甜菜镉胁迫应答基因ZAT10的克隆与功能预测

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作者 姚琦 石俊婷 +1 位作者 鲁振强 刘大丽 《中国糖料》 2024年第3期1-9,共9页

【目的】为了预测甜菜锌指蛋白BvZAT10(LOC 104901462)的结构特点和功能。【方法】以甜菜‘780016B/12优’为试验材料,对BvZAT10基因进行了克隆及生物信息学分析,并利用甜菜响应镉胁迫的转录表达谱数据探究了该基因在镉胁迫下的应答特... 【目的】为了预测甜菜锌指蛋白BvZAT10(LOC 104901462)的结构特点和功能。【方法】以甜菜‘780016B/12优’为试验材料,对BvZAT10基因进行了克隆及生物信息学分析,并利用甜菜响应镉胁迫的转录表达谱数据探究了该基因在镉胁迫下的应答特性。【结果】BvZAT10编码区全长729 bp,编码242个氨基酸,是一种碱性不稳定亲水性蛋白,具有2个C2H2型锌指结构域。该基因编码蛋白共有36处磷酸化修饰位点,蛋白结构以无规则卷曲为主,系统发育分析发现BvZAT10与菠菜和藜麦的ZAT10亲缘关系最近。BvZAT10启动子序列包含植物激素响应、光响应及抗逆相关的多种作用元件。在1、3、5 mmol/L CdCl_(2)处理下,BvZAT10及其预测调控的大部分靶基因,如金属耐受蛋白11(BVRB_2g037080)和ABCG家族成员22(BVRB_5g109050)等,均受到了镉胁迫的正向调控。【结论】推测BvZAT10可能直接或间接地在甜菜应答镉胁迫中发挥重要作用,可将其作为潜在优势抗逆基因深入开展后续研究。 展开更多

关键词 甜菜 镉胁迫 ZAT10 基因克隆 功能预测

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甜菜褐斑病抗性基因的克隆 被引量：7

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作者 刘大丽 马龙彪 +3 位作者 纪岩 张革艳 刘丽萍 鲁振强 《中国糖料》 2017年第4期5-7,共3页

为了获得抗病的甜菜遗传材料,通过RT-PCR技术,分别对两类真菌抗性基因At Chitinase1(Gen Bank No.NM_100117)和At Glucanase2(Gen Bank No.NM_115586)的功能域进行了克隆;将所得的片段连接到载体pMD 18-T并鉴定。结果表明,At Chitinate... 为了获得抗病的甜菜遗传材料,通过RT-PCR技术,分别对两类真菌抗性基因At Chitinase1(Gen Bank No.NM_100117)和At Glucanase2(Gen Bank No.NM_115586)的功能域进行了克隆;将所得的片段连接到载体pMD 18-T并鉴定。结果表明,At Chitinate1基因的核苷酸长度为819 bp,编码272个氨基酸,At Glucanase2基因的核苷酸长度为1020 bp,编码339个氨基酸,确认获得两个抗病基因功能片段。 展开更多

关键词 甜菜 褐斑病 几丁质酶 葡聚糖酶 基因克隆

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应用RT-PCR技术检测甜菜坏死黄脉病毒 被引量：3

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作者 刘大丽 马龙彪 +2 位作者 王皙玮 吴玉梅 张福顺 《中国糖料》 2008年第2期12-14,17,共4页

为了更加准确地检测患有丛根病的甜菜植株中BNYVV病毒的含量,实验采用了RT-PCR的方法分别从26株待测甜菜的根中扩增获得了324bp的BNYVV病毒基因片断。通过调整反转录cDNA模板的浓度,研究发现,当cDNA模板稀释到100倍时,能更加精准地检测... 为了更加准确地检测患有丛根病的甜菜植株中BNYVV病毒的含量,实验采用了RT-PCR的方法分别从26株待测甜菜的根中扩增获得了324bp的BNYVV病毒基因片断。通过调整反转录cDNA模板的浓度,研究发现,当cDNA模板稀释到100倍时,能更加精准地检测到不同丛根病染病植株中BNYVV病毒含量的差异。同时,半定量PCR的统计结果进一步表明.当待测植株中BNYVV病毒的相对含量低于阳性对照的一半时,甜菜丛根病病症并不明显;而当其相对含量超过阳性对照的1.3倍时,甜菜受害严重,有些几乎死亡。本检测方法为更加及时、快捷、准确和系统地检测甜菜植株的染病程度打下了良好的基础。 展开更多

关键词 甜菜 RT-PCR 丛根病 甜菜坏死黄脉病毒

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甜菜蔗糖磷酸合成酶基因的克隆及序列分析 被引量：3

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作者 刘大丽 马龙彪 郝慧 《中国糖料》 2010年第4期6-8,共3页

甜菜蔗糖磷酸合成酶(Beta vulgaris sucrose phosphate synthase,BvSPS)是甜菜体内控制蔗糖合成的关键酶之一。根据Genbank上的BvSPS序列(Genbank accession no.X X81975),利用RT-PCR方法,从甜菜体内扩增获得了BvSPS基因的cDNA全长,并... 甜菜蔗糖磷酸合成酶(Beta vulgaris sucrose phosphate synthase,BvSPS)是甜菜体内控制蔗糖合成的关键酶之一。根据Genbank上的BvSPS序列(Genbank accession no.X X81975),利用RT-PCR方法,从甜菜体内扩增获得了BvSPS基因的cDNA全长,并将其连接到pMD 18-T载体上。通过利用PstI、XbaI和EcoRI对重组质粒pMD 18-T-BvSPS进行酶切鉴定,进一步确定了重组质粒的正确性。利用生物信息学软件分析结果表明,该基因cDNA全长为3138bp,编码1045个氨基酸,蛋白质分子量为118.18kDa,等电点为6.15,该蛋白被预测定位于细胞核内。 展开更多

关键词 甜菜 蔗糖磷酸合成酶 克隆 序列分析

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甜菜磷酸蔗糖合成酶的转基因研究 被引量：3

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作者 刘大丽 马龙彪 郝慧 《中国糖料》 2013年第3期13-14,17,共3页

将甜菜磷酸蔗糖合成酶(Beta vulgaris sucrose phosphate synthase,BvSPS)基因构建到植物表达载体pBI121上,利用农杆菌介导法对甜菜叶柄进行遗传转化。通过对转基因体系的优化,确定了农杆菌浓度OD600为0.6时,叶柄外植体经过2 d的预培养... 将甜菜磷酸蔗糖合成酶(Beta vulgaris sucrose phosphate synthase,BvSPS)基因构建到植物表达载体pBI121上,利用农杆菌介导法对甜菜叶柄进行遗传转化。通过对转基因体系的优化,确定了农杆菌浓度OD600为0.6时,叶柄外植体经过2 d的预培养,农杆菌侵染5 min,侵染受体共培养4 d后,所获得的Kana抗性芽率最高。在所获得的27株Kana抗性植株中,通过提取甜菜基因组DNA及PCR鉴定,有8株成功整合了BvSPS基因,阳性率达到29%。 展开更多

关键词 甜菜 转基因 磷酸蔗糖合成酶

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甜菜NADP-ME基因家族的生物信息学分析

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作者 李思琪 迪娜尔·叶尔兰 +5 位作者 周婉婷 汪曼 李佳佳 刘大丽 兴旺 常广玉 《中国糖料》 2021年第4期17-25,共9页

烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸-苹果酸酶(NADP-malic enzyme,NADP-ME)由小基因家族编码,在植物生长发育和应对逆境胁迫中发挥重要作用。为了进一步筛选甜菜NADP-ME基因并分析其功能,本研究对该家族成员进行了详细的生物信息学分析。结果显示... 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸-苹果酸酶(NADP-malic enzyme,NADP-ME)由小基因家族编码,在植物生长发育和应对逆境胁迫中发挥重要作用。为了进一步筛选甜菜NADP-ME基因并分析其功能,本研究对该家族成员进行了详细的生物信息学分析。结果显示,甜菜基因组共有5个NADPME基因,基因长度介于6537 bp~19759 bp,并且所有BvNADP-ME均为亲水性蛋白,主要定位于线粒体、质膜、内质网和细胞核上,无信号肽,不存在跨膜结构域,不属于跨膜蛋白。除BvNADP-ME5外,其它家族成员均为酸性蛋白质;其中BvNADP-ME2、3、4皆为不稳定蛋白;导肽分析表明BvNADP-ME3含有叶绿体转运肽,BvNADP-ME4、5均含有线粒体靶向肽。染色体定位分析发现,BvNADP-ME5、2、1主要分布在1、2、8号染色体上。蛋白二三级结构预测具有相似的特征,α-螺旋和无规则卷曲为BvNADP-MEs的主要结构元件。系统进化分析表明BvNADP-MEs可分为6个亚组(I~VI),其中甜菜与菠菜NADP-ME亲缘关系最近,其次是藜麦,最远是拟南芥。蛋白质保守基序分析表明甜菜NADP-ME家族蛋白包含14个基序,其中Motif4、Motif6、7、8和Motif11、12可能与烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)的结合有关。分析BvNADP-ME基因家族启动子区域的顺式作用元件,结果显示各成员启动子均含有植物激素响应元件和非生物胁迫响应元件。本研究对5个BvNADP-ME基因家族成员的生物信息学进行分析,为深入研究甜菜NADP-ME基因功能提供参考依据,也为分子抗性育种以及提高甜菜的品质和产量提供新思路。 展开更多

关键词 甜菜 NADP-ME基因家族 生物信息学 逆境防御

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不同浓度胺鲜酯对甜菜种子萌发的影响 被引量：6

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作者 邵昕怡 胡华兵 +3 位作者 王荣华 刘大丽 吴则东 王茂芊 《中国糖料》 2022年第3期60-64,共5页

为测定不同浓度胺鲜酯(DA-6)对甜菜种子引发效果,为甜菜种子包衣剂物料筛选提供依据。以‘ms9602×NY07’甜菜种子为试验材料,分别设置5、10、15 mg/L DA-6三种浓度和8、12、24 h三个时间梯度共9个处理(另以干种子为CK),通过对甜菜... 为测定不同浓度胺鲜酯(DA-6)对甜菜种子引发效果,为甜菜种子包衣剂物料筛选提供依据。以‘ms9602×NY07’甜菜种子为试验材料,分别设置5、10、15 mg/L DA-6三种浓度和8、12、24 h三个时间梯度共9个处理(另以干种子为CK),通过对甜菜种子浸泡回干发芽培养,测定其发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数。结果表明,9个处理均可提高甜菜种子的发芽势、发芽率、发芽指数、活力指数。与对照相比,处理后的发芽势提高了4.67~14.00个百分点(平均9.26个百分点),最高的处理(10 mg/L DA-6,24 h)比最低处理(15 mg/L DA-6,24 h)高9.33个百分点;处理后的发芽率提高了2.00~11.34个百分点(平均6.78个百分点),最高的处理(10 mg/L DA-6,24 h)比最低处理(15 mg/L DA-6,24 h)高9.34个百分点;处理后的发芽指数提高了44.31%~114.65%(平均70.46%),最高的处理(10 mg/L DA-6,24 h)比最低处理(10 mg/L DA-6,8 h)高48.74%;处理后的活力指数提高了39.90%~169.16%(平均105.99%),最高的处理(5 mg/L DA-6,24 h)比最低处理(5 mg/L DA-6,12 h)高92.38%。各处理相对电导率比对照显著降低了340.13~381.67个百分点(平均361.10个百分点),并随浸种处理时间的增加而降低。9种处理都可以促进甜菜种子引发,但浓度、时间不同,效果也有所不同,浓度5 mg/L、10 mg/L DA-6,处理时间24 h,对甜菜种子引发效果较好。 展开更多

关键词 甜菜 种子 DA-6 发芽率 发芽势 发芽指数 活力指数 相对电导率

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红甜菜提取物及甜菜红素的体外抗氧化活性分析 被引量：7

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作者 王锦霞 郭萌萌 +5 位作者 刘亚昕 闫桦 孙思琦 王秋红 兴旺 刘大丽 《中国糖料》 2021年第4期59-63,共5页

为了探究和分析红甜菜的抗氧化活性物质,本研究以红甜菜块根为试验材料,通过酶标仪-微孔板建立了3种微量FRAP、DPPH和ABTS体系,来评价红甜菜水提取物的体外抗氧化活性。结果表明:红甜菜水提取物具有较好的总抗氧化能力,对DPPH自由基和A... 为了探究和分析红甜菜的抗氧化活性物质,本研究以红甜菜块根为试验材料,通过酶标仪-微孔板建立了3种微量FRAP、DPPH和ABTS体系,来评价红甜菜水提取物的体外抗氧化活性。结果表明:红甜菜水提取物具有较好的总抗氧化能力,对DPPH自由基和ABTS阳离子自由基有较强的清除能力,最高清除率分别达91.92%和83.79%。通过国标法提取并测定红甜菜块根中甜菜红素含量,约为2.53%。对甜菜红素含量与以上3个抗氧化指标进行相关性分析发现,它们之间呈显著正相关,相关系数为0.965~0.995,证明甜菜红素是红甜菜中提取物的主要活性成分。研究结果可为今后深入研究红甜菜提取物的体外抗氧化活性以及深度开发和利用红甜菜提供参考。 展开更多

关键词 红甜菜 抗氧化活性 自由基 甜菜红素 相关性分析

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不同浓度维生素B_(1)对甜菜种子引发的影响 被引量：3

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作者 程梓祺 兴旺 +1 位作者 刘大丽 王茂芊 《中国糖料》 2023年第3期60-65,共6页

研究不同浓度的维生素B_(1)作为引发剂对甜菜种子引发的影响,为甜菜种子包衣剂物料的选择提供了相关依据。本研究以‘TD801’甜菜种子为材料,不同浓度的维生素B_(1)为引发剂,设置了50、100、200 mg/L 3个浓度和8、16、24 h 3个时间梯度... 研究不同浓度的维生素B_(1)作为引发剂对甜菜种子引发的影响,为甜菜种子包衣剂物料的选择提供了相关依据。本研究以‘TD801’甜菜种子为材料,不同浓度的维生素B_(1)为引发剂,设置了50、100、200 mg/L 3个浓度和8、16、24 h 3个时间梯度共9组处理,通过对甜菜种子进行浸泡处理,测定不同处理对甜菜种子发芽的影响。结果表明,处理的发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数均高于CK,经过处理的甜菜种子,其发芽势比对照提高了3.00~14.67个百分点;发芽率比对照提高了3.34~11.34个百分点;发芽指数比对照提高了7.51%~62.31%;活力指数比对照提高了30.85%~96.38%;电导率比对照降低19.33~51.33个百分点。维生素B_(1)浓度为100 mg/L,时间为24 h的电导率效果优于其他处理。浓度为200 mg/L,时间为8 h处理对发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数影响优于其他处理,对甜菜种子引发效果较好。 展开更多

关键词 甜菜 种子 引发剂 维生素B1 种子引发

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曲酸对甜菜种子萌发的影响 被引量：2

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作者 丛俊超 胡华兵 +3 位作者 王荣华 刘大丽 吴则东 王茂芊 《中国糖料》 2022年第4期64-68,共5页

为了研究不同浓度曲酸(Kojic acid)对甜菜种子引发效果,为甜菜种子包衣剂物料筛选提供依据。以‘TD801’甜菜种子为试验材料,设置曲酸100、300、500 mg/L三种不同浓度和8、16、24 h三个时间梯度共9个处理(未引发干种子为对照),对甜菜种... 为了研究不同浓度曲酸(Kojic acid)对甜菜种子引发效果,为甜菜种子包衣剂物料筛选提供依据。以‘TD801’甜菜种子为试验材料,设置曲酸100、300、500 mg/L三种不同浓度和8、16、24 h三个时间梯度共9个处理(未引发干种子为对照),对甜菜种子进行浸泡、回干发芽培养试验,测定其发芽势、发芽率、发芽指数、活力指数以及相对电导率。结果表明,9个处理在提高甜菜种子发芽势、发芽率、发芽指数、活力指数等方面,均有明显效果。经过处理的甜菜种子,其发芽势比对照提高5.67~10.67个百分点;发芽率比对照提高5.66~9.33个百分点;发芽指数比对照提高30.67%~64.45%;活力指数比对照提高33.13%~99.02%;相对电导率相比对照降低126.50~145.70个百分点。浓度为500 mg/L,时间为16 h对发芽势和发芽率效果最好;浓度为300 mg/L,时间为24 h对发芽指数和活力指数效果最好;浓度为100 mg/L,时间为16 h对相对电导率效果最好。总体而言,浓度为500 mg/L,时间为16 h曲酸溶液对甜菜种子引发效果最好。 展开更多

关键词 甜菜 种子 曲酸 种子萌发

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富里酸与腐植酸对甜菜种子的引发影响 被引量：2

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作者 潘高 胡华兵 +2 位作者 王荣华 刘大丽 王茂芊 《中国糖料》 2022年第4期59-63,共5页

为了测定不同浓度富里酸(FA)和腐植酸(HA)对甜菜种子的引发效果,为甜菜种子包衣剂物料的筛选提供依据。以不同浓度富里酸(FA)、腐植酸(HA)及两者组合为处理试剂,干种子为对照,通过对‘STm1616’甜菜种子浸泡回干发芽培养,测定其发芽势... 为了测定不同浓度富里酸(FA)和腐植酸(HA)对甜菜种子的引发效果,为甜菜种子包衣剂物料的筛选提供依据。以不同浓度富里酸(FA)、腐植酸(HA)及两者组合为处理试剂,干种子为对照,通过对‘STm1616’甜菜种子浸泡回干发芽培养,测定其发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数。结果表明,处理后甜菜种子的发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数均得到了提高。与对照组相比,处理后种子的发芽势提高了3.34~10.34个百分点(平均6.96个百分点),发芽势最高的0.0375%FA+0.0375%HA比最低的0.05%FA高出7.00个百分点;处理后种子的发芽率比对照组提高了4.33~11.33个百分点(平均8.74个百分点),发芽率最高的0.0375%FA+0.0375%HA比最低的0.05%FA高出7.00个百分点;处理后的发芽指数比对照组提高了48.69%~142.89%(平均76.32%),发芽指数最高的处理0.075%HA比最低的处理0.25%FA+0.025%HA高63.35%;处理后的活力指数提高了100.62%~254.59%(平均147.42%),活力指数最高的0.075%HA比最低的0.025%FA+0.025%HA高76.75%;处理后电导率相比对照组降低了354.56~375.33个百分点(平均366.38个百分点),最高处理0.05%HA比最低处理0.1%HA高出20.77个百分点。不同浓度的富里酸和腐植酸对甜菜种子引发有促进作用,浓度不同引发效果不同,其中0.0375%FA+0.0375%HA、0.075%HA对甜菜种子引发效果最好。 展开更多

关键词 甜菜 种子 腐植酸 富里酸 发芽率 发芽势 发芽指数 活力指数

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甜菜幼苗对氮胁迫及复氮后的生理生化响应 被引量：2

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作者 赵阳 石俊婷 +3 位作者 芮秀丽 李佳佳 魏多 刘大丽 《中国糖料》 2022年第4期30-35,共6页

甜菜是我国重要的糖料作物,而氮是影响甜菜产量的重要元素之一。为研究甜菜响应氮胁迫的机制,分析氮胁迫对甜菜生理生化指标的影响,本研究分别在缺氮N0(0 mmol/L)、低氮N1.5(1.5 mmol/L)和复氮处理下,以适氮条件N10(10 mmol/L)为对照,测... 甜菜是我国重要的糖料作物,而氮是影响甜菜产量的重要元素之一。为研究甜菜响应氮胁迫的机制,分析氮胁迫对甜菜生理生化指标的影响,本研究分别在缺氮N0(0 mmol/L)、低氮N1.5(1.5 mmol/L)和复氮处理下,以适氮条件N10(10 mmol/L)为对照,测定0、12、24、48 h及复氮后24、48 h甜菜的根和叶中抗氧化酶活性及生理活性物质的变化。研究结果发现,低氮及缺氮处理导致甜菜幼苗根和叶中过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽转移酶(GST)的活性及脯氨酸(Pro)、丙二醛(MDA)含量的上升,48 h达最大值。其中缺氮N0处理48 h后,与对照N10相比,甜菜幼苗根和叶中POD活性分别增加了214.21%和222.15%,SOD活性分别增加了85.67%和79.17%,GST活性分别增加了683.86%和258.23%;Pro含量分别增加了245.99%和205.57%;MDA含量分别增加了350.20%和129.17%。恢复供氮后,虽然各类指标均有不同程度的下降,但相比对照仍维持在较高的水平。可以推测,甜菜幼苗通过诱导抗氧化酶活性和脯氨酸来应对缺氮和低氮胁迫引发的氧化胁迫和渗透损伤。 展开更多

关键词 甜菜 氮胁迫 复氮 生理生化指标 抗氧化酶活性

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镉胁迫下能源甜菜BvGST基因在酵母中的功能分析 被引量：3

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作者 杨舒涵 王锦霞 +2 位作者 郭萌萌 马龙彪 刘大丽 《中国糖料》 2020年第4期17-22,共6页

植物谷胱甘肽转移酶(GSTs)在正常生长条件下的细胞代谢以及由于重金属胁迫所带来的解毒过程中,都发挥着重要作用。为了进一步研究BvGST基因在能源甜菜镉逆境胁迫中的功能,本研究利用RT-PCR的方法,从能源甜菜体内克隆获得了Beta vulgaris... 植物谷胱甘肽转移酶(GSTs)在正常生长条件下的细胞代谢以及由于重金属胁迫所带来的解毒过程中,都发挥着重要作用。为了进一步研究BvGST基因在能源甜菜镉逆境胁迫中的功能,本研究利用RT-PCR的方法,从能源甜菜体内克隆获得了Beta vulgaris glutathione S-transferase(BvGST,LOC104898671)基因。利用酵母表达载体构建pYES2-BvGST重组质粒,并转化到酵母InVSc1中。SqRT-PCR结果表明,与内参基因ACT1相比,BvGST基因可以受到半乳糖的诱导从而适量表达。当施加0.5 mmol/L CdCl2逆境胁迫后,适量表达BvGST重组菌的生长状态和趋势要明显优于对照菌株(转化pYES2的酵母),并具有相对更高的Cd耐受性。因此可以推断,能源甜菜BvGST基因在镉逆境胁迫过程中发挥着重要的作用,并有可能通过GST介导的氧化逆境的活性解毒,从而参与到细胞对重金属镉离子的代谢平衡调控过程中。 展开更多

关键词 能源甜菜 谷胱甘肽转移酶 镉胁迫 酵母 功能分析

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不同氮肥水平对甜菜生理指标及产质量的影响

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作者 徐翎清 常晓 +4 位作者 张云龙 李佳佳 刘欣雨 徐泽 刘大丽 《中国糖料》 2023年第4期40-46,共7页

甜菜是氮敏感作物,筛选合适的氮肥施用量,对研究甜菜生长与氮肥的内在联系尤为重要。本试验通过对不同甜菜品种进行不同氮水平处理(0、120、180 kg/hm^(2)),对甜菜块根产量、含糖率、叶绿素含量、可溶性蛋白含量等指标进行统计学和相关... 甜菜是氮敏感作物,筛选合适的氮肥施用量,对研究甜菜生长与氮肥的内在联系尤为重要。本试验通过对不同甜菜品种进行不同氮水平处理(0、120、180 kg/hm^(2)),对甜菜块根产量、含糖率、叶绿素含量、可溶性蛋白含量等指标进行统计学和相关性分析,探索氮肥施用量对甜菜不同生长阶段的影响。结果表明,随施氮量的增加,叶绿素及可溶性蛋白含量显著提高,其中与N0(0 kg/hm^(2))相比,N180(180 kg/hm^(2))处理的甜菜可溶性蛋白含量平均增加了30%;叶片和根的氮含量呈现先增加后降低的趋势,但在同一时期叶片和根的氮含量随氮肥施用量增加而增加。甜菜体内硝酸还原酶活性与生长时间成反比,与氮素供应量成正比;在第一时期(7月6日),N180处理下硝酸还原酶活性比N0增加68%~91%。相关性分析发现不同甜菜品种的根产量与氮肥施用量呈显著正相关,与含糖率呈显著负相关;N120(120 kg/hm^(2))与N180处理下产糖量接近,此时氮肥施用量的增加对甜菜经济价值影响较小,推测甜菜适宜的氮肥施用量为120~180 kg/hm^(2)。本研究结果为甜菜氮肥的合理施用提供了理论依据。 展开更多

关键词 甜菜 氮含量 可溶性蛋白 硝酸还原酶 含糖率 产量

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甜菜铵转运蛋白BvAMT1-3基因的克隆及生物信息学分析

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作者 魏多 刘铭曦 +3 位作者 高卓 李佳佳 刘大丽 马龙彪 《中国糖料》 2021年第4期1-8,共8页

在植物体内,由铵转运蛋白(Ammonium transporters,AMTs)介导植株对铵态氮的吸收和转运。氮素在甜菜糖代谢的过程中起着重要作用,对甜菜AMTs蛋白的功能特性及调控机制进行生物信息学分析对于解析甜菜AMT基因家族的分子功能具有重要意义... 在植物体内,由铵转运蛋白(Ammonium transporters,AMTs)介导植株对铵态氮的吸收和转运。氮素在甜菜糖代谢的过程中起着重要作用,对甜菜AMTs蛋白的功能特性及调控机制进行生物信息学分析对于解析甜菜AMT基因家族的分子功能具有重要意义。本研究通过RT-PCR的方法,在甜菜体内克隆获得了Beta vulgaris ammonium transporter 1-3(BvAMT1-3)基因的全长序列。生物信息学分析结果显示该基因大小为1388 bp,编码462个氨基酸,分子量约为49.729 kDa,亚细胞定位分析其位于内质网膜结构上的可能性较大。系统进化分析显示5个甜菜AMT蛋白序列可分成2个亚族,AMT3亚族仅有1个成员,其余为AMT1亚族成员,同时甜菜BvAMT1-3蛋白与菠菜SoAMT1-3蛋白的亲缘关系最近。5个AMT基因家族成员均由α-螺旋、β-折叠、扩展链以及无规则卷曲4种形式组成。BvAMTs基因家族间的等电点、亲水性、相对分子质量等理化性质存在差异。此外,BvAMT1-3基因的启动子区检测到与植物逆境胁迫、光反应和生长发育相关的顺式作用元件。研究结果可为后续甜菜BvAMT1-3基因在氮胁迫逆境下分子机制的研究提供一定的科学依据。 展开更多

关键词 甜菜 铵转运蛋白 基因 克隆 生物信息学

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镉逆境胁迫下甜菜BvHIPP24基因在大肠杆菌的功能分析 被引量：3

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作者 鲁振强 王锦霞 +2 位作者 董大鹏 张司扬 刘大丽 《中国糖料》 2019年第4期6-10,共5页

重金属关联异戊二烯化植物蛋白(Heavy metal-associated isoprenylated plant proteins,HIPPs)由于其独特的重金属结合域(heavy metal associated domains,HMA)和异戊二烯序列(isoprenylation motif)的结构特点,使其成为一类重要的金属... 重金属关联异戊二烯化植物蛋白(Heavy metal-associated isoprenylated plant proteins,HIPPs)由于其独特的重金属结合域(heavy metal associated domains,HMA)和异戊二烯序列(isoprenylation motif)的结构特点,使其成为一类重要的金属分子伴侣(Metallochaperones)。本研究利用RT-PCR的方法,从甜菜体内克隆获得了Beta vulgaris heavy metal-associated isoprenylated plant protein24(BvHIPP24)基因。该基因CDS全长为444 bp,编码了147个氨基酸,分子量为16.38 kDa。利用大肠杆菌表达载体构建pEASY-Blunt E1-BvHIPP24重组质粒,并转化到BL21中。通过1 mmol/L IPTG诱导发现:在0.5 mmol/L Cd2+逆境胁迫下,表达BvHIPP24重组菌的生长趋势要明显优于对照菌株,并具有更高的Cd耐受性。因此可以推断,甜菜BvHIPP24基因在镉逆境胁迫过程中发挥着重要的作用,并有可能参与到甜菜细胞重金属离子吸收、转运、区隔以及代谢平衡调控过程中。 展开更多

关键词 甜菜 重金属关联异戊二烯化植物蛋白 镉逆境 大肠杆菌

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镉逆境胁迫下甜菜谷胱甘肽合成酶(BvGS)基因的克隆 被引量：4

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作者 刘大丽 马龙彪 +2 位作者 郭爱英 杨洪 鲁振强 《中国糖料》 2017年第6期23-25,共3页

利用RT-PCR技术,克隆了甜菜谷胱甘肽合成酶基因(BvGS;LOC104891052),其CDS全长为1 662 bp,编码553个氨基酸。以Beta vulgaris Actin 1为内参基因,半定量RT-PCR的研究结果表明:与0 mM CdCl_2的对照处理相比,在0.5、1.0、1.5、2.0 mM CdC... 利用RT-PCR技术,克隆了甜菜谷胱甘肽合成酶基因(BvGS;LOC104891052),其CDS全长为1 662 bp,编码553个氨基酸。以Beta vulgaris Actin 1为内参基因,半定量RT-PCR的研究结果表明:与0 mM CdCl_2的对照处理相比,在0.5、1.0、1.5、2.0 mM CdCl_2的逆境胁迫下,甜菜BvGS基因的表达量随着处理浓度的增加而逐渐增大。这说明BvGS基因在其转录表达水平上受到了镉胁迫的诱导,并与镉逆境存在着一定的应答关系。 展开更多

关键词 甜菜 基因 克隆 谷胱甘肽合成酶 镉逆境

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谷胱甘肽合成酶StGCS-GS对甜菜遗传转化的研究 被引量：2

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作者 刘大丽 马龙彪 《中国糖料》 2018年第5期18-21,共4页

嗜热链球菌γ-谷氨酰半胱氨酸谷胱甘肽合成酶Streptococcus thermophilusγ-glutamylcysteine synthetase-glutathione synthetase(StGCS-GS)是一类新型的非限速谷胱甘肽合成酶,其产物GSH在包括干旱在内的众多非生物逆境中发挥着重要作... 嗜热链球菌γ-谷氨酰半胱氨酸谷胱甘肽合成酶Streptococcus thermophilusγ-glutamylcysteine synthetase-glutathione synthetase(StGCS-GS)是一类新型的非限速谷胱甘肽合成酶,其产物GSH在包括干旱在内的众多非生物逆境中发挥着重要作用。本研究利用Gateway系统构建了p GWB2重组植物表达载体。以农杆菌介导法对甜菜叶柄进行遗传操作,将编码该酶的StGCS-GS基因(Genbank accession no.GQ848551)转化到甜菜体内。研究结果表明,当农杆菌侵染浓度OD600值为0.6,侵染时间10 min,共培养4 d后,甜菜叶柄外植体经过农杆菌侵染,在筛选培养基上所获得的抗性芽比率相对最高。通过对潮霉素抗性植物基因组DNA的PCR检测,研究共获得7个转基因甜菜株系。 展开更多

关键词 甜菜 遗传转化 StGCS-GS 谷胱甘肽合成酶 干旱逆境

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甜菜BvMTP11基因的克隆及序列分析 被引量：5

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作者 王锦霞 李硕 +2 位作者 代春艳 马龙彪 刘大丽 《中国糖料》 2019年第3期7-11,共5页

在植物中,金属耐受蛋白(Metal tolerant proteins,MTPs)是阳离子转运家族(Cation effluxtransporters)重要的成员之一,其在细胞重金属逆境耐受性及离子平衡代谢中发挥着重要的作用。本研究通过RT-PCR方法,在甜菜体内克隆获得了Beta vulg... 在植物中,金属耐受蛋白(Metal tolerant proteins,MTPs)是阳离子转运家族(Cation effluxtransporters)重要的成员之一,其在细胞重金属逆境耐受性及离子平衡代谢中发挥着重要的作用。本研究通过RT-PCR方法,在甜菜体内克隆获得了Beta vulgaris metal tolerantce protein 11(BvMTP11)基因的全长序列。该基因CDS全长为1 227 bp,编码了408个氨基酸,分子量(Mw)和等电点(pI)分别为45.935 kDa和4.89,属于相对不稳定蛋白。该基因编码的蛋白有5个跨膜螺旋区,是一种具有阳离子排出域(Cation efflux domain)的膜蛋白,并且有80%的可能性定位于过氧化物酶体膜上。因此可以推测,BvMTP11可能作为甜菜体内重要的转运蛋白参与到重金属逆境胁迫应答网络中,同时,该基因的克隆也为进一步研究其在重金属逆境下的分子机制奠定基础。 展开更多

关键词 甜菜 金属耐受蛋白 重金属逆境 基因克隆

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