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猪生长激素基因表达质粒的构建及其转基因动物研究被引量：6: 1; 作者陈清轩曹颉 +2 位作者宋德秀陈永福魏庆信《生物化学杂志》 CSCD 1997年第5期540-545,共6页; 将猪生长激素基因（ＰＧＨ）克隆到质粒ｐＵＣ１９上，经酶切分析，确定其酶切图谱．把ＰＧＨ转录起始位点以前的序列切掉，换上羊ＭＴ－１ａ基因的启动子，构建成可以调控的表达载体ｐＳＭＴＰＧＨ，用于转基因动物的研究．采用微注射... 展开更多; 关键词猪生长激素基因表达载体转基因动物质粒; 在线阅读下载PDF 职称材料

带有猪生长激素基因的转基因鼠被引量：1: 2; 作者陈清轩刘雷 +1 位作者曹颉宋德秀《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1992年第3期203-204,共2页; 为研究外源基因在转基因动物中的整合及表达调控的机制,我们首先进行了转基因鼠的研究。(a)外源基因片段的制备:把羊金属硫蛋白启动基因(SMT)和猪生长激素基因(PGH)与载体质粒pUC19相连接,构建成psMTPGH表达质粒。; 关键词 PCR 转基因鼠猪生长激素基因; 在线阅读下载PDF 职称材料

鲤鱼垂体mRNA反转录模板活性的研究: 3; 作者宋德秀刘勇 +1 位作者孙霁凌赵大健《生物化学杂志》 CAS CSCD 1991年第5期561-565,共5页; 本实验用不同方法研究鲤鱼垂体mRNA反转录为互补DNA的活性。用硫氰酸胍法,从垂体中提取总RNA,经过Oligo(dT)-纤维素柱层析,得到poly(A)^+RNA。以mRNA为模板,30％反转录成单链cDNA。利用RNaseH-DNA聚合酶Ⅰ-E.coli DNA连接酶合成双链cDN... 展开更多; 关键词鲤鱼垂体反转录酶克隆; 在线阅读下载PDF 职称材料

转猪生长激素基因家兔的研究: 4; 作者魏平华王建忠 +3 位作者邱伦和陈清轩曹颉宋德秀《草食家畜》 1992年第S1期133-136,共4页; 微注射法向家兔受精卵原核注入重组猪生长激素基因(pSMTPGH/BglI片段)。449枚注射卵经移植后共成胎和产仔56只。采集其中50只仔兔耳组织(约1克)提取总体DNA,用经Djgoxigenin-11-dUTP标记的3-5KbSMT-PGH探针对总体DNA斑点杂交,结果表明... 展开更多; 关键词转基因家兔微注射猪生长激素基因; 在线阅读下载PDF 职称材料

转基因处理后代猪的整合检测: 5; 作者魏平华王建忠 +4 位作者邱伦和彭国良陈清轩曹颉宋德秀《广东畜牧兽医科技》 1992年第3期18-18,34,共2页; 本研究对用猪精子电激转基因处理所获40头仔猪的总体DNA进行斑点杂交检测,结果如下:1 试验方法1.1 总体DNA的提取取0.5～1g猪尾部组织,在液氮中剪碎,加500ml消化液(10mM Tris·HCl、0.1mM EDTA,pH8.0,100μ g/ml蛋白酶K,0.5%SDS).... 展开更多; 关键词猪杂交 DNA 检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

SMT非同位素标记探针的制备: 6; 作者魏平华王建忠 +4 位作者邱伦和彭国良陈清轩曹颉宋德秀《畜牧兽医科技》 1992年第2期19-20,共2页; 本试验以一种核苷酸类似物Digoxigenin-11-dUTP(地高辛与dUTP的联接结构,地高辛只天然存在于毛地黄中,是理想的半抗原),用随机引物法掺入绵羊MT启动子(SMT),检测目的基因时再加入抗体一酶连接物(Anti-digoxigeninalkalinephosphatase)... 展开更多; 关键词 SMT 非同位素标记探针; 在线阅读下载PDF 职称材料

鲮鱼垂体Poly(A)^+RNA的分离和纯化及其生物活性鉴定: 7; 作者宋德秀郭波《生物化学杂志》 CSCD 1991年第1期21-24,共4页; 本文利用快速保温法分离纯化了鲮鱼垂体Poly(A)^+RNA,并首次在北农大“白粒146号”小麦麦胚体系中进行了体外翻译活性测定,对鲮鱼Poly(A)^+RNA其最适镁离子浓度为1.7mmol/L,最适Poly(A)^+RNA浓度为0.12μg/50mL,但钾离子浓度及预保温对... 展开更多; 关键词垂体鲮鱼 POLY(A) RNA; 在线阅读下载PDF 职称材料

转猪生长激素基因家兔获得成功被引量：3: 8; 作者魏平华王建忠 +3 位作者邱伦和陈清轩曹颉宋德秀《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第4期332-333,共2页; Palmiter等(1982)将大鼠生长激素基因注射到小鼠受精卵雄原核后移植,率先获得转外源基因动物。转基因并有表达的小鼠比一般小鼠生长快两倍。以后家兔(Brem等,1985),猪和绵羊(Hammer等,1986)等家畜都相继获得转基因后代。而且已有部分转... 展开更多; 关键词猪生长激素家兔转基因; 在线阅读下载PDF 职称材料

双抗体免疫沉淀法纯化牛生长激素poly(A)^+RNA的研究: 9; 作者史瀛仙宋德秀戴宗汉《生物化学杂志》 CSCD 1989年第4期354-358,384,共6页; 我们用双抗体免疫沉淀法,从牛垂体多聚核糖体中分离出牛生长激素特异多聚核糖体,由此多聚核糖体纯化的牛生长激素Poly(A)^+RNA,可以在麦胚体外翻译系统中和兔网织红细胞体外翻译系统中促进^(14)C-亮氨酸的参入。合成的含^(14)-亮氨酸的... 展开更多; 关键词牛生长激素多聚(A)^+RNA 免疫沉淀; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪生长激素基因表达质粒的构建及其转基因动物研究被引量：6: 1; 作者陈清轩曹颉宋德秀陈永福魏庆信; 机构中国科学院发育生物学研究所北京农业大学生物学院湖北省农科院畜牧兽医研究所; 出处《生物化学杂志》 CSCD 1997年第5期540-545,共6页; 基金国家"863"计划; 文摘将猪生长激素基因（ＰＧＨ）克隆到质粒ｐＵＣ１９上，经酶切分析，确定其酶切图谱．把ＰＧＨ转录起始位点以前的序列切掉，换上羊ＭＴ－１ａ基因的启动子，构建成可以调控的表达载体ｐＳＭＴＰＧＨ，用于转基因动物的研究．采用微注射法将线状ｐＳＭＴＰＧＨ导入猪、鼠和金鱼的受精卵中，得到了相应的转基因动物．对这些动物鉴定分析表明，外源基因整合率因动物不同而异，但该基因在这３种动物中的整合率均在９％以上，其生长速度都高于对照组．; 关键词猪生长激素基因表达载体转基因动物质粒; Keywords Porcine growth hormone gene,plasmid pSMTPGH,Transgenic animals; 分类号 S828.2 [农业科学—畜牧学] S188 [农业科学—农业基础科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名带有猪生长激素基因的转基因鼠被引量：1: 2; 作者陈清轩刘雷曹颉宋德秀; 机构中国科学院发育生物学研究所; 出处《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1992年第3期203-204,共2页; 文摘为研究外源基因在转基因动物中的整合及表达调控的机制,我们首先进行了转基因鼠的研究。(a)外源基因片段的制备:把羊金属硫蛋白启动基因(SMT)和猪生长激素基因(PGH)与载体质粒pUC19相连接,构建成psMTPGH表达质粒。; 关键词 PCR 转基因鼠猪生长激素基因; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鲤鱼垂体mRNA反转录模板活性的研究: 3; 作者宋德秀刘勇孙霁凌赵大健; 机构中国科学院发育生物学研究所天津南开大学; 出处《生物化学杂志》 CAS CSCD 1991年第5期561-565,共5页; 文摘本实验用不同方法研究鲤鱼垂体mRNA反转录为互补DNA的活性。用硫氰酸胍法,从垂体中提取总RNA,经过Oligo(dT)-纤维素柱层析,得到poly(A)^+RNA。以mRNA为模板,30％反转录成单链cDNA。利用RNaseH-DNA聚合酶Ⅰ-E.coli DNA连接酶合成双链cDNA。单链cDNA拷贝成双链cDNA。经放射自显影分析,证明合成了全长cDNA。用水解法合成双链cDNA,大多数为不完整的双链cDNA。平末端的双链cDNA连接上Eco RI-linker经Sepharose-4B分离,收集大片段cDNA,与pUC 19载体相连接,经转化构建成10~5克隆/μg mRNA的cDNA文库。; 关键词鲤鱼垂体反转录酶克隆; Keywords Reverse-transcriptase Cloning; 分类号 Q959.468 [生物学—动物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名转猪生长激素基因家兔的研究: 4; 作者魏平华王建忠邱伦和陈清轩曹颉宋德秀; 机构广东省农业科学院畜牧研究所中国科学院发育生物学研究所; 出处《草食家畜》 1992年第S1期133-136,共4页; 基金广东省自然科学基金资助项目。广东省农科院院长基金项目。; 文摘微注射法向家兔受精卵原核注入重组猪生长激素基因(pSMTPGH/BglI片段)。449枚注射卵经移植后共成胎和产仔56只。采集其中50只仔兔耳组织(约1克)提取总体DNA,用经Djgoxigenin-11-dUTP标记的3-5KbSMT-PGH探针对总体DNA斑点杂交,结果表明有15只仔兔为检测阳性。对上述阳性兔Southern印迹杂交进一步检测表明,有7只仔兔整合了导入的猪生长激素基因。出生仔兔中外源基因整合率为14％(7/50)。; 关键词转基因家兔微注射猪生长激素基因; 分类号 S8 [农业科学—畜牧兽医]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名转基因处理后代猪的整合检测: 5; 作者魏平华王建忠邱伦和彭国良陈清轩曹颉宋德秀; 机构广东省农科院畜牧研究所中科院发育生物学研究所; 出处《广东畜牧兽医科技》 1992年第3期18-18,34,共2页; 文摘本研究对用猪精子电激转基因处理所获40头仔猪的总体DNA进行斑点杂交检测,结果如下:1 试验方法1.1 总体DNA的提取取0.5～1g猪尾部组织,在液氮中剪碎,加500ml消化液(10mM Tris·HCl、0.1mM EDTA,pH8.0,100μ g/ml蛋白酶K,0.5%SDS).在55℃水浴中保温消化3小时。; 关键词猪杂交 DNA 检测; 分类号 S828.32 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名SMT非同位素标记探针的制备: 6; 作者魏平华王建忠邱伦和彭国良陈清轩曹颉宋德秀; 机构广东省农科院畜牧研究所中国科学院发育生物学研究所; 出处《畜牧兽医科技》 1992年第2期19-20,共2页; 文摘本试验以一种核苷酸类似物Digoxigenin-11-dUTP(地高辛与dUTP的联接结构,地高辛只天然存在于毛地黄中,是理想的半抗原),用随机引物法掺入绵羊MT启动子(SMT),检测目的基因时再加入抗体一酶连接物(Anti-digoxigeninalkalinephosphatase)与地高辛发生免疫反应。; 关键词 SMT 非同位素标记探针; 分类号 S852.3 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鲮鱼垂体Poly(A)^+RNA的分离和纯化及其生物活性鉴定: 7; 作者宋德秀郭波; 机构中国科学院发育生物学研究所; 出处《生物化学杂志》 CSCD 1991年第1期21-24,共4页; 基金 <淡水鱼生长激素及其基因结构与功能的研究>之Ⅰ 国家自然科学基金; 文摘本文利用快速保温法分离纯化了鲮鱼垂体Poly(A)^+RNA,并首次在北农大“白粒146号”小麦麦胚体系中进行了体外翻译活性测定,对鲮鱼Poly(A)^+RNA其最适镁离子浓度为1.7mmol/L,最适Poly(A)^+RNA浓度为0.12μg/50mL,但钾离子浓度及预保温对蛋白质的合成影响不大。实验结果表明鲮鱼垂体Poly(A)^+RNA的体外蛋白翻译活性达对照组的22倍。由于改进了方法,简化了操作程序,因此使鲮鱼垂体Poly(A)^+RNA的翻译活性大大提高了。; 关键词垂体鲮鱼 POLY(A) RNA; Keywords Poly(A)+RNA FGH Cell free translation system; 分类号 Q959.468 [生物学—动物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名转猪生长激素基因家兔获得成功被引量：3: 8; 作者魏平华王建忠邱伦和陈清轩曹颉宋德秀; 机构广东农科院畜牧研究所中国科学院发育生物学研究所; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第4期332-333,共2页; 文摘 Palmiter等(1982)将大鼠生长激素基因注射到小鼠受精卵雄原核后移植,率先获得转外源基因动物。转基因并有表达的小鼠比一般小鼠生长快两倍。以后家兔(Brem等,1985),猪和绵羊(Hammer等,1986)等家畜都相继获得转基因后代。而且已有部分转基因家畜能不同程度地表达整合基因,表现出目的性状。仅就已获得的约80头转生长激素基因猪的饲养试验结果来看,有近半数的转基因且表达者提高了生长速度约10％(Pursel等,1987、Vize等,1988),胴体瘦肉率也得以显著提高(Brem等,1988)。; 关键词猪生长激素家兔转基因; 分类号 S828.2 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名双抗体免疫沉淀法纯化牛生长激素poly(A)^+RNA的研究: 9; 作者史瀛仙宋德秀戴宗汉; 机构中国科学院发育生物学研究所; 出处《生物化学杂志》 CSCD 1989年第4期354-358,384,共6页; 基金国家自然科学基金; 文摘我们用双抗体免疫沉淀法,从牛垂体多聚核糖体中分离出牛生长激素特异多聚核糖体,由此多聚核糖体纯化的牛生长激素Poly(A)^+RNA,可以在麦胚体外翻译系统中和兔网织红细胞体外翻译系统中促进^(14)C-亮氨酸的参入。合成的含^(14)-亮氨酸的翻译产物中有91％可以被牛生长激素抗体沉淀。用SDS-11％PAGE对翻译产物进行鉴定表明,翻译产物在25KD处呈一条放射自显影带,与报导的牛生长激素前体分子量相吻合。; 关键词牛生长激素多聚(A)^+RNA 免疫沉淀; Keywords Bovine growth hormone Poly(A)^+ RNA Immunoprecipitation Identification of translation product; 分类号 Q781 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	猪生长激素基因表达质粒的构建及其转基因动物研究	陈清轩曹颉宋德秀陈永福魏庆信	《生物化学杂志》 CSCD	1997	6	在线阅读下载PDF 职称材料
2	带有猪生长激素基因的转基因鼠	陈清轩刘雷曹颉宋德秀	《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心	1992	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	鲤鱼垂体mRNA反转录模板活性的研究	宋德秀刘勇孙霁凌赵大健	《生物化学杂志》 CAS CSCD	1991	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	转猪生长激素基因家兔的研究	魏平华王建忠邱伦和陈清轩曹颉宋德秀	《草食家畜》	1992	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	转基因处理后代猪的整合检测	魏平华王建忠邱伦和彭国良陈清轩曹颉宋德秀	《广东畜牧兽医科技》	1992	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	SMT非同位素标记探针的制备	魏平华王建忠邱伦和彭国良陈清轩曹颉宋德秀	《畜牧兽医科技》	1992	0	在线阅读下载PDF 职称材料
7	鲮鱼垂体Poly(A)^+RNA的分离和纯化及其生物活性鉴定	宋德秀郭波	《生物化学杂志》 CSCD	1991	0	在线阅读下载PDF 职称材料
8	转猪生长激素基因家兔获得成功	魏平华王建忠邱伦和陈清轩曹颉宋德秀	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	1993	3	在线阅读下载PDF 职称材料
9	双抗体免疫沉淀法纯化牛生长激素poly(A)^+RNA的研究	史瀛仙宋德秀戴宗汉	《生物化学杂志》 CSCD	1989	0	在线阅读下载PDF 职称材料