咽癌相关的基因 ,命名为NAG73基因 .结构分析显示NAG73的基因序列无内含子 ,无典型的启动子序列 ,polyA尾 .与人类生长激素促分泌因子基因的第 4个外显子和 3′端非翻译区同源 .说明NAG73可能是人类生长... 用定位候选克隆法克隆了一个与鼻咽癌相关的基因 ,命名为NAG73基因 .结构分析显示NAG73的基因序列无内含子 ,无典型的启动子序列 ,polyA尾 .与人类生长激素促分泌因子基因的第 4个外显子和 3′端非翻译区同源 .说明NAG73可能是人类生长激素促分泌因子基因的假基因 .同时 ,实验证明NAG73在一些细胞和组织中活跃表达 .在正常鼻咽上皮细胞 ,鼻咽癌上皮细胞和鼻咽癌活检组织 ,NAG73有表达差异 .序列分析显示NAG73有编码翻译产物的可能 .NAG73可能可编码产物 .该产物在鼻咽癌的发病发展中发挥作用 . 展开更多

关键词 假基因 鼻咽癌相关基因 基因克隆 染色体3P

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