密码结构域及其功能表现

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作者 劳为德 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1994年第1期13-17,共5页

能组织成超级结构的各种序列组块，因其具有特定一级序列、或者具有某种卷曲的螺旋构象和某种非β螺旋结构，可以作为有特异功能的结构域、被特异的结合蛋白质识别和结合，因而可称为密码结构域，密码结构域作为特异的分子相互作用和过... 能组织成超级结构的各种序列组块，因其具有特定一级序列、或者具有某种卷曲的螺旋构象和某种非β螺旋结构，可以作为有特异功能的结构域、被特异的结合蛋白质识别和结合，因而可称为密码结构域，密码结构域作为特异的分子相互作用和过程的遗传指令，参与细胞周期的各种事件乃至发育和分化过程中基因有区别的表达。 展开更多

关键词 密码结构域 染色质 超级结构 序列

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人类骨桥蛋白(hOPN)在细胞增殖中的功能研究 被引量：23

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作者 刘思金 胡国法 +3 位作者 刘思国 魏影允 薛延 劳为德 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2003年第2期25-28,40,共5页

为了研究人类骨桥蛋白 (hOPN)与 2 93细胞增殖、细胞周期及与细胞周期有关基因表达的关系 ,并对其机制进行探讨 ,成功地构建了hOPN真核表达载体并获得了稳定表达hOPN的细胞系 ,也同时获得了稳定表达EGFP的细胞系。hOPN对 2 93细胞具有... 为了研究人类骨桥蛋白 (hOPN)与 2 93细胞增殖、细胞周期及与细胞周期有关基因表达的关系 ,并对其机制进行探讨 ,成功地构建了hOPN真核表达载体并获得了稳定表达hOPN的细胞系 ,也同时获得了稳定表达EGFP的细胞系。hOPN对 2 93细胞具有促增殖效应 ,hOPN蛋白激活了 2 93细胞细胞周期蛋白A的表达。实验结果表明 :hOPN通过一定的信号通路刺激了细胞周期蛋白A的表达 ,加快了细胞进入并通过S期 ,从而促进了细胞的增殖。 展开更多

关键词 细胞增殖 功能 肿瘤 基因表达 骨桥蛋白 293细胞 流式细胞术 细胞周期蛋白A 细胞周期 发生学

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Nucleostemin特异性RNA干扰对HeLa细胞体内外增殖能力的影响 被引量：14

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作者 蔡子微 刘思金 +1 位作者 孙丽秋 劳为德 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期1331-1335,共5页

目的:检测肿瘤细胞Nucleostemin(NS)的表达,研究NS特异性RNA干扰对HeLa细胞体内外增殖的影响。方法:提取6种肿瘤细胞总RNA,用RT-PCR和Northernblot方法检测NS的表达。用NS特异性siRNA表达载体转染HeLa细胞,观察转染的HeLa细胞(简称NS-si... 目的:检测肿瘤细胞Nucleostemin(NS)的表达,研究NS特异性RNA干扰对HeLa细胞体内外增殖的影响。方法:提取6种肿瘤细胞总RNA,用RT-PCR和Northernblot方法检测NS的表达。用NS特异性siRNA表达载体转染HeLa细胞,观察转染的HeLa细胞(简称NS-siRNA-HeLa细胞)体内外增殖的变化。结果:6种肿瘤细胞中NS明显高表达。体外培养的NS-siRNA-HeLa细胞中NS表达显著低于对照组,G0/G1期细胞百分率显著升高。体内致瘤实验显示,NS-siRNA-HeLa细胞在裸鼠体内增殖显著低于对照组。结论:NS在肿瘤细胞中高表达具有普遍性。NS特异性RNA干扰使HeLa细胞进入S期受阻,并可明显降低HeLa细胞体内外的增殖能力。 展开更多

关键词 NUCLEOSTEMIN 干细胞 HELA细胞 细胞周期

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旋毛虫ES抗原基因的克隆和序列分析 被引量：7

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作者 温艳 劳为德 +3 位作者 刘思国 高虹 张传生 甘绍伯 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第6期32-33,87,共3页

目的　完成旋毛虫ES抗原 (Excretory -secretoryAntigen)中 4 3kDa分泌性糖蛋白基因和 5 3kDa分泌性抗原基因的克隆和测序 ,并与已发表的该两种基因的相关序列比较、分析。方法　通过RT -PCR ,从旋毛虫幼虫总RNA中扩增得到特异性片段 ,... 目的　完成旋毛虫ES抗原 (Excretory -secretoryAntigen)中 4 3kDa分泌性糖蛋白基因和 5 3kDa分泌性抗原基因的克隆和测序 ,并与已发表的该两种基因的相关序列比较、分析。方法　通过RT -PCR ,从旋毛虫幼虫总RNA中扩增得到特异性片段 ,利用TA克隆将PCR产物克隆入 pUC -T载体中并进行测序及同源性比较。 结果　RT -PCR扩增得到 4 3kDa分泌性糖蛋白基因和 5 3kDa分泌性抗原基因 ,序列分析表明 ,其核苷酸序列与已发表的 4 3kDa分泌性糖蛋白基因和 5 3kDa分泌性抗原的同源性均为 99%。结论　成功提取了旋毛虫幼虫的总RNA ,并用PT -PCR方法克隆了 4 3kDa分泌性糖蛋白基因和 5 3kDa分泌性抗原基因 ,这为两基因的表达及在医学、兽医学中应用研究奠定了基础。 展开更多

关键词 ES抗原基因 旋毛虫 43kDa分泌性糖蛋白基因 53kDa分泌性抗原基因 基因克隆 免疫学 基因序列

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对我国五株旋毛虫基因组DNA限制性片段长度多态性的研究 被引量：12

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作者 王虹 张月清 +1 位作者 吴赵永 劳为德 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1994年第5期9-11,共3页

本文用５种限制性内切酶（包括ＥｃｏＲⅠ及ＤｒａⅠ）消化５株来自长春（分自犬）、天津、西安、河南及云南（分自猪）的旋毛虫基因组ＤＮＡ，结果显示：长春株与其它各地域株的酶切图谱间存在着差异。曾选其中经ＥｃｏＲⅠ酶切的特异... 本文用５种限制性内切酶（包括ＥｃｏＲⅠ及ＤｒａⅠ）消化５株来自长春（分自犬）、天津、西安、河南及云南（分自猪）的旋毛虫基因组ＤＮＡ，结果显示：长春株与其它各地域株的酶切图谱间存在着差异。曾选其中经ＥｃｏＲⅠ酶切的特异性ＤＮＡ片段（１．１２ｋｂ），经克隆制备成探针，与经ＥｃｏＲⅠ酶切的上述５株虫体ＤＮＡ进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交。结果显示，仅长春株出现１．１２ｋｂ杂交带，其它４株均未出现该杂交带，提示不同地理分布区和／或不同宿主来源的旋毛虫虫株间存在着一定的差别。 展开更多

关键词 旋毛虫 DNA限制性 多态性 SOUTHERN杂交

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乳腺特异性基因转基因山羊表达特性的研究 被引量：2

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作者 成勇 成国祥 +7 位作者 王杏龙 穆宗尧 陈建泉 徐少甫 劳为德 张靖溥 张旭晨 魏允影 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期193-199,共7页

采用胚胎显微注射的方法，将牛乳酪蛋白（αｓｌｃａｓｅｉｎ）基因作为乳腺定位表达调控序列与人乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ／ａｙｗ）基因组成的两个融合构件（λ１０６和λ２０７）导入山羊原核期受精卵。产出的Ｇ０代羊用ＨＢ... 采用胚胎显微注射的方法，将牛乳酪蛋白（αｓｌｃａｓｅｉｎ）基因作为乳腺定位表达调控序列与人乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ／ａｙｗ）基因组成的两个融合构件（λ１０６和λ２０７）导入山羊原核期受精卵。产出的Ｇ０代羊用ＨＢｘ和ｃａｓｅｉｎ８００两个探针进行ＰＣＲ＋Ｓｏｕｔｈｅｒｎ整合检测，分别获得λ１０６和λ２０７构件整合阳性羊１６和２４只。用ＥＬＩＳＡ／ＨＢｓＡｇ试剂盒检测转基因羊乳汁中的重组人乙型肝炎表面抗原（ｒＨＢｓＡｇ），在Ｇ０代转基因羊中，λ１０６乳腺表达率是４７２％（１７／３６）；λ２０７是６８６％（２４／３５）。Ｇ０代转基因母羊与正常公羊交配，所产的４１只Ｇ１代羊中有１３只整合阳性（３１７％），其中６只Ｇ１代整合羊中，乳腺表达率为６６６７％（４／６）。表达阳性羊乳免疫注射６只成年兔，结果在它们的血清中全部检测到ＨＢｓＡｂ（６／６）。试验表明，由αｓｌｃａｓｅｉｎ和ＨＢｓＡｇ／ａｙｗ基因组成的λ１０６和λ２０７两个融合基因构件导入山羊原核期受精卵后均可获得乳腺特异性表达转基因羊，最高表达量达１３０７μｇ／ｌｉｔｅｒ，由此证明通过牛αｓｌ酪蛋白调控序列作为定位基因来指导ＨＢｓＡｇ／ａｙｗ基? 展开更多

关键词 乙肝表面抗原 乳腺 转基因山羊 基因表达 山羊

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正常饮食中短期补充钙剂对双侧卵巢切除大鼠骨质量及骨代谢的影响 被引量：1

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作者 刘思金 刘建刚 +2 位作者 薛延 王芊 劳为德 《中国比较医学杂志》 CAS 2004年第2期104-104,共1页

关键词 饮食 短期补充钙剂 卵巢切除术 大鼠 骨质量 骨代谢 骨密度

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位点特异性重组酶Cre的克隆、表达、纯化及体外活性鉴定

8

作者 高虹 张传生 +2 位作者 魏影允 胡国法 劳为德 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2002年第6期31-33,共3页

克隆了Cre基因 ,分别构建了真核表达载体 pEF EBFP Cre和 pGEX Cre,在大肠杆菌中表达了Cre重组酶 ,并证明了重组酶的删除特性 。

关键词 位点特异性重组酶Cre 克隆 纯化 体外活性 鉴定 CRE/LOXP系统 原核表达 CRE基因 基因表达 大肠杆菌

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兔乳腺组织中与牛α_(s1)酪蛋白基因5′调节区特异结合的蛋白

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作者 陈瑞环 劳为德 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1991年第5期378-378,共1页

α_((?)1)酪蛋白基因为编码ca^(++)敏感性酪蛋白的基因家族成员之一,在催乳素的作用下由乳腺组织特异地合成和分泌,并受糖皮质激素、孕酮等多种激素的诱导和调节。在酪蛋白基因的5′端存在数个可能起顺式调节作用的元件,

关键词 乳腺组织 酪蛋白基因 DNA结合蛋白

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“八五”畜牧生物技术研究进展

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作者 成国祥 成勇 +3 位作者 杜淼 劳为德 钱耕荪 万大方 《畜牧兽医科技信息》 1997年第16期2-4,共3页

一、山羊胚胎细胞经继代核移植后其发育能力的研究 1、建立山羊细胞核移植技术体系:应用鱼、家兔移植的工作基础,在山羊探索卵母细胞的去核、供核胚胎分裂球和细胞的分散、移核、融合和激活等技术参数和方法,并予组合成一套山羊细胞核... 一、山羊胚胎细胞经继代核移植后其发育能力的研究 1、建立山羊细胞核移植技术体系:应用鱼、家兔移植的工作基础,在山羊探索卵母细胞的去核、供核胚胎分裂球和细胞的分散、移核、融合和激活等技术参数和方法,并予组合成一套山羊细胞核的技术体系。1991年首次试验就获得了2头细胞核移植山羊。2、建立山羊连续细胞核移植技术体系:确立了供质、供核、寄母、受体的同步发情和供质与供核羊的超排规程、卵母细胞的回收适期、去核适期和方法、移植卵的融合和激活条件、不同发育期胚胎的分裂球或细胞作供核其组成的重构卵的可能性和重构卵的培养方法,并在继代过程中比较了G₀、G₁世代重构卵的分裂和发育能力。 展开更多

关键词 卵母细胞 转基因 连续细胞核移植 生物技术研究 技术体系 染色体外同源重组 小鼠 基因构件 同步发情 发育能力

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遗传工程载体

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作者 劳为德 陈受宜 《遗传》 CAS 1979年第4期34-37,共4页

根据DNA的来源及受体细胞的属性,遗传工程实验可分成三大类。一类是将原核细胞DNA转移到另一种原核细胞中去,例如将噬菌体DNA嵌入到细菌质体DNA中。另一类是将真核细胞DNA转移到原核细胞的受体DNA中,比如将哺乳动物的基因引进到细菌质... 根据DNA的来源及受体细胞的属性,遗传工程实验可分成三大类。一类是将原核细胞DNA转移到另一种原核细胞中去,例如将噬菌体DNA嵌入到细菌质体DNA中。另一类是将真核细胞DNA转移到原核细胞的受体DNA中,比如将哺乳动物的基因引进到细菌质体或噬菌体中。第三类是将真核基因嵌入到另一真核细胞DNA中。本文简单谈谈遗传工程的载体及其有关问题。 展开更多

关键词 切割位点 质体 抗药性标记 受体细胞 真核基因 遗传工程 噬菌体

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