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靶向增殖细胞核抗原shRNA的构建及其对HepG2细胞增殖与凋亡的影响 被引量：1
1
作者 张小鹰 吴风云 +3 位作者 何金花 廖晓莉 王威 蒋建伟 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2010年第3期278-287,共10页
为了探讨抑制增殖细胞核抗原(PCNA)基因表达对人肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响,将前期筛选出的最佳siRNA序列转化为能表达其小发夹结构RNA(smallhairpinRNAs,shRNA)的DNA序列,并与pSilencer2.0-U6质粒定向连接,构建靶向PCNA基因的siRN... 为了探讨抑制增殖细胞核抗原(PCNA)基因表达对人肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响,将前期筛选出的最佳siRNA序列转化为能表达其小发夹结构RNA(smallhairpinRNAs,shRNA)的DNA序列,并与pSilencer2.0-U6质粒定向连接,构建靶向PCNA基因的siRNA真核表达载体pShPCNA,经DNA测序证实与设计完全一致.随后采用WST法及克隆形成抑制观察细胞增殖抑制情况、划痕实验来观察细胞迁移能力,流式细胞术、Hoechest33258染色、细胞线粒体膜电位改变检测细胞凋亡.在转染HepG2细胞48h后,pShPCNA组细胞PCNAmRNA表达明显下调,并出现明显的增殖抑制作用,明显抑制细胞克隆的形成和细胞的迁移力,且呈剂量-效应关系.流式细胞术检测发现:pShPCNA组细胞明显阻滞于G0/G1期,并出现明显的亚二倍体凋亡峰,出现明显的早期凋亡细胞群.荧光显微镜检测表明,细胞线粒体膜电位降低,并且细胞出现核固缩、凋亡小体等凋亡形态学变化.上述结果表明,成功构建了靶向PCNA基因的siRNA真核表达载体pShPCNA,pShPCNA转染HepG2细胞48h后,能够显著抑制细胞的生长增殖、诱导细胞凋亡、细胞周期阻滞于G0/G1期. 展开更多
关键词 RNA干扰 增殖细胞核抗原 真核细胞表达载体 HEPG2细胞 肝癌
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PEI介导PKC-α反义核酸对肝癌SMMC-7721细胞的增殖抑制作用
2
作者 张小鹰 蒋建伟 +3 位作者 陈涛 严玉霞 黎泳欣 何金花 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期355-360,共6页
目的:研究聚乙烯亚胺(PEI)-PKC-α反义脱氧核寡酸(ASODN)对人肝癌SMMC-7721细胞的增殖抑制作用。方法:RT-PCR检测肝癌SMMC-7721细胞、HepG2细胞PKC-α mRNA表达的差异,细胞增殖抑制实验检测PEI和ASODN混合的最佳质量比,WST法和克隆形成... 目的:研究聚乙烯亚胺(PEI)-PKC-α反义脱氧核寡酸(ASODN)对人肝癌SMMC-7721细胞的增殖抑制作用。方法:RT-PCR检测肝癌SMMC-7721细胞、HepG2细胞PKC-α mRNA表达的差异,细胞增殖抑制实验检测PEI和ASODN混合的最佳质量比,WST法和克隆形成抑制实验检测细胞增殖抑制作用,免疫荧光检测PKC-α的表达水平。结果:SSMC-7721细胞PKC-α mRNA表达相对较高,PEI和ASODN的质量比为0.75/1时是PEI转染反义核酸的合适比例,对SMMC-7721细胞具有明显的增殖克隆抑制作用,且呈剂量-效应关系;ASODN和PEI-ASODN对SMMC-7721的IC50分别为16.6μmol/L和0.58μmol/L;PEI-ASODN能够有效抑制PKC-α蛋白的生物合成。结论:PEI-ASODN能显著抑制SMMC-7721细胞增殖和克隆形成,下调PKC-α蛋白的表达。 展开更多
关键词 蛋白激酶C-Α 聚乙烯亚胺 反义核酸 肝癌 SMMC-7721细胞
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槐耳清膏诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡的实验研究 被引量：13
3
作者 吴志慧 蒋建伟 +3 位作者 曹明溶 陈涛 张小鹰 吴风云 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期370-373,共4页
目的研究槐耳清膏对胃癌SGC-7901细胞增殖抑制和凋亡诱导的作用,并探讨其作用机制。方法用终浓度为0、0.5、1、2、4、6 mg/mL的槐耳清膏和10μg/mL的5-氟尿嘧啶(5-Fu)作用于SGC-7901细胞,分别于24 h和48 h后采用MTT法检测细胞增殖抑制率... 目的研究槐耳清膏对胃癌SGC-7901细胞增殖抑制和凋亡诱导的作用,并探讨其作用机制。方法用终浓度为0、0.5、1、2、4、6 mg/mL的槐耳清膏和10μg/mL的5-氟尿嘧啶(5-Fu)作用于SGC-7901细胞,分别于24 h和48 h后采用MTT法检测细胞增殖抑制率;48 h后收集各组胃癌SGC-7901细胞,琼脂糖凝胶电泳检测DNA,流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-PCR检测survivin mRNA表达。结果MTT法检测显示,槐耳清膏对胃癌SGC-7901细胞有增殖抑制作用,并存在浓度和时间依赖关系(P<0.05);槐耳清膏6 mg/mL组的抑制率48 h后达到(77.9±2.3)%,5-Fu组为(53.4±1.6)%,差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞术检测显示,槐耳清膏4 mg/mL组的细胞凋亡率最高,早期凋亡细胞达33.2%;6 mg/mL组早期凋亡细胞6.3%,而晚期凋亡细胞为19.9%。RT-PCR结果显示,槐耳清膏组胃癌SGC-7901细胞survivin mRNA表达下调。结论槐耳清膏在体外对胃癌SGC-7901细胞有明显的增殖抑制和凋亡诱导作用,初步推断槐耳清膏诱发胃癌细胞凋亡与其对survivin基因表达的抑制有关。 展开更多
关键词 槐耳清膏 胃癌 凋亡 生存素
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促肝细胞生长素改善单侧输尿管梗阻大鼠肾脏纤维化的研究 被引量：4
4
作者 陈超 蒋建伟 +4 位作者 周序珑 严玉霞 吴颜晖 陈涛 张小鹰 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期365-370,共6页
目的:研究促肝细胞生长素(hepatocyte growth-promoting factor,pHGF)改善梗阻性肾病肾小管间质纤维化的疗效和机制。方法:17只SD大鼠随机分为假手术组(SOR)、单侧输尿管梗阻组(UUO)和pHGF治疗组。给药组用促肝细胞生长素pHGF(30μg.kg-... 目的:研究促肝细胞生长素(hepatocyte growth-promoting factor,pHGF)改善梗阻性肾病肾小管间质纤维化的疗效和机制。方法:17只SD大鼠随机分为假手术组(SOR)、单侧输尿管梗阻组(UUO)和pHGF治疗组。给药组用促肝细胞生长素pHGF(30μg.kg-1.d-1)大鼠腹腔注射,其余组给予等剂量生理盐水。14 d后收获大鼠。通过测定肾皮质羟脯氨酸含量比较纤维化改变;肾脏病理分析用H.E.和Masson染色,免疫组化检测TGF-β1,α-SMA,FN在肾组织中的表达。结果:肾组织羟脯氨酸定量UUO组明显高于SOR组,pHGF组,pHGF组介于二者之间,P(0.01;Masson染色SOR组仅在血管和基底膜处有绿染的胶原纤维,UUO组胶原成分增多,而pHGF组较UUO组明显改善,P(0.01。免疫组化显示pHGF能明显降低梗阻肾组织TGF-β1,α-SMA,FN的表达水平降低,与UUO组比较,P(0.01。结论:pHGF能有效缓解梗阻性肾病肾小管间质纤维化。 展开更多
关键词 促肝细胞生长素 单侧输尿管梗阻 肾间质纤维化
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新型军用头盔微晶显示器 被引量：2
5
作者 周宏 谌玉红 +1 位作者 张小鹰 陈晓 《兵工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第1期106-109,共4页
液晶显示器以其高清晰度、低功耗、重量轻和无辐射等一系列优异性能发展十分迅速。本文介绍了一种采用虚拟显示技术研制的新型军用头盔微晶显示器 ,主要用于单兵系统中数字图像、数据和文字信息的传递 ,通过头盔显示器士兵可看到计算机... 液晶显示器以其高清晰度、低功耗、重量轻和无辐射等一系列优异性能发展十分迅速。本文介绍了一种采用虚拟显示技术研制的新型军用头盔微晶显示器 ,主要用于单兵系统中数字图像、数据和文字信息的传递 ,通过头盔显示器士兵可看到计算机产生的图形数据、战场地图、敌方情报、己方位置等信息。该显示器选用动态向列液晶材料 ,将液晶显示器 (LCD)微晶片紧贴到集成电路硅片上 ,由这些电路直接驱动微晶材料 ,并用发光二极管 (LED)作光源 ,使红、绿、蓝点光源按域顺序在微晶显示器上产生全彩色图像。该微晶显示器还利用人眼的视觉原理 ,设计特殊光学系统 。 展开更多
关键词 液晶显示器 军用头盔 单兵系统 电子技术 虚拟显示 光学系统
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辛伐他汀联合5-FU对K562细胞增殖及凋亡的影响 被引量：1
6
作者 何金花 吴风云 +3 位作者 刘冠杰 张小鹰 廖晓丽 蒋建伟 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期578-582,共5页
目的:探讨辛伐他汀(Sim)联合5-FU对白血病K562细胞增殖及凋亡的影响,探讨其作用机制。方法:体外培养人白血病K562细胞,用MTT法观察Sim联合5-FU对细胞的增殖抑制作用,实时荧光定量RT-PCR观察对bcr/abl融合基因mRNA表达水平的影响。流式... 目的:探讨辛伐他汀(Sim)联合5-FU对白血病K562细胞增殖及凋亡的影响,探讨其作用机制。方法:体外培养人白血病K562细胞,用MTT法观察Sim联合5-FU对细胞的增殖抑制作用,实时荧光定量RT-PCR观察对bcr/abl融合基因mRNA表达水平的影响。流式细胞术、Hoechst33258染色观察Sim与5-FU联合应用诱导细胞凋亡的作用。结果:低浓度的Sim与5-FU联合应用在抑制细胞的增殖,诱导细胞凋亡,均较各单一高浓度用药组的作用明显增强,并且下调bcr/abl融合基因mRNA表达。结论:Sim与5-FU联用具有明显的协同抑制细胞增殖的作用,其作用机制可能与诱导细胞凋亡,下调bcr/abl融合基因的表达有关。 展开更多
关键词 辛伐他汀 5-氟尿嘧啶 K562细胞 凋亡
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甲状腺显示胸腺样分化的癌1例临床病理分析 被引量：1
7
作者 严智敏 陈健智 +3 位作者 张小鹰 姚岐 李璇 杨迪 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期802-804,共3页
目的探讨甲状腺显示胸腺样分化的癌(carcinoma showing thymus-like differentiation,CASTLE)的临床特点、组织学特征及鉴别诊断。方法回顾性分析1例CASTLE的临床特点、组织学形态及免疫表型,并复习相关文献。结果镜下见肿瘤细胞呈大小... 目的探讨甲状腺显示胸腺样分化的癌(carcinoma showing thymus-like differentiation,CASTLE)的临床特点、组织学特征及鉴别诊断。方法回顾性分析1例CASTLE的临床特点、组织学形态及免疫表型,并复习相关文献。结果镜下见肿瘤细胞呈大小不等的小叶状、巢状和条索状排列。瘤巢被纤细的血管穿插,周围被含有浆细胞的纤维间质包围。肿瘤细胞似合体细胞样或鳞状细胞样,胞质轻度嗜酸性,细胞核圆形或卵圆形,空泡状,可见小核仁,核形态较一致,核分裂象少见。免疫表型:肿瘤细胞表达CD5、CD117。结论 CASTLE临床罕见,易误诊,结合临床、组织学形态及免疫表型,必要时辅以电镜检查可明确诊断。 展开更多
关键词 甲状腺肿瘤 显示胸腺样分化的癌 CD5 CD117
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促肝细胞生长素部分逆转巨噬细胞趋化因子和马兜铃酸Ⅰ诱导的人肾小管上皮细胞转分化
8
作者 陈超 蒋建伟 +3 位作者 周序珑 严玉霞 陈涛 张小鹰 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期51-54,共4页
目的观察促肝细胞生长素(hepatocyte growth-promoting factor,pHGF)对巨噬细胞趋化因子(monocyte chemo-tatic protein-1,MCP-1)协同马兜铃酸Ⅰ(aristolochic acidⅠ,AAⅠ)诱导的人肾小管上皮细胞(HKC)凋亡及上皮细胞-间质细胞转分化(e... 目的观察促肝细胞生长素(hepatocyte growth-promoting factor,pHGF)对巨噬细胞趋化因子(monocyte chemo-tatic protein-1,MCP-1)协同马兜铃酸Ⅰ(aristolochic acidⅠ,AAⅠ)诱导的人肾小管上皮细胞(HKC)凋亡及上皮细胞-间质细胞转分化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响。方法体外培养的HKC随机分为:空白对照组、转分化模型组及不同浓度pHGF(0.15、1.5、15、150、1500ng/ml)处理组。转分化模型组采用MCP-1(0.1μg/ml)协同AAⅠ(10μg/ml)诱导HKC转分化模型;pHGF处理组采用不同浓度pHGF对转分化模型HKC进行处理;空白对照组常规培养。采用WST-8法和流式细胞术观察各组细胞增殖和凋亡情况;RT-PCR检测各组细胞α-SMA mRNA表达;免疫组化检测各组细胞α-SMA、TGF-β1、FN蛋白的表达。结果与空白对照组相比,转分化模型组、不同浓度pHGF处理组HKC细胞增殖抑制率,凋亡细胞所占比例,α-SMA mRNA表达均明显升高(P<0.01),提示转分化模型制备成功。与转分化模型组细胞相比,pHGF(150ng/ml)处理组HKC增殖抑制率明显降低(P<0.01),各浓度pHGF处理组HKC凋亡细胞所占比例均明显降低(P<0.01),HKC细胞α-SMA mRNA表达下调(150ng/ml pHGF处理组尤明显);α-SMA、TGF-β1、FN蛋白表达下调。结论pHGF(150ng/ml)可部分逆转MCP-1协同AAⅠ诱导的HKC增殖抑制、凋亡和EMT。 展开更多
关键词 促肝细胞生长素 肾小管上皮细胞 细胞凋亡 上皮-间质细胞转分化
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肺平滑肌瘤性错构瘤合并肺腺癌1例 被引量：1
9
作者 张小鹰 陈健智 +2 位作者 严智敏 凡琳琳 杨迪 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期369-370,共2页
患者男性,73岁,因咳嗽、咳痰2个月入院。胸部CT示左上肺尖后段近叶间胸膜处见一类圆形结节状密度增高影,形态欠规则,大小18 mm×16 mm,边界模糊,牵拉邻近胸膜,平扫CT值约38 HU,增强扫描呈轻度强化,考虑周围型肺癌。左下肺后基底段... 患者男性,73岁,因咳嗽、咳痰2个月入院。胸部CT示左上肺尖后段近叶间胸膜处见一类圆形结节状密度增高影,形态欠规则,大小18 mm×16 mm,边界模糊,牵拉邻近胸膜,平扫CT值约38 HU,增强扫描呈轻度强化,考虑周围型肺癌。左下肺后基底段胸膜下见一结节影,边界清楚,大小17mm×13 mm,CT值约14 HU,考虑错构瘤。 展开更多
关键词 肺肿瘤 平滑肌瘤性错构瘤 肺腺癌 病例报道
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羽扇豆醇联合miR-145-5p对前列腺癌细胞增殖与凋亡的影响 被引量：9
10
作者 张小鹰 何金花 +2 位作者 王浩 郭明星 梁春燕 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期1413-1421,共9页
目的:探讨羽扇豆醇(lupeol)联合微小RNA-145-5p(miR-145-5p)对前列腺癌细胞株LNCaP增殖与凋亡的影响。方法:将hsa-miR-145-5p和lupeol作用于LNCaP细胞24、48和72 h后用MTT法检测细胞活力抑制率;PI单染流式细胞术检测细胞周期;annexin V... 目的:探讨羽扇豆醇(lupeol)联合微小RNA-145-5p(miR-145-5p)对前列腺癌细胞株LNCaP增殖与凋亡的影响。方法:将hsa-miR-145-5p和lupeol作用于LNCaP细胞24、48和72 h后用MTT法检测细胞活力抑制率;PI单染流式细胞术检测细胞周期;annexin V/PI双染流式细胞术和TUNEL实验检测细胞凋亡;Transwell法检测细胞迁移和侵袭;划痕愈合实验检测细胞迁移能力;细胞集落形成实验计算集落形成抑制率。结果:细胞对照组、非特异性对照组和溶剂组未出现有效的LNCaP细胞活力抑制、迁移抑制和侵袭抑制,而hsa-miR-145-5p组和lupeol组细胞活力、迁移和侵袭受到显著抑制,并出现早期凋亡;联合用药(hsa-miR-145-5p+lupeol)组比单独用药组出现更有效的生长抑制作用。结论:hsa-miR-145-5p和lupeol均可抑制LNCaP细胞增殖、迁移和侵袭,并诱导体外早期凋亡;lupeol可增强hsa-miR-145-5p对LNCaP细胞的抑增殖和促凋亡作用。 展开更多
关键词 羽扇豆醇 微小RNA-145-5p 前列腺癌 细胞凋亡
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