斑点叉尾鮰烂鳃病病原柱状黄杆菌的分离及鉴定 被引量：21

1

作者 刘礼辉 李宁求 +3 位作者 石存斌 潘厚军 付小哲 吴淑勤 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第17期7124-7126,共3页

[目的]对从斑点叉尾鮰烂鳃病中分离的病原菌进行分类学地位鉴定。[方法]采用人工感染确定其病原性,常规生理生化鉴定和16SrRNA基因序列分析方法进行分析。[结果]该菌株为革兰氏阴性杆菌,滑行运动,无鞭毛,菌体大小为(0.3～0.5)μm×(... [目的]对从斑点叉尾鮰烂鳃病中分离的病原菌进行分类学地位鉴定。[方法]采用人工感染确定其病原性,常规生理生化鉴定和16SrRNA基因序列分析方法进行分析。[结果]该菌株为革兰氏阴性杆菌,滑行运动,无鞭毛,菌体大小为(0.3～0.5)μm×(5～10)μm,过氧化氢酶反应阳性,不能发酵和利用葡萄糖等多糖,不水解酪氨酸,不产生吲哚。所测16SrRNA基因序列经BLAST分析表明,与GeneBank上登录的柱状黄杆菌的16SrRNA序列同源性最高,其相似性达98.2%。基于16SrRNA基因序列构建的系统进化树表明,菌株GHS061212与柱状黄杆菌(AY841899)聚为1个分支,且置信度较高,为71.0%。[结论]菌株GHS061212被鉴定为柱状黄杆菌,这是国内首次报道斑点叉尾鮰烂鳃病病原为柱状黄杆菌。 展开更多

关键词 斑点叉尾鲴 烂鳃病 柱状黄杆菌 生理生化鉴定 16S RRNA基因序列分析

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TAIL-PCR方法克隆约氏黄杆菌aroA基因序列 被引量：2

2

作者 刘礼辉 李宁求 +1 位作者 石存斌 吴淑勤 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第32期18074-18076,共3页

[目的]研究草鱼烂鳃病病原约氏黄杆菌芳香氨基酸代谢途径的合成基因aroA的全序列。[方法]以草鱼烂鳃病病原M165菌株基因组DNA为模板,分别利用5′和3′的3个特异性巢式引物与随机引物,通过热不对称交错PCR(TAIL-PCR)扩增菌株M165的aroA... [目的]研究草鱼烂鳃病病原约氏黄杆菌芳香氨基酸代谢途径的合成基因aroA的全序列。[方法]以草鱼烂鳃病病原M165菌株基因组DNA为模板,分别利用5′和3′的3个特异性巢式引物与随机引物,通过热不对称交错PCR(TAIL-PCR)扩增菌株M165的aroA基因序列,并对其序列进行分析。[结果]电泳检测结果表明,扩增产物与预期扩增结果相符;测序结果分析表明,aroA基因序列全长1 230bp,编码410个氨基酸。aroA蛋白序列与Flavobacterium johnsoniae的aroA蛋白质序列具有高度同源性。[结论]TAIL-PCR方法为基因全序列的克隆提供了一种简便、高效的方法。aroA基因全序列的获得为进一步阐明aroA等营养相关因子对鱼类烂鳃病病原的致病力的影响奠定基础。 展开更多

关键词 热不对称PCR 烂鳃病 约氏黄杆菌 aroA基因

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鱼类药饵科学使用策略

3

作者 刘礼辉 石存斌 +2 位作者 李宁求 付小哲 林强 《科学养鱼》 北大核心 2014年第7期70-70,共1页

近年来,随着水产养殖业的不断发展和集约化程度的提高,水产养殖环境不断恶化,水产养殖病害逐渐增多,已成为影响养殖成功的重要因素。水产动物病害种类繁多,包括细菌性疾病、病毒性疾病、寄生虫疾病以及真菌引起的疾病等。在鱼类养殖过程... 近年来,随着水产养殖业的不断发展和集约化程度的提高,水产养殖环境不断恶化,水产养殖病害逐渐增多,已成为影响养殖成功的重要因素。水产动物病害种类繁多,包括细菌性疾病、病毒性疾病、寄生虫疾病以及真菌引起的疾病等。在鱼类养殖过程中,不同季节发病原因也有所不同,如越冬过后鱼类体内营养物质消耗较大、抗病能力差;春季水温回升时鱼病主要以细菌性疾病为主, 展开更多

关键词 使用策略 鱼类 细菌性疾病 水产养殖业 科学 药饵 水产养殖环境 水产养殖病害

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草鱼鱼种免疫操作流程简述

4

作者 刘礼辉 石存斌 余露军 《科学养鱼》 北大核心 2013年第7期79-80,共2页

现在正是草鱼下塘注射疫苗免疫的季节，为了能有效地预防草鱼“四病”（即出血病、

关键词 草鱼鱼种 免疫操作 疫苗免疫 出血病 季节 注射 下塘

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渔用疫苗发展现状及趋势 被引量：28

5

作者 吴淑勤 陶家发 +5 位作者 巩华 常藕琴 任燕 刘礼辉 陈总会 赖迎迢 《中国渔业质量与标准》 2014年第1期1-13,共13页

分析了国内外渔用疫苗产品研发与应用现状,目前全球超过140种疫苗获得生产许可,中国渔用疫苗相关研究涉及病原27种(类)。未来水生动物疫苗佐剂、抗原载体技术、规模化生产工艺和水产免疫基础等方面将成为研究热点,浸泡口服、多联多价疫... 分析了国内外渔用疫苗产品研发与应用现状,目前全球超过140种疫苗获得生产许可,中国渔用疫苗相关研究涉及病原27种(类)。未来水生动物疫苗佐剂、抗原载体技术、规模化生产工艺和水产免疫基础等方面将成为研究热点,浸泡口服、多联多价疫苗及区域差异化免疫方案等将成为重要的技术需求,渔用疫苗将为水产动物疫病防治发挥重要作用。 展开更多

关键词 渔用疫苗 制备技术 佐剂 生产工艺 水产免疫基础

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约氏黄杆菌减毒活疫苗对鳜免疫效果评价 被引量：2

6

作者 付小哲 方伟 +5 位作者 林强 刘礼辉 梁红茹 黄志斌 徐德海 李宁求 《南方水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期33-38,共6页

为获知约氏黄杆菌(Flavobacterium johnsoniae)减毒活疫苗(M170株)浸泡免疫鳜(Siniperca chuatsi)后的免疫应答,采用荧光定量RT-PCR方法测定免疫后鳜肝脏溶菌酶(Lys)基因、脾脏免疫球蛋白(Ig M)基因表达动力学,并检测了血清中Lys活性和... 为获知约氏黄杆菌(Flavobacterium johnsoniae)减毒活疫苗(M170株)浸泡免疫鳜(Siniperca chuatsi)后的免疫应答,采用荧光定量RT-PCR方法测定免疫后鳜肝脏溶菌酶(Lys)基因、脾脏免疫球蛋白(Ig M)基因表达动力学,并检测了血清中Lys活性和抗体效价变化规律。结果表明,约氏黄杆菌减毒活疫苗浸泡免疫后,鳜肝脏Lys基因表达量显著上调(P<0.05),第48小时表达量达到峰值,是对照组的10.9倍(P<0.05),直到第28天表达量仍显著高于对照组(P<0.05)。同时免疫鱼血清Lys活性明显升高,第2天达到峰值,是对照组的4.35倍(P<0.05),第6天与对照组水平相当;免疫鳜脾脏Ig M基因相对表达量从第7天开始上调并显著高于对照组(P<0.05),至第28天其相对表达量为对照组的98.7倍(P<0.05);而免疫鱼血清抗体效价在第7天开始高于对照组,第28天达到峰值(26)。免疫后第28天采用强毒株M168进行攻毒,结果显示,免疫组相对成活率显著高于对照组,其相对免疫保护率(relative percentage survival,RPS)达85.9%。结果表明约氏黄杆菌减毒株M170可引起鳜特异性和非特异性免疫应答,并提供良好的免疫保护效果。 展开更多

关键词 鳜 约氏黄杆菌 减毒活疫苗 溶菌酶 免疫球蛋白 相对免疫保护率

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新型空间组合拱桥的稳定性分析 被引量：4

7

作者 刘礼辉 邵旭东 《公路工程》 2008年第4期67-69,74,共4页

以某新型空间组合拱桥为研究对象,通过大型通用有限元程序ANSYS建立空间模型,结合现有稳定理论,对该桥的施工阶段和成桥状态的稳定性进行分析。

关键词 空间组合 稳定性 有限元法 非线性分析

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一株斑点叉尾致病菌的分离鉴定 被引量：2

8

作者 任燕 巩华 +4 位作者 陶家发 梁慧丽 刘礼辉 石存斌 吴淑勤 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2011年第2期73-77,共5页

从斑点叉尾(Ictalurus punctatus)肝脏分离到的一株细菌GD091027,对该菌进行人工感染试验、生理生化特性测定和16S rRNA序列测定并构建系统发育树,同时进行了抗菌药物敏感性试验。结果显示:当人工感染剂量大于1.0×107 CFU/尾时,... 从斑点叉尾(Ictalurus punctatus)肝脏分离到的一株细菌GD091027,对该菌进行人工感染试验、生理生化特性测定和16S rRNA序列测定并构建系统发育树,同时进行了抗菌药物敏感性试验。结果显示:当人工感染剂量大于1.0×107 CFU/尾时,能引起斑点叉尾100%发病死亡,对斑点叉尾的LD50为6.2×104 CFU/g。分离株GD091027为革兰氏阴性短杆菌,氧化酶阴性,在25℃、35℃均有运动性,能耐3%的NaCl,不发酵葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、D-甘露醇及L-阿拉伯糖,不利用西蒙氏柠檬酸盐,不利用丙二酸,赖氨酸脱羧酶和鸟氨酸脱羧酶阳性,产生硫化氢和吲哚,甲基红(MR)试验阴性。在16S rRNA系统发育树中,该菌与迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)聚为一分支。分离株GD091027对氨苄西林、庆大霉素、妥布霉素等16种抗菌药物敏感,利福平、青霉素等3种抗菌药物不敏感。除不产生溶血、不发酵葡萄糖和麦芽糖、甲基红(MR)试验阴性外,病原菌形态及生理生化特征符合迟缓爱德华氏菌,结合16S rRNA序列分析结果将其鉴定为迟缓爱德华氏菌。 展开更多

关键词 斑点叉尾(Ictalurus punctatus) 迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda) 16S RRNA 鉴定

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草鱼疾病流行规律及防治措施 被引量：1

9

作者 郭慧芝 刘礼辉 +2 位作者 李宁求 付小哲 石存斌 《科学养鱼》 北大核心 2014年第2期59-60,共2页

草鱼的疾病主要分为病毒性疾病（草鱼出血病）、细菌性疾病（赤皮病、肠炎病、烂鳃病等，俗称“老二病”）、寄生虫性疾病（以车轮虫病、指环虫病、锚头鳋病为主）和真菌性疾病（水霉病、鳃霉病等）四大类。

关键词 鱼疾病 流行规律 草鱼出血病 防治 寄生虫性疾病 病毒性疾病 细菌性疾病 真菌性疾病

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美国红鱼水生气单胞菌的分离、鉴定及其分子特征

10

作者 张德锋 林强 +5 位作者 刘礼辉 任燕 李宁求 付小哲 石存斌 吴淑勤 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2015年第6期46-52,74,共8页

2013年8至9月份,我国广东省珠海市某养殖场的美国红鱼(Sciaenops ocellatus)发生细菌性病害。从患病鱼的肝脏、肾脏和眼球中分离到8株病原菌,经生理生化试验、16S rRNA基因测序和7个管家基因系统发育树分析,8株病原菌被鉴定为水生气单胞... 2013年8至9月份,我国广东省珠海市某养殖场的美国红鱼(Sciaenops ocellatus)发生细菌性病害。从患病鱼的肝脏、肾脏和眼球中分离到8株病原菌,经生理生化试验、16S rRNA基因测序和7个管家基因系统发育树分析,8株病原菌被鉴定为水生气单胞菌(Aeromonas aquariorum)。进一步对这8株病原菌进行MLST和ERICPCR分子分型,结果表明8株病原菌为两种基因型。通过毒力相关基因检测,结果表明病原菌也为两种毒力基因型,即So1381和So1387菌株的毒力基因型为act-aer A-ahy B+alt+ast-exu+fla+gca T+lip+ser-。其余6株病原菌的毒力基因型为act+aer A+ahy B+alt+ast-exu+fla+gca T+lip+ser-。病原菌So1383和So1387对斑马鱼攻毒试验结果表明So1383菌株对斑马鱼的致病性强于So1387菌株,其LD50分别为4.5×105和2.7×106CFU。分离菌株对21种药物敏感性试验的结果表明,这些菌株的耐药谱无明显差异。 展开更多

关键词 美国红鱼(Sciaenops ocellatus) 水生气单胞菌Aeromonas aquariorum) 分子分型 致病性

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杂交鳢舒伯特气单胞菌弱毒疫苗候选株筛选及其免疫效果评价 被引量：2

11

作者 胡蕾 刘礼辉 +6 位作者 杨圆圆 方伟 林强 付小哲 梁红茹 刘山桂 李宁求 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2019年第5期74-79,共6页

为获得一种安全、高效的舒伯特气单胞菌(Aeromanas schubertii)弱毒疫苗候选株,通过鱼体攻毒实验筛选天然弱毒株,用筛选的弱毒株制备弱毒疫苗,对杂交鳢进行免疫后,采用荧光定量RT-PCR方法评价免疫相关基因表达情况,同时采用强毒株攻毒... 为获得一种安全、高效的舒伯特气单胞菌(Aeromanas schubertii)弱毒疫苗候选株,通过鱼体攻毒实验筛选天然弱毒株,用筛选的弱毒株制备弱毒疫苗,对杂交鳢进行免疫后,采用荧光定量RT-PCR方法评价免疫相关基因表达情况,同时采用强毒株攻毒免疫的杂交鳢测定相对免疫保护率(relative percentage survival,RPS),综合评价弱毒株作为活疫苗侯选株的潜力。结果显示:筛选到一株舒伯特气单胞菌天然弱毒株OM170701,其对靶动物杂交鳢与非靶动物大口黑鲈均无明显致病性;该弱毒疫苗候选株能诱导杂交鳢肝脏中IL-8、IL-1β、补体C3表达量上调,免疫后72 h相对表达量达到最高,分别是对照组的相对表达量的4.95倍、5.57倍、3.94倍;免疫组IgM的相对表达量显著高于对照组,其中第28天时免疫组IgM相对表达量是对照组的17.26倍;攻毒后免疫组成活率显著高于对照组,其RPS为65%。结果表明,该弱毒株通过注射免疫能引发杂交鳢非特异性和特异性免疫应答,并提供良好的免疫保护。 展开更多

关键词 杂交鳢 舒伯特气单胞菌(Aeromanas schubertii) 弱毒疫苗 免疫基因 相对免疫保护率

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某悬索桥锚碇大体积混凝土无冷却水管配合比设计及施工控制研究 被引量：2

12

作者 刘礼辉 张剑 《湖南交通科技》 2022年第3期78-83,共6页

大体积混凝土裂缝的形成主要是由水泥水化热温度应力引起,因此,温度控制是大体积混凝土最主要的施工控制指标之一。埋设冷却水管进行降温是一种较为常见的温控措施,但也存在相应的缺陷,如冷却管周围可能开裂、引起工程造价增加等。通过... 大体积混凝土裂缝的形成主要是由水泥水化热温度应力引起,因此,温度控制是大体积混凝土最主要的施工控制指标之一。埋设冷却水管进行降温是一种较为常见的温控措施,但也存在相应的缺陷,如冷却管周围可能开裂、引起工程造价增加等。通过理论计算和实桥现场施工测试,验证了在优化配合比和采取合适的施工分层浇筑措施下,无冷却水管同样可以达到良好的温控效果。 展开更多

关键词 裂缝 无冷却水管 配合比 温控

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新型空间组合拱桥影响结构内力的若干参数研究

13

作者 刘礼辉 《公路工程》 2011年第1期80-83,共4页

以某新型空间组合拱桥为研究对象,通过大型通用有限元程序ANSYS建立空间模型,分析拱梁刚度比和矢跨比对结构内力的影响。

关键词 空间组合 有限元法 结构内力 设计参数

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级配参数对沥青稳定碎石基层性能的影响研究 被引量：2

14

作者 张秋菊 刘礼辉 +2 位作者 钟昆志 孙玉蛟 黄晓明 《交通科技》 2022年第4期6-8,14,共4页

为研究混合料级配对沥青稳定碎石基层性能的影响,通过选取不同的沥青稳定碎石基层级配,分别按照马歇尔配合比设计方法确定油石比等混合料设计参数并成型相应试件。采用贝雷法对不同沥青稳定碎石基层的级配进行定量评价,采用车辙试验、... 为研究混合料级配对沥青稳定碎石基层性能的影响,通过选取不同的沥青稳定碎石基层级配,分别按照马歇尔配合比设计方法确定油石比等混合料设计参数并成型相应试件。采用贝雷法对不同沥青稳定碎石基层的级配进行定量评价,采用车辙试验、浸水马歇尔试验和冻融劈裂试验对沥青稳定碎石基层的动稳定度、残留稳定度和冻融劈裂强度比进行测试并对上述指标与级配变化的相关性进行分析。研究结果表明,沥青稳定碎石基层的级配变化与其高温稳定性和水稳定性有良好的相关性,可用贝雷法的3个指标CA比、FA_(c)和FA_(f)在级配设计阶段对沥青稳定碎石基层的高温稳定性和水稳定性进行预估。 展开更多

关键词 沥青稳定碎石基层 级配参数 贝雷法 路用性能

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悬臂导向架在深水基础施工中的应用 被引量：5

15

作者 李柏殿 刘礼辉 +1 位作者 万纯斌 吴亮 《公路工程》 北大核心 2012年第4期160-162,196,共4页

以悬臂导向架为研究对象,通过建立有限元模型,依照施工过程中的实际工况进行计算,并对比施工完成后的实测情况,说明悬臂导向架在深水基础施工中的应用是可行的。

关键词 悬臂导向架 护筒 有限元

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摩托车悬架刚度的确定

16

作者 刘礼辉 《洪都科技》 1991年第4期13-17,共5页

通过对CJ750B—3型摩托车后悬架及其减振器刚度的选择计算,介绍了摩托车悬架刚度的一种确定方法,并对悬架的弹性特性作了简略的分析。

关键词 刚度 挠度 固有频率 摩托车 悬架

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浅谈摩托车单减震后悬架的结构特点

17

作者 刘礼辉 《摩托车》 2001年第6期17-17,共1页

摩托车后悬架是摩托车的重要组成之一,它直接影响摩托车的行驶平顺性、稳定性、燃料经济性等性能。摩托车后悬架整体布置的好坏,是衡量摩托车设计水平的重要指标。 摩托车后悬架整体布置型式有摆动式和摇臂式两种。

关键词 摩托车 后悬架 结构特点 整体布置

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海绵型高速公路应用前景与展望 被引量：5

18

作者 陶鹏鹏 刘礼辉 《交通节能与环保》 2016年第5期38-41,共4页

高速公路常见路面积水、服务区供水不协调、边坡水毁等现象,极大影响行车安全,并与可持续发展理念不符。为建设绿色智慧的高速公路,参考海绵城市理念,提出了"顺应自然、利用自然、恢复自然"的海绵型高速公路建设理念,并结合... 高速公路常见路面积水、服务区供水不协调、边坡水毁等现象,极大影响行车安全,并与可持续发展理念不符。为建设绿色智慧的高速公路,参考海绵城市理念,提出了"顺应自然、利用自然、恢复自然"的海绵型高速公路建设理念,并结合实际项目以排水降噪路面,海绵服务区,海绵边坡等三模块构建了海绵型高速公路。并对海绵型高速公路建设范围和内容作了进一步扩展和延伸,为同类高速公路建设提供了一定借鉴作用。 展开更多

关键词 海绵城市 海绵型高速公路 建设理念 绿色智慧

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大跨度桥梁钢结构检测优化研究 被引量：1

19

作者 刘卫华 刘礼辉 《交通世界》 2015年第36期40-41,27,共3页

钢结构有着强度高、自重轻、整体性好等一系列优点,但钢结构又存在结构复杂,整体成型后损坏隐蔽养护维修难度大,需要进行无损检测探伤以确定养护方案等缺点,因此在成型运行后检测费用在管养单位养护支出中往往都占比较大的比率。以九江... 钢结构有着强度高、自重轻、整体性好等一系列优点,但钢结构又存在结构复杂,整体成型后损坏隐蔽养护维修难度大,需要进行无损检测探伤以确定养护方案等缺点,因此在成型运行后检测费用在管养单位养护支出中往往都占比较大的比率。以九江长江公路大桥铜箱梁的养护方案决策为背景,以最低的检测费用达到最佳的检测效果为目的,对检测优化理论进行讨论研究。 展开更多

关键词 桥梁施工 桥梁钢结构 缺陷检测

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