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溶葡球菌酶的纯化和某些性质 被引量:3
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作者 周润琦 马力 +3 位作者 张培德 阎栋材 杨瑞蓉 陈石根 《生物化学杂志》 CSCD 1993年第3期358-363,共6页
1.应用本实验室构建的克隆菌株枯草杆菌0044进行了溶葡球菌酶的发酵生产,产量为150—200mg/L; 2.通过DEAE-纤维素,CM-纤维素和Sephadex G-50层析纯化了该酶;并以NaCl盐析方式,首次获得了该酶结晶; 3.测定了溶葡球菌酶的某些性质; 4.观... 1.应用本实验室构建的克隆菌株枯草杆菌0044进行了溶葡球菌酶的发酵生产,产量为150—200mg/L; 2.通过DEAE-纤维素,CM-纤维素和Sephadex G-50层析纯化了该酶;并以NaCl盐析方式,首次获得了该酶结晶; 3.测定了溶葡球菌酶的某些性质; 4.观察并讨论了溶葡球菌酶与溶菌酶等在溶菌作用上的相互加强。 展开更多
关键词 溶葡萄球菌酶 提纯
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从Staphylococcus simulans消除含有溶葡球菌酶基因质粒的研究
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作者 周润琦 陈石根 +1 位作者 Recsei A.Paul 《生物化学杂志》 CSCD 1993年第1期11-18,共8页
溶葡球菌酶是Staphylococcus simulans分泌的能分解葡萄球菌的酶,它的基因位于一个约40kb的质粒DNA上。为了探索用高拷贝质粒取代原有的质粒的可能性,本文首先进行了从该菌株中消除含有溶葡球菌酶基因质粒的实验研究,获得了相应的“消... 溶葡球菌酶是Staphylococcus simulans分泌的能分解葡萄球菌的酶,它的基因位于一个约40kb的质粒DNA上。为了探索用高拷贝质粒取代原有的质粒的可能性,本文首先进行了从该菌株中消除含有溶葡球菌酶基因质粒的实验研究,获得了相应的“消除”菌株。根据对目的菌株和原始菌株的比较分析,包括细胞蛋白质的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,Western blot分析,质粒DNA的琼脂糖胶电泳、Southern Blot分析,质粒DNA的限制性内切核酸酶酶切分析以及对溶葡球菌酶作用敏感性的分析,都表明该目的菌株确系Staphylococcus simulans的衍生菌株,只是清除了其中含有溶葡球菌酶基因的质粒。在此基础上,本文也进行了转化实验。 展开更多
关键词 溶葡球菌酶 基因 葡萄球菌
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溶葡球菌酶前体及前体加工蛋白酶的生成控制和纯化
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作者 周润琦 Recsei A.Paul 《生物化学杂志》 CSCD 1990年第3期243-248,共6页
为深入探讨溶葡球菌酶前体加工转化为成熟的溶葡球菌酶的机制,本文通过条件控制分别从Staphylococcus simulans的培养液中获得了溶葡球菌酶前体和它的加工蛋白酶,并分别通过HPLC和Affi-Gel 501亲和层析对它们进行了纯化,根据聚丙烯酰胺... 为深入探讨溶葡球菌酶前体加工转化为成熟的溶葡球菌酶的机制,本文通过条件控制分别从Staphylococcus simulans的培养液中获得了溶葡球菌酶前体和它的加工蛋白酶,并分别通过HPLC和Affi-Gel 501亲和层析对它们进行了纯化,根据聚丙烯酰胺凝胶电泳和凝胶等电聚焦电泳,表明二者已基本上达到均一的程度。在此基础上,又进行了溶葡球菌酶前体的体外加工转化实验。 展开更多
关键词 溶葡球菌酶 前体 加工蛋白酶 纯化
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人脑型肌酸激酶纯化的一种简捷方法
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作者 郭健 张世明 +2 位作者 周润琦 陈石根 韩一平 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第6期580-582,共3页
人脑型肌酸激酶纯化的一种简捷方法郭健,张世明,周润琦,陈石根,韩一平关键词肌酸激酶.人脑型,分离和提纯,色谱法.凝胶中国图书资料分类法分类号Q555肌酸激酶(Creatinekinase,CK)是一种与糖酵解控制机制... 人脑型肌酸激酶纯化的一种简捷方法郭健,张世明,周润琦,陈石根,韩一平关键词肌酸激酶.人脑型,分离和提纯,色谱法.凝胶中国图书资料分类法分类号Q555肌酸激酶(Creatinekinase,CK)是一种与糖酵解控制机制有关的限速酶,该酶以M、B亚基的二... 展开更多
关键词 肌酸激酶 脑型 纯化
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人脑神经元特异性烯醇化酶的纯化方法 被引量:2
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作者 郭健 张世明 +2 位作者 周润琦 陈石根 韩一平 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1995年第6期552-555,共4页
采用改良的Grace层析方法,经一次DEAE-SephadexA50柱层析即从人脑中纯化了神经元特异性烯醇化酶,比活力为92.1U/mg,纯化倍数为59.4.该酶纯化后,经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定为单一蛋白质谱... 采用改良的Grace层析方法,经一次DEAE-SephadexA50柱层析即从人脑中纯化了神经元特异性烯醇化酶,比活力为92.1U/mg,纯化倍数为59.4.该酶纯化后,经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定为单一蛋白质谱带.此外,还测定了其部分理化性质,其亚单位分子量为45000,等电点pI为4.7,氨基酸组成分析表明其为一种酸性蛋白质;对2-磷酸甘油酸的K_m值为5.6×10 ̄(-4)mol/L. 展开更多
关键词 神经元 特异性烯醇化酶 提纯
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L-赖氨酸脱羧酶酶电极的研制 被引量:1
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作者 吕东津 周润琦 陈石根 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1989年第1期42-45,共4页
将赖氨酸脱羧酶直接固定于CO_2电极的硅橡胶气透膜上制成的赖氨酸脱羧酶酶电极,性能如下:(1)酶电极对赖氨酸的线性响应浓度范围为0.0025—0.1%;极羞为50—55mV;CV值小于5%;(2)连续使用寿命超过30天;(3)高度专一;(4)用于测定发酵过程... 将赖氨酸脱羧酶直接固定于CO_2电极的硅橡胶气透膜上制成的赖氨酸脱羧酶酶电极,性能如下:(1)酶电极对赖氨酸的线性响应浓度范围为0.0025—0.1%;极羞为50—55mV;CV值小于5%;(2)连续使用寿命超过30天;(3)高度专一;(4)用于测定发酵过程赖氨酸浓度变化,结果与瓦氏呼吸仪的数据平行,相关性良好。 展开更多
关键词 赖氨酸脱羧酶 酶电极 交联法
全文增补中
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