夏咸柱(中国工程院院士、解放军军事医学科学院军事兽医研究所研究员):加强禽流感防控,严防人间流感大流行

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作者 夏咸柱 《北方牧业》 2015年第12期7-7,共1页

夏成柱院士在题为《加强禽流感防控，严防人间流感大流行》的报告中，首先介绍了流感病毒分型与变异情况，并就动物流感与流感大流行情况作了历史性的回顾。他说，就当前来看，动物流感流行的国家和地区在不断扩大，2014年．印尼有12个... 夏成柱院士在题为《加强禽流感防控，严防人间流感大流行》的报告中，首先介绍了流感病毒分型与变异情况，并就动物流感与流感大流行情况作了历史性的回顾。他说，就当前来看，动物流感流行的国家和地区在不断扩大，2014年．印尼有12个省累计暴发260多起H5N1疫情：越南有32个省累计暴发80多起H5N1疫情。此外，朝鲜、柬埔寨、印度等国家在去年都暴发了多起H5N1疫情．其中朝鲜平壤市和黄海北道暴发的疫情造成17万只鸡发病，4万多只鸡死亡：印度发生的4起疫情，造成1．8万只家禽发病，约23万只家禽被销毁。 展开更多

关键词 张宏福 动物群体 产业技术体系 畜群 主动免疫 营养学研究 临床诊断

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宠物源人兽共患病防控战略研究 被引量：18

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作者 夏咸柱 才学鹏 +2 位作者 林德贵 马继红 池丽娟 《中国动物检疫》 CAS 2017年第2期34-37,41,共5页

近年来,宠物越来越受到人们的关注,同时带来的人兽共患病问题也接踵而至。本文分析了宠物源人兽共患病的病原情况和防控现状,阐明了我国宠物源人兽共患病防控仍然面临巨大挑战,提出了加速提高宠物医疗技术水平、加快宠物药品的研制与注... 近年来,宠物越来越受到人们的关注,同时带来的人兽共患病问题也接踵而至。本文分析了宠物源人兽共患病的病原情况和防控现状,阐明了我国宠物源人兽共患病防控仍然面临巨大挑战,提出了加速提高宠物医疗技术水平、加快宠物药品的研制与注册等建议,对于防控宠物源人兽共患病有一定的借鉴意义。 展开更多

关键词 宠物 人兽共患病 细菌病 病毒病 寄生虫病

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犬瘟热疫苗弱毒的复壮与免疫试验 被引量：6

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作者 夏咸柱 李金中 +5 位作者 胡桂学 黄耕 武银莲 范志强 王允海 刘海涛 《中国兽药杂志》 北大核心 1997年第4期2-6,共5页

将一株犬瘟热疫苗株病毒通过Ｖｅｒｏ细胞２０代（ＣＤＶ／Ｒ－２０）后又通过敏感犬的腹腔巨噬细胞，获得一株免疫原性更高的弱毒株（ＣＤＶ／Ｒ－２０／８）。接种同样剂量１０４ＴＣＩＤ５０的ＣＤＶ／Ｒ－２０／８和ＣＤＶ／Ｒ－２... 将一株犬瘟热疫苗株病毒通过Ｖｅｒｏ细胞２０代（ＣＤＶ／Ｒ－２０）后又通过敏感犬的腹腔巨噬细胞，获得一株免疫原性更高的弱毒株（ＣＤＶ／Ｒ－２０／８）。接种同样剂量１０４ＴＣＩＤ５０的ＣＤＶ／Ｒ－２０／８和ＣＤＶ／Ｒ－２０的犬，产生出血清中和（ＳＮ）抗体价的几何平均数分别为１：５４和１：２６。前者为后者的２倍多。接种１０５ＴＣＩＤ５０的ＣＤＶ／Ｒ－２０／８能完全保护犬（１０／１０）抵抗ＣＤＶ强毒的攻击，接种１０４ＴＣＩＤ５０的保护９／１０犬，而对照犬５只全部发病，其中４只死亡。犬体内ＳＮ价可持续一年之久。冻干培养物在４和－３０℃中可分别保存９个月和１２个月而效力不减。 展开更多

关键词 犬瘟热病毒 复壮 免疫 疫苗

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犬瘟热病毒高压灭活疫苗的制备与应用 被引量：5

4

作者 夏咸柱 池元斌 +4 位作者 余春 王雪梅 黄耕 王允海 刘海涛 《中国兽药杂志》 北大核心 2000年第2期6-8,共3页

本试验用静水压高压灭活的方法对 CDV进行灭活 ,并加入蜂胶佐剂制备犬瘟热病毒高压灭活疫苗。将此灭活疫苗免疫接种 CDV易感犬 ,同时以用福尔马林灭活的犬瘟热病毒灭活疫苗为对照 ,检测结果表明 :犬瘟热病毒高压灭活疫苗安全、可靠 ,其... 本试验用静水压高压灭活的方法对 CDV进行灭活 ,并加入蜂胶佐剂制备犬瘟热病毒高压灭活疫苗。将此灭活疫苗免疫接种 CDV易感犬 ,同时以用福尔马林灭活的犬瘟热病毒灭活疫苗为对照 ,检测结果表明 :犬瘟热病毒高压灭活疫苗安全、可靠 ,其诱导试验犬所产生中和抗体的能力明显高于该病毒的福尔马林灭活苗 ,临床应用证明该疫苗对犬的保护率达 89%。 展开更多

关键词 犬瘟热病毒 灭活疫苗 制备 静水压商压灭活 免疫

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宠物与宠物保健品 被引量：2

5

作者 夏咸柱 《中国兽药杂志》 2010年第10期6-8,19,共4页

介绍了宠物的定义与分类,宠物与人类健康的新理念,宠物福利与保健等与宠物相关的常识。重点阐述了宠物保健品特别是宠物生物制品的研发现状,并对宠物保健品的监管提出了几点建议。

关键词 宠物 宠物保健品 宠物生物制品

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我国犬瘟热病毒的生态学调查研究 被引量：51

6

作者 李金中 夏咸柱 +6 位作者 胡桂学 范志强 邹啸环 武银莲 黄耕 袁书智 乔贵林 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期375-379,共5页

本研究应用电子显微镜技术检查了１７种毛皮动物和野生动物的６７６份材料，从犬、貂、貉、狐、熊、小熊猫、大熊猫、狼、狮、虎、猞猁、金猫等１２种动物病料中，检出含有ＣＤＶ材料４８７份。应用间接ＥＬＩＳＡ、免疫荧光和中和试验... 本研究应用电子显微镜技术检查了１７种毛皮动物和野生动物的６７６份材料，从犬、貂、貉、狐、熊、小熊猫、大熊猫、狼、狮、虎、猞猁、金猫等１２种动物病料中，检出含有ＣＤＶ材料４８７份。应用间接ＥＬＩＳＡ、免疫荧光和中和试验等技术检测了８种动物１５８份血清，其中从犬、狐、小熊猫、虎、金猫，狼等６种动物的１０６份血清中检出了抗ＣＤＶ抗体。应用ＲＴ－ＰＣＲ和基因探针检查了４种动物的３７份材料，其中有２９份阳性。本研究证实的大熊猫、虎、狮、小熊猫、金猫、猞猁、熊、狼等动物对犬瘟热病毒的感染，丰富了犬瘟热病毒生态学的内容。 展开更多

关键词 犬瘟热病毒 生态学 大熊猫 小熊猫 调查

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犬细小病毒VP2基因的比较及分型研究 被引量：25

7

作者 邱薇 范泉水 +6 位作者 李作生 杨美峰 郑颖 尹惠琼 王双印 李江 夏咸柱 《动物医学进展》 CSCD 2005年第5期69-72,共4页

为查明我国CPV的流行变异情况及为进一步的免疫研究奠定基础,对我国不同地区分离到的9株细小病毒毒株进行了VP2基因的扩增和序列分析,并与CPV的参考毒株进行了比较分型, 9 株CPV 中有6 株属CPV 2a,3株属CPV 2b,但未分离到CPV 2c变异株,... 为查明我国CPV的流行变异情况及为进一步的免疫研究奠定基础,对我国不同地区分离到的9株细小病毒毒株进行了VP2基因的扩增和序列分析,并与CPV的参考毒株进行了比较分型, 9 株CPV 中有6 株属CPV 2a,3株属CPV 2b,但未分离到CPV 2c变异株,结果表明我国目前仍以CPV 2a流行为主。 展开更多

关键词 VP2基因 犬细小病毒 分型 CPV 免疫研究 序列分析 病毒毒株 参考毒株 变异株 流行 分离

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犬瘟热病毒H、F、N基因试验免疫研究 被引量：13

8

作者 闫芳 夏咸柱 +4 位作者 扈荣良 谢之景 赵忠鹏 高玉伟 黄耕 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期50-55,共6页

以构建的真核表达载体pVAXLPH、pVAXLPF和pVAXLPN为基因疫苗，分组进行了免疫小鼠试验，对免疫鼠体内免疫应答水平进行了检测。结果显示：所构建的基因疫苗可以诱导小鼠产生特异性免疫应答反应，pVAXLPH＋pVAXLPF＋pVAXLPN3个基因混合... 以构建的真核表达载体pVAXLPH、pVAXLPF和pVAXLPN为基因疫苗，分组进行了免疫小鼠试验，对免疫鼠体内免疫应答水平进行了检测。结果显示：所构建的基因疫苗可以诱导小鼠产生特异性免疫应答反应，pVAXLPH＋pVAXLPF＋pVAXLPN3个基因混合免疫小鼠诱导产生了较强的体液免疫和细胞免疫应答，免疫3次后血清中抗CDV ELISA抗体效价为0．332，而免疫前为0．158；抗CDV中和抗体效价为1：（4～16）；CD4^＋T／CD8^＋T比值为2．05±0．38，而对照组为1．99±0．56；免疫小鼠脾细胞对CDVLP及ConA刺激的增殖反应值分别为0．384和0．356。基因疫苗免疫犬试验中，进行了单用基因疫苗免疫和基因疫苗与CDV弱毒疫苗联合免疫效果的比较研究。结果显示，基因疫苗免疫3次后，血清中抗CDVELISA抗体效价为0．296，抗CDV中和抗体效价为1：（8～32）。基因疫苗免疫2次，再使用弱毒疫苗加强免疫1次，血清中抗CDVELISA抗体效价为0．433，抗CDV中和抗体效价为1：（16～64）。 展开更多

关键词 犬瘟热 基因疫苗 犬瘟热病毒H基因 犬瘟热病毒F基因 犬瘟热病毒N基因

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大熊猫犬冠状病毒的分离与鉴定 被引量：9

9

作者 胡桂学 高凤山 +3 位作者 高玉伟 夏咸柱 柏亚铎 余春 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期202-207,共6页

以犬肾传代细胞(MDCK)从1只病死大熊猫肝脏中分离到1株病毒,命名为DXMV。电镜观察磷钨酸负染的病毒细胞培养物,发现冠状病毒样粒子,超薄切片上可见细胞浆内病毒包涵体。理化学和生物学鉴定结果表明,DXMV核酸类型为RNA,对氯仿、乙醚敏感... 以犬肾传代细胞(MDCK)从1只病死大熊猫肝脏中分离到1株病毒,命名为DXMV。电镜观察磷钨酸负染的病毒细胞培养物,发现冠状病毒样粒子,超薄切片上可见细胞浆内病毒包涵体。理化学和生物学鉴定结果表明,DXMV核酸类型为RNA,对氯仿、乙醚敏感,可耐受1%胰蛋白酶的作用,具有一定的耐酸性和耐热性,可在MDCK、FCWF、F81细胞中增殖,无血凝性和血吸附特性。血清中和试验结果表明,DXMV可被犬冠状病毒阳性血清中和。采用犬冠状病毒间接荧光抗体法染色DXMV细胞飞片,可在细胞浆内见到特异性荧光。以冠状病毒通用引物和犬冠状病毒特异性引物,可从大熊猫肝脏和不同代次的病毒细胞培养物中扩增出与预期值251bp和515bp大小相同的核苷酸片段。由此说明,该病毒为犬冠状病毒,大熊猫可被犬冠状病毒感染。 展开更多

关键词 大熊猫 犬冠状病毒 病毒分离 病毒鉴定

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裂谷热研究进展 被引量：11

10

作者 李林 高玉伟 +3 位作者 胡桂学 夏咸柱 赵国良 卜祥泉 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第2期96-100,共5页

裂谷热是一种烈性毒性人畜共患病,被OIE列为必须报告的疫病。幼年动物感染后,病死率高达100%。人感染此病后,病死率约为1%。2010年3月,南非再度发生疫情,导致186人感染,18人死亡;并调查出154例动物感染,146例死亡,感染动物病死率高达95... 裂谷热是一种烈性毒性人畜共患病,被OIE列为必须报告的疫病。幼年动物感染后,病死率高达100%。人感染此病后,病死率约为1%。2010年3月,南非再度发生疫情,导致186人感染,18人死亡;并调查出154例动物感染,146例死亡,感染动物病死率高达95%。该病的流行不但对人类健康和养殖业构成威胁,其病毒还可能被用于生物恐怖和生物战。论文对裂谷热病毒的生物学特性及此病的流行情况、危害、诊断方法和防控等方面进行综述。 展开更多

关键词 裂谷热病毒 流行病学 生物恐怖 疫苗

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2011—2013年河南省犬细小病毒分子流行病学调查与分析 被引量：7

11

作者 丁轲 余祖华 +6 位作者 彭春平 赵战勤 何雷 贾艳艳 张春杰 程相朝 夏咸柱 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1671-1678,共8页

为了解近年来河南省犬细小病毒病的流行情况及毒株的分子变异特征,于2011—2013年从郑州、洛阳、开封、信阳等10个不同的地区采集了573份疑似犬细小病毒病病例样品,首先采用国标法检测犬细小病毒(CPV)VP2基因462—1 023bp片段,对扩增的... 为了解近年来河南省犬细小病毒病的流行情况及毒株的分子变异特征,于2011—2013年从郑州、洛阳、开封、信阳等10个不同的地区采集了573份疑似犬细小病毒病病例样品,首先采用国标法检测犬细小病毒(CPV)VP2基因462—1 023bp片段,对扩增的序列进行测序和进化树分析。在分类的基础上分别挑选出代表性毒株,克隆VP2全基因,测序后进行比较分析。结果表明,国标法检测样品的阳性率为88.48%,阳性毒株分为7个分支,通过对7个代表毒株VP2基因426AA的碱基组成分析,发现6株属于CPV-2a型,1株属于CPV-2b型。与国内外的代表毒株的核苷酸相似性为98.4%~99.9%,氨基酸相似性为97.6%~100.0%。遗传进化树分析表明,7个CPV分离株分属于2个分支,其中KJ438801株与其它分离株亲缘关系较远。氨基酸序列比较发现共有12个位点发生变异,其中突变率较高的位点是267、297、324、440、555位氨基酸,每个毒株均有2~3个氨基酸发生突变。以上结果表明,河南省流行的CPV以CPV-2a型和CPV-2b型并存,但以CPV-2a型为主,且基因呈多变异现象,从而为河南省犬细小病毒病的疫苗研发和防治提供了科学的参考依据。 展开更多

关键词 河南省 犬细小病毒 分子流行病学调查 VP2基因

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犬细小病毒核酸疫苗、重组活载体疫苗与弱毒疫苗免疫犬实验研究 被引量：9

12

作者 谢之景 杨松涛 +5 位作者 夏咸柱 闫芳 赵忠鹏 高玉伟 邹啸环 黄耕 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1562-1566,共5页

分别用犬细小病毒(CPV)核酸疫苗(pVCPV-VP2)、CPV重组活载体疫苗(CAV2/CPV)与CPV弱毒疫苗对犬进行了免疫试验,以检测不同CPV疫苗的免疫原性。采用CPV ELISA、CPV HI与CPV微量中和试验检测免疫犬的体液免疫水平,采用淋巴细胞转化试验检... 分别用犬细小病毒(CPV)核酸疫苗(pVCPV-VP2)、CPV重组活载体疫苗(CAV2/CPV)与CPV弱毒疫苗对犬进行了免疫试验,以检测不同CPV疫苗的免疫原性。采用CPV ELISA、CPV HI与CPV微量中和试验检测免疫犬的体液免疫水平,采用淋巴细胞转化试验检测犬的细胞免疫水平。结果,pVCPV-VP2和CAV2/CPV均能诱导机体产生抗CPV ELISA抗体与抗CPV中和抗体,但是pVCPV-VP2不能诱导机体产生可检测的抗CPV HI抗体,而CAV2/CPV能够诱导机体产生抗CPV HI抗体。淋巴细胞转化试验结果,pVCPV-VP2和CAV2/CPV免疫犬的外周血淋巴细胞对ConA与CPV的刺激均出现明显的增殖反应。结果表明,pVCPV-VP2和CAV2/CPV免疫犬均能诱导机体产生抗CPV的特异性体液免疫反应和细胞免疫反应,两者所表达的VP2蛋白均具有较好的免疫原性。CAV2/CPV以及pVCPV-VP2和CAV2/CPV联合免疫犬的抗CPV体液免疫水平和细胞免疫水平均比用pVCPV-VP2单独免疫犬的体液免疫水平和细胞免疫水平高。但CAV2/CPV诱导机体产生的抗CPV特异性免疫反应仍然比CPV弱毒疫苗诱导机体产生的抗CPV特异性免疫反应弱。另外,CAV2/CPV还能诱导机体产生抗CAV-2的特异性免疫反应。 展开更多

关键词 犬细小病毒 核酸疫苗 重组活载体疫苗

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抗犬瘟热病毒荧光标记单抗的制备和初步鉴定 被引量：18

13

作者 苏建青 褚秀玲 +2 位作者 杨松涛 夏咸柱 岳妙姝 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第8期3552-3554,共3页

[目的]建立利用单克隆抗体检测犬瘟热病毒的直接免疫荧光诊断方法。[方法]通过搅拌法,用异硫氰酸荧光素标记G蛋白纯化的抗犬瘟热病毒单抗CE3,对荧光抗体进行纯化、鉴定,并确定其最适工作浓度。对61份临床可疑犬瘟热病料进行直接免疫荧... [目的]建立利用单克隆抗体检测犬瘟热病毒的直接免疫荧光诊断方法。[方法]通过搅拌法,用异硫氰酸荧光素标记G蛋白纯化的抗犬瘟热病毒单抗CE3,对荧光抗体进行纯化、鉴定,并确定其最适工作浓度。对61份临床可疑犬瘟热病料进行直接免疫荧光检测。[结果]吸收试验、阻断试验和特异性试验结果显示,标记抗体具有高度的敏感性和特异性,与犬细小病毒(CPV)、犬副流感病毒(CPIV)、犬腺病毒(CAV)、狂犬病毒(RV)无交叉反应,其最优化工作浓度为1∶80。对临床可疑犬瘟热病料的阳性检出率是48%。[结论]该研究建立的直接免疫荧光方法具有快速、特异和简便的优点,对犬瘟热疾病的早期诊断具有重要意义。 展开更多

关键词 犬瘟热病毒 直接免疫荧光 单克隆抗体

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犬瘟热病毒单克隆抗体的制备及其生物学特性鉴定 被引量：8

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作者 王铮 王铁成 +4 位作者 冯娜 虞一聪 高玉伟 杨松涛 夏咸柱 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第3期73-77,共5页

用纯化后的犬瘟热病毒免疫Balb/c小鼠,采用间接ELISA方法筛选分泌阳性抗体的杂交瘤细胞株,并挑选阳性孔进行亚克隆,用Vero细胞交叉反应试验及间接免疫荧光检测单克隆抗体的特异性。结果获得2株能稳定分泌抗犬瘟热病毒单克隆抗体细胞株,... 用纯化后的犬瘟热病毒免疫Balb/c小鼠,采用间接ELISA方法筛选分泌阳性抗体的杂交瘤细胞株,并挑选阳性孔进行亚克隆,用Vero细胞交叉反应试验及间接免疫荧光检测单克隆抗体的特异性。结果获得2株能稳定分泌抗犬瘟热病毒单克隆抗体细胞株,分别命名为062-1、062-2。实验室已有的一株单克隆抗体为6H8。交叉反应试验及间接免疫荧光染色检测表明,3株单克隆抗体的特异性较好;经过体外连续传代及反复冻存、复苏,杂交瘤细胞均能稳定分泌特异性单克隆抗体。培养上清液及小鼠腹水间接ELISA效价分别为1∶105和1∶108。相加试验表明,单克隆抗体062-1、062-2具有共同的表位,而单克隆抗体6H8识别的位点与其他两株不同。 展开更多

关键词 犬瘟热病毒 单克隆抗体 间接酶联免疫吸附试验 相加酶联免疫吸附试验

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表达犬瘟热病毒H基因的重组犬2型腺病毒免疫原性测定 被引量：4

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作者 闫芳 夏咸柱 +4 位作者 扈荣良 谢之景 赵忠鹏 高玉伟 黄耕 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期258-262,共5页

为测定表达犬瘟热病毒(CDV)H基因的重组犬2型腺病毒(CAV-2/CDVLPH)免疫原性,25只45-50日龄犬(抗CDV中和抗体小于1∶2,CAV-2 HI抗体效价小于1∶2)随机分为5组进行免疫犬试验,第1组为CAV-2/CDVLPH免疫组,第2组为pVAXLPH免疫组,第3组为pVAX... 为测定表达犬瘟热病毒(CDV)H基因的重组犬2型腺病毒(CAV-2/CDVLPH)免疫原性,25只45-50日龄犬(抗CDV中和抗体小于1∶2,CAV-2 HI抗体效价小于1∶2)随机分为5组进行免疫犬试验,第1组为CAV-2/CDVLPH免疫组,第2组为pVAXLPH免疫组,第3组为pVAXLPH和CAV-2/CDVLPH联合免疫组,CDV弱毒疫苗组和pVAX1空载体组分别作为阳性和阴性对照组。利用间接ELISA和CDV中和试验检测免疫犬的抗CDV体液免疫水平、CAV-2 HI试验检测免疫犬的抗CAV体液免疫水平、淋巴细胞转化试验检测免疫犬的抗CDV和抗CAV-2细胞免疫水平,分析CAV-2/CDVLPH的免疫性。结果,能够在各试验组免疫犬血清中检测到抗CDV ELISA抗体和抗CDV中和抗体,同时在第1组和第3组免疫犬的血清中检测到抗CAV-2的HI抗体,免疫犬的外周淋巴细胞对特异性和非特异性抗原刺激均有明显增殖,第2组的免疫应答水平低于第3组,第1组又高于第3组,但低于CDV弱毒疫苗免疫组,试验表明CAV-2/CDVLPH可同时诱导免疫犬产生抗CDV和CAV特异性免疫,CAV-2/CDVLPH与pVAXLPH相比能诱导犬产生较高的特异性免疫应答,然而低于CDV弱毒疫苗。 展开更多

关键词 犬瘟热 CDV H基因 CAV-2

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犬细小病毒核酸疫苗制备及免疫试验 被引量：8

16

作者 邱薇 范泉水 +6 位作者 李作生 杨美峰 郑颖 李丽红 王双印 李江 夏咸柱 《动物医学进展》 CSCD 2006年第3期78-81,共4页

以犬细小病毒基因组DNA为模板,应用PCR方法扩增了全长VP1基因,PCR产物经纯化和NotⅠ/BamHⅠ双酶切后与同样处理的真核表达载体pIRES进行连接,转化到感受态细胞JM109中,筛选了真核重组表达质粒pIRESVP1,并进行了序列测定。对6只9月龄犬... 以犬细小病毒基因组DNA为模板,应用PCR方法扩增了全长VP1基因,PCR产物经纯化和NotⅠ/BamHⅠ双酶切后与同样处理的真核表达载体pIRES进行连接,转化到感受态细胞JM109中,筛选了真核重组表达质粒pIRESVP1,并进行了序列测定。对6只9月龄犬分别接种不同剂量的pIRESVP1或空载体质粒及生理盐水,8周接种1次,每次接种前采血,测定血清的血凝抑制抗体效价,第2次免疫后即可检测到较高的血清效价。在第3次接种4周后,对全部实验犬进行攻毒,攻毒后第7天及第14天时采血,测定血清的血凝抑制抗体效价。所有接种pIRESVP1疫苗的犬均能抵抗CPV强毒的攻击,而接种空载体质粒和生理盐水的对照犬则全部发病。证明所构建的核酸疫苗(pIRESVP1)能使犬免受犬细小病毒强毒的感染。 展开更多

关键词 核酸疫苗 犬细小病毒 免疫

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小反刍兽疫病毒N基因的原核表达 被引量：9

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作者 阮洋 秦峻岭 +8 位作者 高玉伟 孙玮 张涛 杨玉姣 杨松涛 王承宇 王铁成 黄耕 夏咸柱 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第3期21-25,共5页

目的是表达出小反刍兽疫病毒的核蛋白,并鉴定其活性。根据GenBank发表的小反刍兽疫病毒(PPRV)Nigeria 75/1株N基因序列,对其进行基因优化并合成。设计引物,利用PCR的方法扩增PPRV-N基因,将该基因片段定向克隆到原核表达载体pET-28a(+)中... 目的是表达出小反刍兽疫病毒的核蛋白,并鉴定其活性。根据GenBank发表的小反刍兽疫病毒(PPRV)Nigeria 75/1株N基因序列,对其进行基因优化并合成。设计引物,利用PCR的方法扩增PPRV-N基因,将该基因片段定向克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,构建原核表达载体pET-28a-N。阳性质粒转化原核表达宿主菌Transetta(DE3),用IPTG诱导表达并确定表达N基因的最佳诱导时间、温度。通过SDS-PAGE电泳和Western blot分析确定表达蛋白的表达量和活性。扩增出PPRV-N基因,构建的原核表达载体pET-28a-N和原核表达菌,表达了N蛋白,表达蛋白能与PPRV阳性血清发生特异性反应。 展开更多

关键词 小反刍兽疫病毒N基因 原核表达 SDS-PAGE电泳 WESTERN-BLOT

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犬瘟热的诊断及其预防免疫的研究进展 被引量：61

18

作者 何洪彬 夏咸柱 《动物医学进展》 CSCD 2001年第1期12-15,21,共5页

本文对犬瘟热 ( CD)的诊断、预防免疫和免疫失败的影响因素及犬瘟热病毒( CDV)的宿主范围进行了综述。 CDV不仅感染陆生食肉动物 ,而且也感染水生食肉动物 ,并且其宿主范围还在不断扩大。CDV感染主要采用病毒分离、特异性病毒抗原或特... 本文对犬瘟热 ( CD)的诊断、预防免疫和免疫失败的影响因素及犬瘟热病毒( CDV)的宿主范围进行了综述。 CDV不仅感染陆生食肉动物 ,而且也感染水生食肉动物 ,并且其宿主范围还在不断扩大。CDV感染主要采用病毒分离、特异性病毒抗原或特异性核酸检测等方法确诊。疫苗包括灭活的 CDV疫苗、麻疹病毒 ( MV)异源苗及 CDV弱毒活苗。疫苗接种犬的免疫反应主要取决于毒株特性及犬的应答能力 ,只有弱毒活苗能诱导产生持久而坚强的保护力。尽管多年来 CDV弱毒活苗的使用控制了 CD的发生 ,但最近免疫过的犬发生 CD的病例并不少见。分析免疫失败的原因 ,主要是母源抗体干扰、疫苗质量差、其它病毒的免疫抑制以及 展开更多

关键词 犬瘟热 诊断 预防免疫 免疫失败

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动物干扰素的研究进展 被引量：13

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作者 王照 王磊 +8 位作者 李天松 王胜乐 王铁锋 高玉伟 黄耕 王铁成 杨松涛 王化磊 夏咸柱 《中国动物检疫》 CAS 2012年第2期71-73,共3页

1980年国际干扰素委员会定义了干扰素:干扰素是一类在同种细胞上具有抗病毒活性的蛋白质,其活性的发挥又受细胞基因组的调节和控制,涉及RNA和蛋白质的合成。本文就动物干扰素的研究现状做以概述,为动物干扰素的研究奠定理论基础。

关键词 干扰素 分类 作用机制

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小熊猫源犬瘟热病毒全基因序列的克隆及序列分析 被引量：6

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作者 王磊 王照 +9 位作者 李天松 刘玉秀 冯娜 王胜乐 许薇薇 姜雪 高玉伟 王铁成 杨松涛 夏咸柱 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第11期77-82,共6页

本研究对军事兽医研究所病毒二室分离驯化后的小熊猫源犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)基因组进行全序列测定,并对其基因组特征及H基因遗传稳定性进行比较分析。根据GenBank公布的犬瘟热病毒全长基因组序列设计合成17对特异性引... 本研究对军事兽医研究所病毒二室分离驯化后的小熊猫源犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)基因组进行全序列测定,并对其基因组特征及H基因遗传稳定性进行比较分析。根据GenBank公布的犬瘟热病毒全长基因组序列设计合成17对特异性引物,以小熊猫源犬瘟热病毒总RNA为模板,RT-PCR进行分段扩增,并克隆到pEASY-Blunt Simple载体中,经测序、拼接获得全长cDNA序列。结果显示,小熊猫源犬瘟热病毒全基因序列与GenBank登录号分别为AF014953、AY445077、AY542312、AY466011、AY386316、AF164967、EU716337、EU726268、AY443350、AB474397、GU138403和AY649446的12个不同毒株全基因序列的同源性分别为86.6%、92.4%、92.5%、92.5%、94.3%、96.3%、95.9%、87.1%、94.5%、92.3%、87.4%和94.6%,与标准强毒株A75/17株(AF164967)的亲缘关系最近,全基因同源性达96.3%,但与疫苗株Onderstepoort(AF014953)亲缘关系相对较远,同源性为86.6%。小熊猫源犬瘟热病毒H基因与其他不同地区具有代表性的30株CDV进化树分析显示,小熊猫源犬瘟热病毒属于AsiaⅠ型,H蛋白中309-311位氨基酸残基所形成的潜在糖基化位点,为疫苗株没有而野毒株所共有的,并且可能与病毒的免疫原性有关。因此,致弱的小熊猫源CDV在预防免疫的针对性上可能强于已有的疫苗株。 展开更多

关键词 犬瘟热病毒 全基因测序 序列分析

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