犬新孢子虫miRNAs的鉴定与分析 被引量：1

1

作者 李京宇 陈金铭 +6 位作者 张明一 赵姗姗 陶德良 宋军科 杨新 樊莹莹 赵光辉 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期3085-3093,共9页

为鉴定犬新孢子虫(Neospora caninum)特异表达的miRNAs,并研究其在宿主细胞中的表达情况,本研究收集N.caninum速殖子感染的山羊子宫内膜上皮细胞(caprine endometrial epithelial cells,EECs)24和48 h的样本,用Illumina高通量测序平台... 为鉴定犬新孢子虫(Neospora caninum)特异表达的miRNAs,并研究其在宿主细胞中的表达情况,本研究收集N.caninum速殖子感染的山羊子宫内膜上皮细胞(caprine endometrial epithelial cells,EECs)24和48 h的样本,用Illumina高通量测序平台和生物信息学分析犬新孢子虫特异表达的miRNAs及其体外表达情况,并研究了一个上调的miRNA novel3_mature对犬新孢子虫在山羊EECs增殖的影响。结果发现,共鉴定出3404个犬新孢子虫特异表达的miRNAs(155个新预测miRNAs),其中77个(47个上调和30个下调)miRNAs显著差异表达;随机选取7个显著差异表达的miRNAs进行实时荧光定量PCR分析,结果与高通量测序结果一致;预测分析发现61个miRNAs的3978个靶基因,功能富集分析发现这些靶基因可能主要参与MAPK信号通路、突触导向、黏着斑、cMAP信号通路、钙信号通路等;转染novel3_mature的模拟物显著促进犬新孢子虫在山羊EECs中的增殖。犬新孢子虫存在多个特异表达的miRNAs,其在虫体增殖中发挥重要作用,研究成果为深入理解犬新孢子虫胞内生存提供了新的思路。 展开更多

关键词 犬新孢子虫 山羊子宫内膜上皮细胞 MIRNAS novel3_mature 增殖

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四川省甘孜州部分地区藏猪消化道寄生虫感染情况调查 被引量：1

2

作者 杨丹娇 张敏 +7 位作者 王俊伟 张敏 刘怡雯 且华敏 田维 赵光辉 叶忠明 宋军科 《动物医学进展》 北大核心 2024年第3期129-132,共4页

为了解四川省甘孜州部分地区藏猪消化道寄生虫感染情况,通过饱和盐水漂浮法结合形态学对采自该地区7个养殖场的176份藏猪新鲜粪便样品中的寄生虫虫卵和卵囊进行鉴定。结果显示,检测样品中猪蛔虫虫卵、猪毛尾线虫虫卵、食道口线虫虫卵以... 为了解四川省甘孜州部分地区藏猪消化道寄生虫感染情况,通过饱和盐水漂浮法结合形态学对采自该地区7个养殖场的176份藏猪新鲜粪便样品中的寄生虫虫卵和卵囊进行鉴定。结果显示,检测样品中猪蛔虫虫卵、猪毛尾线虫虫卵、食道口线虫虫卵以及猪囊等孢球虫卵囊的阳性率分别为42.04%(74/176)、25.57%(45/176)、5.11%(9/176)和43.18%(76/176),总感染率达75%(132/176);腹泻粪便样本寄生虫感染率80.88%(55/68),显著高于非腹泻粪便样本71.29%(77/108)(P<0.05);放牧藏猪寄生虫感染率85.06%(74/87),显著高于圈养藏猪65.17%(58/89)(P<0.05)。表明四川省甘孜州部分地区藏猪消化道寄生虫的感染较为严重,为该地区藏猪消化道寄生虫病的防控提供了依据。 展开更多

关键词 藏猪 消化道寄生虫 感染率

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寄生虫半胱氨酸蛋白酶研究进展 被引量：7

3

作者 宋军科 才学鹏 +3 位作者 骆学农 林青 窦永喜 于三科 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第12期95-98,共4页

半胱氨酸蛋白酶(Cysteine protease,CP)是一类在酶的活性中心含有半胱氨酸残基的蛋白水解酶。CP属于木瓜蛋白酶家族,广泛分布于从病毒至脊椎动物的生物体中。对人体半胱氨酸蛋白酶的研究主要集中在细胞凋亡分子机制和恶性肿瘤的基因诊... 半胱氨酸蛋白酶(Cysteine protease,CP)是一类在酶的活性中心含有半胱氨酸残基的蛋白水解酶。CP属于木瓜蛋白酶家族,广泛分布于从病毒至脊椎动物的生物体中。对人体半胱氨酸蛋白酶的研究主要集中在细胞凋亡分子机制和恶性肿瘤的基因诊断与治疗等方面。而对寄生虫半胱氨酸蛋白酶研究的内容则更为广泛,其中包含半胱氨酸蛋白酶在寄生虫免疫逃避、毒力、组织细胞入侵、蜕皮及包囊形成、孵化等作用的研究。研究发现,该酶具有较好的种特异性,既可作为寄生虫病诊断抗原和疫苗候选分子,同时,也是药物治疗寄生虫病的靶标。因此,论文重点对寄生虫半胱氨酸蛋白酶近年的研究进展做一综述。 展开更多

关键词 寄生虫 半胱氨酸蛋白酶 生物学特性

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陕西永寿县某羊场寄生虫种类的调查研究 被引量：6

4

作者 宋军科 于三科 袁超 《动物医学进展》 CSCD 2007年第6期107-108,共2页

陕西省永寿县某羊场共有羊471只,其中布尔山羊92只,无角道赛特118只,莎能奶山羊96只,同羊40只,小尾寒羊50只,道赛特羔羊75只。通过对羊群进行粪便检查、剖检等方法,共发现寄生虫13种。其中,内寄生虫有12种,包括矛形双腔吸虫(Dicrocoeliu... 陕西省永寿县某羊场共有羊471只,其中布尔山羊92只,无角道赛特118只,莎能奶山羊96只,同羊40只,小尾寒羊50只,道赛特羔羊75只。通过对羊群进行粪便检查、剖检等方法,共发现寄生虫13种。其中,内寄生虫有12种,包括矛形双腔吸虫(Dicrocoelium dendriticum)卵及成虫,毛首线虫(Trichuris)卵,细颈线虫(Nematodirus)卵,捻转血矛线虫(Haemonchus contortus)卵及成虫,奥斯特线虫(Osteragia)卵,毛圆线虫(Trichostrongylus)卵,食道口线虫(Oesophagostomum)卵,羊仰口线虫(Bunostomum trigonocephalum)卵,夏伯特线虫(Chabertia ovina)卵,丝状网尾线虫(Dictyocaulusfilaria)成虫及一期幼虫,艾美耳球虫(Eimeria)卵囊,细颈囊尾蚴(Cysticercus tenuicollis),外寄生虫1种为血蜱(Heamaphysalis)。其中线虫、球虫感染率高,感染强度大。 展开更多

关键词 羊 寄生虫 线虫 球虫

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奶牛乳房炎病原菌的分离鉴定 被引量：16

5

作者 赵战峰 宋军科 于三科 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第4期113-115,共3页

对西安地区某些奶牛场50头乳房炎阳性奶牛的50个乳样进行细菌分离鉴定,共分离出细菌122株,鉴定出17种细菌。其中葡萄球菌检出47次,占38.53%;链球菌检出22次,占18.04%;大肠埃希菌检出15次,占12.30%;由葡萄球菌、链球菌和大肠埃希菌引起... 对西安地区某些奶牛场50头乳房炎阳性奶牛的50个乳样进行细菌分离鉴定,共分离出细菌122株,鉴定出17种细菌。其中葡萄球菌检出47次,占38.53%;链球菌检出22次,占18.04%;大肠埃希菌检出15次,占12.30%;由葡萄球菌、链球菌和大肠埃希菌引起的乳房炎检出次数,占68.87%。引起该地区奶牛乳房炎的主要病原菌以金黄色葡萄球菌为主,且多数是由2种~3种病原菌引起,混合感染率为78%。 展开更多

关键词 乳房炎 病原菌 分离鉴定 奶牛

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秦岭羚牛寄生虫种类的调查研究 被引量：5

6

作者 于三科 潘广林 +3 位作者 马清义 林青 宋军科 孙韵 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第12期121-123,共3页

近年来,对陕西省珍稀野生动物抢救饲养研究中心所饲养的20余头羚牛(Budorcas taxicolor)进行了寄生虫种类的调查研究,所获寄生虫标本经鉴定共有11种,其中吸虫2种、绦虫2种、线虫4种、原虫1种、硬蜱1种、毛虱1种,包括印度槽盘吸虫(Ogmaco... 近年来,对陕西省珍稀野生动物抢救饲养研究中心所饲养的20余头羚牛(Budorcas taxicolor)进行了寄生虫种类的调查研究,所获寄生虫标本经鉴定共有11种,其中吸虫2种、绦虫2种、线虫4种、原虫1种、硬蜱1种、毛虱1种,包括印度槽盘吸虫(Ogmacotyle indica),矛形歧腔吸虫(Dicrocoeliumlanceatum),贝氏莫尼茨绦虫(Moniezia benedeni),细颈嚢尾蚴(Cysticercus tenuicollis),捻转血矛线虫(Haemonchus contortus),原圆线虫(Protostrongylus sp.),仰口线虫(Bunostomum sp.),美丽筒线虫(Gongylonema pulchrum),艾美耳球虫(Eimeriaspp.),血蜱(Haemaphysalis sp.),毛虱(Trichodectes sp.)。 展开更多

关键词 羚牛 寄生虫 种类

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应用ELISA检测紫外线减毒柔嫩艾美耳球虫YL株虫苗抗体 被引量：3

7

作者 李健 宋军科 +2 位作者 战美娜 林青 于三科 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第S1期117-120,共4页

将无球虫雏鸡随机分为2组,在9日龄和16日龄分别进行首免和二免。用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清抗球虫抗体的变化情况。结果显示,雏鸡的抗体水平动态变化整体呈上升趋势,并且在二免后第11天出现峰值(0.398),其后稳定地维持在较... 将无球虫雏鸡随机分为2组,在9日龄和16日龄分别进行首免和二免。用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清抗球虫抗体的变化情况。结果显示,雏鸡的抗体水平动态变化整体呈上升趋势,并且在二免后第11天出现峰值(0.398),其后稳定地维持在较高水平;对照组抗体水平稳中有降。抗体水平动态变化表明,紫外线减毒柔嫩艾美耳球虫YL株有较强的免疫保护力。 展开更多

关键词 ELISA 柔嫩艾美耳球虫 抗体

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德国牧羊犬复孔绦虫种类鉴定和遗传进化分析 被引量：1

8

作者 简永利 于三科 +5 位作者 宋军科 王会宝 高永安 王清艳 李培德 涂宜强 《动物医学进展》 北大核心 2022年第2期54-58,共5页

为了对采集自3只德国牧羊犬小肠内的复孔绦虫进行种类鉴定和遗传进化分析,通过形态学方法对分离到的虫体进行孔雀绿染色后显微镜观察,并进一步基于线粒体部分基因(p cox 1和p nad 1)进行PCR扩增和序列分析。显微镜观察结果表明,分离到... 为了对采集自3只德国牧羊犬小肠内的复孔绦虫进行种类鉴定和遗传进化分析,通过形态学方法对分离到的虫体进行孔雀绿染色后显微镜观察,并进一步基于线粒体部分基因(p cox 1和p nad 1)进行PCR扩增和序列分析。显微镜观察结果表明,分离到的虫体形态和内部结构符合犬复孔绦虫的特征。通过对扩增的靶基因序列及其遗传进化分析发现,3个虫体样本的p cox 1和p nad 1序列完全一致,构建系统发生树显示这些虫体均与Dipylidium caninum(AB732959)位于同一进化支。以上结果提示,分离到的绦虫种为犬复孔绦虫(D.caninum)。研究结果为宠物复孔绦虫病的诊断和防控奠定了基础。 展开更多

关键词 犬复孔绦虫 形态 细胞色素C氧化酶Ⅰ亚基 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶Ⅰ亚基 序列分析

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内蒙古阿拉善盟左旗部分地区双峰驼消化道线虫感染情况的调查研究 被引量：2

9

作者 陈曦 姚倩 +6 位作者 王德军 孟柯其其格 徐创美 何新梅 乌林花 李国中 宋军科 《动物医学进展》 北大核心 2019年第10期130-133,共4页

为了明确阿拉善盟左旗双峰驼消化道线虫的感染情况,在该地区5个采样点(巴彦浩特、苏海图、吉兰泰、沙日布日都和日泰格里)共采集137份双峰驼新鲜粪便样品,通过饱和盐水漂浮法和光学显微镜下对样品中的线虫虫卵进行检测。结果表明,该地... 为了明确阿拉善盟左旗双峰驼消化道线虫的感染情况,在该地区5个采样点(巴彦浩特、苏海图、吉兰泰、沙日布日都和日泰格里)共采集137份双峰驼新鲜粪便样品,通过饱和盐水漂浮法和光学显微镜下对样品中的线虫虫卵进行检测。结果表明,该地区双峰驼消化道线虫总感染率为29.19%(40/137),其中,巴彦浩特双峰驼感染率最高为65.00%(26/40),苏海图双峰驼具有最低感染率3.00%(1/27);幼驼和成年双峰驼的总感染率分别为42.86%(12/28)和5.69%(28/109),但差异不显著(P>0.05)。进一步通过形态学检测,共鉴定出该地区双峰驼消化道中有4种线虫虫卵(毛圆线虫卵、细颈线虫卵、马歇尔线虫卵和食道口线虫卵),其中毛圆线虫虫卵在各地区和各年龄段双峰驼中均有发现,为优势虫卵。综上所述,明确了该地区双峰驼消化道线虫感染情况,可为当地双峰驼消化道线虫病的防控提供理论依据。 展开更多

关键词 双峰驼 消化道线虫 虫卵 感染率

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温洲地区部分奶牛场隐孢子虫种类与分布调查

10

作者 简永利 涂宜强 +4 位作者 王会宝 高永安 王蒙 于三科 宋军科 《动物医学进展》 北大核心 2023年第2期127-132,共6页

为阐明浙江省温州地区奶牛隐孢子虫感染情况及其种类分布,对地处温州市的乐清市、瑞安市和平阳县的3个奶牛场85份新鲜荷斯坦奶牛粪便样品进行DNA提取,并基于隐孢子虫小亚基核糖体核苷酸(SSU rRNA)基因位点设计特异扩增引物,进行隐孢子虫... 为阐明浙江省温州地区奶牛隐孢子虫感染情况及其种类分布,对地处温州市的乐清市、瑞安市和平阳县的3个奶牛场85份新鲜荷斯坦奶牛粪便样品进行DNA提取,并基于隐孢子虫小亚基核糖体核苷酸(SSU rRNA)基因位点设计特异扩增引物,进行隐孢子虫PCR扩增、测序和序列分析。结果显示,3个奶牛场奶牛隐孢子虫的总感染率为34.1%(29/85),其中,平阳县感染率最高,达42.6%(20/47);在不同年龄段奶牛中,断奶前犊牛感染率最高,达64.3%(18/28)。共检出4种隐孢子虫,分别为牛隐孢子虫(Cryptosporidium bovis)、瑞氏隐孢子虫(C.ryanae)、安氏隐孢子虫(C.andersoni)和奇异隐孢子虫(C.occultus),且在29份阳性样品中,C.bovis的占比最高(34.5%,10/29),分布范围最广,成为该地区奶牛感染隐孢子虫的优势虫种。结果提示,温洲地区奶牛隐孢子虫感染较为普遍,且种类较多。研究结果可为该地区奶牛隐孢子虫病的防控提供基础数据。 展开更多

关键词 隐孢子虫 奶牛 分布 调查

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毒害艾美耳球虫和产气荚膜梭菌双重PCR检测方法的建立

11

作者 陈曦 王一 +3 位作者 王佳丽 杨新 宋军科 赵光辉 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期3985-3990,共6页

旨在初步建立可同时检测毒害艾美耳球虫(Eimeria necatrix)和产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)的双重PCR及纳米PCR检测方法。基于E.necatrix的ITS-2基因和C.perfringens的α毒素基因分别设计、筛选靶基因位点的特异性扩增引物,通... 旨在初步建立可同时检测毒害艾美耳球虫(Eimeria necatrix)和产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)的双重PCR及纳米PCR检测方法。基于E.necatrix的ITS-2基因和C.perfringens的α毒素基因分别设计、筛选靶基因位点的特异性扩增引物,通过反应体系和退火温度的优化,建立适用于两种病原的特异性双重PCR和双重纳米PCR检测方法;用所建立的方法对6种其它常见寄生性原虫和3种其他细菌进行PCR扩增以验证其特异性;构建两种病原的重组质粒pMD19-T-ITS2和pMD19-T-cpa,将其按10倍倍比稀释成不同浓度梯度的质粒模板用于所建方法的敏感性试验。结果表明:两种方法均能特异性扩增出E.necatrix约150 bp和C.perfringens约400 bp的目的片段,且所建立的两种检测方法对其他6种其他原虫和3种其他细菌的检测结果均为阴性;双重PCR扩增E.necatrix和C.perfringens的最低模板检出量分别是181和1050 copies,而双重纳米PCR的最低模板检出量分别是1.81和105 copies;临床检测结果显示,所建立的2种方法与临床病原学检测结果一致。成功建立了用于E.necatrix和C.perfringens双重PCR和双重纳米PCR检测方法,且敏感性好、特异性高,可为临床上毒害艾美耳球虫和产气荚膜梭菌感染的检测提供技术支持。 展开更多

关键词 毒害艾美耳球虫 产气荚膜梭菌 PCR 纳米PCR

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西北部分地区藏香猪隐孢子虫感染情况研究 被引量：3

12

作者 杨梦婷 张会军 +3 位作者 李蕴慧 林青 宋军科 赵光辉 《动物医学进展》 北大核心 2020年第7期130-134,共5页

为了解我国西北部分地区藏香猪隐孢子虫的感染和种类分布,从陕西省和青海省采集了共450份藏香猪新鲜粪便样品,基于隐孢子虫18S rRNA基因的分子生物学方法对粪便样品中隐孢子虫感染情况及其种类进行了研究。结果显示,藏香猪隐孢子虫总感... 为了解我国西北部分地区藏香猪隐孢子虫的感染和种类分布,从陕西省和青海省采集了共450份藏香猪新鲜粪便样品,基于隐孢子虫18S rRNA基因的分子生物学方法对粪便样品中隐孢子虫感染情况及其种类进行了研究。结果显示,藏香猪隐孢子虫总感染率为14.2%,青海省藏香猪的感染率(23.9%)显著高于陕西省(3.7%)(P<0.01);不同年龄段藏香猪隐孢子虫感染率差异显著(P<0.01),其中断奶后仔猪感染率(42.9%)最高,而哺乳仔猪和成年猪均未检测到隐孢子虫的感染;序列分析发现,藏香猪的隐孢子虫均为Cryptosporidium scrofarum。研究结果为藏香猪隐孢子虫病的防控提供了基础数据。 展开更多

关键词 隐孢子虫 藏香猪 18S RRNA 感染率 种类

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宿主抗新孢子虫感染的免疫机制研究进展 被引量：3

13

作者 陶德良 赵姗姗 +4 位作者 陈曦 陈金铭 杨新 宋军科 赵光辉 《动物医学进展》 北大核心 2022年第12期104-108,共5页

新孢子虫病是一种危害世界养牛业的重要动物原虫病,其病原为顶复门寄生原虫新孢子虫,主要造成牛、羊等反刍动物的流产。目前缺少可以用来预防或治疗新孢子虫病的疫苗和药物,究其原因,主要是由于对新孢子虫致病机制的认识有限。研究表明... 新孢子虫病是一种危害世界养牛业的重要动物原虫病,其病原为顶复门寄生原虫新孢子虫,主要造成牛、羊等反刍动物的流产。目前缺少可以用来预防或治疗新孢子虫病的疫苗和药物,究其原因,主要是由于对新孢子虫致病机制的认识有限。研究表明,新孢子虫感染导致流产的机制与母胎界面的炎症以及感染刺激宿主细胞介导的免疫反应有关。先天免疫反应中的模式识别受体在识别新孢子虫感染中起着关键作用,并进一步激活下游的多种级联信号通路;适应性免疫中的Th1型细胞免疫在抗新孢子虫入侵以及清除新孢子虫中也发挥着至关重要的作用。论文主要综述模式识别受体、先天免疫途径以及细胞免疫等在宿主抵抗新孢子虫感染中的研究进展,以期为后续新孢子虫致病机制的深入研究及防控措施的开发提供参考。 展开更多

关键词 新孢子虫 先天免疫 模式识别受体 信号通路 Th1型细胞免疫

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山羊源3种不同形态阴门盖捻转血矛线虫雌虫的多位点序列分析 被引量：2

14

作者 梁高星 荣诗琪 +4 位作者 王俊伟 李媛 杨新 赵光辉 宋军科 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期3140-3148,共9页

旨在解析3种不同形态阴门盖捻转血矛线虫(Haemonchus contortus)的遗传进化差异,本研究从养殖场山羊皱胃中分离到捻转血矛线虫虫体,采用普通光学显微镜观察71条雌虫虫体阴门盖的形态结构特征,并基于捻转血矛线虫ITS-1、ITS-2和nad4基因... 旨在解析3种不同形态阴门盖捻转血矛线虫(Haemonchus contortus)的遗传进化差异,本研究从养殖场山羊皱胃中分离到捻转血矛线虫虫体,采用普通光学显微镜观察71条雌虫虫体阴门盖的形态结构特征,并基于捻转血矛线虫ITS-1、ITS-2和nad4基因位点,采用PCR法对不同阴门盖的虫体进行扩增,通过比对多位点序列进行遗传进化分析。经显微镜观察发现,本研究分离到的捻转血矛线虫雌虫阴门盖存在舌瓣形、亚球形和舌-球混合形3种形态,所占比例分别为45.07%(32/71)、50.70%(36/71)和4.23%(3/71)。对43条雌虫全长和阴门至虫体末端长度进行测量和统计分析,结果显示,3种不同形态阴门盖的捻转血矛线虫全长统计学差异不显著(P>0.05),而3种不同形态阴门盖的捻转血矛线虫阴门至虫体末端的长度存在显著性差异(P<0.05)。基于捻转血矛线虫ITS-1、ITS-2和nad4基因进行的序列分析结果显示,不同形态阴门盖虫体的9个样品在3个基因位点上存在不同程度的碱基差异,多态性位点分别为10、13和43个,核苷酸多态性分别为0.85%、1.34%和1.97%。基于ITS-1和ITS-2构建的遗传进化树显示,研究中所用样品与GenBank上H.contortus的参考序列处于同一进化支,表明本研究所分离到的虫体均属捻转血矛线虫。捻转血矛线虫雌虫的阴门盖存在形态学差异,不同形态阴门盖虫体在ITS-1、ITS-2和nad4基因位点上均存在不同程度的碱基差异,此研究结果为捻转血矛线虫的种类鉴定和遗传进化提供了参考数据。 展开更多

关键词 捻转血矛线虫 阴门盖 形态学 基因位点 序列分析

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陕南白山羊感染泰勒虫的种类鉴定及其遗传进化分析 被引量：6

15

作者 于正青 宋军科 +3 位作者 张会军 刘婷丽 范现成 赵光辉 《动物医学进展》 北大核心 2018年第8期1-5,共5页

为了解陕南地区白山羊泰勒虫的感染情况,采用形态学和分子生物学相结合的方法对121份来自陕西省陕南地区白山羊的血液样品进行检测。血液涂片染色后形态学检测结果表明,112份血液涂片的红细胞中存在大小约1μm,呈圆点形、卵圆形或短杆... 为了解陕南地区白山羊泰勒虫的感染情况,采用形态学和分子生物学相结合的方法对121份来自陕西省陕南地区白山羊的血液样品进行检测。血液涂片染色后形态学检测结果表明,112份血液涂片的红细胞中存在大小约1μm,呈圆点形、卵圆形或短杆状多形性虫体。基于泰勒虫SSU rRNA基因位点对提取的血液样品DNA进行套式PCR扩增。结果表明,陕南地区白山羊的血液样品中泰勒虫阳性率为92.6%(112/121),且该结果与形态学检测结果相一致。通过比对发现,所获得的泰勒虫分离株与获取自GenBank中的吕氏泰勒虫相应基因序列序列同源性在99%以上。进一步构建遗传进化树发现,获得的泰勒虫分离株与吕氏泰勒虫(登录号:JN676988、AF081136)归于同一支,提示陕南地区白山羊感染的泰勒虫种为吕氏泰勒虫。 展开更多

关键词 陕南白山羊 泰勒虫 核糖体小亚基RNA 种类

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隐孢子虫AOX和TSP6核酸疫苗的制备及免疫保护性研究 被引量：2

16

作者 田格如 于三科 +5 位作者 宋军科 吴礼平 王会宝 孔学礼 张峰华 仇薪鑫 《动物医学进展》 北大核心 2020年第3期46-51,共6页

旨在制备微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)线粒体蛋白(AOX)基因和微线体蛋白(TSP6)基因的DNA疫苗,评价其对贝氏隐孢子虫(Cryptosporidium baileyi)感染雏鸡的免疫保护性。根据GenBank库中AOX和TSP6基因的序列设计引物,扩增出编码2... 旨在制备微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)线粒体蛋白(AOX)基因和微线体蛋白(TSP6)基因的DNA疫苗,评价其对贝氏隐孢子虫(Cryptosporidium baileyi)感染雏鸡的免疫保护性。根据GenBank库中AOX和TSP6基因的序列设计引物,扩增出编码2个保护性抗原基因的DNA片段,利用DNA重组技术将2个目的片段分别克隆到真核表达载体pVAX1,制成核酸疫苗pVAX1-AOX和pVAX1-TSP6。将制备的核酸疫苗肌肉注射免疫雏鸡,共分为4组,pVAX1组,pVAX1-AOX组,pVAX1-TSP6组,pVAX1-AOX+pVAX1-TSP6组,2周后检测雏鸡血清IgG抗体滴度和细胞因子(IL-4和IFN-γ)水平的变化。结果显示,免疫组中鸡的血清特异性IgG抗体水平、细胞因子IFN-γ都有明显的升高。攻卵囊试验结果表明,免疫组比对照组的排卵囊量明显减少,且排卵囊时间有所缩短。表明制备的pVAX1-AOX和pVAX1-TSP6核酸疫苗有较好的免疫保护作用。 展开更多

关键词 隐孢子虫 AOX基因 TSP6基因 真核表达载体 免疫保护

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山羊美丽筒线虫ITS序列的PCR扩增及分析 被引量：1

17

作者 王亚男 宋军科 +2 位作者 赵光辉 边青青 于三科 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第12期80-84,共5页

以神木山羊体内分离出的美丽筒线虫为研究对象,用保守引物进行PCR扩增其核糖体DNA(rDNA)的内转录间隔区(ITS)和5.8S序列,并进行克隆、转化、测序和序列分析,对样品进行分子鉴定。结果获得一个美丽筒线虫样品的ITS及5.8SrDNA序列,总长均... 以神木山羊体内分离出的美丽筒线虫为研究对象,用保守引物进行PCR扩增其核糖体DNA(rDNA)的内转录间隔区(ITS)和5.8S序列,并进行克隆、转化、测序和序列分析,对样品进行分子鉴定。结果获得一个美丽筒线虫样品的ITS及5.8SrDNA序列,总长均为1 035bp。将序列与GenBankTM公布的相关序列进行比较分析,结果显示美丽筒线虫分离株ITS1与参考株的相似性为98.1%～99.7%,ITS2、5.8S序列与参考株相似性均达到100%。本研究是第一次从山羊体内获得美丽筒线虫ITS序列,为其分子学的进一步研究提供了基础资料。 展开更多

关键词 美丽筒线虫 ITS PCR 序列分析’

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环状RNA ciRS-7靶向miR-219a-5p影响微小隐孢子虫体外增殖的机制 被引量：2

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作者 尹艳玲 黄爽 +5 位作者 姚倩 吴江平 郭浩晨 杨新 宋军科 赵光辉 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期3989-3999,共11页

旨在探究环状RNA ciRS-7靶向miR-219a-5p影响微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)在HCT-8细胞中增殖的作用机制。以C.parvum感染HCT-8细胞为研究模型,利用Western blot检测HCT-8细胞中的自噬蛋白LC3B-II和p62的表达情况;利用qRT-PCR... 旨在探究环状RNA ciRS-7靶向miR-219a-5p影响微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)在HCT-8细胞中增殖的作用机制。以C.parvum感染HCT-8细胞为研究模型,利用Western blot检测HCT-8细胞中的自噬蛋白LC3B-II和p62的表达情况;利用qRT-PCR和双荧光素酶报告基因试验检测和验证ciRS-7与miR-219a-5p的靶向关系,利用qRT-PCR检测HCT-8细胞中C.parvum的荷虫量(C.parvum hsp70基因的mRNA水平)。结果显示:C.parvum感染诱导HCT-8细胞中LC3B-II和p62的蛋白质表达水平在感染后8、12、24、36和48 h显著上调;过表达ciRS-7显著抑制了C.parvum感染细胞中LC3B-II的蛋白质表达水平,但升高了p62的蛋白质表达水平,而干扰ciRS-7表达的作用相反;C.parvum感染诱导HCT-8细胞中miR-219a-5p的显著下调表达,且ciRS-7可靶向调节miR-219a-5p的表达;miR-219a-5p mimics显著增加了C.parvum感染细胞中LC3B-II的蛋白质表达水平,但降低了p62的蛋白质表达水平,而miR-219a-5p inhibitor的作用相反;miR-219a-5p mimics可逆转过表达ciRS-7对C.parvum感染细胞中LC3B-II蛋白质表达的抑制和p62蛋白质表达的促进作用;miR-219a-5p mimics显著抑制了感染细胞中C.parvum hsp70基因的mRNA表达水平,而miR-219a-5p inhibitor的作用相反;miR-219a-5p mimics逆转了过表达ciRS-7对感染细胞中C.parvum hsp70基因的mRNA表达水平的上调作用。ciRS-7通过靶向miR-219a-5p抑制C.parvum感染诱发的HCT-8细胞自噬,进而促进C.parvum在HCT-8细胞中的增殖。 展开更多

关键词 微小隐孢子虫 circRNA ciRS-7/miR-219a-5p轴 自噬 增殖

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陕西部分地区山羊毕氏肠微孢子虫多位点基因分型研究 被引量：2

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作者 刘婷丽 彭先启 +4 位作者 宋军科 胡瑞思 王莎莎 潘广林 赵光辉 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期1730-1736,共7页

为了阐明山羊毕氏肠微孢子虫的遗传多样性,笔者采用基于微卫星(MS1、MS3、MS7)和小卫星(MS4)位点的多位点序列分型技术首次对不同用途山羊的122个毕氏肠微孢子虫分离株进行了多位点序列分型研究。结果发现,在MS1、MS4和MS7位点的扩增效... 为了阐明山羊毕氏肠微孢子虫的遗传多样性,笔者采用基于微卫星(MS1、MS3、MS7)和小卫星(MS4)位点的多位点序列分型技术首次对不同用途山羊的122个毕氏肠微孢子虫分离株进行了多位点序列分型研究。结果发现,在MS1、MS4和MS7位点的扩增效率依次为27.9%(34/122)、18.0%(22/122)、50.8%(62/122),而在MS3位点所有样品均未获得有效扩增。核苷酸序列分析表明,所有样品的MS1、MS4和MS7位点分别具有16、9和18个基因型,共形成了14个MLGs。其中,50份绒山羊阳性样品3个位点扩增效率分别为10.0%(5/50)、14.0%(7/50)和90.0%(45/50),分别具有3、3和10个基因型,共形成了5个MLGs;56份奶山羊阳性样品3个位点的扩增效率依次为28.6%(16/56)、19.6%(11/56)和8.9%(5/56),分别组成4、4、1个基因型,共组成7个不同的MLGs;16份黑山羊阳性样品在3个位点的扩增效率依次为81.3%(13/16)、25.0%(4/16)、75.0%(12/16),分别具有9、2、7个基因型,构成2个MLGs。 展开更多

关键词 山羊 毕氏肠微孢子虫 多位点序列分型 陕西

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陕西省犊牛安氏隐孢子虫多位点序列分型研究 被引量：1

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作者 任冠静 王雪婷 +2 位作者 张会军 宋军科 赵光辉 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1969-1975,共7页

为了对陕西省犊牛安氏隐孢子虫(Cryptosporidium andersoni)进行多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST),本研究基于4个基因位点对陕西省4个地区的36份犊牛(0~6月龄)C.andersoni阳性粪便样品进行PCR检测和序列分析。结果显示... 为了对陕西省犊牛安氏隐孢子虫(Cryptosporidium andersoni)进行多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST),本研究基于4个基因位点对陕西省4个地区的36份犊牛(0~6月龄)C.andersoni阳性粪便样品进行PCR检测和序列分析。结果显示,15份C.andersoni分离株在CM-MS1、CM-MS2、CM-MS3、CM-MS16 4个基因位点均被成功分型,形成A4、A4、A2、A1,A4、A4、A4、A1,A5、A4、A4、A1和A1、A4、A4、A1共4个MLST亚型。其中A4、A4、A4、A1广泛分布于各个养殖场与不同品种犊牛中,为该地区犊牛C.andersoni的优势亚型。该研究结果表明,陕西地区犊牛C.andersoni存在遗传多样性,具有多种MLST亚型。 展开更多

关键词 安氏隐孢子虫 多位点序列分型 犊牛 陕西

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